Πρότυπο κύτταρα CPE θα μπορούσε να χαρακτηρίζεται από συμβάσεις και σφαιρικές μορφές, αποκόλληση μία από την άλλη, αν όχι την απόσπαση από την πλάκα καλλιέργειας ιστού. Mammosphere καλλιέργειες από την κυτταρική σειρά σας 4Τ1 αναγνωρίστηκαν και πλήττονται από ογκολυτικό HSV1 GFP. Ισχυρή πράσινο φθορισμό λόγω συστατική έκφραση GFP βρέθηκε σε αρκετές κύτταρα των σφαιρών συγκριτικά με την ψευδο μολυσμένο ελέγχου. Συλλογικά, αυτά τα δεδομένα δεικνύουν ότι και οι δύο 4Τ1 μονοστοιβάδες και mammospheres μπορεί να δεχθεί επίθεση από ογκολυτική HSV-1 GFP.

ALDHbr και κυττάρων ALDHlo μπορούσε να μολυνθεί ομοιόμορφα από 4Τ1 κύτταρα χρωματισμένα με aldefluor υπόστρωμα εμφάνισε λαμπρό πράσινο φθορισμό, που δεν θα μπορούσε ίσως να διακρίνεται από την έκφραση GFP σε κύτταρα μολυσμένα με HSV1 GFP. Ωστόσο, το φυσικό φθορισμό γρήγορα εξαφανίστηκε από τη θέση σταθερά κύτταρα ALDHbr επειδή δεν ήταν στο ρυθμιστικό aldefluor, η οποία μπλοκάρει ABC μεταφορείς και διατήρησε το φθορίζον υπόστρωμα στα κύτταρα, αλλά ήταν ως εναλλακτική λύση στη μέθοδο και θήκη υγρό όταν επικαλυμμένα με συνταγές.

Για το λόγο αυτό, τα διαχωρισμένα κύτταρα ALDHbr ήταν φθορισμού δωρεάν και HSV1 drived GFP φράση θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της μολυσματικότητας σε κύτταρα ALDHbr. Σταθερή κύτταρα ALDHbr και ALDHlo μολύνθηκαν με HSV1 GFP σε διαφορετικές ΜΟΙ για διαφορετικούς χρόνους. Όπως φαίνεται στην Εικόνα 4C, μετά από 10 ώρες, GFP όρος είχε εμφανιστεί σε δύο υποπληθυσμούς μολυσμένα με HSV1 GFP σε ΜΟΙ 0. Μετά μόλυνσης για 34 ώρες, όταν η διαφοροποίηση και την ανάπτυξη των κυττάρων είχε αποκαλυφθεί, η έκφραση GFP ήταν περισσότερο εμφανής και στις δύο υποπληθυσμούς. Επιπλέον, η αποτελεσματικότητα GFP ασθένεια HSV-1 και στα δύο κύτταρα ALDHlo και ALDHbr ήταν συναφή.

Για να βοηθήσει να αναλύσει την συνέπεια της ογκολυτικού αναστολέα κινάσης Syk σε 4Τ1 κύτταρα ALDHbr, κύτταρα 4Τ1 αντιμετωπίστηκαν με δοξορουβικίνη ή HSV1 hGM CSF για 24 ώρες και ως εκ τούτου εξετάζονται για αλλαγές στην αναλογία των κυττάρων ALDHbr με κυτταρομετρία ροής. Λόγω της φθορισμό μεταξύ του ενεργοποιημένου υποστρώματος aldefluor και έκφραση GFP με κυτταρομετρία ροής, ογκολυτικοί HSV1 hGMCSF χρησιμοποιήθηκε αντ ‘αυτού. Υπήρξε μια 3. 5-πλάσια αύξηση στην ποσότητα των κυττάρων ALDHbr μετά από θεραπεία με δοξορουβικίνη έναντι της αντίστοιχης ελέγχου. Παρ ‘όλα αυτά, η παρουσία του HSV1 hGM CSF στο κανάλι δεν μεταβάλλει κάπως το ποσοστό των κυττάρων ALDHbr στα κύτταρα 4Τ1 σε σύγκριση με τον έλεγχο.

Η συχνότητα των κυττάρων του όγκου ALDHbr αξιολογήθηκε in vivo μετά από διάφορες θεραπείες, να προσδιοριστεί εάν τα κύτταρα του όγκου ALDHbr εμφανίζεται επίσης αντίσταση σε δοξορουβικίνη χημειοθεραπεία ή ευαισθησία σε HSV-1 hGM CSF in vivo. Ασυμβίβαστη με την in vitro πληροφορίες, δεν υπήρχε περισσότερο κλιμάκωση της συχνότητας οίδημα κύτταρο ALDHbr in vivo μετά την μόνη θεραπεία χημειοθεραπείας, η οποία ήταν παρόμοια με, ή ακόμα και ελαφρώς μικρότερη από εκείνες των όγκων σε αγωγή με φορέα.

Από την άλλη πλευρά, ογκολυτικοί HSV-1 hGM CSF θεραπεία απλού παράγοντα ως αποτέλεσμα τη σημαντική μείωση των πληροφοριών των καρκινικών κυττάρων ALDHbr, και ο όγκος των καρκινικών κυττάρων ALDHbr επίσης μειώθηκε σημαντικά σε όγκους που έλαβαν θεραπεία με δοξορουβικίνη που ακολουθείται στενά από HSV1 hGM ΚΠΣ έναντι του οχήματος ή δοξορουβικίνη και μόνο. ​​