Αφηρημένο

Πολλές επιδημιολογικές μελέτες έχουν συσχετίσει τη χρήση μη-στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα (ΜΣΑΦ): PLoS ONE με μειωμένο κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών, ο πιο θανατηφόρος γυναικολογικός καρκίνος, διαγνώστηκε συνήθως σε προχωρημένα στάδια της νόσου. Έχουμε αποδείξει στο παρελθόν ότι η προ-αποπτωτική διαφοροποίησης κυτοκίνης που συνδέονται με μελάνωμα γονίδιο-7 /Η ιντερλευκίνη-24 (

MDA

-7 /IL-24) είναι ένα κρίσιμο μεσολαβητή των NSAID απόπτωση σε προστάτη, του μαστού, της νεφρικής και καρκίνο του στομάχου κύτταρα. Στην έκθεση αυτή αξιολογούνται διάφορα δομικά διαφορετικά μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα για την απόδοση των τους να επάγουν την απόπτωση και

MDA

-7 /IL-24 έκφραση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Ενώ αρκετές NSAIDs επαγόμενη απόπτωση, θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac πιο ισχυρά απόπτωση που επάγεται και μειωμένη ανάπτυξη του όγκου. Ένας συνδυασμός αυτών των παραγόντων οδηγεί σε μια συνεργιστική δράση. Επιπλέον,

MDA

-7 /IL-24 επαγωγή από ΜΣΑΦ είναι απαραίτητη για προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο, διότι η αναστολή του

MDA

-7 /IL-24 με μικρό παρεμβαλλόμενο RNA καταργεί την απόπτωση.

MDA

IL-24 ενεργοποίηση -7 /οδηγεί σε προς τα πάνω ρύθμιση της σύλληψης της ανάπτυξης και της βλάβης του DNA επαγώγιμων (GADD) 45 α και γ και ενεργοποίηση JNK. Η οικογένεια NF-κΒ των παραγόντων μεταγραφής έχει ενοχοποιηθεί στην ανάπτυξη καρκίνου των ωοθηκών. Έχουμε προηγουμένως καθοριστεί ΝΡ-κΒ /ΙκΒ σηματοδότηση ως ουσιαστικό βήμα για την επιβίωση των κυττάρων σε καρκινικά κύτταρα και υπέθεσαν ότι η στόχευση του ΝΡ-κΒ θα μπορούσαν να ενισχύσουν NSAID διαμεσολαβείται επαγωγή απόπτωσης σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Πράγματι, συνδυάζοντας θεραπεία NSAID με αναστολείς του ΝΡ-κΒ οδήγησε σε αυξημένη επαγωγή απόπτωσης. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η αναστολή του NF-κΒ σε συνδυασμό με την ενεργοποίηση του

MDA

-7 /IL-24 έκφραση μπορεί να οδηγήσει σε μια νέα συνδυαστική θεραπεία για τον καρκίνο των ωοθηκών

Παράθεση:. Ζερμπίνη LF, Tamura RE, Correa RG, Czibere Α, Cordeiro J, Bhasin Μ, et al. (2011) Αναστολείς Συνδυαστική Επίδραση των μη-στεροειδή αντι-φλεγμονώδη φάρμακα και NF-κΒ στον καρκίνο των ωοθηκών Θεραπεία. PLoS ONE 6 (9): e24285. doi: 10.1371 /journal.pone.0024285

Επιμέλεια: Irina V. Λεμπέντεβα, Enzo Life Sciences, Inc., Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 12 Απριλίου 2011? Αποδεκτές: 5 Αυγούστου του 2011? Δημοσιεύθηκε: 12 Σεπτεμβρίου 2011

Copyright: © 2011 Ζερμπίνη et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. RET είναι ο δικαιούχος του ICGEB μετα-διδακτορική υποτροφία. Η έρευνα αυτή χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας χορηγεί 1R01 CA85467, CA090381 Ρ50, Ρ50 CA105009 και το Ίδρυμα Hershey (TAL), ΝΙΗ επιχορηγήσεις 1R01 CA097318, 1R01 CA127641, P01 CA104177, το Ίδρυμα Έρευνας για τον Καρκίνο Samuel Waxman (απευθείας) και το Υπουργείο Άμυνας επιχορηγήσεις PC051217 και OC0060439 (LFZ). DS είναι μια Harrison Scholar στο Cancer Research και Blick Scholar στο VCU Massey Κέντρο Καρκίνου και η VCU School of Medicine. PBF ασκεί την προεδρία Θέλμα Newmeyer Corman στο Cancer Research στη VCU Massey Κέντρο Καρκίνου και είναι ένας ανακριτής SWCRF. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος των ωοθηκών αποτελεί την πιο θανατηφόρα γυναικολογικό καρκίνο και το 5

ου κύρια αιτία των γυναικών θανάτου που σχετίζονται με τον καρκίνο στις Ηνωμένες Πολιτείες [1]. Καθυστερημένη διάγνωση είναι ένα από τα κύρια εμπόδια για τη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών, καθώς σχεδόν το 70% των γυναικών παρουσιάζουν προχωρημένο στάδιο της νόσου κατά τη διάγνωση [2]. Αρκετές επιδημιολογικές μελέτες έχουν δείξει ότι η χρήση των ΜΣΑΦ σε κλινικά σχετικές συγκεντρώσεις μειώνει παχέος [3], του μαστού [4] και τους κινδύνους καρκίνου των ωοθηκών [5], [6], [7], αν και διαμάχη παραμένει [8], [9 ]. Ένας μείζων στόχος της δράσης NSAID είναι η αναστολή της κυκλοοξυγενάσης (COX), που είναι υπεύθυνα για τη μετατροπή του αραχιδονικού οξέων σε προσταγλανδίνες και απασχολούν μια ποικιλία διαφορετικών μηχανισμών. Τα δύο γονίδια COX, COX-1 και COX-2, είναι σχεδόν ταυτόσημα? Ωστόσο, ένας σχετικός διαφορά είναι ότι η COX-1 έκφραση είναι ιδιοσυστατική, ενώ η έκφραση COX-2 επάγεται από αυξητικούς παράγοντες και προ-φλεγμονώδη ερεθίσματα [10]. Τα μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα τυπικά ταξινομούνται ως ειδικοί αναστολείς COX-2 ή μη ειδικών αναστολέων της COX. Στον καρκίνο των ωοθηκών COX-1, αλλά όχι της COX-2 έχει βρεθεί ότι υπερεκφράζεται [11], [12], ωστόσο άλλες μελέτες ανέφεραν ότι η COX-2 είναι επίσης ρυθμίζεται προς τα πάνω [13], [14]. Υψηλής COX-1 σε καρκίνο των ωοθηκών συσχετίζεται έντονα με τα υψηλά επίπεδα του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) [15], [16], [17] και NSAIDs αναστέλλουν την παραγωγή VEGF σε κυτταρικές γραμμές καρκίνου ωοθηκών [12], [18] που δείχνει ότι η COX-1 μπορεί να ρυθμίζει την έκφραση του VEGF. Η αγγειογένεση και την έκφραση του VEGF εμπλέκονται σε σχηματισμό ασκίτη [19] και της μετάστασης του καρκίνου των ωοθηκών [20], ενώ η αναστολή της εμποδίζει το σχηματισμό ασκίτη και αναστέλλει την ανάπτυξη του καρκίνου διαδίδονται [21].

προηγούμενη μελέτη μας δείχνει ότι NSAIDs επάγουν επίσης απόπτωση των καρκινικών κυττάρων μέσω της επαγωγής του

MDA

-7 /IL-24 έκφραση [22], που οδηγεί σε αυξημένη έκφραση των δύο μελών της σύλληψης ανάπτυξη και DNA-Ζημιά 45 (GADD45) της οικογένειας [23]. Η οικογένεια γονιδίων GADD45 κωδικοποιεί τρία δομικά πολύ σχετικές βλάβη που επάγεται από πρωτεΐνες arrest- ανάπτυξη και DNA, GADD45 α, β και γ παίζουν ένα ρόλο στην G2 /M σημείο ελέγχου σε απόκριση προς βλάβη του DNA [24]. Υπό κανονικές φυσιολογικές συνθήκες,

MDA

-7 /IL-24 εκφράζεται σε κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος και φυσιολογικά μελανοκύτταρα [25]. Υψηλά επίπεδα

MDA

-7 /IL-24 έχει αποδειχθεί ότι επάγει απόπτωση ειδικά των καρκινικών κυττάρων και ως εκ τούτου

MDA

-7 /IL-24 έχει αναφερθεί ως μια «μαγική σφαίρα» [26], [27]. Επιπλέον, πολλές μελέτες έδειξαν ότι η υπερέκφραση του

MDA

-7 /IL-24 από ένα ανασυνδυασμένο αδενοϊό αποτελέσματα των καρκινικών κυττάρων της απόπτωσης και θεραπευτικά οφέλη στον καρκίνο των ωοθηκών [28], [29].

NF-κΒ /ΙκΒ σηματοδότηση είναι ένα άλλο μονοπάτι που έχει εμπλακεί στην αντοχή φαρμάκου και την επιβίωση στον καρκίνο των ωοθηκών [30], [31]. Η οδός ΝΡ-κΒ /ΙκΒ αναδύεται ως βασικός παράγοντας στην ογκογένεση, εισβολή και μετάσταση για διάφορους καρκίνους [30], [31] και είναι ένα κρίσιμο βήμα για τα καρκινικά κύτταρα να ξεφύγουν από προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο [32]. Επιπλέον, η αντίσταση των καρκινικών κυττάρων σε χημειοθεραπευτικούς παράγοντες έχει συσχετιστεί με την απορυθμισμένη ενεργοποίηση ΝΡ-κΒ [33]. Επιπλέον, έχουμε δείξει ότι η αναστολή της ουσιαστικώς δραστικής ΝΡ-κΒ με αδενοϊική έκφραση της ΙκΒ διεγείρει απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα του προστάτη και αναστέλλει το σχηματισμό όγκων σε ποντίκια SCID [34].

Στην έκθεση αυτή, συγκρίναμε ένα ευρύ σύνολο ΜΣΑΦ για αποτελεσματικότητες τους να επάγουν την απόπτωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών. Από προηγούμενη μελέτη μας έδειξε ένα ρόλο για

MDA

-7 /IL-24 στα ΜΣΑΦ με τη μεσολάβηση κυτταρικό θάνατο, αξιολογήσαμε επίσης αν η επαγωγή απόπτωσης από τα ΜΣΑΦ οφείλεται στην επαγωγή του

MDA

-7 /IL-24 έκφρασης. Viral παράδοση

MDA

-7 /IL-24 χρησιμοποιείται επί του παρόντος σε κλινικές δοκιμές για διάφορους καρκίνους [27]. Προσδιορισμός των φαρμάκων που είναι πιο αποτελεσματική σε

MDA

IL-24 επαγωγή -7 /μπορεί να παρέχει μια εναλλακτική λύση για την ιογενή παράδοσης για την αξιοποίηση των αντι-νεοπλασματικές επιδράσεις των

MDA

-7 /IL-24 . Υποθέσαμε επίσης ότι ο συνδυασμός ΜΣΑΦ με αναστολείς του μονοπατιού ΝΡ-κΒ μπορεί να ενισχύσει τις επιδράσεις των ΜΣΑΦ κατά του καρκίνου των ωοθηκών. Εμείς, ως εκ τούτου, να δοκιμάζονται φαρμακολογικές αναστολείς του μονοπατιού ΝΡ-κΒ για τις ικανότητές τους να επάγουν απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Εδώ, έχουμε αποδείξει ότι θειώδες σουλινδάκ και δικλοφενάκη είναι οι πιο ισχυροί ΜΣΑΦ που επάγουν την απόπτωση του καρκίνου των ωοθηκών, μέσω

MDA

-7 /IL-24 έκφρασης και επίσης να μειώσει την ανάπτυξη του όγκου

in vivo

.

MDA

-7 /IL-24 έκφραση οδηγεί σε GADD45α και προς τα πάνω ρύθμιση γ και ενεργοποίηση της κινάσης JNK. Αρκετές φαρμακολογικών αναστολέων του NF-κΒ επίσης επάγουν την απόπτωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών και σε συνδυασμό με μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα ενισχύουν την αποπτωτική δράση των ΜΣΑΦ.

Αποτελέσματα

ΜΣΑΦ είναι ισχυροί επαγωγείς του

MDA

-7 /IL-24 και την απόπτωση στα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών

Ένα ευρύ πάνελ των ΜΣΑΦ δοκιμάστηκε για τις ικανότητές τους να επάγουν την απόπτωση και

mda-

7 /IL-24 γονιδιακή έκφραση σε τέσσερις ωοθηκών κυτταρικές σειρές καρκίνου, SKOV-3, CaOV-3, SW626 και 36m2. Επελέγησαν οι συγκεντρώσεις για όλα τα ΜΣΑΦ φάρμακα που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη να είναι συγκρίσιμη με επιτεύξιμη φυσιολογικές συγκεντρώσεις στο πλάσμα [35] – [49]. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά την κατεργασία του SKOV-3, CaOV-3, SW626 και 36m2 του καρκίνου των ωοθηκών κυττάρων με αυτό το σύνολο των ΜΣΑΦ, αποκαλύπτοντας ότι μια ποικιλία, αλλά δεν είναι όλα τα μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα επαγόμενη απόπτωση (Σχήμα 1α και S1a). Σταθερά ισχυροί επαγωγείς απόπτωσης σε τέσσερις-κυτταρικές σειρές περιλαμβάνονται θειώδες σουλινδάκ, Diclofenac, Naproxen Εμπσελέν και σε σύγκριση με τους ελέγχους διαλύτη. Μερικά NSAIDs οδήγησε σε σημαντική επαγωγή της απόπτωσης σε ένα υποσύνολο των καρκινικών κυτταρικών γραμμών ωοθηκών συμπεριλαμβανομένων σουλφονικό σουλινδάκ, ακεταμινοφαίνη, η ασπιρίνη και Flurbiprofen, ενώ η θεραπεία με NS-398, ιβουπροφένη, Finasteride, φλουφεναμικό οξύ και Μελοξικάμη οδήγησε μόνο σε οριακό ή καθόλου επαγωγή απόπτωσης ( Σχήμα 1α και S1a).

SKOV-3 κυτταρική γραμμή μετά από αγωγή με 5 mM ασπιρίνη, 200 μΜ Ibuprofen, 1 mM ακεταμινοφαίνη, 200 μΜ Naproxen, 200 μΜ NS-398, 200 μΜ δικλοφενάκη, 50 μΜ Finasteride, 200 μΜ φλουφεναμικό οξύ, 40 μΜ Μελοξικάμη, 50 μΜ Εμπσελέν, 20 ηΜ Flurbiprofen, 50 μΜ θειώδες σουλινδάκ και 50 μΜ σουλφονικό σουλινδάκ ή DMSO ως έλεγχος. (Α) Προσδιορισμός απόπτωσης των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών μετά από τη θεραπεία με ΜΣΑΦ. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (Β) Δόση εξαρτώμενη επαγωγή απόπτωσης με NSAIDs σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. δοκιμασία απόπτωσης των SW626 καρκίνου των ωοθηκών κύτταρα. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε αγωγή με 50, 25, 10 και 5 μΜ θειώδες σουλινδάκ? 200, 100, 40 και 20 μΜ του Diclofenac? 200, 100, 40 και 20 μΜ του Naproxen και 50, 25, 10 και 5 μΜ Εμπσελέν ή DMSO. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά τη θεραπεία. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (Γ) Real Time PCR ανάλυση του

MDA

-7 /IL-24 έκφραση σε SKOV-3 κύτταρα μετά από 24 ώρες αγωγή με διαφορετικές ΜΣΑΦ. Κάθε δείγμα ομαλοποιήθηκε σε hGAPDH. (Δ) Προσδιορισμός απόπτωσης CaOV-3 καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών μετά από θεραπεία με ΜΣΑΦ ή DMSO και μόλυνση με φακοϊό κωδικοποιεί

MDA

-7 /IL-24 siRNA διπόλων. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. ανεξάρτητων λοίμωξη τριπλούν για κάθε φορέα σε κάθε θεραπεία.

Η

Για καθένα από τα τέσσερα πιο συνεπής επαγωγείς απόπτωσης προσδιορίσαμε τη χαμηλότερη δόση που εξακολουθούν να επάγει προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών. Οι συγκεντρώσεις των επιλεγμένων NSAIDs ελέγχθηκαν σε 2, 5 και 10 φορές χαμηλότερες συγκεντρώσεις από ό, τι τα φυσιολογικά επιτεύξιμη δόσεις που χρησιμοποιήθηκαν στα πειράματα για το Σχήμα 1α και S1a. Η απόπτωση μετρήθηκε σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών 24 ώρες μετά τη θεραπεία με διαφορετικές δόσεις των τεσσάρων ΜΣΑΦ. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι οι συγκεντρώσεις θειώδες σουλινδάκ, δικλοφενάκη και τη ναπροξένη ακόμη και σε 5 φορές χαμηλότερη δόση εξακολουθεί να προκαλέσουν αποτελεσματικά την απόπτωση, ενώ Εμπσελέν μπορεί να μειωθεί μόνο 2-φορές (Σχήμα 1β).

Με βάση τις προηγούμενες παρατηρήσεις μας σε άλλους τύπους του καρκίνου, εμείς καθοριστεί αν η επαγωγή απόπτωσης από ΜΣΑΦ σχετίζεται με

MDA

-7 /IL-24 επαγωγή. Μετρήσαμε τα επίπεδα έκφρασης του mRNA της

mda-

7 /IL-24 mRNA σε απόκριση σε διάφορα NSAIDs σε SKOV-3 κύτταρα με ανάλυση PCR πραγματικού χρόνου που δεικνύουν ότι η

mda-

7 /IL-24 (μέγιστη επαγωγή 12 φορές) την έκφραση συνήθως προκαλείται από ΜΣΑΦ που προωθούν την απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών (Σχήμα 1γ). Αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώθηκαν επίσης σε δύο επιπλέον κυτταρικές γραμμές καρκίνου των ωοθηκών. Σε CaOV-3 και SW626 κυτταρικών σειρών καρκίνου των ωοθηκών

mda-

7 /IL-24 είναι επίσης έντονα επάγεται (μέγιστο 77 φορές επαγωγή στη CaOV-3 κύτταρα) (Σχήμα S1b). NSAIDs που ενισχύεται έντονα απόπτωση όπως θειώδες σουλινδάκ, ναπροξένη, ebselen, και η δικλοφενάκη (Σχήμα 1α) που επάγεται σημαντικά

MDA

7 /IL-24 έκφρασης (Σχήμα 1γ), ενώ NSAIDs που μόνο οριακά επαγόμενη απόπτωση (Σχήμα 1α ) δεν ενίσχυσε σημαντικά την

MDA

-7 /IL-24 έκφρασης εκτός από το ibuprofen που προκαλείται από

MDA

-7 /IL-24, αλλά δεν επάγει απόπτωση (Σχήμα 1γ).

Εμείς και άλλοι έχουν δείξει ότι η υπερέκφραση του

MDA

-7 /IL-24 μετά από μόλυνση με έναν αδενοϊό που φέρει το

MDA

-7 /IL-24 γονίδιο προκαλεί απόπτωση και αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε καρκινικά κύτταρα [50], [51]. Προκειμένου να αξιολογηθεί κατά πόσον η επαγωγή της απόπτωσης σε καρκινικά κύτταρα με μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα εξαρτάται από

MDA

-7 /IL-24 προς τα πάνω ρύθμιση, πραγματοποιήσαμε πειράματα με φακοϊό κωδικοποιεί ένα siRNA εναντίον

MDA

-7 /IL-24 που είχε προηγουμένως δημιουργηθεί από την ομάδα μας [23]. Λοίμωξη του SKOV-3 κύτταρα με το

MDA

-7 /IL-24 siRNA lentivirus μειωμένη απόπτωση που επάγεται από τα ΜΣΑΦ κατά 40-70% σε σχέση με τον φακοϊό ελέγχου (Σχήμα 1δ), υποστηρίζοντας περαιτέρω την άποψη ότι με ΜΣΑΦ απόπτωση είναι τουλάχιστον εν μέρει εξαρτάται από

MDA

-7 /IL-24 επαγωγή. Τα ίδια αποτελέσματα παρατηρήθηκαν σε CaOV-3 κύτταρα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Synergistic επιδράσεις των συνδυασμών NSAID

Χρησιμοποιώντας τη χαμηλότερη δόση της κάθε NSAID που επηρέασαν την απόπτωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών (Εικόνα 1 b ), αναλύσαμε συστηματικά επαγωγή απόπτωσης μετά συνδυάζοντας χαμηλές δόσεις ΜΣΑΦ. Μια ομάδα ΜΣΑΦ συμπεριλαμβανομένων Diclofenac, θειώδες σουλινδάκ, ναπροξένη και Εμπσελέν δοκιμάστηκαν για τις ικανότητές τους να επάγουν απόπτωση μόνα και σε συνδυασμό. SKOV-3 καρκινικά κύτταρα ωοθηκών υπέστησαν κατεργασία με 10 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 40 μΜ Diclofenac, 25 μΜ Εμπσελέν ή 40 μΜ Naproxen και συνδυασμούς αυτών. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά τη θεραπεία αποκαλύπτοντας ότι η πλειοψηφία των συνδυασμών των ΜΣΑΦ που δοκιμάστηκαν απόπτωση που επάγεται σημαντικά περισσότερο από είτε μόνο των NSAIDs σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών (Σχήμα 2α). Ορισμένοι συνδυασμοί όπως θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac, θειώδες σουλινδάκ και η ναπροξένη και δικλοφενάκη και η ναπροξένη ήταν πιο αποτελεσματική στην επαγωγή απόπτωσης από άλλες (Σχήμα 2α). Εμείς επικυρωμένα αυτά τα αποτελέσματα σε κυτταρικές σειρές CaOV-3 και SW626 (σχήμα S2). ανάλυση Ισοβολόγραμμα χρησιμοποιώντας συνδυασμούς Diclofenac και θειώδες σουλινδάκ δείχνει ότι οι συνδυασμοί των αποτελεσμάτων φαρμάκων σε μια συνεργιστική επίδραση (Σχήμα 2β).

(Α) Προσδιορισμός απόπτωσης κυττάρων SKOV-3 μετά την αγωγή με 10 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 40 μΜ Diclofenac, 25 μΜ Εμπσελέν ή 40 μΜ Naproxen και ένα συνδυασμό αυτών ή DMSO. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά τη θεραπεία. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (Β) ομαλοποιημένη ισοβολόγραμμα που λαμβάνονται από το λογισμικό Compusyn. CaOV-3 κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με συνδυασμό 5 μΜ θειώδες σουλινδάκ και 20 μΜ δικλοφενάκη εμφανίζει συνεργική δράση.

Η

θεραπεία με ΜΣΑΦ μειώνουν την ανάπτυξη καρκίνου των ωοθηκών ξενομοσχευμάτων σε SCID ποντίκια

Για να προσδιορίσετε αν μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα να μειώσει την ανάπτυξη του όγκου

in vivo

, SKOV-3 καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών ενέθηκαν υποδορίως σε ποντίκια SCID. Οι ποντικοί χωρίστηκαν τυχαία σε 3 ομάδες και τροφοδοτείται μία από τις τρεις δίαιτες καθ ‘όλη τη πείραμα: ΑΙΝ-93g ως τον έλεγχο και τη δίαιτα ΑΙΝ-93g συμπληρωμένο με είτε 200 ppm θειώδες σουλινδάκ ή 100ppm Diclofenac. Δύο μήνες αργότερα, τα ζώα εξετάστηκαν για σχηματισμό όγκου και το βάρος του όγκου. Όλοι οι ποντικοί ανέπτυξαν όγκους που δείχνει ότι αυτή η συγκεκριμένη δόση του ΜΣΑΦ δεν εμπόδισε το σχηματισμό όγκων. Ωστόσο, όπως φαίνεται στο σχήμα 3, θειώδες σουλινδάκ και θεραπεία Diclofenac μείωσε τον μέσο όγκο του όγκου κατά 30% και 20%, αντίστοιχα, σε σύγκριση με την δίαιτα ελέγχου με τιμή-ρ & lt?. 0.05, επιβεβαιώνοντας την αποτελεσματικότητα κατά του όγκου του

Για κάθε εμβολιασμό, 2 × 10

6 SKOV-3 κύτταρα εγχύθηκαν υποδορίως σε ποντικούς SCID. Οι ποντικοί χωρίστηκαν τυχαία σε τρεις ομάδες (η = 7 /ομάδα) και τροφοδοτείται μία από τις τρεις δίαιτες καθ ‘όλη τη πείραμα: ΑΙΝ-93g ως έλεγχος, η δίαιτα ΑΙΝ-93g συμπληρωμένο με 200 ppm θειώδες σουλινδάκ ή τη δίαιτα ΑΙΝ-93g συμπληρωμένο με 100 ppm Diclofenac. Το μέγεθος των όγκων και όγκων βάρος μετρήθηκαν μετά από 2 μήνες. Αξίες που δεν μοιράζονται τα ίδια γράμματα είναι στατιστικά σημαντικές με ρ τιμές τουλάχιστον & lt? 0,05

Η

Πρόκληση GADD45 α και γ-γονιδίου έκφραση και ενεργοποίηση της JNK στον καρκίνο των ωοθηκών από ΜΣΑΦ

. Έχουμε αναφερθεί στο παρελθόν ότι η επαγωγή της απόπτωσης από τα ΜΣΑΦ είναι στενά συνδεδεμένη με επαγωγή της

MDA

-7 /IL-24 έκφραση και, κατά συνέπεια, να GADD45 α και προς τα πάνω ρύθμιση γ σε αρκετές καρκινικές κυτταρικές γραμμές [23]. Όπως ΜΣΑΦ να προκαλέσει

MDA

-7 /IL-24 έκφραση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών (Σχήμα 1γ και S1c), αξιολογήσαμε τις αλλαγές στην GADD45 α και την έκφραση του γονιδίου γ.

Για να αξιολογηθεί κατά πόσον ρύθμιση της γονίδια GADD45 εμπλέκεται σε NSAID απόπτωση που διαμεσολαβείται, η έκφραση των GADD45 α και γ mRNAs μετρήθηκε με πραγματικού χρόνου PCR σε SKOV-3, CaOV-3, και τα κύτταρα SW626 αγωγή με ΜΣΑΦ. Τα ΜΣΑΦ με το ισχυρότερο προ-αποπτωτική δραστηριότητα, συμπεριλαμβανομένων θειώδες σουλινδάκ, δικλοφενάκη, ναπροξένη και Εμπσελέν έντονα ενισχυμένη GADD45 α και της έκφρασης γ, υποδεικνύοντας ότι η αυξημένη GADD45 α και έκφρασης γ συσχετίζεται στενά με την προ-αποπτωτική δράση των ΜΣΑΦ (Σχήμα S3a και S3b). Λεντοϊών έκφραση του siRNA κατά

MDA

-7 /IL-24 σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών απέδειξε ότι knockdown του

MDA

-7 /IL-24 μειώνει diclofenac επαγόμενη GADD45 α και την έκφραση του γονιδίου γ υποδεικνύοντας ότι GADD45α και επαγωγή γ είναι τουλάχιστον εν μέρει εξαρτάται από

MDA

-7 /IL-24 έκφρασης (Σχήμα S3C).

Από άλλους και είχαμε δείξει ότι η ενεργοποίηση της JNK παίζει έναν ρόλο στην απόπτωση επαγωγή σε καρκινικά κύτταρα και GADD45 α και γ αλληλεπιδρούν με το ανάντη κινάσης της JNK, MTK1 [52], αξιολογήσαμε την ενεργοποίηση των JNK στη διάρκεια NSAID απόπτωση. δραστικότητα JNK κινάσης δοκιμάστηκε σε πρωτεϊνικά εκχυλίσματα που λαμβάνονται από CaOV-3 και SKOV-3 κύτταρα σε επεξεργασία με θειώδες σουλινδάκ (50 μΜ), δικλοφενάκη (200 μΜ) ή DMSO για 24 ώρες από ένα

in vitro δοκιμασία κινάσης

. Η ανάλυση στυπώματος Western αποκάλυψε πολύ μικρή δραστηριότητα της JNK σε μη κατεργασμένα κύτταρα ελέγχου και μια ισχυρή αύξηση της δραστηριότητας JNK σε αμφότερες τις κυτταρικές γραμμές κατά την κατεργασία με θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac (Σχήμα 4α και 4β). Επιβεβαιωτικός Αυτή η απόδειξη μιας ασθενής επαγωγέας του

MDA

-7 /IL-24, GADD45 α και γ και την απόπτωση, Flurbiprofen, έδειξε μόνο οριακή επαγωγή δραστικότητας JNK (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Για να διαλευκανθεί η λειτουργική σημασία της GADD45 α και γ και

MDA

-7 /IL-24 για την επαγωγή της JNK ΜΣΑΦ με τη μεσολάβηση και την απόπτωση στον καρκίνο των ωοθηκών, η δραστηριότητα της κινάσης JNK ελέγχθηκε σε πρωτεϊνικά εκχυλίσματα που λαμβάνονται από το

CaOV -3

κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με θειώδες σουλινδάκ και δικλοφενάκη και μολύνθηκαν με φακοϊό κωδικοποίηση siRNA εναντίον GADD45 α και

MDA

-7 /IL-24 γονίδια. ανάλυση Western blot αποκάλυψε την ενεργοποίηση της κινάσης JNK από θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac εξαρτιόταν σημαντικά για GADD45 α και

MDA

-7 /IL-24 επαγωγή, αφού δραστηριότητα κινάσης JNK σε θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac αντιμετωπίζονται

MDA

-7 /IL-24 – /- κύτταρα καταργήθηκε σε σύγκριση με

MDA

-7 /IL-24 + /+ κύτταρα (Σχήμα 4β). Για να χαρακτηριστεί περαιτέρω η επίδραση των ΜΣΑΦ στην επαγωγή της απόπτωσης, τα επίπεδα της ενεργοποίησης PARP μετρήθηκαν με κηλίδωση Western, υποδεικνύοντας ότι θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac είναι ισχυροί επαγωγείς της διάσπασης της ΡΑΚΡ (Σχήμα S4A).

(Α ) Σύνολο λύμα πριν ανοσοκατακρήμνισης. (Β) Δοκιμασία κινάσης που δείχνει την επαγωγή της δραστικότητας κινάσης JNK από τα ΜΣΑΦ. Η επαγωγή της ενεργοποίησης ΙΝΚ με θειώδες σουλινδάκ και δικλοφενάκη αναλύθηκε σε προϊόντα λύσης κυττάρου από SKOV-3 και CaOV-3 κύτταρα σε επεξεργασία με 50 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 100 μΜ Diclofenac ή DMSO χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμασίας SAPK /JNK (Cell Signaling). Ανάλυση (Γ) Western Blot χρησιμοποιώντας JNK αντισώματος αντι-φωσφο κυτταρολυμάτων από CaOV-3 κύτταρα σε επεξεργασία με 50 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 100 μΜ Diclofenac ή DMSO και μόλυνση με φακοϊό κωδικοποιεί

MDA

-7 /IL-24 siRNA, GADD45α και GFP μεζονέτες.

η

Συνδυαστική θεραπεία των φαρμακολογικών αναστολέων του μονοπατιού NF-κΒ με ΜΣΑΦ επάγουν απόπτωση στα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών

διερευνήθηκε η βιολογική σημασία του ΝΡ κΒ μονοπάτι σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών και προσδιορίζονται οι λειτουργικές συνέπειες της αναστολής της. Αντί να χρησιμοποιεί αδενοϊικών παράδοσης του αναστολέα ΙκΒ περάσαμε προς μια πιο κλινικά σχετικό μοντέλο και χρησιμοποιήθηκαν φαρμακολογικές αναστολείς του μονοπατιού ΝΡ-κΒ. Οι αναστολείς του μονοπατιού ΝΡ-κΒ δοκιμάστηκαν για τις ικανότητές τους να επάγουν απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά την κατεργασία του SKOV-3, CaOV-3 και SW626 καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών με τέσσερα διαφορετικά αναστολείς του ΝΡ-κΒ, 5 ηΜ 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κιναζολίνη [53], 50 μΜ Isohelenin [54], 50 μΜ ΙΚΚ-2 αναστολέα SC-514 [55], και 200 ​​μΜ αναστολέα ΙΚΚ II Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) [56] ή DMSO (έλεγχος). 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κιναζολίνη ήταν ένας αποτελεσματικός επαγωγέας απόπτωσης σε όλες τις τρεις κυτταρικές γραμμές, και ο αναστολέας ΙΚΚ II Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) επήγαγε απόπτωση σε δύο από οι τρεις κυτταρικές σειρές. Η θεραπεία με Isohelenin ή αναστολέα ΙΚΚ-2 SC-514 οδήγησε μόνο σε οριακό ή καθόλου επαγωγή απόπτωσης (Εικόνα 5α). Επιπλέον, σε πραγματικό χρόνο PCR ανάλυση δείχνει ότι Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) προκαλεί ισχυρή ενεργοποίηση του GADD45 α και του γονιδίου γ έκφρασης (Σχήμα S4b), και προωθεί την φωσφορυλίωση JNK (Σχήμα S4C) και διάσπαση της PARP (Σχήμα S4A).

(Α) αναστολείς Φαρμακολογικές ΝΡ-κΒ επάγουν απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. SW626, CaOV-3, και SKOV-3 κύτταρα μετά από επεξεργασία με 5 ηΜ 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κουιναζολίνη (6-αμινο), 50 μΜ Isohelenin, 50 μΜ ΙΚΚ-2 αναστολέα SC-514, και 200 μΜ ΙΚΚ αναστολέα II Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) ή DMSO ως έλεγχος. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (Β) Δόση εξαρτώμενη επαγωγή απόπτωσης με αναστολείς ΝΡ-κΒ σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. δοκιμασία Απόπτωση του SKOV-3 καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με 5, 2,5, 1 και 0,5 ηΜ 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κουιναζολίνη (6-αμινο) 50, 25, 10 και 5 μΜ Isohelenin, 50, 25, 10 και 5 μΜ αναστολέας ΙΚΚ II Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) (Wedelolactone), 50, 25, 10 και 5 μΜ ΙΚΚ-2 αναστολέα SC-514 ή DMSO. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά τη θεραπεία. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (Γ) απόπτωσης σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών μετά από τη θεραπεία με ΜΣΑΦ σε συνδυασμό με αναστολείς του ΝΡ-κΒ. SW626, CaOV-3, και SKOV-3 κύτταρα μετά από επεξεργασία με 10 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 40 μΜ Diclofenac, 25 μΜ Εμπσελέν, 40 μΜ Naproxen, 1 ηΜ 6-αμινο-4- (4 phenoxyphenylethylamino) κουιναζολίνη (6-αμινο), και 200 ​​μΜ αναστολέα ΙΚΚ II Wedelolactone και ένα συνδυασμό αυτών. Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά τη θεραπεία. Δεδομένα σημαίνει ± s.d. τριπλών ανεξάρτητα πειράματα για κάθε επεξεργασία. (D) ομαλοποιημένη ισοβολόγραμμα που λαμβάνονται από το λογισμικό Compusyn. CaOV-3 κύτταρα που κατεργάζονται με ένα συνδυασμό 10 μΜ θειώδες σουλινδάκ και 2.5 ηΜ 6-αμινο δείχνει συνεργική δράση.

Η

Όσον αφορά τα μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα πραγματοποιήσαμε μια ανάλυση δόσης απόκρισης για 6-αμινο-4- ( 4-phenoxyphenylethylamino) κιναζολίνη και Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) για να προσδιοριστεί η χαμηλότερη δόση που εξακολουθούν να επάγει προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών. Η μείωση της συγκέντρωσης της 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κιναζολίνη από 5 ηΜ έως 1 ηΜ ακόμη απόπτωση, ενώ μειωμένες δόσεις Wedelolactone οδήγησε σε απώλεια της επαγωγής απόπτωσης (Εικόνα 5b).

Για να προσδιοριστεί αν οι αναστολείς του ΝΡ-κΒ 6-αμινο-4- (4-phenoxyphenylethylamino) κιναζολίνη και Wedelolactone (7-μεθοξυ-5,11,12-τριϋδροξυ-coumestan) ενίσχυση των προ-αποπτωτική δραστηριότητες των NSAIDs συνδυάσαμε τις χαμηλότερες δόσεις κάθε των τεσσάρων μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα, θειώδες σουλινδάκ, δικλοφενάκη, Εμπσελέν, και Naproxen με τις χαμηλότερες δόσεις των δύο αναστολέων του ΝΡ-κΒ που εξακολουθούν να προκαλούν απόπτωση (Σχήμα 1β και 5β, αντίστοιχα). Οι αναστολείς ΜΣΑΦ και NF-κΒ δοκιμάστηκαν για τις ικανότητές τους να επάγουν απόπτωση μόνα και σε συνδυασμό. SKOV-3, CaOV-3, και SW626 καρκινικά κύτταρα ωοθηκών υπέστησαν κατεργασία με 10 μΜ θειώδες σουλινδάκ, 40 μΜ Diclofenac, 25 μΜ Εμπσελέν, 40 μΜ Naproxen, 1 ηΜ 6-αμινο-4- (4 phenoxyphenylethylamino) κουιναζολίνη και 200 ​​μΜ Wedelolactone . Η απόπτωση μετρήθηκε 24 ώρες μετά την αγωγή που αποκαλύπτουν ότι οι συνδυασμοί των NSAIDs με το ΝΡ-κΒ αναστολέα 6-αμινο-4- (4 phenoxyphenylethylamino) κουιναζολίνη ενισχυθεί σημαντικά απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών σε σχέση με οποιοδήποτε από τα φάρμακα μόνο του (Σχήμα 5c). Σε αντίθεση, Wedelolactone ενίσχυσε τις προ-αποπτωτικά αποτελέσματα μόνο από μερικά από τα ΜΣΑΦ και λιγότερο αποτελεσματικά σε SKOV-3 κύτταρα (Σχήμα 5c). ανάλυση Ισοβολόγραμμα υποδεικνύει ότι ο συνδυασμός 6-αμινο-4- κιναζολίνη (4 phenoxyphenylethylamino) με αποτέλεσμα θειώδες σουλινδάκ σε μια συνεργιστική επίδραση (Σχήμα 5d).

Συζήτηση

NSAIDs έχουν αναδειχθεί ως δυνητικά φάρμακα για χημειοπροφύλαξη του καρκίνου, αλλά τα οφέλη τους είναι ακόμα υπό εξέταση. Ορισμένα παραδοσιακά ΜΣΑΦ, όπως η σουλινδάκη τη στιγμή δοκιμάζεται σε κλινικές δοκιμές για διάφορες μορφές καρκίνου. Πράγματι, προκλινικές μελέτες παρέχουν συνεπή απόδειξη ότι τα ΜΣΑΦ μπορεί να εμποδίσει αποτελεσματικά την ογκογένεση, ιδίως μέσω της αναστολής της κυκλοοξυγενάσης-2 (COX-2). Είναι σημαντικό, η χρήση ασπιρίνης έχει συσχετιστεί με μειωμένο κίνδυνο απόμακρη υποτροπή του καρκίνου του μαστού και του θανάτου από καρκίνο του μαστού [57].

Οι επιδημιολογικές μελέτες δείχνουν αντίστροφη σχέση χρήση των μη στεροειδών αντιφλεγμονωδών φαρμάκων (ΜΣΑΦ) και τη συχνότητα των καρκίνο των ωοθηκών [5], [6], [7]. Πολλές εκθέσεις δείχνουν ότι ορισμένα μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα επάγουν απόπτωση και κύκλου κυττάρου σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών, αλλά η ακριβής μοριακός μηχανισμός με τον οποίο NSAIDs επάγουν αντιογκογένεσης δραστηριότητα δεν είναι σαφής. Προηγουμένως, οι ομάδες μας περιγράφεται μια νέα οδός με την οποία NSAIDs επάγουν απόπτωση και διακοπή της ανάπτυξης σε καρκινικά κύτταρα. Δείξαμε ότι η επαγωγή της προ-αποπτωτικών κυτοκίνη MDA-7 /IL-24 από τα ΜΣΑΦ είναι ζωτικής σημασίας για προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο που προκαλείται από μη στεροειδή αντιφλεγμονώδη φάρμακα [23]. Ωστόσο, η μελέτη αυτή δεν περιλαμβάνει ωοθηκών καρκινικά κύτταρα.

Αρκετές εκθέσεις χρησιμοποιώντας ένα αδενοϊό που κωδικοποιεί το

MDA

-7 /IL-24 γονίδιο (Ad-

MDA

-7 ) δείχνουν βαθιά και εκλεκτική αντικαρκινική δράση του σε ζωικά μοντέλα [26], [27], [50], [58], [59], [60] καθώς και μια έκθεση επιλεκτικά επαγόμενο κυτταρικό θάνατο των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών που καταλήγει σε καταστολή της ανάπτυξης του όγκου

in vivo

[58]. Ωστόσο, η παροδική έκφραση, πιθανώς ανεπιθύμητες ανοσολογικές αντιδράσεις (που προκαλείται από αδενοϊό) και τα προβλήματα με συστηματική χορήγηση περιορίζουν τη γενικευμένη χρήση των αδενοϊικών παράδοσης

MDA

-7 /IL-24, ιδιαίτερα όταν χορηγούνται συστηματικά ως μη αντιγραφόμενα αδενοϊού.

σε αυτό το πλαίσιο, τα ευρήματά μας ότι NSAIDs με αντικαρκινική δράση επάγουν υψηλά επίπεδα

MDA

-7 /IL-24 σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών παρέχουν μια νέα θεραπευτική στρατηγική για την ενίσχυση της

MDA

-7 /IL-24 επίπεδα σε συστημικό επίπεδο. Πράγματι, έχουμε αποκτήσει μια συνολική επισκόπηση των συνεπειών μιας ολόκληρης πάνελ των ΜΣΑΦ στην επιβίωση των καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών συγκρίνοντας efficacies τους να επάγουν την απόπτωση και

MDA

-7 /IL-24 έκφρασης. Οι πιο ισχυροί επαγωγείς του

MDA

-7 /έκφρασης γονιδίου IL-24 περιλαμβάνουν θειώδες σουλινδάκ και Diclofenac. Το εύρημά μας αντιστοιχεί με προηγούμενες αναφορές που απέδειξαν ότι η αγωγή των ξενομοσχευμάτων ανθρώπινου όγκου πνεύμονα σε γυμνούς ποντικούς με Ad-

MDA

-7 εκτός από σουλινδάκη μειωμένη ανάπτυξη του όγκου πιο αποτελεσματικά από ό, τι Ad-

MDA

– 7 [50]. Επιπλέον, αυτά τα αποτελέσματα επιβεβαιώνουν τα προηγούμενα ευρήματα μας ότι απόπτωση επαγωγή του προ-αποπτωτικών κυτοκίνη

MDA

-7 /IL-24 μεσολαβεί επαγωγή GADD45 α και της έκφρασης και JNK γ δραστηριότητα σε άλλους τύπους καρκίνου [23]. Ενώ θειώδες σουλινδάκ και οι ίδιοι Diclofenac μπορεί να μην είναι οι ιδανικές φάρμακα για να προκληθεί

MDA

-7 /IL-24 και απόπτωσης σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών, και ιδιαίτερα Diclofenac προκαλεί πολλές αρνητικές επιπτώσεις σε ασθενείς που περιορίζουν τη χρήση της σε ασθενείς με καρκίνο , θα πρέπει να είναι εφικτό να παράγουν τροποποιημένες εκδόσεις αυτών των φαρμάκων που είναι πιο ισχυρές σε δραστηριότητες κατά του καρκίνου τους και με μειωμένες δυσμενείς και εκτός στόχου επιδράσεις. Πράγματι μια τροποποιημένη εκδοχή του σουλινδάκη έχει πρόσφατα αναφερθεί ότι είναι περισσότερο δραστικά έναντι καρκινικών κυττάρων χωρίς να αναστέλλει COX 1 και 2 [61].

Diclofenac έχει προηγουμένως δειχθεί ότι επάγει απόπτωση σε κόλον και καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων και να αναστέλλουν ανάπτυξη παγκρεατικού όγκου [62], [63]. Ωστόσο, δεν υπάρχουν αναφορές σχετικά με τη χρήση του σε καρκίνο των ωοθηκών. Εδώ, έχουμε αποδείξει ότι Diclofenac καθώς και θειώδες σουλινδάκ επάγουν απόπτωση και αναστέλλουν την ανάπτυξη του όγκου του καρκίνου των ωοθηκών. Αυτά τα ισχυρά δεδομένα ενισχύουν την έννοια της τα πιθανά οφέλη της θεραπείας με ΜΣΑΦ για τον καρκίνο των ωοθηκών.

Επίσης, εντοπίστηκαν ναπροξένη και Εμπσελέν ως μέτρια επαγωγείς της απόπτωσης και

MDA

-7 /IL-24 έκφραση σε ωοθηκών καρκινικά κύτταρα. Ενώ Naproxen βοηθά στην πρόληψη της ουροδόχου κύστεως και καρκινογένεση κόλον [64], Εμπσελέν έχει αποδειχθεί ότι μειώνει την τοξικότητα σισπλατίνης θεραπεία σε μοντέλα καρκίνου των ωοθηκών αρουραίων, ενίσχυση της δραστικότητας κατά του όγκου και τη βελτίωση της θνησιμότητας, νοσηρότητας και έκβαση [65]. Όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, έχουμε αναφέρει ότι η επαγωγή του

MDA

-7 /IL-24 με δομικά διαφορετικές NSAIDs είναι κρίσιμη για την επαγωγή απόπτωσης του στήθους, του προστάτη, των νεφρών και του στομάχου καρκινικών κυττάρων [23]. Ωστόσο, σε αυτή προηγούμενη μελέτη, ναπροξένη και Εμπσελέν είχε μόνο οριακά αποτελέσματα στην επαγωγή απόπτωσης. Στην έκθεση αυτή, παρατηρήσαμε διαφορετικές δραστηριότητες φάρμακο για ναπροξένη και Εμπσελέν. Εμπσελέν και Naproxen επαγόμενη απόπτωση και

MDA

-7 /IL-24 έκφραση σε καρκινικά κύτταρα των ωοθηκών και επίσης synergized με τις πιο ισχυρές NSAIDs, Diclofenac και θειώδες σουλινδάκ, γεγονός που υποδηλώνει πιθανή κλινική χρησιμότητα στη θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών.

Έχουμε δείξει στο παρελθόν ότι η αναστολή του NF-κΒ σε καρκινικά κύτταρα αυξάνει την απόπτωση, χωρίς την προώθηση

MDA

-7 /IL-24 παραγωγής [23]. Ένα από τα σημαντικότερα μεταγραφικής κυκλώματα εμπλέκονται στη φλεγμονή είναι η οδός ΝΡ-κΒ /ΙκΒ [66]. Περαιτέρω, ο ΝΡ-κΒ έχει εμπλακεί στην επιβίωση των κυττάρων του καρκίνου και να ξεφύγουν από προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο και ενεργοποιείται από χημειοθεραπευτικών παραγόντων σε καρκινικά κύτταρα [30], [31], [33]. Οι μεταλλάξεις σε διαφορετικά γονίδια του μονοπατιού ΝΡ-κΒ και συστατικώς δραστικό ΝΡ-κΒ που παρατηρείται συχνά σε διάφορους τύπους καρκίνου [33]. Πράγματι, τα κύτταρα του καρκίνου των ωοθηκών συχνά περιέχουν ενεργοποιημένα ΝΡ-κΒ πριν από τη θεραπεία και, ως εκ τούτου, αναμένεται να είναι ανθεκτικά στη χημειοθεραπεία

a priori

. 5′CTGTCTAGACAAAAACTTTGTTCTCATCGTGTCATCTCTTGAATGACACGATGAGAACAAAGGGGGATCTGTGGTCTCATACA-3′.

Animal