Αφηρημένο

γλυοξαλάσης 1 είναι ένα ένζυμο απομάκρυνσης των ισχυρών πρόδρομων ουσιών σε αντιδραστικά είδη οξυγόνου σχηματισμός και εμπλέκεται στην εμφάνιση και την εξέλιξη της ανθρώπινης κακοηθειών. Γλυοξαλάσης Ι A111E πολυμορφισμός έχει προταθεί να επηρεάζουν την ενζυματική δραστηριότητα της. Η παρούσα μελέτη στοχεύει στη διερεύνηση της σύνδεσης αυτού του πολυμορφισμού με το οξειδωτικό στρες και τις επιπτώσεις της στον προστάτη εξέλιξη του καρκίνου ή την επιβίωση. Ο πολυμορφισμός ήταν γονότυπος σε ανθρώπινο διαφορετικά επιθετική και διηθητικού καρκίνου του προστάτη κυτταρικές γραμμές, σε 571 καρκίνο του προστάτη ή 588 ασθενείς καλοήθη υπερπλασία προστάτη, και 580 υγιή άτομα με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης /Περιορισμός Fragment Length πολυμορφισμό. Γλυοξαλάσης 1 δραστηριότητα, η προ-οξειδωτικό γλυοξαλάσης 1 σχετίζονται Argpyrimidine και το οξειδωτικό στρες βιοδείκτες αξιολογήθηκαν από βιοχημικές αναλύσεις. Γλυοξαλάσης 1 πολυμορφισμός σχετίστηκε με μια αύξηση στην γλυοξαλάσης 1 που σχετίζονται με προ-οξειδωτικό Argpyrimidine και οξειδωτική επίπεδα στρες και την εξέλιξη του καρκίνου. Το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο Α παρείχε μέτρια κίνδυνο καρκίνου του προστάτη, μια αξιοσημείωτη κίνδυνο εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη και ένα κατώτερο χρόνο επιβίωσης, σε σύγκριση με το αλληλόμορφο αγρίου C. Τα αποτελέσματα της διερευνητικής μελέτης μας επισημάνω ένα σημαντικό ρόλο για την γλυοξαλάσης 1 στην εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη, παρέχοντας μια επιπλέον υποψήφιο για την αξιολόγηση του κινδύνου σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη και ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για την επιβίωση. Τέλος, παρέχονται στοιχεία για τη βιολογική αληθοφάνεια των γλυοξαλάσης 1 πολυμορφισμού, είτε μόνη της είτε σε συνδυασμό με άλλα, όλα σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες έλεγχο που αντιπροσωπεύει ένα σημαντικό γεγονός στην ανάπτυξη και την εξέλιξη του προστάτη

Παράθεση:. Antognelli C , Mezzasoma L, Mearini Ε, Talesa VN (2013) γλυοξαλάσης 1-419C & gt? Μια παραλλαγή σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες: Επιπτώσεις στον καρκίνο του προστάτη εξέλιξη. PLoS ONE 8 (9): e74014. doi: 10.1371 /journal.pone.0074014

Επιμέλεια: Rui Medeiros, IPO, Inst Λιμάνι Ογκολογίας, Πορτογαλία

Ελήφθη: 24 Απριλίου 2013? Αποδεκτές: 26 του Ιουλίου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 10 Σεπτεμβρίου 2013

Copyright: © 2013 Antognelli et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Δεν υπάρχει τρέχουσα εξωτερικές πηγές χρηματοδότησης για τη μελέτη αυτή

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

γλυοξαλάσης 1 (GLO1) είναι μια γλουταθειόνη-εξαρτώμενο ένζυμο που εμπλέκεται στην σάρωσης του Methylglyoxal (MG), μία ισχυρή κυτταροτοξική α-oxoaldehyde, με μια ισχυρή ικανότητα να διασυνδέει με πρωτεϊνικές αμινομάδες, σχηματίζουν σταθερά προϊόντα που ονομάζονται τελικά προϊόντα προχωρημένης γλυκοζυλίωσης (AGEs) [1], [2]. Μεταξύ αυτών, argpyrimidine (AP) αντιπροσωπεύει ένα από τα κύρια προϊόντα που προέρχονται από MG τροποποιήσεις των πρωτεϊνών υπολειμμάτων αργινίνης [3], [4]. Τόσο MG και AGEs είναι αποτελεσματικά πρόδρομοι των δραστικών μορφών οξυγόνου (ROS) και ελεύθερης ρίζας [5], [6], έντονα εμπλέκονται στην πρόοδο του καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του προστάτη (PCA) [7] – [10]. Μια ενιαία νουκλεοτιδίου πολυμορφισμός (SNP), -419C & gt? Α (rs2736654), προκαλώντας μια Ala111Glu (A111E) υποκατάσταση, έχει εντοπιστεί στο εξόνιο 4 της GLO1 γονιδίου [11] και συνδέεται με μια μείωση της ενζυματικής δραστηριότητας GLO1 [11] – [ ,,,0],13]. GLO1 A111E πολυμορφισμός έχει μελετηθεί σε ορισμένες ανθρώπινες διαταραχές [11], [14] – [17], συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου [18], [19], ωστόσο, εξ όσων γνωρίζουμε, ο ρόλος του στην PCa δεν έχει ποτέ διερευνηθεί πριν . Στην παρούσα μελέτη, υποθέσαμε ότι πολυμορφισμός GLO1, που συνδέεται με μια μείωση της ενζυματικής δραστηριότητας GLO1, και, κατά συνέπεια, σε μια συσσώρευση GLO1 σχετίζονται προ-οξειδωτική AP, θα μπορούσε να συνδεθεί με την επαγωγή του οξειδωτικού στρες, μετρώντας έτσι ως νέο μηχανισμό στην εξέλιξη της ΣΕΣΣ. Για το σκοπό αυτό GLO1 πολυμορφισμό, AP και το οξειδωτικό βιοδείκτες στρες (ROS, ανηγμένη γλουταθειόνη, GSH, malonyldialdheyde, MDA) [20] τα επίπεδα ήταν, πρώτον, σπούδασε στην ανθρώπινη διαφορετικό τρόπο επιθετικό και διηθητικό καρκίνο κυτταρικές σειρές LNCaP και PC3 του προστάτη, δεύτερον, στα ούρα ιζήματα [21], [22] και το αίμα του προστάτη και της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη (ΚΥΠ) των ανδρών, ή υγιείς άνδρες της ίδιας ηλικίας. Δεδομένου ότι η αρχική μας αποτελέσματα επεσήμανε ένα ρόλο για GLO1 στην εξέλιξη της ΣΕΣ, παρέχοντας ένα βιολογικό υπόβαθρο για την πιθανή συσχέτιση του GLO1 A111E πολυμορφισμού με προστάτη, εμείς, εξέτασε επιπλέον σύνδεσή της με την εξέλιξη, αξιολογούνται από το στάδιο και βαθμό. Μια μελέτη για τη σύνδεση των GLO1 πολυμορφισμού και τον κίνδυνο του προστάτη και την επιβίωση σε επιλεγμένες υποομάδες ήταν επίσης πολύ καλές επιδόσεις. Εκτός αυτού, τα στοιχεία που προστάτη έχει μια σημαντική γενετική συνιστώσα είναι επιτακτική από επιδημιολογικές μελέτες γενετικών και γονιδίωμα-ευρεία ένωση [23] – [26]. Ορισμένες παραλλαγές του γονιδίου κινδύνου έχουν ταυτοποιηθεί, οι οποίες μπορεί να προδιαθέτουν τους μεταφορείς με την ανάπτυξη και την εξέλιξη της νόσου, όπως [24]? Παρ ‘όλα αυτά, έχουν αντικρουόμενα αποτελέσματα έχουν ληφθεί. Επομένως, η μελέτη των άλλων πολυμορφικών γονιδίων απαιτείται επειγόντως. Ενίσχυση της γνώσης του πώς οι γενετικοί παράγοντες επηρεάζουν προστάτη εξέλιξη μπορεί να βελτιώσει την κλινική διαχείριση αυτών σε όλο τον κόσμο νεοπλασίας. Τέλος, καθώς πιστεύουμε ότι ενιαίας αλληλικές παραλλαγές μόνες τους δεν είναι επαρκείς για να προβλεφθεί, σε πολλές περιπτώσεις, η προδιάθεση του κινδύνου προστάτη, αξιολογήσαμε GLO1 A111E πολυμορφισμό σε συνδυασμό με άλλα οξειδωτικό στρες ελέγχου που σχετίζονται με πολυμορφικών γονιδίων, ότι προηγουμένως βρέθηκε να να σχετίζεται με τον κίνδυνο της PCA σε μια μελέτη περίπτωσης /ελέγχου [27], του οποίου η ΚΥΠ και οι ομάδες του προστάτη έχει εδώ περιλαμβάνονται στα νέα διευρυμένη πληθυσμούς. Επιπλέον, η ανάλυση πραγματοποιήθηκε σε υγιείς άνδρες εθελοντές ίδιας ηλικίας.

Τα αποτελέσματα των διερευνητικών σημείο της μελέτης μας προς τα έξω ένα σημαντικό ρόλο για την GLO1 στην εξέλιξη της ΣΕΣ, παρέχοντας μια επιπλέον υποψήφιο για την αξιολόγηση του κινδύνου σε ασθενείς με προστάτη και ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για την επιβίωση.

Υλικά και Μέθοδοι

κυτταρικές γραμμές

ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη LNCaP και PC3 κυττάρων γραμμές ελήφθησαν από την American Type Culture Collection (ATCC) και συνήθως διατηρούνται στους 37 ° C σε 5% CO

2 σε RPMI 1640 συμπληρωμένο με 10% θερμοαπενεργοποιημένο FBS, 1 Χ ί-γλουταμίνη, 1 mM πυροσταφυλικό νάτριο, 1 Χ μη-βασικά αμινοξέα, 100 μονάδες /ml πενικιλλίνης και 0,1 mg /ml στρεπτομυκίνης (Invitrogen).

ασθενείς

Ένα σύνολο 1739 Καυκάσου ιταλική άνδρες είχαν εγγραφεί στη μελέτη αυτή. Από αυτούς, 1423 (PCA, BPH, υγιείς άνδρες) συμμετείχαν μεταξύ του Απριλίου 1999 και Ιουνίου 2005 από το Τμήμα Ουρολογίας (Πανεπιστήμιο της Περούτζια, Περούτζια, Ιταλία), 316 (υγιείς άνδρες) είχαν προσληφθεί από τον Ιούλιο του 2005 έως τον Ιούνιο 2013 από το ίδιο Τμήμα. Η ομάδα περίπτωση αποτελούνταν από 571 ασθενείς με μη προθεραπευμένο, ιστολογικά επαληθεύεται προστάτη, που είχαν διαγνωστεί με διορθικό υπέρηχο-καθοδηγούμενη βιοψία. Η ένδειξη για βιοψία του προστάτη ήταν είτε ένα ύποπτο εύρημα σε δακτυλική εξέταση ή αυξημένα επίπεδα του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) στον ορό, ή και τα δύο. Ασθένεια που ταξινομούνται σύμφωνα με τα κριτήρια της Παγκόσμιας Οργάνωσης Υγείας και ανέβασε σύμφωνα με την ταξινόμηση των όγκων Κόμβος Μετάσταση (TNM) και το σύστημα ταξινόμησης Gleason (σκορ Gleason). Συγκεκριμένα, στρωματοποιημένη η ανάλυση σύμφωνα με το στάδιο του όγκου (μεταφρασμένη: Τ1 /Τ2? Τοπικά προχωρημένο: Τ3 /Τ4) και ιστολογικά βαθμού (χαμηλής ποιότητας: Gleason 2-6 ή καλά διαφοροποιημένο? Μέτρια Βαθμός: Gleason 7 ή μετρίως διαφοροποιημένων? Υψηλό βαθμός: Gleason 8-10 ή ελάχιστα διαφοροποιημένη), σύμφωνα με την παθολογική ή /και εκθέσεων ραδιολογικές. Τα στοιχεία δείχνουν ότι οι όγκοι του προστάτη χαρακτηρίζεται ως αποτέλεσμα Gleason 7 διαφέρουν αρκετά ευδιάκριτα σε σχέση με την πρόγνωση με αυτούς τους όγκους με σκορ Gleason 3 + 4 = 7 θεωρούνται λιγότερο επιθετικά από ό, τι οι όγκοι με σκορ Gleason 4 + 3 = 7 [28], [29]. Δεδομένου ότι, σε προκαταρκτικές αναλύσεις, δεν βρήκαμε καμία σημαντική διαφορά σε σχέση GLO1 SNP μεταξύ των 3 + 4 ή 4 + 3 όγκου βαθμούς, αποφασίσαμε να τους συγκεντρώσει σε μια ενιαία ομάδα (Gleason score 7). Η ομάδα ελέγχου αποτελείτο από 588 ηλικία, ethnicity- και γεωγραφικά ταιριαστό άτομα με καλοήθη υπερπλασία του προστάτη, του οποίου η διάγνωση με βάση τα συμπτώματα κατώτερου ουροποιητικού συστήματος, χωρίς ουροροομετρία στοιχεία που δείχνουν αύξηση του μεγέθους του προστάτη (που λαμβάνεται με ψηλάφηση ή διορθικό υπερηχογράφημα) και στους οποίους το παρουσία του προστάτη αποκλείστηκε προσεκτικά κλινικά και ιστολογική (αρνητικές βιοψίες για την PSA & gt? 4 ng /ml, καμία ασθένεια T1a-T1b). Για σύγκριση, μια ομάδα υγιών ανδρών, συμπεριλαμβανομένης της ηλικία, ethnicity- και γεωγραφικά-συμφωνημένα άτομα, που δεν πάσχουν από οποιαδήποτε ασθένεια του προστάτη, συμπεριλήφθηκε στη μελέτη. Τα ποσοστά συμμετοχής ήταν 98%, 95% και 96% για τον προστάτη, καλοήθη υπερπλασία του προστάτη και υγιείς άνδρες, αντίστοιχα. Όλα τα άτομα που συμφώνησαν να συμμετάσχουν στη μελέτη αξιολογήθηκαν με ένα λεπτομερές ερωτηματολόγιο, το οποίο αποδείχθηκε πληροφορίες σχετικά με τον τρόπο ζωής και το οικογενειακό ιστορικό καρκίνου.

Ηθική Δήλωση

Όλα τα άτομα έδωσαν γραπτή συγκατάθεση για η μελέτη, η οποία εγκρίθηκε από την Επιτροπή Βιοηθικής του Πανεπιστημίου της Περούτζια, σύμφωνα με τις αρχές που καθορίζονται στη δήλωση του Ελσίνκι

GLO1-419C & gt?. Ένας πολυμορφισμός Γονοτυπικές

DNA από περιφερικό αίμα λευκοκύτταρα εκχυλίζεται με την NucleoSpin Blood Quick Καθαρό Kit (Macherey-Nagel). GLO1-419C & gt? A SNP ανίχνευση βασίστηκε ανάλυση Polymerase Chain Reaction-Θραύσμα πολυμορφισμού μήκους (PCR-RFLP) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [18], μετά από ενίσχυση PCR. Όλα γονοτυπική πραγματοποιήθηκε από εργαστηριακό προσωπικό γνώριζαν την κατάσταση περίπτωση ελέγχου των δειγμάτων, η οποία περιελάμβανε δείγματα ποιοτικού ελέγχου για την επικύρωση. Συμφωνία για τα δείγματα ελέγχου ποιότητας ήταν 100%.

Οξειδωτικό στρες ελέγχου που σχετίζονται με Gene πολυμορφισμοί Γονοτυπικές

Ενιαία νουκλεοτιδικών πολυμορφισμών (SNPs) για τα γονίδια ελέγχου που σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες γλουταθειόνη S-τρανσφεράσης 1 (GSTP1 ile & gt? Val), παραοξονάσης 1 (PON1-192Q & gt? Ε, PON1-55 L & gt? Μ) και κυτόχρωμα P450 17 (CYP17A1 & gt? Α2) ανιχνεύθηκαν όπως περιγράφεται από Antognelli et al. [27].

συλλογή δειγμάτων ούρων Μετά Προστάτη Μασάζ

Η συλλογή των δειγμάτων ούρων έγινε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [21], [22].

Συλλογή ορού, πλάσματος και λεμφοκύτταρα από δείγματα αίματος

ορού, πλάσματος και λεμφοκύτταρα ελήφθησαν από δείγματα αίματος που συλλέχθηκαν πριν από την πρωκτική ψηλάφηση, να αποκλειστεί το ενδεχόμενο επηρεασμού των αποτελεσμάτων οφείλεται στην χειραγώγηση του προστάτη. Ορού και πλάσματος ελήφθησαν σύμφωνα με πρότυπα πρωτόκολλα και χρησιμοποιείται για GLO1 ή μετρήσεων MDA και GSH, αντίστοιχα. Λεμφοκύτταρα απομονώθηκαν σε μέσο διαχωρισμού Lymphoprep (Axis-Shield, Όσλο, Νορβηγία) [30] και χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση των ROS.

GLO1 ενζυματική Ειδικές Δραστηριότητα

Παρασκευή εκχυλισμάτων από κυτταρικές σειρές και GLO1 ενζυματική ειδική δραστικότητα ήταν σύμφωνα με Antognelli et al. [31] και Mannervik et al. [32], αντίστοιχα. Ορός εκτίμηση GLO1 πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφεται από τους Chavan et al. [33].

Western Blot

εκχύλιση πρωτεΐνη ολόκληρου κυττάρου και στύπωμα western πραγματοποιήθηκαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [31], [34]. Μία κατάλληλη αραίωση αντι-MG-AGE ποντικού (Arg-πυριμιδίνη, ΑΡ) mAb χρησιμοποιήθηκαν (Αντισώματα-online, GmbH) και αντι-β-ακτίνης mAb (Santa Cruz Biotechnology). μέτρηση ΑΡ στο πλάσμα διεξήχθη σύμφωνα με Raj et al. [35].

Μέτρηση του οξειδωτικού στρες βιοδείκτες (ROS, GSH και MDA)

ROS και GSH εντοπίστηκαν σύμφωνα με Szabados et al. [36] ή Guzel κ.ά. [37], αντίστοιχα. MDA μετρήθηκε χρησιμοποιώντας OxiSelect ™ TBARS Assay Kit (MDA ποσοτικός προσδιορισμός) (Cell Biolabs).

Στατιστική Ανάλυση

Η ανάλυση των δεδομένων έγινε με τη χρήση του SPSS 11.0 για Windows. Περιγραφική ανάλυση περιελάμβανε καθορισμό της τυπικής απόκλισης (SD), καθώς και t-test του Student. επίπεδα ορού GLO1 ήταν log-μετασχηματιστεί ως τις υποομάδες (μεταφρασμένη, τοπικά προχωρημένο ή χαμηλής, μέσης και υψηλής ποιότητας) δεν δείχνει κανονική κατανομή των δεδομένων ανά 1 δείγμα δοκιμής-KS. Κατανομή των μεταβολιτών ήταν φυσιολογική σε κάθε μία από τις προαναφερθείσες υποομάδες. Το χ

2 δοκιμή χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση των συχνοτήτων γονοτύπου /αλληλόμορφο μεταξύ των περιπτώσεων προστάτη και BPH ή υγιή άτομα ελέγχους. αναλογία πιθανοτήτων (OR) υπολογίστηκε για την εκτίμηση του σχετικού κινδύνου για ΣΕΣΣ με την άνευ όρων ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης και προσαρμόζεται για τους πιθανούς παράγοντες που τροποποιούν, συμπεριλαμβανομένης της ηλικίας (συνεχής) και ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA, συνεχής). Αλληλόμορφων συχνότητες υπολογίστηκαν με άμεση καταμέτρηση γονίδιο. χ

2 τεστ που χρησιμοποιούνται για τη δοκιμή των Hardy-Weinberg ισορροπία (HWE). GLO1 SNP δοκιμάστηκε για τις πιθανές επιδράσεις στην γνωρίσματα ελέγχου που σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες με ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης υπό μοντέλο πρόσθετο, ενσωματώνοντας συμμεταβλητές της ηλικίας και της PSA. Επιβίωση ανάλυση επιλεγμένων περιπτώσεων προστάτη χρησιμοποιήθηκε για να ελεγχθεί η πιθανή επίδραση των γονότυπων σχετικά με τον κίνδυνο θανάτου από προστάτη. Για το σκοπό αυτό καμπύλες επιβίωσης κατασκευάσθηκαν με τη χρήση της μεθόδου Kaplan-Meier και οι διαφορές μεταξύ των ομάδων ελέγχθηκαν με τη μέθοδο log-rank. Η πολυπαραγοντική ανάλυση των πιθανών προγνωστικών παραγόντων για την επιβίωση πραγματοποιήθηκε με τη χρήση ανάλυσης παλινδρόμησης αναλογικού κινδύνου του Cox. Οι σχετικές αναλογίες κινδύνου (HR) με διαστήματα εμπιστοσύνης 95% αξιολογήθηκαν προσαρμογή για πιθανούς συγχυτικούς παράγοντες, οπότε θεωρείται ότι, εάν αλλάξει τις ώρες από την οποιαδήποτε από τις γενετικές παραλλαγές κατά τουλάχιστον 5%. χρόνος επιβίωσης υπολογίστηκε από τις ημερομηνίες του προστάτη διάγνωση μέχρι την ημερομηνία της PCA-ειδικών θανάτου, τα οποία συλλέγονται από τις βάσεις δεδομένων του Περιφερειακού Μητρώου Καρκίνου το 2010. Προσαρμογή για πολλαπλές δοκιμές πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας μεθόδους μετάθεση με βάση [38], [39]. Για όλα τα αποτελέσματα, μια τιμή p μικρότερη του 0,05 θεωρήθηκε ως στατιστικά σημαντική.

Αποτελέσματα

Χαρακτηριστικά του προστάτη υποθέσεις και BPH ή υγιείς μάρτυρες

Τα κύρια χαρακτηριστικά της Οι περιπτώσεις προστάτη και BPH ή υγιείς μάρτυρες παρουσιάζονται στον πίνακα 1. Οι περιπτώσεις και οι έλεγχοι εμφανίστηκε καλά συμφωνημένα στην ηλικία, ο Δείκτης μάζας Σώματος (ΔΜΣ), το ποτό ή το κάπνισμα κατάστασης και φυσικής δραστηριότητας (p & gt? 0,05). Ορός επίπεδα PSA ήταν σημαντικά υψηλότερα σε σύγκριση με PCa ΒΡΗ ή υγιείς άνδρες (ρ & lt? 0,0001). Όταν κατανεμημένες ανάλογα με το κλινικό στάδιο, 52,0% και 48,0% των ασθενών είχαν εντοπισμένο (T1 /T2) και τοπικά προχωρημένο (Τ3 /Τ4) νόσο, αντίστοιχα. Όταν κατανεμημένες ανάλογα με τον βαθμό του όγκου (σκορ Gleason), 44,7%, 28,2% και 27,1% των ασθενών είχαν χαμηλή (2-6), μέτρια (7) και υψηλή (8-10) βαθμού νόσο, αντίστοιχα.

Σύλλογος GLO1 πολυμορφισμός με το οξειδωτικό στρες και προστάτη εξέλιξη

για να μελετηθεί η συσχέτιση της GLO1 A111E πολυμορφισμού με το οξειδωτικό στρες, εμείς, πρώτον, σπούδασε GLO1 γονότυπους και η συγκεκριμένη δραστηριότητα ενζυματική σε δύο διαφορετικά επιθετικό και διηθητικό καρκίνο ανθρώπινες κυτταρικές σειρές προστάτη. Βρήκαμε ότι κακώς επιθετική, λιγότερο επεμβατική και εξαρτώμενων από ανδρογόνα κύτταρα LNCaP ήταν ομοζυγώτες για αλληλόμορφο C (Σχήμα 1Α) και είχαν σημαντικά μια GLO1 ειδική ενζυμική ενεργότητα (ρ & lt? 0,03) υψηλότερη (μέση ± SD, 1,47 ± 0,025 μmol /min /mg πρωτεΐνη) από εξαιρετικά επιθετική, πιο επεμβατικές και ανδρογόνο-αναίσθητη κύτταρα PC3 (μέση ± SD, 0,84 ± 0,01 μmol /min /mg πρωτεΐνης), omozygous για το Α αλληλόμορφο (Σχήμα 1Α). Από GLO1 απαιτείται για MG αποτοξίνωση που είναι, ενδοκυτταρικά, μετατρέπεται γρήγορα σε AGEs [1], μπορούμε στη συνέχεια αναλύθηκαν τα ενδοκυτταρικά επίπεδα του ΑΡ, η κύρια AGE που προέρχονται από αυθόρμητες MG προσαγωγή υπολειμμάτων αργινίνης [3], [4], [40] , διαπιστώνοντας ότι στα κύτταρα PC3, που φιλοξενούν το ισομορφή Ala του GLO1, ήταν σημαντικά (ρ & lt? 0.001) διπλασιάστηκαν σε σύγκριση με κύτταρα LNCaP, που εκφράζουν την ισομορφή Glu (Εικόνα 1Β). Τέλος, αφού ΑΡ έχει δειχθεί ότι είναι ένας αποτελεσματικός πρόδρομος των ROS και την παραγωγή ελεύθερων ριζών [5], [6], [41], αναλύσαμε τα ενδοκυτταρικά επίπεδα του οξειδωτικού βιοδεικτών στρες, βρίσκοντας μια σημαντική αύξηση της MDA και ROS ή μείωση σε GSH ενδοκυτταρικά επίπεδα σε κύτταρα PC3 σε σύγκριση με LNCaP (Σχήμα 1 C). Δεδομένου ότι αυτά

in vitro

αποτελέσματα φάνηκε να υποστηρίζει την τυχόν σύνδεση των GLO1 πολυμορφισμού με την εξέλιξη, πραγματοποιήσαμε μετρήσεις των ίδιων παραμέτρων σε δείγματα αίματος και τα κύτταρα από ιζήματα ούρα ασθενών με εντοπισμένη και τοπικά προχωρημένο ή χαμηλής, μέσης και υψηλής ποιότητας ΣΕΣ. δραστηριότητα GLO1, AP και το οξειδωτικό στρες δείκτες, τόσο στο αίμα ή τα κύτταρα από ιζήματα ούρων, ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των ασθενών προστάτη στρωματοποιημένη ανά στάδιο και βαθμό, που μεταφέρουν CC, CA και γονοτύπων ΑΑ των GLO1 πολυμορφισμού (όλα τα P & lt? 0,05) (Πίνακας 2) , αντανακλώντας την τάση που ελήφθησαν στις μελετηθεί διαφορετικά επιθετικές κυτταρικές σειρές

(Α) GLO1 -419C & gt?. Ένα ομόζυγο άγριου τύπου (CC) LNCaP και ομόζυγα μεταλλαγμένου τύπου (ΑΑ) κύτταρα PC3? (Β) Argpyrimidine (AP) ενδοκυτταρικά επίπεδα και πυκνομετρική ανάλυση από ανίχνευση με στύπωση Western. κηλίδα Western ελήφθη με τη χρήση ενός mAb ποντικού αντι-ΑΡ. Το στύπωμα απογυμνώθηκε από το δεσμευμένο Ab και την εκ νέου ανιχνεύθηκαν με αντι-β-ακτίνης ποντικού, για να επιβεβαιωθεί ίση φόρτωση. Η κηλίδα Western που δείχνεται είναι αντιπροσωπευτικά τριών ξεχωριστών πειραμάτων. (Γ) Reactive είδη οξυγόνου (ROS), μηλονοδιαλδεϋδης (MDA) και ανηγμένη γλουταθειόνη (GSH) ενδοκυτταρικά επίπεδα. Ιστογράμματα δείχνουν μέσες τιμές ± SD τριών διαφορετικών πολιτισμών καθένα από μία ελέγχθηκε εις τετραπλούν και εκφράζονται ως φορές μεταβολής ** P & lt?. 0.001, ** P & lt?. 0.001

Η

GLO1 Πολυμορφισμός και προστάτη Πρόοδος

ο Πίνακας 3 παρουσιάζει τις επιδράσεις της GLO1 πολυμορφισμού στην εξέλιξη του προστάτη αξιολογήθηκαν από κλινικό στάδιο και ιστολογικά βαθμού. Τα άτομα που φέρουν τουλάχιστον ένα αλληλόμορφο παραλλαγή Α (CA + AA) είχαν μετρίως υψηλότερο κίνδυνο να αναπτύξουν τοπική προστάτη (OR = 1,57, 95% CI = 01.17 έως 02.11, p = 0,002), ενώ ισχυρή συσχέτιση βρέθηκε με τοπικά προχωρημένο στάδιο του προστάτη (OR = 8,97, 95% CI = 5,77 – 14,02, p & lt? 0,0001), σε σύγκριση με τα άτομα με CC γονότυπο. Ομοίως, τα άτομα που φέρουν τουλάχιστον ένα αλληλόμορφο παραλλαγή Α (CA + AA) είχαν ελαφρά υψηλότερο κίνδυνο ανάπτυξης χαμηλής ποιότητας προστάτη (OR = 1,46, 95% CI = 1,07 – 1,98, p = 0,013), ενώ ισχυρή συσχέτιση βρέθηκε με μέτρια και υψηλής ποιότητας προστάτη (OR = 7,20, 95% CI = 04.28 – 12.20, p & lt? 0,0001 και OR = 10,28, 95% CI = 5,64 – 19,05, p & lt? 0,0001, αντίστοιχα)., σε σύγκριση με τα άτομα με CC γονότυπο

GLO1 πολυμορφισμός και προστάτη

κινδύνου

Μια μελέτη για τη σύνδεση των GLO1 πολυμορφισμού και τον κίνδυνο του προστάτη ήταν επίσης performed.The γονότυπος και αλληλόμορφο συχνότητες GLO1 -419C & gt? Ένα πολυμορφισμός σε περιπτώσεις προστάτη και BPH ή Οι υγιείς μάρτυρες φαίνονται στον πίνακα 4. Οι συχνότητες γονοτύπου σε ΒΡΗ και PCa ασθενείς ή σε υγιείς άνδρες ήταν σύμφωνα όλοι να HWE (ρ & gt? 0,05). Βρήκαμε ότι η επικράτηση του άγριου τύπου CC γονότυπο ήταν χαμηλότερη σε προστάτη (43,3%) σε σχέση με καλοήθη υπερπλασία του προστάτη (50,5%) ή υγιείς άνδρες (52,2%) του πληθυσμού, και ότι η συχνότητα της CA γονότυπο ήταν υψηλότερη μεταξύ της ΣΕΣΣ (46,2% ) από ό, τι μεταξύ καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη (41,7%) ή υγιείς άνδρες (40,7%) της ομάδας. Η επικράτηση του μεταλλαγμένου ΑΑ γονότυπο ήταν υψηλότερη μεταξύ της ΣΕΣΣ (10,5%) σε σύγκριση με καλοήθη υπερπλασία του προστάτη (7,8%) ή υγιείς άνδρες (7,1%) της ομάδας. Η διαφορά στην κατανομή συχνοτήτων της C και Α αλληλόμορφο μεταξύ των ασθενών του προστάτη και BPH ή υγιείς άνδρες ήταν επίσης σημαντική (p = 0,010). Αρκετές μελέτες ανέφεραν ότι οι συχνότητες του μεταλλαγμένου αλληλόμορφου Α σε διάφορους κανονικούς πληθυσμούς έδειξαν σε όλο τον κόσμο τιμές μεταξύ 27,2% και 51,7% [11], [17], [18], [42], [43]. Τα αποτελέσματά μας σε συχνότητα αλληλόμορφου στα ΚΥΠ ή υγιείς άνδρες ομάδες ήταν επίσης στην αναφερόμενη σειρά. Δεδομένου ότι δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των υγιών και ΒΡΗ άνδρες, καλοήθη υπερπλασία του προστάτη επελέγη ως ομάδα αναφοράς. Τα άτομα με CA και ΑΑ γονότυπους είχε οριακή, αλλά σημαντική αύξηση της ευαισθησίας σε προστάτη εμφάνιση, σε σύγκριση με τα άτομα με το γονότυπο CC (OR = 1,34, 95% CI = 1,06 – 1,70, p = 0,013? OR = 1,57, 95% CI = 1,01 -2.44, ρ = 0.035, αντίστοιχα). Επιπλέον, η παραλλαγή Α αλληλόμορφο συσχετίστηκε επίσης με μια μέτρια σημαντική αύξηση του κινδύνου για την PCA, σε σύγκριση με το αλληλόμορφο C (OR = 1,26, 95% CI = 1,05 – 1,51, p = 0,010).

Η

GLO1 Πολυμορφισμός και προστάτη επιβίωση σε επιλεγμένες υποομάδες από το στάδιο του όγκου και βαθμού

Δεδομένου ότι ένα σημαντικό ποσοστό των ασθενών με εντοπισμένο (60,6%, Πίνακας 3) ή χαμηλής ποιότητας (58,8%, Πίνακας 3) προστάτη περιείχε τον κίνδυνο Α αλληλόμορφο , υποθέσαμε ότι σε αυτές τις ομάδες, οι ασθενείς που φέρει το αλληλόμορφο παραλλαγής Α μπορεί να είναι σε μεγαλύτερο κίνδυνο μιας μεταγενέστερης εξέλιξης του όγκου, σε σύγκριση με τους ασθενείς που φέρουν το CC. Όταν το log-rank και την ανάλυση παλινδρόμησης του Cox, χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση της συσχέτισης ανάμεσα GLO1 πολυμορφισμού και του χρόνου επιβίωσης, τα άτομα με τους γονότυπους CA /ΑΑ παρουσίασαν χαμηλότερο χρόνο επιβίωσης από ό, τι τα άτομα με το γονότυπο CC και στις δύο εντοπισμένη ή χαμηλή υποομάδες Βαθμός ( Πίνακας 5, Εικόνα 2).

τα άτομα με τα παραλλαγή γονότυπους CA /AA έδειξαν σημαντικά χαμηλότερα ποσοστά επιβίωσης από ό, τι τα άτομα με το γονότυπο CC τόσο εντοπισμένο (Α) ή χαμηλής ποιότητας (Β) υποομάδες.

η

Επιπλέον, η πολυπαραγοντική ανάλυση χρησιμοποιείται για να οριοθετηθούν σημαντική προγνωστικούς παράγοντες για την επιβίωση, έδειξε σε δύο υποομάδες που ο κίνδυνος Α αλληλόμορφο ήταν ένα ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για την επιβίωση μετά από προσαρμογή για την ηλικία και το PSA (μεταφρασμένη προστάτη: προσαρμοσμένη HR = 2,48, 95% CI: 1,91 – 3,19? χαμηλής ποιότητας του προστάτη:. προσαρμοστούν HR = 2,35, 95% CI: 1,79 – 3,08) (Πίνακας 5)

Συνδυασμός GLO1, GSTP1, PON1-192 , PON-1 5, CYP17 πολυμορφισμοί ως προγνωστικός παράγοντας για προστάτη και σύνδεσης με το οξειδωτικό στρες

σε μια μελέτη περίπτωσης /ελέγχου του οποίου ομάδες έχει πλέον συμπεριληφθεί στην παρούσα διευρυμένη πληθυσμούς, βρήκαμε προηγουμένως ότι οι πολυμορφισμοί στο οξειδωτική το άγχος του ελέγχου που σχετίζονται με GSTP1, PON1-192, PON-1 55 και CYP17 γονίδια που σχετίζονται με τον κίνδυνο του προστάτη. Σε αυτή την εργασία, καμία συσχέτιση των ίδιων πολυμορφισμών γονίδιο βρέθηκε με την εξέλιξη του όγκου ή την επιβίωση [27]. Εδώ, πρώτον επιβεβαίωσε τα προηγούμενα αποτελέσματα που παρατηρήθηκαν ενσωμάτωσή τους με μια σύγκριση με μια ομάδα υγιών ανδρών (Πίνακας 6). Δεύτερον, δεδομένου ότι πιστεύουμε ότι ο συνδυασμός των πιο πολυμορφισμούς σε κάθε μεμονωμένη περίπτωση, σε σχέση με ένα και μόνο ένα, μπορεί να είναι μια πιο προγνωστικός παράγοντας για τη συσχέτιση με τον κίνδυνο προστάτη, αξιολογήσαμε έναν τέτοιο συνδυασμό, που περιλαμβάνει επίσης GLO1 πολυμορφισμό. Ο πίνακας 7 δείχνει ότι η ανίχνευση του GSTP1Ile /Ιλ PON1 /192RR-PON1 /55LL-CYP17A2A2-GLO1CC ή GSTP1Ile /Ιλ PON1 /192QQ-PON1 /55LM-CYP17A1A2-GLO1CA ή GSTP1Ile /Val-PON1 /192QR-PON1 /συνδυασμός 55MM-CYP17A1A1-GLO1AA γονότυπο σε ατομικό επίπεδο, θα μπορούσε να οδηγήσει στην ταυτοποίηση των ασθενών με χαμηλό, ενδιάμεσο και υψηλό κίνδυνο για την PCA, αντίστοιχα. Μια σημαντική (p & lt? 0,05) συσχέτιση του χαμηλού, μέσου και υψηλού κινδύνου γονότυπους με τα επίπεδα των ROS, GSH και MDA βιοδεικτών οξειδωτικού στρες στο αίμα και τα κύτταρα από ιζήματα ούρων παρατηρήθηκε (Πίνακας 7)

Η

Πολλαπλές συγκρίσεις

Πολλαπλές συγκρίσεις ήταν απαραίτητη πριν από μια συνολική οριστική δήλωση σχετικά με τη σημασία των ευρημάτων μας, θα μπορούσε να γίνει. Όλα τα αποτελέσματα, εκτός από εκείνα για τη σύνδεση των GLO1 πολυμορφισμού με προστάτη τον κίνδυνο, άντεξε διόρθωση για πολλαπλές δοκιμές (p & lt? 0,05).

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη αξιολογήσαμε, για πρώτη φορά, με τις γνώσεις μας, η σχέση μεταξύ GLO1 -419C & gt? ένα επίπεδα πολυμορφισμού και το οξειδωτικό στρες σε εξέλιξη προστάτη

στην πραγματικότητα, όπως πρότεινε προηγουμένως, το Α έως Ε υποκατάστασης λόγω GLO1 SNP μπορεί να καθορίσει μια διαμορφωτική τροποποίηση του. ένζυμο, οδηγώντας σε ισοένζυμο με χαμηλότερη ικανότητα αποτοξίνωσης [11] – [13]. Όπως είναι γνωστό, GLO1 είναι μια αποτελεσματική άμυνα αντιγλυκίωσης που μειώνει την συγκέντρωση των αντιδρώντων καρβονυλικών ενώσεων, όπως MG, ένας από τους πιο ισχυρούς προδρόμους καρβονυλ AGEs σχετίζονται με το άγχος [1]. Κατά συνέπεια, μία μείωση στην δράση αυτού του ενζύμου μπορεί να οδηγήσει σε συσσώρευση των AGEs και, στη συνέχεια, των ROS και τις ελεύθερες ρίζες σε ανθρώπινα κύτταρα PCa. Στην πραγματικότητα, όπως είναι γνωστό, MG-προέρχεται AGEs είναι επίσης πολύ αποτελεσματική προ-οξειδωτικών μορίων [5], [6], που συμβάλλουν σημαντικά στο οξειδωτικό στρες εμφάνιση, ένα σημαντικό γεγονός στην παθογένεση του προστάτη και την πρόοδο [7]. Πράγματι, η συσσώρευση του ΑΡ, ένα από τα πιο άφθονα MG-προερχόμενο AGEs [3], [4], έχει βρεθεί στην παρούσα μελέτη, είτε σε διαφορετικά επιθετική και διεισδυτική προστάτη κυτταρικές γραμμές μοντέλα, ή σε βιολογικά υγρά ασθενών με διαφορετικά επιθετική και επεμβατική προστάτη, όπου μια τέτοια συσσώρευση και ταίριαζε με την παρουσία ενός λιγότερο ενζύμου GLO1 λειτουργία, καθώς και μια σημαντική προϋπόθεση του οξειδωτικού στρες. Επιπλέον, MG-επαγόμενη μεταμεταφραστική προσαγωγή των επιλεγμένων πρωτεϊνών στόχων [44], [45] αναπτύσσεται ταχέως ως ένα νέο μηχανισμό επιβίωσης των καρκινικών κυττάρων σηματοδότησης, μια κατάσταση που συνήθως συνδέονται με την εξέλιξη του καρκίνου. Τα αποτελέσματά μας επίσης συσχετίζονται με εκείνα των Hermani et al. τα οποία απέδειξαν ότι η έκφραση της διαλυτής μορφής του υποδοχέα AGEs (sRAGE), η οποία αντανακλά ευαισθησία AGEs βάρος [42], ενισχύεται και συσχετίζεται ισχυρά με καρκινώματα προστάτη εξέλιξη [46]. Εκτός αυτού, η αλληλεπίδραση RAGE-AGEs πυροδοτεί την ενεργοποίηση ενός πολλαπλές οδούς σηματοδότησης αναπόσπαστα συνδεδεμένη με ογκογένεση [47] και είναι ουσιώδης για την ανάπτυξη του προστάτη [48] και την εξέλιξη [49]. Τα αποτελέσματα σχετικά με το ρόλο του GLO1 πολυμορφισμού με το οξειδωτικό στρες σε LNCaP και κυτταρικές σειρές PC3, και, πάνω απ ‘όλα, στα βιολογικά δείγματα ασθενών με προστάτη σε διαφορετική διαβάθμιση και σταδιοποίηση, πρότεινε έναν σημαντικό βιολογικό ρόλο αυτών των ενζύμων και πολυμορφισμός της στην συσχέτιση με την εξέλιξη του προστάτη. Ως εκ τούτου, ήταν λογικό να αναμένεται ότι η παρουσία της χαμηλότερης μορφής δραστηριότητα GLO1- η GLO1 Α αλληλόμορφο – θα μπορούσε να είναι προγνωστική για σοβαρές συνέπειες για την PCA κίνδυνο ενός ατόμου της εξέλιξης. Στην πραγματικότητα, βρήκαμε ότι το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο Α ανατίθενται μια δραματική κίνδυνο εξέλιξης προστάτη σε σύγκριση με το αλληλόμορφο αγρίου C, είτε όταν ΚΥΠ ή υγιείς άνδρες μάρτυρες θεωρήθηκαν ως ομάδα αναφοράς. Λιγότερο σημαντική ήταν η συσχέτιση της GLO1 πολυμορφισμού με τον κίνδυνο της ανάπτυξης του προστάτη. Στην πραγματικότητα, βρήκαμε ότι το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο Α παρείχε μέτρια κίνδυνο εμφάνισης προστάτη σε σύγκριση με το αλληλόμορφο αγρίου C, και πάλι είτε όταν ΚΥΠ ή υγιείς άνδρες μάρτυρες θεωρήθηκαν ως ομάδα αναφοράς. Ως εκ τούτου, τα αποτελέσματα μας πρότεινε έναν σημαντικό ρόλο για GLO1 στην πρόοδο και όχι στην ανάπτυξη του προστάτη. Πρόσφατα, έχει καταδειχθεί ότι και άλλες SNPs σε GLO1 locus αποτέλεσμα που πρέπει να σχετίζονται με την δραστηριότητα GLO1 [13]. Στην παρούσα διερευνητική μελέτη, αναλύσαμε την κοινή κωδικοποίηση GLO1 -419C & gt? Ένα πολυμορφισμός, λογικά αν υποτεθεί ότι μπορεί να είναι πιο πιθανό και συσχετίζεται άμεσα με τη δραστηριότητα GLO1. Στην πραγματικότητα, έχει περιγραφεί ότι η υποκατάσταση των Ala111Glu σε GLO1 λόγω της-419C & gt? A SNP, μπορεί να προκαλέσει μεταβολές διαμόρφωσης της πρωτεΐνης, είναι πολύ πιθανό να παρεμβαίνει με 3D δομή της και να επηρεάζουν ενζυμική δραστηριότητα [14]. Σίγουρα, δεν μπορούμε να αποκλείσουμε το ενδεχόμενο ότι και άλλες SNPs ή τον αριθμό των tagSNPs από GLO1 τόπο, μπορεί να επηρεάσει την ενζυματική δραστηριότητα GLO1. Ως εκ τούτου, η επιλογή των πρόσθετων SNPs είναι υποχρεωτική σε μελλοντικές μελέτες, προκειμένου να αξιολογηθεί καλύτερα η επίδραση των γενετικών παραλλαγών στην εξέλιξη του προστάτη.

Όσον αφορά την ανάλυση επιβίωσης, βρήκαμε ότι GLO1 -419 Α αλληλόμορφο σχετίζεται σημαντικά με μια δυσμενή πρόγνωση επιβίωσης σε ασθενείς με εντοπισμένο (T1 /T2) ή χαμηλής ποιότητας (GS 2-6) του προστάτη. Ως εκ τούτου, εάν επιβεβαιωθεί από πρόσθετες μελέτες, αυτός ο πολυμορφισμός, κατά προτίμηση σε συνδυασμό με άλλους, μπορεί να βοηθήσει να γίνει διάκριση μεταξύ κλινικώς σημαντική και νωχελικός καρκίνους του προστάτη και να προβλέψουμε την κλινική πορεία των πρώιμων σταδίων προστάτη. Δυστυχώς, τα πρόσθετα πολυμορφισμούς που μελετήθηκαν στην παρούσα εργασία, είτε μεμονωμένα είτε σε συνδυασμό, δεν έδειξε κάποια σημαντική συσχέτιση με την επιβίωση ή την πρόοδο PCa. Ο συνδυασμός ήταν, ωστόσο, σημαντικά στη συνεργασία με προστάτη του κινδύνου και συσχετίζεται θετικά με την κατάσταση του οξειδωτικού στρες φαίνεται από τους ασθενείς που ανήκουν στις συγκεκριμένες κατηγορίες κινδύνου, παρέχοντας έτσι τη βιολογική αληθοφάνεια. Στην πραγματικότητα, τέτοια γονίδια κωδικοποιούν πρωτεΐνες που σχετίζονται με τον έλεγχο του οξειδωτικού στρες, είναι σε θέση να αποτοξινώσει τις ελεύθερες ρίζες (ΡΟΝ 1 και GSTP1) ή να μειώσει πιθανά υποστρώματα για την παραγωγή τους (CYP17). Ομοίως με GLO1, οι πολυμορφικές παραλλαγές μπορούν να καθορίσουν διαμορφωτική τροποποιήσεις που οδηγούν σε ισοένζυμα με μια αλλοιωμένη λειτουργική ικανότητα και, κατά συνέπεια, συμβάλλουν στην έναρξη μιας σημειώνονται οξειδωτικού κατάσταση στρες όπως, πράγματι, εδώ, επισημαίνει η γενετική σύνδεση με το αίμα ή της ακράτειας των επιπέδων του οξειδωτικού στρες δεικτών.

είναι πλέον ευρέως αποδεκτό ότι οι μελέτες γενετικής σύνδεσης έχουν βοηθήσει να ενισχύσει την κατανόηση της παθογένειας των ανθρώπινων καρκίνων, συμπεριλαμβανομένου του προστάτη. Ωστόσο, για την ίδρυση της κλινική χρησιμότητα αυτών των SNPs έχουν αποδειχθεί δύσκολη, κυρίως λόγω των δυσκολιών που ανέκυψαν κατά την εκτέλεση ανάλυσης SNP (έλλειψη αναπαραγωγιμότητας, ανεπαρκής μεγέθη δείγματος, μεροληψία δημοσίευσης, το γενετικό υπόβαθρο) [50]. Μια άλλη πρόσθετη ανάλυση σχετικά με το θέμα SNPs είναι η βιολογική αξιοπιστία της γενετικής σύνδεσης. Η πιθανότητα ότι οι σημαντικές ενώσεις, ακόμη και με εντυπωσιακά χαμηλές τιμές p, είναι αλήθεια, εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από το αν η ένωση είναι βιολογικά αληθοφανής [51]. Θα ήθελα να τονίσω ότι η παρούσα εργασία, παρέχοντας βιολογική αληθοφάνεια του συνδέσμου GLO1 πολυμορφισμού με την εξέλιξη ή στο συνδυασμό όλων των αναλύθηκαν πολυμορφισμοί με τον κίνδυνο της ΣΕΣ, να εμφανιστεί μια έγκυρη συμβολή στη μελέτη της γενετικής ενώσεων. Δεδομένου ότι ένας σημαντικός αριθμός των ανεξάρτητων στατιστικών ελέγχων εφαρμόστηκε στη μελέτη, πολλαπλές συγκρίσεις ήταν απαραίτητες πριν θα μπορούσε να γίνει μια συνολική οριστική δήλωση σχετικά με τη σημασία των ευρημάτων μας. Εκτός από τα δεδομένα σχετικά με το ήδη παρατηρηθεί αδύναμη σύνδεση των GLO1 πολυμορφισμού με προστάτη τον κίνδυνο, που δεν αντέχουν διόρθωση για πολλαπλές δοκιμές, έτσι που υποδηλώνει σίγουρα περαιτέρω έρευνα, βρήκαμε αποδείξεις εναντίον της μηδενικής υπόθεσης (η

σ

αξία έμεινε εξακολουθεί να είναι σημαντικό & lt?. 0.05 μετά τη διόρθωση για πολλαπλές δοκιμές με τη χρήση μεθόδων μετάθεσης-based) για όλες τις άλλες αναλύσεις, που δείχνει την ευρωστία των αποτελεσμάτων

Εν κατακλείδι, η μελέτη μας επεσήμανε σημαντικό ρόλο για GLO1 στην εξέλιξη του προστάτη και ότι αλληλόμορφο κινδύνου GLO1 -419A μπορεί να είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για την επιβίωση. Τέλος, παρέχεται απόδειξη της βιολογικής αληθοφάνειας των εν λόγω πολυμορφισμού, είτε μόνη της είτε σε συνδυασμό με άλλα, όλα σχετίζονται με το οξειδωτικό στρες ελέγχου που, όπως είναι γνωστό, αποτελεί ένα σημαντικό γεγονός για την ανάπτυξη και την εξέλιξη του προστάτη. Δεδομένου ότι αυτή είναι η πρώτη μελέτη που εξετάζει τη σχέση μεταξύ GLO1 -419C & gt? Ένα πολυμορφισμός και PCA, απαιτείται πρόσθετη έρευνα

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστήσω την κα Roberta Φροσύνης για την άριστη τεχνική βοήθεια..