Αφηρημένο

Γλυκόζη-ρυθμιζόμενη πρωτεΐνη 78 (GRP78), ένα ενδοπλασματικό δίκτυο συνοδός, ανάντη ρύθμιση χρησιμεύει ως αποτελεσματικός μηχανισμός για την προώθηση κακοήθη μετασχηματισμό του καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) και προστατεύουν τα κύτταρα CRC κατά την απόπτωση. Πρόσφατα, η ανάλυση των πολυμορφισμών GRP78 έχει ήδη διαπιστώσει ότι GRP78 rs391957 πολυμορφισμός θα μπορούσε να προβλέψει την κλινική έκβαση σε ασθενείς με CRC. Έτσι, ελέγξαμε εάν οι πολυμορφισμοί GRP78 σχετίζονται με τον κίνδυνο CRC. Σε αυτή τη μελέτη, εντοπίσαμε δύο πολυμορφισμών GRP78 (rs391957 (C & gt? T) και rs430397 (G & gt? Α)) σε 414 περιπτώσεις CRC και 502 του νοσοκομείου με βάση τον καρκίνο χωρίς υγιείς μάρτυρες στη νοτιοδυτική Κίνα, χρησιμοποιώντας μια αντίδραση περιορισμού μήκους θραύσματος αλυσίδας πολυμεράσης τεχνική πολυμορφισμό. Σε σύγκριση με τον CC γονότυπο, φορείς CT και TT γονότυπους των rs391957 πολυμορφισμού είχαν υψηλότερο κίνδυνο CRC (αναλογία πιθανοτήτων (OR) = 1,39, 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI) = 1,06 – 1,83 για CT γονότυπο και OR = 2,10, 95% CI = 01.06 έως 04.14 για το ΤΤ γονότυπο, αντίστοιχα). Σε περιπτώσεις CRC, το αλληλόμορφο παραλλαγής Τ συσχετίστηκε σημαντικά με το στάδιο προσβολή όγκου (Ρ = 0.030), αλλά όχι με την κατάσταση των λεμφαδένων μετάστασης (Ρ = 0,052). Σε σύγκριση με τον γονότυπο GG, φορείς της GA και ΑΑ γονότυπους των rs430397 πολυμορφισμού είχαν υψηλότερο κίνδυνο CRC (OR = 1,63, 95% CI = 01.23 έως 02.15 για GA γονότυπο και OR = 2.92, 95% CI = 1,23 – 6,94 για ΑΑ γονότυπο , αντίστοιχα). Ο πολυμορφισμός rs430397 δεν συνδέθηκε με τις κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά της CRC. Αυτά τα δεδομένα παρέχουν την πρώτη απόδειξη ότι GRP78 rs391957 και πολυμορφισμοί rs430397 θα μπορούσαν να χρησιμεύσουν ως δείκτες για την πρόβλεψη του κινδύνου CRC

Παράθεση:. Zhang D, Zhou Β, Li Υ, Wang Μ, Wang C, Zhou Z, et al. (2013) Οι πολυμορφισμοί της γλυκόζης-Ρυθμιζόμενη Πρωτεΐνη 78 και του κινδύνου καρκίνου του παχέος εντέρου: Μια υπόθεση-Control Μελέτη στη νοτιοδυτική Κίνα. PLoS ONE 8 (6): e66791. doi: 10.1371 /journal.pone.0066791

Επιμέλεια: Valli De Re, Centro di Riferimento Oncologico, IRCCS Εθνικό Ινστιτούτο Καρκίνου, Ιταλία

Ελήφθη: 15 Ιανουαρίου 2013? Αποδεκτές: 12η Μάη του 2013? Δημοσιεύθηκε: 20 Ιουνίου 2013

Copyright: © 2013 Zhang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η έρευνα υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από Εξαιρετική Διδακτορική Διατριβή Ίδρυμα του Υπουργείου Παιδείας της Κίνας (Αρ 2007B66). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Καρκίνος του παχέος εντέρου (CRC) είναι ο τρίτος πιο συχνός καρκίνος παγκοσμίως, αντιπροσωπεύοντας περίπου το 10% του συνόλου των περιπτώσεων καρκίνου. Σχεδόν το 60% των περιπτώσεων CRC συμβαίνουν στις αναπτυγμένες χώρες [1]. Ωστόσο, η επίπτωση της CRC αυξάνεται στις περισσότερες από τις αναπτυσσόμενες χώρες, ενώ οι τάσεις είναι είτε σταθεροποίηση ή πτωτική στις περισσότερες από τις αναπτυγμένες [2] χώρες. Ως αναπτυσσόμενη χώρα, η Κίνα έχει βιώσει δύο έως δηλαδή τετραετή φορές αύξηση στη συχνότητα εμφάνισης της CRC κατά τις τελευταίες δεκαετίες [3]. Επιπλέον, οι Κινέζοι Hans έχουν σημαντικά υψηλότερη συχνότητα εμφάνισης CRC από άλλες εθνοτικές ομάδες στο [4] Ασία. Η παθογένεση της CRC δεν είναι πλήρως κατανοητή, αλλά είναι σίγουρα μια πολλαπλών βημάτων καρκινογόνο διαδικασία στην οποία γενετικές και επιγενετικές μεταβολές συσσωρεύονται διαδοχικά [5]. Οι πολυμορφισμοί του γονιδίου, όπως γενετικές παραλλαγές έχουν μελετηθεί ήδη σε περισσότερα από 35 διαφορετικά γονίδια, και για πολλά γονίδια, σύνδεση με CRC παρατηρούνται [6], [7].

Γλυκόζη-ρυθμιζόμενη πρωτεΐνη 78 (GRP78), και που αναφέρεται ως πρωτεΐνη δέσμευσης βαριάς αλυσίδας ανοσοσφαιρίνης, είναι ένα μέλος της πρωτεΐνης θερμικού σοκ 70 οικογένεια η οποία εκφράζεται ιδιοσυστατικώς και βρίσκεται κυρίως στο ενδοπλασματικό δίκτυο (ER) [8], [9]. Ως ένα σημαντικό chaperone ER, GRP78 διευκολύνει αναδίπλωση πρωτεϊνών και συναρμολόγησης, μετατοπίζεται νεοσυντιθέμενη πολυπεπτίδια κατά μήκος της μεμβράνης ER, εμποδίζει ενδιάμεσα από τη συνάθροιση, στοχεύει πρωτεΐνες κακώς αναδιπλωμένο για αποικοδόμηση πρωτεασώματος, δεσμεύει Ca

2+ και χρησιμεύει ως αισθητήρας για ER στρες [ ,,,0],10] – [12]. Επιπλέον, η υπερέκφραση του GRP78 μπορεί να προκληθεί δραματικά από ER στρες συμπεριλαμβανομένης της στέρησης της γλυκόζης, διαταραχή του Ca

2 + ομοιόσταση, το οξειδωτικό στρες και υποξίας, και στη συνέχεια, ενεργοποιεί το ανοιγμένο απάντηση πρωτεΐνης (UPR). UPR είναι μια σύνθετη και πολύπλευρη καταρράκτη μεταγωγής σήματος και χρησιμεύει για τον περιορισμό της συσσώρευσης του ξεδιπλωμένη πρωτεϊνών, συμβάλλοντας στον περιορισμό της βλάβης σε κύτταρα που εκτίθενται σε ER στρες και προστασία των κυττάρων έναντι θανάτου [9], [12] – [15].

τα καρκινικά κύτταρα συχνά αντιμέτωποι με υποξία και στέρηση γλυκόζης, με τον τρόπο αυτό υπό την προϋπόθεση της ER στρες με υπερέκφραση του GRP78. Πρόσφατα, η υπερέκφραση του GRP78 έχει ανιχνευθεί σε διάφορους καρκίνους όπως ο καρκίνος του εγκεφάλου, καρκίνος του μαστού, ο καρκίνος του πνεύμονα, καρκίνο του προστάτη, καρκίνο του στομάχου και CRC. Επιπλέον, GRP78 έχει αποδειχθεί ότι συνδέεται με την ανάπτυξη και την εξέλιξη των καρκίνων. [16] – [23]. Υπήρχαν αποδείξεις για να δείξει ότι GRP78 πολυμορφισμοί, μόνος του ή σε συνδυασμό, είχε επίδραση στην έκφραση της GRP78 [24], [25]. Προηγούμενες εκθέσεις διαπίστωσε ότι GRP78 rs430397 πολυμορφισμού συσχετίστηκε με τον κίνδυνο και την πρόγνωση του καρκίνου του ηπατοκυτταρικό (HCC) και η πρόγνωση του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) [26], [27]. Εν τω μεταξύ, έγινε επίσης γνωστό ότι GRP78 rs391957 πολυμορφισμός θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως μια πιθανή προγνωστική καθοριστικός παράγοντας για γαστρικό και του παχέος εντέρου [28]. Η πρόσφατη μελέτη έδειξε GRP78 rs391957 πολυμορφισμού συσχετίστηκε με τον κίνδυνο ηπατοκυτταρικού καρκινώματος, αλλά το αποτέλεσμα παρέμεινε αντιφατικά [29]. Επί του παρόντος, λίγα είναι γνωστά για τη σχέση των πολυμορφισμών GRP78 και επιδεκτικότητα σε CRC, ιδιαίτερα στον πληθυσμό κινέζικα Χαν. Ως εκ τούτου, υποθέσαμε ότι οι πολυμορφισμοί GRP78 θα μπορούσε επίσης να επηρεάσει τον κίνδυνο της CRC.

Για να ελεγχθεί η υπόθεση, πραγματοποιήσαμε μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων σε ένα πληθυσμό Κινέζοι Χαν να διερευνήσει κατά πόσον πολυμορφισμοί GRP78 συσχετίστηκαν με τον κίνδυνο και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά της CRC.

Υλικά και Μέθοδοι

Θέματα μελέτη

Ένα σύνολο από 414 περιπτώσεις CRC και 502 του καρκίνου χωρίς ελέγχους είχαν προσληφθεί για τη μελέτη αυτή την περίπτωση-ελέγχου. Οι ασθενείς επιλέχθηκαν διαδοχικά από Ιανουάριος 2009 – Αύγουστος 2009 στο τμήμα του γαστρεντερικού Χειρουργικής, Δυτική Κίνα Νοσοκομείο, Πανεπιστήμιο Sichuan. Όλες οι περιπτώσεις είχαν πρόσφατα διαγνωστεί, μη επεξεργασμένα πρωτογενή CRC, οι οποίοι εντοπίστηκαν από την προεγχειρητική κολονοσκόπηση και αξονική τομογραφία, διεγχειρητική διερεύνηση και μετεγχειρητική παθολογική εξέταση. Ο καρκίνος του ορθού θεωρήθηκε ως όγκος βρίσκεται σε κοντινή απόσταση 15 cm από το πρωκτικό, και το μη-ορθού καρκίνου του παχέος εντέρου θεωρήθηκε ως του όγκου που βρίσκεται πέρα ​​από απόσταση 15 cm από το πρωκτικό. Ασθενείς με άλλες ιστορία του καρκίνου και των προηγούμενων ραδιοθεραπεία και χημειοθεραπεία αποκλείστηκαν. Όλες οι επιλεγμένες περιπτώσεις συμφώνησε να συμμετάσχει. Οι έλεγχοι νοσοκομείο με βάση επιλέχθηκαν τυχαία από το ίδιο νοσοκομείο κατά τη διάρκεια συνήθων εξετάσεις υγείας, οι οποίοι ήταν ελεύθεροι καρκίνου υγιή άτομα που προσδιορίζονται από την κολονοσκόπηση και αξονική τομογραφία. Η ομάδα ελέγχου ταιριάζουν με την ομάδα υπόθεσης στο φύλο και την ηλικία. Όλοι οι συμμετέχοντες ήταν άσχετες κινεζική Hans στη νοτιοδυτική Κίνα. Γραπτή συγκατάθεση, δείγματα αίματος και κλινικά δεδομένα συλλέχθηκαν από όλους τους συμμετέχοντες σύμφωνα με τα πρωτόκολλα που εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της Δυτικής Κίνας Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου του Σιτσουάν.

DNA Εξόρυξη και Γονοτυπικές

Το γονιδιακό DNA εκχυλίστηκε από πλήρες αίμα του κάθε συμμετέχοντα με συμβατική διαδικασία φαινόλη /χλωροφόρμιο. Η συγκέντρωση και η καθαρότητα του DNA μετρήθηκαν με ένα φασματοφωτόμετρο. Το απομονωμένο DNA διαλύθηκε σε ρυθμιστικό ΤΕ και αποθηκεύεται σε ψυγείο στους -20 ° C πριν από την ανάλυση. Δύο πολυμορφισμοί GRP78 (rs391957 (C & gt? T) και rs430397 (G & gt? Α)) ήταν ο γονότυπος χρήση αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης (PCR) θραύσμα -Περιορισμός τεχνική πολυμορφισμού μήκους. Εν συντομία, εμπρόσθιοι και αντίστροφοι εκκινητές χρησιμοποιήθηκαν για την ενίσχυση PCR, και στη συνέχεια τα ενισχυμένα προϊόντα υπέστησαν πέψη με ενδονουκλεάσες περιορισμού. Επιπλέον, τα μήκη των προϊόντων PCR και οι πέψη θραύσματα προσδιορίσθηκαν με ηλεκτροφόρηση σε πήκτωμα αγαρόζης 1.5% και 3% πηκτή αγαρόζης, χωριστά. Για γονότυπο GRP78 rs391957 πολυμορφισμό, εκκινητές PCR ήταν 5′-atctctcctgcgacttctga-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-gatggaggaagggagaacaa-3′ (αντίστροφο), και το μέγεθος των ενισχυμένων προϊόντων ήταν 167 bp. Τα προϊόντα PCR στη συνέχεια σε πέψη με ενδονουκλεάση περιορισμού MboII. Το αλληλόμορφο παραλλαγής Τ είχε την θέση περιορισμού MboII και δύο ζώνες (134 bp και 32 bp) δημιουργήθηκαν μετά την πέψη, ενώ η αλληλόμορφο άγριου C έλειπε ελήφθη η θέση περιορισμού και μια μονή ζώνη (167 bp). Για γονότυπο GRP78 rs430397 πολυμορφισμό, εκκινητές PCR ήταν 5’-aattcaggacattgcatcta-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-tggacagcagcaccatac-3’ (αντίστροφο), και το μέγεθος των ενισχυμένων προϊόντων ήταν 271 bp. Τα προϊόντα PCR στη συνέχεια σε πέψη με ενδονουκλεάση περιορισμού Hin1III. Η παραλλαγή Α αλληλόμορφο έλειπε η Hin1III θέση περιορισμού και μια ενιαία ζώνη (271 bp) ελήφθη, ενώ η άγρια ​​G αλληλόμορφο είχε την θέση διασπάσεως και δύο ζώνες (218 bp και 52 bp) δημιουργήθηκαν μετά την πέψη. Επιπλέον, τα αποτελέσματα προσδιορισμού του γονότυπου επικυρώθηκαν από την άμεση αλληλούχιση του DNA σε μια τυχαία 5% των δειγμάτων για τον έλεγχο της ποιότητας. Γονότυπο συμφωνία ήταν 100%.

Στατιστική Ανάλυση

Οι υπολογισμοί για τη δύναμη και μέγεθος δείγματος σχεδιασμού case-control μας πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό πρόγραμμα PS. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ο αριθμός των προσληφθεί δειγμάτων θα μπορούσε να παρέχει επαρκή στατιστική ισχύ. Απόκλιση από την ισορροπία Hardy-Weinberg για κάθε πολυμορφισμό ελέγχθηκε με τη χρήση chi-square test μεταξύ των ελέγχων. Οι διαφορές στα δημογραφικά χαρακτηριστικά (π.χ. φύλο και ηλικία) μεταξύ των περιπτώσεων CRC και ελέγχους συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας τεστ chi-square και t. Οι ενώσεις των γονότυπων κατανομής των πολυμορφισμών GRP78 με κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των περιπτώσεων CRC αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας τεστ chi-square. εκτιμήσεων κινδύνου υπολογίστηκαν για τις συν-κυρίαρχο και κυρίαρχη γενετική μοντέλα που χρησιμοποιούν την πιο κοινή ομόζυγο γονότυπο ως κατηγορία αναφερόμενο. Τα αποτελέσματα των γονότυπων των πολυμορφισμών GRP78 σχετικά με τον κίνδυνο της CRC εκπροσωπήθηκαν ως τις αναλογίες πιθανοτήτων (OR) με διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (ΠΙ) χρησιμοποιώντας άνευ όρων μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης με προσαρμογή για το φύλο και την ηλικία. Όλες οι στατιστικές δοκιμασίες ήταν δύο όψεων, και η P & lt? 0,05 θεωρήθηκε σημαντική. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του PASW Στατιστικής 18 (SPSS Inc, Chicago, IL).

Αποτελέσματα

Από τις εκτιμώμενες αλληλόμορφο ΕΑΠ 1,38 και 1,60, η μελέτη μας με 414 περιπτώσεις CRC και 502 μάρτυρες προϋπόθεση ότι η στατιστική ισχύς των 0,80 και 0,95 με την ονομαστική Ι ποσοστό σφάλματος τύπο του 0,05, αντίστοιχα, υποδεικνύοντας ότι τα δείγματα θα μπορούσαν να μας παρέχουν επαρκή δύναμη στον προσδιορισμό της σύνδεσης του κινδύνου CRC με δύο πολυμορφισμούς GRP78. Η παρατηρούμενη κατανομή γονότυπων συχνότητα των δύο πολυμορφισμών GRP78 στους ελέγχους δεν έδειξε σημαντική απόκλιση από την ισορροπία Hardy-Weinberg (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Χαρακτηριστικά Πληθυσμός μελέτης

Τα δημογραφικά και κλινικά χαρακτηριστικά οι συμμετέχοντες στη μελέτη συνοψίζονται στον πίνακα 1. Η μέση ηλικία ήταν 59.0 (± 13,2) έτη και 58,2 (± 9,1) ετών, στις περιπτώσεις και ελέγχους αντίστοιχα. Οι περισσότερες από τις περιπτώσεις και οι έλεγχοι ήταν άνδρες, και στις περιπτώσεις που η αναλογία των φύλων (αρσενικό /θηλυκό) ήταν 1.39:1 ενώ η αναλογία ήταν 1.5:1 στους ελέγχους. Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων όσον αφορά την ηλικία (Ρ = 0,295) και το φύλο (Ρ = 0,592), υποδεικνύοντας ότι η αντιστοίχιση για δύο ομάδες ήταν επιτυχής. Οι περισσότερες από τις περιπτώσεις CRC ήταν στο NCCN σταδίου ΙΙ και ΙΙΙ (288/412, 69,9%). Οι όγκοι των πιο CRC περιπτώσεις βρίσκονταν στο ορθό (310/414, 74,9%).

Η

Σύλλογος κλινικοπαθολογοανατομικών Χαρακτηριστικά Περιπτώσεις CRC με τις δύο GRP78 πολυμορφισμοί

Σύλλογος αναλύσεων μεταξύ γονότυπους κατανομή των δύο πολυμορφισμών GRP78 και κλινικοπαθολογικών χαρακτηριστικά των περιπτώσεων CRC φαίνονται στον πίνακα 2. κατανομή της παραλλαγής-αλληλόμορφο που μεταφέρουν γονότυπους (CT + ΤΤ) ή CC ομόζυγο γονότυπο GRP78 rs391957 πολυμορφισμού συσχετίστηκε σημαντικά με το στάδιο εισβολής του όγκου ( Τ1, Τ2, Τ3 και Τ4 στάδιο) στις περιπτώσεις CRC (Ρ = 0,030). Μεταξύ των ασθενών με την παραλλαγή Τ αλληλόμορφου, 9,0%, 10,1%, 24,9% και 56,0% ήταν σε Τ1, Τ2, Τ3 και το στάδιο Τ4 αντίστοιχα, ενώ 7,6%, 16,1%, 14,8% και 61,5% των ασθενών με την CC ομόζυγη γονότυπο ήταν σε Τ1, Τ2, Τ3 και Τ4 στάδιο αντίστοιχα. Υπήρχε μια υψηλότερη τάση ότι οι φορείς αλληλόμορφου παραλλαγής Τ είχαν μικρότερο ποσοστό των λεμφαδένων μεταστάσεων (37,6%) σε σύγκριση με τους φορείς με CC ομόζυγο γονότυπο (47,1%), αν και η διαφορά δεν ήταν στατιστικά σημαντική (P = 0,052). Εν τω μεταξύ, γονότυποι διανομή GRP78 rs391957 πολυμορφισμός δεν συσχετίστηκε με άλλες κλινικοπαθολογοανατομικές δεδομένων, όπως το στάδιο TNM, μακρινή μετάσταση, θέση του όγκου, της διαφοροποίησης του όγκου και του τρόπου ανάπτυξης του όγκου σε περιπτώσεις CRC (P & gt? 0,05). Επιπλέον, δεν υπήρξε συσχέτιση μεταξύ της κατανομής των γονότυπων παραλλαγή-αλληλόμορφο που μεταφέρουν (GA + AA) ή GG ομόζυγο γονότυπο GRP78 rs430397 πολυμορφισμό και όλα τα κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά στις περιπτώσεις CRC (P & gt? 0,05).

γονότυποι των δύο GRP78 πολυμορφισμοί συσχετίστηκαν με αυξημένο κίνδυνο CRC

Λογιστική παλινδρόμηση αναλύσεις γονότυπους των δύο πολυμορφισμών GRP78 τόσο έδειξαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των υποθέσεων CRC και τους ελέγχους στον πίνακα 3. σε σύγκριση με το CC ομόζυγο γονότυπο της GRP78 rs391957 πολυμορφισμό, το CT ετερόζυγη (Adjusted OR = 1.39, 95% CI = 1,06 – 1,83, P = 0,018) και ΤΤ ομόζυγη (Adjusted OR = 2.10, 95% CI = 01.06 έως 04.14, Ρ = 0.033 ) γονότυπων ήταν τόσο σημαντικά που συνδέονται με υψηλότερο κίνδυνο CRC. Οι φορείς αλληλόμορφο συνολική παραλλαγή Τ (CT + ΤΤ) είχαν επίσης σημαντικά υψηλότερο κίνδυνο CRC σε σύγκριση με τις ομόζυγο φορείς CC (Adjusted OR = 1.45, 95% CI = 1,11 – 1,89, P = 0,006), γεγονός που υποδηλώνει ότι το αλληλόμορφο παραλλαγή Τ GRP78 rs391957 πολυμορφισμός μπορεί να είναι μια επιβλαβής αλληλόμορφο. Επιπλέον, παρόμοια τάση υψηλότερου κινδύνου CRC ανιχνεύθηκε σε αναλύσεις των γονότυπων της GRP78 rs430397 πολυμορφισμού. Σε σύγκριση με τον ομόζυγο γονότυπο GG, η ετερόζυγη GA (Adjusted OR = 1,63, 95% CI = 01.23 έως 02.15, Ρ = 0.001) και ΑΑ ομόζυγη (Adjusted OR = 2.92, 95% CI = 1,23 – 6,94, P = 0,015) γονότυπους ήταν τόσο σημαντικά που συνδέονται με υψηλότερο κίνδυνο CRC. Η συνολική παραλλαγή Α φορείς αλληλόμορφου (GA + AA) είχαν επίσης σημαντικά υψηλότερο κίνδυνο CRC σε σύγκριση με τις ομόζυγο φορείς GG (Adjusted OR = 1.70, 95% CI = 1.29 έως 2.23, P & lt? 0.001), έτσι η παραλλαγή Α αλληλόμορφο GRP78 rs430397 πολυμορφισμός μπορεί να είναι μια βλαβερή αλληλόμορφο, καθώς και.

η

Συζήτηση

Για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη που διερεύνησε αν οι rs391957 GRP78 και πολυμορφισμοί rs430397 που σχετίζονται με τον κίνδυνο CRC. Σε αυτή τη μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο με βάση, βρήκαμε ότι η CT ετερόζυγη, ΤΤ ομόζυγα και σε συνδυασμό (CT + ΤΤ) γονότυπους των GRP78 rs391957 πολυμορφισμό και το ετερόζυγο GA, ΑΑ ομόζυγα και σε συνδυασμό (GA + AA) γονότυπους των GRP78 rs430397 πολυμορφισμού και οι δύο σχετίζονται σημαντικά με υψηλότερο κίνδυνο CRC σε έναν πληθυσμό κινεζική Han, γεγονός που υποδηλώνει ότι οι δύο πολυμορφισμοί GRP78 πιθανώς να διαδραματίσουν δυναμικό ρόλο στην ανάπτυξη του CRC.

στις ΗΠΑ, νέες περιπτώσεις καρκίνου του ορθού αντιπροσώπευαν περίπου 40 % των περιπτώσεων με CRC [30]. Ωστόσο, βρήκαμε ότι το 75% CRCs συνέβη στο ορθό στις υποθέσεις μας, η οποία ήταν ασυμβίβαστη με το ορθό λογιστικό καρκίνου για 40-50% στο συνολικό πληθυσμό των Χαν. Τα δεδομένα μας ήταν παρόμοια με εκείνη της προηγούμενης μελέτης σχετικά με νοτιοδυτική κινεζική πληθυσμού από τον Wang

et al.

όπου το 77% CRCs ήταν ορθού σε περιπτώσεις τους [31]. Μια πιθανή εξήγηση είναι η συχνότητα εμφάνισης του καρκίνου θα πρέπει να είναι συγκεκριμένη περιοχή. Λόγω της τεράστιας περιοχής και μεγάλο μέρος του πληθυσμού στην Κίνα, ο τρόπος ζωής και η οικονομική ανάπτυξη είναι διαφορετικά σε διαφορετικές περιοχές, με διαφορετικές παθολογίες για διαφορετικούς καρκίνους. Για το λόγο αυτό, τώρα που η μελέτη μας επικεντρώθηκε στην νοτιοδυτική πληθυσμού Χαν στην Κίνα, το υψηλό ποσοστό του καρκίνου του ορθού σε υποθέσεις μας, η οποία θα μπορούσε να αποκαλύψει την επιδημιολογική κατάσταση της CRC στη νοτιοδυτική πληθυσμού Han ήταν ίσως διαφορετική από την αναλογία του καρκίνου του ορθού σε συνολικό πληθυσμό Han . Από την άλλη πλευρά, όπως νοτιοδυτική Κίνα είναι μια οικονομικά υπανάπτυκτη περιοχή, η πλειοψηφία των ανθρώπων στη νοτιοδυτική Κίνα δεν είναι σε θέση να δώσει έλεγχο ρουτίνας για CRC. Ως εκ τούτου, τα περισσότερα κρούσματα παρουσιάστηκαν ως συμπτωματική ασθένειες. Ενώ ο καρκίνος του ορθού μπορεί να είναι πιο εμφανής από ό, τι μη-ορθού καρκίνου του παχέος εντέρου, ασθενείς με καρκίνο του ορθού έχουν μεγαλύτερη πιθανότητα να πάρει την εξέταση και θεραπεία από εκείνους με μη-ορθού καρκίνου του παχέος εντέρου. Αυτό μπορεί να είναι ένας άλλος λόγος για την υψηλή αναλογία του καρκίνου του ορθού σε περιπτώσεις μας. Ωστόσο, παρ ‘όλα αυτά, τα οριστικά ποσοστά του καρκίνου του ορθού και του καρκίνου του μη ορθού στη νοτιοδυτική πληθυσμού Han, θα χρειαστεί περαιτέρω έρευνα σε μεγάλα και πολλαπλά κέντρα μελετών. Επιπλέον, η αναλογία των αρσενικών προς τα θηλυκά με CRC στη μελέτη μας ήταν 1.39:1, η οποία ήταν επίσης παρόμοια με εκείνη του 1.36:1 στην προηγούμενη μελέτη για νοτιοδυτική κινεζικού πληθυσμού από τον Wang

et al.

[31] . Αν και αναλογία μας στο CRC ήταν υψηλότερη από ότι στις ΗΠΑ η οποία είναι συνήθως καλά ισορροπημένη μεταξύ ανδρών και γυναικών, θεωρήσαμε ότι η αναλογία των φύλων θα πρέπει επίσης να είναι συγκεκριμένη περιοχή λόγω των διαφορών στις επικίνδυνες συμπεριφορές και εθνοτικές ομάδες. Η προηγούμενη μελέτη, η οποία έδειξε τα χαμηλότερα ποσοστά παρατηρούνται στις γυναίκες σε σύγκριση με τους άνδρες μπορεί να σχετίζονται με διαφορές στις συμπεριφορές κινδύνου που συνδέεται με καρκίνο του παχέος εντέρου, όπως το κάπνισμα, και η διαφορετική επίδραση της παχυσαρκίας στους άνδρες και τις γυναίκες, επεσήμανε επίσης σε αυτό [32]. Έτσι, η υψηλότερη αναλογία των αρσενικών προς τα θηλυκά με CRC μπορεί να είναι ο εκπρόσωπος της αναλογίας των φύλων στη νοτιοδυτική κινεζική πληθυσμό.

Είναι σαφές ότι η υπερέκφραση της GRP78 εμφανίζεται σε διάφορους ανθρώπινους καρκίνους και καρκινικές κυτταρικές σειρές, συσχετίζοντας με κακοήθεια, μετάσταση και φτωχή πρόγνωση [13]. Η αυξημένη έκφραση του GRP78 αύξησε την WHO παθολογική τάξη των πρωτογενών αστροκύτωμα, το οποίο προβλέπεται έντονα πρόγνωση των ασθενών [16]. Η έκφραση του GRP78 ήταν ρυθμισμένα προς τα πάνω σε καρκινικά κύτταρα του προστάτη σε σύγκριση με καλοήθη ιστό, και οι ασθενείς με υψηλότερη έκφραση της GRP78 είχαν σχεδόν διπλάσιο κίνδυνο θανάτου από καρκίνο του προστάτη σε σύγκριση με εκείνους με αδύναμο έκφραση [20]. GRP78 ήταν εντόνως εκφρασμένο σε γαστρικό καρκίνο και φαίνεται να είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός επιβίωση [21]. Μια προηγούμενη μελέτη ανέφερε ότι η υπερέκφραση του GRP78 φάνηκε να συσχετίζεται με την ιστολογική σοβαρότητα από το φυσιολογικό ιστό κόλου να αδένωμα του παχέος εντέρου σε καρκίνωμα του παχέος εντέρου, η οποία έδειξε ότι η υπερέκφραση του GRP78 θα μπορούσε να είναι ένας δείκτης για κακοήθη εξαλλαγή του CRC [22]. Επιπλέον, μια άλλη μελέτη έδειξε ότι knockdown του GRP78 ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων CRC και αύξησε την απόπτωση των κυττάρων CRC in vitro, η οποία έδειξε ότι η έκφραση του GRP78 θα μπορούσε να ενισχύσει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων CRC και την προστασία τους ενάντια σε απόπτωση [23].

Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι οι πολυμορφισμοί στον υποκινητή του γονιδίου είναι πιθανόν να ενισχύσει ή να εξασθενήσει την έκφραση του γονιδίου [33] – [35]. Η πολυμορφισμός rs391957 βρίσκεται στον προαγωγέα του γονιδίου GRP78 [24]. Έχει παρατηρηθεί ότι ο πολυμορφισμός rs391957 μετέβαλε την έκφραση των GRP78 σε κύτταρα κάτω από διαφορετικές συνθήκες. Συγκεκριμένα, σε φυσιολογικά κύτταρα, οι φορείς αλληλόμορφο παραλλαγής Τ είχαν χαμηλότερη δραστικότητα υποκινητή βασικό από τα ομόζυγα φορείς CC. Ωστόσο, στα κύτταρα υπό την προϋπόθεση της ER στρες, οι μεταφορείς αλληλόμορφο παραλλαγής Τ είχαν σημαντικά υψηλότερη έκφραση του GRP78 από τα ομόζυγα φορείς CC [25]. Έτσι, η παραλλαγή Τ αλληλόμορφο GRP78 rs391957 πολυμορφισμού ενισχύει πιθανώς την έκφραση GRP78 σε διάφορους καρκίνους που επηρεάζουν έτσι την ανάπτυξη και την εξέλιξη των καρκίνων. Αυτά τα ευρήματα είναι συνεπή με την προηγούμενη μελέτη η οποία έδειξε ότι οι ασθενείς με CRC τον ετερόζυγο CT ή ΤΤ ομόζυγοι γονότυπους είχαν σημαντικά υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής του όγκου σε σύγκριση με τους ασθενείς με ομόζυγο γονότυπο την CC [27]. Στη συνέχεια, παρούσα μελέτη μας έχει παρόμοια ευρήματα, η οποία έδειξε ότι οι αερομεταφορείς αλληλόμορφο παραλλαγής Τ είχαν υψηλότερο κίνδυνο CRC σε σύγκριση με τα άγρια ​​φορείς αλληλόμορφο C. Συλλογικά, αυτά τα δεδομένα παρέχουν προκαταρκτική υποστήριξη ότι το αλληλόμορφο παραλλαγή Τ του GRP78 rs391957 πολυμορφισμού μπορεί να είναι τόσο ευαίσθητος δείκτης και ένας προγνωστικός δείκτης για CRC, και έχουν μία σημαντική λειτουργία στην ανάπτυξη και εξέλιξη της CRC λόγω ενίσχυση της έκφρασης του GRP78. Ωστόσο, ορισμένα αποτελέσματα εξακολουθούν να παραμένουν αντιφατικά. Η πιο πρόσφατη μελέτη έδειξε ότι το αλληλόμορφο C του GRP78 rs391957 πολυμορφισμού συσχετίστηκε με αυξημένο κίνδυνο HCC και τους φορείς αλληλόμορφο C είχαν υψηλότερη έκφραση του mRNA και της πρωτεΐνης του GRP78 στο HCC [29]. Η πιθανή εξήγηση είναι ότι οι συνθήκες της ER στρες είναι διαφορετικά σε διάφορους τύπους καρκίνου. Έτσι, όλο και περισσότερες έρευνες που απαιτούνται για να ανακαλύψουν και να επιβεβαιώσει τους ρόλους των GRP78 rs391957 πολυμορφισμού.

Βρήκαμε επίσης ότι το αλληλόμορφο παραλλαγή Τ GRP78 rs391957 πολυμορφισμού συσχετίστηκε με την τοπική εισβολή όγκου της CRC. Ωστόσο, λόγω της αναδρομικής σχεδιασμό και τον σχετικό αριθμό των αιτήσεων που αφορούν, επιπλέον υποψήφιους βιοδείκτη ενσωματωμένο κλινικές δοκιμές και τα πειράματα των κυττάρων και των ιστών θα είναι απαραίτητες για την επικύρωση αποτέλεσμα μας και να προσδιορίσει ποιος είναι ο ρόλος που παίζει ο rs391957 πολυμορφισμός στην εξέλιξη της CRC. Στη μελέτη μας, το στάδιο Τ4 ήταν η πλειοψηφία των περιπτώσεων. το στάδιο του όγκου συνδέεται συχνά με την έλλειψη ελέγχου, η πρόσβαση στην ιατρική περίθαλψη και ούτω καθεξής. Έτσι, αποτέλεσμα μας μπορεί επίσης να αποκαλύψει ότι υπάρχει έλλειψη ελέγχου για CRC στη νοτιοδυτική κινεζική πληθυσμό. Οι ασθενείς με CRC δεν ήταν σε θέση να πάρει η έγκαιρη διάγνωση, έτσι ώστε η πλειοψηφία των οποίων ήταν σε προχωρημένα στάδια, όταν έλαβαν την κατάλληλη θεραπεία. Είναι απαραίτητο ότι νοτιοδυτική κινεζική δώσει μεγαλύτερη προσοχή στην εξέταση ρουτίνας για CRC. Επιπλέον, η προηγούμενη μελέτη διαπίστωσε υψηλότερη έκφραση του GRP78 συνέβαλαν στην αύξηση της μετάστασης λεμφαδένα σε ασθενείς με γαστρικό καρκίνο [21]. Αντίθετα, βρήκαμε τους ασθενείς CRC με την παραλλαγή Τ αλληλίου που συμβάλλουν στην υψηλότερη έκφραση του GRP78 μπορεί να έχουν μικρότερη πιθανότητα μετάστασης λεμφαδένα. Περιορισμοί της μικρού μεγέθους του δείγματος μας είναι πιθανό να είναι ο λόγος. Εναλλακτικά, οι ρόλοι των GRP78 σε επηρεάζουν την κατάσταση της μετάστασης λεμφαδένα είναι διαφορετικά σε διάφορες μορφές καρκίνου.

Η παραλλαγή Τ συχνότητα αλληλόμορφο είναι περίπου 29% στις ασιατικές πληθυσμού, το 36% στο ευρωπαϊκό πληθυσμό, 29% στις ΗΠΑ και μόνο το 9% στην αφρικανική πληθυσμού. Έτσι, το γεγονός ότι οι περισσότεροι πληθυσμοί μοιράζονται παρόμοιες αναλογίες Τ φορείς ενισχύει τη σημασία των ευρημάτων μας και την ανάγκη για περαιτέρω μελέτη. Ωστόσο, η εθνικότητα είναι μείζονος σημασίας στην ανάλυση πολυμορφισμού, και τα ευρήματά μας πρέπει επίσης μελέτες για άλλες πληθυσμιακές ομάδες να το επιβεβαιώσει στο μέλλον.

Οι πολυμορφισμοί στο ιντρόνιο του γονιδίου έχουν λάβει λιγότερη προσοχή, αλλά έχουν αρχίσει να να αναγνωρίζεται για την πιθανή συνεισφορά τους στην ανάπτυξη και την εξέλιξη των ασθενειών, συμπεριλαμβανομένων των καρκίνων [36]. Υπάρχουν συρραφής ενισχυτή και μάτισμα φίμωσης τοποθεσίες σε όλη την εσώνια των γονιδίων. μεταβολές αλληλουχίας σε οποιαδήποτε από αυτές τις περιοχές μπορούν να εσωνίων προκαλούν αλλοίωση μάτισμα του pre-mRNA το οποίο συμβάλλει στην κακοήθη εξέλιξη [37]. Ο πολυμορφισμός rs430397 είναι ακριβώς βρίσκεται στην αντίθετη κατεύθυνση από το όριο εσωνίου /εξωνίου στο πλαίσιο του πέμπτου ιντρονίου του γονιδίου GRP78 [36]. Η προηγούμενη μελέτη έχει κατ ‘αρχάς αποδειχθεί ότι η παραλλαγή Α αλληλόμορφο GRP78 rs430397 πολυμορφισμού συσχετίστηκε με υψηλότερο κίνδυνο και κακή πρόγνωση ηπατοκυτταρικού καρκινώματος [26]. Μια άλλη μελέτη κατέδειξε επίσης ότι οι ΑΑ ομόζυγοι φορείς είχαν υψηλότερα RNA και πρωτεΐνης έκφραση GRP78 σύγκριση με τα ομόζυγων φορέων GG σε ιστούς, και ότι οι φορείς ΑΑ είχαν κακή πρόγνωση του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα [28]. Ο μηχανισμός της GRP78 rs430397 πολυμορφισμού που επηρεάζουν την ανάπτυξη και εξέλιξη του καρκίνου είναι ασαφής. Μια υπόθεση είναι ότι αυτή η παραλλαγή αλληλόμορφου στο ιντρόνιο μεταβάλλει πιθανώς την μάτισμα του pre-mRNA, επηρεάζοντας έτσι την έκφραση της GRP78 μεταβάλλοντας την αποτελεσματικότητα της μεταφράσεως ή την σταθερότητα του mRNA [36]. Το αποτέλεσμα της μελέτης μας, η οποία έδειξε ότι η παραλλαγή Α αλληλόμορφο φορείς είχαν υψηλότερο κίνδυνο CRC σε σύγκριση με τις ομόζυγο φορείς CC έχει παράσχει έμμεση αποδείξεις για να υποστηρίξουν την υπόθεση. Ως εκ τούτου, ο Α αλληλόμορφο παραλλαγή μπορεί να είναι σε θέση να ενισχύσει την έκφραση του GRP78, αλλά η περαιτέρω έρευνα λειτουργία είναι απαραίτητη για να εξηγήσει την ακριβή μηχανισμό. Επιπλέον, η παραλλαγή Α αλληλόμορφο GRP78 rs430397 πολυμορφισμού μπορεί να είναι ένας ευαίσθητος δείκτης για CRC, αλλά αν η παραλλαγή Α αλληλόμορφο που σχετίζεται με την πρόγνωση του CRC δεν είναι ακόμα γνωστός.

Υπήρξαν περίπου 200 γνωστούς πολυμορφισμούς εντός το γονίδιο GRP78 [36]. Με βάση προηγούμενες μελέτες, οι πολυμορφισμοί του rs391957 και rs3216733 ήταν εντελώς συνδεδεμένο [25], και οι πολυμορφισμοί του rs391957, rs17840761 και rs12009 ήταν σε ανισορροπία σύνδεσης ενώ οι απλότυποι από αυτούς δεν συνδέθηκαν με CRC [28]. Επιπλέον, οι πολυμορφισμοί του rs17840761 και rs12009 δεν συσχετίστηκαν με CRC [28]. Επιπλέον, δεν διαπιστώθηκε ότι άλλοι πολυμορφισμοί και rs430397 πολυμορφισμού ήταν σε ανισορροπία σύνδεσης.

Συμπέρασμα

Δεν υπήρχαν σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ του κινδύνου του CRC και τα rs391957 GRP78 και πολυμορφισμοί rs430397. Τόσο η παραλλαγή Τ αλληλόμορφο rs391957 πολυμορφισμού και η παραλλαγή Α αλληλόμορφο rs430397 πολυμορφισμού συσχετίστηκαν με υψηλότερο κίνδυνο CRC στη νοτιοδυτική κινεζική πληθυσμό Han, αν και κατά πόσο το αλληλόμορφο παραλλαγή Τ rs391957 πολυμορφισμού επηρεάζονται τοπικές στάδια εισβολής του όγκου και το καθεστώς των αναγκών μετάσταση στους λεμφαδένες να δοκιμαστεί περαιτέρω προοπτικές μελέτες μεγαλύτερης κλίμακας στο μέλλον. Αυτά τα προκαταρκτικά ευρήματα υποδεικνύουν ότι οι πολυμορφισμοί GRP78 θα μπορούσε να παράσχει ενδείξεις για την πρόβλεψη της ευαισθησίας σε CRC. Αλλά οι ακριβείς μηχανισμοί που διέπουν τη σχέση των πολυμορφισμών GRP78 και CRC χρειάζονται επίσης περαιτέρω διερεύνηση.

Ευχαριστίες

Σας ευχαριστούμε Xueping Zhang, Κυ Peng και Yaling Zhang για τη βοήθειά τους στη συλλογή των δειγμάτων αίματος, Keling Chen και Zhaoying Lu για εργαστηριακή συνδρομή τους.