Αφηρημένο

Μέχρι σήμερα, κακοήθη φαιοχρωμοκυττώματα και παραγαγγλιωμάτων (PHEOs /pGLS) δεν μπορεί να θεραπευτεί αποτελεσματικά και ως εκ τούτου μυθιστόρημα στρατηγικές θεραπείας χρειάζονται επειγόντως. Η λοβαστατίνη έχει δειχθεί ότι επάγει αποτελεσματικά απόπτωση σε κύτταρα Pheo ποντικού (MPC) και οι πιο επιθετική καρκινικά κύτταρα ποντικού που προέρχονται από ιστούς (ΜΤΤ), η οποία συνοδεύεται από μειωμένη φωσφορυλίωση που ενεργοποιείται από μιτογόνο κινάσης (ΜΑΡΚ) παίκτες οδό. Το μονοπάτι ΜΑΡΚ παίζει ένα ρόλο σε πολυάριθμες επιθετικούς όγκους και έχει συσχετιστεί με μια υποομάδα PHEOs /pGLS, συμπεριλαμβανομένων

K-RAS-

,

αναδρομική έναρξη

, και

NF1

-mutated όγκων. Στόχος μας ήταν να διαπιστωθεί κατά πόσον σηματοδότηση ΜΑΡΚ μπορεί επίσης να παίζουν ρόλο στην επιθετική, ηλεκτρική αφυδρογονάση (SDH) Β μετάλλαξη που προέρχεται PHEOs /pGLS. Έκφραση προφίλ και ανάλυση κηλίδας Western έδειξε ότι συγκεκριμένες πτυχές της ΜΑΡΚ σηματοδότησης δραστηριοποιούνται σε SDHB PHEOs /pGLS, υποδηλώνοντας ότι η αναστολή με κατεργασία με στατίνες μπορεί να είναι ευεργετική. Επιπλέον, με στόχο να εκτιμηθεί κατά πόσον η αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση της λοβαστατίνης επί MPC και ΜΤΤ διέφερε από εκείνη που εξασκείται από φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, ατορβαστατίνη, πραβαστατίνη, ροσουβαστατίνη ή. Σιμβαστατίνη και φλουβαστατίνη μειωμένο πολλαπλασιασμό των κυττάρων πιο αποτελεσματικά και τα πιο επιθετικά κύτταρα ΜΤΤ εμφανίστηκε πιο ευαίσθητα από την άποψη αυτή. Αναστολή της MAPK1 και 3 φωσφορυλίωση μετά από θεραπεία με φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, λοβαστατίνη και επιβεβαιώθηκε με κηλίδα western. Αυξημένα επίπεδα CASP-3 και PARP διάσπαση επιβεβαιώνεται διέγερση απόπτωσης μετά τη θεραπεία. Σε μία συγκέντρωση αρκετά χαμηλή να μην επηρεάζουν τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, αυθόρμητη μετανάστευση του MPC και ΜΤΤ ανεστάλη σημαντικά μέσα σε 24 ώρες της θεραπείας. Εν κατακλείδι, λιπόφιλες στατίνες μπορεί να παρουσιάσει μια πολλά υποσχόμενη θεραπευτική επιλογή για την αντιμετώπιση της επιθετικής ανθρώπινης παραγαγγλιωμάτων από την επαγωγή της απόπτωσης και την παρεμπόδιση εξάπλωσης του όγκου

Παράθεση:. Fliedner SMJ, Engel Τ, Lendvai ΝΚ, Shankavaram U, Nolting S, Wesley R , et al. (2014) Αντικαρκινική Δυναμικό της ΜΑΡΚ Διαδρομή Αναστολή στην παραγαγγλιώματα-Επίδραση διάφορες στατίνες για ποντίκι Φαιοχρωμοκύττωμα κύτταρα. PLoS ONE 9 (5): e97712. doi: 10.1371 /journal.pone.0097712

Επιμέλεια: Benjamin Edward Rich, Dana-Farber Cancer Institute, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 10 του Γενάρη 2014? Αποδεκτές: 22 του Απρίλη 2014? Δημοσιεύθηκε: 20 Μάη του 2014

Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης, χωρίς όλα τα πνευματικά δικαιώματα, και δεν μπορεί να αναπαραχθεί ελεύθερα, διανεμηθεί, να μεταδοθεί, τροποποιηθεί, χτισμένο πάνω, ή ειδάλλως να χρησιμοποιηθεί από οποιονδήποτε για οποιονδήποτε νόμιμο λόγο. Το έργο γίνεται διαθέσιμα υπό την Creative Commons CC0 αφοσίωση δημόσιο τομέα

Χρηματοδότηση:. Η χρηματοδότηση παρέχεται από τις Τειχών Ερευνητικά Προγράμματα της Eunice Kennedy Shriver Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας του Παιδιού και Ανθρώπινης Ανάπτυξης και το Εθνικό Genome Research Institute του Ανθρώπου , National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA και το 1ο Τμήμα Ιατρικής, Πανεπιστήμιο του Ιατρικού Κέντρου Σλέσβιχ-Χολστάιν, Lübeck, Γερμανία. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Πρόσφατα, λοβαστατίνη έχει προταθεί ως πολλά υποσχόμενη δυνητική θεραπευτική επιλογή για την αντιμετώπιση RET, NF1, και TMEM127 μετάλλαξη που προέρχεται επινεφριδίων και εξωεπινεφριδικό όγκοι των κατεχολαμινών παράγει χρωμιόφιλα κυττάρων (φαιοχρωμοκυττωμάτων (PHEOs) και παραγαγγλιωμάτων (pGLS), αντίστοιχα ) [1]. Ωστόσο, ο κίνδυνος για μεταστατική νόσο σε αυτούς τους όγκους είναι σχετικά χαμηλή και εκτομή του όγκου είναι έτσι σχεδόν πάντα θεραπευτική. Αντίθετα, ο κίνδυνος για κακοήθη PHEOs /pGLS είναι ιδιαίτερα υψηλό στην περίπτωση του ηλεκτρικού αφυδρογονάσης Β (SDHB) γονιδιακών μεταλλάξεων [2], [3], και νέες στρατηγικές θεραπείας χρειάζονται επειγόντως για την κατάσταση αυτή.

Μια πρόσφατη New England Journal of Medicine άρθρου ανέφεραν μειωμένη θνησιμότητα σχετιζόμενη με τον καρκίνο σε ασθενείς που είχαν συνταγογραφηθεί στατίνες πριν από τη διάγνωση [4]. Σε συμφωνία με αυτό, πολυάριθμες

in vitro

και

in vivo μελέτες έδειξαν

αντικαρκινικές επιδράσεις της λοβαστατίνης και άλλες στατίνες μόνο του ή ως μέρος ενός συνδυασμένου θεραπευτικό σχήμα για την επιθετική όγκους (που επισκοπείται στο [ ,,,0],5] – [7]). Σε υψηλότερες συγκεντρώσεις από αυτές που απαιτούνται για τη μείωση των επιπέδων της χοληστερόλης, έχουν στατίνες έχει αποδειχθεί ότι αναστέλλουν την οδό μεβαλονικό τόσο σοβαρά ώστε αναστέλλουν τη σύνθεση των ισοπρενοειδή, τα οποία δρουν ως αναγκαία άγκυρες μεμβράνης για τη σωστή λειτουργία ορισμένων πρωτεϊνών [8]. Οι αντικαρκινικές επιδράσεις των στατινών έχουν κυρίως συσχετιστεί με αναστολή της Ras -πρενυλίωσης (δηλαδή φαρνεζυλίωση ή γερανυλογερανυλίωση), η οποία, μεταξύ άλλων συνεπειών, διαταράσσει την ενεργοποίηση των κατάντη παίκτες στην οδό ΜΑΡΚ [9], [10]. Πάνω-ενεργοποίηση της οδού μεβαλονικό οξύ, συμπεριλαμβανομένων των ΜΑΡΚ σηματοδότησης έχει δειχθεί να είναι επαρκής για τον μετασχηματισμό των κυττάρων [11]. Η υπερβολική σηματοδότηση ΜΑΡΚ υποστηρίζει την αναστολή της απόπτωσης, τον πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση και είναι ένα βασικό χαρακτηριστικό πολλών τύπων καρκίνου (που συνοψίζονται στο [12], [13]). Σε περίπτωση PHEOs /pGLS, αυξημένη δραστικότητα ΜΑΡΚ οδός είναι εμφανής σε

H-RAS

,

K-RAS

,

TMEM127

,

RET

,

NF1

, και, ενδεχομένως,

MAX

όγκους μετάλλαξη σχετίζεται [14] – [22]

για τις γνώσεις μας, προς το παρόν χωρίς ενδείξεις για αυξημένη σηματοδότηση ΜΑΡΚ στην SDHB προέλευσης. pGLS έχει παρουσιαστεί. Σε κύτταρα από ασθενείς με Cowden-όπως σύνδρομο και SDHB ή παραλλαγές του γονιδίου D, ωστόσο, αυξημένα επίπεδα ΜΑΡΚ 1 και 3 φωσφορυλίωσης έχει παρατηρηθεί [23]. Με την παρουσία ενός ενεργού οδού ΜΑΡΚ, στατίνες μπορεί να παρέχει ένα πολλά υποσχόμενη θεραπεία ή επιλογή συν-θεραπείας για ανίατων κακοήθη pGLS.

Η έκταση των αντικαρκινικές επιδράσεις έχει δειχθεί ότι ποικίλει ανάλογα με το μοντέλο και τον τύπο της στατίνης χρησιμοποιούνται [24] – [30]. Έτσι, αξιολογείται η οποία από τα επτά διαθέσιμα σήμερα οι στατίνες μπορεί να είναι πιο αποτελεσματική για τη θεραπεία Pheo /PGL.

Υλικά και Μέθοδοι

Η φλουβαστατίνη, πραβαστατίνη, λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη και ελήφθησαν όλα από την Cayman Chemicals (Ann Arbor, MI)? ατορβαστατίνη και rosuvastatin ελήφθησαν από Enzo Life Sciences, Inc. (Farmingdale, NY).

Κυτταρική καλλιέργεια

όγκου Ποντίκι ιστών που προέρχονται από κύτταρα (ΜΤΤ) έχουν αναπτυχθεί πρόσφατα στο εργαστήριο μας [31 ]. Όλες οι μελέτες σε ζώα είναι απαραίτητες για την ανάπτυξη και τον χαρακτηρισμό των κυττάρων ΜΤΤ διεξήχθησαν σύμφωνα με τις αρχές και τις διαδικασίες που περιγράφονται στο Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας Οδηγός για τη Φροντίδα και Χρήση των Ζώων, και εγκρίθηκαν από το

Eunice Kennedy Shriver

Εθνική Ινστιτούτο Υγείας του Παιδιού και Ανθρώπινης Ανάπτυξης Φροντίδα ζώων και Επιτροπής Χρήση (αριθμός πρωτοκόλλου ASP # 06-028). κύτταρα ΜΤΤ είναι ιδιοκτησία του ΝΙΗ. κύτταρα φαιοχρωμοκυττώματος ποντικού (MPC 4 /30PRR) ήταν ένα γενναιόδωρο δώρο από τον Dr. Tischler, Tufts, Βοστώνη. Τα κύτταρα διατηρήθηκαν σε ϋΜΕΜ (Gibco, Life Technologies, Grand Island, ΝΥ), συμπληρωμένο με 10% θερμο-απενεργοποιημένο ορό αλόγου (Hyclone Logan, UT), 5% ορό εμβρύου μόσχου (Gibco), HEPES (Gibco), και πενικιλλίνη ( 10.000 μονάδες /ml) /στρεπτομυκίνη (100 000 μg /ml) (Gibco) σε υγροποιημένη ατμόσφαιρα που περιέχει 5% CO

2 στους 37 ° C. Το μέσο αλλάχθηκε κάθε δεύτερη ημέρα και τα κύτταρα ανακαλλιεργήθηκαν όταν επιτεύχθηκε 80-90% συρροή. Όλες οι στατίνες συγκρίθηκαν με την κατάλληλη συγκέντρωση του οχήματος (DMSO). Όταν στατίνες συνενώθηκαν για να αξιολογήσει τις πιθανές επιδράσεις προσθέτου, 25 μΜ 2 διαφορετικών στατινών συγκρίθηκαν με 50 μΜ από κάθε ένα από τα επιμέρους στατινών.

δοκιμασίες πολλαπλασιασμού

Τα κύτταρα σπάρθηκαν σε επικαλυμμένες κολλαγόνου 96- φρεατίων (BD Biosciences, San Jose, CA) εις 10.000 κύτταρα ανά φρεάτιο και αφέθηκαν να προσκολληθούν για 24 ώρες. Τότε μέσον ανταλλάχθηκε με συγκεντρώσεις 6.25, 12.5, 25, και 50 μΜ των διαφορετικών στατινών, διαλύθηκε σε συμπληρωμένο μέσο. Μετά από 0, 24, 48, και 72 ώρες της θεραπείας, τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων εκτιμήθηκε με την Πολλαπλασιασμού Κυττάρου Kit II (ΧΤΤ) (Roche εφαρμοσμένη επιστήμη? Indianapolis, ΙΝ) σύμφωνα με το εγχειρίδιο του προϊόντος. Μετά από τέσσερις ώρες επώασης, οι πλάκες μετρήθηκαν σε 490 nm με μήκος κύματος αναφοράς 650 nm σε έναν αναγνώστη μικροπλάκας (Victor

3 1420 μετρητής multilabel, Perkin Elmer, Waltham, ΜΑ). Όλα τα πειράματα διεξήχθησαν εις τετραπλούν και επαναλήφθηκαν τουλάχιστον δύο φορές.

δοκιμασίες Αυθόρμητες κυτταρική μετανάστευση

Τα κύτταρα σπάρθηκαν σε 60000 κύτταρα ανά φρεάτιο για την αξιολόγηση αυθόρμητη μετανάστευση σε μια συσκευή xCELLigence DP (Roche Diagnostics, Mannheim , Γερμανία), όπως αναφέρθηκε προηγουμένως [32]. Η αυθόρμητη μετανάστευση καταγράφηκε για 24 ώρες υπό την παρουσία 5 μΜ φλουβαστατίνη, λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη και μόνο, ή σε συνδυασμό με 100 μΜ trans, trans φαρνεσόλη (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, ΜΟ, USA).

οδός ΜΑΡΚ γονίδιο-εμπλουτισμού σε SDHB pGLS

Τα δεδομένα έκφρασης εξήχθη από προηγουμένως παρουσιάζονται τα δεδομένα μικροσυστοιχιών σε 45 δείγματα pseudohypoxic PHEOs /pGLS, συμπεριλαμβανομένων 18 SDHB, 8 SDHD κεφαλής και του τραχήλου (ΗΝ), 6 SDHD κοιλιακή και θωρακική (AT), και 13 δείγματα VHL σε σύγκριση με το φυσιολογικό μυελό των επινεφριδίων [33]. Όπως αναφέρθηκε, η ανάλυση πρόβλεψη των μικροσυστοιχιών εντοπίζονται 6937 γονίδια ως χαρακτηριστικό για μια από τις διαφορετικές υποομάδες της pseudohypoxic PHEOs /pGLS. Αυτά χαρτογραφήθηκαν με μια λίστα 254 ΜΑΡΚ γονίδια οδού (Κιότο Εγκυκλοπαίδεια των γονιδίων και γονιδιωμάτων Pathway). Κυρίαρχη υπερ-έκφραση σε δείγματα SDHB σε σύγκριση με το φυσιολογικό μυελό επιβεβαιώθηκε με ANOVA και διαστήματα βασίστηκαν στο φάσμα στατιστική studentized, η μέθοδος «Τίμιος Σημαντική Διαφορά» του Tukey.

Δήλωση Ηθικής

συλλογή ιστού που εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του

Eunice Kennedy Shriver

Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας του Παιδιού και Ανθρώπινης Ανάπτυξης. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από κάθε ασθενή.

Ανθρώπινο όγκου ιστού

Pheo /PGL ιστός καταψύχεται αμέσως μετά την εκτομή. ενημέρωση των ασθενών και του όγκου για κάθε δείγμα παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Τα κατεψυγμένα δείγματα ομογενοποιήθηκαν σε πάγο σε Αντιδραστήριο Tissue Protein Extraction (Thermo Fisher Scientific Inc., Lafayette, CO, USA) με αναστολέα 0,1% φωσφατάση (Cell Signaling Technology Inc, Danvers , MA, USA) και έναν αναστολέα πρωτεάσης Complete Mini ταμπλέτα ανά 10 ml διαλύματος (Roche Applied Science, Indianapolis, ΙΝ, USA). Τα ομογενοποιήματα φυγοκεντρήθηκαν στις 10.000 χ g για 5 λεπτά στους 4 ° C. Το υπερκείμενο χρησιμοποιήθηκε ως εκχύλισμα πρωτεΐνης.

Η

συγκομιδής κυττάρων

Τα κύτταρα σπάρθηκαν σε πλάκες επικαλυμμένες με κολλαγόνο [34] σε 600.000 κύτταρα /ml και αφέθηκαν να προσκολληθούν για ένα ελάχιστο 18 h πριν μέσα αλλάχθηκαν σε λύσεις στατίνη 25 μΜ ή ελέγχου DMSO. λύσεις θεραπείας ανανεώθηκαν μετά από 24 ώρες. Μετά από 48 ώρες αγωγής, τα κύτταρα συλλέχθηκαν με λαστιχένιο αστυνομικός και πλύθηκαν 3 φορές σε παγωμένο PBS με φυγοκέντρηση στα 500 χ g. Τα κύτταρα συλλέχθηκαν σε 1500 χ g, διαλύεται σε 0,1% cholamidopropyldimethylammoniopropanesulfate, που περιέχει ένα αναστολέα πρωτεάσης Complete Mini δισκίο ανά 7 ml διαλύματος (Roche Applied Science) και 0,5% Φωσφατάση Inhibitor Cocktail 2 (Sigma-Aldrich Co.). Τα δείγματα υποβλήθηκαν σε κατεργασία υπερήχων για 2 λεπτά σε πάγο και στη συνέχεια φυγοκεντρείται στα 10.000 χ g για 10 λεπτά, 4 ° C. Το υπερκείμενο χρησιμοποιήθηκε ως εκχύλισμα πρωτεΐνης.

κηλίδας Western

Για την εκτίμηση των συγκεντρώσεων πρωτεΐνης η Quant-iT Protein Assay Kit (Invitrogen, Life Technologies Corporation) χρησιμοποιήθηκε. Ίσες ποσότητες πρωτείνης των εκχυλισμάτων των όγκων σε ρυθμιστικό δείγματος LDS PAGE γέλης (Thermo Fisher Scientific) ή εκχυλίσματα κυττάρων σε ρυθμιστικό Lämmli φορτώθηκαν 4-20% Κριτήριο TGX τζελ προκατασκευασμένα (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA) ή το χέρι ρίχνει 12 % πηκτώματα, διαχωρίστηκαν με ηλεκτροφόρηση πηκτής πολυακρυλαμιδίου νάτριο-δωδεκυλθειικό, και μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες PVDF (Immobilon-P, Millipore EMD Corporation, Billerica, ΜΑ, USA). Οι μεμβράνες μπλοκαρίστηκαν σε 5% άπαχο ξηρό γάλα σε αλατόνερο ρυθμισμένο με φωσφορικό (ρΗ 7.4) με 0,01-0,05% Tween 20 (Sigma-Aldrich Co.) για 1 ώρα. Τα αντισώματα διαλύθηκαν σε 5% αλβουμίνη βόειου ορού ή 5% άπαχο ξηρό γάλα σε ρυθμισμένο με tris αλατούχο (ρΗ 7,6) με 0,01-0,05% Tween 20. Οι μεμβράνες επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα όλη τη νύχτα στους 4 ° C ή για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου. Πρωτογενή αντισώματα ήταν αντι-διασπάστηκε-κασπάση-3, αντι-ρ44 /Ρ42 ΜΑΡΚ κουνελιού, αντι-φωσφο-ρ44 κουνελιού /Ρ42 ΜΑΡΚ, κουνελιού αντι-PARP, αντι-GAPDH (Cell Signaling, Technology Inc.) κουνελιού, αντι-ποντικού κουνελιού -β-ακτίνης (Sigma-Aldrich). Δευτερογενή αντισώματα ήταν ΗΚΡ-συνδεδεμένη γαϊδάρου αντι-κουνελιού (GE Healthcare, Pittsburgh, ΡΑ, USA), κατσίκα αντι-κουνελιού, και κατσίκα αντι-ποντικού (αμφότερα DAKO North America, Inc., Carpinteria, CA). Οι μεμβράνες επωάστηκαν σε σήμα υπέρ West Pico χημειοφωταύγειας Υπόστρωμα (Thermo Fisher Scientific) και εκτίθεται σε φιλμ υψηλής απόδοσης Χημειοφωταύγειας (GE Healthcare) ή επωάστηκαν σε Αντιδραστήριο Amersham ECL Prime Western Blotting Detection (GE Healthcare) και οπτικοποιήθηκαν σε ένα σύστημα ChemiDoc (Bio-Rad Laboratories). Μεμβράνες απομακρύνθηκαν με την Επαναφορά PLUS Western Blot απογύμνωσης Buffer (Thermo Fisher Scientific) πριν από την εκ νέου δέσμευση και επώαση με ένα άλλο δευτερεύον αντίσωμα.

Η στατιστική ανάλυση

χρησιμοποιείται μια προσέγγιση δύο βημάτων για την αξιολόγηση της αντι-πολλαπλασιαστική αποτελεσματικότητα του κάθε φαρμάκου να μειώνει τη βιωσιμότητα των κυττάρων. Στο πρώτο στάδιο, κάθε ένα από τα 6 φαρμάκων συγκρίθηκε χωριστά σε όχημα για κάθε επίπεδο της διάρκειας θεραπείας, η δόση και τον τύπο κυττάρου. Τα δεδομένα που χρησιμοποιήθηκαν για αυτές τις αναλύσεις ήταν οι (αναπαραχθεί) αναλογίες των τιμών καλά φάρμακο διαιρείται με το μέσο όρο του σχετικού συνόλου τιμών ελέγχου DMSO. Αυτές οι αναλογίες, από 2 έως 4 ανεξάρτητα πειράματα, αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας αμφίδρομη σταθερών επιδράσεων ANOVA. Οι προκύπτουσες τιμές ρ ήταν Bonferroni-διορθώνονται με πολλαπλασιασμό τους με 24, ο αριθμός των συνθέσεων της διάρκειας, της δόσης, και τον κυτταρικό τύπο για ένα δεδομένο φάρμακο. Στη συνέχεια, επελέγησαν φάρμακα που μειώθηκαν συνολικά σημαντικά τον πολλαπλασιασμό και αξιολογήθηκαν οι πιο αποτελεσματικές διάρκειες και οι δόσεις για κάθε φάρμακο για κάθε κυτταρικό τύπο: με μία αρχική ANOVA, ακολουθούμενη από την κατάταξη βάσει της μετα-ANOVA μέσα, που ακολουθείται από Student-Newman- Keuls (SNK) post hoc δοκιμές για να διαπιστωθεί το οποίο σημαίνει ότι διέφερε σημαντικά. Οι συνολικές αποδόσεις των 3 καλύτερες επιδόσεις φάρμακα συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας ένα 4-way ANOVA (παράγοντες: φάρμακο, διάρκεια, τη δόση και τον τύπο κυττάρων)? πάλι έγιναν SNK post hoc δοκιμές για να προσδιοριστεί ποια φάρμακα ήταν γενικά σημαντικά διαφορετικά.

Η επίδραση της συνδυασμένης στατίνες σε σύγκριση με κάθε επιμέρους στατίνης αξιολογήθηκε με ανάλογο τρόπο. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέσος όρος και το τυπικό σφάλμα (με βάση το ANOVA και δέλτα-μέθοδος) από τουλάχιστον δύο ανεξάρτητα πειράματα. Στατιστικοί υπολογισμοί πραγματοποιήθηκαν στο Stata (Release 12, StataCorp., College Station, Texas, USA).

Αποτελέσματα

Αποδείξεις για ΜΑΡΚ σηματοδότησης σε SDHB PHEOs /pGLS

Όπως καταδεικνύεται προηγουμένως, λοβαστατίνη εξασκείται μία ισχυρή αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση στην MPC και ΜΤΤ κυττάρων, η οποία σχετίζεται με μειωμένο φωσφο-ΜΑΡΚ 1 και 3 (pMAPK1 /3) επίπεδα [1]. Να αξιολογήσει εάν η θεραπεία με στατίνες μπορεί να είναι επωφελής για τους ασθενείς με μεταστατικό pGLS, θα αξιολογηθεί κατά πόσον pMAPK1 /3 ήταν παρούσα στις επιθετικές SDHB που προέρχονται pGLS και άλλες κληρονομικές PHEOs /pGLS (Εικ. 1Α). ενημέρωση των ασθενών και του όγκου για κάθε δείγμα παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Μεταξύ των ανθρωπίνων PHEOs /pGLS τα επίπεδα pMAPK1 /3 ήταν πολύ μεταβλητές. Αν και τα μέσα επίπεδα pMAPK1 /3 ήταν συγκριτικά χαμηλή περιεκτικότητα σε SDHB όγκους σε σχέση με άλλα δείγματα ελέγχθηκαν, φωσφορυλίωση ήταν εμφανής σε 4 από έξι δείγματα SDHB. Καμία διαφορά μεταξύ πρωτογενών pGLS SDHB και SDHB-μεταστάσεις ήταν εμφανής.

Α. Western blot του pMAPK1 /3, οι συνολικές MAPK1 /3, και GAPDH σε ανθρώπινα PHEOs /pGLS. ενημέρωση των ασθενών και του όγκου για κάθε δείγμα παρουσιάζονται στον Πίνακα 1. Συντμήσεις: Β) SDHB, D) SDHD, N) NF1, Μ) κανονική μυελό των επινεφριδίων. Β Heatmap δείχνει την έκφραση της 21 ΜΑΡΚ γονίδια οδού στο pseudohypoxic PHEOs /pGLS. Η έκφραση αυτών των γονιδίων 21 ήταν σημαντικά αυξημένα σε σύγκριση με SDHB φυσιολογικό μυελό (ρ & lt? 0.002). Κάθε δείγμα αντιστοιχεί ένας αριθμός. Το αντίστοιχο αναγνωριστικό δείγμα από το αρχικό άρθρο [33] δίνεται στον Πίνακα S1. πληροφορίες και link για να κατατεθεί δεδομένα ασθενή δίδονται στο αρχικό άρθρο.

Η

Επιπλέον, αξιολογήσαμε το προφίλ έκφρασης του mRNA των γονιδίων οδού ΜΑΡΚ σε pseudohypoxic PHEOs /pGLS. Χαρτογράφηση των 254 ΜΑΡΚ γονίδια μονοπάτι προς 6937 είχαν διαπιστωθεί γονίδια ενδιαφέροντος [33] αποκάλυψε έναν αγώνα των 85 γονιδίων. Ιεραρχική συσταδοποίηση των εν λόγω 85 γονιδίων αποκάλυψε δύο συστάδες γονιδίων, ένα από τα οποία περιείχε 21 γονίδια που φάνηκε να είναι περισσότερο εντόνως εκφρασμένο σε SDHB και SDHD-AT PHEOs /pGLS σύγκριση με το κανονικό μυελό των επινεφριδίων και SDHD-ΗΝ και VHL PHEOs /pGLS (Σχ. 1Β). Μια πιο προσεκτική ματιά σε αυτά τα 21 γονίδια που αποκάλυψε τη συνολική αυξημένη έκφραση στα δείγματα SDHB σε σύγκριση με το φυσιολογικό μυελό των επινεφριδίων (p & lt? 0.002) (Εικ. 1Β) και ANOVA των μεμονωμένων γονιδίων με την αξιολόγηση post-hoc επιβεβαίωσε σημαντικά υψηλότερη έκφραση του MAPK12, CACNB3 , CACNG7, MAP4K2, MAP3K9, και MAPK6 σε SDHB PHEOs /pGLS από το φυσιολογικό μυελό των επινεφριδίων (p≤0.02). Έτσι, ορισμένες πτυχές της σηματοδότησης ΜΑΡΚ φαίνεται να ενεργοποιείται στις πιο επιθετικές SDHB που προέρχονται PHEOs /pGLS, έτσι στοχεύουν σε αυτό το μονοπάτι μπορεί να είναι μια πολλά υποσχόμενη νέα θεραπευτική προσέγγιση.

Σύγκριση των

in vitro

απόδοση των διαφορετικών στατινών

για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα των διαφόρων στατινών σε PHEOs /pGLS, χρησιμοποιήσαμε δύο μοντέλα ποντικών? κυτταρικές σειρές ΜΤΤ και MPC. Δεν υπάρχουν ενδείξεις για ηλεκτρικό αφυδρογονάση δυσλειτουργίας ή υπομονάδα μετάλλαξη αναμένεται το MPC ή ΜΤΤ τα κύτταρα, ωστόσο σήμερα δεν είναι καλύτερη in-vitro μοντέλο υπάρχει για να μελετηθεί η επίδραση νέων θεραπευτικών επιλογών για PHEOs /pGLS. Σχετική βιωσιμότητα κυττάρου μειώθηκε με την αύξηση της διάρκειας της θεραπείας και της συγκέντρωσης των διαφορετικών στατινών για MPC και ΜΤΤ. Διάρκεια τρεις ημέρες θεραπείας με την υψηλότερη συγκέντρωση των 50 μΜ ήταν πιο αποτελεσματικό για όλες τις στατίνες (Σχ. 2) και έδειξε μία σημαντικά υψηλότερη δράση σε σύγκριση με την ίδια δόση και στατίνης τη δεύτερη ημέρα της θεραπείας (SNK p≤0.029 για όλους στατίνες, εκτός από την πραβαστατίνη, η οποία ήταν αναποτελεσματική).

Ποσοστό σημαντικών αποτελεσμάτων για όλα τα στατίνες για όλες τις δόσεις της θεραπείας στις διάφορες διάρκειες θεραπείας για MPC (Α) και ΜΤΤ (Β). Το ποσοστό των σημαντικών αποτελεσμάτων αυξήθηκε σε σύγκριση με ΜΤΤ MPC μετά από 48 και 72 ώρες, υποδηλώνοντας ότι ΜΤΤ είναι πιο ευαίσθητα στις στατίνης θεραπεία.

Η

Η εμφάνιση μειωθεί σημαντικά σε σχέση με τη βιωσιμότητα σε σύγκριση με το όχημα με τη δόση αύξηση της και διάρκειες θεραπείας και αυτές οι επιδράσεις ήταν εντονότερη για ΜΤΤ από MPC, υποδεικνύοντας μια υψηλότερη ευαισθησία του πιο επιθετικό τύπο κυττάρων στη θεραπεία με στατίνες (Σχ. 2).

το αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση των στατινών έξι διέφεραν σημαντικά (p & lt? 0,0001). Η λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη, φλουβαστατίνη και επέδειξε υψηλότερη αναστολή πολλαπλασιασμού (Εικ. 3). Άμεση σύγκριση των αντι-πολλαπλασιαστική αποτελεσματικότητα της κάθε αποκάλυψε υψηλότερη δραστικότητα της σιμβαστατίνης και φλουβαστατίνης σε σύγκριση με λοβαστατίνη (p = 0,033? Σιμβαστατίνη έναντι λοβαστατίνη SNK p = 0,043, φλουβαστατίνη έναντι λοβαστατίνη SNK p = 0,031).

MPC ( Α-Ρ) και ΜΤΤ (G-Κ) υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με ▪ 6,25 μΜ, ▴ 12,50 μΜ, ▾ 25,00 μΜ και ⧫ 50,00 μΜ ατορβαστατίνη, φλουβαστατίνη, λοβαστατίνη, πραβαστατίνη, ροσουβαστατίνη, και σιμβαστατίνη για 24, 48, και 72 ώρες.

Η

Εκτός από την καθιέρωση οποία στατίνη είναι πιο αποτελεσματική στην αναστολή του κυτταρικού πολλαπλασιασμού σε MPC και MTT, θα διερευνηθεί εάν ο συνδυασμός δύο διαφορετικές στατίνες μπορεί να αυξήσει την αποτελεσματικότητα. Είναι ενδιαφέρον ότι, οι τέσσερις πιο αποτελεσματικοί συνδυασμοί όλα περιλαμβάνονται σιμβαστατίνη: σιμβαστατίνη /λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη /φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη /ατορβαστατίνη, σιμβαστατίνη και /rosuvastatin. Ωστόσο, κανένας από αυτούς τους συνδυασμούς μειωμένη σχετική βιωσιμότητα πιο αποτελεσματικά από τις τρεις πιο αποτελεσματικές στατίνες, φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, λοβαστατίνη και μόνο (Σχ. 4).

Σχετική βιωσιμότητα του MPC (Α) και ΜΤΤ (Β) στο οι ενδεικνυόμενες δόσεις και διάρκειες για τις πιο αποτελεσματικές σε συνδυασμό θεραπείες όπως η σιμβαστατίνη σε σχέση με σιμβαστατίνη μόνη της.

η

κηλίδα Western αποκάλυψε ότι τα τρία πιο αποτελεσματικές στατίνες όλα ανέστειλε φωσφορυλίωση ΜΑΡΚ στις 48 ώρες της θεραπείας με 25 μΜ (Εικ . 5Α). Επιπλέον, φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, λοβαστατίνη και αυξημένα επίπεδα προϊόν διάσπασης του CASP-3 και PARP, υποδεικνύοντας αυξημένη απόπτωση (Σχ. 5Β).

A. δείχνει κηλίδα Western μειωμένα επίπεδα pMAPK1 /3 στην αγωγή εναντίον ανεπεξέργαστων MPC και ΜΤΤ σε σχέση με το σύνολο MAPK1 /3 και GAPDH. Β Western που δείχνει στύπωμα μειωμένα επίπεδα της ανέπαφης PARP (κορυφαία συγκροτήματα) και αυξημένα επίπεδα διασπασμένη PARP (κάτω ζώνη) σε αγωγή εναντίον μη επεξεργασμένα MPC και ΜΤΤ. Σύμφωνα, που διασπάται CASP-3 ήταν αυξημένη στα επεξεργασμένα κύτταρα, υποδεικνύοντας απόπτωση. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε θεραπεία με 25 μΜ της ενδεικνυόμενης στατίνης για 48 ώρες.

Η

Ο πολλαπλασιασμός των ούτε MPC ούτε ΜΤΤ επηρεάστηκε από 6,25 μΜ κάθε δοκιμή στατίνης μετά από 24 ή 48 ώρες. Ωστόσο, αυθόρμητη κυτταρική μετανάστευση του MPC και ΜΤΤ ανεστάλη σημαντικά με επεξεργασία με 5 μΜ του φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, λοβαστατίνη και (Εικ. 6). Τα μεταναστευτικά ικανότητα εν μέρει διασώθηκε με την προσθήκη 100 μΜ τρανς, τρανς φαρνεσόλη.

MPC (Α) και ΜΤΤ (Β) τοποθετήθηκαν σε όχημα (CTR), 5 μΜ φλουβαστατίνη (Fluva), 5 μΜ σιμβαστατίνη (Simva ), 5 μΜ λοβαστατίνη (Lova) με ή χωρίς 100 μΜ trans, trans farnesol (FOH) και αυθόρμητη μετανάστευση καταγράφηκε για 24.

η

Συζήτηση

Μέχρι σήμερα, καμία θεραπευτική αγωγή έχει καθιερωθεί για τη μεταστατική PHEOs /pGLS. Ωστόσο, αρκετές νέες θεραπευτικές στρατηγικές έχουν δοκιμαστεί πρόσφατα σε μοντέλο οργανισμούς [35] – [38], συμπεριλαμβανομένων λοβαστατίνη [1]. Προηγουμένως, έχουν στατίνες έχουν αναφερθεί ότι μειώνουν τον πολλαπλασιασμό, την επιβίωση, την εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου, και μετανάστευση σε άλλα κύτταρα συμπεριλαμβανομένης της επιθετικής μοντέλα καρκίνου, μεταξύ άλλων με ΜΑΡΚ αναστολής οδού [10], [25] – [27], [29], [30 ], [39] – [41]. Ωστόσο, προς το παρόν ενδείξεις ότι η θεραπεία με στατίνες θα είναι ισχυρός στην πιο επιθετικός τύπος PHEOs /pGLS, δηλαδή τα άτομα με μεταλλάξεις SDHB [42], είναι ανύπαρκτη.

Τα στοιχεία μας δείχνουν ότι MAPK1 /3 φωσφορυλίωση είναι παρούσα σε ορισμένες SDHB-pGLS, συμπεριλαμβανομένων των μεταστάσεων. Σε συμφωνία μια προηγούμενη μελέτη έδειξε αυξημένη MAPK1 /3 φωσφορυλίωση σε απαθανάτισε lymphoblastoids από ασθενείς με Cowden-όπως παραλλαγές του συνδρόμου και βλαστικής σειράς SDHB ή SDHD γονίδιο ή μεταλλάξεις [23]. Επιπλέον, αρκετά γονίδια μονοπάτι ΜΑΡΚ φάνηκε να είναι πιο υψηλά εκφράζονται σε SDHB-pGLS από ότι στα φυσιολογικά μυελό επινεφριδίων. Η ακριβής λειτουργία και τις δυνατότητες συμμετοχής των ταυτοποιημένων γονιδίων στην SDHB-μετάλλαξη προκαλούμενη ογκογένεση παραμένουν να αξιολογηθούν.

Εν κατακλείδι, τουλάχιστον ένα υποσύνολο των ασθενών με επιθετικό pGLS που δείχνουν MAPK1 /3 φωσφορυλίωση μπορεί να ωφεληθούν από τη θεραπεία με στατίνες. Τα στοιχεία μας δείχνουν ότι η ομάδα αυτή των ασθενών δεν μπορεί να περιορίζεται σε σύμπλεγμα 2 ασθενείς PGL. Προσδιορισμός των MAPK1 /3 φωσφορυλίωση σε κατά περίπτωση στο μεταστατικό pGLS μπορεί να είναι χρήσιμη για την εκτίμηση του δυνητικού οφέλους της θεραπείας με στατίνες.

Σε μια προηγουμένως δημοσιευθεί με βάση τη μελέτη των μικροσυστοιχιών σύγκριση PHEOs /pGLS με διαφορετικό γενετικό υπόβαθρο, SDHx που προέρχονται από όγκους έδειξαν μειωμένη ΜΑΡΚ γονίδιο μονοπάτι έκφρασης σε σχέση με Ret, NF1, TMEM127 και σποραδικές PHEOs /pGLS [21]. Η διαφορά μεταξύ αυτού του αποτελέσματος και των δεδομένων μας μπορεί να οφείλεται στο γεγονός ότι, σε σχέση με Ret, NF1, TMEM127, και ορισμένες σποραδικές PHEOs /pGLS, το πάνω ρύθμιση των γονιδίων σηματοδότησης ΜΑΡΚ μπορεί να είναι οριακή σε SDHB PHEOs /pGLS, και ως εκ τούτου δεν είναι ανιχνεύσιμα εν απουσία του φυσιολογικού ιστού ελέγχου. δεδομένων των μικροσυστοιχιών μας αποκάλυψαν αντίθετες πρότυπα έκφρασης σε SDHB και pGLS SDHD-HN σε σχέση με ΜΑΡΚ γονίδια σηματοδότησης? ομαδοποίηση έτσι αυτά τα δείγματα μπορεί να συγκαλύψει η υπερέκφραση των γονιδίων ΜΑΡΚ που σχετίζονται με SDHB PHEOs /pGLS σε σύγκριση με άλλες PHEOs /pGLS. Εδώ παρουσιάζουμε διάφορα γονίδια σηματοδότησης ΜΑΡΚ που ρυθμίζεται προς τα πάνω σε σχέση με την κανονική μυελό των επινεφριδίων. Έτσι, καταλήγουμε στο συμπέρασμα ότι η θεραπεία με στατίνη μόνη της ή σε συνδυασμό με άλλες θεραπευτικές αγωγές μπορεί να είναι επωφελής σε ορισμένα SDHB που προέρχονται PHEOs /pGLS

Σήμερα, επτά διαφορετικές στατίνες είναι στην αγορά, ότι -. Εκτός από τη χοληστερόλη τους χαμήλωμα χαρακτηριστικά: – έχει αποδειχθεί ότι παρεμβαίνει σε αρκετές καρκίνο σχετικές οδούς [43], [44]. Οι φαρμακολογικές δράσεις και τις επιπτώσεις στην έκφραση των γονιδίων τους έχουν δειχθεί ότι διαφέρουν [43], [45], [46] και ως εκ τούτου, ανάλογα με τα κύτταρα που θα θεραπευθεί, το πιο αποτελεσματικό φάρμακο πρέπει να προσδιοριστεί. Εδώ μπορούμε να δείξουμε ότι σε περίπτωση MPC και ΜΤΤ, του λιπόφιλου στατίνες φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη, λοβαστατίνη και μείωσε σημαντικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, με σιμβαστατίνη και φλουβαστατίνη δείχνει ελαφρώς ισχυρότερη αποτελέσματα. Η πραβαστατίνη έχει αποδειχθεί ότι είναι αναποτελεσματικές σε διάφορα μοντέλα καρκίνου του [47], [48], η οποία μπορεί να οφείλεται σε υδρόφιλα χαρακτηριστικά του και την έλλειψη κατάλληλων μεταφορέων επί των κυττάρων του όγκου. Σε άλλες μελέτες που συγκρίνουν τις επιδράσεις διαφόρων στατινών, σιμβαστατίνη ή φλουβαστατίνη εμφανίστηκε πιο αποτελεσματική από λοβαστατίνη [24], [30]. Για περαιτέρω μελέτες, εξέταση μπορεί να δοθεί στο γεγονός ότι τα φαρμακοκινητικά χαρακτηριστικά της φλουβαστατίνης έχουν αναφερθεί ότι είναι προτιμότερη σε εκείνους σιμβαστατίνης και λοβαστατίνης [45].

Είναι ενδιαφέρον ότι, τα πιο επιθετικά κύτταρα ΜΤΤ φάνηκε να είναι πιο ευαίσθητα σε θεραπεία με στατίνη, πράγμα που δείχνει ότι περισσότερο επιθετική κύτταρα μπορεί να είναι περισσότερο δεκτικοί σε αντι-πολλαπλασιαστικά αποτελέσματα των στατινών. Η διαφορά στην απόδοση μηχανισμός ΜΤΤ πιο επιρρεπή μένει να διευκρινιστεί.

Η μέγιστη συγκέντρωση στατίνη αναφέρονται σε ανθρώπινο αίμα μετά από στοματική χορήγηση (12.3 μΜ) [49], ήταν στην περιοχή από τρίτο υψηλότερο συγκέντρωση μας (12,5 μΜ) , η οποία μειώθηκε σημαντικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε MPC και ΜΤΤ σε 48 ή 72 ώρες κατεργασίας με φλουβαστατίνη, λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη και. Holstein et al. ανέφεραν ότι έως 415 mg /m

2 του στόματος κάθε έξι ώρες για τέσσερις ημέρες ήταν καλά ανεκτή από τους ασθενείς με σοβαρή κακοήθειες [49]. Ωστόσο, τα επίπεδα της στατίνης στο αίμα δεν αυξάνονται με γραμμικό τρόπο, και έτσι από του στόματος χορήγηση μπορεί να μην είναι η καλύτερη επιλογή για την επίτευξη υψηλών συγκεντρώσεων ιστού. Βέλτιστη τεχνικές διοίκησης για την επίτευξη των στοχευμένων συγκεντρώσεις θα πρέπει να καθοριστεί. έχουν αμελητέα αποτελέσματα των στατινών σε φυσιολογικά κύτταρα σε σύγκριση με τα καρκινικά κύτταρα έχουν αναφερθεί [24], [50].

Σε μη τοξικές συγκεντρώσεις, να επιτευχθούν με χορήγηση από το στόμα, έχουν στατίνες έχουν αναφερθεί ότι εμφανίζουν ένα άλλο αντικαρκινικό αποτέλεσμα , η αναστολή της μετανάστευσης των κυττάρων και εισβολή [9], [47], [51]. Για το λόγο αυτό, εξετάσαμε το αποτέλεσμα των αποτελεσματικών στατίνες, λοβαστατίνη, σιμβαστατίνη και φλουβαστατίνη στην αυθόρμητη κυτταρική κινητικότητα των MPC και ΜΤΤ στα 5 μΜ. δοκιμασίες πολλαπλασιασμού μας έδειξαν καμία μείωση του πολλαπλασιασμού κατά 6,5 μΜ εντός 24 ωρών από τη θεραπεία. Η λοβαστατίνη, φλουβαστατίνη, σιμβαστατίνη και αποτελεσματικά ανέστειλε τη μετανάστευση του MPC και ΜΤΤ εντός 24 ωρών. Η μετανάστευση αναστολή φάνηκε να είναι τουλάχιστον εν μέρει εξαρτάται από την εξάντληση φαρνεσύλιο, δεδομένου ότι η παρουσία της trans, trans farnesol εν μέρει διασωθεί μεταναστευτικών ικανότητα. Ωστόσο, ακόμη και μία σχετικά υψηλή συγκέντρωση 100 μΜ τρανς, τρανς φαρνεσόλη δεν αναστραφεί πλήρως την αντι-μεταναστευτική επίδραση των τριών στατίνες. Έτσι, δεν μπορεί να αποκλειστεί φαρνεσυλίωση-ανεξάρτητες επιδράσεις των στατινών στην MPC και ΜΤΤ. Σε προηγούμενη μελέτη, γερανυλγερανυλ πυροφωσφορικό έχει αποδειχθεί ότι είναι πιο αποτελεσματική στην αντιστροφή της επίδραση των στατινών από φαρνεσυλπυροφωσφορικού [24]. Επιπλέον, μη εξαρτώμενου από μεβαλονικό μονοπάτι επιδράσεις στατίνη σε καρκινικά κύτταρα έχουν επίσης περιγραφεί [43].

Από του στόματος χορήγηση στατινών δεν αποφέρει συγκεντρώσεις τόσο υψηλές όπως χρησιμοποιείται εδώ για να επιτευχθούν τα καλύτερα αντι-πολλαπλασιαστική δράση σε vitro, συνδυασμένη χορήγηση άλλων φαρμάκων φαίνεται να είναι μια πολλά υποσχόμενη στρατηγική. Οι αναστολείς κινασών sunitinib και sorafenib επηρεάζουν επίσης την οδό ΜΑΡΚ και έχουν δειχθεί ότι είναι αποτελεσματικές στην προοδευτική μεταστατική pGLS [52], [53]. Η χορήγηση sunitinib έδειξε ευεργετικά κλινικά αποτελέσματα σε 8 από τους 17 ασθενείς με προοδευτικό μεταστατικό pGLS. Είναι ενδιαφέρον, 6 από τους ανταποκρίθηκαν πραγματοποιείται SDHB-μεταλλάξεις. Ωστόσο, δεδομένου ότι οι περισσότεροι αντι-νεοπλασματικά φάρμακα, οι παρενέργειες των κινασών αναστολείς μπορεί να είναι σοβαρή και εννέα από τους 17 ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με sunitinib έπρεπε να διακόψει τη θεραπεία ή να μειώσετε τη δόση τελικά.

Μια συνεργική επίδραση της φλουβαστατίνης και sorafenib έχει παρουσιαστεί για κύτταρα μελανώματος in vitro [54]. Αυτή κρατά τη δυνατότητα της μείωσης των συγκεντρώσεων αναστολέας πολλαπλών κινασών, η οποία μπορεί να ανακουφίσει την σοβαρότητα των παρενεργειών ενώ η απόδοση κατά του όγκου διατηρείται. Ωστόσο, απαιτούνται περαιτέρω μελέτες εντολή να διαπιστωθεί εάν ο συνδυασμός των πολλαπλών κινασών αναστολέων με στατίνες μπορεί να έχουν αθροιστική δράση στην επιθετική pGLS. Όπως έχει ήδη αναφερθεί, σε συνδυασμό αναστολή της ΡΙ3Κ /ΑΚΤ και mTORC1 /2 σηματοδότηση έχει προταθεί ως πολλά υποσχόμενη θεραπευτική αγωγή για ορισμένα pGLS [1].

Εν κατακλείδι, οι στατίνες μπορεί να είναι επωφελής μόνο του ή σε συνδυασμό με άλλους θεραπευτικούς αγωγές σε ασθενείς με επιθετική PHEOs /pGLS που δείχνουν δραστηριότητα μονοπάτι ΜΑΡΚ.

Υποστήριξη Πληροφορίες

πίνακα S1.

Δείγμα αριθμοί από το σχήμα 1Α με τα αντίστοιχα τσιπ αναγνωριστικών και δείγμα αναγνώρισης από Shankavaram & amp? Fliedner et al. 2013 Νεοπλασία 15: 435-447. πληροφορίες για τον ασθενή και τον σύνδεσμο για να κατατεθεί δεδομένα μικροσυστοιχιών δίνονται στο αρχικό άρθρο

doi:. 10.1371 /journal.pone.0097712.s001

(XLSX)

Ευχαριστίες

Εμείς θα ήθελα να ευχαριστήσω τον Δρ Tischler και ο Δρ Martiniova για την παροχή κυττάρων MPC και ΜΤΤ, αντίστοιχα. Είμαστε ευγνώμονες επίσης με τον Δρ Perwitz, κα Maushagen, και η κα Resch για την παροχή συμβουλών εμπειρογνωμόνων και αντισώματα. Επιπλέον θα θέλαμε να εκφράσουμε την ευγνωμοσύνη μας προς τον καθηγητή Aherrahrou και ο Δρ Perwitz, για γενναιόδωρα μοιράζονται τον εξοπλισμό τους.