Αφηρημένο

Ο σκοπός αυτής της μελέτης είναι να προσδιοριστεί η γενετική συχνότητα Gnas ενεργοποίηση μεταλλάξεων σε καρκίνο του παχέος εντέρου και την αντίστοιχη παθολογία των μεταλλαγμένων όγκων Gnas. έχουν ογκογονικές μεταλλάξεις στο Gnas έχουν περιγραφεί σε έναν αριθμό νεοπλασμάτων συμπεριλαμβανομένων εκείνων της υπόφυσης, των νεφρών, του παγκρέατος, και, πιο πρόσφατα, σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Για να εξακριβωθεί η συχνότητα του καρκίνου του παχέος εντέρου χρησιμοποιήσαμε ένα ευαίσθητο πλατφόρμα Pyrosequencing για την ανίχνευση μετάλλαξης του R201C και hotspots R201H Gnas σε δείγματα όγκων που εκπροσωπούν όλα τα κλινικά στάδια. Εμείς επιπλέον προσδιορίστηκαν για KRAS και BRAF μεταλλάξεων όπως προηγούμενες εκθέσεις έχουν δείξει ότι αυτά συχνά συν-συμβαίνουν με την ενεργοποίηση Gnas μεταλλάξεις. Από τους 428 όγκους του παχέος εντέρου δοκιμάστηκαν, μεταλλάξεις σε Gnas ήταν παρόντα σε 10 από τα δείγματα (2,3%), δείχνοντας ότι αυτό είναι ένα σημαντικό, αν και σπάνια, η μετάλλαξη σε όγκους παχέος εντέρου. Εννέα Gnas όγκους μεταλλαγμένου (90%) παρουσίασαν ταυτόχρονη μεταλλάξεις ενεργοποίησης είτε στην KRAS ή BRAF ογκογονίδιο, η οποία ήταν σημαντικά μεγαλύτερη από τη συχνότητα μετάλλαξης αυτών των γονιδίων στον πληθυσμό του όγκου (56%, ρ & lt? 0,0305). Όλα δέκα από τους όγκους μεταλλαγμένου Gnas προέκυψε στην δεξιά (εγγύς) του παχέος εντέρου (ρ & lt? 0.007), και 7 από 8 αξιολόγησαν περιπτώσεις εμφάνισαν μια αξιοσημείωτη λαχνών μορφολογία. Στο σύνολό τους, τα στοιχεία αυτά δείχνουν ότι Gnas όγκους μεταλλαγμένου του παχέος εντέρου έχουν συνήθως σύγχρονη μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS ή BRAF, είναι δεξιάς στην τοποθεσία, και συνδέονται με ένα λαχνών μορφολογία

Παράθεση:. Fecteau RE, Lutterbaugh J, Markowitz SD, Willis J, Γκούντα Κ (2014) Gnas μεταλλάξεις εντοπίσει ένα σύνολο δεξιάς, RAS Mutant, λαχνών καρκίνων του παχέος εντέρου. PLoS ONE 9 (1): e87966. doi: 10.1371 /journal.pone.0087966

Συντάκτης: Robert Oshima, Sanford Burnham Medical Research Institute, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 17 του Οκτωβρίου 2013? Αποδεκτές: 31η Δεκεμβρίου 2013? Δημοσιεύθηκε: 30 του Ιανουαρίου του 2014

Copyright: © 2014 Fecteau et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίζεται από την PHS επιχορηγήσεις 1P50CA150964 (SDM, JW, KG), CA148980 (KG), P30CA43703, T32GM007250 (REF) και CA059366 (REF) και από δωρεές από το Ίδρυμα Marguerite Wilson (SDM), τον Leonard και Joan Ίδρυμα Horvitz (SDM ). το Ίδρυμα Richard Horvitz και Erica Hartman-Horvitz (SDM) και το National Cancer παχέος Research Alliance (SDM) Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου.

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

παχέος ογκογένεση χαρακτηρίζεται από μια διαδοχή των γενετικών ανωμαλιών που μετατρέπουν το φυσιολογικό επιθήλιο του κόλου σε διηθητικό καρκίνο [ ,,,0],1]. Έχουμε ορίσει προηγουμένως ένα σύνολο 140 γονιδίων που υποβάλλονται σε επαναλαμβανόμενες σωματική μετάλλαξη σε ορθοκολικό καρκίνο (CRC), γεγονός που υποδηλώνει το πιθανότερο είναι οι οδηγοί της εξέλιξης όγκων [2], [3]. Ένα από αυτά τα γονίδια ήταν Gnas, στην οποία βρήκαμε υποτροπιάζουσες μεταλλάξεις στο κωδικόνιο 201, που άλλαξε την εξαιρετικά διατηρημένη Arg

201 είτε κυστεΐνη (R201C) ή ιστιδίνη (R201H) [2], [3]. Gnas είναι ένα γνωστό ογκογονίδιο που περιγράφηκε για πρώτη φορά σε αυξητικής ορμόνης εκκρίσεως αδενωμάτων υπόφυσης και έκτοτε έχει βρεθεί να μεταλλαχθεί σε μια σειρά από νεοπλάσματα, κυρίως στο κωδικόνιο 201 hotspot [4] – [7]. Gnas κωδικόνιο 201 μεταλλάξεις είναι ιδιαίτερα συχνή σε intrapapillary βλεννώδες νεοπλασίες (IPMN) του παγκρέατος, όπου το 67% των περιπτώσεων είναι μεταλλαγμένο [8]. Το κύριο προϊόν του τόπου Gnas, ο Gsα υπομονάδα της ετεροτριμερών G-πρωτεΐνες, δρα για να μετάγουν σήματα από συζευγμένοι με πρωτεΐνη recptors (GPCRs) προς την αδενυλική κυκλάση ένζυμο τελεστή στο G-διεγερτική (Gs) μονοπάτι, που οδηγεί στην παραγωγή της κυκλικής AMP (cAMP). Και οι δύο R201C και R201H μεταλλάξεις οδηγούν σε συστατική ενεργοποίηση της Gsα και αυτόνομη παραγωγή cAMP [9], [10].

Σε IPMNs, Gnas μεταλλάξεις συχνά συνοδεύονται από μεταλλάξεις KRAS, με το 51% των Gnas μεταλλαγμένων περιπτώσεις, επίσης, που φέρουν μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS [8]. Ενεργοποίηση μεταλλάξεις στο KRAS, και σε μικρότερο βαθμό, καθοδικός τελεστής του BRAF, είναι συχνές εκδηλώσεις σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Επιπλέον, η πλήρης αλληλούχιση exome των δειγμάτων ορθοκολικού καρκίνου με την ομάδα μας και οι συνεργάτες αποκάλυψαν συμπίπτει μεταλλάξεις Gnas και KRAS σε μια μικρή ομάδα των όγκων του παχέος εντέρου, υποδεικνύοντας Gnas μεταλλάξεις σε καρκίνους του παχέος εντέρου μπορεί επίσης συχνά να συνοδεύεται από μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS ή /και BRAF [2] .

Αναφέρθηκαν συχνότητες Gnas ενεργοποίηση μεταλλάξεων στο CRC έχουν διέφεραν μεταξύ των διαφόρων ομάδων, που κυμαίνονται από μόλις 0,5% σε 9% [2], [11] – [13]. Στην παρούσα μελέτη, χρησιμοποιήσαμε ένα ευαίσθητο πλατφόρμα Pyrosequencing της αλληλουχίας της μετάλλαξης hotspot κωδικόνιο R201 σε μία ομάδα από 428 σποραδικών όγκων του παχέος εντέρου να διαπιστώσει μια πιο ακριβή συχνότητα σε CRC. Μπορούμε επίσης προσδιορίστηκαν για μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS και BRAF για τον προσδιορισμό του επιπολασμού της συμπίπτει Gnas /KRAS ή μεταλλάξεις Gnas /BRAF στην ομάδα του όγκου μας. Κλινικά και παθολογικά στοιχεία που αναθεωρήθηκε για να διαπιστώσει αν όγκους μεταλλαγμένου Gnas συνδέονται με οποιοδήποτε μοναδικό κλινικά ή μορφολογικά φαινοτύπους. Εδώ μπορούμε να δείξουμε ότι Gnas όγκους μεταλλαγμένου παχέος εντέρου λιμάνι επαναλαμβανόμενες KRAS ή μεταλλάξεις BRAF, στοχεύουν στην ανατομική εγγύς «δεξιάς» του παχέος εντέρου, και παρουσιάζουν μια λαχνών μορφολογία.

Υλικά και Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

το πρωτόκολλο δεδουλευμένη δείγμα όγκου με τίτλο, «CWRU 7296: Colon επιθηλιακού ιστού Τράπεζα», εγκρίθηκε από το Διοικητικό συμβούλιο του Ιατρικού Κέντρου Θεσμικών κριτική Πανεπιστημιακά Νοσοκομεία υπόθεση για τα Ανθρώπινα Διερεύνηση με τον αντιστοιχισμένο αριθμό UH IRB 03-94-105. Σύμφωνα με αυτό το πρωτόκολλο, απορρίπτονται ιστός ελήφθη μέσω γραπτή συγκατάθεση από τους ασθενείς για ερευνητική χρήση.

όγκου Δείγματα

δείγματα όγκου λήφθηκαν από ένα παγωμένο αρχείο που αποτελούνταν από 428 μη επιλεγμένων καρκίνων του παχέος εντέρου, χωρίς να αναφερθεί οικογένεια ιστορία (εφεξής σποραδικές παχέος αδενοκαρκινώματα) συγκεντρώθηκε στα πλαίσια του παραπάνω πρωτοκόλλου. λαμβάνονται και συναρμολογούνται μέσα από ατομικές εκθέσεις περίπτωση παθολογίας για κάθε όγκο κλινικών δεδομένων. Μικροσκοπική αναθεώρηση της μορφολογίας του όγκου για επιλεγμένα δείγματα εκτελέστηκε από έναν ανατομικό παθολόγο (J.W). Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν για μεταλλάξεις στο κωδικόνιο 201 Gnas, KRAS κωδικόνια 12, 13, 61, και 146, και BRAF κωδικόνιο 600 χρησιμοποιώντας τόσο Sanger αλληλούχισης και Pyrosequencing.

εξαγωγή DNA και MSI δοκιμές

Γονιδιωματικό εκχύλιση DNA από δείγματα όγκων πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας είτε ένα πρότυπο πρωτόκολλο θειοκυανικής γουανιδίνης [14] ή το DNeasy αίματος και Kit Tissue (QIAGEN). Δοκιμές για την κατάσταση της MSI σε γονιδιωματική BAT26 loci και BAT40 έγινε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [15].

Pyrosequencing

Pyrosequencing ανάλυση των Gnas κωδικόνιο 201 έγινε σε όλα τα δείγματα. δοκιμασίες Pyrosequencing σχεδιάστηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό PSQ Δοκιμασία Σχεδιασμός (QIAGEN, Chatsworth, CA) που περιλαμβάνονται Gnas κωδικόνιο 201, KRAS κωδικόνια 12 και 13, KRAS κωδικόνιο 61, KRAS κωδικόνιο 146, και BRAF κωδικόνιο 600. Για κάθε δοκιμασία, ένα από τα PCR εκκινητές βιοτινυλιώθηκε στο 5 ‘άκρο και καθαρίστηκαν χρησιμοποιώντας υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης. Primer αλληλουχίες είναι ως ακολούθως. Gnas: Για: 5’-βιοτίνη-TTGGCTTTGGTGAGATCCATTG-3 ‘, 5′-Rev CACCTGGAACTTGGTCTCAAAGAT-3′, 5’-Seq TTCCAGAAGTCAGGACA-3 ‘? κωδικόνια KRAS 12 και 13: Για 5’- TCGATGGAGGAGTTTGTAAATGA-3 ‘, 5′-Rev βιοτίνης-TTCGTCCACAAAATGATTCTGA-3′, 5’-Seq CTTGTGGTAGTTGGAGC-3 ‘? KRAS κωδικόνιο 61: Για 5’- CAGACTGTGTTTCTCCCTTCTCA-3 ‘, 5′-Rev βιοτίνης-TCCTCATGTACTGGTCCCTCATTG-3′, 5’-Seq ATATTCTCGACACAGCAG-3 ‘? KRAS κωδικόνιο 146: Για 5’-AGGCTCAGGACTTAGCAAGAAGTT-3 ‘, Rev 5′-βιοτίνη-GCCCTCTCAAGAGACAAAAACAT-3′, 5’-Seq AATTCCTTTTATTGAAACAT-3 ‘. BRAF κωδικόνιο 600: Για 5’- TTCATGAAGACCTCACAGTAAAAA-3 ‘, 5′-Rev βιοτίνης-CCACAAAATGGATCCAGACA-3′, 5’-Seq TGATTTTGGTCTAGCTACA-3 ‘. Όλες οι αντιδράσεις PCR πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση FastStart Taq (Roche) και εκκινητή συγκεντρώσεις 0.2 μΜ. Οι συνθήκες κύκλων περιελάμβανε ένα αρχικό στάδιο αποδιάταξης στους 95 C για 4 λεπτά, και 49 κύκλοι των 95 ° C για 15 s, 54 C για 30 s, και 72 ° C για 20 s. Μετά PCR, προϊόντα ενίσχυσης υποβλήθηκαν σε αλληλούχιση σε ένα όργανο Pyrosequencing PyroMark MD (QIAGEN) και ανάλυση μετάλλαξης διεξήχθη όπως περιγράφηκε προηγουμένως [16].

Sanger Sequencing

αλληλούχισης Sanger χρησιμοποιήθηκε για να επιβεβαιώσει όλες τις μεταλλάξεις ανιχνεύεται από Pyrosequencing ανάλυση. Απομονωμένη γενωμικού DNA από δείγματα όγκων χρησιμοποιήθηκε για ενίσχυση PCR των περιοχών που περιλαμβάνει κωδικόνιο 201 του Gnas, κωδικόνια 12, 13, 61, και 146 του KRAS, και το κωδικόνιο 600 του BRAF. Οι πρόσθιοι και ανάστροφοι εκκινητές που χρησιμοποιούνται για PCR ενίσχυση κολλήθηκαν με ένα 5 ‘Μ13 προς τα εμπρός (5′-GTAAAACGACGGCCAGT-3’) και 5 ‘Μ13 ανάστροφου (5′-CAGGAAACAGCTATGAC-3′) καθολική αλληλουχία εκκινητή, αντίστοιχα. Primer αλληλουχίες ήταν ως εξής. Gnas: Για 5’- GTTGGCAAATTGATGTGAGC-3 ‘, 5′-Rev CCCTGATCCCTAACAACACAG-3′? KRAS κωδικόνια 12 και 13: Για 5’-TGGTGGAGTATTTGATAGTGTA-3 ‘, 5′-Rev CATGAAAATGGTCAGAGAA-3′? KRAS κωδικόνιο 61: Για 5’-TCCAGACTGTGTTTCTCCCT-3 ‘, 5′-Rev AACCCACCTATAATGGTGAATATCT-3′? KRAS κωδικόνιο 146: Για 5’-AGAAGCAATGCCCTCTCAAG-3 ‘, 5′-Rev GGACTCTGAAGATGTACCTATGGTC-3′ BRAF κωδικόνιο 600: Για 5’-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA-3 ‘, 5′-Rev GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA-3’. Όλες οι αντιδράσεις διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας 0,4 υΜ συγκέντρωσης κάθε εκκινητή και FastStart πολυμεράσης Taq (Roche, Indianapolis, ΙΝ). Οι συνθήκες κύκλων για όλα τα ζεύγη εναρκτήρα αποτελούμενο από μία αρχική μετουσίωση στους 95 ° C για 4 λεπτά που ακολουθείται από 39 κύκλους των 95 ° C για 30 s, 58 C για 30 s, 72 ° C για 30 s, και μια τελική επιμήκυνση στους 72 C για 3 λεπτά .

Στατιστική Ανάλυση

ακριβές τεστ του Fisher χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει τις διαφορές του ποσοστού των μεταλλαγμένων όγκων Gnas μεταξύ των τάξεων του φύλου, εθνικότητας, KRAS /BRAF κατάσταση, την κατάσταση της σταθερότητας μικροδορυφόρων, κλινικό στάδιο, και θέση του όγκου. Ένα δύο-ουρά P-τιμή μικρότερη από 0.05 θεωρήθηκε σημαντική.

Αποτελέσματα

Συχνότητα Gnas Hotspot Μεταλλάξεις σε καρκίνο του παχέος εντέρου

Pyrosequencing ανιχνεύονται ενεργοποιώντας μεταλλάξεις του Gnas κωδικόνιο 201 σε δέκα από τα αδενοκαρκινώματα του παχέος 428 (2,3%) (Πίνακας 1). Κάθε μία από αυτές τις μεταλλάξεις επίσης επικυρωθεί με τη χρήση προσδιορισμού αλληλουχίας Sanger (Εικ. 1). Από τα δέκα Gnas κωδικόνιο 201 μεταλλάξεις που ανιχνεύονται, εντοπίσαμε επτά p.R201H και τρεις υποκαταστάσεις p.R201C αμινοξέων, το σύνολο των οποίων ήταν αλληλοαποκλειόμενες (Πίνακας 2). Επτά από αυτές τις μεταλλάξεις ανιχνεύονται προέκυψαν μεταξύ των 377 μικροδορυφόρων σταθερό όγκους που δοκιμάστηκαν (1.9%), και τρία προέκυψαν μεταξύ των 41 όγκους με αστάθεια μικροδορυφόρου (7,7%). Η αυξημένη συχνότητα των μεταλλάξεων Gnas στο μικροδορυφορικού ασταθείς όγκους ήταν οριακής στατιστικής σημαντικότητας (P = 0,065). Η συχνότητα μετάλλαξης στο κωδικόνιο 201 του 0,0063 ανά διπλοειδή ζεύγος βάσεων είναι σημαντικά υψηλότερο από το ποσοστό μετάλλαξης φόντο των 1,2 × 10

-6 μεταλλάξεις ανά ζεύγος βάσεων που χαρακτηρίζει καρκίνους του μικροδορυφορικού σταθερό άνω και κάτω τελεία (P = 3Ε (-36)) [3 ].

Εκπρόσωπος χρωματογραφήματα (αριστερά) και πυρογραμμάτων (δεξιά) της Gnas άγριου τύπου, Gnas R201C, και οι μεταλλάξεις Gnas R201H ανιχνεύονται στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Βέλη σε χρωματογραφήματα δείχνουν μεταλλαγμένο, ετερόζυγο κορυφές. Εγκλωβιστούμε κορυφές στο πυρογραμμάτων τονίζουν μεταλλαγμένα αλληλόμορφα. Ποσοστά δείχνουν αλληλόμορφο συχνότητες υπολογίζεται από εντάσεις κορυφής πυρόγραμμα.

Η

Η

Gnas μεταλλάξεις σχετίζονται με λαχνών μορφολογία

επανεξέταση Παθολογία των μεταλλαγμένων όγκων Gnas αποκάλυψε μια εξέχουσα λαχνών μορφολογία σε επτά από τις οκτώ (88%) είναι διαθέσιμη για εξέταση περιπτώσεις. Σε πέντε από αυτές τις περιπτώσεις, τα μεταλλαγμένα καρκίνοι Gnas προέκυψε σε μία συνεχή λαχνών αδένωμα. Σε δύο από αυτές τις περιπτώσεις, οι καρκίνοι οι ίδιοι επέδειξαν εξαιρετικά ασυνήθιστη λαχνών αρχιτεκτονική (Σχήμα 2). Λαχνών αδενώματα είναι ένας υπότυπος του αδενωματώδη πολύποδα, που αντιπροσωπεύουν περίπου το 5-15% των αδενωμάτων της [17]. Λαχνών καρκίνοι, ωστόσο, επί του παρόντος δεν αναγνωρίζονται ως μια συγκεκριμένη υπο-ταξινόμηση των CRC, αν και οι μελέτες δείχνουν ότι λαχνών αδενοκαρκινώματα μπορεί να ευθύνεται για περίπου το 9% των περιπτώσεων CRC [18], [19]. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι Gnas όγκους μεταλλαγμένου προκύψουν κοντά αποκλειστικά σε συνδυασμό με λαχνών μορφολογία παρόν είτε στο καρκίνο ή την πρότερη αδένωμα

H & amp?. Ε Μικροφωτογραφία ενός μεταλλαγμένου Gnas, λαχνών αδενοκαρκίνωμα. Ο όγκος έχει τυπικά λαχνών μορφολογία με προεξέχοντα θηλές που περιέχει ένα fibrovascular πυρήνα και επένδυση με αδενωματώδεις επιθήλιο.

Η

Μια πρόσφατη μελέτη από Yamada και οι συνεργάτες ανιχνεύεται Gnas κωδικόνιο 201 μεταλλάξεις hotspot στο 83% των λαχνών αδενώματα του παχέος εντέρου και ορθού μεταξύ Ιάπωνες ασθενείς [13]. Εμείς αναλόγως επεκταθεί ανάλυση μετάλλαξης μας σε μια μικρή ομάδα των λαχνών, tubulovillous, και αδενώματα σωληνοειδή να καθορίζει τη συχνότητα των μεταλλάξεων Gnas σε μια δυτική ομάδα αδενώματος (Πίνακας 3). Συνολικά, βρήκαμε Gnas κωδικόνιο 201 μεταλλάξεις στο 46% (6/13) των λαχνών αδενώματα και 15% (3/20) των tubulovillous αδενώματα, και σε καμία σωληνοειδή αδενώματα. Έτσι Gnas μεταλλάξεις στα αδενώματα προκύπτουν αποκλειστικά στο πλαίσιο των λαχνών μορφολογία. Ωστόσο, στο δυτικό πληθυσμό χαρακτηρίσαμε διαπιστώνουμε ότι λαχνών αδενώματα χωρίζουν μοριακά σε δύο περίπου ίσου μεγέθους ομάδες, μία ομάδα που αποτελείται από λάχνης αδενωμάτων που προκύπτουν μέσω της οδού μετάλλαξη Gnas, και η άλλη ομάδα των λαχνών αδενωμάτων που προκύπτουν μέσω ενός εναλλακτικού μονοπατιού.

η

Gnas μεταλλαγμένο CRCs είναι κυρίως KRAS /BRAF μεταλλαγμένων και βρίσκεται στο εγγύς κόλον

Μεταξύ IPMNs, Gnas μεταλλάξεις είναι συχνά συν-συνοδεύεται από μεταλλάξεις KRAS. Μεταξύ Gnas μεταλλαγμένο καρκίνους του παχέος εντέρου, εντοπίσαμε μεταλλάξεις στα ογκογονίδια KRAS και BRAF σε εννέα από τις δέκα (90%) περιπτώσεις, ένα κλάσμα που είναι σημαντικά υψηλότερη από τη συνολική συχνότητα του KRAS και BRAF μεταλλάξεων στην ομάδα του όγκου (P & lt? 0,0305, ακριβής δοκιμασία του Fisher). Η συνολική συχνότητα του KRAS και BRAF μεταλλάξεων σε πληθυσμό καρκινικών μας ήταν περίπου 56% (44% KRAS, 12% BRAF), η οποία βρίσκεται σε συμφωνία με προηγούμενες μελέτες [20]. Όταν εξετάστηκαν για ανατομική θέση εντός του παχέος εντέρου, όλα τα δείγματα μεταλλαγμένου δέκα Gnas βρέθηκαν να προέρχονται από πρωτογενείς καρκίνους που ξεκίνησε από το εγγύς κόλον, μεταξύ του τυφλού εντέρου και σπληνική καμπή, βλάβες που συνήθως αναφέρονται ως δεξιάς (Ρ & lt? 0.007, του Fisher ακριβής δοκιμή). Περιλαμβάνονται στην ομάδα των όγκων μας ήταν τόσο μικροδορυφορικού σταθερό (MSS) και μικροδορυφορικού ασταθής (MSI) όγκους του παχέος εντέρου, με περιπτώσεις MSI που προκύπτουν κυρίως από την δεξιά πλευρά. Επειδή τρία όγκοι μεταλλαγμένη Gnas ήταν επίσης MSI όγκων, είναι πιθανό ότι συμπεριλαμβανομένων των καρκίνων MSI ξεφεύγει τη σύνδεση των μεταλλάξεων Gnas με το εγγύς κόλον. Ωστόσο, όταν όλοι οι καρκίνοι MSI εξαιρεθούν από την ανάλυση, η ένωση της Gnas θετικών καρκίνων με το εγγύς παχέος εντέρου παραμένει σημαντική (P & lt? 0.044)

Είναι ενδιαφέρον να σημειωθεί ότι ενώ όλες οι μεταλλαγμένες καρκίνοι Gnas ήταν δεξιάς , Gnas μεταλλαγμένο αδενώματα βρέθηκαν σε όλη την άνω και κάτω τελεία (Πίνακας 4). Δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές σε όγκους μεταλλαγμένου Gnas όταν αναλύονται για το φύλο, την εθνικότητα, το κλινικό στάδιο, ή την κατάσταση μικροδορυφόρων.

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη διαπιστώνουμε ότι Gnas μεταλλάξεις συνδέουν με ένα διακριτή υποκατηγορία των καρκίνων του παχέος εντέρου που χαρακτηρίζεται από τοποθεσία στο εγγύς κόλον, έχοντας συμπίπτει KRAS ή μετάλλαξη BRAF, και με την σύνδεση με λαχνών μορφολογία. Αν και η συχνότητα των καρκίνων Gnas μεταλλαγμένων παχέος εντέρου είναι 2,3%, βρίσκουμε αυτοί οι όγκοι αποτελούν μια ξεχωριστή μοριακή-παθολογική υποκατηγορία του καρκίνου του παχέος εντέρου. Για τις γνώσεις μας, η ανάλυση αυτή των 428 tuomrs του παχέος εντέρου είναι η πιο εκτεταμένη ανάλυση αυτών των μεταλλάξεων που έχει γίνει. Η συχνότητα 2,3% των Gnas μεταλλάξεις σε αυτή την ομάδα, είναι μεγαλύτερη από εκείνη που αναφέρθηκε πρόσφατα από Idziaszczyk και συνεργάτες το 2010, αν και λιγότερο από ό, τι παρατηρήθηκε αρχικά σε μια προηγούμενη μελέτη από μικρότερα εμείς και οι συνεργάτες [2]. Περιέργως, Gnas μεταλλαγμένο καρκίνοι δεν βρίσκονται στο άπω κόλον, ενώ Gnas μεταλλαγμένο λαχνών αδενώματα προκύπτουν σε όλη την άνω και κάτω τελεία, αυξάνοντας την πιθανότητα ότι Gnas μεταλλαγμένο αδενώματα προχωρήσουν ταχύτερα σε καρκίνο στο εγγύς κόλον ή είναι περισσότερο πιθανό να γίνουν συμπτωματική και ανιχνεύεται όταν βρίσκονται στο άπω κόλον. Αυτά τα ερωτήματα θα πρέπει να εξεταστούν περαιτέρω πειραματικά να γίνει διάκριση μεταξύ αυτών των δύο δυνατοτήτων.