Αφηρημένο

Η ανάπτυξη των παραγόντων φυσικό προϊόν με στοχευμένες στρατηγικές κρατά την υπόσχεση για αυξημένη αντικαρκινική θεραπεία με μειωμένη ναρκωτικών -associated παρενέργειες. Η ρεσβερατρόλη βρίσκεται στο κόκκινο κρασί, έχει αντικαρκινική δράση σε διάφορους τύπους όγκων. Έχουμε αναφερθεί νωρίτερα σε μια νέα μοριακό στόχο της ρεσβερατρόλης, η μετάσταση σχετιζόμενη πρωτεΐνη 1 (MTA1), το οποίο είναι ένα μέρος του νουκλεοσώματος αναδιαμόρφωση και αποακετυλίωση (NuRD) σύμπλοκο συν-καταστολέα που μεσολαβεί γονιδιακή σίγηση. Ταυτοποιήσαμε ρεσβερατρόλη ως ρυθμιστής της MTA1 συμπλόκου /NuRD και επανα-ενεργοποιητής της p53 ακετυλίωσης σε καρκίνο προστάτη (PCA). Στην παρούσα μελέτη, που απευθύνεται είτε ανάλογα ρεσβερατρόλη διαθέτει επίσης την ικανότητα να αναστέλλουν MTA1 και να αντιστρέψει ρ53 αποακετυλίωση. Δείξαμε ότι pterostilbene (pter), που βρέθηκαν σε βατόμουρα, είχαν μεγαλύτερη αύξηση στην MTA1 μεσολάβηση p53 ακετυλίωση, επιβεβαιώνοντας την ανώτερη ισχύ πάνω από τη ρεσβερατρόλη ως διαιτητικά επιγενετικών παράγοντα. Σε ορθοτοπική PCa ξενομοσχεύματα, η ρεσβερατρόλη και pter αναστέλλει σημαντικά την ανάπτυξη του όγκου, της προόδου, την τοπική εισβολή και αυθόρμητη μετάσταση. Επιπλέον, MTA1-knockdown ευαισθητοποιημένα κύτταρα σε αυτούς τους παράγοντες ως αποτέλεσμα πρόσθετη μείωση της εξέλιξης του όγκου και της μετάστασης. Η μείωση ήταν εξαρτημένη από MTA1 σηματοδότηση που δείχνει αυξημένη ακετυλίωση p53, υψηλότερη αποπτωτικό δείκτη και λιγότερο αγγειογένεση

in vivo

σε όλες ξενομοσχεύματα αγωγή με τις ενώσεις, και ειδικότερα με pter. Συνολικά, τα αποτελέσματα μας δείχνουν MTA1 ως σημαντικός συνεισφέρων σε όγκο του προστάτη κακοήθη εξέλιξη, και να υποστηρίξει τη χρήση των στρατηγικών που στοχεύουν MTA1. ισχυρή προ-κλινικά δεδομένα μας δείχνουν pter ως ένας ισχυρός, εκλεκτικός και φαρμακολογικά ασφαλές φυσικό προϊόν που μπορεί να δοκιμαστεί σε προχωρημένο προστάτη

Παράθεση:. Li K, Dias SJ, Rimando AM, Dhar S, Mizuno CS, Penman AD, et al. (2013) Pterostilbene πράξεις μέσω Μετάσταση-Associated Protein 1 να αναστείλει την ανάπτυξη των όγκων, εξέλιξη και μετάσταση στον καρκίνο του προστάτη. PLoS ONE 8 (3): e57542. doi: 10.1371 /journal.pone.0057542

Επιμέλεια: Νατάσα Κυπριανού, Πανεπιστήμιο του Κεντάκι College of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 26η Σεπτεμβρίου του 2012? Αποδεκτές: 25 Ιανουαρίου 2013? Δημοσιεύθηκε: 1 Μάρτη 2013

Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης, χωρίς όλα τα πνευματικά δικαιώματα, και δεν μπορεί να αναπαραχθεί ελεύθερα, διανεμηθεί, να μεταδοθεί, τροποποιηθεί, χτισμένο πάνω, ή ειδάλλως να χρησιμοποιηθεί από οποιονδήποτε για οποιονδήποτε νόμιμο λόγο. Το έργο γίνεται διαθέσιμα υπό την Creative Commons CC0 αφοσίωση δημόσιο τομέα

Χρηματοδότηση:. Η μελέτη χρηματοδοτήθηκε εν μέρει από τις επιχορηγήσεις Τειχών Ερευνητικό Πρόγραμμα Υποστήριξης (# 59927 και # 68100231012) από το Πανεπιστήμιο του Μισισιπή Ιατρικό Κέντρο για να ASL. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ο καρκίνος του προστάτη (PCA) θεραπεία εξακολουθεί να αντιπροσωπεύει μια ανικανοποίητη ιατρική ανάγκη. Διατροφή προερχόμενο πολυφαινόλες, συμπεριλαμβανομένων στιλβένια, είναι ελκυστικοί υποψήφιοι για κλινικές πρωτογενείς και δευτερογενείς χημειοπρόληψη του καρκίνου λόγω της ικανότητάς τους όχι μόνο να εμποδίζουν ή αναστέλλουν την έναρξη της καρκινογένεσης, αλλά επίσης για την αναστροφή των διαφημιστικών στάδια. Το τελευταίο χαρακτηριστικό καθιστά αυτές τις ενώσεις που υπόσχεται θεραπευτικούς παράγοντες. Η ρεσβερατρόλη (Res) και άλλες φυσικές στιλβένια είναι φυτοαλεξινών που παράγονται από τα φυτά σε απόκριση προς περιβαλλοντικό στρες [1]. Η ρεσβερατρόλη έχει καρδιοπροστατευτική, αντιφλεγμονώδη και αντικαρκινική δραστηριότητα [2], [3]. Οι αντικαρκινικές δράσεις της ρεσβερατρόλης περιλαμβάνουν ρύθμιση των πολλαπλών και ποικίλων μοριακών στόχων και προκαλούνται από διέγερση διακοπή του κυτταρικού κύκλου και της απόπτωσης [4] – [8] και η αναστολή της αγγειογένεσης [9] – [13].

ανακαλύφθηκε πρόσφατα ότι η ρεσβερατρόλη ρυθμίζει προς τα κάτω μετάσταση σχετιζόμενη πρωτεΐνη 1 (MTA1) σε προστάτη [13]. MTA1 υπερέκφραση συσχετίζεται με κλινικοπαθολογικών παραμέτρων που χαρακτηρίζουν την επιθετικότητα του όγκου: λέμφου μετάσταση στους λεμφαδένες, υψηλή βαθμολογία όγκου και την αγγειογένεση σε διάφορους καρκίνους [14] – [19]. Σε ανθρώπινους ιστούς του προστάτη, ένα υψηλό επίπεδο MTA1 συσχετίστηκε με ορμονο-ανθεκτικό προστάτη [15]. Αρχικά προσδιορίζεται MTA1 ως νέο συμμετέχοντα στην «φαύλο κύκλο» του προστάτη μετάσταση στα οστά, και περαιτέρω έδειξαν ότι η ένταση της χρώσης και πυρηνικό εντοπισμό MTA1 σε ανθρώπινους ιστούς συσχετίστηκαν με την επιθετικότητα του προστάτη και των οστών μεταστατικών βλαβών [19]. Ιδρύσαμε επίσης ότι MTA1 είχε προ-επιβίωσης, αντι-αποπτωτικά, επεμβατική και προ-αγγειογενετικών ιδιοτήτων σε προστάτη

in vitro

και

in vivo

[19].

MTA1 αποτελεί μέρος του συγκροτήματος νουκλεοσώματος αναδιαμόρφωσης και αποακετυλίωση (NuRD) συν-καταστολέα που εμπλέκονται στην ιστόνης και μη ιστόνης πρωτεΐνης αποακετυλίωση και ειδική γονιδιακή ρύθμιση μεταγραφικής [20], [21]. Το συγκρότημα περιλαμβάνει επίσης αποακετυλασών ιστόνης 1 και 2 (HDAC1 και 2). Έχουμε προηγουμένως έδειξαν ότι η ρεσβερατρόλη επαγόμενη αποικοδόμηση MTA1 αποσταθεροποιεί το σύμπλοκο αποακετυλίωση MTA1 /HDAC /NuRD οδηγώντας σε αυξημένη ακετυλίωση /ενεργοποίησης των ογκοκατασταλτικών ρ53 σε κύτταρα προστάτη [13]. MTA1 φίμωση μέσω RNAi ευαισθητοποιηθεί σημαντικά τα κύτταρα του προστάτη σε ρεσβερατρόλη που εξαρτώνται από ρ53 ακετυλίωση και την απόπτωση. Αυτός ο αναστολέας δραστικότητα παρόμοια HDAC της ρεσβερατρόλης υποστηρίχθηκε περαιτέρω από πειράματα συνδυασμό με κλινικά εγκεκριμένο αναστολέα HDAC σουβεροϋλανιλιδο υδροξαμικό οξύ (SAHA), στην οποία η ρεσβερατρόλη συνεργικά ενισχυμένη p53-ακετυλίωση και την απόπτωση [13]. Έχουμε επίσης έχουν δείξει ότι MTA1 knockdown κύτταρα είχαν κατασταλεί εισβολή και αγγειογόνο δραστικότητα

in vitro

, και καθυστερημένη σχηματισμό όγκων και την ανάπτυξη σε υποδόρια ξενομοσχεύματα [19]. Στο σύνολό τους, ορίσαμε μια νέα επιγενετική μηχανισμό αντικαρκινική δράση της ρεσβερατρόλης που προκαλείται μέσω της αρνητικής επιγενετικές ρυθμιστή, MTA1.

Παρά την πολλά υποσχόμενη ιδιότητες, ταχύ μεταβολισμό ρεσβερατρόλη και χαμηλή βιοδιαθεσιμότητα έχουν αποκλείεται εξέλιξη του σε κλινική χρήση [2] [22] – [24]. Οι περιορισμοί της ρεσβερατρόλης έχουν ζητηθεί το ενδιαφέρον μας για τα φυσικά και συνθετικά ανάλογα με βελτιωμένη φαρμακοκινητική και την ανώτερη φαρμακολογική δραστικότητα που κατέχουν μεγαλύτερες δυνατότητες ως φάρμακα αντικαρκινικά φυσικό προϊόν [25]. Ωστόσο, το πώς τα ανάλογα ρεσβερατρόλη συγκρίνουν μεταξύ τους από την άποψη της δραστικότητας και μηχανισμών δράσης είναι σε μεγάλο βαθμό άγνωστη. Η

in vivo

επιπτώσεις είναι κυρίως ανεξερεύνητο για ανάλογα ρεσβερατρόλης, γεγονός που καθιστά δύσκολο να επιλέξετε ποια αναλογική (s) είναι η καλύτερη για την κλινική ανάπτυξη.

Στην παρούσα μελέτη, θα πραγματοποιηθεί μια συγκριτική ανάλυση της ρεσβερατρόλης και έξι ανάλογα στην ικανότητά τους να αναστέλλουν την έκφραση MTA1 και σηματοδότηση, και επικεντρώθηκε σε MTA1 μεσολάβηση αντικαρκινικές και αντιμεταστατική αποτελέσματα της πιο ισχυρά ανάλογο, pter, χρησιμοποιώντας ορθοτοπικό ξενομοσχεύματα PCa. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν MTA1 ως ένα ισχυρό στόχο για παρέμβαση διαιτητικές pter ως θεραπευτικό φάρμακο φυσικό προϊόν για την αντικαρκινική θεραπεία στην πρωτοβάθμια και μεταστατικό ΣΕΣ.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

όλες οι εργασίες των ζώων διεξήχθη σύμφωνα με εγκεκριμένο πρωτόκολλο ζώο # 1272 από την επιτροπή Θεσμικών ζωικά Φροντίδα και Χρήση του Πανεπιστημίου του Ιατρικού Κέντρου του Μισισιπή και διαπιστευμένο από την Ένωση για την Αξιολόγηση και Πιστοποίηση του Εργαστηρίου Animal Care International, σύμφωνα με την πολιτική των ΗΠΑ Υπηρεσίας Δημόσιας Υγείας όπως διαβεβαίωσε από το Γραφείο του εργαστηρίου καλή μεταχείριση των ζώων.

Υλικά |

η ρεσβερατρόλη και Piceatannol (PIC) ελήφθησαν από εμπορικές πηγές (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO και Calbiochem-Novabiochem Corp. , San Diego, CA, αντίστοιχα). Pterostilbene συνετέθη ακολουθώντας δημοσιευμένες διαδικασίες [26] τριμεθοξυ-ρεσβερατρόλη (3Μ-Res) και (

E

) -4- (3,5-διμεθοξυστυρυλ) ανιλίνη (DMSA) συντέθηκαν σύμφωνα με μεθόδους που περιγράφηκαν προηγουμένως [27 ]. Τριακετυλ-ρεσβερατρόλη (3AC-Res) και 3,5-διακετυλο ρεσβερατρόλη (2Αγ-Res) συντέθηκαν ως ακολούθως: 18 mg της ρεσβερατρόλης διαλύονται σε 500 μί MeOH, προστέθηκαν 10 σταγόνες πυριδίνης και 500 μL οξικού ανυδρίτη. Το μίγμα αναδεύτηκε όλη τη νύχτα σε θερμοκρασία δωματίου. οξικού αιθυλεστέρα (EtOAc) προστέθηκε στο μίγμα της αντίδρασης, και στη συνέχεια κλασματώθηκε με νερό για να απομακρυνθεί η πυριδίνη. Το στρώμα EtOAc συμπυκνώθηκε υπό ρεύμα στο άζωτο, και κηλίδα σε μία πλάκα χρωματογραφίας λεπτής στιβάδας. Η πλάκα αναπτύχθηκε χρησιμοποιώντας σύστημα διαλύτη 30% EtOAc: 70% εξάνιο. Οι ζώνες του 3AC-Res (Rf 0.8) και 2Αγ-Res (Rf 0,6) ξύστηκαν από την πλάκα και εκχυλίζεται με EtOAc. Οι δομές των 3AC-Res και 2Αγ-Res προσδιορίστηκαν με πυρηνικό μαγνητικό συντονισμό και φασματοσκοπία μάζας. Οι δομές όλων των άλλων στιλβενίων έχουν επίσης επιβεβαιωθεί με φασματοσκοπία. Η καθαρότητα των ενώσεων προσδιορίστηκε να είναι & gt? 99%. Οι ενώσεις διαλύθηκαν σε αιθανόλη υψηλής καθαρότητας ή DMSO και αποθηκεύεται στο σκοτάδι στους -20 ° C πριν από τη χρήση σε προσδιορισμούς.

Cell Culture

LNCaP και Du145 PCa κύτταρα αγοράστηκαν από την American Type Culture Collection (ATCC). κύτταρα PC3M ήταν ένα δώρο από τον Dr. R. Bergan (Πανεπιστήμιο Northwestern, Chicago, IL) [28], [29], και RWPE-1, «κανονική» αθανατοποιημένα επιθηλιακά κύτταρα προστάτη, ήταν ένα δώρο από τον Dr. C. Lee ( Πανεπιστήμιο Northwestern, Chicago, IL) [30]. κύτταρα προστάτη αναπτύχθηκαν σε RPMI-1