Αφηρημένο

Σκοπός

Φλεγμονή των πνευμόνων οδηγεί σε πνευμονική τοξικότητα μετά την ακτινοθεραπεία (RT) μπορεί να συμβεί σε ασθενείς με μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC). Ερευνήσαμε την κινητική του RT που προκαλείται από το πλάσμα φλεγμονωδών κυτοκινών σε αυτούς τους ασθενείς, προκειμένου να εντοπιστούν κλινικά πρόβλεψης της τοξικότητας.

Πειραματικός Σχεδιασμός

Σε 12 ασθενείς με NSCLC, RT έως 60 Gy (30 κλάσματα πάνω από 6 εβδομάδες) παραδόθηκε? 6 έλαβαν ταυτόχρονη chemoradiation (chemoRT) και 6 έλαβαν μόνο RT. Ελήφθησαν δείγματα αίματος πριν από τη θεραπεία, σε 1 και 24 ώρες μετά την παράδοση του 1

st κλάσμα, 4 εβδομάδες από την έναρξη RT, και 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας, για την ανάλυση μιας ομάδας 22 κυτοκινών πλάσματος. Η σοβαρότητα των αναπνευστικών τοξικότητα καταγράφηκαν χρησιμοποιώντας κοινά κριτήρια ορολογίας για ανεπιθύμητα συμβάντα (CTCAE) v4.0.

Αποτελέσματα

Δώδεκα κυτοκίνες ανιχνεύθηκαν σε απάντηση RT, εκ των οποίων δέκα κατέδειξε σημαντικές χρονικές αλλαγές σε συγκέντρωση στο πλάσμα. Για εοταξίνη, IL-33, IL-6, MDC, ΜΙΡ-1α και VEGF, οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα ήταν εξαρτημένα από την ομάδα θεραπείας (chemoRT vs RT μόνον, όλα

ρ-

αξιών & lt? 0,05), ενώ οι συγκεντρώσεις της MCP-1, IP-10, MCP-3, ΜΙΡ-1β, ΤΙΜΡ-1 και TNF-α δεν ήταν. Η μέση δόση ακτινοβολίας του πνεύμονα σχετίζεται με μείωση κατά 1 ώρα σε επίπεδα πλάσματος IP-10 (

r

2 =

0.858,

σ

& lt? 0.01), MCP-1 (

r

2

= 0.653,

σ

& lt? 0.01), MCP-3 (

r

2

= 0.721,

p

& lt? 0.01), και IL-6 (

r

2

= 0,531,

σ

= 0,02). Οι ασθενείς που υπέστησαν πνευμονική τοξικότητα έδειξαν σημαντικά διαφορετικά επίπεδα ΙΡ-10 και MCP-1 σε 1 ώρα, και εοταξίνη, IL-6 και ΤΙΜΡ-1 συγκέντρωση στις 24 ώρες (όλο το

ρ-τιμές

& lt? 0,05) σε σύγκριση με ασθενείς χωρίς αναπνευστική τοξικότητα.

Συμπεράσματα

οι φλεγμονώδεις κυτοκίνες προκλήθηκαν σε ασθενείς με NSCLC κατά τη διάρκεια και μετά το RT. Νωρίς αλλαγές στα επίπεδα της ΙΡ-10, MCP-1, εοταξίνη, IL-6 και ΤΙΜΡ-1 συνδέεται με υψηλότερη τοξικότητα βαθμού. Η μέτρηση των συγκεντρώσεων κυτοκίνης κατά τη διάρκεια της RT θα μπορούσε να βοηθήσει στην πρόβλεψη της τοξικότητας των πνευμόνων και να οδηγήσει σε νέες θεραπευτικές στρατηγικές

Παράθεση:. Siva S, M MacManus, Kron Τ, Best Ν, Smith J, Lobachevsky P, et al. (2014) Ένα πρότυπο της πρώιμης φλεγμονώδους κυτοκίνης έκφρασης Μετακτινική σχετίζεται με πνεύμονα τοξικότητα σε ασθενείς με μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 9 (10): e109560. doi: 10.1371 /journal.pone.0109560

Επιμέλεια: Yong J. Lee, το Πανεπιστήμιο του Πίτσμπουργκ της Ιατρικής Σχολής, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 2 Ιούνη 2014? Αποδεκτές: 29 Αύγ, 2014? Δημοσιεύθηκε: 7 Οκτωβρίου 2014

Copyright: © 2014 Siva et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

Χρηματοδότηση:. Δρ Σανκάρ Σίβα έχει λάβει Εθνικό Σύστημα Υγείας και χρηματοδότηση υποτροφιών Ιατρικό Συμβούλιο Έρευνας για την έρευνα αυτή, APP1038399. https://www.nhmrc.gov.au/grants/apply-funding/postgraduate-scholarships. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του πνεύμονα είναι η κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο που σχετίζονται με τα δύο φύλα [1]. Μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα (NSCLC) αντιπροσωπεύει το 85% των περιπτώσεων. Ακτινοθεραπεία (RT), μόνο του ή σε συνδυασμό με χημειοθεραπεία, είναι ένα πρότυπο οριστική προσέγγιση θεραπείας για ασθενείς με τοπικά προχωρημένο NSCLC ή ακατάλληλο για χρήση σε ασθενείς με νόσο πρώιμο στάδιο [2], [3]. Πάνω από το ήμισυ των ασθενών με NSCLC αντιμετωπίζονται σήμερα με RT. Το ποσοστό αυτό μπορεί να αυξηθεί στο μέλλον με το βέλτιστο ποσοστό χρησιμοποίησης RT που εκτιμάται σε 76% [4]. Ωστόσο, οι τοπικές αποτυχίες είναι μια σημαντική αιτία για τη σχετικά φτωχή επιβίωση αναφερθεί σε ασθενείς που έλαβαν θεραπεία με RT. Μια πρόσφατη μετα-ανάλυση δείχνει ότι οι τοπικές αστοχίες εξακολουθούν να εμφανίζονται έως και στο 38% των ασθενών [5]. Οι προσπάθειες για την εντατικοποίηση RT, ωστόσο, περιορίζονται σοβαρά από την ανάγκη να περιορίσουν δόση στον περιβάλλοντα φυσιολογικό πνεύμονα, προκειμένου να διατηρηθεί η λειτουργία [6]. Πνεύμονα τοξικότητα που προκαλείται από RT (που ονομάζεται

πνευμονίτιδα

) είναι ένα πραγματικό και ενδεχομένως εξουθενωτική τοξικότητα, μερικές φορές οδηγεί στο θάνατο του ασθενούς [7]. Στη σύγχρονη εποχή συμπτωματική πνευμονίτιδα εξακολουθεί να εμφανίζεται στο 29,8% των ασθενών και μοιραία πνευμονίτιδα στο 1,9% [8]. χρησιμοποιούνται σήμερα αστικού RT που έχουν σχεδιαστεί για να περιορίσει τον κίνδυνο πνευμονίτιδα βασίζεται σε στοιχεία πάνω από μια δεκαετία παλιά [9]. Οι περιορισμοί αυτοί ισχύουν για τους πληθυσμούς και να δώσει καμία ένδειξη ευαισθησίας ενός ατόμου ασθενούς σε θανατηφόρο τοξικότητα, πέρα ​​από το γεγονός ότι κατά μέσο όρο υψηλότερες δόσεις RT σε μεγαλύτερους όγκους είναι πιο πιθανό να είναι τοξικά. Είναι, επομένως, επιτακτική ανάγκη να καθοριστεί

in vivo

βιοδείκτες για την πρόβλεψη ή την έγκαιρη αξιολόγηση των πνευμονίτιδα που θα βοηθήσει τελικά στην αποφυγή RT που προκαλείται από δυσλειτουργία των πνευμόνων από την εξατομίκευση της θεραπείας.

Η παθοφυσιολογία της ακτινοβολίας που προκαλείται από την τοξικότητα του πνεύμονα δεν είναι πλήρως κατανοητή προς το παρόν. Ένα μεγάλο σώμα της στοιχεία από ζωικά μοντέλα, η μοριακή βιολογία και κλινικές παρατηρήσεις δείχνουν ότι η κανονική βλάβη ιστού είναι μια δυναμική και προοδευτική διαδικασία [10], [11]. Μια σύνθετη αλληλεπίδραση ακτινοβολίας που προκαλείται από βλάβη στα παρεγχυματικά κύτταρα, υποστηρίζοντας αγγείωση και αντιδράσεις που σχετίζονται με ινωτικές αποτελέσματα σε οξεία και όψιμη τοξικότητες της ακτινοβολίας. Στον πνεύμονα, αυτές οι αλλαγές μπορούν να εκδηλώνονται ως μειωμένη πνευμονική λειτουργία και σε μια χρόνια φλεγμονώδη καταρράκτη είναι γνωστή ως πνευμονίτιδα [12]. Υπάρχουν πολλοί παράγοντες που επηρεάζουν την πιθανότητα σοβαρής αναπνευστικής τοξικότητα περιλαμβανομένου του όγκου των ακτινοβολημένων παρεγχύματος, προϋπάρχουσα πνευμονική νόσο και τη χρήση των ραδιοευαισθητοποίησης χημειοθεραπείας [13]. Ωστόσο, η ακριβής βιολογικών μηχανισμών του φλεγμονώδους καταρράκτη και την ενδεχόμενη πνευμονικής ίνωσης δεν είναι πλήρως διαλευκανθεί.

απελευθέρωσης κυτοκίνης σε απόκριση σε ιοντίζουσα ακτινοβολία είναι ένα τεκμηριωμένο φαινόμενο και μπορεί να παίζει ένα σημαντικό ρόλο στην επακόλουθη επαγόμενη ακτινοβολία τοξικότητα των πνευμόνων (ανασκόπηση στο [14] – [18] μία μη-ειδική οξεία αντίδραση, ή «καταιγίδα κυτοκινών» συνήθως υποχωρεί μέσα σε 24 ώρες [19] κλασματοποιημένη ακτινοβολία, όμως, δημιουργεί ένα σταθερό σύμπλοκο αντίδραση στο στρες και ένα προφίλ κυτοκίνης είναι διαφορετική από εκείνη που προκαλείται από.. α. απλή δόση ακτινοβολίας [20] RT που σχετίζονται με συγκεντρώσεις ενός ή περισσότερων κυτοκινών σε ανθρώπους πλάσμα έχουν συσχετιστεί με τοξικότητα του πνεύμονα Ο αυξητικός παράγοντας εξαλλαγής (TGF) -β1 [21] – [24]., ιντερλευκίνη (IL) -6 και IL -10 [25], [26] κατά τη διάρκεια της RT έχουν προταθεί ως πιθανές δείκτες κινδύνου σε αυτές τις μελέτες. Ωστόσο, άλλες μελέτες έχουν αναφέρει αντιφατικά ή αρνητικά ευρήματα [27], [28].

το σκεπτικό για την σύνθεση του πάνελ μας 22 πιθανών βιοδεικτών για την τοξικότητα του πνευμονικού ιστού βασίστηκε σε αρκετές δημοσιευμένες εκθέσεις τεμαχίζοντας φλεγμονώδη και την ακτινοβολία ανταπόκριση. Τα επίπεδα μιας σειράς κυτοκινών πλάσματος έχουν προηγουμένως ερευνηθεί σε πλαίσιο τόσο του ποντικού [29] και τα μοντέλα των κυττάρων [20]. Μια σειρά από προ-φλεγμονώδεις κυτοκίνες, εκφράζονται ως οξείας φάσεως, περιλαμβανομένου του παράγοντα νέκρωσης όγκων (TNF) -α, i IL-1 και IL-6 [14], [18]. Οι χημειοκίνες δρουν ως χημειοελκτικά για τα λευκοκύτταρα που ενισχύουν την φλεγμονώδη απόκριση, όπως η ιντερφερόνη-επαγώγιμη πρωτεΐνη-10 (ΙΡ-10), το οποίο προσελκύει κυρίως τα ουδετερόφιλα, φλεγμονώδης πρωτεΐνη μακροφάγων (ΜΙΡ) -1α, και πρωτεΐνη χημειοελκτική μακροφάγων (MCP) -3 οποία προσελκύει κυρίως μονοκύτταρα, και ΜΙΡ-1β και ΜΙΡ-3α που προσελκύουν κυρίως λεμφοκύτταρα [16], [17]. Επαγωγή της ΜΙΡ-3β έχει σαν αποτέλεσμα χημειοέλξη των δενδριτικών κυττάρων και το αντιγόνο που ασχολούνται Β-κύτταρα [30]. MCP-1 είναι μια κυτοκίνη που έχει συνδεθεί με πολλές που σχετίζονται με φλεγμονή ασθένειες και έχει ενοχοποιηθεί για την πρόοδο και την πρόγνωση καρκίνων αρκετών [29], [31]. Προς τα πάνω ρύθμιση της έκφρασης του γονιδίου της MCP-3 έχει δειχθεί ότι είναι μέγιστη σε 1 ώρα σε απόκριση σε ακτινοβολία σε ήπαρ αρουραίου [32]. Η υπερβολική απελευθέρωση της ιντερφερόνης-γάμμα (ΙΡΝγ) έχει συσχετιστεί με την παθογένεση της χρόνιας φλεγμονωδών και αυτοάνοσων ασθενειών [17]. Μακροφάγων που προέρχονται από χημειοκίνη (MDC), εμπλέκεται σε χρόνια φλεγμονή και δενδριτικών κυττάρων και των λεμφοκυττάρων παλιννόστησης [17]. Εοταξίνη είναι ένα χημειοελκτικό για ηωσινόφιλα και εμπλέκεται σε οξείες φλεγμονώδεις αποκρίσεις πνευμονικής βλάβης, ιδιαίτερα σε εμφύσημα και άσθμα [33], [34]. IL-3, IL-11, IL-22 και IL-33 είναι όλοι οι οξείας φάσεως που ενισχύουν κυτταρική ανοσολογική σηματοδότηση και φλεγμονώδεις αντιδράσεις [35] – [37]. Η επαγωγή όλων αυτών των φλεγμονωδών κυτοκινών σε απόκριση προς ακτινοβολία διεγείρουν την επακόλουθη έκφραση ινωτικών κυτταροκινών όπως η οικογένεια ΤΟΡ-β και αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF). Αυτές με τη σειρά διευκολύνει την πρόοδο από πνευμονίτιδα να πνευμονική ίνωση [38], [39]. Βοηθώντας να εξισορροπήσει αυτή τη διαδικασία, και οι δύο IL-22 και IL-10 μπορεί να δράσει για να ρυθμίζουν προς τα κάτω την απόκριση pneumonitic μπλοκάροντας προ-φλεγμονώδεις κυτοκίνες και λειτουργία των κυττάρων παρουσίασης αντιγόνου [25], [37]. Επιπλέον, οι αναστολείς μεταλλοπρωτεϊνάσης ιστού (ΤΙΜΡ) -1 δρα για τη μειωτική ρύθμιση της ινωτικές απόκριση και είναι αυξημένη σε χρόνιες φλεγμονώδεις καταστάσεις ασθένειας [29], [40].

Σε αυτή τη μελέτη, αναφέρουμε τη διαμόρφωση του συγκεντρώσεις στο πλάσμα αυτών των κυτοκινών σε ασθενείς που λαμβάνουν RT μόνος ή RT με ταυτόχρονη χημειοθεραπεία ακτινοευαισθητοποιό. Σε αντίθεση με πολλές προηγούμενες μελέτες, θεωρούμε τις διαφορικές πρότυπα απόκρισης σε ασθενείς που λαμβάνουν χημειοθεραπεία ραδιοευαισθητοποίησης σε σύγκριση με εκείνους που λαμβάνουν RT μόνο. Έχουμε αξιολογήσει μια ομοιογενή ομάδα των ασθενών που έλαβαν πανομοιότυπα χρονοδιαγράμματα δόση /κλασματοποίηση, και απασχολούν ένα μεγάλο πίνακα των υποψηφίων κυτοκινών. Επιπλέον, αναφέρουμε την επίδραση της έντασης της θεραπείας και της δόσης σε κανονικό πνευμονικό ιστό σχετικά με τις συγκεντρώσεις κυτοκίνης στο πλάσμα, γεγονός που υποδηλώνει ότι αυτές οι κυτοκίνες θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ως

in-vivo

«biodosimeters» της ατομικής δόσης ακτινοβολίας. Τέλος, εντοπίσαμε πέντε κυτοκίνες που αυτό θα μπορούσε να είναι προγνωστική της πνευμονικής τοξικότητας του πνεύμονα και θα πρέπει να επικυρωθεί σε μια μεγαλύτερη ομάδα, ήδη πρόβλεψης δεικτών για την κλινική πνευμονίτιδα από ακτινοβολία.

Υλικά και Μέθοδοι

Αυτή η έρευνα το μεταφραστικό στοιχείο της θεσμικής επιτροπής δεοντολογίας που εγκρίθηκε προοπτική κλινική μελέτη στην Peter MacCallum Κέντρο Καρκίνου (Universal Δοκιμές Αριθμός U1111-1138-4421). Όλοι οι ασθενείς που παρέχονται γραπτή συγκατάθεση για να συμμετάσχουν σε αυτή τη μελέτη. Διαδοχικοί ασθενείς που υποβάλλονται σε οριστικό RT, με ή χωρίς ταυτόχρονη χημειοθεραπεία υποβλήθηκε σε σειριακή φλεβοκέντησης και τη συλλογή αίματος για φλεγμονώδεις δοκιμές κυτοκινών. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν σε τρία μηνιαία διαστήματα μετά τη θεραπεία. Τοξικότητα σκορ έγινε προοπτικά σε κάθε κλινική επίσκεψη χρησιμοποιώντας Κοινής Ορολογίας Κριτήρια για Ανεπιθύμητες Ενέργειες (CTCAE) έκδοση 4.0.

Ακτινοθεραπεία

Όλοι οι ασθενείς είχαν προγραμματιστεί να λάβουν 60 Gy σε 30 κλάσματα του RT που παρέχονται μέσω 6 εβδομάδες με τη χρήση 3D τεχνικές σύμμορφη. Αναπνευστική-ταξινομημένο τεσσάρων διαστάσεων αξονική τομογραφία (4DCT) χρησιμοποιήθηκε για RT σχεδιασμό. οριοθέτηση στόχου πραγματοποιήθηκε σε ένα σταθμό εργασίας Elekta FocalSim (Στοκχόλμη, Σουηδία). Ένας εσωτερικός όγκος στόχος (ITV) σκιαγραφήθηκε από το μέγιστο προεξοχή ένταση σειρά (ΜΙΡ), και ένα περαιτέρω ισοτροπική επέκταση της διαστολής 5 mm χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία του όγκου κλινικό στόχο, και 10 mm επιπλέον ισότροπα επέκταση χρησιμοποιήθηκε για τη δημιουργία του σχεδιασμού όγκου στόχου (PTV). Το όργανο του πνεύμονα σε όγκο κίνδυνος ορίζεται ως ο όγκος και των δύο πνευμόνων μείον τον όγκο του ITV. Συνήθως 3-4 τομέα της τεχνικής RT χρησιμοποιώντας 6MV φωτόνια χρησιμοποιήθηκε με προσπάθεια που γίνεται για να αποφευχθεί η ετερόπλευρη ανεπηρέαστο πνεύμονα και ανταλλακτικά του νωτιαίου μυελού, εξασφαλίζοντας παράλληλα τη PTV ήταν στο -5% και + 7% της συνιστώμενης δόσης, σύμφωνα με ICRU 62 συστάσεις. Οι περιορισμοί δόσεων σε όργανο σε κινδύνους δόση ήταν ως εξής: σπονδυλικού σωλήνα ≤45 Gy, μέση δόση του πνεύμονα ≤20 Gy, ο όγκος του πνεύμονα που λάμβαναν 5 Gy (V5) ≤60%, V20≤35%, V30≤30%. Σε ασθενείς που λαμβάνουν ταυτόχρονη χημειοθεραπεία, αυτό παραδόθηκε χρησιμοποιώντας δυάδων πλατίνα. Αυτό αποτελούνταν από είτε 2 × 3 εβδομαδιαίες κύκλους των 50 mg /m

2 σισπλατίνη ημέρες 1 και 8, με 50 mg /m

2 ετοποσίδη ημέρες 1-5, ή 6x εβδομαδιαία κύκλους καρβοπλατίνη AUC 2 ημέρα 1 με 45 mg /m

2 ημέρα πακλιταξέλη 1. Ο πρώτος κύκλος της ταυτόχρονης χημειοθεραπείας άρχισε αμέσως πριν από το πρώτο κλάσμα της ακτινοθεραπείας. Κανένας ασθενής δεν λάβει επικουρική χημειοθεραπεία μετά την ταυτόχρονη παράδοση χημειοθεραπεία. Όλοι οι ασθενείς στο ίδρυμα μας έχει προγραμματιστεί για ταυτόχρονη χημειοθεραπεία, εκτός αν απαγορεύεται από καρδιαγγειακά συνοδά νοσήματα ή νεφρική ανεπάρκεια.

Αίμα Επεξεργασία δείγματος

δείγματα αίματος των ασθενών συλλέχθηκαν και επεξεργασία σε πέντε χρονικά σημεία σε αυτή τη μελέτη. Baseline συλλέχθηκαν δείγματα αίματος πριν τη θεραπεία, και 4 διαδοχικά δείγματα συλλέχθηκαν σε 1 ώρα μετά το πρώτο κλάσμα του RT, 24 ώρες μετά το πρώτο κλάσμα του RT, 4 εβδομάδες από την έναρξη τη διάρκεια της RT, και 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της RT. Τα πρώτα χρονικά σημεία επιλέχθηκαν για πρακτικούς λόγους ώστε να αντικατοπτρίζει την κλινική πρακτικότητα? ασθενείς είναι συνήθως μέσα στο τμήμα εντός 1 ώρας από την πρώτη και τη δεύτερη κλάσμα RT. Οι χρόνοι αυτοί επιτρέπουν τη δυνατότητα της έγκαιρης προσαρμογής του σχεδίου RT ανάλογα με την ανταπόκριση κυτοκίνης. Το χρονικό σημείο 4 εβδομάδες επιλέχθηκε ως αυτή συμπίπτει συνήθως με περίπου 40 Gy της χορηγούμενης δόσης, η οποία επιτρέπει μια ιδανική ευκαιρία για μια προσαρμοστική σχεδιασμό ακτινοβολίας πριν από την ολοκλήρωση της RT [41]. Το τελικό σημείο του χρόνου, στις 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της RT, συμπίπτει με την περίοδο κατά την οποία μπορεί να προκύψει ινωτική κυψελίτιδα και η κλινική εκδήλωση της μεταγενέστερης πνευμονίτιδας [42]. Το αίμα συλλέχθηκε σε σωληνάρια 9 mL αιθυλενοδιαμινοτετραοξικό οξύ (EDTA), και φυγοκεντρείται δύο φορές σε 2000 rpm για 10 λεπτά και στη συνέχεια στους 4000 rpm για 10 λεπτά. Το άνω 90% του πλάσματος μεταφέρθηκε σε κλάσματα 2 mL σε κρυοφιαλίδια και αποθηκεύτηκε στους -80 ° C. Αυτά στη συνέχεια υποβάλλονται σε επεξεργασία σε παρτίδες χρησιμοποιώντας ένα εμπορικό σύστημα κυτταρομετρίας ροής.

Cytokine Ανάλυση

Κάθε δείγμα ασθενούς διεξήχθη εις διπλούν χρησιμοποιώντας 100 μΐ πλάσματος αραιώνονται κατά ένα συντελεστή 2. Μια εμπορική πολυπλεκτικές σάντουιτς array ELSIA με βάση χρησιμοποιήθηκε (Quantibody προσαρμοσμένη σειρά, RayBiotech Inc., Norcross, GA, USA). Όλα τα δείγματα εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας ένα πάνελ 22 κυτοκινών: εοταξίνη, ΙΡΝγ, IL-6, IL-10, IL-11, IL-22, IL-3, IL-33, ΙΡ-10, MCP-1, MCP -3, MDC, ΜΙΡ-1α, ΜΙΡ-1β, ΜΙΡ-3α, ΜΙΡ-3β, ΤΟΡ-β1, ΤΟΡ-β2, ΤΟΡ-β3, ΤΙΜΡ-1, TNF-α, VEGF. Η συστοιχία αντισωμάτων είναι ένα ποτήρι-chip-based σύστημα ELISA πολυπλεξίας σάντουιτς σχεδιαστεί για να καθορίσει τις συγκεντρώσεις όλων των 22 κυτοκίνες ταυτόχρονα. Ένα πρότυπο γυάλινο πλακίδιο εθεάθη με 16 πηγάδια των συστοιχιών πανομοιότυπα βιοδείκτη αντισώματος. Κάθε αντίσωμα, μαζί με τον θετικό και αρνητικό μάρτυρα, ήταν ντυμένη με τετραπλούν. Τα δείγματα και τα πρότυπα προστέθηκαν στα φρεάτια της συστοιχίας τσιπ και επωάστηκαν για 3 ώρες στους 4 ° C. Αυτό ακολουθήθηκε από τρεις έως τέσσερις βαθμίδες πλύσης και την προσθήκη του πρωτογενούς αντισώματος και συζευγμένου με HRP στρεπταβιδίνη στα φρεάτια. Τα σήματα (Cy3 μήκη κύματος: 555 nm διέγερση, 655 nm εκπομπή) σαρώθηκαν και εκχυλίζεται με ένα σαρωτή λέιζερ GenePix (Αχοη Instruments, Foster City, CA), και ποσοτικά με τη χρήση του λογισμικού Quantibody Analyzer (Ray Biotech Inc). Κάθε σήμα που προσδιορίζονται από την τοποθεσία τόπου του. Το λογισμικό του σαρωτή υπολογίζεται σήματα φόντο αυτόματα. Τα επίπεδα συγκέντρωσης, που εκφράζεται σε πικογραμμάρια ανά χιλιοστόλιτρο (pg /ml), υπολογίστηκαν με μια πρότυπη καμπύλη που καθορίζονται για κάθε βιοδείκτη από τους θετικούς και αρνητικούς μάρτυρες.

Στατιστικές Μέθοδοι

Οι ασθενείς ταξινομήθηκαν σε εκείνους που λαμβάνουν ταυτόχρονα χημειοθεραπεία (chemoRT) και μόνο σ ‘αυτούς που λαμβάνουν RT. Αμφίδρομη ANOVA υποθέτοντας επαναλαμβανόμενες δοκιμές μέτρα για διαφορετικά χρονικά σημεία χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογηθούν οι διαφορές στις συγκεντρώσεις κυτοκίνης μεταξύ chemoRT και RT ομάδες και απέναντι χρονικά σημεία δειγματοληψίας. Αυτές οι αλλαγές από τη συγκέντρωση κυτοκίνης βασική μετρήθηκαν σε ατομικό επίπεδο ασθενή. Στη συνέχεια, τα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% υπολογίστηκαν και διορθώσεις για πολλαπλές συγκρίσεις έγιναν με τη μέθοδο του Dunnett και άλφα του 0.05. Κλινική τοξικότητα δευτεροβάθμιας στη θεραπεία αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας CTCAE v4.0 κατά την έναρξη, 4 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας και 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας. Η δόση του πνεύμονα PTV και σημαίνουν (MLD) του RT καταγράφηκαν για κάθε ασθενή και συσχετίζεται με την αλλαγή στις συγκεντρώσεις κυτοκίνης από την αρχική τιμή κατά μία ώρα μετά το πρώτο κλάσμα, τέσσερις εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας και 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας με τη χρήση ενός γραμμικού μοντέλου παλινδρόμησης. Οι ασθενείς διαχωρίστηκαν μεταξύ τους σε εκείνες που αντιμετωπίζουν σοβαρή αναπνευστική τοξικότητα (Βαθμός 2+) και σε εκείνους που δεν το έκανε. Αζευγάρωτη δίπλευρη

t-tests

χρησιμοποιήθηκαν για τη σύγκριση των μέσων κυτοκίνης συγκεντρώσεις σε αυτά τα χρονικά σημεία μεταξύ των ομάδων τοξικότητα ασθενών. Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του λογισμικού PRISM v6.0.

Αποτελέσματα

Δώδεκα ασθενείς εντάχθηκαν σε αυτή τη μελέτη με μέση ηλικία 67 έτη (εύρος 46 – 89 ετών). Όλοι οι ασθενείς έλαβαν 60 Gy σε 30 κλάσματα του RT. Έξι ασθενείς έλαβαν συγχορηγούμενη χημειοθεραπεία και έξι έλαβε την RT μόνον (λόγω συνοδά νοσήματα). Έξι ασθενείς είχαν νόσο σταδίου ΙΙΙ, τρεις είχαν νόσο σταδίου ΙΙ και τρία είχα στάδιο της νόσου. Τα ασθενή χαρακτηριστικά του πληθυσμού που παρατίθενται στον Πίνακα 1. Μεμονωμένα χαρακτηριστικά των ασθενών περαιτέρω δίνονται στον Πίνακα S1.

Η

Επίδραση ομάδα θεραπείας και Δείγμα Ώρα Σημείο

Από τις 22 κυτοκινών που αναλύθηκαν, τα αποτελέσματα από 12 κυτοκίνες ήταν πάνω από το όριο ανίχνευσης. Αυτά ήταν εοταξίνη, IL-33, IL-6, MCP-1, MDC, ΜΙΡ-1α, VEGF, ΙΡ-10, MCP-3, ΜΙΡ-1β, ΤΙΜΡ-1 και TNF-α. Από αυτές τις 12 κυτοκίνες, όλα εκτός από την IL-33 και ΤΝΡ-α αποδεικνύεται σημαντική διακύμανση στις συγκεντρώσεις στα διάφορα χρονικά σημεία (όλα

ρ

–

αξίες

≤0.02, Πίνακας S2). Οι απόλυτες αλλαγές στις συγκεντρώσεις για καθεμία από τις 12 κυτοκινών πλάσματος απεικονίζεται στο Σχήμα 1. Τα επίπεδα του εοταξίνη, IL-33, IL-6, MDC, ΜΙΡ-1α και VEGF ήταν διαφορετικές σε εκείνους τους ασθενείς που λαμβάνουν chemoRT σε σύγκριση με εκείνους που έλαβαν RT μόνο (όλα

ρ-τιμές

& lt? 0,01), ενώ οι συγκεντρώσεις της ΙΡ-10, MCP-1, MCP-3, ΜΙΡ-1β, ΤΙΜΡ-1 και TNF-α δεν ήταν εξαρτημένα από την ομάδα θεραπείας . Στην ομάδα της μονοθεραπείας RT, η κορυφή μεταβολή των επιπέδων κυτοκίνης (κατάθλιψη ή ανύψωση) παρατηρήθηκε σε 4 εβδομάδες κατά τη διάρκεια της θεραπείας για την IL-33, ΙΡ-10, MCP-1, & amp? ΜΙΡ-1α. Η αλλαγή στο επίπεδο κορυφής κυτοκίνη παρατηρήθηκε στις 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας για την εοταξίνη, IL-6, MCP-3, ΤΙΜΡ-1 και του VEGF. Συγκριτικά, στην ομάδα chemoRT, η ανώτατη αλλαγή στα επίπεδα κυτοκινών (κατάθλιψη ή ανύψωση) παρατηρήθηκε σε 4 εβδομάδες κατά τη διάρκεια της θεραπείας για την MDC και μόνο ΜΙΡ-1α. Η αλλαγή στο επίπεδο κορυφής κυτοκίνη παρατηρήθηκε στις 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας για την εοταξίνη, η MCP-3, ΜΙΡ-1β, και VEGF. Υπήρξε σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ της ομάδας θεραπείας και χρονικού σημείου δείγματος (

ρ-τιμές

& lt? 0,01) για τις συγκεντρώσεις της IL-6, ΙΡ-10, MCP-1, MDC, ΜΙΡ-1α, ΜΙΡ-1β και VEGF, υποδηλώνοντας ότι η διακύμανση των συγκεντρώσεων κυτοκίνης στο πλάσμα συναρτήσει του χρόνου δεν ήταν το ίδιο για την ομάδα RT όπως και για την ομάδα chemoRT. Αντίθετα, δεν υπήρχε σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ των ομάδων θεραπείας και τα χρονικά σημεία δειγματοληψίας για εοταξίνη, MCP-3 και ΤΙΜΡ-1 που υποδεικνύει ότι η διακύμανση των συγκεντρώσεων κυτοκίνης σε όλη φορά ήταν η ίδια και για τις δύο ομάδες θεραπείας. Μια περίληψη των επιπέδων κυτοκίνης που μεταβάλλεται με το χρόνο και εκείνων που ποικίλλει ανά ομάδα θεραπείας απεικονίζονται στο Σχήμα 2.

Τα επίπεδα ομαδοποιούνται σε θεραπεία τύπου (ChemoRT vs RT μόνο). Οι κυτοκίνες στην οποία η διακύμανση είναι διαφορετική ανάλογα με τις ομάδες θεραπείας που σημειώνονται με ένα

δέλτα

(

δ

). Μέσα σε κάθε γράφημα κυτοκίνη, ένας

αστερίσκο

(

*

) δηλώνει χρόνος κατά τον οποίο το επίπεδο των κυτοκινών στο πλάσμα είναι σημαντικά διαφορετικό από το βασικό επίπεδο, με διορθώσεις για πολλαπλές συγκρίσεις που εκτελούνται με τη μέθοδο του Dunnett.

MCP-1, ΤΙΜΡ-1, IP-10, MCP-3 και ΜΙΡ-1β ποικίλλουν διαφορετικά στις διάφορες χρονικές στιγμές δειγματοληψίας, αλλά είναι έχουν παρόμοια διακύμανση μεταξύ των ομάδων θεραπείας (RT μόνον vs ChemoRT). IL-6, εοταξίνη, MDC, ΜΙΡ-1α και τα επίπεδα VEGF μεταβάλλεται κατά μήκος τόσο σε χρόνο όσο και την ομάδα θεραπείας. τα επίπεδα του TNF-α δεν ήταν διαφορετική μεταξύ των χρονικών σημείων δειγματοληψίας ή θεραπεία παραδοθεί.

Η

Επίδραση των Μέσων πνεύμονα Δόση και PTV όγκο

Η διάμεση (εύρος) του όγκου PTV σε όλους τους ασθενείς ήταν 320 cm

3 (87 cm

3 έως 1138 cm

3). Οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα μειώθηκε από την αρχική τιμή σε 1 ώρα μετά την ακτινοβόληση σε όλους τους ασθενείς με γραμμικό όγκου με τρόπο που εξαρτάται για την IL-6 (

r

= 0.887,

p & lt?

0.01), MCP-1 (

r

= 0,664,

σ

= 0,03), και IP-10 (

r

= 0,819,

σ

& lt? 0.01), η οποία είναι απεικονίζεται στο Σχήμα 3. Ο βαθμός της μείωσης σε αυτές τις συγκεντρώσεις κυτοκίνης στο πλάσμα συσχετίζονται με ακτινοβολημένα όγκο-στόχο. Η ισχυρότερη συσχέτιση παρατηρήθηκε για την IL-6 (Σχήμα 3Α). Αλλαγή σε συγκέντρωση στο πλάσμα σε 1 ώρα στις 9 υπόλοιπες κυτοκίνες δεν συσχετίζονται με όγκο PTV. Οι αλλαγές στη συγκέντρωση του πλάσματος από τη βασική γραμμή για όλα τα 12 κυτοκίνες δεν συσχετίζονται με ακτινοβολημένα όγκο-στόχο είτε στους 4 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας ή 12 εβδομάδες μετά τη θεραπεία.

γραμμή Γραμμική-παλινδρόμησης (μπλε) εμφανίζεται με διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (κόκκινη διακεκομμένη γραμμή).

Η

Η διάμεση (εύρος) MLD σε όλους τους ασθενείς ήταν 11,7 Gy (5,97 Gy-19.14 Gy). Παρόμοια με την επίδραση που παρατηρείται με όγκο PTV, οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα μειώθηκε από την αρχική τιμή σε 1 ώρα μετά την ακτινοβόληση με γραμμικό δοσοεξαρτώμενο τρόπο για την IL-6 (

r =

0.729,

σ

= 0,02 ), MCP-1 (

r =

0,808,

σ

& lt? 0.01), και IP-10 (

r =

0.926,

p

& lt? 0,01), που απεικονίζεται στο Σχήμα 4. Επιπλέον, η MCP-3 έδειξαν επίσης γραμμική μείωση στη συγκέντρωση στο πλάσμα σε 1 ώρα για ένα δεδομένο MLD (

r = 0,849

,

ρ

& lt ? 0,01). Η MLD ήταν ανάλογη με τη μείωση σε αυτές τις συγκεντρώσεις κυτοκίνης στο πλάσμα σε 1 ώρα. Αλλαγή σε συγκέντρωση στο πλάσμα σε 1-ώρα στις 8 υπόλοιπες κυτοκίνες δεν σχετίζεται με την MLD. Και πάλι, η μεταβολή της συγκέντρωσης στο πλάσμα από τη βασική γραμμή για όλα τα 12 κυτοκίνες δεν σχετίζεται με την μέση κανονική δόση του πνεύμονα είτε στους 4 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας ή 12 εβδομάδες μετά τη θεραπεία.

γραμμή Γραμμική-παλινδρόμησης (μπλε) εμφανίζεται με 95 διαστήματα εμπιστοσύνης% (κόκκινη διακεκομμένη γραμμή).

Η

Σύλλογος Plasma κυτοκίνης συγκεντρώσεις με πιθανότητα σοβαρής αναπνευστική τοξικότητα

Πέντε από τους δώδεκα ασθενείς παρουσίασαν σοβαρή τοξικότητα των πνευμόνων (CTCAE βαθμού 2 ή υψηλότερη ) σε αυτη τη ΜΕΛΕΤΗ. Τρεις από αυτούς τους ασθενείς ήταν στην ομάδα chemoRT και δύο από αυτούς τους ασθενείς έλαβαν μόνο RT. Συνολικά, οι ασθενείς με μεγαλύτερη κατάθλιψη σε συγκεντρώσεις της MCP-1 και τα επίπεδα ΙΡ-10 σε 1-ώρα μετά το πρώτο κλάσμα της ακτινοβολίας στη συνέχεια υπέστη σοβαρή τοξικότητα του πνεύμονα (Σχήμα 5Α, 5Β). Για εκείνους τους ασθενείς με σοβαρή τοξικότητα, η μέση (+/- τυπική απόκλιση) μείωση της συγκέντρωσης της MCP-1 και ΙΡ-10 στο πλάσμα ήταν 167,0 pg /ml (+/- 119,0 pg /ml) και 233,0 pg /ml (+ /-232,0 pg /ml), αντίστοιχα. Αυτά τα επίπεδα ήταν σημαντικά πιο περιορισμένη από ό, τι εκείνοι σε ασθενείς οι οποίοι στη συνέχεια δεν έχουν σοβαρή τοξικότητα των πνευμόνων, με αντίστοιχη μέση μείωση 38,6 pg /ml (+/- 62.2 pg /ml), και 4,0 pg /ml (+/- 76.7 pg /ml), αντίστοιχα (

ρ =

0.05). Σε 24 ώρες μετά τη το πρώτο κλάσμα της ακτινοβολίας, οι ασθενείς με μία μείωση στις συγκεντρώσεις του εοταξίνη και IL-6 επίπεδα ακολούθως υπέστη αναπνευστική τοξικότητα (Σχήμα 6Α, 6Β). Για εκείνους τους ασθενείς με σοβαρή τοξικότητα, η μέση (+/- τυπική απόκλιση) μειώνονται σε εοταξίνη και IL-6 από τα επίπεδα προ της θεραπείας ήταν 6,8 pg /ml (+/- 36.6 pg /ml) και 8,9 pg /ml (+ /-8,8 pg /ml), αντίστοιχα. Συγκριτικά, οι εν λόγω ασθενείς χωρίς τοξικότητα είχε αυξηθεί εοταξίνη και IL-6 επίπεδα από μία μέση (+/- τυπική απόκλιση) 31,9 pg /ml (+/- 20.4 pg /ml),

σ

= 0.03 και 1.4 (+/- 2.5 pg /ml)

σ

= 0,04, αντίστοιχα. Αντίθετα, αυξημένες συγκεντρώσεις του ΤΙΜΡ-1 σε 24 ώρες συσχετίστηκαν με πιο σοβαρή τοξικότητα (Σχήμα 6C). Η μέση αύξηση (+/- τυπική απόκλιση) ΤΙΜΡ-1 σε άτομα με σοβαρή τοξικότητα των πνευμόνων ήταν 337,0 pg /ml (+/- 867,0 pg /ml), έναντι μείωσης κατά 762,0 pg /ml (+/- 292,0 pg /ml) για εκείνους που δεν έχουν,

σ

= 0.02. Καμία από τις κυτοκίνες που δοκιμάστηκαν ήταν σημαντικά διαφορετικές σε άτομα με ή χωρίς σοβαρή τοξικότητα του πνεύμονα στις 4 εβδομάδες σε θεραπεία ή 12 εβδομάδες μετά την ολοκλήρωση της θεραπείας.

στατιστικώς σημαντικές διαφορές μεταξύ των ασθενών με σοβαρή αναπνευστική τοξικότητα [σκιασμένα κουτιά] και εκείνων χωρίς [ανοιχτά παράθυρα] επισημαίνονται με τη σχετική

σ

-. αξίες

Η

τα στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των ασθενών με σοβαρή αναπνευστική τοξικότητα [σκιασμένα κουτιά] και εκείνων που δεν έχουν [ανοιχτά παράθυρα] τονίζεται με τη σχετική

σ

– τιμές

η

Συζήτηση

Σε αυτή τη μελέτη, ανακαλύψαμε ότι η σοβαρή τοξικότητα του πνεύμονα (CTCAE βαθμού 2 ή υψηλότερη) συνδέεται με σημαντική αλλαγή. σε ορισμένες συγκεντρώσεις στο πλάσμα κυτταροκινών από τα επίπεδα προ της θεραπείας σε ασθενείς που λαμβάνουν οριστική RT για NSCLC. Συγκεκριμένα, η σοβαρή τοξικότητα συνδέθηκε με την ανίχνευση των μειωμένα επίπεδα ΙΡ-10 και MCP-1 σε 1 ώρα μετά την ακτινοβόληση, καθώς και χαμηλότερα επίπεδα εοταξίνη και IL-6 στις 24 ώρες μετά την ακτινοβόληση σε σύγκριση με τους ασθενείς που έκαναν δεν συνέχεια αναπτύσσουν σοβαρή τοξικότητα του πνεύμονα (Εικόνα 5 και 6). Επίπεδα του ΤΙΜΡ-1 σε 24 ώρες ήταν σημαντικά αυξημένα σε ασθενείς με σοβαρή τοξικότητα του πνεύμονα σε σύγκριση με εκείνους χωρίς. Αυτά τα πρώτα προγνωστικά διακυμάνσεις των κυτοκινών επίπεδα μπορεί να αντιπροσωπεύει την ευαισθησία του πνεύμονα ενός ατόμου και μετέπειτα κίνδυνο για την τοξικότητα του πνεύμονα και ίνωση μετά από επαναλαμβανόμενη έκθεση σε προσβολή ακτινοβολία. Η ανίχνευση ενός προγνωστικού σήματος μετά το πρώτο κλάσμα ενός μαθήματος 30-κλάσμα του RT είναι ιδιαίτερη κλινική σημασία, καθώς αυτό μπορεί να επιτρέψει την πρώιμη παρέμβαση κατά τη διάρκεια της θεραπείας. Από κλινική άποψη, αυτό μπορεί να εκδηλωθεί ως πιο εντατική αξιολόγηση μεταξύ κλασματική τοξικότητα και την έγκαιρη υποστηρικτική παρέμβαση, ενδεχομένως με κορτικοστεροειδή. Εναλλακτικά, πρώιμη προγνωστική υπογραφή κυτοκίνη μπορεί να επιτρέψει την εξατομικευμένη βιολογική προσαρμογή του μαθήματος θεραπείας μέσω αυξάνοντας ή μειώνοντας την ένταση της θεραπείας. Αυτά τα σήματα κυτοκινών ήταν γενικά λιγότερο εμφανής σε 4 εβδομάδες από την έναρξη της θεραπείας. Υποθέτουμε ότι κατά τη διάρκεια μιας μακράς ακτινοθεραπεία πορεία διάρκειας 6 εβδομάδων που οι ασθενείς μπορούν να προσαρμοστούν στις επανειλημμένες εκθέσεις και εκδηλώνουν μια λιγότερο έντονη οξεία φλεγμονώδη αντίδραση κυτταροκινών από τις αρχικές εκθέσεις κατά την έναρξη της θεραπείας. Ερμηνεία της προγνωστικής σημασίας των κυτοκινών 12 εβδομάδες μετά τη θεραπεία είναι δύσκολη, δεδομένου ότι αυτό είναι ένα σύνθετο χρονικό σημείο λόγω της μεταβλητότητας που εισήγαγε ένα ευρύ φάσμα της ατομικής ασθενούς κλινικό αποτέλεσμα. Αυτή τη στιγμή μερικοί ασθενείς θα έχουν πλήρη όγκων απαντήσεις σε θεραπεία, ενώ άλλοι θα έχουν σταθερή ή εξελισσόμενη νόσος. Επιπλέον, αυτή τη φορά μπορεί επίσης να επηρεάζεται από τη διατροφική ελλείμματα που προκαλούνται από esophagitus σχετίζονται με τη θεραπεία και δυσφαγία. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης δείχνουν ότι η πρώιμη αλλαγές σε αυτές τις κυτταροκίνες θα πρέπει να διερευνηθούν περαιτέρω ως προγνωστικοί δείκτες της πιθανότητας τοξικότητας στο πλαίσιο ασθενείς που λαμβάνουν οριστική ακτινοβολία για NSCLC.

Από μια μηχανιστική άποψη, αυτές οι υποθετικές βιοδείκτες της πνευμονικής βλάβης φαίνεται να είναι λογικό προγνωστικός υποψήφιοι λόγω προ-φλεγμονώδη ρόλο τους σε διάφορες νοσηρές καταστάσεις. MCP-1 προκαλεί κυτταρική ενεργοποίηση συγκεκριμένων λειτουργιών που σχετίζονται με την άμυνα του ξενιστή και τη φλεγμονή, συμπεριλαμβανομένων των μονοκυττάρων, κοκκιοκυττάρων και τη μετανάστευση των λεμφοκυττάρων [43]. ΙΡ-10 επίσης διεγείρει επιλεκτικά κατευθυντική μετανάστευση των Τ-κυττάρων και μονοκυττάρων, καθώς και συμμετέχουν στην προσκόλληση κυττάρου Τ [16]. ΤΙΜΡ-1 δρα για τη μειωτική ρύθμιση της ινωτικές απόκριση και σχετίζεται με το βαθμό της φλεγμονής στο βλεννογόνο των ασθενών με χρόνιες φλεγμονώδεις καταστάσεις (όπως η φλεγμονώδης νόσος του εντέρου) [40]. Σε προηγούμενες μελέτες, η πρώιμη μείωση (εντός 3-6 ωρών) επιπέδων της ΙΡ-10, MCP-1 και ΤΙΜΡ-1 στον ορό έχουν προηγουμένως αποδειχθεί σε μυϊκά στελέχη πιο ευαίσθητα στην ίνωση [C57BL /6] σε σύγκριση με πιο ανεκτικό στελέχη [C3H /HeN] [29], [43], [44]. Αργότερα μετά την ακτινοβολία, επαγωγή της έκφρασης του γονιδίου ΙΡ-10 και MCP-1 mRNA έως 6 μήνες μετά RT σε μοντέλα ποντικών πιστεύεται στη συνέχεια να οδηγήσουν σε καθυστερημένη ίνωση ιστού και βλάβη των πνευμόνων μετέπειτα [16], [45]. IL-6 είναι μια πλειοτροπική κυτοκίνη που εκκρίνεται από τα Τ-λεμφοκύτταρα και εμπλέκεται στην ωρίμανση των Β-λεμφοκυττάρων, και πιστεύεται ότι μεσολαβεί κλινική πυρετός και ρυθμίζει τη φλεγμονή και ίνωση διαμέσου ανοσοκύτταρα [38]. Chen et al. [26] που παρατηρήθηκε νωρίς μειώσεις της IL-6 κυτοκίνης σε ασθενείς που υπέστησαν πνευμονίτιδα, παρόμοια με τα ευρήματα της παρούσας μελέτης. Εοταξίνη είναι ένας πρωταρχικός μεσολαβητής της IgE που συνδέονται με αλλεργικές φλεγμονώδεις αντιδράσεις στον πνεύμονα, τα οποία είναι χαρακτηριστικά που σχετίζονται με ένα πρώιμο, παροδική συσσώρευση ουδετερόφιλων και την επακόλουθη εξαρτώνται από τα ουδετερόφιλα οξεία πνευμονική φλεγμονώδης βλάβη [34]. επίπεδα Εοταξίνη πλάσμα έχουν τεκμηριωθεί προηγουμένως σε ένα μοντέλο ποντικού για να μειώσετε αρχικά, στη συνέχεια, στη συνέχεια αυξάνεται με την πάροδο ημερών, παρόμοιο με το χρονικό πρότυπο που παρατηρήθηκε στην παρούσα μελέτη [29].

Οι συγκεντρώσεις των διαφόρων κυτταροκινών επίσης αποδειχθεί να εξαρτάται από τη δόση σε κανονικό πνευμονικό ιστό και το ακτινοβολημένο όγκο του όγκου (Σχήματα 2 και 3). Σε 3D σύμμορφη ακτινοθεραπεία, η δόση στην ακτινοβολημένα φυσιολογικό πνευμονικό ιστό (ο MLD) επηρεάζεται από τον αριθμό των δοκών που επιλέγονται, γωνίες δέσμης που χρησιμοποιείται, την θέση του όγκου, και ο βαθμός διάσωση του αμέτοχος πνεύμονα. Σε αντίθεση, ο όγκος στόχος (PTV) είναι μια άμεση συνάρτηση του όγκου του όγκου και της γεωμετρικής περιθωρίων που εφαρμόζονται στο λογαριασμό για μικροσκοπική νόσο και λάθους παράδοσης. Σε αυτή τη μελέτη, και οι δύο μετρήσεις που σχετίζονται με τις συγκεντρώσεις κυτοκίνης σε 1 ώρα μετά την ακτινοβόληση. επίπεδα κυτοκίνης γραμμική σχέση με τη δόση στο ακτινοβολημένα φυσιολογικό πνευμονικό ιστό (ο MLD), με κατάθλιψη του ΙΡ-10, MCP-1 και MCP-3 είναι η πλέον συσχετίζεται έντονα. Μείωση των επιπέδων κυκλοφορίας της IL-6, MCP-1 και ΙΡ-10 σε 1-ώρα επίσης συσχετίζεται με την PTV, αν και η συσχέτιση αυτή ήταν λιγότερο ισχυρή. Πιο συγκεκριμένα, αυτή η σχέση επηρεάστηκε κυρίως από τον απόκριση σε έναν συγκεκριμένο ασθενή με ένα μεγάλο όγκο PTV του 1138 cm

3. Παρά αυτό το δυναμικό παράγοντας σύγχυσης, μια πιθανή εξήγηση για μια διαφορική σχέση μεταξύ των επιπέδων κυτοκίνης και PTV /MLD είναι ότι τα μεγαλύτερα πεδία ακτινοβολίας (με μεγαλύτερο PTV), το οποίο καλύπτει μεσοθωρακίου κομβικά συμμετοχή δεν μπορεί να διασχίζουν αναγκαστικά μεγαλύτερους όγκους του φυσιολογικού πνευμονικού παρεγχύματος από μικρότερους όγκους όγκων που βρίσκονται βαθύτερα μέσα στον ιστό πνεύμονα (που μπορεί να έχουν μεγαλύτερο MLD).