Αφηρημένο

Ιστορικό

miR-18a είναι ένα από τα πιο up-ρυθμίζονται miRNAs στην παχέος εντέρου (CRC) με βάση την miRNA προφίλ. Στην παρούσα μελέτη, εξετάσαμε τη λειτουργική σημασία του miR-18a σε CRC.

Μέθοδοι

Η έκφραση του miR-18a ερευνήθηκε σε 45 ασθενείς με CRC. Δυναμικό γονιδίων στόχων του miR-18a είχαν προβλεφθεί από

in silico

αναζητήσετε και να επιβεβαιωθεί με δοκιμασία λουσιφεράσης δραστηριότητα και κηλίδα Western. βλάβη στο DNA μετρήθηκε με κομήτη δοκιμασίας. γονιδιακής λειτουργίας μετρήθηκε με τη βιωσιμότητα του κυττάρου, σχηματισμός αποικίας και προσδιορισμούς απόπτωσης.

Αποτελέσματα

Η αυξητική ρύθμιση του miR-18a ελέγχθηκε και επιβεβαιώθηκε σε 45 πρωτογενείς όγκους CRC σε σύγκριση με τους φυσιολογικούς ιστούς παρακείμενα

(

p

& lt?

0,0001). Μέσω

in silico

αναζήτηση, η 3’UTR του

Αταξία τηλαγγειεκτασία μεταλλαχθεί (ΑΤΜ)

περιέχει μία θέση πρόσδεσης συντηρημένη miR-18a. Έκφραση των ΑΤΜ κάτω-ρυθμίζονται σε CRC όγκους (p

& lt?

0,0001) και αντιστρόφως ανάλογη με την έκφραση του miR-18a (r = -0,4562, p

& lt?

0.01). Υπερ-έκφραση του miR-18a σε καρκινικά κύτταρα του παχέος εντέρου, μείωσε σημαντικά τη δραστικότητα της λουσιφεράσης του κατασκευάσματος με άγριου τύπου ATM 3’UTR αλλά όχι εκείνη με μεταλλαγμένο ATM 3’UTR, συνάγοντας μια άμεση αλληλεπίδραση του miR-18a με ATM 3’UTR . Αυτό επιβεβαιώνεται και από το κάτω ρύθμιση πρωτεΐνης ΑΤΜ από miR-18a. Όπως ATM είναι ένα ένζυμο κλειδί στην επιδιόρθωση του DNA βλάβη, αξιολογήσαμε την επίδραση του miR-18a στο DNA διπλό σκέλος διαλείμματα. Η έκτοπη έκφραση του miR-18a ανέστειλε σημαντικά την αποκατάσταση της βλάβης του DNA που προκαλείται από ετοποσίδη (p

& lt?

0.001)., Που οδηγεί σε συσσώρευση της βλάβης του DNA, αύξηση της κυτταρικής απόπτωσης και των φτωχών κλωνογονικού επιβίωση

Συμπέρασμα

miR-18a μειώνει την κυτταρική επιδιόρθωση του DNA διπλό σκέλος διαλείμματα από άμεσα καταστολή ATM, ένα ένζυμο κλειδί στην επιδιόρθωση βλαβών του DNA

Παράθεση:. Wu CW, Dong YJ, Liang ΟΥ, αυτός XQ, Ng SSM, Chan FKL, et al. (2013) microRNA-18α εξασθενίζει επισκευής ζημιών DNA μέσω καταστολή της έκφρασης της αταξίας Τελαγγειεκτασία Μεταλλαγμένα στον Καρκίνο του παχέος εντέρου. PLoS ONE 8 (2): e57036. doi: 10.1371 /journal.pone.0057036

Επιμέλεια: Xin Yuan-Γκουάν, το Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ, Κίνα

Ελήφθη: 15 Νοεμβρίου του 2012? Αποδεκτές: 16 του Ιανουαρίου, 2013? Δημοσιεύθηκε: 21 Φεβρουαρίου 2013

Copyright: © 2013 Wu et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Το σχέδιο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (NSFC) (κωδικός έργου 81101488), ένα πρόγραμμα Κίνα 863 (2012AA02A506) και το Χονγκ Κονγκ ταμείο ITF (ITS /276/11). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

miRNAs είναι 18 έως 25 νουκλεοτιδίων μη-κωδικοποίησης μόρια RNA που ρυθμίζουν την μετάφραση του mRNA. Ασκούν τα αποτελέσματα με τη στόχευση το RNA επαγόμενη φίμωση συμπλόκου (RISC) σε συμπληρωματικές θέσεις στο 3 ‘αμετάφραστη περιοχή (UTR) των γονιδίων στόχων τους [1]. Η δέσμευση ενός miRNA-φορτωμένο RISC σε μία συμπληρωματική αλληλουχία θα οδηγήσει είτε μεταγραφική καταστολή ή αποσύνθεση του στοχευόμενου mRNA [2]. Μέσω αυτού, miRNAs ρυθμίζουν μια ποικιλία κυτταρικών διεργασιών συμπεριλαμβανομένης της απόπτωσης [3], [4], η διαφοροποίηση [5] και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων [6]. Η αλλαγμένη προφίλ έκφρασης miRNA βρέθηκαν σε περισσότερους τύπους όγκων, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του παχέος (CRC) [7], [8], [9], [10]. Χειρισμός ειδικών miRNAs βρέθηκε να είναι σε θέση να ρυθμίζουν την ανάπτυξη του όγκου σε μοντέλο ζώου [6], [11], [12]. Προηγουμένως, μέσω προφίλ της έκφρασης του 667 miRNAs σε ανθρώπινο ορθοκολικό καρκινικούς ιστούς, εντοπίσαμε miR-18a ως ένα από τα πιο πάνω ρυθμισμένα miRNAs σε ανθρώπινο CRC [13]. Ένα υψηλό επίπεδο miR-18α μπορεί να ανιχνευθεί στα κόπρανα των ασθενών CRC σε σύγκριση με άτομα με φυσιολογική κολονοσκόπηση. Μετά την αφαίρεση του όγκου, το επίπεδο σκαμνί του miR-18a μειώθηκε σημαντικά [13].

miR-18a ανήκει στο σύμπλεγμα των miR-17-92, το οποίο βρίσκεται στην περιοχή του χρωμοσώματος 13q31.1. Το ογκογόνο ρόλος του συμπλέγματος miR-17-92 είναι καλά τεκμηριωμένη. Υπερ-έκφραση του συμπλέγματος συσχετίζεται με την επιτάχυνση της ανάπτυξης των όγκων [6] και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων [14]. Χρωμοσωμικό κέρδος αριθμού αντιγράφων στην περιοχή συμπλέγματος miR-17-92 συνδέθηκε με την νεοπλαστική εξέλιξη από αδένωμα σε καρκίνωμα [15]. Υψηλή έκφραση του miR-18a έχει ενοχοποιηθεί στον καρκίνο του μαστού [16], καρκίνος της ουροδόχου κύστης [17] και τον καρκίνο του παγκρέατος [18]. Ωστόσο, ο λειτουργικός ρόλος του miR-18a σε CRC παραμένει ασαφής. Σε αυτή τη μελέτη, έχουμε ως στόχο να εντοπίσει το γονίδιο-στόχο της και κρίσιμο ρόλο της στην CRC.

Μέθοδοι και Υλικά