Αφηρημένο

Ιστορικό

Οι ασθενείς με υψηλότερα επίπεδα της γλυκόζης νηστείας στον ορό έχουν υψηλότερα ποσοστά θανάτου από καρκίνο του παγκρέατος σε σύγκριση με ασθενείς με χαμηλότερα επίπεδα της γλυκόζης νηστείας στον ορό. Ωστόσο, οι λόγοι δεν έχουν μελετηθεί. Ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να εξετάσει τις νευρικές αλλοιώσεις σε ασθενείς με καρκίνο του παγκρέατος με την υπεργλυκαιμία και να προσδιορίσει τη σχέση μεταξύ των νευρικών αλλαγές και περινευρικό εισβολή.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Η κλινική και παθολογικά χαρακτηριστικά του 61 σταθεροποιημένο με φορμαλίνη παγκρεατικών δειγμάτων καρκίνου και 10 φυσιολογικούς παγκρέατα ως έλεγχοι αναλύθηκαν. Επιπλέον, η έκφραση της πρωτεΐνης του γονιδίου προϊόντος 9.5 (PGP9.5), μυελίνης P0 πρωτεΐνη (MPP), NGF, TrkA, και ρ75 εξετάστηκαν με ανοσοϊστοχημεία. Ο διάμεσος αριθμός των νεύρων, η διάμεση περιοχή του νευρικού ιστού, και η μέση διάμετρος νεύρο ανά 10 mm

2 ήταν μεγαλύτερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από εκείνες στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0.007,

σ

= 0.009 και

σ

= 0,004, αντίστοιχα). Η ολοκληρωμένη οπτική πυκνότητα (IOD) της χρώσης MPP ήταν χαμηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από εκείνες στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0,019), ενώ τα επίπεδα έκφρασης του NGF και ρ75 ήταν υψηλότερη στην ομάδα της υπεργλυκαιμίας από εκείνες στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0,002, και

σ

= 0,026, αντίστοιχα). Η εισβολή των νεύρων δέσμη του καρκίνου του παγκρέατος ήταν συχνότερες στην ομάδα υπεργλυκαιμία σε σχέση με την ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0.000).

Συμπεράσματα /Σημασία

βλάβη των νεύρων και την αναγέννηση συμβαίνουν ταυτόχρονα στο μικροπεριβάλλον του όγκου των ασθενών με καρκίνο του παγκρέατος υπεργλυκαιμία? η ταυτόχρονη εμφάνιση μπορεί να επιδεινώσει την διαδικασία της περινευρικό εισβολής. Η ανώμαλη έκφραση του NGF και p75 μπορεί επίσης να συμμετέχει σε αυτή τη διαδικασία και στη συνέχεια να οδηγήσει σε χαμηλότερο ποσοστό θεραπευτική χειρουργική

Παράθεση:. Li J, Ma Q, Liu H, Guo Κ, Li F, Λι W , et al. (2011) Σχέση μεταξύ Νευρωνικά Τροποποίηση και Περινευρική Εισβολή σε καρκίνο του παγκρέατος ασθενείς με υπεργλυκαιμία. PLoS ONE 6 (2): e17385. doi: 10.1371 /journal.pone.0017385

Επιμέλεια: Γιάννης Minna, Πολυτεχνείου της Texas Southwestern Medical Center στο Ντάλας, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 6 Οκτώβρη 2010? Αποδεκτές: 1η Φεβρουαρίου 2011? Δημοσιεύθηκε: 28 Φεβ του 2011

Copyright: © 2011 Li et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Φυσικό Επιστημονικό Ίδρυμα της Κίνας (2009 Νο 30900705) και μια επιστημονική Επιχορήγηση από Xi’an City (2009 Νο GG06718) (Ερ Ma), και εν μέρει από τη ΝΔ EPSCoR (Ε Wu). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Ο καρκίνος του παγκρέατος (panca) είναι μια θανατηφόρα ασθένεια με ποσοστό θνησιμότητας σχεδόν το 100%. Παρά το γεγονός ότι η χειρουργική επέμβαση είναι αποτελεσματική στο 20% των ασθενών, η τάση για τοπική υποτροπή στον οπισθοπεριτοναϊκό χώρο δεν έχει πλήρως κατανοηθεί [1]. Μία από τις κύριες αιτίες της τοπικής υποτροπής του όγκου είναι περινευρικό εισβολή (PNI) [2], η οποία απαντάται συχνά σε Panca (τόσο υψηλή όσο το 90% -100%) [3], [4]. Ως κοινή, αλλά μη ειδικό χαρακτηριστικό Panca [5], PNI είναι ένας σημαντικός προγνωστικός παράγοντας για Panca. Επίσης, ΡΝι αυξάνει καθώς ο καρκίνος γίνεται αδιαφοροποίητα (δηλαδή κύτταρα ΜΙΑ PaCa-2 Panca) σε Panca [6].

Επειδή το πάγκρεας είναι ένα όργανο με πλούσια εννευρώσεις που προέρχονται από το ανώτερο πλέγμα μεσεντερική και το πλέγμα κοιλιοκάκη, πρέπει να δώσουμε προσοχή τόσο στην εξωπαγκρεατικές περινευρικό εισβολή (με διείσδυση σε ένα ή περισσότερα εξωπαγκρεατικές νευρικά πλέγματα) και το ενδοπαγκρεατικής περινευρικό εισβολή [7]. Έχει προταθεί ότι η περινεύριο (η θήκη του συνδετικού ιστού που περιβάλλει μία δέσμη των νευρικών ινών) μπλοκ νευρωνικά εισβολή του Panca. Ωστόσο, περινεύριου βλάβη έχει προσδιοριστεί στο τέλος του νεύρου, στο σημείο όπου το νεύρο είναι εισέβαλαν από τα αιμοφόρα αγγεία γύρω από τα νεύρα, και στην περιοχή εισέβαλαν από δικτυωτό ίνες [8]. Ως αποτέλεσμα, τα κύτταρα Panca εύκολα εισβάλλουν από τις εξασθενημένες περιοχές του περινεύριο στο περινευρικό χώρο. Εάν συστημική ή τοπική παράγοντες εξακολουθούν να διαβρώσει την αντοχή του περινεύριο, η έκταση της περινευρικό εισβολής μπορεί να είναι υψηλή.

Επιπλέον, η ταυτόχρονη εμφάνιση Panca και ο σακχαρώδης διαβήτης (DM) έχει αναγνωρισθεί από μακρού. Μεγάλης διάρκειας ΣΔ αυξάνει την πιθανότητα για Panca σε μέτριο βαθμό [9]? στις περισσότερες περιπτώσεις, ωστόσο, νέα εμφάνιση DM είναι ένα από τα πρώτα κλινικά συμπτώματα της Panca [10], [11]. DM είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της θνησιμότητας από καρκίνο του παγκρέατος [12]. Περίπου το 80% των ασθενών Panca έχουν δυσανεξία στη γλυκόζη ή ειλικρινή διαβήτη [13], [14]. Στην Κορέα, και τα δύο αυξημένα επίπεδα γλυκόζης νηστείας στον ορό και η διάγνωση του διαβήτη θεωρηθούν ως ανεξάρτητους παράγοντες κινδύνου για αρκετές μεγάλες καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του στομάχου, καρκίνο του ήπατος, καρκίνο του πνεύμονα, και Panca? και ο κίνδυνος αυτών των συνθηκών αυξάνουν με αυξημένο επίπεδο της γλυκόζης νηστείας στον ορό [15]. Επιπλέον, οι Κορέας ασθενείς με την υψηλότερη γλυκόζη ορού νηστείας είχαν υψηλότερα ποσοστά θανάτου από όλους τους καρκίνους σε συνδυασμό όπως καρκίνων του οισοφάγου, του λάρυγγα, του στομάχου, του παχέος εντέρου, του ήπατος, χοληδόχου πόρου, παγκρέατος, πνεύμονα, προστάτη, του νεφρού, της ουροδόχου κύστης, και του εγκεφάλου όπως καθώς και λευχαιμία σε σύγκριση με τους ασθενείς με το χαμηλότερο επίπεδο της γλυκόζης νηστείας στον ορό [15]. Μεταξύ αυτών των τύπων καρκίνου, η σύνδεση μεταξύ των ποσοστών θανάτου και τα επίπεδα της γλυκόζης νηστείας στον ορό ήταν ισχυρότερη για Panca στους άνδρες και στις γυναίκες [15], [16]. Επίσης, η νευρωνική πρόσληψη γλυκόζης εξαρτάται από την εξωκυτταρική συγκέντρωση της γλυκόζης. Η υπεργλυκαιμία στο διαβήτη μπορεί να προκαλέσει μέχρι και αυξήσεις τετραπλάσια σε νευρωνική επίπεδα γλυκόζης. Εάν υπάρχουν οι επίμονες επεισόδια υπεργλυκαιμίας, τότε ενδοκυτταρικό μεταβολισμό της γλυκόζης οδηγεί σε νευρωνική βλάβη [17]. Τέτοιες ζημιές μπορεί να οδηγήσει σε πολλές εξουθενωτικές προβλήματα αφού νευροπάθεια συχνά οδηγεί σε κλινικά σημαντική νοσηρότητα, όπως πόνος, απώλεια αίσθησης, το πόδι έλκος, γάγγραινα και ακρωτηριασμό [18], [19].

Ακόμα κι αν ΡΝ, και υπεργλυκαιμία είναι κοινά φαινόμενα σε panca, η έρευνα δεν έχει καθοριστεί αν οι δύο παράγοντες δημιουργούν μια συνεργιστική δράση για την προώθηση της εξέλιξης της panca. Πρόσφατες μελέτες [2] έχουν αποδείξει ότι ΡΝι μπορεί να εμπλέκεται σε αμοιβαίες αλληλεπιδράσεις σηματοδότηση μεταξύ κυττάρων όγκου και τα νεύρα, και ότι τα εισβάλλοντα κύτταρα όγκου μπορεί να ανταποκριθούν σε προ-επεμβατική σήματα εντός του περιφερικού νεύρου περιβάλλον. Για να εξεταστεί η επίδραση της υπεργλυκαιμίας στο νευρικό ιστό σε Panca, αναλύσαμε τις λειτουργικές και μορφολογικές αλλαγές των νεύρων στους όγκους των ασθενών Panca με και χωρίς υπεργλυκαιμία, και στη συνέχεια εξετάσαμε τη σχέση μεταξύ των αλλαγών και ΡΝι. Προκειμένου να διερευνηθούν οι μορφολογικά χαρακτηριστικά των νεύρων στο νέο μικροπεριβάλλον του όγκου, Protein Gene προϊόντος 9.5 (PGP9.5) και πρωτεΐνης της μυελίνης P0 (MPP) επισημάνθηκαν εντός των νευρικών ινών και των έλυτρα μυελίνης, χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημικές μεθόδους. Ως εκ τούτου, μια καλύτερη κατανόηση της σχέσης υπεργλυκαιμία-νεύρων μπορεί να ρίξει νέο φως στους μηχανισμούς της PNI σε Panca.

Μέθοδοι

Ηθικές Η άδεια

Το πρωτόκολλο της μελέτης και συγκατάθεση μορφές είναι σύμφωνη με τη Διακήρυξη του Ελσίνκι και εγκρίθηκαν από την Ethical Review Board (ERB) Επιτροπή (το πρώτο Affiliated Νοσοκομείο Medical College, Xi’an Jiaotong Πανεπιστήμιο, Κίνα) και ενημερωμένη συγκατάθεση λήφθηκε από όλα τα μαθήματα.

ασθενείς

Από Ιανουάριος 1999-Μάρτιος 2008, 513 όγκους του παγκρέατος υποβλήθηκαν σε κλινική εξέταση στην Πρώτη Ενταγμένο Νοσοκομείο, Xi’an Jiaotong Πανεπιστήμιο, Κίνα. Μεταξύ αυτών, 420 περιπτώσεις ήταν καρκίνωμα παγκρεατικού πόρου εξαιρουμένων ενδοπορικού θηλώδη βλεννώδες όγκου, καρκίνωμα κυψελωτών κυττάρων, και καρκίνωμα κυττάρων νησιδίων. Τελικά, τα εξήντα ένας ασθενείς που έλαβαν θεραπευτική ρίζα του παγκρέατος λειτουργία με παθολογική διάγνωση διερευνήθηκαν σε αυτή τη μελέτη. Η μέση ηλικία των ασθενών ήταν 58 έτη και 22 από τους ασθενείς ήταν γυναίκες. Κανένας από τους ασθενείς έλαβαν νεο-επικουρική θεραπεία πριν την αρχική λειτουργία τους. Περιφερειακή ανατομή λεμφαδένα διεξήχθη σε όλους τους ασθενείς, και πύλη εκτομές φλέβα εκτελέστηκαν σε 17 ασθενείς. Κανένας από τους 61 ασθενείς που έλαβαν επικουρική θεραπεία.

Ομαδοποίηση και κλινικές παραμέτρους

Οι 420 όγκους του παγκρέατος χωρίστηκαν σε δύο ομάδες ανάλογα με τα επίπεδα γλυκόζης νηστείας στο αίμα (ένα μέσο επίπεδο των μακροπρόθεσμων για την οι ασθενείς με την ιστορία της DM και ένα μέσο επίπεδο των τριών ημερών συνεχούς μετά την νοσηλεία) των ασθενών: (1) ευγλυκαιμία /κανονική και (2) υπεργλυκαιμία /υψηλό. Όπως συνοψίζεται στον Πίνακα 1, τέσσερις κλινικές παράμετροι αξιολογήθηκαν σε κάθε ομάδα, που περιλαμβάνει: (1) κοιλιακός πόνος, (2) θεραπευτική λειτουργία, (3) ιστορία της DM, και (4) ακτινοβολεί τον πόνο. Από τους ασθενείς με ιστορικό DM, οι υποθέσεις διαιρέθηκαν σε μια ελεγχόμενη ομάδα και μια ανεξέλεγκτη ομάδα (το επίπεδο της γλυκόζης στο αίμα δεν ελέγχονταν στο φυσιολογικό) σύμφωνα με τα επίπεδα γλυκόζης νηστείας στο αίμα. Τρεις κλινικές παράμετροι αξιολογήθηκαν σε κάθε ομάδα, που περιλαμβάνουν: (1). Κοιλιακό άλγος, (2) θεραπευτική λειτουργία, και (3) ακτινοβολεί τον πόνο

Η

Ποσοτική ανάλυση του νευρικού ιστού

μια ανάλυση του παγκρέατος νεύρα διεξήχθη από δύο ανεξάρτητους ερευνητές, με τη βοήθεια της ψηφιακής ανάλυσης εικόνας και το λογισμικό Image Pro plus (Media Cybernetics, Maryland, USA). Μια συσκευή συζευγμένου φορτίου (CCD) βιντεοκάμερα και Proscan ηλεκτρονική 5000 (Hama, Γερμανία) συνδεδεμένο με το λογισμικό Image Pro-plus έκδοση 6.0 (Media Cybernetics) χρησιμοποιήθηκαν για να μετρηθεί η ολόκληρη την επιφάνεια κάθε τμήματος του ιστού, τον αριθμό των νεύρων, και η νεύρων περιοχή. Από τις καταγεγραμμένες μετρήσεις, η μέση έκταση των νεύρων ανά 10 mm

2 περιοχές ιστού και το ποσοστό του ιστού εισβολή από νεύρα υπολογίστηκαν. Η περιοχή νεύρωση ανά νεύρο και τον αριθμό των νεύρων ανά 10 mm

2 εμβαδού ιστού υπολογίστηκε επίσης.

Ανοσοϊστοχημεία

Ανοσοϊστοχημική χρώσεις πραγματοποιήθηκαν σε 3 μm τμήματα του σταθεροποιημένο με φορμαλίνη παραφίνη -embedded δειγμάτων χρησιμοποιώντας ένα πρότυπο συγκρότημα τεχνική υπεροξειδάσης αβιδίνης-βιοτίνης. Μετά αποπαραφινώσεως με ξυλόλιο και επανυδάτωση με σειριακές αιθανόλη κλίση, το αντιγόνο ανακτήθηκε με θέρμανση των διαφανειών σε 10 mM κιτρικού ρυθμιστικού διαλύματος (ρΗ 6.0) για 6 λεπτά σε ένα φούρνο μικροκυμάτων. Η ενδογενής υπεροξειδάση αποκλείσθηκε με υπεροξείδιο του υδρογόνου 0,3%. Οι πλάκες στη συνέχεια επωάστηκαν με μια πρωτεΐνη μπλοκαρίσματος (Dako, CA, USA) για 10 λεπτά και πρωτεύον αντίσωμα προστέθηκε όλη τη νύκτα στους 4 ° C που ακολουθείται από ξέπλυμα. Τα αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν: μονοκλωνικό αντι-πρωτεΐνη του γονιδίου προϊόντος 9.5 (PGP9.5, Zhongshan Goldenbridge Βιοτεχνολογία Co, LTD, Πεκίνο, Κίνα), πολυκλωνικά αντι-μυελίνης P0 πρωτεΐνη (MPP, Πεκίνο Βιοσύνθεση Βιοτεχνολογία Co, LTD, Πεκίνο, Κίνα ), πολυκλωνικά αντι-αυξητικού παράγοντα νεύρων (NGF) (Millipore, ΜΑ, USA), πολυκλωνικά αντι-TrkA (Cell Signaling Technology, Inc., ΜΑ, USA) και πολυκλωνικό αντι-ρ75 (Sigma, ΜΟ, USA). Το δευτερεύον αντίσωμα αντι-κουνελιού ή κατσίκας αντι-ποντικού βιοτινυλιωμένο κατσίκας (Dako) εφαρμόστηκε στη συνέχεια για 30 λεπτά, ακολουθούμενο από 30 λεπτά επώασης με στρεπταβιδίνη υπεροξειδάσης (κιτ Dako LSAB + HRP). Μετά την έκπλυση, τα πλακίδια έγιναν ορατά με διαμινοβενζιδίνη διάλυμα (DAB) χρωμογόνο (Dako) και αντίθετα με αιματοξυλίνη ρουτίνα, που ακολουθείται από αφυδάτωση μέσω διαβαθμισμένη αιθανόλη και τοποθέτηση των πλακιδίων. Η ομάδα ελέγχου είχε επιλεγεί από δέκα κανονική παγκρεατική ιστούς από ευγλυκαιμική ασθενείς με φυσιολογική δεικτών μάζας σώματος και των οποίων οι ηλικίες ήταν ανάλογη με τις πειραματικές ομάδες. Για να εξασφαλιστεί η ειδικότητα των πρώτων αντισωμάτων, διαδοχικές τομές ιστών επωάστηκαν με την απουσία του πρωτογενούς αντισώματος. Δεν ανοσοχρώση ανιχνεύθηκε σε αυτά τα τμήματα, που δείχνει την εξειδίκευση των πρωτογενών αντισωμάτων που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη.

Η ιστολογική εξέταση και τα κριτήρια για την αξιολόγηση ΡΝι

Τα εκτομή δείγματα σταθεροποιήθηκαν σε 10% φορμαλίνη σε θερμοκρασία δωματίου θερμοκρασία, καθώς και το μέγεθος και το ακαθάριστο εμφάνιση των όγκων καταγράφηκαν. Κάθε όγκος τομή κατά διαστήματα από 0.5 έως 0,7 cm, και όλα τα τμήματα σαν ρουτίνα σε επεξεργασία και ενσωματωμένα σε παραφίνη για ιστολογική εξέταση. υποβλήθηκαν σε επεξεργασία Διαδοχικές τομές (4 μm) κάθε όγκου. Στη συνέχεια, οι τομές, χρωματίζονται με αιματοξυλίνη και ηωσίνη, εξετάστηκαν παθολογικά για να επιβεβαιωθεί η διάγνωση και να αξιολογηθούν για την εισβολή του όγκου των νεύρων. Το πρωτόκολλο για την αξιολόγηση του βαθμού ΡΝι τροποποιήθηκε από μία προηγουμένως περιγραφείσα μέθοδο [20]. Ο βαθμός της PNI ήταν κατατάσσεται σε τέσσερις κατηγορίες ως εξής, σύμφωνα με το νέο ορισμό της PNI [21]: NE0-δεν περινευρικό εισβολή? NE1-neurium εισβολή? NE2-περινευρικό χώρο εισβολή? Ne3-νεύρων δέσμη εισβολή. Πρωτόκολλα για τη μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή ERB για τα Ανθρώπινα Ερευνών του Xi’an Jiaotong Πανεπιστημίου.

Δύο ερευνητές αξιολόγησαν τις ιστολογικές παραμέτρους και κατατάσσεται το βαθμό PNI. Οπου υπήρχε μεγάλη διαφορά, οι δύο ερευνητές επανεξέτασε τις διαφάνειες για την επίτευξη συναίνεσης.

Η στατιστική ανάλυση

Η στατιστική ανάλυση έγινε με το στατιστικό πρόγραμμα SPSS 17.0. Τα δεδομένα δόθηκαν ως μέσοι ± τυπική απόκλιση (S.D.). Για την στατιστική ανάλυση, χρησιμοποιήθηκε η μαθητές για Newman-Keuls (SNK) δοκιμή, μονόδρομη ανάλυση διακύμανσης, και Chi-square τεστ. Ένα

σ

αξία μικρότερη από 0,05 θεωρήθηκε σημαντική.

Αποτελέσματα

Η επίδραση της γλυκόζης του αίματος σε κλινικές παραμέτρους

Από όλες τις 420 περιπτώσεις, 153 ( 36,43%) είχαν υπεργλυκαιμία, συμπεριλαμβανομένης της νέας εμφάνισης σακχαρώδη διαβήτη και ανεξέλεγκτη διαβήτη. Το υπόλοιπο (267 περιπτώσεις) στην ομάδα ευγλυκαιμία περιλαμβάνεται κανένα διαβητικός ή ελεγχόμενη διαβητικούς περιπτώσεις. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1, η ομάδα υπεργλυκαιμία είχε μια χαμηλότερη συχνότητα από κοιλιακό άλγος, θεραπευτική λειτουργία, και υψηλότερη συχνότητα ακτινοβολεί τον πόνο. Ωστόσο, αυτές οι διαφορές δεν ήταν στατιστικά σημαντικές. Μεταξύ των 153 περιπτώσεις υπεργλυκαιμίας, 37 είχαν ιστορικό διαβήτη, σε σύγκριση με 10 267 περιπτώσεις ευγλυκαιμίας (

σ

= 0.000, Chi-square test), και αυτές οι διαφορές ήταν στατιστικά σημαντικές. Σύμφωνα με τα επίπεδα γλυκόζης νηστείας στο αίμα, οι περιπτώσεις με ιστορικό διαβήτη χωρίστηκαν σε ελεγχόμενες ή ανεξέλεγκτη ομάδες. Οι συχνότητες του κοιλιακού πόνου και θεραπευτική λειτουργία ήταν σημαντικά χαμηλότερες στην ανεξέλεγκτη ομάδα από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0.017 και

σ

= 0,025, αντίστοιχα, δοκιμασία Chi-Square). Ο βαθμός ακτινοβολεί τον πόνο δεν ήταν σημαντική διαφορετική μεταξύ των δύο ομάδων (

σ

= 0,359, δοκιμασία Chi-Square).

Σύγκριση των νευρικών αλλαγές μεταξύ της ομάδας ευγλυκαιμία και η ομάδα υπεργλυκαιμία

Η ανοσοχρώση του νευρώνα ειδική πρωτεΐνη PGP9.5 εντοπίστηκε σε νευρικές ίνες των παγκρεατικών ιστών (Εικ. 1). Ο αριθμός των ανοσοκηλιδώσεις αντιπροσωπεύει τον αριθμό και έκταση των παγκρεατικών νεύρου. Η ανοσοχρώση MPP που καθοδηγεί τη διαδικασία τυλίγματος και τελικά συμπιέζει παρακείμενα ελάσματα, εντοπίστηκε στη μεμβράνη των κυττάρων Schwann (Εικ. 2). έκφραση MPP στα νεύρα ήταν σημαντικά χαμηλότερη (

σ

= 0,019) στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία, υποδεικνύοντας δυσλειτουργία ή απομυελίνωση του ελύτρου μυελίνης. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 2, το μέσο περιοχή και διάμεσος αριθμός των νεύρων ανά 10 mm

2 εμβαδού ιστού ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0.007,

p = 0,009

, αντίστοιχα). Η μεσαία περιοχή νεύρο και μέση διάμετρο νεύρου (

σ

= 0.004) ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα της υπεργλυκαιμίας από ό, τι στην ομάδα ευγλυκαιμία.

PGP 9.5 ανοσοχρώση στην κανονική πάγκρεας (Α, D, κεφαλή βέλους), καρκίνο του παγκρέατος σε ομάδα ευγλυκαιμία (Β, Ε, κεφαλή βέλους), και ομάδα υπεργλυκαιμία (C, F, κεφαλή βέλους). Α, Β, Γ δείχνουν μια αρχική μεγέθυνση 100 ×, και D, Ε, F μια αρχική μεγέθυνση 200 ×. Στην ομάδα υπεργλυκαιμία, συγκρίσιμες αυξήσεις του αριθμού, περιοχή, και η διάμετρος των νευρικών ιστών ήταν παρόντες. Σχήμα βέλη δείχνουν τις ανοσοκηλιδώσεις.

Η

MPP ανοσοχρώση του παγκρεατικού ιστού καρκίνου στην ομάδα ευγλυκαιμία (Α, Β, αιχμή βέλους) και η υπεργλυκαιμία ομάδα (C, D, βέλος). Το αριστερό πάνελ δείχνει μια αρχική μεγέθυνση 100 ×, καθώς και το δικαίωμα του πίνακα μια αρχική μεγέθυνση 400 ×. Η συχνότητα των μέτριων έως ισχυρή χρώση MPP των νεύρων ήταν σημαντικά μικρότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία. Σχήμα βέλη δείχνουν τις ανοσοκηλιδώσεις.

Η

Αντίθετα, η έκφραση MPP στα νεύρα ήταν σημαντικά χαμηλότερη στην ανεξέλεγκτη ομάδα σε σχέση με την ελεγχόμενη ομάδα. Η μεσαία περιοχή και διάμεσος αριθμός των νεύρων ανά 10 mm

2 της περιοχής του ιστού ήταν επίσης υψηλότερα στην ανεξέλεγκτη ομάδα από όλες τις άλλες ομάδες. Το μεσαίο νεύρο περιοχή και μέση διάμετρο νεύρο ήταν υψηλότερες στην ανεξέλεγκτη ομάδα από όλες τις άλλες ομάδες.

Η έκφραση κυτοκινών /αυξητικών παραγόντων σε διαφορετικές ομάδες

Η πλειονότητα των καρκινικών κυττάρων και νευρικών ιστών έδειξε διακριτή ανοσοκηλιδώσεις του TrkA, p75NTR, και NGF εντοπίζεται στο κυτταρόπλασμα. Οι νευρικές ιστοί είχαν διαφορετικά επίπεδα έκφρασης του TrkA και p75NTR με ανοσοχρώση μεταξύ της ομάδας ευγλυκαιμία και ομάδα υπεργλυκαιμία. (Εικ. 3). Όπως φαίνεται στο Σχ. 4, η χρώση NGF στο κυτταρόπλασμα των καρκινικών κυττάρων ήταν σημαντικά ισχυρότερη (

σ

= 0,002) στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία, που δείχνει το επίπεδο της πρωτεΐνης NGF των καρκινικών κυττάρων αυξήθηκε στην ομάδα υπεργλυκαιμία . Το ποσοστό της επιφάνειας που καταλαμβάνεται από καρκίνο θετικό NGF καρκίνος χρώση κυττάρων ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία. Στην διατομή των νεύρων, ο TrkA ανοσοχρώση των νευρικών ινών ήταν ισοδύναμη στις δύο ομάδες χωρίς σημαντικές διαφορές (

σ

= 0,626). Η ανοσοχρώση p75NTR είχε ένα περιφερειακό σχέδιο, όπου η ευρύτερη περιοχή των νευρικών ινών ήταν έντονα χρωματισμένο και η κεντρική περιοχή ήταν ελαφρώς χρωματισμένο στην ομάδα υπεργλυκαιμία? Αντίθετα, η ανοσοχρώση p75NTR στην ομάδα ευγλυκαιμία ήταν ελαφρύ και ομοιόμορφο (

σ

= 0,026).

Α, C, Ε, Ζ, Ι, Κ δείχνουν μια αρχική μεγέθυνση 100 × , και Β, D, F, Η, J, L μια αρχική μεγέθυνση 400 ×. Η συχνότητα των μέτριων έως ισχυρή χρώση NGF των καρκινικών κυττάρων ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (κεφαλή βέλους). Ο λεκές NGF των νεύρων δεν ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των δύο ομάδων. Η μέτρια έως έντονη χρώσεις TrkA ήταν επίσης παρόντες σε δύο ομάδες (βέλος), αλλά χωρίς σημαντική διαφορά. Η συχνότητα των μέτριων έως ισχυρή χρώση ρ75 των νεύρων (κεφαλή βέλους) ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία. Σχήμα βέλη δείχνουν τις ανοσοκηλιδώσεις.

Η

Εξήντα ένας ασθενείς που έλαβαν ριζική θεραπευτική παγκρέατος εργασιών κατά την Πρώτη Ενταγμένο Νοσοκομείο, Xi’an Jiaotong Πανεπιστήμιο με παθολογική διάγνωση ερευνήθηκαν, η οποία περιελάμβανε 45 υπόδειγμα του ευγλυκαιμία ομάδα και 16 του δείγματος στην ομάδα υπεργλυκαιμία. Η MPP, NGF, TrkA και ρ75 ανοσοκηλιδώσεις αναλύθηκαν με Image-Pro Plus λογισμικό. Η ολοκληρωμένη οπτική πυκνότητα (IOD) της χρώσης MPP ήταν χαμηλότερη στην ομάδα της υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (

p = 0,019

). Η IOD του NGF και χρώσεις ρ75 ήταν υψηλότερη στην ομάδα της υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (

p = 0,002

,

p = 0,026

). Η IOD της χρώσης TrkA δεν ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των δύο ομάδων.

Η

ΡΝΐ αξιολόγηση

Εκπρόσωπος εικόνες της κανονικής δομές των νεύρων και η εισβολή νευρική δομή σε διάφορα στάδια της κατάταξης τα παγκρεατικά ιστοί που φαίνεται στο Σχ. 5. Μια δέσμη των νεύρων που περιβάλλεται από τις συνεχώς στρώσεις φύλλων επιθηλιοειδής ονομάζεται περινεύριου, ενώ ο εσωτερικός χώρος μεταξύ της δέσμης νεύρων και περινεύριου είναι η περινευρικό χώρο. Ο βαθμός ΡΝι ήταν κατατάσσεται σε τέσσερις κατηγορίες ανάλογα με την παρουσία των καρκινικών κυττάρων στις διαφορετικές δομές των νευρικών ιστών. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, η συνολική συχνότητα των PNI ήταν υψηλότερη στην ομάδα υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία χωρίς στατιστικά σημαντική διαφορά. Ωστόσο, η συχνότητα της εισβολής Ne3 ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα της υπεργλυκαιμίας από ότι στην ομάδα ευγλυκαιμία (

σ

= 0.000, διόρθωση συνέχειας)

NE0-δεν περινευρικό εισβολή.? NE1-neurium εισβολή? NE2-περινευρικό χώρο εισβολή? Ne3-νεύρων δέσμη εισβολή. Οι νευρικές δομές (Α, Β) και αντιπροσωπευτικές στάδια της εισέβαλαν νευρικής δομής για την ταξινόμηση (C-H). (Α) Μια δέσμη νεύρων που περιβάλλεται από τις συνεχείς στρώσεις φύλλων επιθηλιοειδή του περινεύριο (κεφαλή βέλους). (Β) Η περινευρικό χώρος, ένας εσωτερικός χώρος μεταξύ της δέσμης νεύρων και περινεύριο (κεφαλή βέλους). (Γ) Neurium εισβολή των καρκινικών κυττάρων στο εξωτερικό περινευρικό χώρο και συνδέονται με το περινεύριο (κεφαλή βέλους). κύτταρα (D) Perineurial του περινεύριο μεταξύ της δέσμης νεύρου και καρκινικά κύτταρα (κεφαλή βέλους). χώρος εισβολή (Ε) Περινευρική των καρκινικών κυττάρων στο περινευρικό χώρο (κεφαλή βέλους). κύτταρα (F) Cancer εισβάλλοντας στην περινευρικό χώρο και συμπιέζοντας τη δέσμη νεύρων ομαλά. Τα σύνορα μεταξύ των καρκινικών κυττάρων και δέσμες νεύρων δεν περιέχουν perineurial κύτταρα ή περινεύριου (βέλος). (G) δέσμη νεύρων εισβολή από τα καρκινικά κύτταρα. Τα καρκινικά κύτταρα με ακανόνιστο συμπιεστεί το δέσμη νεύρων, σαφώς εισβολή μεταξύ των νευρικών ινών (βέλος). (H) Επεμβατική καρκινικά κύτταρα φαίνεται ξεκάθαρα μεταξύ των νευρικών ινών (βέλος). Α, C, Ε, G δείχνουν μια αρχική μεγέθυνση 100 ×, και Β, D, F, Η μια αρχική μεγέθυνση 400 ×. Σχήμα αιχμές βελών δείχνουν τα νεύρα.

Η

Συζήτηση

Στην παρούσα μελέτη, παρουσιάζουμε τη νευρική αλλοίωση και την έκταση των PNI στις πρωτογενείς όγκους των ασθενών Panca στο πλαίσιο της ελέγχου της γλυκόζης. Τα δεδομένα μας υποδηλώνουν ότι η υπεργλυκαιμία, ένα κοινό σύγχυση παράγοντας που σχετίζεται με Panca, μπορεί να συμβάλει στην PNI. Δείξαμε ότι οι ασθενείς με οθόνη υπεργλυκαιμία μειωμένη έκφραση του MPP, και αυξημένη έκφραση του NGF και ρ75 σε σύγκριση με τους ασθενείς με ευγλυκαιμία. Επιπλέον, οι όγκοι από ασθενείς με υπεργλυκαιμία έδειξαν μία ανύψωση στο στάδιο της ΡΝ σε σύγκριση με όγκους από τους ασθενείς με ευγλυκαιμία (Πίνακας 3).

γενιά Πόνος στην Panca φαίνεται να είναι πολυπαραγοντική. Πιθανολογείται ότι κοιλιακό άλγος σε ασθενείς Panca προκύπτει από την εισβολή των καρκινικών κυττάρων σε γειτονικά όργανα [22]. Νευροπάθεια φαίνεται να προκαλείται από ενδο- και εξω-παγκρεατικά περινευρικό εισβολή και βλάβη στα νεύρα από φλεγμονώδη ή /και τα καρκινικά κύτταρα [6], [23] – [25]. Δεν βρήκαμε σχετικές μελέτες για τη συσχέτιση του βαθμού PNI στον πόνο. Ωστόσο, τα καρκινικά κύτταρα μπορεί να διαπεράσει το περινεύριο και γίνεται στενά συνδεδεμένες με κύτταρα Schwann και νευράξονες στο endoneurium. Η νευρική αναδιαμόρφωση δείχνει πώς παγκρεατικό νευροπαθητικό πόνο και σπλαχνικό νευροπάθεια συνδέονται με αλλοιωμένη εννεύρωση του παγκρέατος σε Panca [26]. Νέα στοιχεία δείχνουν ότι έως και το 80% των ασθενών είναι είτε υπεργλυκαιμικοί ή διαβητικό, δύο από τα οποία μπορούν να ανιχνευθούν στην προ-συμπτωματική φάσης [14]. Αναγνωρίζεται τώρα ότι η διαταραγμένη ανοχή γλυκόζης, ακόμη και χωρίς εμφανείς DM, μπορεί να είναι ένας παράγοντας κινδύνου για την διαβητική περιφερική νευροπάθεια (DPN). Ο νευροπαθητικός πόνος είναι μια εξέχουσα νωρίς χαρακτηριστικό της DPN και μπορεί να είναι σοβαρή, παρά ελάχιστα σημάδια της DPN [27].

Κατά συνέπεια, εμείς αιτιολογημένη ότι κοιλιακό άλγος σε ασθενείς Panca με την ιστορία του DM θα πρέπει να γίνεται συχνότερα από εκείνους που δεν η ιστορία του DM. Στη μελέτη μας, ο κοιλιακός πόνος ήταν περισσότερο συχνή, στην ομάδα ευγλυκαιμία σε σύγκριση με την ομάδα υπεργλυκαιμία. Η θεραπευτική ρυθμός λειτουργίας ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα ευγλυκαιμία σε σύγκριση με την ομάδα υπεργλυκαιμία, υποδεικνύοντας ότι η ιστορία της DM συνδέεται με το χαμηλότερο ποσοστό θεραπευτική λειτουργία σε ασθενείς Panca. Με περαιτέρω έρευνα, διαπιστώσαμε ότι σε αυτούς τους ασθενείς με ιστορικό γερμανικών μάρκων, τα ποσοστά του κοιλιακού πόνου και θεραπευτική λειτουργία ήταν σημαντικά χαμηλότερες στην ομάδα που το επίπεδο της γλυκόζης στο αίμα ήταν ανεξέλεγκτη στην κανονική σχέση με την ελεγχόμενη ομάδα (Πίνακας 1). Πιστεύουμε ότι αυτό το φαινόμενο δεν εξηγείται εύκολα με ένα μόνο θεωρία, επειδή το μικροπεριβάλλον επιδεινώνεται προοδευτικά σε αυτούς τους ασθενείς. Η καταστροφική επίδραση των καρκινικών κυττάρων στα νεύρα με συμπίεση είναι πολύ ήπια, αλλά ο καρκίνος μπορεί να ερεθίσει τα νεύρα και εκδηλώνεται ως κοιλιακό άλγος. Όταν αυτοί οι ασθενείς είχαν εκτεθεί σε κατάσταση υπεργλυκαιμίας, υπεργλυκαιμία μπορεί να ασκήσει μια ισχυρή καταστρεπτική επίδραση στα εύθραυστα νεύρα, το οποίο προωθεί την εξέλιξη από την αρχική λειτουργική βλάβη τέλη μη αναστρέψιμη δομική βλάβη, με ή χωρίς εξασθενημένο πόνο.

Τα κύρια μορφολογικά χαρακτηριστικά όπως ένας συνδυασμός demyelinization (βλάβη στο μυελίνης θήκη των νευρώνων), αξονική εκφύλιση των μυελινωμένων ινών και εκφύλιση με αναγέννηση των αμύελων ινών και ενδονευρικών μικροαγγειοπάθεια, με απώλεια των νευρικών ινών στο τελικό της στάδιο, είναι παρόντα στην καθιερωμένη νευροπάθεια [19 ]. Βρήκαμε ότι το επίπεδο έκφρασης MPP ήταν χαμηλότερη στα υπεργλυκαιμίας και της γλυκόζης αίματος ανεξέλεγκτη ομάδες, η οποία ανέφερε την δυσλειτουργία ή demyelinization των πληγεισών θηκών νεύρων. Επιπλέον, παρατηρήσαμε ότι ο μέσος αριθμός των νεύρων και των μέσου νεύρου διάμετροι ήταν μεγαλύτερο στην υπεργλυκαιμία και της γλυκόζης αίματος ανεξέλεγκτη ομάδες? Αυτό το φαινόμενο δείχνει ότι νευρική βλάβη και επιδιόρθωση είναι ταυτόχρονες στο νέο περιβάλλον.

Είναι γνωστό ότι οι παρατηρήσεις του ανώμαλα επίπεδα NGF σε τρωκτικά και ανθρώπινη διαβητική νεύρα οδήγησε σε κλινικές δοκιμές για να δοκιμαστεί η αποτελεσματικότητα του NGF ως θεραπευτικό παράγοντα για την ανεπάρκεια νευροτροφινών. θεραπεία NGF δείχθηκε να διεγείρει νευράξονα διακλάδωσης στο πέλμα, γεγονός που υποδηλώνει ότι η θεραπεία με NGF που ασκείται βιολογικές επιδράσεις επί δερματικών νευράξονες [28]. Τα στοιχεία μας έδειξαν ότι ο NGF-θετικά καρκινικά κύτταρα ήταν εμφανής και συμπίπτει με το βελτιωμένο νεύρα στην ομάδα υπεργλυκαιμία. Προτείνουμε ότι η υπεργλυκαιμία μπορεί να προκαλέσει την έκφραση του NGF των καρκινικών κυττάρων, η οποία αναγεννά τις πληγείσες νεύρα με την τόνωση νευράξονα διακλάδωση και ότι ο NGF μπορεί να είναι εν δυνάμει βασικός παράγοντας στην παραγωγή των παγκρεατικών νευροπάθειας σε Panca [29]. Η παρατήρησή μας της αυξημένης χρώσης του p75NTR στην ομάδα υπεργλυκαιμία αναφέρεται δυσλειτουργία ή demyelinization των προσβεβλημένων νευρικών θήκες και ήταν συνεπής με μια προηγούμενη αναφορά που υποδηλώνει ότι η υπερβολική NGF μπορεί να προκαλέσει απόπτωση μέσω p75NTR [30]. Αν εκφύλισης των νεύρων υπερβαίνει την αναγέννηση των νεύρων σε παθολογικές καταστάσεις όπως DPN, απώλεια νευρικών ινών μπορεί να προχωρήσει. Ωστόσο, εάν η συγκεκριμένη θεραπεία θα μπορούσε να βρεθεί για να μειωθεί εκφυλισμό νεύρου ή /και αυξάνει την αναγέννηση των νεύρων, παθολογικών καταστάσεων, συμπεριλαμβανομένης της εκφύλισης των νευρικών ινών και την απώλεια, θα μπορούσε να βελτιωθεί [31].

Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε επίσης ότι η συχνότητα και η έκταση των PNI αυξήθηκαν στην ομάδα υπεργλυκαιμία. Έτσι, τα ειδικά μορφολογικά χαρακτηριστικά των προσβεβλημένων νεύρα στο νέο μικροπεριβάλλον μπορεί επίσης να συσχετίζεται με την κοινή φαινόμενο του ΡΝι. Κατ ‘αρχάς, τα νεύρα αυξηθούν σε αριθμό, η οποία προσφέρει περισσότερες ευκαιρίες για τα καρκινικά κύτταρα να εισβάλουν και να συνδεθεί με το ανώτερο πλέγμα μεσεντερίων και το πλέγμα κοιλιοκάκη. Η πιθανότητα υποτροπής αυξάνεται ακόμα και μετά από θεραπευτική λειτουργία. Δεύτερον, οι αναγεννημένες νευράξονες και απομυελίνωση μπορούν να σχηματίσουν ένα κανάλι χαμηλής αντίστασης, το οποίο διευκολύνει τα καρκινικά κύτταρα να διεισδύσουν. Όταν τα καρκινικά κύτταρα διαπερνούν το νεύρο και να αναπτυχθούν στο endoneurium, επηρεάζουν τις νευρικές διεργασίες και γύρω από τα κύτταρα Schwann. Έτσι, όλα τα στοιχεία του νεύρου υπόκεινται σε βλάψει και να είναι λειτουργικά τροποποιημένη. Περαιτέρω, τα καρκινικά κύτταρα εκτείνονται όχι μόνο κατά μήκος του μεγάλου άξονα του νεύρου, αλλά επίσης τείνουν να αναπτύσσονται γύρω από την περιφέρεια, μερικές φορές στη συνέχεια απομονώνοντας το νεύρο από τον περιβάλλοντα ιστό. Με τον τρόπο αυτό, DM επιδεινώνει την πρόγνωση Panca προωθώντας ΡΝι.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι έχουμε αναλύσει μόνο τους όγκους από ασθενείς με θεραπευτική λειτουργία και στις δύο ομάδες ευγλυκαιμία και υπεργλυκαιμία. Δεν ήταν σε θέση να λάβει κατάλληλα δείγματα από ασθενείς μη ιάσιμη για δύο λόγους. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η εξέταση της κοιλιακής κοιλότητας κατά την διάρκεια χειρουργικής επέμβασης αποκάλυψε εκτεταμένη μετάσταση, και έτσι δεν μπορούσε να θεραπεύσει τον καρκίνο. Σε άλλες περιπτώσεις, θα μπορούσαμε να εκτελεί μόνο παρηγορητική επέμβαση όπως αποχέτευση για ίκτερο, επειδή ο όγκος δεν μπορεί να εκτομή. Παρά αυτές τις επιλογές, τα δεδομένα μας έδειξαν ότι οι όγκοι από υπεργλυκαιμική ασθενείς παρουσιάζουν μια ανύψωση στο στάδιο της ΡΝ σε σύγκριση με όγκους από ευγλυκαιμική ασθενείς (Πίνακας 3).

Συνοπτικά, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η DM καταστρέφει παγκρεατική νεύρα με ένα μοτίβο των παθολογικών αναγέννηση νευραξόνων και απομυελίνωση στο μικροπεριβάλλον του όγκου, ειδικά όταν η γλυκόζη στο αίμα δεν ελέγχεται. Η συνέπεια των κατεστραμμένων νεύρων μπορεί να επιδεινώσει μια κακή πρόγνωση από δύο μηχανισμούς: (1) κατέστρεψε τα νεύρα κρύψει το κοιλιακό άλγος των Panca και εμποδίζουν την έγκαιρη ανίχνευση των Panca και (2) κατέστρεψε τα νεύρα να αυξήσει τη συχνότητα και την έκταση των PNI στο Panca, η οποία είναι ένας παράγοντας κινδύνου για τοπική υποτροπή.

ευχαριστίες

Θα ήθελα να εκφράσω τις ευχαριστίες μας προς τον Ronald E. Vincent (SciConnXX), Carrie Wu (Νοσοκομείο Παίδων της Βοστόνης), και η Μαρία Τραβήξτε (Βόρεια Ντακότα μέλος Πανεπιστήμιο) για στοχαστική τους ανάγνωση του χειρογράφου.