Αφηρημένο

Ιστορικό

Οι ουροποιητικού βιοδείκτες για την ανίχνευση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης περιορίζεται από ανεπαρκή ευαισθησία ή ειδικότητα. Εδώ θα αξιολογηθεί η διαγνωστική ακρίβεια της MCM5, ένα μυθιστόρημα βιοδείκτη κυτταρικού κύκλου της ανώμαλης ανάπτυξης, μεμονωμένα και σε συνδυασμό με NMP22.

Μέθοδοι

1677 διαδοχικούς ασθενείς υπό έρευνα για κακοήθεια του ουροποιητικού συστήματος προσλήφθηκαν για να μια προοπτική μελέτη παρατήρησης τύφλωσε. Όλοι οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε υπερηχογράφημα, ενδοφλέβια ουρογραφία, κυστεοσκόπηση, καλλιέργεια ούρων και κυτταρολογική ανάλυση. Μία ανοσοφθορομετρικές δοκιμασία χρησιμοποιείται για τη μέτρηση των επιπέδων MCM5 στο κελί ούρα ιζήματα. NMP22 ουροποιητικού επίπεδα προσδιορίστηκαν με την FDA-εγκεκριμένο κιτ NMP22® Test.

Αποτελέσματα

καρκίνους Ουρογεννητικού οδού εντοπίστηκαν στη 210/1564 (13%) των ασθενών με αποτέλεσμα MCM5 και 195/1396 (14%) ασθενείς με NMP22 αποτέλεσμα. Κατά την δοκιμασία cut-σημείο όπου η ευαισθησία και η ειδικότητα ήταν ίσα, η δοκιμή MCM5 ανιχνεύεται πρωτοβάθμιας και υποτροπιάζουσες καρκίνους της ουροδόχου κύστης με 69% ευαισθησία (95% διάστημα εμπιστοσύνης = 62-75%) και το 93% αρνητική προγνωστική αξία (95% CI = 92- 95%). Η περιοχή κάτω από της χαρακτηριστικής καμπύλης για MCM5 ήταν 0,75 (95% CI = 0,71-0,79) και 0,72 (95% CI = 0,67 – 0,77) για NMP22. Είναι σημαντικό ότι, σε συνδυασμό με την MCM5 NMP22 προσδιορίζονται 95% (79/83? 95% CI = 88-99%) από δυνητικά απειλητικές για τη ζωή διαγνώσεις (π.χ. βαθμού 3 ή καρκίνωμα in situ ή το στάδιο ≥pT1) με υψηλή ειδικότητα (72%, 95% CI = 69-74%).

Συμπεράσματα

Ο ανοσοπροσδιορισμός MCM5 είναι μια μη επεμβατική εξέταση για τον εντοπισμό ασθενών με ουροφόρων καρκίνους με παρόμοια ακρίβεια με την εγκεκριμένη από την FDA NMP22 ELISA Test Kit. Ο συνδυασμός της MCM5 συν NMP22 βελτιώνει την ανίχνευση της UCC και προσδιορίζει το 95% των κλινικά σημαντική νόσο. Οι δοκιμές ενός αναπτυχθεί εμπορικά δοκιμασία MCM5 κατάλληλο για εργαστηριακές τελικό χρήστη, παράλληλα με NMP22 απαιτούνται για την αξιολόγηση πιθανή κλινική χρησιμότητα τους στη βελτίωση της διάγνωσης και περίθαλψης επιτήρησης μονοπάτια

Παράθεση:. Kelly JD, Dudderidge TJ, Wollenschlaeger Α, Okoturo O, Burling Κ, Tulloch F, et al. (2012) καρκίνο της ουροδόχου κύστης Διάγνωση και ταυτοποίηση των κλινικά σημαντική νόσο με Ακράτεια Ανίχνευση Συνδυασμένη της MCM5 και Πυρηνικής Matrix Πρωτεΐνη 22. PLoS ONE 7 (7): e40305. doi: 10.1371 /journal.pone.0040305

Επιμέλεια: Clive shiff, Johns Hopkins University, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 23, Φεβρουαρίου, 2012? Αποδεκτές: 4 Ιουνίου του 2012? Δημοσιεύθηκε: 9 Ιούλ 2012

Copyright: © 2012 Kelly et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από Cancer Research UK (αριθμός επιχορήγηση C428 /A3441 με KS και GHW). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνωμα ουροθηλιακά κυττάρων (UCC) της ουροδόχου κύστης είναι το 4ο πιο κοινή μορφή καρκίνου στις ΗΠΑ, με κατ ‘εκτίμηση 73.510 νέες περιπτώσεις και 14.880 θάνατοι από καρκίνο της ουροδόχου κύστης, το 2012 [1]. Κυστεοσκόπηση είναι η τυπική μέθοδος ανίχνευσης όγκου κύστης, όμως είναι μια επεμβατική, άβολα και δαπανηρή διαδικασία η οποία οδηγεί σε λοίμωξη του ουροποιητικού σε έως και 5% των περιπτώσεων [2]. Ανίχνευση καρκίνου της ουροδόχου κύστης με ένα μη επεμβατικό τεστ καρκινικός δείκτης θα μπορούσε δυνητικά να βελτιώσει τη διαχείριση της νόσου με την αύξηση της ακρίβειας και μειώνοντας τη νοσηρότητα που συνδέεται με την τρέχουσα διαγνωστική και την επιτήρηση μονοπάτια. Μέσω της μειωμένης συχνότητας των κυστεοσκοπήσεων, βελτιώσεις στην ποιότητα της ζωής και την αποδοτικότητα του κόστους του ασθενούς θα μπορούσε να δει.

Ακράτεια βιοδεικτών για την ανίχνευση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης υπόσχονται πολλά και ενώ πολλές δείκτες έχουν κανονιστικό καμία έγκριση έχει γίνει αποδεκτή ως πρότυπο διαγνωστική διαδικασία [3]. Ακράτεια κυτταρολογία παραμένει η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη λόγω της υψηλής εξειδίκευσης αν και φτωχή ευαισθησία. Οι νέες τεχνολογίες και βιοδείκτες, ωστόσο, έχουν τη δυνατότητα να βελτιώσουν τη διαγνωστική ακρίβεια, με τις πιο αποτελεσματικές διαγνωστικές και επιτήρησης των στρατηγικών για την ημερομηνία χρησιμοποιώντας τη φωτοδυναμική κυστεοσκόπηση και βιοδείκτες [4]. πρωτεΐνη πυρηνικής μήτρας 22 (NMP22), για παράδειγμα, είναι μια πυρηνική πρωτεΐνη μιτωτικής συσκευής που ρυθμίζει το διαχωρισμό χρωματίδων και κόρη κυττάρων [5], [6] και έχει αναδειχθεί ως μία από τις πολλά υποσχόμενες ουροποιητικού βιοδείκτες για UCC [3]. Η FDA-εγκριθεί, εργαστήριο με βάση ποσοτικούς NMP22® Test Kit ανοσολογική δοκιμή (Matritech, Freiburg, Γερμανία) και μια ποιοτική δοκιμασία point-of-care, NMP22® BladderChek® (Matritech? Σύμβολο ® παρέλειψε στη συνέχεια), είναι τώρα διαθέσιμο για κλινική χρήση . Ωστόσο, αν και τα επίπεδα ουρικής NMP22 αυξημένα σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης, νεκροί και πεθαίνουν ουροθηλίου κύτταρα σε πολλές μη-κακοήθεις και φλεγμονωδών καταστάσεων μπορεί επίσης να απελευθερώσει NMP22, μειώνοντας έτσι την ειδικότητα. Επιπλέον, ένα ευρύ φάσμα σημειώνονται στην απόδοση της δοκιμής έχει αναφερθεί μεταξύ των διαφόρων μελετών που χρησιμοποιούν NMP22, με ευαισθησία που κυμαίνονται από 33% έως 100% και ειδικότητα από 40% έως 93% [4].

Η περιορισμένη ακρίβεια των διαθέσιμων βιοδείκτες, μαζί με δικά τους έξοδα, έχει ως εκ τούτου περιορίζεται εισαγωγή του ουροποιητικού βιοδεικτών στην κλινική πράξη. Ως εκ τούτου, εξακολουθεί να υπάρχει επείγουσα ανάγκη για την ταυτοποίηση νέων βιοδεικτών που θα μπορούσαν να βελτιώσουν τη διαγνωστική ακρίβεια, είτε όταν χρησιμοποιούνται μεμονωμένα ή σε συνδυασμό με υπάρχουσες δοκιμές βιοδεικτών [7].

Τα μηχανήματα για την έναρξη της αντιγραφής του DNA αντιπροσωπεύει μία τελική και κρίσιμο βήμα στην ελέγχου της ανάπτυξης προς τα κάτω του συμπλόκου περιττή οδών ογκογονικής σηματοδότησης και είναι επομένως μια δυνητικά ελκυστική διαγνωστική και θεραπευτική στόχος [8]. Οι πρωτεΐνες της οικογένειας συντήρηση μικροχρωμόσωμα (Mcm) (Mcm2-7, που αναφέρονται συλλογικά ως MCM), συναρμολογούνται σε εξαμερή συμπλέγματα που έχουν δραστικότητα DNA ελικάσης, η οποία είναι απαραίτητη για την έναρξη της σύνθεσης του DNA [9], [10]. Σε συστήματα οργάνων επιθηλιακά επένδυση πρωτεΐνες MCM γίνει απορυθμισμένη και υπερεκφράζεται σε υπερπολλαπλασιαστικές δυσπλαστικά (preinvasive) και κακοήθεις καταστάσεις, [8], [11] – [13]. Πράγματι ο βαθμός της έκφρασης του MCM2 και η MCM5 έχει δειχθεί να προβλέψει επανάληψη και θανάτου σε ασθενείς με καρκίνο της ουροδόχου κύστης [14] – [16]. έκφραση πρωτεΐνης Mcm2-7 σε φυσιολογικό επιθήλιο περιορίζεται στα βασικά διαμερίσματα στελέχους /διέλευσης και απουσιάζει από επιφανειακά στρώματα ως κύτταρα εκδίδει πλήρως διαφοροποιημένο φαινότυπο. Σε προκακοήθων /δυσπλαστικών επιθηλιακών αλλοιώσεων υπάρχει μια επέκταση της πολλαπλασιαστικής διαμερίσματος συζευγμένο με συνελήφθη διαφοροποίηση, με αποτέλεσμα την εμφάνιση της ποδηλασίας MCM-θετικών κυττάρων σε επιφανειακές στιβάδες. Κατά συνέπεια, η ανίχνευση των απολέπιση MCM-θετικών κυττάρων σε κλινικά δείγματα παρέχει μία δυνητικά ευαίσθητη μέθοδο για την ανίχνευση και preinvasive διηθητικού καρκίνου [8], [17], [18]. Σε μια απόδειξη της αρχής μελέτη στο παρελθόν έδειξαν ότι τα αυξημένα επίπεδα MCM5 σε κύτταρα στα ιζήματα στα ούρα είναι προγνωστική της παρουσίας του καρκίνου της ουροδόχου κύστης [19].

Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογήσει MCM5 ως βιοδείκτη για την ανίχνευση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης και μόνο, σε σύγκριση και σε συνδυασμό με NMP22. Ο υποψήφιος τύφλωσε παρατήρησης δοκιμή χρησιμοποίησε μια ανοσοφθορομετρικές δοκιμασία για τη μέτρηση MCM5 και η FDA-εγκριθεί NMP22 Test Kit.

Μέθοδοι

Θέματα Μελέτη

Ενιαία ακυρώνεται δείγματα ούρων ελήφθησαν από 1677 ασθενείς παρακολουθούν μια διαγνωστική κλινική μία στάση για τη διερεύνηση της αιματουρίας. Η διάγνωση ιδρύθηκε μετά από αξιολόγηση από κυστεοσκόπηση, ανώτερη απεικόνιση του ουροποιητικού συστήματος, κυτταρολογική εξέταση ούρων και του πολιτισμού. Ιστολογική επιβεβαίωση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης στις επόμενες trans-ουρήθρας εκτομή ήταν το πρότυπο αναφοράς και όλοι οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν για διάστημα έξι μηνών από τη στιγμή της αρχικής έρευνας. Οι ασθενείς με ιστορικό πρόσφατης παθήσεις του ουροποιητικού συστήματος οργάνων ή χειρουργικής επέμβασης εντός των προηγούμενων δύο εβδομάδων αποκλείστηκαν. Επίσης αποκλείονται οι ασθενείς με ιστορικό κακοήθειας ταυτόχρονη ή άλλη κακοήθεια εντός πέντε ετών πριν από τη μελέτη. Με αυτές τις εξαιρέσεις όλοι οι διαδοχικοί ασθενείς που συμμετέχουν για την έρευνα κατά τη διάρκεια της περιόδου της μελέτης προσεγγίστηκαν για την πρόσληψη σε δίκη

Τα δείγματα ούρων χωρίστηκαν εξίσου για:. (I) ανάλυση ούρων και μικροβιολογική καλλιέργεια, (ii) κυτταρολογική ανάλυση, (iii ) μέτρηση ΜΟΜ5 και (iv) NMP22 μέτρησης. Οι ασθενείς υποβλήθηκαν σε ανώτερη απεικόνιση του ουροποιητικού συστήματος, συμπεριλαμβανομένων υπερηχογράφημα και ενδοφλέβια ουρογραφία. Οι άρρενες ασθενείς εξετάστηκαν με δακτυλική εξέταση για την παρουσία της κλινικά ανιχνεύσιμης προστατικής νόσου. Του ειδικού προστατικού αντιγόνου (PSA) δεν έλαβε την εντολή και τα επίπεδα PSA ελέγχθηκαν σε ένα ποσοστό των περιπτώσεων στους οποίους ο καρκίνος ήταν ύποπτος ή ο οποίος ζήτησε την εξέταση. Αν τα επίπεδα του PSA ήταν αυξημένα στους ασθενείς προσφέρθηκε trans-ορθού υπερήχους καθοδηγούμενη πυρήνα βιοψίες του προστάτη. Συνήθως όλες οι δοκιμές αιματουρία ολοκληρώθηκαν μέσα σε 24 ώρες και μέσα σε δύο εβδομάδες για όλους τους ασθενείς. Τα κλινικά δεδομένα εισήχθησαν σε μια βάση δεδομένων μελλοντικά πριν από ΜΟΜ5 και NMP22 ανάλυση. Το πρότυπο αναφοράς για την ανίχνευση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης ήταν παθολογική επιβεβαίωση μετά από trans-ουρήθρας εκτομή.

Τα δείγματα ούρων αναλύθηκαν με τυφλό τρόπο για την ανίχνευση MCM5, NMP22 δοκιμές και αναλύσεις κυτταρολογική. Με την ολοκλήρωση της μελέτης, μπορούμε αποκωδικοποιημένα τα δεδομένα ασθενούς και συγκρίνεται ανοσοφθορομετρικές σήματα MCM5 και NMP22 αποτελέσματα με κλινικές διαγνώσεις βασίζονται σε κυστεοσκόπηση, βιοψία ιστολογία, απεικόνιση και κυτταρολογία των ούρων. Στάσης και ταξινόμηση των κακοήθων όγκων έγινε από έναν ειδικό uro-παθολόγος χρησιμοποιώντας το ΤΝΜ (όγκος-node-μετάσταση) σύστημα ταξινόμησης [20] και το 1973 του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (ΠΟΥ) σύστημα ταξινόμησης, αντίστοιχα [21].

Ηθική Δήλωση

η δεοντολογική έγκριση ελήφθη από τις κοινές UCL /UCLH επιτροπές για την ηθική των Ανθρωπίνων Έρευνας (04 /Q0502 /1), Επιτροπή Addenbrooke Νοσοκομείο Δεοντολογίας (00/236) και το Newcastle και της Βόρειας Tyneside Έρευνας Επιτροπή ηθικής και Δεοντολογίας (2002/161). Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες.

Ούρα Κυτταρολογίας

Τα δείγματα ούρων (50 mL) υποβλήθηκαν σε φυγοκέντρηση στα 1500 g για 5 λεπτά. Cytospin παρασκευάσματα παρασκευάστηκαν επί επικαλυμμένων διαφάνειες πολυ-L-λυσίνη χρησιμοποιώντας σωλήνες cytospin Shandon και κυτταροφυγόκεντρο σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (Thermo Shandon, Runcorn, UK). Τα δείγματα μονιμοποιήθηκαν σε βιομηχανικό οινόπνευμα και χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας την τεχνική Παπανικολάου για επιχρίσματα [20]. Τα δείγματα αξιολογήθηκαν από ένα κυτταρολόγο σύμβουλο με εμπειρία στην ουρο-παθολογία. Κυτταρολογικό βαθμολογήθηκε ως θετική εάν ταυτοποιήθηκαν άτυπη ή κακοήθη κύτταρα.

NMP22 Δοκιμασία

NMP22 μετρήθηκε με ένζυμο-συνδεδεμένη ανοσορροφητική δοκιμασία (ELISA) με τη χρήση του FDA-εγκριθεί Kit NMP22 δοκιμών που παράγονται από Matritech (Freiburg, Γερμανία). Η δοκιμασία εκτελείται σε ένα αυτοματοποιημένο 2000 επεξεργαστή ELISA Dade Behring ΒΕΡ (τώρα Τομέα Υγείας της Siemens). Όλα τα αντιδραστήρια, οι βαθμονομητές και οι έλεγχοι ήταν προετοιμασμένοι όπως συνιστάται από τον κατασκευαστή. Όλα τα πρότυπα, οι έλεγχοι ποιότητας και τα δείγματα αναλύθηκαν εις διπλούν. Τα αποτελέσματα υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό επεξεργασίας των δεδομένων που παρέχεται με το ΒΕΡ 2000. Το κατώτερο όριο ανίχνευσης της δοκιμασίας βρέθηκε να είναι 2 U /mL. Τα δείγματα με συγκεντρώσεις μεγαλύτερες από την κορυφή πρότυπο επαναλήφθηκαν μετά από αραίωση σε ρυθμιστικό δοκιμασίας. Η μεταξύ παρτίδα συντελεστής μεταβλητότητας ήταν 13,3% σε συγκέντρωση 11,3 U /mL, 8,8% στους 34 U /mL και 9,5% σε 65 U /mL. Ένα αποτέλεσμα για την NMP22 δοκιμή ήταν διαθέσιμα το 1396 ασθενείς, συμπεριλαμβανομένων 195 ασθενών (14%) με ένα ουροθηλιακό όγκο.

ανοσοφθορομετρικές Δοκιμασία για τη μέτρηση MCM5 επίπεδα στα ιζήματα ούρων

MCM5 μετρήθηκε με δύο -site ανάλυση χρόνου ανοσοδοκιμασία φθορισμού στον αναλυτή AutoDELFIA (Perkin Elmer). Όλα τα πρότυπα, οι έλεγχοι ποιότητας και τα δείγματα ούρων παρασκευάστηκαν και επεξεργάστηκαν όπως περιγράφεται [19]. πλάκες μικροτιτλοδοτήσεως Nunc Maxisorp (Perkin Elmer) επικαλύφθηκαν με μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού 12A7 αντι-ανθρώπινης MCM5 [19] σε μία συγκέντρωση 8 mg /L από Dako UK Ltd (Ely, Ηνωμένο Βασίλειο). Μια μεγάλη παρτίδα (περίπου 200) των πλακών παρασκευάστηκαν με Dako και χρησιμοποιήθηκε σε όλη τη μελέτη. Οι πλάκες παρελήφθησαν προ-αποκλειστεί και έτοιμο για χρήση. Ένα μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού δεύτερο αντι-ανθρώπινο MCM5 (4Β4) [19] συζεύχθηκε με ευρώπιο με Dako. Το ευρώπιο-επισημασμένο αντίσωμα ήταν σε μια συγκέντρωση 1.75 mg /mL. κύτταρα HeLa S3 αγοράστηκαν από το εμπόριο (Προστασία της Υγείας Οργανισμό Πολιτισμού Συλλογές, Porton Down, Ηνωμένο Βασίλειο) και η δοκιμασία βαθμονομηθεί με επεξεργασία πρότυπα HeLa κυττάρων σε συγκέντρωση 150000 κυττάρων /φρέαρ. Μια σειρά προτύπων που εκτείνονται σε εύρος συγκέντρωσης 150000 να 1500 κύτταρα /φρεάτιο παρασκευάστηκαν με αραίωση του πρότυπου απόθεμα στο αλατούχο φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα που περιέχει 0,04% SDS και 0,02% αζίδιο του νατρίου. δείγματα ποιοτικού ελέγχου που περιέχει τέσσερις διαφορετικές συγκεντρώσεις κυττάρων HeLa αναλύθηκαν στην αρχή και στο τέλος κάθε παρτίδας. Το πρωτόκολλο για την δοκιμασία AutoDELFIA ήταν ως ακολούθως. 50 μL προτύπου, δείγματος ή ελέγχου ποιότητας προστέθηκε (εις διπλούν) στην πλάκα μικροτιτλοδότησης επικαλυμμένα με αντίσωμα, μαζί με 100 μL DELFIA multibuffer (Perkin Elmer κωδικός προϊόντος 1380-3614). Η πλάκα επωάστηκε για 2.5 ώρες με συνεχή ανάδευση. Η πλάκα στη συνέχεια πλύθηκαν τέσσερις φορές με ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης DELFIA (Perkin Elmer κωδικός προϊόντος B117-100). αντίσωμα ανίχνευσης Ευρώπιο-επισημασμένο 4Β4 αραιώθηκε 1:1,800 σε DELFIA multibuffer. 100 μL του αραιωμένου αντισώματος προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο και η πλάκα επωάστηκε για περαιτέρω 4 ώρες με συνεχή ανάδευση. Η πλάκα στη συνέχεια πλύθηκε έξι φορές με ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης DELFIA και 200 ​​διαλύματος ενίσχυσης DELFIA μL (Perkin Elmer κωδικός προϊόντος B118-100) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο. Η πλάκα επωάστηκε σε έναν αναδευτήρα για άλλα 10 λεπτά. Η ποσότητα ευρώπιο σε κάθε φρεάτιο μετρήθηκε σε αναγνώστη πλάκας AutoDELFIA. Τα δεδομένα μεταφέρθηκαν αυτόματα σε ένα πακέτο λογισμικού MultiCalc (Perkin Elmer), το οποίο χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία μιας καμπύλης βαθμονόμησης και τον υπολογισμό της συγκέντρωσης των αγνώστων. Το κατώτερο όριο ανίχνευσης της δοκιμασίας βρέθηκε να είναι 1000 κύτταρα /φρεάτιο. Τα δείγματα με συγκεντρώσεις μεγαλύτερες από την κορυφή πρότυπο επαναλήφθηκαν μετά από αραίωση στο πρότυπο ρυθμιστικό διάλυμα αραίωσης. Η μεταξύ παρτίδα συντελεστής μεταβλητότητας ήταν 11,5% σε μια συγκέντρωση από 2648 κύτταρα /φρεάτιο και 11,0% στα 26.382 κύτταρα /φρεάτιο. Ένα αποτέλεσμα για την ανοσοφθορομετρικές δοκιμή MCM5 ήταν διαθέσιμο το 1564 ασθενείς, συμπεριλαμβανομένων 210 ασθενών (13%) με ένα ουροθηλιακό όγκο.

Στατιστική Ανάλυση

Η ευαισθησία και η ειδικότητα χαρακτηριστικά της MCM5 και NMP22 για την ανίχνευση της UCC της ουροδόχου κύστης παρουσιάζονται ως λειτουργικές δέκτη χαρακτηριστικό (ROC) καμπύλη. Η περιοχή κάτω από την καμπύλη ROC μη-παραμετρική χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση της συνολικής διαγνωστική απόδοση κάθε δοκιμής. Τρεις cut-σημεία χρησιμοποιήθηκαν για να αποδείξουν την απόδοση δοκιμής υπό διαφορετικές συνθήκες για MCM5 ως εξής: (i) το κατώτερο όριο ανίχνευσης της δοκιμασίας, όπου η ευαισθησία της δοκιμασίας ήταν μέγιστη (1000 κύτταρα /φρεάτιο) (ii) την ευαισθησία ίση με την ειδικότητα (2150 κύτταρα /φρεάτιο) και (iii) 95% ειδικότητα (8500 κύτταρα /φρεάτιο). Αρνητική προγνωστική αξία (NPV) και θετική προγνωστική αξία (PPV) έχουν επίσης εκτιμηθεί. Μια ακριβής 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI) για κάθε τμήμα, συμπεριλαμβανομένων ευαισθησία, ειδικότητα και προγνωστική αξία για MCM5 και NMP22, προήλθε υποθέτοντας μια διωνυμική κατανομή. Συνιστώμενο από τον κατασκευαστή cut-σημείο για NMP22, 10 U /ml χρησιμοποιήθηκε για όλες τις αναλύσεις, εκτός αν ορίζεται διαφορετικά.

ψευδώς θετικά ποσοστά (FPR) για την MCM5 και NMP22 δοκιμές σε ασθενείς με καλοήθη διάγνωση συγκρίθηκαν με σαφή κανονική ασθενείς χρησιμοποιώντας Chi-squared test. Η ΜΟΜ5 και NMP22 τιμές συνοψίστηκαν με τη χρήση διάμεσοι και ενδοτεταρτημοριακό εύρος (IQR) και σε σύγκριση με τις συνήθεις ασθενείς σαφές χρησιμοποιώντας το Mann-Whitney U-test. Για κάθε βιοδεικτών, η ανάλυση ROC επαναλήφθηκε για τους άνδρες και τις γυναίκες ξεχωριστά και οι περιοχές κάτω από τις καμπύλες ROC συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας Chi-τετράγωνο τεστ με ένα βαθμό ελευθερίας. Ανάλυση ROC είχε επίσης αναλάβει την υποχρέωση να εξετάσει την ευαισθησία από τα κύρια αποτελέσματα στον αποκλεισμό των ατόμων με καλοήθη νόσο. Οι τιμές των ουροφόρων βιοδεικτών για ασθενείς με διαφορετικές ποιότητες όγκου και στάδια και φυσιολογικούς ασθενείς συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας Mann-Whitney U-τεστ μεταξύ γειτονικών κατηγοριών, και χρησιμοποιώντας το τεστ Jonckheere-Terpstra για την τάση των διαφόρων βαθμίδων και στάδια. Η Chi-squared test για γραμμικά με γραμμική συσχέτιση χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση των αποδεικτικών στοιχείων για την εξέλιξη των ψευδώς θετικά ποσοστά από την αύξηση της ποιότητας του όγκου και το στάδιο. Η ευαισθησία προσδιορίστηκε για ουρική κυτταρολογία συγκρίθηκε με εκείνη της ανοσοφθορομετρικές δοκιμή MCM5 χρησιμοποιώντας τεστ McNemar για ζεύγη αναλογίες. Η ακρίβεια ενός βιοδείκτη ορίσθηκε ως η αξία της ευαισθησίας και της ειδικότητας, όπου η τομή-σημείο την προϋπόθεση ότι αυτές είναι ίσες. Η ακρίβεια των δύο δοκιμές βιοδεικτών συγκρίθηκε χρησιμοποιώντας το τεστ του McNemar. δοκιμή του McNemar χρησιμοποιήθηκε επίσης για να συγκριθεί η ευαισθησία της κυτταρολογίας με εκείνη του κάθε βιοδεικτών στο cut-σημεία που παρέχουν την ίδια εξειδίκευση όπως παρατηρείται για κυτταρολογία. Spearman συσχέτιση χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση του βαθμού στον οποίο οι βιοδείκτες ήταν χαρακτηριστική στην περίπτωση UCC και στην κανονική ομάδες ελέγχου. Όλες οι στατιστικές δοκιμασίες ήταν αμφίδρομες, και ένα επίπεδο 5% χρησιμοποιήθηκε για να δείξει στατιστική σημαντικότητα.

Ένα πολυ-ROC ανάλυση [22] έγινε για να προσδιοριστεί η πρόσθετη απόδοση που προκύπτει από τη χρήση των δύο βιοδείκτες μαζί. Στην ανάλυση αυτή, NMP22 κρατήθηκε σταθερό στη συνιστώμενη cut-σημείο της 10 U /mL και MCM5 συμπεριλήφθηκε με διαφορετικό cut-σημείο. Έθεσε τις αξίες του κάθε δείκτη θα μπορούσε να προβλέψει θετικό για UCC. Η πρόσθετη απόδοση των MCM5 έναντι εκείνης που λαμβάνεται από NMP22 (10 U /mL cut-σημείο) εκτιμήθηκε με τη χρήση της μη παραμετρικής περιοχή κάτω από την καμπύλη ROC πολλαπλών, και αξιολογήθηκαν για στατιστική σημαντικότητα χρησιμοποιώντας ένα χ τετράγωνο με έναν βαθμό ελευθερίας. Για να καταδειχθεί απόδοση της δοκιμής, MCM5 κατόπιν καθορίζεται σύμφωνα με την cut-σημείο που προβλέπεται ίσης ευαισθησίας και εξειδίκευσης στην καμπύλη πολλαπλών ROC από τη χρήση των συνδυασμένων δεικτών. Αυτή η ακρίβεια δοκιμής συνδυασμό συγκρίθηκε με την ακρίβεια της δοκιμής παρέχονται από τη χρήση των NMP22 και μόνο με τη χρήση τεστ του McNemar.

Αποτελέσματα

Δημογραφικά και Clinical Investigation

Τα δημογραφικά χαρακτηριστικά, τον τρόπο παρουσίασης , τελική διάγνωση, και του βαθμού του όγκου και το στάδιο για τους 1677 ασθενείς που συμπεριλήφθηκαν σε αυτή τη μελέτη συνοψίζονται στον πίνακα 1. Ο πληθυσμός της μελέτης ήταν κυρίως άνδρες (62%) και είχαν μέση ηλικία 60,7 έτη (τυπική απόκλιση, 16,3 έτη). Από αυτούς με μια καταγεγραμμένη παρουσίαση, το 54% είχε ορατά αιματουρία και 46% είχαν μη ορατές αιματουρία. Οι ασθενείς αυτοί είχαν πρόσφατα παρουσιάζοντας περιπτώσεις, αν και τέσσερις ασθενείς που προσλαμβάνονται, αργότερα αποκάλυψε μια προηγούμενη ιστορία της UCC. Έρευνες είχαν παραλειφθεί σε μια αναλογία των περιπτώσεων ως εξής: κυστεοσκόπηση δεν πραγματοποιήθηκε σε 20 ασθενείς, υπερηχογράφημα σε 186 ασθενείς και ενδοφλέβια ουρογραφία σε 223 ασθενείς. Ούρα κυτταρολογική εξέταση ήταν διαθέσιμος για 109 ασθενείς λόγω της ανεπαρκούς συλλογής δείγματος ή, εναλλακτικά, επειδή η δοκιμή δεν αναλήφθηκε. Ούτε υπερηχογράφημα ούτε ενδοφλέβια ουρογραφία πραγματοποιήθηκε σε 77 ασθενείς. Όλοι οι ασθενείς είχαν μια κλινική διάγνωση που τους αποδίδεται από κλινικό ιατρό τους. Τα δεδομένα δεν συλλέχθηκαν επίσημα για τις δυσμενείς επιπτώσεις του προτύπου κλινικές δοκιμές και χωρίς δυσμενείς επιπτώσεις της ακράτειας δοκιμών για MCM5 ή NMP22 καταγράφηκαν.

Η

Μετά την κλινική έρευνα, οι όγκοι του ουροποιητικού συστήματος εντοπίστηκαν σε ασθενείς 222/1677 (13%). Σχεδόν όλοι οι όγκοι ήταν UCCS, αλλά, έρευνα προσδιόρισε επίσης μία περίπτωση αδενοκαρκινώματος και δύο περιπτώσεις πλακώδες καρκίνωμα της ουροδόχου κύστης. Οι UCCS ήταν κυρίως ουροδόχου κύστης όγκων, με μόνο επτά ασθενείς με όγκους του ανώτερου ουροποιητικού. Οι UCCS άνω σωλήνα που περιλαμβάνεται μαζί με τους όγκους της ουροδόχου κύστης για την ανάλυση που αναφέρεται παρακάτω. Οι διαγνώσεις στους υπόλοιπους ασθενείς συμπεριλαμβάνονται άλλες κακοήθειες, καλοήθεις αλλοιώσεις ή κύστεις των νεφρών, της καλοήθους φλεγμονώδεις και συγγενείς παθήσεις, νεφρολιθίαση, καλοήθης υπερπλασία του προστάτη και νεφρολογικές παθήσεις. Οι διαγνώσεις που παρατίθενται στον Πίνακα S1. Ως συστατικό της διαγνωστικής οδού, του ουροποιητικού κυτταρολογίας είχε ευαισθησία 9% (95% CI, 5-14%? Συμπεριλαμβανομένων των άτυπων κυτταρολογίας ως θετική), η ειδικότητα του 88% (95% CI, 86-89%) και PPV της 10% (95% CI, 7-15%).

ΜΟΜ5 και απόδοση NMP22 Test

Η δοκιμή ΜΟΜ5 διακρίσεις, με υψηλή εξειδίκευση και ευαισθησία, μεταξύ των ασθενών με και χωρίς καρκίνο της ουροδόχου κύστης, όπως καταδεικνύεται από την μεγάλη περιοχή κάτω από την καμπύλη ROC (AUC) (0.75 [95% CI = 0,71-0,79]) (Σχήμα 1), στατιστικά σημαντικά μεγαλύτερη από την περιοχή που ανέλαβε η μηδενική υπόθεση (0,5? Ρ & lt? 0.001) και με βάση την 210 και 1354 ασθενείς, αντίστοιχα με και χωρίς UCC.

Η

Η ευαισθησία, η ειδικότητα, και θετική και αρνητική προγνωστική αξία (PPV και NPV) για MCM5 φαίνονται στον πίνακα 2. Η ανάλυση cut-σημείο (cut λιωθούν αντιστοιχούν σε (i) κατώτερο όριο ανίχνευσης της ανάλυσης? (ii) όπου η ευαισθησία είναι ίσο με ειδικότητα, και (iii) ειδικότητα 95% για όλους τους ασθενείς που εξετάστηκαν), έδειξε ένα ευρύ φάσμα επιπέδων απόδοσης δοκιμής (Πίνακας 2) . Στο χαμηλότερο όριο ανίχνευσης της δοκιμασίας, η δοκιμασία είχε το 80% (167/210) (95% CI = 73-85%) ευαισθησία και 20% (167/846) (95% CI = 17-23%) PPV. Όταν η ευαισθησία είναι ίση με την ειδικότητα, η δοκιμή είχε 69% (145/210) (95% CI = 62-75%) ευαισθησία και 26% (145/565) (95% CI = 22-30%) PPV. Στο 95% ειδικότητα (1286/1354), η δοκιμή είχε 42% (89/210) (95% CI = 36-49%) ευαισθησία και 57% (89/157) (95% CI = 49-65%) PPV .

Η

Η NMP22 δοκιμή διακρίσεις με υψηλή εξειδίκευση και ευαισθησία, όπως αποδεικνύεται από το μεγάλο AUC (0,72 [95% CI = 0,67 – 0,77]? μηδενική υπόθεση [0,5? P & lt? 0.001] (Σχήμα 1) ) και με βάση 195 και 1201 ασθενείς αντίστοιχα με και χωρίς UCC. Τα ευαισθησία, ειδικότητα, και θετική και αρνητική προγνωστική αξία για NMP22 στη συνιστώμενη 10 U /ml σημείων κοπής φαίνεται στον Πίνακα 2. Ευαισθησία ήταν 53% (104/195) (95% CI = 46-60%) και PPV 36% (104/291) (95% CI = 30-42%).

για να αξιολογηθεί η απόδοση της δοκιμής σε ασθενείς με διάφορα στάδια και τους βαθμούς της νόσου, το True Positive Rate (TPR) ήταν υπολογίζεται για MCM5 (στα διάφορα cut-σημεία), NMP22 και κυτταρολογική εξέταση για τους μυς επεμβατική vs μη μυών επεμβατική (Πίνακας S2) και των διαφόρων βαθμίδων (Πίνακας S3). απόδοση Test βελτιώθηκε για όλες τις δοκιμές σε υψηλότερο στάδιο και βαθμό κατηγορίες

Όταν η ειδικότητα του NMP22 (cut-σημείο 12.1) ήταν η ίδια με εκείνη των θετικών κυτταρολογίας (88%? 989/1128)., η ευαισθησία του NMP22 ήταν σημαντικά υψηλότερη (P & lt? 0.001) (51%? 91/177 έναντι 8%? 14/177). Στην περίπτωση που η ειδικότητα της MCM5 (5150-κύτταρο cut-σημείο) ήταν η ίδια με εκείνη του κυτταρολογίας (87%? 1109/1271) η ευαισθησία της MCM5 ήταν σημαντικά υψηλότερη (Ρ & lt? 0.001) (52%? 100/193 έναντι 9% ? 17/193)

βιοδεικτών False Positive Ανάλυση

τα ψευδώς θετικά αποτελέσματα σε 400/1301 (31%) των σαφών κανονική και καλοήθεις ασθενείς διάγνωσης με το τεστ MCM5 στο 2150-κυττάρων. cut-σημείο. Υπήρχε ένα σημαντικά υψηλότερο ποσοστό των ψευδώς θετικά αποτελέσματα σε γυναίκες ασθενείς, 38% (200/520) σε σύγκριση με τους άνδρες 26% (200/781) (P & lt? 0.001). Ακράτεια επίπεδα ΜΟΜ5 ήταν επίσης σημαντικά υψηλότερα στην κανονική /καλοήθη γυναίκες σε σύγκριση με τους άνδρες (μέση τιμή 1560 κύτταρα /φρεάτιο [IQR = & lt? 1.000 – 3.675 κύτταρα /φρεάτιο] vs μεσαίο & lt? 1000 κύτταρα /φρεάτιο [IQR = & lt? 1000-2180 κύτταρα /καλά], P & lt? 0.001). Επιπλέον, σε σύγκριση με φυσιολογικούς ασθενείς, εκείνοι με, ουρόλιθων είχαν σημαντικά υψηλότερο ποσοστό ψευδώς θετικών (44% [47/106] έναντι 30% [201/661], P = 0,004) και τα υψηλότερα επίπεδα ουρικής πρωτείνης MCM5 (διάμεσος 1840 κύτταρα /φρεάτιο [& lt? 1000-3963 κύτταρα /φρεάτιο] vs 1040 κύτταρα /φρεάτιο [& lt? 1000-2645 κύτταρα /φρεάτιο], Ρ & lt? 0,001? Πίνακας 3). Δεν υπήρξε καμία ένδειξη ότι υπάρχει συσχετισμός μεταξύ της ποσοστό ψευδώς θετικών και οποιαδήποτε από τις άλλες ομάδες, συμπεριλαμβανομένων καλοήθων φλεγμονωδών καταστάσεων και της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη. Στα καθαρά φυσιολογικό και καλοήθεις ομάδες ασθενών δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές (Ρ = 0,99) στα επίπεδα NMP22 μεταξύ αρσενικών και θηλυκών. Ένα έθεσε σήμα NMP22 και αυξημένο ποσοστό ψευδώς θετικών παρατηρήθηκε για τους ασθενείς με λοιμώξεις του ουροποιητικού συστήματος (FPR: 22% έναντι 11%, p = 0,001? Μεσαίο NMP22 αποτέλεσμα: 3,35 U /mL έναντι 2,2 U /mL, P & lt? 0.001) και ουροποιητικού λιθίασης (FPR: 23% έναντι 11%, p = 0,001? NMP22:2.55 U /mL έναντι 2,2 U /mL, P = 0,047) (Πίνακας 3)

Η

Η ανάλυση ROC για MCM5. και NMP22 επαναλήφθηκε παρατηρώντας τα αποτελέσματα σε όλες αρσενικά και τα θηλυκά (Πίνακας S4 και το Σχήμα S1). Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στις τιμές AUC για MCM5 μεταξύ ανδρών και γυναικών (Ρ = 0,76), αλλά υπήρχε μία σημαντική διαφορά στην αξία NMP22 AUC μεταξύ ανδρών και γυναικών (AUC 0,69 για τους άνδρες vs 0,80 για τις γυναίκες, Ρ = 0.025), προφανώς σχετίζονται με την μεγαλύτερη NMP22 ευαισθησία στις γυναίκες.

βιοδεικτών ψευδώς αρνητικά Ανάλυση

Πίνακας 4 και Πίνακας S5 δείχνουν τα ψευδώς αρνητικά ποσοστά του ουροποιητικού MCM5 και NMP22 ομαδοποιούνται ανάλογα με το βαθμό του όγκου και το στάδιο. Υπήρχε ενδείξεις πτωτική τάση στο ποσοστό ψευδώς αρνητικών αποτελεσμάτων με την αύξηση του βαθμού του όγκου και το στάδιο και για τις δύο ουροποιητικού βιοδείκτες. Για τους βαθμούς 1, 2 και 3 αντίστοιχα, τα ψευδώς αρνητικά ποσοστά για την ακράτεια MCM5 στο 2150-κυττάρων cut-σημείο ήταν 52% (95% CI = 31 – 73%), 37% (95% CI = 28 έως 46%) και 11% (95% CI = 4-22%? τάση P & lt? 0.001). Για NMP22 στο 10 U /mL cut-σημείο, οι αντίστοιχες ψευδώς αρνητικά ποσοστά ήταν 80% (95% CI = 59 – 93%), 49% (95% CI = 40-59%) και 25% (95% CI = 14-40%? τάση P & lt? 0.001). Παρόμοιες τάσεις παρατηρήθηκαν για το στάδιο του όγκου. Μια σημαντική μείωση του πλάτους της MCM5 και NMP22 σήμα με χαμηλότερο βαθμό όγκου και το στάδιο παρατηρήθηκε, σε συνάρτηση με την αύξηση των ψευδώς αρνητικά ποσοστά παρατηρούνται για αυτές τις ομάδες (Πίνακας 4 και Πίνακας S5).

συνδυασμένη βιοδεικτών πολλαπλών -ROC Ανάλυση

Υπήρχαν 183 UCCS της ουροδόχου κύστης και 1100 φυσιολογικούς ασθενείς με δεδομένα δοκιμασία διαθέσιμη και για τις δύο ουροποιητικού δείκτες. Για αυτούς τους ασθενείς, ένα MCM5 σημείων κοπής του 2180 κύτταρα /φρεάτιο παρέχεται ίση ευαισθησία και ειδικότητα 71% (130/183 και 777/1100), καθώς και για NMP22 μια περικοπή-σημείο του 4,6 U /mL παρέχεται ίση ευαισθησία και ειδικότητα της 67% (123/183 και 742/1100). Αν και υπήρχε μέτρια μεγαλύτερη απόδοση της MCM5 σε σύγκριση με NMP22 όσον αφορά την ακρίβεια (71% έναντι 67%, διαφορά 3,3%, 95% CI = -0,2 έως 6,7%), η διαφορά αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική (δοκιμασία του McNemar: P = 0,067).

οι συντελεστές συσχέτισης Spearman μεταξύ ΜΟΜ5 και NMP22 ήταν μετρίως υψηλή (rho = 0,54) για τις περιπτώσεις UCC και αμελητέα (rho = 0,08) για την φυσιολογική ομάδα, που δείχνει δυναμικό για τα βιοδείκτες για την παροχή διακριτούς ρόλους μέσα ένας συνδυασμός. Με βάση την πολυ-ROC ανάλυση, η ανοσοφθορομετρικές δοκιμή ΜΟΜ5, σε συνδυασμό με NMP22 στη συνιστώμενη 10 U /mL cut-σημείο, προσφέρει μια στατιστικά σημαντική αύξηση στην απόδοση (Ρ & lt? 0.001) σε σύγκριση με NMP22 μόνο στις συνιστώμενες cut- σημείο (περιοχή κάτω από την καμπύλη multi-ROC = 0.65, 95% CI = 0,58 – 0,71). Ως επίδειξη, εάν είτε NMP22 υπερβαίνει τα 10 U /mL ή MCM5 υπερβαίνει το 4.200-κυττάρων cut-σημείο, αυτός ο συνδυασμός παρέχει ευαισθησία (131/183) και ειδικότητα (789/1100) και οι δύο ίσες με 72%, πράγμα που δείχνει την βελτίωση κατά χρήση NMP22 μόνη, όπου η ευαισθησία (123/183) και η ειδικότητα (742/1100), η ίση του 67% (72% έναντι 67%, διαφορά = 4,3% [95% CI = 1,5 – 7,0%], του McNemar test P = 0,002) . Σε συνδυασμό με NMP22 σε 10 U /mL, η δοκιμή MCM5 αφαιρεί ψευδώς αρνητικά από την NMP22 δοκιμή, προσφέροντας μια βελτίωση από την ευαισθησία 54% των NMP22 μόνος σε 75% ευαισθησία με 65% ειδικότητα (2800-κυττάρων cut-σημείο), ή για να 80% ευαισθησία με 58% ειδικότητα (1900-κυττάρων cut-σημείο), ή μέχρι τη μέγιστη ευαισθησία 85% με ειδικότητα 45% (1000-κυττάρων cut-σημείο).

Κατά την ανάλυση συνδυασμό, με NMP22 ( 10 U /mL cut-σημείο) και MCM5 (4200-κύτταρο cut-σημείο, όπου η ευαισθησία και ειδικότητα είναι ίσες), 100% (31/31) των μυών επεμβατική καρκίνων (δηλαδή στάδιο ≥ Τ2), 93% (40/43 ) των όγκων ρΤ1 και 53% (54/102) των όγκων pTa εντοπίστηκαν. Ο συνολικός αριθμός των ασθενών με καρκίνωμα in situ ήταν χαμηλή και 86% (6/7) ανιχνεύθηκαν. Grade 1 ασθένεια εντοπίστηκε σε 46% (10/22), βαθμού 2 νόσου σε 64% (68/106) και βαθμού 3 νόσου σε 96% (53/55) των περιπτώσεων (συμπεριλαμβανομένων 6/7 περιπτώσεων καρκίνωμα in situ) . Είναι σημαντικό, MCM5 σε συνδυασμό με NMP22 εντοπίστηκαν 95% (79/83, 95% CI = 88-99%) των διαγνώσεων που απειλούν δυνητικά τη ζωή (π.χ. βαθμού 3 ή CIS ή το στάδιο ≥pT1) με υψηλή ειδικότητα (72%, 95% CI = 69-74%).

Συζήτηση

σε μια παλαιότερη απόδειξη της ιδέας μελέτη έδειξε ότι τα αυξημένα επίπεδα MCM5 στα ιζήματα των κυττάρων στα ούρα είναι εξαιρετικά προγνωστικά καρκίνου της ουροδόχου κύστης [19]. Ο υποψήφιος τύφλωσε παρατήρησης δίκη που αναφέρονται εδώ, αφορούν μια μεγάλη ομάδα ασθενών, επιβεβαιώνει την αρχική μας παρατηρήσεις ότι MCM5 είναι μια ευαίσθητη και ειδική βιοδεικτών για την ανίχνευση της UCC. Σημαντικά, μέσω πολυ-ROC ανάλυση, δείχνουμε εδώ ότι η δοκιμή ΜΟΜ5, σε συνδυασμό με NMP22 στο εγκατεστημένος αποκοπής σημείο 10 U /mL, ενισχύει διαγνωστική ακρίβεια πάνω NMP22 σε απομόνωση και προσδιορίζει όλες σχεδόν τις δυνητικά απειλητική για τη ζωή ασθένεια.

Παρά τις πολυάριθμες μελέτες την τελευταία δεκαετία, η αναφερόμενη ακρίβεια της NMP22 τεστ είναι εξαιρετικά μεταβλητή. Πολλές από τις προηγούμενες μελέτες που προσλαμβάνονται μικρές έως μέτριες αριθμούς ατόμων και αναφέρθηκαν υψηλές ευαισθησίες και εξειδικεύσεις, πάνω από 80% [23] – [26]. Ωστόσο, ένα μεγάλο εύρος στην απόδοση δοκιμή έχει παρατηρηθεί σε πιο πρόσφατες μελέτες με ευαισθησία που κυμαίνεται από 33% έως 100% και ειδικότητα από 40% έως 93% [4]. Μια συγκεντρωτική ανάλυση συμπεριλαμβανομένων των πιο πρόσφατων μελετών δείχνουν ευαισθησία περίπου 68% και ειδικότητα 79% [4]. Μια πρόσφατη μεγάλη πολυοργανική διεθνή μελέτη αποκάλυψε μια έντονη μεταβλητότητα στην απόδοση του NMP22 δοκιμής σε όλη συμμετέχοντα ιδρύματα με ευαισθησία και ειδικότητα που κυμαίνονται από 36% έως 86% και 50% έως 94% αντίστοιχα [27]. Μεταβλητότητα έχει αποδοθεί σε πολλούς παράγοντες σύγχυσης, συμπεριλαμβανομένων βιολογικών, αναλυτικές και επιδημιολογικές μεταβλητές και μεθοδολογικές προκαταλήψεις.

Η μελέτη μας αποτελεί τη μεγαλύτερη προοπτική παρατήρησης δίκη που έχει αναληφθεί ποτέ τη χρήση του NMP22 ουροποιητικού βιοδείκτη. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η απόδοση στο 10 U /mL cut-σημείο, με ευαισθησία 53% και ειδικότητα 84%, είναι κάπως χαμηλότερο από αυτό που αναφέρεται στην συγκεντρωτική ανάλυση, αλλά σχεδόν ταυτόσημη με την διαγνωστική απόδοση αναφέρεται στην Matritech υποστηρίζεται μεγάλο ασθενή ομάδα δοκιμών με τη χρήση της NMP22 point-of-care πρωτεομική ανάλυση [4], [28]. Είναι ενδιαφέρον παρατηρήσαμε σημαντικά μεγαλύτερη διαγνωστική ακρίβεια της NMP22 στις γυναίκες σε σύγκριση με τους άνδρες.