Αφηρημένο

Ιστορικό

Το σύνδρομο Lynch (LS) είναι μια κληρονομική πάθηση που αυξάνει τον κίνδυνο για ενδομητρίου και άλλων μορφών καρκίνου. Η ταυτοποίηση του καρκίνου του ενδομητρίου (ΕΚ) ασθενείς με LS έχει τη δυνατότητα να επηρεάσει παρεμβάσεις σωτήρια. Έχουμε ως στόχο να μελετήσει τον επιπολασμό της LS μεταξύ των ασθενών ΕΚ του πληθυσμού μας.

Μέθοδοι

Οικουμενική έλεγχο για LS εφαρμόστηκε για μια συνεχόμενη σειρά ΕΚ. δοκιμή όγκου χρησιμοποιώντας αστάθεια μικροδορυφορικού (MSI), ανοσοϊστοχημεία (IHC) για τυχόν αναντιστοιχία επισκευή (MMR) έκφραση της πρωτεΐνης και

MLH1

ανάλυση μεθυλίωση, όταν απαιτείται, χρησιμοποιήθηκε για να επιλέξετε LS-ύποπτες περιπτώσεις. Αλληλουχίας των αντίστοιχων MMR γονίδια εκτελέστηκε.

Αποτελέσματα

Εκατόν εβδομήντα τρεις ΕΚ (μέση ηλικία, 63 ετών) ελέγχθηκαν. Εξήντα ένας ασθενείς (35%) είχαν ανώμαλη IHC ή MSI αποτελέσματα. Μετά από

MLH1

ανάλυση μεθυλίωσης, 27 περιπτώσεις θεωρήθηκαν ύποπτες της LS. Από αυτά, 22 ήταν σε επαφή και αναφέρονται για γενετική συμβουλευτική. Δεκαεννέα επιδιώκει γενετικές δοκιμές και οκτώ διαγνώστηκαν της LS. Μεταλλάξεις ήταν πιο συχνές σε νεότερους ασθενείς ( _ 645+ del Διαγραφή της εξόνιο 1-3 σ Colon cancerEnd091Yes40MSIMSH2 /MSH6

MSH2

c.1226_1227delAGp.Gln409Argfs * 7Ovarian cancerEnd003Yes60MSIMSH2 /MSH6

MSH2

c.1387 -; _ 1661del Διαγραφή της εξόνιο 9-10 p?NoneEnd014No61MSIMSH6

MSH6

c.2731CTp.Arg911*NoneEnd088Yes45MSSMSH6

MSH6

c.1367GA

#p.Trp456*Ovarian cancerEnd137No56MSINo απώλεια

MSH6

c.1367GA

# p.Trp456 * NoneEnd034Yes44MSSPMS2

PMS2

c.538 -; _ 705+ del Διαγραφή από το εξώνιο 6

# p; NoneTable 5. Χαρακτηριστικά των ασθενών με βλαστική μετάλλαξη.

#Not περιγράφεται σε βάση δεδομένων Insight. CSV Λήψη CSV

Τρεις από τις μεταλλάξεις (37,5%) ήταν μεγάλες διαγραφές (δύο στο

MSH2

και ένα στο

PMS2

), τρία (37,5%) ήταν οι μεταλλάξεις ανοησίες (όλα στους

MSH6

γονίδιο) και δύο (25%) ήταν μεταλλάξεις μετατόπισης πλαισίου (μία εισαγωγή στο

MLH1

και μία διαγραφή σε

MSH2

). Άλλοι δύο ασθενείς έδειξε παραλλαγές γενετική παρερμηνεύσιμη αγνώστου κλινικής σημασίας, τόσο στο

MSH6

(c.116GA? P.Gly39Glu? Και c.1109TC? P.Leu370Ser). Πρόβλεψη χρησιμοποιώντας Polyphen-2 (https://genetics.bwh.harvard.edu/pph2/) κατατάσσονται δύο παραλλαγές ως πιθανώς παθογόνων. Επιπλέον, και οι δύο όγκοι έδειξαν απώλεια της έκφρασης του MSH6 με διατηρημένα έκφραση του MSH2, και απουσία MSI.

Στη μελέτη σύνδεσης σύγκριση της μεταλλαγμένης με μη μεταλλαγμένη περιπτώσεις, μόνο η ηλικία βρέθηκε να είναι σημαντική. Μεταλλάξεις πιο συχνά σε ασθενείς με ΕΚ διαγνωστεί πριν των 50 ετών (ή 16,67? 95% CI 1,01 έως 588,03?

σ

= 0,048). Δεν σημαντικές συσχετίσεις βρέθηκαν σχετικά με τα κριτήρια RBG, IHC, την κατάσταση MSI, ιστοπαθολογική εξέταση ή η παρουσία της σύγχρονης όγκων.

Συζήτηση

Ένα μικρό ποσοστό των ΑΕΚ θα μπορούσε να είναι το αποτέλεσμα ενός γενετικού κινδύνου κατάσταση [ ,,,0],3]. LS είναι η κύρια σύνδρομο που εμπλέκονται σε αυτές τις περιπτώσεις [5,6], αν και η ύπαρξη ενός οικογενή site-specific ΕΚ γενετική οντότητα ξεχωριστή από LS έχει ΠΡΟΤΕΙΝΟΜΕΝΑ [26]. Η τρέχουσα δεδομένα σχετικά με τον επιπολασμό της LS μεταξύ των ασθενών με ΕΚ είναι περιορισμένη και περιορίζεται στους πληθυσμούς από τις Ηνωμένες Πολιτείες [13-15]. Οι διαφορές στον επιπολασμό των γενετικών ασθενειών παρατηρούνται συχνά μεταξύ των διαφορετικών πληθυσμών, ιδίως για σύνδρομα όπου η διεισδυτικότητα είναι ατελής και άλλους γενετικούς και περιβαλλοντικούς παράγοντες θα μπορούσαν να λειτουργήσουν ως τροποποιητές διεισδυτικότητα.

Είμαστε με στόχο να προσδιοριστεί η επικράτηση της LS μεταξύ των ασθενών με ΑΕΚ στην ισπανική πληθυσμού μας, να δημιουργήσουν κατάλληλες στρατηγικές ελέγχου για τον εντοπισμό των ατόμων με γενετική προδιάθεση σε άλλους όγκους? ως εκ τούτου, να εντοπίσει τα μέλη της οικογένειας σε κίνδυνο και τη δημιουργία εξατομικευμένες συστάσεις παρακολούθησης.

Χρησιμοποιήσαμε μια μελέτη επιπολασμού χρησιμοποιώντας καθιερωμένες συστάσεις και τη συναίνεση αλγορίθμων για την ανάλυση ελέγχου και μετάλλαξης [7]. Για να μεγιστοποιηθεί η ευαισθησία ανίχνευσης μετάλλαξης μας, θεωρήθηκε κανένα όριο στην ηλικία κατά τη διάγνωση. IHC και ανάλυση MSI διεξήχθησαν για όλους τους όγκους.

MLH1

μεθυλίωση δοκιμάστηκε σε όγκους, αλλά και στο αίμα όταν απαιτείται, και μεταλλάξεων ανάλυση έγινε για τα τέσσερα κοινά MMR και

EpCAM

γονίδια.

IHC και MSI μας διαλογής ανιχνεύονται 35,3% (61/173) των όγκων με ανεπάρκεια MMR, το οποίο είναι υψηλότερο από ό, τι εκείνα 22,8% (124/543) και 25,3% (62/245) βρέθηκαν από Hampel κ.ά.

,

2006 και Μολίν κ.ά. 2013, αντίστοιχα. Βρήκαμε κανονική έκφραση IHC της MMR πρωτεϊνών μαζί με MSI σε 3/61 περιπτώσεις (4,9%). Παρόμοια αποτελέσματα ελήφθησαν με Hampel et al. 2006 (6,3%, 6/96) [13]. Επιπλέον, βρήκαμε ότι περίπου 23% (14/61) των όγκων είχαν απώλεια της έκφρασης μιας πρωτεΐνης και MMR MSI. Η αναμενόμενη ποσοστό απώλειας της έκφρασης και της MSI στη μελέτη Hampel (2006) [13] θα είναι περίπου 15%. Είναι ενδιαφέρον, βρήκαμε ότι οι δύο ανεξάρτητες μεταξύ τους ασθενείς με αυτές τις προφανείς ασυμφωνίες είχαν την ίδια μετάλλαξη στο

MSH6

(c.1367GA? P.Trp456 *), γεγονός που υποδηλώνει ότι σε ορισμένες περιπτώσεις η φύση της δεύτερης χτύπημα θα μπορούσε να είναι καθοριστική για IHC και MSI χαρακτηριστικά του όγκου (Πίνακας 5). Τα στοιχεία μας δείχνουν ότι σε ασθενείς με ΕΚ, έως και 27,9% των περιπτώσεων με ανεπάρκεια MMR μπορεί να έχουν είτε φυσιολογικά αποτελέσματα IHC ή MSI και ενισχύει την ανάγκη για την εφαρμογή προσυμπτωματικού ελέγχου με τις δύο τεχνικές.

Συγκριτική ανάλυση της MMR μας ανεπαρκή σε σχέση με θετικές περιπτώσεις έδειξε μια σημαντική συσχέτιση με LVI και TILs, όπως περιγράφεται αλλού [27,28]. Ωστόσο, δεν διαπιστώθηκε καμία συσχέτιση μεταξύ της ηλικίας κατά τη διάγνωση και την RBG ή κριτήρια AMII (Πίνακας S2 στο αρχείο S1). Αυτά τα αποτελέσματα θα μπορούσαν να εξηγηθούν από τη συχνή εμφάνιση των σωματικών MMR ανεπάρκειας σε EC [13].

MLH1

μεθυλίωση και

BRAF

μετάλλαξη αναλύσεις επιτρέπουν σε κάποιον να εντοπίσει σποραδικές μορφές της CRC μεταξύ MMR ανεπάρκεια όγκους. Βρήκαμε καμία περίπτωση μεταλλαχθεί σε

BRAF

(τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Ετσι, το γονίδιο αυτό δεν έχει σημαντικό ρόλο στην ΕΚ και δεν θα πρέπει να συμπεριληφθούν στον αλγόριθμο ελέγχου [15]. Σε αντίθεση,

MLH1

μεθυλίωση προαγωγού ήταν παρούσα στην πλειοψηφία των όγκων, μαζί με την απώλεια της έκφρασης του MLH1 (77,3%, 34/44). Το ποσοστό αυτό ήταν σημαντικά χαμηλότερο από το 94% (79/84) βρέθηκε από Hampel κ.ά., 2006 [13]. Οι διαφορές μεταξύ των δύο ομάδων πληθυσμού και διαφορετικές μεθοδολογίες για την ανάλυση μεθυλίωσης (MS-MLPA vs MS-PCR) μπορεί να συνέβαλαν σε αυτή την ανισότητα.

Συνταγματικό epimutations για το

MLH1

γονιδίων σε περιπτώσεις ΕΚ είναι πολύ σπάνιες [29]. Καμία από τις εννέα περιπτώσεις που αναλύθηκαν με μεθυλίωση του όγκου είχε

MLH1

μεθυλίωσης στο DNA του αίματος. Έτσι, ένας όγκος με

MLH1

μεθυλίωση είναι απίθανο να είναι LS-συνδέονται. Σε αντίθεση, ένας όγκος που δείχνει την απώλεια MLH1 και PMS2 με IHC, χωρίς ενδείξεις μεθυλίωσης, είναι πιθανό να συνδέεται με LS [1].

Μετά την αρχική διαλογή, επιλέξαμε 27 ασθενείς (15,61%) υπόνοια της LS. Η μέση ηλικία στην ομάδα αυτή ήταν 57,7 ετών και ασθενείς ηλικίας κάτω των 50 ήταν πιο συχνές (Πίνακας 3). Όχι άλλες παθολογικές ή κλινικές χαρακτηριστικό βρέθηκε να σχετίζεται με ύποπτες περιπτώσεις LS. Επί του παρόντος, έχουν υπάρξει προσπάθειες να εντοπιστούν παθολογικοί παράγοντες σε LS-σχετίζεται ΕΚ. Μερικοί συγγραφείς έχουν εντοπίσει τον εντοπισμό του όγκου ανέφεραν σημαντικά υψηλότερη επικράτηση των όγκων κατώτερο τμήμα της μήτρας σε ασθενείς με LS [30,31]. Westin et al. κατέληξε στο συμπέρασμα ότι ο έλεγχος για LS θα πρέπει να εξετάζεται σε περιπτώσεις με ΑΕΚ καταγωγής κατώτερο τμήμα της μήτρας [30]. Αυτή η θέση μπορεί να είναι μια πηγή των διαγνωστικών κατάπληξη, διότι μπορεί να φιλοξενήσει δύο ενδομητρίου και ενδοτραχηλικά καρκινώματα, με αποτέλεσμα τον εσφαλμένο χαρακτηρισμό του όγκου [32].

Οι μεταλλάξεις βρέθηκαν σε οκτώ ασθενείς (42,1%), με μέση ηλικία 49 ετών .

MSH6

και

MSH2

μεταλλάχθηκαν σε έξι περιπτώσεις (Πίνακας 5). Δύο περιπτώσεις με μεταλλάξεις

MSH6

(ηλικίας 56 και 61 ετών) δεν πληρούν τα κριτήρια RBG και καμία άλλη σύγχρονη όγκου ήταν παρούσα κατά τη διάγνωση. Έτσι, περίπου 25% των ασθενών με ΕΚ που συνδέονται με LS μπορεί να φαίνεται να έχουν σποραδικές όγκους και να πάει αδιάγνωστες, όταν τα κριτήρια RBG χρησιμοποιείται για τη δοκιμή μια υποψία της LS. LS που σχετίζονται με ECs συνήθως προκύπτουν από μεταλλάξεις στο

MSH6

και συμβαίνουν σε μεταγενέστερες ηλικίες από ό, τι οι μεταλλάξεις στο

MLH1

και

MSH2

[33,34]. Για τους ασθενείς με ECs LS που σχετίζονται με τον κίνδυνο της ανάπτυξης ενός δεύτερου καρκίνου μετά την αρχική διάγνωση ΕΚ εκτιμάται σε 25% σε 10 χρόνια και 50% στα 15 έτη [35,36]. Η σωρευτική κινδύνου 20 ετών από καρκίνο μετά τον καρκίνο του ενδομητρίου έχει πρόσφατα αναφερθεί με το 48% του κινδύνου για CRC? 11% για τον καρκίνο του νεφρού, της νεφρικής πυέλου, του ουρητήρα ή? 9% για καρκίνο της ουροδόχου κύστεως? και 11% για τον καρκίνο του μαστού [37]. Μεταξύ των ασθενών με LS, 50% της παρούσης ECs πριν τη διάγνωση του CRC, αν οι διαγνώσεις δεν είναι συγχρονισμένη. Ως εκ τούτου, ΕΚ μπορεί να χρησιμεύσει ως ο καρκίνος «φρουρός» για τους ασθενείς και ενδεχομένως για τα μέλη της οικογένειάς τους [38].

Στη μελέτη μας, οι μεταλλάξεις βρέθηκαν πιο συχνά σε ασθενείς με ΑΕΚ διαγνωστεί πριν από 50 ετών και δεν συσχέτιση όσον αφορά τα κριτήρια RBG, IHC ή MSI κατάσταση, ιστοπαθολογία και η παρουσία της σύγχρονης όγκων. Ωστόσο, είναι πιθανό ότι το περιορισμένο μέγεθος του δείγματος θα μπορούσε να κρύβεται οποιαδήποτε άλλη ένωση.

Υπάρχουν πολλές δυνατότητες για να εξηγήσει αυτές τις περιπτώσεις με απαρατήρητα μεταλλάξεις βλαστικής σειράς. Πρώτον, η παρουσία μεταλλάξεων στη μη δοκιμασμένη ρυθμιστικές περιοχές των γονιδίων που αναλύθηκαν? δεύτερο, ένα MMR ανεπάρκεια που προκαλείται από σωματικά διαλληλικό αδρανοποίηση? Τρίτον, η γενετική μωσαϊκισμό? τέταρτο, μεταλλάξεις βλαστικής σειράς σε άλλα γονίδια που εμπλέκονται άμεσα ή έμμεσα με το MMR λειτουργία, όπως

SETD2

[39],

POLE

και

POLD1

[40], και, τέλος, άλλες άγνωστη γενετική ή επιγενετική μηχανισμούς (Σχήμα 1).

Πολλά ιδρύματα και ομάδες πολιτικής εξετάζει το ενδεχόμενο να εφαρμόσει εξέταση για ασθενείς με LS μεταξύ των ασθενών με ΑΕΚ. έχουν διαφορετικές στρατηγικές ελέγχου για τις γυναίκες με ΕΚ έχει αποδειχθεί να είναι οικονομικά αποτελεσματική [41,42]. IHC διαλογή όλων των περιπτώσεων της ΕΚ μπορεί να εντοπίσει πιο φορείς μετάλλαξης, αλλά με σημαντικό κόστος. Η συμπερίληψη ενός τουλάχιστον συγγενή πρώτου βαθμού με ένα LS που σχετίζεται με καρκίνο σε οποιαδήποτε ηλικία μπορεί να αποδειχθεί οικονομικά αποδοτικό [42]. Παρ ‘όλα αυτά, είναι σημαντικό να τονιστεί ότι πολλαπλούς τοπικούς παράγοντες μπορεί να παρεμβαίνει στην αποτελεσματικότητα της κάθε διαδικασίας. Νέες προσεγγίσεις για να καταστεί η καθολική διαλογή των ασθενών με ΕΚ από την IHC πιο αποδοτικές είναι σε εξέλιξη. Πρόσφατα στοιχεία δείχνουν ότι ένα δύο-αντισώματος δοκιμών πάνελ για PMS2 και MSH6 είναι εξίσου αποτελεσματικό με το πάνελ τεσσάρων αντισωμάτων για την ανίχνευση ανωμαλιών MMR [43,44]. Παρατηρήσαμε ότι για να αυξηθεί η ευαισθησία στο LS διάγνωση θα πρέπει να θεωρείται μια ανάλυση της MSI σε συνδυασμό με IHC επειδή περίπου το 5% (3/61) των ασθενών με υποψία LS και το ένα όγδοο των επιβεβαιωμένων LS περιπτώσεις στη μελέτη μας είχε MSI με ανέπαφη IHC.

Ο επιπολασμός της LS βρήκαμε μεταξύ των ασθενών με ΕΚ ήταν 4,6% (8/173)? με μια έξυπνη συχνότητα 6,6% για το ισπανικό πληθυσμό. Αυτή η πρόβλεψη έγινε παρέκταση της βρέθηκε συχνότητα των μεταλλαγμένων περιπτώσεις και λαμβάνοντας υπόψη την πιθανή απουσία χαθεί περιπτώσεις. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι η παρούσα εργασία είναι μια μελέτη επιπολασμού που διεξάγονται σε ένα μόνο νοσοκομείο από την Ισπανία, ως εκ τούτου, παρέκταση των δεδομένων για το σύνολο του ισπανικού πληθυσμού μπορεί να είναι μεροληπτική.

Προηγούμενες μελέτες από το North American πληθυσμών έδειξαν ποσοστά επιπολασμού που κυμαίνονται από 1,8% έως 4,5% [13-15]. Στον πληθυσμό μας, διαπιστώσαμε ότι ο επιπολασμός του LS μεταξύ των ασθενών με ΕΚ έξι φορές υψηλότερη από την επικράτηση της LS μεταξύ των ασθενών με CRCs (4,6% έναντι 0,7%) [12].

Εν κατακλείδι, βρήκαμε ένα υψηλός επιπολασμός του LS μεταξύ των ασθενών με ΑΕΚ (04.06 με 06.06%). Σε αντίθεση με CRC, ηλικίας μόνο του ασθενούς κατά τη διάγνωση βρέθηκε να συνδέεται με LS. Συνεπής με αυτά τα αποτελέσματα, θεωρούμε ότι η καθολική διαλογή όλων των ασθενών με ΑΕΚ με IHC, MSI και

θα πρέπει να συνιστάται MLH1

ανάλυση μεθυλίωσης.

Υποστήριξη Πληροφορίες

αρχείου S1.

Συμπληρωματικές πληροφορίες.