Αφηρημένο

Ιστορικό

Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να εξετάσει την έκφραση BRF2 σε ασθενείς με μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) και να διερευνήσει τη σχέση των BRF2 πρωτεΐνης με κλινικοπαθολογική παράγοντες, η αγγειογένεση του όγκου και την πρόγνωση.

Μέθοδοι

Τόσο BRF2 πρωτεΐνη και ενδοογκική μικροαγγείων εξετάστηκαν με ανοσοϊστοχημική χρώση σε 107 μη-μικροκυτταρικό ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα. Η ενδονεοπλασματική πυκνότητα m icrovessel (MVD) μετρήθηκε με απαρίθμηση CD-34 θετικά ανοσοχρωματισμένη ενδοθηλιακά κύτταρα. κηλίδα Western και RT-PCR αναλύσεις χρησιμοποιήθηκαν για να διερευνηθεί η κατάσταση έκφρασης BRF2 σε ιστούς

Αποτελέσματα

Μια ιδιαίτερα υψηλότερο επίπεδο έκφρασης BRF2 βρέθηκε σε ιστούς NSCLC σε επίπεδα πρωτεΐνης. Επιπλέον, μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι BRF2 πρωτεΐνη υπερ-έκφραση και την υψηλή MVD ήταν σημαντικά σχετίζονται με υποτροπή του όγκου. Παρά το γεγονός ότι BRF2 υπερέκφραση και υψηλής MVD έδειξε κακή 5-ετή συνολική επιβίωση (p = 0,004 και p = 0,019, αντίστοιχα), πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι μόνο BRF2 υπερέκφραση ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για την αρνητική συνολική επιβίωση (P = 0,021).

Συμπεράσματα

BRF2 είναι μια πολλά υποσχόμενη βιοδείκτης για τον εντοπισμό ατόμων με κακή προγνωστική δυνατότητες και πιθανός στόχος για αντι-αγγειογενετική θεραπεία για ασθενείς με πρώιμου σταδίου NSCLC

Παράθεση:. Lu Μ, Tian Η, Yue W, Li L, Li S, Qi L, et al. (2014) TFIIB-Σχετικές Factor 2 Πάνω έκφρασης είναι ένα πρόγνωση δείκτης για αρχικό στάδιο μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα Συναφές με όγκο αγγειογένεση. PLoS ONE 9 (2): e88032. doi: 10.1371 /journal.pone.0088032

Συντάκτης: Kapil Mehta, Πανεπιστήμιο του Τέξας MD Anderson Cancer Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 22 Αυγούστου του 2013? Δεκτές: 2, Γενάρη του 2014? Δημοσιεύθηκε: 11 Φεβρουαρίου 2014

Copyright: © 2014 Lu et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Υποστηρίζεται Έργου από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (Νο 30571844), και του Ιδρύματος Επιστήμης και Τεχνολογίας Ανάπτυξης της επαρχίας Shandong (Αρ 2009GG10002007), και το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της επαρχίας Shandong (Αρ ZR2009CM090), και το Wu Jie Ping Ίδρυμα (Νο 320.6750.12393). Χορηγοί είχε καμία ανάμειξη στο σχεδιασμό της μελέτης, στη συλλογή, ανάλυση και ερμηνεία των δεδομένων? στη συγγραφή του χειρογράφου? και στην απόφαση να υποβάλει το χειρόγραφο προς δημοσίευση. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, η συλλογή και ανάλυση δεδομένων

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ο καρκίνος του πνεύμονα είναι η πιο κοινή αιτία θανάτου από καρκίνο για τους άνδρες και τις γυναίκες σε όλο τον κόσμο. Κάθε χρόνο, υπάρχουν 1,35 εκατομμύρια νέα κρούσματα καρκίνου του πνεύμονα στον κόσμο [1]. Μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα (NSCLC) αντιπροσωπεύει περίπου το 75-80% των περιπτώσεων του καρκίνου του πνεύμονα [2] – [3]. Παρά τις προόδους στην έγκαιρη ανίχνευση, ριζική λειτουργία θεραπεία, και πολυτροπική θεραπευτικών μεθόδων τις τελευταίες δεκαετίες, το συνολικό ποσοστό επιβίωσης 5 ετών από καρκίνο του πνεύμονα είναι μόνο 15% [4]. 30-40% των ασθενών σταδίου Ι υποτροπιάζουν μετά τη χειρουργική εκτομή [5]. Επιπλέον, προοπτική, τυχαιοποιημένη, τα δεδομένα έδειξαν ότι η επικουρική χημειοθεραπεία στο στάδιο ΙΒ δεν έχει επιτύχει ένα σημαντικό όφελος επιβίωσης και ακόμη και μια καταστρεπτική επίδραση παρατηρήθηκε στο στάδιο ΙΑ [6]. Ως εκ τούτου, υπάρχει επείγουσα ανάγκη για την ταυτοποίηση νέων βιοδεικτών που θα σας βοηθήσουν να επιλέξετε τις ασθενείς με υψηλή πιθανότητα υποτροπής του καρκίνου του πνεύμονα και να παρέχει καλύτερη πρόγνωση και θεραπεία της εξατομίκευσης.

RNA πολυμεράσης (POL) III είναι υπεύθυνος για τη μεταγραφή του μικρό, λιγότερο από 300 νουκλεοτίδια, αμετάφραστη RNAs συμπεριλαμβανομένων microRNAs (miRNAs) [7] – [8]. Από την ανακάλυψή τους, miRNAs εμπλακεί στην παθογένεση διαφόρων ανθρώπινων καρκίνων, και χαρακτηριστικών έκφραση miRNA ανθρώπινων όγκων έχει ειδικές υπογραφές που συνδέονται με τη διάγνωση, σταδιοποίηση, την εξέλιξη, την πρόγνωση και την ανταπόκριση στη θεραπεία [9]. Ακριβή μεταγραφή από την RNA pol III απαιτεί TFIIIB, ενώ BRF2 (TFIIB που σχετίζονται με συντελεστή 2) είναι ένα συστατικό του TFIIIB. Η ρύθμιση των pol III είναι αναπόσπαστο μέρος των λειτουργιών ελέγχου της ανάπτυξης της RB, Ρ53 και c-myc, και η δραστηριότητα TFIIIB ρυθμίζεται αυστηρά από Maf1, χημειοπροφυλακτική παράγοντες, ογκογονίδια και καταστολείς όγκων [10] – [15]. BRF2 έχει αποδειχθεί ότι είναι εξαιρετικά υπερεκφράζεται σε μία ποικιλία καρκίνων συμπεριλαμβανομένου του στομάχου, του νεφρού και το μελάνωμα καρκίνων [16] – [17]. Πρόσφατα, Lockwood et al. ανέφεραν ότι η υπερέκφραση του BRF2 θα μπορούσαν να οδηγήσουν την έκφραση των μεταγραφημάτων RNA pol III, συμβάλλοντας στην πλακώδους καρκινώματος ογκογένεση, και BRF2 έχει ταυτοποιηθεί ως νέο γράμμωσης ειδικά ογκογονιδίου σε πνεύμονα καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων [18]. Ωστόσο, με τις γνώσεις μας, η έκφραση της BRF2 και συσχέτιση με κλινικοπαθολογική παράγοντες και την πρόγνωση σε χειρουργικά NSCLC δεν έχουν διερευνηθεί.

Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήσαμε ανοσοϊστοχημική μέθοδο για να εξετάσει την έκφραση της πρωτεΐνης BRF2 σε κλινικά δείγματα NSCLC και αναλύσαμε τις σχέσεις της έκφρασης BRF2 με μεταβλητό κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά και την πρόγνωση των ασθενών. Επιπλέον, αξιολόγησε τις ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες που επηρεάζουν τη μακροπρόθεσμη επιβίωση των ασθενών με NSCLC.

Υλικά και Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

Το πρωτόκολλο της μελέτης εγκρίθηκε από Ηθικής Διοικητικά Qilu Νοσοκομείο, και την απόκτηση δείγματος ιστού διεξήχθη σύμφωνα με τις οδηγίες του ιδρύματος. Όλα τα άτομα υπέγραψαν τη γραπτή συγκατάθεση, και αυτή η διαδικασία συναίνεσης εγκρίθηκε από Ηθικής Διοικητικά Συμβούλια των Qilu Νοσοκομείο.

Ασθενείς

Τα δείγματα ελήφθησαν από 107 ασθενείς που είχαν διαγνωστεί με NSCLC μεταξύ Ιανουάριο του 2004 και Οκτώβριο . 2006 στο Τμήμα Χειρουργικής θώρακος, Qilu Νοσοκομείο, και αντιμετωπίζεται με πνευμονική λοβεκτομή συν περιφερειακή ανατομή των λεμφαδένων.

Όλοι οι ασθενείς δεν είχαν προεγχειρητική ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία, και δεν είχε απομακρυσμένες μεταστάσεις. Τα δεδομένα σχετικά με κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά τους και την παρακολούθηση ήταν πλήρης. 46 περιπτώσεις γειτονικών δειγμάτων ιστού ελήφθησαν από περίπου 0,5 cm από το εξωτερικό άκρο των ιστών όγκου πνεύμονα, και οι άλλες 32 περιπτώσεις ελήφθησαν πάνω από 5 cm από το περιθώριο του όγκου των φυσιολογικών ιστών του πνεύμονα ως αρνητικοί μάρτυρες. Για RT-PCR και ανάλυση Western blotting, 12 ζεύγη των όγκων ιστού και των παρακείμενων δείγματα noncancerous ιστού ελήφθησαν από πνευμονική δείγματα λοβεκτομή των ασθενών που διαγιγνώσκονται με NSCLC αμέσως μετά την εγχείρηση μεταξύ της SEP 2013 και OCT 2013 στο τμήμα μας, και αποθηκεύτηκαν στους -80 ° Γ

για όλους τους ασθενείς, ιστολογικό τύπο και το βαθμό διαφοροποίησης των καρκινικών κυττάρων ήταν επαναξιολογούνται και καθορίζεται από το σύστημα ταξινόμησης της Παγκόσμιας Οργάνωσης Υγείας τροποποιήθηκε το 2004, και μετεγχειρητική παθολογική στάσης καθορίστηκε με βάση το διεθνές σύστημα σταδιοποίησης.

η ανοσοϊστοχημεία

Όλα τα δείγματα συλλέχθηκαν κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης, που καθορίζεται από το 10% φορμόλη και ενσωματωμένο σε παραφίνη. Οι ιστοί κόπηκαν ως 4 μm διαδοχικές τομές, και στη συνέχεια, χρησιμοποιώντας αποπαραφινώθηκαν ξυλόλιο και επανυδατώθηκαν μέσω μιας σειράς αιθανόλης σε νερό. ανάκτηση αντιγόνου υψηλής θερμοκρασίας διεξήχθη σε κιτρικό ρυθμιστικό για 25 λεπτά σε φούρνο μικροκυμάτων. Στη συνέχεια, η ενδογενής δραστικότητα ενζύμου υπεροξειδάσης αποκλείστηκε χρησιμοποιώντας 3% Η

2O

2 σε μεθανόλη για 20 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Οι πλάκες στη συνέχεια επωάστηκαν με αντι-BRF2 πολυκλωνικό αντίσωμα πρωτογενούς κουνελιού (Abcam) και κουνελιού αντι-CD34 μονοκλωνικό αντίσωμα (Santa Cruz Biotechnology) όλη τη νύκτα στους 4 ° C σε θάλαμο υψηλής υγρασίας, που ακολουθείται από επώαση για 30 λεπτά στους 37 ° C με βιοτινυλιωμένα δευτερογενή αντισώματα και σύμπλοκο στρεπταβιδίνης-υπεροξειδάσης. Τέλος, ένα διάλυμα 3,30-διαμινοβενζιδίνη προστέθηκε, και τα πλακίδια με αιματοξυλίνη και συναρμολογείται με ουδέτερο βάλσαμο. Για αρνητικούς ελέγχους, οι τομές επωάστηκαν με PBS αντί των πρωτογενών αντισωμάτων.

Αξιολόγηση της έκφρασης πρωτεΐνης BRF2 και πυκνότητα μικροαγγείων

Για τη χρώση BRF2, η περιοχή εντός της διαγνωστικής περιοχή βαθμολογήθηκε με τρεις ανεξάρτητους παρατηρητές και να αναπαραχθούν ημι-ποσοτική μέθοδος που θεωρείται τόσο η ένταση χρώσης (0, αρνητικά? 1, αδύναμη? 2, μέτρια και 3, ισχυρή) και το ποσοστό των θετικά χρωματισμένων κυττάρων (0, 0-5%? 1, 6-25 %? 2, 26-50%? 3, 51-75%? 4, BRF2,forward,5′-GTGAAGCTCCTGGGACTGGAT-3′,reverse, 5′-GTATTTGGCTGGCACAGAAGG-3 ‘? Τα αποτελέσματα είναι μέσες ± τυπική μέση σφάλμα (SEM) των 3 πειραμάτων επανάληψης και GAPDH χρησιμοποιήθηκε ως αναφορά μεταγραφής.

κηλίδωση Western ανάλυση

Τα φρέσκα ιστοί πλύθηκαν τρεις φορές με παγωμένο φωσφορικό άλας -buffered αλατούχο διάλυμα (PBS) και λύθηκαν επί πάγου εντός RIPA (δοκιμασία ανοσοκατακρήμνισης ραδιόφωνο) ρυθμιστικό (Cell Signaling Technology, Danvers, ΜΑ, USA) που περιέχει πλήρες κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης (Roche Applied Science, Mannheim, Germany). Πρωτεΐνη από ιστούς ή κύτταρα διαχωρίστηκαν μέσω SDS-PAGE και μεταφέρθηκαν σε μία μεμβράνη PVDF (GE Healthcare, USA). Οι μεμβράνες αποκλείστηκαν με 5% αποβουτυρωμένο γάλα σε αλατόνερο ρυθμισμένο με Tris που περιέχει 0.1% Tween-20 (TBST) επί 1,5 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου, οι μεμβράνες στη συνέχεια επωάστηκαν όλη τη νύκτα στους 4 ° C με αντι-BRF2 (1:1000, Abcam, Cambridge, ΜΑ, USA), ή αντι-GADPH (1:1000, Abcam, Cambridge, MA, USA) αντισώματα. Που ακολουθείται από αντι-υπεροξειδάσης horseradish κουνέλι συζευγμένο IgG, ένα κιτ ECL (GE Healthcare, USA) χρησιμοποιήθηκε για την ανίχνευση.

Η στατιστική ανάλυση

Chi-square test χρησιμοποιήθηκε για να ελεγχθεί η συσχέτιση μεταξύ BRF2 έκφρασης και MVD, και οι συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης BRF2 ή MVD και κλινικοπαθολογοανατομικές παράγοντες. μέθοδο Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό των καμπυλών επιβίωσης, και log-rank test χρησιμοποιήθηκε για να συγκρίνει τη διαφορά μεταξύ των επιβιώσεις των υποομάδων ασθενών. ανάλυση παλινδρόμησης Η πολυπαραγοντική Cox χρησιμοποιήθηκε για τον εντοπισμό σημαντικών ανεξάρτητων προγνωστικών παραγόντων. Οι διαφορές μεταξύ των ομάδων θεωρήθηκαν σημαντικές για την τιμή Ρ & lt? 0.05. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με το λογισμικό SPSS 13.0 στατιστικού λογισμικού (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Αποτελέσματα

έκφραση BRF2 σε NSCLC

Διαπιστώσαμε την έκφραση της BRF2 πρωτεΐνη στους φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων, τα παρακείμενα μη καρκινικούς ιστούς και ιστούς όγκου με ανοσοϊστοχημεία. Όπως φαίνεται στο Σχ. 1 A, διάχυτη πυρηνική χρώση των BRF2 πρωτεΐνης σε διάφορες εντάσεις παρατηρήθηκε σε καρκινικά κύτταρα, αλλά BRF2 ήταν μόλις και μετά βίας ανιχνεύθηκε σε κανονικούς ιστούς των πνευμόνων. Επιπλέον, κάποια χρώση παρατηρήθηκε στο κυτταρόπλασμα των καρκινικών κυττάρων. Ωστόσο, δεν παρατηρήθηκε καμία στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης της πρωτεΐνης BRF2 και τυχόν κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά των ιστών NSCLC (Ρ & gt? 0,05, Πίνακας 1). Η μέση τιμή της έκφρασης BRF2 σε 107 ιστούς NSCLC ήταν 55,14%, σημαντικά υψηλότερη από ότι σε παρακείμενους ιστούς και φυσιολογικούς ιστούς πνεύμονα (36,96% και 34,38%, αντίστοιχα, Ρ = 0,034 Πίνακας 2).

(Α ): Το πρότυπο έκφρασης του BRF2 σε ιστούς καρκίνου του πνεύμονα. (Α) έκφραση υψηλού BRF2 σε αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα. (Β): Υψηλή έκφραση BRF2 σε ιστούς πλακώδες καρκίνωμα πνεύμονα. (Γ): Αρνητικό έκφραση BRF2 σε αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα. (Δ): Αρνητικό έκφραση BRF2 σε πνεύμονα ιστούς πλακώδες καρκίνωμα. (E): Η ενδονεοπλασματική μικροαγγείων βάφτηκαν ως καφέ από το αντι-CD34 μονοκλωνικό αντίσωμα σε ιστούς καρκίνου του πνεύμονα (μεγέθυνση χ 400). (Β): Ποσοτική PCR πραγματικού χρόνου αναλύσεις BRF2 mRNA σε δώδεκα ζεύγη αντιστοιχισμένων NSCLC και noncancerous ιστούς με GAPDH ως μάρτυρας φόρτωσης και στα δύο φύλλα. (Γ): επίπεδα πρωτεΐνης έκφρασης BRF2 αξιολογήθηκαν από western αποτύπωση από ζεύγη noncancerous ιστό και NSCLC

Η

Η

Για να διερευνήσουν την κατάσταση της γονιδιακής έκφρασης BRF2 στο NSCLC, χρησιμοποιήσαμε Real. -Time PCR για να μετρηθεί η έκφραση του mRNA σε 12 ζεύγη των πρωτογενών καρκινικών όγκων και των παρακείμενων noncancerous δείγματα. Σε σύγκριση με τα παρακείμενα noncancerous δείγματα τους, 8 από 12 NSCLC είχε επάνω ρυθμισμένη έκφραση (Εικ. 1 Β και Εικ. 1 C). Σταθερά, ανάλυση στυπώματος western έδειξε ότι οι 8 περιπτώσεις είχαν επίσης υψηλότερη έκφραση πρωτεΐνης BRF2 από γειτονικούς ιστούς.

Συσχέτιση μεταξύ MVD και κλινικοπαθολογική παράγοντες NSCLC

Η ενδονεοπλασματική MVD ποσοτικοποιήθηκε μετρώντας CD34-θετικά ενδοθηλιακά κύτταρα σε καρκινικούς ιστούς (Εικ. 1Α), και η ένταση χρώσης του MVD κυμαίνονταν χονδρικά, από 12 να 118 μικροαγγείων /200 × πεδίο μεγέθυνση. Βρήκαμε ότι η MVD συσχετίστηκε σημαντικά με το βάθος εισβολή (P = 0,013), αλλά όχι με άλλους κλινικοπαθολογική παράγοντες του NSCLC (P & gt? 0,05? Πίνακας 1)

μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης

. από τους 107 ασθενείς, οι 53 (49,5%) περιπτώσεις έχασαν τη ζωή τους μέσα σε 5 χρόνια μετά τη λειτουργία, και υποτροπή του όγκου που αναπτύχθηκε κατά τη διάρκεια της παρακολούθησης σε 57 (53,3%) ασθενείς. Kaplan-Meier αναλύσεις σε σύγκριση με το τεστ log-rank χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό της επίδρασης των παραγόντων κλινικοπαθολογική στη συνολική επιβίωση και την επιβίωση ελεύθερη νόσου. Η μονοπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι η υψηλή MVD (40,0% έναντι 63,8%? P = 0,019) και της πρωτεΐνης υπερέκφραση BRF2 (39,0% vs.64.6%? P = 0,004) σημαντικά προβλέψει μειωμένη συνολική επιβίωση 5 ετών. Επιπλέον, η υψηλή MVD (65,0 έναντι 38,3%? P = 0,008) και της πρωτεΐνης υπερέκφραση BRF2 (62,7% έναντι 41,7%? P = 0,006) έδειξε υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής (Εικ. 2)? Επιπλέον, πολυπαραγοντική ανάλυση εντοπίστηκαν BRF2 υπερέκφραση (P = 0.036) και MVD (P = 0,034) ως ανεξάρτητοι προγνωστικοί παράγοντες για την επιβίωση χωρίς εξέλιξη. Ωστόσο, μόνο BRF2 υπερέκφραση διατήρησε τη σημασία της ως ανεξάρτητο προγνωστικό παράγοντα για τη συνολική όσο και η επιβίωση χωρίς εξέλιξη (P = 0,021, Πίνακας 3 και Πίνακας 4).

Η

Η

Για να διερευνήσει τη συσχέτιση των BRF2 υπερέκφραση με MVD, εξετάσαμε περαιτέρω την επιβίωση διαφορές των ασθενών στρωματοποιημένη για χαμηλή MVD και υψηλή MVD ανάλογα με την κατάσταση της έκφρασης της πρωτεΐνης BRF2. Για τους ασθενείς χωρίς BRF2 υπερέκφραση, εντοπίσαμε μια εξαιρετικά σημαντική κατώτερη συνολική επιβίωση (OS) και την ελεύθερη νόσου επιβίωση (PFS), αντίστοιχα, σε ασθενείς με υψηλή MVD σε σύγκριση με τους ασθενείς με χαμηλή MVD (P = 0,003 για το OS και P = 0,001 για PFS, Πίνακας 5). Ωστόσο, δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στην επιβίωση μεταξύ χαμηλής MVD ομάδα και υψηλής MVD ομάδα για ασθενείς με υπερέκφραση BRF2 (Ρ & gt? 0,05, Πίνακας 5). Και στατιστική ανάλυση έδειξε ότι υπήρχε σημαντικά πιο MVD σε όγκους με BRF2 πρωτεϊνών υψηλής έκφρασης από ότι σε άτομα με BRF2 πρωτεΐνη χαμηλή έκφραση (P & lt? 0,001, Mann-Whitney U test? Εικ. 3).

Mann- WhitneyUtest έδειξαν ότι οι όγκοι με BRF2 πρωτεϊνών υψηλής έκφρασης έδειξαν σημαντικά υψηλότερο εντός του όγκου MVD από τους όγκους με BRF2 πρωτεΐνη χαμηλή έκφραση (P & lt? 0.001).

η

Έχουμε αναλύσει περαιτέρω την προγνωστική σημασία της BRF2 πρωτεΐνης σε επιλεκτική υποομάδες ασθενών κατανεμημένες ανάλογα με τον τύπο ιστολογία του NSCLC. Μονοπαραγοντική ανάλυση έδειξε ότι το συνολικό ποσοστό επιβίωσης 5-χρόνια των ασθενών με πρωτεΐνη BRF2 υψηλή έκφραση ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη των υπόλοιπων ασθενών μεταξύ καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων, και βρήκαμε επίσης μια τέτοια τάση σε αδενοκαρκίνωμα, παρά τη στατιστική ανάλυση δεν έχει νόημα ? (Ρ = 0,007 και Ρ = 0,130, respectly? Σχ. 4)

(α): καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων.. (Β):. Αδενοκαρκίνωμα

Η

Συζήτηση

Η ικανότητα να πολλαπλασιάζονται ανεξέλεγκτα είναι το κυρίαρχο χαρακτηριστικό πολλών τύπων καρκινικών κυττάρων. Αξιολόγηση των μοριακών προγνωστικών παραγόντων είναι ένας σημαντικός τομέας της έρευνας για τον καρκίνο. BRF2 πρωτεΐνη κωδικοποιείται από ένα γονίδιο που βρίσκεται στο χρωμόσωμα 8p12 [22]. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι BRF2 υπερεκφράζεται σε διάφορους τύπους καρκίνου [23] και προτείνουν την ογκογόνο ρόλο του BRF2. Ωστόσο, λίγες μελέτες έχουν διερευνήσει την έκφραση και τη σημασία της BRF2 σε NSCLC, ειδικά για την πρόγνωση του NSCLC.

Σε αυτή τη μελέτη, τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης BRF2 και τα χαρακτηριστικά του κλινικοπαθολογοανατομικών NSCLC (p & gt? 0,05). Ωστόσο, η υψηλή MVD συσχετίστηκε σημαντικά με το καθεστώς Τ στο NSCLC, αλλά δεν συνδέονται με την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, η ιστολογία και τη διαφοροποίηση. Σε κάποιο βαθμό, Τ στάδιο είναι μια κρίσιμη διαδικασία της ανάπτυξης του όγκου, και η διαφορά στη συσχέτιση μεταξύ της MVD και κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά μπορεί να αντανακλά το γεγονός ότι η μικροαγγειακή πυκνότητα είναι μια σημαντική πτυχή της ανάπτυξης του όγκου. Ωστόσο, βρήκαμε καμία σημαντική διαφορά στην έκφραση BRF2 μεταξύ αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα και πνευμονικό καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων με ανοσοϊστοχημική χρώση.

Αξίζει να σημειωθεί ότι, τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι BRF2 πρωτεΐνης υπερέκφραση ήταν κοινό στις αρχές ιστούς NSCLC και σχετίζεται σημαντικά με αυξημένη αγγειογενετική δραστηριότητα μετράται ως ενδοογκική MVD, υποδηλώνοντας ότι BRF2 παίζει κρίσιμο ρόλο στην ογκογένεση NSCLC από την επαγωγή ή /και προώθηση της αγγειογένεσης του όγκου. Αν και έχουν πολλαπλούς αυξητικούς παράγοντες έχει δειχθεί ότι ρυθμίζουν την αγγειογένεση και την αγγειακή ανάπτυξη, λίγα είναι γνωστά για το συγκρότημα μηχανισμού ρύθμισης της γονιδιακής έκφρασης και της μετάφρασης [24]. Τα αποτελέσματά μας υπογραμμίζουν το δυναμικό ρόλο της BRF2 στην αγγειογένεση των όγκων.

ανάλυση επιβίωσης μας απέδειξαν ότι η υψηλή MVD και BRF2 πρωτεΐνης υπερέκφραση σημαντικά προβλέψει μειωμένη συνολική επιβίωση 5 ετών και υψηλότερο ποσοστό υποτροπής. Περαιτέρω ανάλυση με τη χρήση του μοντέλου παλινδρόμησης Cox επιβεβαίωσε ότι η έκφραση BRF2 και MVD ήταν ανεξάρτητοι παράγοντες στην πρόβλεψη της επιβίωσης χωρίς εξέλιξη για τους ασθενείς με NSCLC, γεγονός που υποδηλώνει ότι BRF2 πρωτεΐνες και MVD μπορεί να αποτελούν πιθανές προγνωστικούς παράγοντες για την υποτροπή των ασθενών με NSCLC σε πρώιμα στάδια. Ωστόσο, στην πολυπαραγοντική ανάλυση, μόνο BRF2 έκφραση θα μπορούσε ανεξάρτητα και σημαντικά προβλέψει τη συνολική επιβίωση 5 ετών, παρά τη διαπίστωση ότι η υψηλή MVD συσχετίστηκε σημαντικά με την επανεμφάνιση του όγκου. Τα στοιχεία μας έδειξαν ότι BRF2 υπερέκφραση είχε μια συντριπτική επίδραση στην OS και PFS, ενώ MVD έδειξαν σημαντική επίδραση στο λειτουργικό σύστημα και PFS μόνο σε ασθενείς χωρίς BRF2 υπερέκφραση.

Στο σύνολό τους, τα δεδομένα μας υποστηρίζουν την υπόθεση ότι οι BRF2 πρωτεΐνη υπερ-έκφραση είναι κοινή σε πρώιμο στάδιο NSCLC και συσχετίστηκε σημαντικά με την αγγειογένεση του όγκου και της υποτροπής. Επιπλέον, BRF2 υπερέκφραση είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για τους ασθενείς με NSCLC.