Αφηρημένο

Ιστορικό

Η μετάσταση είναι η πιο συχνή αιτία της αποτυχίας της θεραπείας και του θανάτου σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Η έγκαιρη ανίχνευση όγκων και μεταστάσεων είναι ζωτικής σημασίας για τη βελτίωση των στρατηγικών θεραπείας και την έκβαση των ασθενών. Ανάπτυξη αξιόπιστων βιοδεικτών και απλές δοκιμασίες που εφαρμόζονται συνήθως στην κλινική για την ανίχνευση, πρόγνωση και παρακολούθηση της θεραπείας έχει ιδιαίτερο ενδιαφέρον. Εμείς εντοπίστηκαν πρόσφατα το νέο γονίδιο Μετάσταση-Associated σε Colon Cancer 1 (MACC1), ένα βασικό ρυθμιστή της HGF /Met-μονοπάτι. MACC1 είναι ένας ισχυρός προγνωστικός βιοδείκτης για μετάσταση καρκίνου του παχέος εντέρου και επιτρέπει την αναγνώριση των ατόμων υψηλού κινδύνου, σε πρώιμα στάδια, όταν προσδιορίζεται σε πρωτογενείς όγκους ασθενών. Για να ξεπεραστεί ο περιορισμός του περιορισμένου αριθμού των μοριακών αναλύσεων στον ιστό του όγκου, τη δημιουργία ενός μη επεμβατική εξέταση αίματος για την έγκαιρη αναγνώριση των ασθενών με καρκίνο υψηλού κινδύνου, για την πορεία της παρακολούθησης της νόσου και την ανταπόκριση της θεραπείας είναι έντονα χρειάζεται.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

για πρώτη φορά, έχουμε περιγράψει μία μη επεμβατική δοκιμασία για την ποσοτικοποίηση των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο αίμα πάνω από 300 ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου. Τα επίπεδα MACC1 μεταγραφή αυξήθηκε σε όλα τα στάδια της νόσου των ασθενών με καρκίνο σε σύγκριση με τους εθελοντές χωρίς όγκο. Υψηλότερα επίπεδα MACC1 προσδιορίστηκαν σε άτομα με μεταστάσεις (όλα τα P & lt? 0,05). Είναι σημαντικό, τα υψηλά επίπεδα MACC1 συσχετίζονται με δυσμενείς επιβίωση (P & lt? .0001). Συνδυάζοντας MACC1 με κυκλοφορία μεταγραφές του γονιδίου μετάσταση S100A4, ένας μεταγραφικός στόχος της Wnt /β-κατενίνης-μονοπάτι, βελτιώνει την πρόγνωση επιβίωσης για τους ασθενείς με καρκίνο πρόσφατα διαγνωστεί.

Συμπέρασμα /Σημασία

Αυτό το αίμα με έδρα δοκιμασία για κυκλοφορούν μεταγραφές MACC1, η οποία μπορεί να ποσοτικοποιηθεί σε τακτική βάση, είναι κλινικά εφαρμόζεται για τη διάγνωση, την πρόγνωση και θεραπευτική παρακολούθηση των ασθενών με καρκίνο. Εδώ αποδεικνύουμε την διαγνωστική και προγνωστική αξία των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα του ασθενούς για μετάσταση και επιβίωση. Από MACC1 αντιπροσωπεύει έναν υποσχόμενο στόχο για αντι-μεταστατική θεραπείες, που κυκλοφορούν μεταγραφές MACC1 μπορεί να αποδειχθεί μια ιδανική διαβάσει-out για την παρακολούθηση της θεραπευτικής ανταπόκρισης των μελλοντικών παρεμβάσεων που στοχεύουν MACC1 που προκαλείται από μετάσταση σε ασθενείς με καρκίνο

Παράθεση:. Stein U , Burock S, Herrmann P, Wendler Ι, Niederstrasser Μ, Wernecke KD, et al. (2012) Κυκλοφορούν μεταγραφές MACC1 στον καρκίνο του παχέος εντέρου πλάσμα του ασθενούς Προβλέψτε μετάσταση και πρόγνωση. PLoS ONE 7 (11): e49249. doi: 10.1371 /journal.pone.0049249

Επιμέλεια: Hassan χείλος, Πανεπιστήμιο Howard, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 2η Μαΐου 2012? Αποδεκτές: 4η Οκτωβρίου 2012? Δημοσιεύθηκε: 14, Νοεμβρίου 2012

Copyright: © 2012 Stein et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτοί οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. ΗΠΑ και PMS είναι κάτοχοι διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας που αφορούν MACC1 (πρώην 7a5 /prognostin) προσδιορισμός σε πρωτοπαθείς όγκους. Stein U, Schwabe Η, Walther W, Schlag μμ. Verwendung des neu-identifizierten Gens 7a5 /Prognostin (MACC1) für Tumordiagnostik und Tumortherapie. 7a5 /Prognostin και χρήση αυτών για τη διαγνωστική και τη θεραπεία των όγκων. JP2006-519895 δίπλωμα ευρεσιτεχνίας: 13.5.2011. AU δίπλωμα ευρεσιτεχνίας 2004259281: 12.5.2011. Δίπλωμα ευρεσιτεχνίας ΗΠΑ 7.851.168 Β2: 14.12.2010. Η αίτηση διπλώματος ευρεσιτεχνίας CA 2526240: 2004. Η αίτηση ευρεσιτεχνίας ΕΡ 008 053: 2004. Η αίτηση διπλώματος ευρεσιτεχνίας DE 10.332.854,8: 2003. ΗΠΑ, PH, SB, και PMS είναι κάτοχοι διπλώματος ευρεσιτεχνίας για τη χρήση της μετάστασης μεταγραφές progressor S100A4 στα σωματικά υγρά του παχέος εντέρου και του γαστρικού ασθενείς με καρκίνο. Stein U, Herrmann P, Burock S, Schlag μμ. Χρήση της μετάστασης μεταγραφές progressor S100A4 στα υγρά του σώματος των ασθενών του παχέος εντέρου και καρκίνο του στομάχου. Η αίτηση ευρεσιτεχνίας PCT /EP2010 /001891: εφαρμογή 19.3.2010 Ευρεσιτεχνίας ΗΠΑ 61 /261.017: 13.11.2009. Οι συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι αυτό δεν μεταβάλλει την προσκόλλησή τους σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Η μετάσταση είναι η πιο συχνή αιτία της αποτυχίας της θεραπείας και του θανάτου σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Η έγκαιρη ανίχνευση όγκων και μεταστάσεων είναι ζωτικής σημασίας για τη βελτίωση των στρατηγικών θεραπείας και την έκβαση των ασθενών. Ανάπτυξη αξιόπιστων βιοδεικτών και απλές δοκιμασίες που εφαρμόζονται συνήθως στην κλινική για την ανίχνευση, πρόγνωση και παρακολούθηση της θεραπείας έχει ιδιαίτερο ενδιαφέρον.

Πρόσφατα εντοπίστηκαν το νέο γονίδιο Μετάσταση-Associated σε Colon Cancer 1 (MACC1) [ ,,,0],1] – [3]. MACC1 είναι ένα νέο προγνωστικό βιοδείκτη για μετάσταση καρκίνου του παχέος εντέρου και μετάσταση επιβίωση χωρίς όταν προσδιορίζεται σε πρωτογενείς όγκους ασθενών. επίπεδα MACC1 στις πρωτογενείς όγκους βρέθηκαν να είναι σημαντικά υψηλότερη σε καρκίνους που αναπτύσσονται metachronously απομακρυσμένες μεταστάσεις σε σύγκριση με εκείνους που δεν μεταστάσεις εντός 12 ετών παρακολούθησης. Η προγνωστική αξία του βιοδείκτη για το αν ένας όγκος θα κάνουν μετάσταση ή όχι ήταν 74% και 80% αντίστοιχα. Το ποσοστό 5-year-επιβίωση ήταν 80% για τους ασθενείς με χαμηλή MACC1, σε σύγκριση με 15% για τους ασθενείς με υψηλή έκφραση MACC1 σε πρωτοπαθείς όγκους τους. MACC1 είναι ένας προγνωστικός δείκτης για τον ορθοκολικό καρκίνο μετάστασης ανεξάρτητα από το στάδιο του όγκου, την ηλικία, το φύλο, τη διήθηση του όγκου, κομβικών κατάσταση και της λέμφου εισβολή σκάφος, και έτσι επιτρέπει ταυτοποίηση των υποκειμένων σε υψηλό κίνδυνο για μετάσταση στα πρώτα στάδια [1]. Αυτό καθιστά MACC1 ένα σημαντικό προγνωστικό γονίδιο στην κλινική πρακτική. Επιπλέον, βρήκαμε ότι MACC1 δρα βασικό ρυθμιστή του HGF (αυξητικός παράγοντας ηπατοκυττάρων) /Met-μονοπάτι, το οποίο είναι ζωτικής σημασίας για καρκίνο του παχέος εντέρου για την εξέλιξη του όγκου και τον σχηματισμό μετάστασης [1], [2], [4].

Αρκετές ομάδες επιβεβαιώθηκε εν τω μεταξύ ένα συσχετισμό του υψηλής έκφρασης MACC1 στον όγκο σε εξέλιξη, μετάσταση, την επιβίωση και την απόκριση σε θεραπεία καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) [5] – [9]. Ο ρόλος του MACC1 ως βιοδείκτη για την εξέλιξη του καρκίνου και επιβίωση εν τω μεταξύ επίσης αναφερθεί για άλλα στερεά καρκίνους, όπως γαστρικό [10], του πνεύμονα [11], [12], ηπατοκυτταρικό [13], [14] και τον καρκίνο των ωοθηκών [15 ].

Μοριακή ανάλυση στον ιστό του όγκου, π.χ. που απαιτούνται για την πρόγνωση της νόσου στο πλαίσιο του σχηματισμού μετάστασης και επιβίωσης, περιορίζονται σε ένα περιορισμένο αριθμό των διαθέσιμων δειγμάτων ιστού. Για να ξεπεραστεί αυτός ο περιορισμός, η δημιουργία ενός μη-επεμβατική MACC1 με βάση το τεστ αίματος για την έγκαιρη αναγνώριση των ασθενών με καρκίνο υψηλού κινδύνου και για την παρακολούθηση της πορείας της νόσου, καθώς και της ανταπόκρισης της θεραπείας είναι, ως εκ τούτου πιεστική ανάγκη.

Εδώ , για πρώτη φορά, έχουμε αναπτύξει μια μη επεμβατική δοκιμασία για τα επίπεδα MACC1 μεταγραφής στο πλάσμα. Αναλύσαμε την διαγνωστική αξία των επιπέδων MACC1 για την ανίχνευση όγκων και μεταστάσεων στο παχύ έντερο και ασθενείς με καρκίνο του ορθού, και προγνωστική αξία του σε συνολική επιβίωση (επιβίωση) από αυτούς τους ασθενείς. Επιπλέον, θα αξιολογηθεί το όφελος του συνδυασμού MACC1 με ένα επιπλέον γονίδιο μετάστασης, S100A4, για βελτιωμένη πρόβλεψη της πρόγνωσης της νόσου [16] – [18].

Υλικά και Μέθοδοι

Στόχος

Η μετάσταση επαγωγής του γονιδίου MACC1 είναι ένα ισχυρό προγνωστικό βιοδείκτη για τη μετάσταση του καρκίνου του παχέος εντέρου και επιτρέπει την ταυτοποίηση των ατόμων υψηλού κινδύνου, σε πρώιμα στάδια, όταν προσδιορίζεται σε πρωτογενείς όγκους των ασθενών. Για να ξεπεραστεί ο περιορισμός του περιορισμένου αριθμού των μοριακών αναλύσεων στον ιστό του όγκου, που αποσκοπούν στη δημιουργία ενός μη-επεμβατική MACC1 με βάση το τεστ αίματος για την έγκαιρη αναγνώριση των ασθενών με καρκίνο υψηλού κινδύνου και για την παρακολούθηση της πορείας της νόσου.

οι συμμετέχοντες

Για τα χαρακτηριστικά του παχέος εντέρου και του καρκίνου του ορθού των ασθενών βλέπε πίνακες 1, 2, 3. Διαδοχική ασθενείς με παχέος εντέρου ή του ορθού που παρατηρήθηκαν στο Robert Rössle Αντικαρκινικό Νοσοκομείο, Πανεπιστήμιο Charité Ιατρικής Βερολίνου, κατά τη διάρκεια του 2006 μέχρι το 2007 για ενδονοσοκομειακή ή εξωνοσοκομειακή περίθαλψη και οι οποίοι έδωσαν γραπτή συγκατάθεση τους για να λάβουν μέρος σε βιοτράπεζας όγκου μας είχαν εγγραφεί.

η

η

δεδομένα ασθενών για ιστοπαθολογική χαρακτηρισμό του όγκου (συμπεριλαμβανομένης της διήθησης του όγκου , λεμφικό κατάσταση, μετάσταση, ταξινόμησης, λεμφαγγείων διείσδυση, τα αιμοφόρα αγγεία διείσδυση, υπολειμματικό όγκο κόμβο), για τη θεραπεία και την επιβίωση ήταν διαθέσιμα από την τράπεζα του όγκου της Charité Περιεκτική Κέντρο Καρκίνου. Η ιστολογική σταδιοποίηση του όγκου πραγματοποιήθηκε με ρουτίνα παθολογία. Τα κριτήρια αποκλεισμού ήταν άλλες κακοήθειες κατά τη διάρκεια της ιστορίας ή παρακολούθηση. Αναλύσαμε 312 δείγματα αίματος του κόλου (n = 151) και του ορθού (n = 161) ασθενείς με καρκίνο (Πίνακες 1, 2, 3).

Δείγματα αίματος ελήφθησαν κατά την ημέρα της διάγνωσης από νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με ένας πρωτογενής όγκος χωρίς ή με σύγχρονη μεταστάσεις ή από ασθενείς οι οποίοι ανέπτυξαν μεταστάσεις metachronously μετά R0-εκτομή του πρωτογενούς όγκου. Εξαίρεση: Οι ασθενείς με νεοδιαγνωσμένο τοπικά προχωρημένο καρκίνο του ορθού, οι οποίοι έλαβαν εισαγωγική ακτινοβολία μικρής φυσικά ή μακροπρόθεσμα ακτινοχημειοθεραπεία (n = 16). Εδώ, τα δείγματα αίματος ελήφθησαν μετά από εισαγωγική θεραπεία του πρωτογενούς όγκου. Για ασθενείς που λαμβάνουν ακτινοβολία μικρής Φυσικά, το διάστημα μεταξύ του τέλους της θεραπείας και αίματος, λαμβανομένης ήταν 3 έως 6 ημέρες. Δεν βρήκαμε σημαντικά διαφορετικά επίπεδα MACC1 μεταγραφής μεταξύ του αγωγή (n = 16) και των μη επεξεργασμένων ασθενείς με καρκίνο του ορθού (n = 23).

Τα δείγματα αίματος από την ομάδα των ασθενών παρακολούθησης ελήφθησαν αποκλειστικά κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης (διάμεση τιμή 975 και 1.280 ημέρες μετά την αρχική διάγνωση? μεσαίο 807 και 853 ημερών παρακολούθησης μετά από τη λήψη αίματος για παχέος εντέρου και του ορθού, αντίστοιχα)

Οι έλεγχοι πλάσμα που προέρχεται από δύο ανεξάρτητες ομάδες. εθελοντών (n = 54). Πρόσληψη των εθελοντών υποστηρίχθηκε από τον Klaus Sperber, Ιατρική σύνδικος, το Βερολίνο, και από την Ursula Plockinger, Charité Campus Virchow Klinikum, Βερολίνο. Όλοι οι εθελοντές πρέπει να είναι χωρίς όγκο και χωρίς ιστορικό ογκολογικές ασθένειες. Δεν βρήκαμε σημαντικά διαφορετικά επίπεδα MACC1 σε σχέση με το φύλο, την ηλικία, ή μεταξύ των δύο ομάδες.

νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο με πρωτοπαθή όγκο, με ή χωρίς σύγχρονη μεταστάσεις ομαδοποιήθηκαν λόγω χρονολογική εξέταση τους σε ένα δοκιμή-set (n = 36) και η επικύρωση-set (n = 35) για τον προσδιορισμό της διαγνωστικής αξίας των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 (Πίνακας 4).

η

Παρασκευή Plasma

Πρώτον, εξετάσαμε τις βέλτιστες συνθήκες για τη λήψη του αίματος, την αποθήκευση και το διαχωρισμό του πλάσματος. Μετά τη λήψη του αίματος υγιών εθελοντών (n = 12), EDTA-αίμα διατηρήθηκε σε θερμοκρασία δωματίου ή στους 4 ° C. διαχωρισμού πλάσματος έγινε είτε αμέσως, ή 7, 24, 48, και 72 ώρες μετά την λήψη του αίματος (10 αναλύσεις ανά εθελοντή). RNA απομονώθηκε και MACC1-ειδική ποσοτική πραγματικού χρόνου RT-PCR πραγματοποιήθηκε εις διπλούν (Εικ. 1Α). επίπεδα μεταγραφής MACC1 υπηρέτησε ως read-out. Εμείς δεν βρήκε μεταβολές των επιπέδων MACC1 όταν ο διαχωρισμός του πλάσματος πραγματοποιήθηκε κατά τη διάρκεια των πρώτων 24 ωρών (είτε ψύχεται ή να διατηρούνται σε θερμοκρασία δωματίου). Βάσει αυτών των ευρημάτων, το πλάσμα διαχωρίστηκε από ψύχθηκε EDTA-αίμα την ίδια ημέρα εντός 7 ώρες μετά την λήψη του αίματος. Διαδικασία για το διαχωρισμό του πλάσματος ήταν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [18]. Τυφλωμένος δείγματα, ούτε του παχέος εντέρου ούτε καρκίνο του ορθού, ούτε στάδιο της νόσου αποκαλύφθηκε κατά τη διάρκεια της ανάλυσης, φυλάχθηκαν στους -80 ° C.

Α. συνθήκες διαχωρισμού πλάσματος για τον προσδιορισμό των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1. διαχωρισμού πλάσματος των δειγμάτων από εθελοντές χωρίς όγκο (n = 12) έγινε αμέσως, 7, 24, 48, και 72 ώρες μετά τη λήψη του αίματος, είτε από το αίμα δείγματα διατηρούνται στους 4 ° C ή σε θερμοκρασία δωματίου. Στη συνέχεια, το πλάσμα παρήχθη εντός των πρώτων 7 ώρες από 4 ° C με ψύξη του αίματος. B. MACC1 μεταγραφές στο πλάσμα εθελοντών χωρίς όγκο (n = 54). Δεν παρατηρήθηκε διαφορά στα επίπεδα μεταγραφής MACC1 βρέθηκαν σε δύο ανεξάρτητα αναλύθηκαν ομάδες εθελοντών χωρίς όγκο (n = 34 και n = 20, αντίστοιχα). Γ MACC1 μεταγραφές στο πλάσμα του συνόλου των ασθενών καρκίνου του παχέος εντέρου (n = 312). Όλες οι ομάδες ασθενών που φέρουν παχέος εντέρου, του παχέος εντέρου (n = 151) ή του ορθού (n = 161), καρκίνου εξέφρασαν σημαντικά υψηλότερα επίπεδα MACC1 μεταγραφή από εθελοντές χωρίς όγκο (

P

& lt? 0,001 για όλες τις συγκρίσεις).

RNA και ποσοτική πραγματικού χρόνου RT-PCR

Απομόνωση ολικού RNA πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [18]. Ποσοτική πραγματικού χρόνου RT-PCR πραγματοποιήθηκε σε 30 sec 95 ° C, 45 χ (10 sec 95 ° C, 10 sec 62 ° C, 10 s 72 ° C), που τήκεται καμπύλη 40 ° C έως 95 ° C, με χρησιμοποιώντας το LightCycler (κιτ DNA κύριο Hybridization Probes, Roche Diagnostics) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [1]. Οι ακόλουθοι εκκινητές και ανιχνευτές χρησιμοποιήθηκαν ενίσχυση ενός 136 bp MACC1-ειδικό προϊόν PCR: πρόσθιος εκκινητής 5′-TTCTTTTGATTCCTCCGGTGA-3 ‘, αντίστροφος εκκινητής 5′-ACTCTGATGGGCATGTGCTG-3′, FITC-ανιχνευτής 5’-GCAGACTTCCTCAAGAAATTCTGGAAGATCTA-3 ‘, LCRed640- καθετήρα 5’-AGTGTTTCAGAACTTCTGGACATTTTAGACGA-3 ‘(συνθέσεις των εκκινητών και ανιχνευτών: BioTeZ και TIB MolBiol, Βερολίνο, Γερμανία). Το cDNA βαθμονομητή χρησιμοποιήθηκε σε σειριακές αραιώσεις ταυτόχρονα σε κάθε κίνηση, που προέρχεται από τις κυτταρικές σειρές SW620. Θεώρηση της κυτταρικής σειράς πραγματοποιήθηκε με μικρή διαδοχική επανάληψη (STR) γονοτυπική (DSMZ Braunschweig, Germany). STR γονότυπο ήταν σύμφωνο με τη δημοσιευμένη γονότυπο για αυτή την κυτταρική σειρά (ATCC, CCL-227). S100A4-ειδική ποσοτική πραγματικού χρόνου RT-PCR διεξήχθη όπως περιγράφηκε προηγουμένως [18]. mRNA έκφραση ενός δείγματος αίματος δίνεται ως ποσοστό της έκφρασης του mRNA ενός καθορισμένου δείγματος βαθμονομητή, η οποία ορίστηκε στο 100%. Κάθε δείγμα εις διπλούν, τα μέσα που απεικονίζονται.

Ηθική

Όλα τα δείγματα αίματος από ασθενείς και εθελοντές χωρίς όγκο λήφθηκαν με ενημέρωσε γραπτή συγκατάθεση, σύμφωνα με τη Διεθνή Διάσκεψη για την Εναρμόνιση και με την έγκριση του τοπικού IRB.

Στατιστικές Μέθοδοι

οι διαφορές μεταξύ των ομάδων όσον αφορά τα επίπεδα MACC1 μεταγραφής στο πλάσμα ελέγχθηκαν με τη χρήση μη-παραμετρική Wilcoxon-Mann-Whitney τεστ (εξαρτάται από την κατανομή της κανονικότητας): εθελοντές χωρίς όγκο εναντίον ασθενείς με πρωτοπαθείς όγκους χωρίς και με σύγχρονη μεταστάσεις, σε ασθενείς με metachronous μεταστάσεις, και οι ασθενείς να ακολουθήσουν-up? ασθενείς με όγκους εναντίον εκείνων με όγκους και μεταστάσεις. Σε περίπτωση μικρών δειγμάτων, μεγαλύτερες διαφορές μέγεθος των δειγμάτων, οι μεγάλες αλλά ασύμμετρες ομάδες, σύνολα δεδομένων που περιέχουν δεσμούς, ή αραιά δεδομένα, οι δοκιμές διεξήχθησαν σε μία ακριβή έκδοση. Θεωρήσαμε

P

& lt? 0,05 για να είναι σημαντική. Όλες οι αριθμητικοί υπολογισμοί πραγματοποιήθηκαν με το SPSS, έκδοση 18.

Για να ορίσετε τη διαγνωστική αξία των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα, η ευαισθησία και η ειδικότητα υπολογίστηκαν με τετραπλό τραπέζι για καρκίνο του παχέος εντέρου (δοκιμαστικά και επικύρωση-σετ), του παχέος εντέρου, του ορθού και του καρκίνου ασθενείς, οι οποίοι είχαν πρόσφατα διαγνωστεί με μια πρωτογενή όγκο χωρίς ή με σύγχρονη μεταστάσεις σε σύγκριση με τα δείγματα αίματος από 54 εθελοντές χωρίς όγκο. Σύμφωνα με χρονολογική εξέταση τους και οι ασθενείς αρχικά αίματος, λαμβανομένης ομαδοποιήθηκαν σε μια δοκιμή-set και επικύρωση-σετ. Ξεκινήσαμε με ένα δοκιμαστικό σύνολο των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών CRC (n = 36), προσδιορίζεται η βέλτιστη τιμή αποκοπής του MACC1 (ευαισθησία 75%, ειδικότητα 76%), και εφαρμόστηκε αυτό το cut-off τιμή για την επικύρωση-σετ CRC ασθενείς (n = 35). Ευαισθησία και ειδικότητα ήταν 77% και 76%, αντίστοιχα. Όταν το συνδυασμό όλων των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών CRC, η ευαισθησία και η ειδικότητα ήταν 76%. Κατά την ανάλυση του παχέος εντέρου και του ορθού ασθενών με καρκίνο χωριστά, η ευαισθησία ήταν 77% για τον καρκίνο του παχέος εντέρου και 76% για τον καρκίνο του ορθού. Εξειδίκευση ήταν 89% για τον καρκίνο του παχέος εντέρου και 76% για τον καρκίνο του ορθού, αντίστοιχα.

Για την ανάλυση επιβίωσης νεοδιαγνωσθέντες και όλων των CRC ασθενών, χρησιμοποιήθηκαν Kaplan Meier καμπύλες σε συνδυασμό με δοκιμασία log rank. Αυτές οι CRC ασθενείς συμπεριλήφθηκαν σε αυτή την ανάλυση, όπου και οι δύο δείκτες, MACC1 και S100A4, θα μπορούσε να προσδιοριστεί (n = 294). Η τιμή αποκοπής του MACC1 και η αποκοπή αξία S100A4 ήταν η διάμεση τιμή των ομάδων διερευνήθηκαν (πρωτογενή διάγνωση ή όλων των ασθενών), αντίστοιχα. Οι υπολογισμοί έγιναν με το λογισμικό SPSS, έκδοση 18.

Αποτελέσματα

Η ποσοτικοποίηση των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο ανθρώπινο πλάσμα

Αρχικά προσδιορίζονται οι βέλτιστες συνθήκες για την επεξεργασία και MACC1 πλάσμα μεταγραφή ποσοτικοποίηση μετά από το αίμα λήψη. διαχωρισμού πλάσματος και επακόλουθες αναλύσεις MACC1 διεξήχθησαν αμέσως ή 7, 24, 48, και 72 ώρες μετά τη λήψη αίματος από εθελοντές χωρίς όγκο (η = 12? 10 δείγματα ανά εθελοντή), είτε 4 ° C με ψύξη ή αφέθηκε σε θερμοκρασία δωματίου ( Σχ. 1Α). Αυξημένα επίπεδα MACC1 μετρήθηκαν λόγω αιμόλυσης μετά από 48 και 72 ώρες μετά τη λήψη του αίματος. Για τον προσδιορισμό των βασικών επιπέδων των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 σε εθελοντές χωρίς όγκο και ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο, μπορούμε ακολούθως διαχωρίζονται πλάσματος από 4 ° C με ψύξη δείγματα αίματος εντός των πρώτων 7 ωρών μετά τη λήψη του αίματος.

κυκλοφορούντα MACC1 μεταγραφές σε πλάσμα του όγκου χωρίς εθελοντές

Αναλύσαμε τα βασικά επίπεδα MACC1 εθελοντών χωρίς όγκο σε δύο ανεξάρτητες ομάδες (n = 34 και n = 20, αντίστοιχα? Εικ. 1Β). μεταγραφές MACC1 ανιχνεύθηκαν σε όλα τα δείγματα, χωρίς σημαντικές διαφορές μεταξύ των δύο ομάδες. Όλοι οι εθελοντές χωρίς όγκο συνδυάστηκαν για τις επόμενες αναλύσεις (διάμεση τιμή 0,224 MACC1 mRNA έκφραση /% βαθμονόμησης).

Κυκλοφορούν μεταγραφές MACC1 στο διακρίνουν Plasma όγκων χωρίς Εθελοντών και του παχέος εντέρου Οι ασθενείς

Στη συνέχεια, αναλύθηκαν τα επίπεδα στο πλάσμα MACC1 του παχέος εντέρου (n = 151) και του ορθού (n = 161) ασθενείς με καρκίνο (χαρακτηριστικά των ασθενών: Οι πίνακες 1, 2, 3). Για να αξιολογηθεί η διαγνωστική αξία των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα, συγκρίναμε νεοδιαγνωσθέντες CRC ασθενείς με πρωτοπαθή όγκο, με ή χωρίς σύγχρονη μεταστάσεις (n = 71) με τους εθελοντές χωρίς όγκο (n = 54) και υπολογίζονται ευαισθησία και εξειδίκευση με τετραπλό τραπέζι. Ξεκινήσαμε με ένα δοκιμαστικό σύνολο των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών CRC (n = 36? Ευαισθησία 75%? Ειδικότητα 76%), και εφαρμόζεται η υπολογιζόμενη βέλτιστη τιμή αποκοπής για την επικύρωση-set των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών CRC (n = 35? ευαισθησία 77%? ειδικότητα 76%). Κατά το συνδυασμό όλων των CRC νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς, ευαισθησία και ειδικότητα ήταν 76% (Πίνακας 4). Κατά την ανάλυση των ασθενών του παχέος εντέρου και του καρκίνου του ορθού χωριστά, ευαισθησίες ήταν 77% και 76%, και η ειδικότητα ήταν 89% και 76%, αντίστοιχα. Έτσι, τα επίπεδα MACC1 μεταγραφή στο πλάσμα υποστηρίζει την ταυτοποίηση των ατόμων που φέρουν παχέος εντέρου και του καρκίνου του ορθού.

Διαπιστώσαμε μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα των ασθενών με καρκίνο. Βρήκαμε σημαντικά υψηλότερα επίπεδα MACC1 στο παχύ έντερο, το ορθό, και του παχέος ασθενείς (συνδυασμένα) καρκίνο σε σύγκριση με τα άτομα χωρίς-όγκο (όλα

P

& lt? 0,001? Εικ. 1 C). Δεν παρατηρήσαμε σημαντικές διακυμάνσεις των επιπέδων MACC1 οφείλονται στην ηλικία, το φύλο, ή μεταξύ των σταδίων του όγκου Ι, ΙΙ και ΙΙΙ.

Υψηλή Κυκλοφορούν MACC1 Απομαγνητοφώνηση επίπεδα στο πλάσμα του μετάσταση καρκίνου του παχέος εντέρου Οι ασθενείς

Για να αξιολογηθεί η συνάφεια των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα σε σχέση με το σχηματισμό μετάστασης, οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ανάλογα με το στάδιο της νόσου: ασθενείς με πρωτοπαθή όγκο χωρίς σύγχρονη μετάσταση (στάδια Ι-ΙΙΙ? n = 51 για τον ορθοκολικό, η = 12 για παχέος εντέρου, και n = 39 για τους ασθενείς με καρκίνο του ορθού)? ασθενείς με πρωτοπαθή όγκο και σύγχρονη μετάσταση (στάδιο IV? n = 20 για τον ορθοκολικό, η = 10 για παχέος εντέρου, και η = 10 για τους ασθενείς με καρκίνο του ορθού)? και τα άτομα με metachronous μετάσταση μετά R0-εκτομή του πρωτογενούς όγκου (η = 11 για τον ορθοκολικό, η = 4 για παχέος εντέρου, και η = 7 για ασθενείς με καρκίνο του ορθού) (Πίνακες 1, 2, 3). Το αίμα ελήφθη κατά την ημέρα της διάγνωσης. Επιπλέον, έχουμε περιλαμβάνονται επίσης ασθενείς παρακολούθησης (n = 230 για τον ορθοκολικό, n = 125 για του παχέος εντέρου, και n = 105 για ασθενείς με καρκίνο του ορθού? Πίνακες 1, 2, 3). επίπεδα MACC1 ήταν σημαντικά υψηλότερα σε κάθε στάδιο της νόσου του παχέος εντέρου και του καρκίνου του ορθού σε σύγκριση με τους εθελοντές χωρίς όγκο (Σχ. 2Α-C). Αξιοσημείωτα, σαφώς αυξημένα επίπεδα MACC1 ανιχνεύθηκαν σε νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με καρκίνο με σύγχρονη μετάσταση (στάδιο IV), σε σύγκριση με τους ασθενείς με καρκίνο χωρίς απομακρυσμένες μεταστάσεις (στάδιο Ι-ΙΙΙ): για τον ορθοκολικό (Εικ. 2Α), του παχέος εντέρου (Εικ. 2Β), και του καρκίνου του ορθού (Σχ. 2C), διαμέσους 0.937, 2.249, και 0.829 έκφραση MACC1 mRNA /% βαθμονομητή σε μετάσταση ασθενείς, σε σύγκριση με 0,61, 0,78, και 0,559 MACC1 mRNA έκφραση /% βαθμονομητή σε ασθενείς χωρίς απομακρυσμένες μεταστάσεις (

P

= 0.006,

P

= 0.176, και

P

= 0,041 για τον ορθοκολικό, του παχέος εντέρου, και ασθενείς με καρκίνο του ορθού, αντίστοιχα). Έτσι, τον ποσοτικό προσδιορισμό της μετεγγραφής MACC1 στο αίμα του ασθενούς είναι διαγνωστική αξία σε σχέση με μετάσταση.

Α, Β, C. Όλα παχέος (A, n = 312), του παχέος εντέρου (Β, η = 151), και του καρκίνου του ορθού (C, n = 161) των ασθενών υπο-ομάδες παρουσίασαν σημαντικά υψηλότερα κυκλοφορούντα επίπεδα μεταγραφής MACC1 από εθελοντές χωρίς όγκο (n = 54). Υψηλότερα επίπεδα MACC1 βρέθηκαν επίσης για τον ορθοκολικό (

P

= 0.006? Α) και του ορθού (

P

= 0.041? C) ασθενείς με καρκίνο με μεταστάσεις σύγχρονη (n = 20 και n = 10, αντίστοιχα) σε σύγκριση με ασθενείς χωρίς απομακρυσμένες μεταστάσεις (n = 51 και n = 39, αντίστοιχα). ανάλυση Θηκόγραμμα, με βάση την ποσοτική πραγματικού χρόνου RT-PCR.

Η

Υψηλή Κυκλοφορούν MACC1 Απομαγνητοφώνηση επίπεδα στο πλάσμα του καρκίνου του παχέος εντέρου Οι ασθενείς σχετίζεται με Shorter Επιβίωση

Στη συνέχεια, θα αξιολογηθεί η προγνωστική επίδραση των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα. Αρχίσαμε την ανάλυση των κυκλοφορούντων επιπέδων MACC1 σε σχέση με την επιβίωση του νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς CRC με πρωτογενή όγκο, με ή χωρίς σύγχρονη μεταστάσεις (ελήφθησαν δείγματα αίματος κατά την ημέρα της διάγνωσης) (Σχ. 3Α). Η τιμή αποκοπής που χρησιμοποιήθηκε ήταν η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων MACC1 σε αυτή την ομάδα ασθενών (0.670 έκφραση MACC1 mRNA /% βαθμονόμησης). Σύμφωνα με αυτό το cut-off, οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ως χαμηλό ή υψηλό εκφραστές MACC1. Είναι ενδιαφέρον, αυτοί οι νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με χαμηλά επίπεδα MACC1 (& lt? Cut-off) έδειξε ένα σημαντικά μεγαλύτερο χρόνο επιβίωσης από ό, τι οι ασθενείς με υψηλά επίπεδα MACC1 (& gt? Cut-off) (

P

= 0.003? Εικ. 3Α). Έτσι, τα κυκλοφορούντα επίπεδα μεταγραφής MACC1 στο πλάσμα όταν προσδιορίζεται κατά την ημέρα της διάγνωσης, έχουν προγνωστική αξία για την επιβίωση των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών.

Α, Β κατά Kaplan-Meier ανάλυση για νεοδιαγνωσθέντες (A, n = 49) και όλα τα (Β, n = 294) των ασθενών CRC, με βάση και μόνο MACC1 (Α, χαμηλή MACC1 n = 24, υψηλή MACC1 n = 25? Β, χαμηλή MACC1 n = 147, υψηλή MACC1 n = 147). Νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς CRC (Α) καθώς και όλα τα CRC ασθενείς (Β) με υψηλά επίπεδα κυκλοφορίας μεταγραφής MACC1 αποδειχθεί μικρότερη επιβίωση σε σύγκριση με τους ασθενείς που καταδεικνύουν χαμηλά επίπεδα MACC1 (

P

= 0.003 και

P

& lt? 0,0001, αντίστοιχα). C, ανάλυση D. Kaplan-Meier για νεοδιαγνωσθέντες (C, η = 49) και όλα (D, n = 294) ασθενείς CRC, βασίζεται σε ένα συνδυασμό των MACC1 και S100A4. Νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς CRC (C) και όλα τα CRC ασθενείς (D) ταξινομήθηκαν σε ομάδες των χαμηλών εκφραστές των δύο γονιδίων (n = 13 και n = 85, αντίστοιχα), από ασθενείς με υψηλά επίπεδα S100A4 (n = 25 και n = 147 , αντίστοιχα), από ασθενείς με υψηλά επίπεδα MACC1 (n = 25 και n = 147, αντίστοιχα), ή με υψηλή έκφραση και των δύο βιοδείκτες (n = 14 και n = 85, αντίστοιχα). Για τους ασθενείς που διαγνώστηκαν πρόσφατα (C), η επιβίωση μειώθηκε με την αύξηση των επιπέδων των κυκλοφορούντων μεταγραφές S100A4, του MACC1, ή και των δύο. επαγωγή έκφρασης είτε MACC1 ή S100A4 ή και των δύο βιοδείκτες συσχετίζεται με μειωμένη επιβίωση των ασθενών.

Η

Στη συνέχεια, θελήσαμε να αναλύσουμε το κατά πόσον ένα προγνωστικό αντίκτυπο των μεταγραφών MACC1 ισχύει και για την ομάδα των ασθενών CRC, συμπεριλαμβανομένων των ασθενών παρακολούθησης. Η τιμή αποκοπής που χρησιμοποιήθηκε ήταν η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων MACC1 όλων των ασθενών CRC (0,518 έκφραση MACC1 mRNA /% βαθμονόμησης). Με βάση αυτό το cut-off, όλα τα CRC ασθενείς ταξινομήθηκαν ως χαμηλό ή υψηλό εκφραστές MACC1. Αξίζει να σημειωθεί ότι, θα μπορούσαμε να επιβεβαιώσει το εύρημα μας από την ομάδα των νεοδιαγνωσθέντων ασθενών και για όλα τα CRC ασθενείς που αναλύθηκαν: ασθενείς με χαμηλά επίπεδα MACC1 (& lt? Cut-off) έδειξαν σημαντικά μεγαλύτερο χρόνο επιβίωσης από ό, τι οι ασθενείς με υψηλά επίπεδα MACC1 (& gt? Cut- off) (

P

& lt? .0001? Εικ. 3Β). Έτσι, τα επίπεδα των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο CRC πλάσμα του ασθενούς είναι προγνωστική αξία σε σχέση με την επιβίωση των ασθενών.

Συνδυασμός των κυκλοφορούντων MACC1 και S100A4 Απομαγνητοφώνηση επίπεδα στο πλάσμα βελτιώνει την επιβίωση Πρόβλεψη για καρκίνο του παχέος εντέρου Οι ασθενείς

για την περαιτέρω βελτίωση πρόβλεψη της επιβίωσης, προσθέσαμε την S100A4 γονίδιο μετάστασης, ένα στόχο της Wnt /β-κατενίνης-μονοπάτι, σε αυτή την ανάλυση MACC1. Είχαμε επιλέξει αυτές τις βιοδείκτες μετάσταση για το συνδυασμό, δεδομένου ότι την αντιμετώπιση των πιο σχετικών οδών σηματοδότησης σε παχέος εξέλιξης του καρκίνου και της μετάστασης: MACC1 – ένα βασικό ρυθμιστή της HGF /Met μονοπατιού σηματοδότησης, και S100A4- ένα μεταγραφικό γονίδιο στόχο της Wnt /β-κατενίνης μονοπάτι σηματοδότησης. Μέχρι στιγμής, δεν υπάρχει σταυρός ρύθμιση αυτών των δύο γονιδίων μετάστασης που σχετίζονται με – MACC1 και S100A4 – είναι γνωστό

Επιπλέον, έχουμε αναφερθεί στο παρελθόν την διαγνωστική και προγνωστική αξία της S100A4 μεταγραφές στο πλάσμα [18].. Εδώ, άτομα με επίπεδα πλάσματος χαμηλής S100A4 έδειξε επίσης μεγαλύτερη επιβίωση (Εικ. S1 Α, Β).

Θα απευθύνεται πρώτα το ερώτημα σχετικά με το εάν ο συνδυασμός των δύο βιοδείκτες, που κυκλοφορεί μεταγραφές MACC1 και S100A4, μπορεί να βελτιώσει η προγνωστική αξία των MACC1 μόνη της κλάσης του νεοδιαγνωσθέντων ασθενών CRC. Οι τιμές cut-off που χρησιμοποιήθηκαν ήταν η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων MACC1 σε αυτή την ομάδα ασθενών (0.670 έκφραση MACC1 mRNA /% βαθμονομητή), καθώς και η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων S100A4 σε αυτή την ομάδα ασθενών (0.435 έκφραση S100A4 mRNA /% βαθμονομητή) . Σύμφωνα με αυτές τις τιμές cut-off, οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ως χαμηλή εκφραστές των δύο γονιδίων, όπως υψηλή εκφραστές του S100A4, όπως υψηλή εκφραστές του MACC1, ή τόσο υψηλή εκφραστές των δύο γονιδίων. Οι ασθενείς που εμφάνισαν χαμηλά επίπεδα κυκλοφορούντων της MACC1 και S100A4, είχαν τις μεγαλύτερες στιγμές επιβίωσης. Μειωμένη επιβίωση στη συνέχεια παρατηρήθηκε για τους ασθενείς με υψηλά επίπεδα S100A4, ακολουθούμενη από ασθενείς με υψηλά επίπεδα MACC1. Μικρότερη χρόνοι επιβίωσης αποτελέσματα για τους ασθενείς με τα δύο βιοδείκτες υψηλής έκφρασης (Σχ. 3C). Έτσι, για νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς, ο συνδυασμός των υψηλών MACC1 και τα υψηλά επίπεδα S100A4 βελτιωμένη πρόβλεψη επιβίωση, σε σύγκριση με τα υψηλά επίπεδα MACC1 μόνο. ​​

Στη συνέχεια αξιολογούνται Αυτή η συνδυαστική προσέγγιση MACC1 και S100A4 σε σχέση με την επιβίωση για όλους τους ασθενείς CRC , συμπεριλαμβανομένων και των ασθενών παρακολούθησης. Οι τιμές cut-off που χρησιμοποιήθηκαν ήταν η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων MACC1 για όλους τους ασθενείς CRC (0.518 έκφραση MACC1 mRNA /% βαθμονομητή), καθώς και η διάμεση τιμή των μετρούμενων επιπέδων S100A4 για όλους τους ασθενείς CRC (0.421 έκφραση S100A4 mRNA /% βαθμονομητή) . Σύμφωνα με αυτές τις τιμές cut-off, όλοι CRC ασθενείς ταξινομήθηκαν ως χαμηλή εκφραστές των δύο γονιδίων, όπως υψηλή εκφραστές του S100A4, όπως υψηλή εκφραστές του MACC1, ή τόσο υψηλή εκφραστές των δύο γονιδίων. Όπως παρατηρήθηκε για τις νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς, επίσης όλους τους ασθενείς οι οποίοι έδειξαν CRC χαμηλά επίπεδα κυκλοφορίας του MACC1 και του S100A4, είχε το μέγιστο χρόνο επιβίωσης. επαγωγή έκφρασης είτε MACC1 ή S100A4 ή και των δύο βιοδείκτες συσχετίζονται με μειωμένο ασθενείς επιβίωση (Εικ. 3D).

Επιπλέον, μπορούμε επίσης σύγκριση της επιβίωσης των ασθενών με χαμηλά επίπεδα MACC1 και S100A4 ή με μία μόνο δείκτη (είτε MACC1 ή S100A4) αυξήθηκε με την επιβίωση των ασθενών που παρουσίασαν τόσο MACC1 και S100A4 αυξημένα. Βρήκαμε ένα σημαντικά βραχύτερη επιβίωση για τους ασθενείς με υψηλά επίπεδα και των δύο βιοδεικτών πλάσματος. Αυτό παρατηρήθηκε για την ομάδα των ασθενών που διαγνώστηκαν πρόσφατα (

P

& lt? 0,0001? Εικ. S2A), καθώς και για όλες τις ασθενείς CRC αναλύθηκαν (

P

= 0.001? Σχ. S2B ).

Συζήτηση

Εδώ αναφέρουμε την ανάπτυξη του πρώτου προσδιορισμού με βάση το αίμα για την μετάσταση επάγει γονίδιο MACC1, η οποία είναι ένας προγνωστικός βιοδείκτης για μετάσταση καρκίνου του παχέος εντέρου, καθώς και για την εξέλιξη του όγκου και την επιβίωση σε μια ποικιλία στερεών καρκίνων. Αυτή η δοκιμασία για κυκλοφορούν μεταγραφές MACC1, η οποία μπορεί να ποσοτικοποιηθεί σε τακτική βάση, είναι κλινικά εφαρμόζεται για τη διάγνωση, την πρόγνωση και θεραπευτική παρακολούθηση των ασθενών με καρκίνο. Τα επίπεδα των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 είναι σημαντικά υψηλότερες σε ασθενείς με καρκίνο σε σύγκριση με τους εθελοντές χωρίς όγκο. Αξίζει να σημειωθεί ότι, υψηλότερα επίπεδα κυκλοφορούντων μετεγγραφής MACC1 προσδιορίστηκαν σε άτομα με μεταστάσεις, αποδεικνύοντας την διαγνωστική αξία των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα του ασθενούς σε σχέση με το σχηματισμό μετάστασης. Το πιο σημαντικό, τα υψηλά επίπεδα MACC1 – προοπτικά καθοριστεί -. Συσχετίζονται με δυσμενείς επιβίωση των ασθενών υπογραμμίζοντας την προγνωστική αξία των κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1

Η ανίχνευση του mRNA ελεύθερου κυττάρων στο αίμα ως «υγρό βιοψίες» επιτρέπει την παρακολούθηση σε πραγματικό χρόνο της προόδου της νόσου, την πρόγνωση και θεραπευτική ανταπόκριση [19]. Πολυάριθμες μελέτες περιγράφουν ανίχνευση μεταγράφου των κυκλοφορούντων κυττάρων χωρίς RNA στο πλάσμα και στον ορό των ασθενών που πάσχουν από μία ποικιλία στερεών καρκίνων, συμπεριλαμβανομένων του θυρεοειδούς, των πνευμόνων, του στομάχου, του μαστού και της μήτρας καρκίνου του τραχήλου, και η χρήση του για την πρόγνωση της πορείας της νόσου [20] – [29]. Σταθερότητα των κυκλοφορούντων κυττάρων χωρίς RNA εξασφαλίζεται από εξωσώματα (μικροσωματίδια, μικροκυστίδια, multivesicles) προστατεύοντάς το από την υποβάθμιση [30], [31]. Ιδιαίτερα για την κυκλοφορία RNA στο πλάσμα από ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου έχει αναφερθεί ότι αυτό το ελεύθερο κυττάρων RNA περιορίζεται σε mRNA εμπλουτισμένο κυστίδια όπως δομές [32]. Αρκετές κυκλοφορούν μεταγραφές έχουν ήδη αναφερθεί ότι είναι χρήσιμες για τη διάγνωση και την πρόγνωση για τον ορθοκολικό καρκίνο? π.χ. hTERT [33], β-κατενίνης [34], θυμιδυλική συνθάση [35], και LISCH7 [36]. Ιδιαίτερα CEA [37], [38], και σε συνδυασμό με δείκτες όπως CK19, ΟΚ20, hTERT, TIMP-1, miR141 [39] – [41], αναγνωρίζεται ως ενδεχόμενη ενίσχυση στην έγκαιρη ανίχνευση CRC, ως προγνωστικός δείκτης για υποτροπή, αλλά και ως προγνωστικό βιοδείκτη σε σχέση με την ανταπόκριση της θεραπείας. Εξετάζοντας το συνδυασμό και των δύο, CEA και MACC1, θα μπορούσε να ξεπεράσει αυτά τα χαρακτηριστικά.

νέα ευρήματά μας κυκλοφορούντων μεταγραφές MACC1 στο πλάσμα των ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου για τη διάγνωση και την πρόβλεψη της επιβίωσης είναι σύμφωνες με αυτές που παρουσιάζονταν με βάση παρελθόν για τον ποσοτικό προσδιορισμό της έκφρασης mRNA σε ορθοκολικό καρκινικούς ιστούς σε σχέση με την πρόγνωση της νόσου. [1] Στη συνέχεια, αρκετές ομάδες επικυρωθεί το σύνδεσμο της υψηλής έκφρασης MACC1 σε ορθοκολικό καρκινικό ιστό σε προχωρημένη νόσο (π.χ. [5], [7], [8]).