Αφηρημένο

Νουκλεολίνης ενοχοποιείται για να παίξει ένα ρόλο στην αγγειογένεση, μια ζωτικής σημασίας διαδικασία στην ανάπτυξη και μετάσταση όγκου. Ωστόσο, η παρουσία και η κλινική σημασία της νουκλεολίνης σε ανθρώπινο μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) παραμένει σε μεγάλο βαθμό άγνωστος. Σε αυτή τη μελέτη, διερευνήσαμε την έκφραση και την προγνωστική επίπτωση νουκλεολίνης σε χειρουργικά ασθενείς με NSCLC. Μια ομάδα από 146 ασθενείς με ΜΜΚΠ οι οποίοι υποβλήθηκαν σε χειρουργική εκτομή επιλέχθηκε για μικροσυστοιχιών ιστού. Σε αυτή την μικροσειρά ιστό, νουκλεολίνης έκφραση μετρήθηκε με ανοσοφθορισμό. Η χρώση για CD31, έναν δείκτη ενδοθηλιακών κυττάρων, διεξήχθη για να σηματοδοτήσει αιμοφόρα αγγεία. Ένα Cox μοντέλο αναλογικών κινδύνων χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση της προγνωστικής σημασίας της νουκλεολίνης. Νουκλεολίνης έκφραση παρατηρήθηκε σε 34.2% όλων των ασθενών, και 64,1% στους ασθενείς έκφραση υψηλού CD31. Η ελεύθερη νόσου επιβίωση (DFS) ήταν σημαντικά μικρότερη σε ασθενείς με υψηλή νουκλεολίνη (CD31

hiNCL

hi) σε σύγκριση με τους ασθενείς με τα αιμοφόρα αγγεία χαμηλό όγκο (CD31

loNCL

lo) (5 ys της DFS 24% έναντι 64%,

σ

= 0,002). Μια τέτοια διαφορά καταδείχθηκε στις ακόλουθες στρωματοποιημένο αναλύσεις: το στάδιο Ι (

σ

& lt? 0.001), πλακώδες καρκίνωμα και το καρκίνωμα αδενοχοληδωτό κυττάρων (

σ

= 0,028), μικρό όγκο (& lt? 5 cm,

σ

= 0.008), και η χειρουργική επέμβαση και μόνο (

σ

= 0,015). Η πολυπαραγοντική ανάλυση έδειξε επίσης ότι νουκλεολίνη έκφραση προέβλεψε ανεξάρτητα για χειρότερη επιβίωση (

σ

= 0,003). Αυτή η μελέτη καταδεικνύει ότι νουκλεολίνη σχετίζεται με τα κλινικά αποτελέσματα σε ασθενείς με NSCLC μετεγχειρητική. Έτσι, τα επίπεδα έκφρασης των νουκλεολίνη μπορεί να παρέχει ένα νέο προγνωστικό δείκτη για τον εντοπισμό των ασθενών που διατρέχουν υψηλότερο κίνδυνο για αποτυχία της θεραπείας, ιδιαίτερα σε ορισμένες υποομάδες

Παράθεση:. Zhao H, Huang Υ, Xue C, Chen Υ, Χου Χ Ο Guo Y, et al. (2013) προγνωστική σημασία της Συνδυασμένης Αποτέλεσμα της ενδοθηλιακή έκφραση του Νουκλεολίνης και CD31 στα χειρουργικά μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 8 (1): e54674. doi: 10.1371 /journal.pone.0054674

Επιμέλεια: Mitsunobu R. Κάνο, Πανεπιστήμιο Okayama, Japan

Ελήφθη: 16 Ιούλ, 2012? Αποδεκτές: 17 Δεκ 2012? Δημοσιεύθηκε: 31, Ιανουαρίου 2013

Copyright: © 2013 Zhao et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνου

πνεύμονα είναι η κύρια αιτία των θανάτων από καρκίνο στην. ανδρών και γυναικών [1]. Μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα (NSCLC) αντιπροσωπεύει περίπου το 85% όλων των καρκίνων του πνεύμονα, και είναι τυπικά σχετίζονται με την κακή έκβαση. Το ποσοστό υποτροπής των NSCLC είναι σημαντικά υψηλό σε ασθενείς με πλήρη εκτομή του πρωτοπαθούς όγκου, που εισέφερε την υψηλότερη θνησιμότητα σχετιζόμενη με τον καρκίνο σε όλο τον κόσμο. Για τη φάση I /II NSCLC, τα ποσοστά υποτροπής είναι περίπου 35-67% και τα 5-ετή κυμαίνεται ποσοστό επιβίωσης 33 έως 63% [2], [3]. Στην πραγματικότητα, οι περισσότερες αποτυχίες θεραπείας είναι σε μεγάλο βαθμό οφείλεται στο μακρινό υποτροπές.

Η αγγειογένεση είναι μια κρίσιμη διαδικασία κατά την ανάπτυξη και μετάσταση όγκου [4], [5]. Έχει αποδειχθεί ότι νεοαγγειογένεσης αποτελεί σημαντικό προγνωστικό παράγοντα τόσο για τη συνολική επιβίωση και την επιβίωση χωρίς ασθένεια στον καρκίνο του πνεύμονα [6] – [12]. Πολυάριθμες μελέτες έχουν μετρηθεί μικροαγγειακή πυκνότητα όγκου (MVD) με χρώση CD31. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ MVD και της επιβίωσης σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα παραμένει άλυτο [13].

νουκλεολίνη είναι ένα πανταχού παρόν μη-ιστόνης πρωτεΐνη που απομονώθηκε αρχικά από το πυρηνίσκο [14]. Ως πολυλειτουργική πρωτεΐνη, νουκλεολίνης διαδραματίζει θεμελιώδη ρόλο σε πολλές σημαντικές διαδικασίες, συμπεριλαμβανομένου του πολλαπλασιασμού των κυττάρων, ριβόσωμα συναρμολόγηση, rDNA μεταγραφή, τη συσκευασία προ-RNA, και την οργάνωση της χρωματίνης πυρηνισκικός [15], [16]. Ωστόσο, συσσωρεύοντας στοιχεία δείχνουν ότι η νουκλεολίνη μπορεί μεταφοράς με λεωφορείο προς το κυτταρόπλασμα και μεμβράνη από το nucleolus [17] – [20]. Αν και νουκλεολίνης εντοπίζεται κυρίως στο πυρηνίσκο, έχει επίσης βρεθεί στην κυτταρική επιφάνεια διαφόρων τύπων κυττάρων σε μία φωσφορυλιωμένη μορφή [21]. Πρόσφατα, νουκλεολίνης έκφραση παρατηρήθηκε στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων σε εν τω γεννάσθαι αιμοφόρα αγγεία του όγκου [22], [23]. Εν απουσία κυτταρικής επιφάνειας νουκλεολίνης, τα ενδοθηλιακά κύτταρα έχασαν μερικώς κινητικότητα τους και απέτυχαν να σχηματίσουν σωληναρίων δομές [24]. Επιπλέον, ως νέο λειτουργικού υποδοχέα για endostain, νουκλεολίνη είναι υπεύθυνη για τα ισχυρά αντιαγγειογόνο και κατά του όγκου δραστηριότητες του endostain [25], [26]. Προηγούμενες μελέτες έχουν βρει νουκλεολίνη έκφραση εντοπισμένη σε πιο αιμοφόρα αγγεία των όγκων ξενομοσχεύματος, υποδηλώνοντας την πιθανή εμπλοκή της νουκλεολίνης στην αγγειογένεση του όγκου [23], [26]. Ωστόσο, μέχρι στιγμής, δεν υπάρχουν προς το παρόν λίγες εκθέσεις που μελετούν τις επιπτώσεις της νουκλεολίνης σε ανθρώπινο NSCLC.

Με βάση τις προηγούμενες μελέτες των προγνωστικών βιοδεικτών σε ασθενείς με NSCLC [27], [28] και τη συμμετοχή της νουκλεολίνης σε αγγειογένεση όγκου, υποθέσαμε ότι νουκλεολίνη μπορεί να χρησιμεύσει ως ένα σημαντικό δείκτη για νεοαγγειογένεσης όγκου και σχετίζεται με κακή πρόγνωση σε πρώιμο NSCLC μετά από ριζική χειρουργική επέμβαση. Στην παρούσα μελέτη, εξετάσαμε τη σχέση μεταξύ νουκλεολίνη έκφρασης και clinicopathogical μεταβλητές σε 146 ασθενείς με ΜΜΚΠ λειτουργεί.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς

Ένα σύνολο από 146 συνεχόμενες NSCLC ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με ριζική χειρουργική επέμβαση από Αύγουστος 2000 – Νοέμβριος 2004 στο Cancer Center της Sun Yat-Sen University εντάχθηκαν σε αυτή τη μελέτη. Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Ιατρικής Δεοντολογίας της Sun Yat-Sen University. Οι ασθενείς με προηγούμενο ιστορικό κακοήθων νόσων αποκλείστηκαν. δείγματα ιστού του όγκου και τα δεδομένα παρακολούθησης ήταν διαθέσιμα για όλους τους περιλαμβάνονται περιπτώσεις. Τα δημογραφικά στοιχεία των ασθενών παρατίθενται στον Πίνακα 1. Ο βαθμός διαφοροποίησης όγκου προσδιορίστηκε σύμφωνα με τα κριτήρια της Παγκόσμιας Οργάνωσης Υγείας. Η παθολογική Όγκων-Node-Μετάσταση (TNM) κατάσταση αξιολογήθηκε από την ταξινόμηση ΤΝΜ της Διεθνούς Ένωσης κατά του Καρκίνου (UICC, 2002). Ελεύθερη νόσου επιβίωση ορίστηκε ως το χρονικό διάστημα από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την ημερομηνία της εξέλιξης της νόσου ή θανάτου. Αν δεν παρατηρήθηκε εξέλιξη της νόσου ή θανάτου στο τέλος της παρακολούθησης, η επιβίωση ελεύθερη νόσου ορίστηκε από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την τελευταία ώρα της αξιολόγησης του όγκου. Συνολική επιβίωση ορίστηκε ως το χρονικό διάστημα από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την ημερομηνία θανάτου ή την τελευταία παρακολούθηση. χρόνος Bone μετάσταση ορίστηκε από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την ημερομηνία μετάσταση στα οστά. Εάν δεν μετάσταση στα οστά σημειώθηκε στην τελευταία παρακολούθηση, χρόνος μετάσταση στα οστά υπολογίστηκε ως το διάστημα από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την τελευταία ώρα της αξιολόγησης του όγκου. Η ημερομηνία έναρξης της εισαγωγική χημειοθεραπεία αγνοήθηκε. Η ημερομηνία λήξης της μελέτης παρακολούθησης ήταν 3 Μαρτίου 2010. Η μέση παρακολούθηση ήταν 70,8 μήνες. (Εύρος: 10,4 – 114 μήνες)

Η

Κατασκευή ιστικές μικροσυστοιχίες (ΤΜΑ)

Το ΤΜΑ δομήθηκε σύμφωνα με μια μέθοδο που περιγράφηκε προηγουμένως [29]. Εν συντομία, το άτομο μπλοκ ιστού δότη και η αντίστοιχη αιματοξυλίνη και εοσίνη (Η &? Ε) -stained πλακίδια επικαλύφθηκαν για ιστό TMA δειγματοληψία. Ο ιστός του δείγματος χρησιμοποιώντας ένα όργανο διευθέτησης ιστού (Beecher Instruments, Silver Spring, MD, USA). Ένας πυρήνας διαμέτρου 0,6-mm ιστών απομακρύνθηκε και επανα-ενσωματώνονται σε μια προκαθορισμένη θέση σε ένα μπλοκ δέκτη παραφίνη. Τρία δείγματα πυρήνα επιλέχθηκαν από κάθε πρωτογενούς όγκου. Πολλαπλές τομές (πάχους 5 μm) κόπηκαν από μπλοκ ΤΜΑ και τοποθετήθηκαν σε πλακίδια επενδεδυμένη με κόλλα χρησιμοποιώντας την παραφίνη συστήματος ταινίας-Transfer (Instrumedics, Hackensack, NJ, USA).

Ανοσοϊστοχημεία

Σύμφωνα με μεθόδους που περιγράφονται προηγουμένως [23], [26], οι αποπαραφινοποιήθηκαν τομές επωάστηκαν στους 4 ° C όλη τη νύκτα με αντι-ανθρώπινο CD31 mAb (Santa Cruz Biotechnologies, Santa Cruz, CA, USA) και κουνελιού αντι-ανθρώπινης νουκλεολίνης pAb (Protgen , Πεκίνο, Κίνα). Μετά το ξέπλυμα με TBS-T (0.1% Tween 20 σε TBS), τα δείγματα επωάστηκαν με δευτερεύοντα αντισώματα FITC-συζευγμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-ποντικού και TRITC-συζευγμένο αντίσωμα κατσίκας αντι-κουνελιού (Jackson Immuno-Research Laboratories, West Grove, ΡΑ, USA) για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου. Οι πυρήνες βάφτηκαν με DAPI. Ομοεστιακή εικόνες φθορισμού συλλήφθηκαν από τουλάχιστον 4 τυχαία πεδία ανά τμήμα στα 100 × μεγέθυνση χρησιμοποιώντας μια σάρωση με λέιζερ σύστημα συνεστιακής απεικόνισης της Nikon Α1 (Nikon, Ιαπωνία). Εικόνες ελήφθησαν και αξιολογήθηκαν με πολλαπλούς σωλήνες φωτοπολλαπλασιαστή ρυθμίζεται από Nikon λογισμικού NIS-στοιχεία. Όλες οι διαφάνειες εξετάστηκαν από δύο ανεξάρτητους παθολογοανατόμους που δεν γνώριζαν την κλινική και παθολογική πληροφορίες.

Στατιστική Ανάλυση

λογισμικό SPSS16.0 (SPSS Inc, Chicago, IL, USA) χρησιμοποιήθηκε για τα δεδομένα ανάλυσης.

ελεύθερη νόσου επιβίωση και η συνολική επιβίωση εκτιμήθηκαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier και αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ log-rank. Η συσχέτιση της νουκλεολίνης έκφρασης με κλινικά και παθολογικά χαρακτηριστικά αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας το Chi-square τεστ. Στατιστικά σημαντικές μεταβλητές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας μονοπαραγοντική Cox μοντέλο αναλογικού κινδύνου. ανάλυση Πολυμεταβλητή επιβίωση εκτελέστηκε για όλες τις παραμέτρους για τη δοκιμή για ανεξάρτητο προγνωστικό αξίες. Τα αποτελέσματα θεωρήθηκαν σημαντικές σε Ρ & lt?. 0.05

Αποτελέσματα

Cohort Περιγραφή και κλινικά προγνωστικά

Τα κλινικά και παθολογικά χαρακτηριστικά του κάθε ασθενούς παρατίθενται στον Πίνακα 1. Η μέση όγκου μέγεθος ήταν 4,25 εκατοστά (εύρος, 1-12 cm). Εξήντα από 146 ασθενείς (41%) που υποβλήθηκαν σε χειρουργική επέμβαση έλαβε επίσης χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία. Η πρόοδος του όγκου παρατηρήθηκε σε 71 ασθενείς (49%), με μακρινή υποτροπή σε 62 ασθενείς και τοπικής υποτροπής σε 9 ασθενείς. Πενήντα τρεις ασθενείς (36%) έχασαν τη ζωή τους κατά τη διάρκεια του χρόνου παρακολούθησης. Το εκτιμώμενο ποσοστό ελεύθερης νόσου επιβίωσης 5-ετών ήταν 47% (95% CI, 40,7% -59,3%), και το συνολικό ποσοστό επιβίωσης 5-ετών ήταν 69% (95% CI, 63,2% -78,7%) για όλα τα 146 ασθενείς. Όπως ήταν αναμενόμενο, η μονοπαραγοντική ανάλυση έδειξε σημαντικές συσχετίσεις της διαφοροποίησης του καρκίνου, το μέγεθος του όγκου, Ν στάδιο, και παθολογικές στάδιο τόσο με την επιβίωση ελεύθερη νόσου και συνολική επιβίωση. Ωστόσο, η μορφή θεραπείας συνδέθηκε μόνο με την ελεύθερη νόσου επιβίωση, αλλά όχι τη συνολική επιβίωση (Πίνακας 1).

Νουκλεολίνης Έκφραση σε NSCLC

Νουκλεολίνης ανιχνεύθηκε σε 50 ασθενείς από τη συνολική ομάδα των ασθενών (34,2%). Περαιτέρω ανάλυση με παθολογικοί παράγοντες αποκάλυψε ότι νουκλεολίνη έκφραση ήταν σημαντικά σχετίζεται με μεγάλους όγκους (≥5 cm) (μεγάλες έναντι μικρές: 44,4% έναντι 28,3%,

P

= 0,047). Δεν υπήρχαν σημαντικές σχέσεις μεταξύ νουκλεολίνης και άλλους παράγοντες, όπως η ηλικία, το φύλο, η ιστολογική υποτύπου, τη διαφοροποίηση του καρκίνου και παθολογικές στάδια.

Αξίζει να σημειωθεί ότι, υψηλή έκφραση CD31 σημειώθηκε στο 53,2% του συνόλου της κοόρτης (n = 78 ). Νουκλεολίνης ήταν colocalized με το CD31 παν-ενδοθηλιακού δείκτη σε όλους τους 50 ασθενείς με νουκλεολίνη έκφρασης (64,1%). Ωστόσο, νουκλεολίνης απουσίαζε σε άλλες 28 ασθενείς με έκφραση CD31. Τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ένα πιθανό ρόλο για νουκλεολίνης στην ανάπτυξη της αγγειογένεσης του όγκου. Οι ασθενείς περαιτέρω διαιρέθηκαν σε τρεις ομάδες με βάση την κατάσταση της νουκλεολίνης και της έκφρασης CD31 (Σχήμα 1). Αυτό περιελάμβανε υψηλή εμφάνιση των αιμοφόρων αγγείων του όγκου με έκφραση νουκλεολίνη (CD31

hiNCL

hi), κατά μέσο όρο αριθμό των αιμοφόρων αγγείων πάνω από 10 /τομέα, και τυπική μορφολογία των αιμοφόρων αγγείων θα πρέπει να είναι εμφανής. Επιπλέον, το επίπεδο έκφρασης σε αυτούς τους NCL αιμοφόρα αγγεία του όγκου είναι σημαντικά υψηλότερη (τουλάχιστον 2-φορές μεγαλύτερη μέση ένταση φθορισμού, που μετράται με Nikon NIS-Elements Software) από το βασικό επίπεδο NCL εντός ολόκληρη την περιοχή του όγκου. Αυξημένη συν-εντοπισμός παρατηρήθηκε επίσης μεταξύ CD31 θετικό σωληνοειδείς δομές και τις θετικές περιοχές NCL. Οι ασθενείς επίσης χωρίζεται περαιτέρω από το υψηλό εμφάνιση των αιμοφόρων αγγείων του όγκου χωρίς νουκλεολίνη έκφρασης (CD31

hiNCL

lo). Τα κριτήρια αυτά περιλαμβάνουν ένα παρόμοιο πυκνότητα σκάφος υψηλής αρτηριακής ως εκείνα του CD31

hiNCL

hi ομάδα, το επίπεδο έκφρασης NCL στα αιμοφόρα αγγεία του όγκου δεν ήταν σημαντικά υψηλότερη (& lt? 2 φορές, η μέση ένταση φθορισμού) από την βασική επίπεδο NCL σε ολόκληρη ιστό του όγκου. Επιπλέον, δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των συν-εντοπισμός των CD31 θετικών σωληνοειδείς δομές και θετικές περιοχές NCL.

Ο όγκος των αιμοφόρων αγγείων και νουκλεολίνη βάφτηκαν με αντι-CD31 (πράσινο) και αντι-νουκλεολίνης (κόκκινο) , αντίστοιχα. Οι πυρήνες βάφτηκαν με DAPI (μπλε). Εκπρόσωπος εικόνες από τις τρεις ομάδες που παρουσιάζονται εδώ. (Α) CD31

hiNCL

hi, (Β) CD31

hiNCL

lo, (C) CD31

loNCL

lo. μπαρ κλίμακα, 50 μm.

Η

Από την άποψη των αιμοφόρων αγγείων χαμηλό όγκο (CD31

loNCL

lo), ο μέσος αριθμός των αιμοφόρων αγγείων με τυπική σωληνοειδή δομή θα πρέπει να είναι μικρότερη από 10 /πεδίο. Αυτά τα αιμοφόρα αγγεία του όγκου δεν θα πρέπει ούτε εκφράζουν υψηλά νουκλεολίνη ούτε συν-εντοπίζεται με CD31 θετικό σκάφη. Σχεδόν κανένας νουκλεολίνη τμήμα έκφραση πυκνότητας υψηλή χαμηλή αιμοφόρων αγγείων παρατηρήθηκε μεταξύ των τμημάτων NSCLC.

μονοπαραγοντική Ανάλυση Επιβίωσης

Χρησιμοποιήσαμε μονοπαραγοντική ανάλυση για να διαπιστωθεί η επίδραση της νουκλεολίνης έκφρασης για την επιβίωση των ασθενών με NSCLC με χειρουργικά εξαιρέσιμων όγκων. Τα δεδομένα επιβίωσης παρουσιάζονται στον Πίνακα έκφραση 2. Νουκλεολίνης συσχετίστηκε με μειωμένη επιβίωση ελεύθερη νόσου (

P = 0,002

, σχήμα 2), αλλά δεν επηρέασε τη συνολική επιβίωση (

P = 0,841

). Στρωματοποιημένη ανάλυση αποκάλυψε μια σημαντική συσχέτιση νουκλεολίνης έκφρασης με την ελεύθερη νόσου επιβίωση σε ασθενείς με πλακώδες ή αδενοχοληδωτό καρκίνωμα (

P = 0,028

, σχήμα 3), αλλά όχι σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα (

P =

0.061). Νουκλεολίνη έκφραση συσχετίστηκε επίσης με την ελεύθερη νόσου επιβίωση όταν στρωματοποιημένη από άλλα χαρακτηριστικά του όγκου, όπως η χαμηλή διαφοροποίηση του καρκίνου (

P = 0,038

, σχήμα 3), μέση /υψηλή διαφοροποίηση του καρκίνου (

P =

0,01), η χειρουργική θεραπεία μόνο (

P =

0.015), και το μικρότερο μέγεθος του όγκου (

Ρ = 0,008

, σχήμα 3). Το πιο σημαντικό, νουκλεολίνη είχε σημαντική επίδραση στην επιβίωση ελεύθερη νόσου σε ασθενείς Ι στάδιο (

P

& lt? 0,0001, σχήμα 3), αλλά όχι σε ασθενείς με στάδιο ΙΙ ασθένεια ΙΙΙΑ (

P =

0.374). Ωστόσο, δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές για τη συνολική επιβίωση μεταξύ των τριών νουκλεολίνη ομάδες σε σχέση με τις μεταβλητές κλινικές και παθολογικές όγκου

HH:. CD31

hiNCL

hi, HL: CD31

hiNCL

lo, και LL: CD31

loNCL

lo

Η

HH:. CD31hiNCLhi, HL: CD31hiNCLlo, και LL:. CD31loNCLlo

Η

Uniltivariate κινδύνους ανάλυση της αναλογίας χρησιμοποιήθηκε για να εκτιμηθεί η σημαντική συσχέτιση μεταξύ νουκλεολίνη και ελεύθερη νόσου επιβίωση. Συνολικά, οι ασθενείς με νουκλεολίνη έκφρασης (CD31

hiNCL

hi) είχαν υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής σε σύγκριση με τους ασθενείς με σκάφη χαμηλό όγκο (CD31

loNCL

lo) (HR = 2,768, 95% CI 1.544 ~4.964,

P

= 0,001). Σε σύγκριση με το CD31

hiNCL

hi ομάδα, το CD31

hiNCL

ομάδα lo είχαν χαμηλότερο κίνδυνο υποτροπής (HR = 0,568, 95% CI 0.325~0.991,

P

= 0.046). Περαιτέρω ανάλυση έδειξε ότι το CD31

hiNCL

hi ομάδα είχε επίσης υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής στις ακόλουθες υποομάδες: πλακώδες καρκίνωμα και το καρκίνωμα αδενοχοληδωτό κυττάρων (HR = 3,907, 95% CI 1.285~7.462,

P =

0,012), χαμηλό και μεσαίο /υψηλό διαφοροποίηση (HR = 2,363, 95% CI 1.129~4.949,

P = 0,023

και HR = 4,201, 95% CI 1.568~11.253,

P =

0,004, αντίστοιχα), μικρό όγκο (& lt? 5 cm) (HR = 3,382, 95% CI 1.505~7.603,

P

= 0,003), το στάδιο Ι (HR = 11.371, 95% CI 3.003~43.059,

P

& lt? 0.001), και η χειρουργική επέμβαση και μόνο (HR = 3,012, 95% CI 1.345~6.747,

P =

0,007). Σε αυτές τις αναλύσεις υποομάδων, σε σύγκριση με το CD31

loNCL

ομάδα lo, το CD31

hiNCL

ομάδα lo δεν συσχετίστηκε με υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής, εκτός σε ασθενείς με μέση ή διαφοροποίηση υψηλής καρκίνου (HR = 2.826, 95% CI 1.081~7.386,

P

= 0,034). Έτσι, νουκλεολίνη μπορεί να γίνει ένα πολύτιμο δείκτη για τον προσδιορισμό του κινδύνου υποτροπής για τους ασθενείς με πρώιμο στάδιο NSCLC.

Η πολυπαραγοντική Κίνδυνοι Λόγος Ανάλυση

Μια πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης χρησιμοποιώντας αναλογικό μοντέλο κινδύνου του Cox για την επιλογή των οι προγνωστικοί παράγοντες για την ελεύθερη νόσου επιβίωση, συμπεριλαμβανομένων κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους που αναφέρονται παραπάνω και τα αποτελέσματα ανοσοφθορισμού costaining της πυκνότητας των αιμοφόρων αγγείων και νουκλεολίνη επίπεδο έκφρασης, ανέφερε ότι τόσο νουκλεολίνη έκφραση σε πλοία όγκου και κλινικό στάδιο ΙΙΙ αποτελούν ανεξάρτητους παράγοντες της κακής πρόγνωσης για ελεύθερη νόσου επιβίωση (

P

= 0.003 και

P

& lt? 0,0001, αντίστοιχα, Πίνακας 3). Ωστόσο, σε προχωρημένο στάδιο αλλά δεν νουκλεολίνη έκφραση ήταν ένας ανεξάρτητος προγνωστικός παράγοντας για τη συνολική επιβίωση (

P

& lt? 0,001 για το στάδιο II /III).

Η

Οστών μετάσταση είναι μια συχνή επιπλοκή της NSCLC. Τα ποσοστά 5-ετή επιβίωση των ασθενών με μετάσταση στα οστά, και CD31

hiNCL

hi, CD31

hiNCL

lo, CD3l

loNC

lo are72%, 81%, και 82%, αντίστοιχα. Ωστόσο, ούτε CD31

hiNCL

hi ούτε CD31

hiNCL

lo ομάδες παρουσίασαν υψηλότερο κίνδυνο για μετάσταση στα οστά σε σύγκριση με το CD31

loNCL

lo (

P

= 0.556 και

P

= 0,338, αντίστοιχα). Υψηλός κίνδυνος για μετάσταση στα οστά παρατηρήθηκε μόνο σε ασθενείς με προχωρημένο στάδιο NSCLC (

P

= 0,014) (δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι η έκφραση νουκλεολίνη ανιχνεύθηκε στο 34,2% των ασθενών με NSCLC με εκτομή όγκων. Αυτό θα μπορούσε να σχετίζεται με το συν-εντοπισμό των νουκλεολίνης και CD31, η οποία είναι συνεπής με προηγούμενες παρατηρήσεις του νουκλεολίνης επί ενδοθηλιακά κύτταρα όγκου [23]. Νουκλεολίνης επίσης υπό όρους εκφράζεται στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων μόνο κατά τη διάρκεια της αγγειογένεσης των όγκων [23]. Μία δυνατότητα για την ετερογένεια των νουκλεολίνης έκφραση στην κυτταρική επιφάνεια είναι η τοπική παραλλαγή του πολλαπλασιασμού των ενδοθηλιακών κυττάρων σε αγγειογόνου αλλοιώσεις in vivo [24]. Επιπλέον, αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF), εξωκυτταρική μήτρα, και ενδοκυτταρική πρωτεΐνη μοτέρ είναι απαραίτητα για την έκφραση του νουκλεολίνης στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων κατά τη διάρκεια της αγγειογένεσης [24]. Οι μελέτες αυτές μπορεί να εξηγήσει γιατί νουκλεολίνη δεν είναι εύκολα ανιχνεύσιμες σε ιστούς όγκων έλλειψη έκφρασης CD31 στη μελέτη μας. Ωστόσο, μελέτες για τη σχέση της MVD και νουκλεολίνης έκφρασης είναι λίγοι, ιδίως σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. Το μέγεθος του δείγματος δεν ήταν αρκετά μεγάλο για να ανιχνεύσει ασθενείς με χαμηλό CD31 και υψηλή νουκλεολίνης, και ένα μεγαλύτερο μέγεθος δείγματος είναι απαραίτητη για να επιβεβαιώσει αυτή τη σχέση. Απαιτείται περαιτέρω έρευνα με πιο ευαίσθητοι δείκτες των αιμοφόρων αγγείων. Επιπλέον, παρατηρήσαμε ότι μια υποομάδα ασθενών με NSCLC που εκφράζεται CD31 απουσία νουκλεολίνης. Για να προσδιορίσετε αν CD31 και μόνο θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως προγνωστικό δείκτη σε NSCLC, χωρίσαμε τους ασθενείς σε τρεις ομάδες: CD31

hiNCL

hi, CD31

hiNCL

lo και CD31

loNCL

lo

.

Βρήκαμε ότι η νουκλεολίνη έκφραση σχετίζεται μόνο με μεγάλους όγκους (≥ 5cm), αλλά όχι με άλλες παθολογικές παράγοντες όπως το φύλο, την ηλικία, ή ιστολογική βαθμού. Μια εξήγηση μπορεί να είναι ότι οι μεγαλύτερες όγκοι έχουν αρκετό οξυγόνο και τη διατροφή που παρέχονται από την αγγειογένεση των όγκων. Αξιοσημείωτα, νουκλεολίνης έχει δειχθεί ότι συσχετίζεται θετικά με τον ρυθμό ανάπτυξης του όγκου [24]. Σε αρκετές πρόσφατες μελέτες, ειδικοί ανταγωνιστές του νουκλεολίνης παρουσίασαν δραστικότητα κατά του όγκου με αναστολή αγγειογένεσης όγκου [23], [26], [30], [31].

Αυτή είναι η πρώτη μελέτη για τη διερεύνηση της προγνωστική αξία νουκλεολίνης έκφρασης σε ασθενείς με NSCLC. Στην πολυπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης κατά Cox, νουκλεολίνη έκφραση αξιολογήθηκε ως ανεξάρτητος παράγοντας της νόσου επιβίωση χωρίς σε ασθενείς με NSCLC (HR = 2.414), γεγονός που υποδηλώνει ότι η νουκλεολίνη θα μπορούσε να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στη διαδικασία της υποτροπής του όγκου των NSCLC. Η αγγειογένεση είναι ένα ουσιώδες γεγονός για εισβολή και μετάσταση όγκων. Μετά την απομάκρυνση του όγκου, το προ-αγγειογενετική περιβάλλον ήταν σε θέση να προκαλέσει νάρκη όγκους να αυξάνεται ραγδαία [32] – [34]. Αυτό είναι πιθανό να οφείλεται στην αυξημένη έκφραση του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) ή μειωμένη έκφραση ενδοστατίνης και αγγειοστατίνης μετα χειρουργική επέμβαση, η οποία μπορεί να μεταβάλλει την προ-αγγειογενετική διακόπτης [34], [35]. Η ενισχυμένη αγγειογένεση σε συνδυασμό με την είσοδο περισσότερων καρκινικών κυττάρων στην κυκλοφορία διευκολύνει έτσι μετάσταση όγκου [6], [36], [37]. Έχει καλά τεκμηριωμένο ότι η εμφάνιση της νεοαγγειογένεσης είναι ένας σημαντικός δείκτης της κακής πρόγνωσης για τόσο επιβίωση ελεύθερη νόσου και συνολική επιβίωση στον καρκίνο του πνεύμονα [6], [7], [9], [11], [38], [ ,,,0],39]. Στη μελέτη μας, ο κύριος λόγος για την υποτροπή είναι η μακρινή μετάσταση (87,3%), η οποία συνδέεται στενά με την αγγειογένεση. Από την άλλη πλευρά, δεν καταφέραμε να βρούμε ότι η νουκλεολίνη είναι ένας προγνωστικός παράγοντας της συνολικής επιβίωσης. Μια πιθανή εξήγηση είναι ότι οι ασθενείς θα λαμβάνουν διαφορετικές στρατηγικές θεραπείας (όπως endostain, bevacizumab) μετά την εξέλιξη της νόσου, η οποία θα μπορούσε να επηρεάσει την πρόγνωση της επιβίωσης.

Σε περαιτέρω επιβίωση αναλύσεις, διαπιστώσαμε ότι νουκλεολίνη έκφραση συσχετίστηκε με μειωμένο ελεύθερη νόσου επιβίωση και ένα υψηλό κίνδυνο υποτροπής, ιδιαίτερα στις υποομάδες με σταδίου Ι, μικρότερες όγκου (& lt? 5 cm) και η χειρουργική επέμβαση και μόνο. Κλινικά, ένα μικρό κλάσμα του νεοπλάσματος είναι αρκετά επιθετικό ακόμα και σε πρώιμα στάδια που θα μπορούσε να αποβεί μοιραία [40]. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η απομάκρυνση του πρωτογενούς όγκου θα μπορούσε να επιταχύνει την υποτροπή του όγκου τοπικά ή συστηματικά [34], [41], [42]. Ως εκ τούτου, νουκλεολίνη μπορεί να χρησιμεύσει ως χρήσιμος δείκτης για τον εντοπισμό ασθενών με κακή έκβαση και να καθοδηγήσει μετεγχειρητική θεραπεία σε πρώιμο στάδιο NSCLC.

Οστών μετάσταση είναι μια συχνή επιπλοκή του καρκίνου του πνεύμονα. Πειραματικές παρατηρήσεις υποδεικνύουν ότι οστό μεταστατικά καρκινικά κύτταρα έχουν την ικανότητα να επάγουν τον πολλαπλασιασμό ενδοθηλιακών κυττάρων, μετανάστευση, καθώς και διαφοροποίηση [43]. Ωστόσο, σε αυτή τη μελέτη, δεν καταφέραμε να προσδιορίσει μια ένωση του νουκλεολίνη έκφρασης με υψηλό κίνδυνο μετάσταση στα οστά. Μια μεγαλύτερη ομάδα μπορεί να είναι χρήσιμη για να επιβεβαιωθεί περαιτέρω τη σχέση της νουκλεολίνης έκφρασης και μετάσταση στα οστά σε NSCLC.

Εν κατακλείδι, μπορούμε να αξιολογήσει για πρώτη φορά την έκφραση της νουκλεολίνης σε NSCLC. Τα ευρήματά μας αποδεικνύουν ότι η νουκλεολίνη εντοπίζεται με CD31 σε ιστό όγκου των NSCLC, προτείνοντας νουκλεολίνης βρίσκεται επίσης στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων όγκου. Μπορούμε επίσης να αποδείξει ότι η νουκλεολίνη έκφραση θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως αρνητικός προγνωστικός παράγοντας της επιβίωσης ελεύθερης νόσου σε ασθενείς με NSCLC που έλαβαν θεραπεία με ριζική χειρουργική επέμβαση. Η προγνωστική ένδειξη της νουκλεολίνης μπορούσε επίσης να χρησιμοποιηθεί ιδιαίτερα σε ασθενείς με SCC + ADSCC, στάδιο Ι, μικρό όγκο, και η χειρουργική επέμβαση και μόνο, υποδεικνύοντας ότι η χορήγηση της περιεγχειρητικής αντι-NL φάρμακα, όπως ενδοστατίνη, μπορεί να είναι χρήσιμο.