Αφηρημένο

Η ανώμαλη υπερέκφραση της κυκλοοξυγενάσης-2 (COX2) παρατηρείται σε καρκίνωμα ουροφόρων του της ουροδόχου κύστης (UCB). Μελέτες που αξιολογούν COX2 ως προγνωστικός δείκτης στην UCB αναφέρει αντιφατικά αποτελέσματα. Έχουμε καθορίσει την προγνωστική δυναμικό της έκφρασης COX2 στην UCB και ποσοτικά συνοψίζουν τα αποτελέσματα με αυτά της λογοτεχνίας μέσα από μια μετα-ανάλυση. Νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς UCB προσλαμβάνονται μεταξύ 1998-2001 σε 18 ισπανικά νοσοκομεία προοπτικά περιλαμβάνονται στη μελέτη και παρακολουθήθηκαν (διάμεσος 70,7 μήνες). Διαγνωστικών διαφάνειες εξετάστηκαν και ομοιόμορφα ταξινομημένα ανά παθολόγους εμπειρογνώμονα. Κλινικών δεδομένων που ανακτώνται από τα διαγράμματα του νοσοκομείου. μικροσυστοιχίες ιστό που περιέχει μη-μυϊκό επεμβατική (n = 557) και της μυϊκής επεμβατική (n = 216) οι όγκοι αναλύθηκαν με ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιώντας ποσοτική ανάλυση εικόνας. Έκφραση αξιολογήθηκε σε μοντέλα παλινδρόμησης κατά Cox για να αξιολογηθεί ο κίνδυνος της υποτροπής, εξέλιξης και ειδική θνησιμότητα της νόσου. αναλογίες μετα-κινδύνου εκτιμήθηκαν χρησιμοποιώντας τα αποτελέσματα μας και εκείνων που προέρχονται από 11 επιπλέον αξιολογήθηκαν μελέτες. έκφραση COX2 παρατηρήθηκε στο 38% (211/557) των μη μυϊκών επεμβατική και 63% (137/216) των μυών επεμβατική όγκων. Έκφραση σχετίστηκε με προχωρημένο παθολογικό στάδιο και βαθμό (p & lt? 0,0001). Στην μονοπαραγοντική ανάλυση, COX2 έκφραση – ως κατηγορική μεταβλητή – δεν συνδέεται με καμία από τις εκβάσεις που αναλύθηκαν. Ως συνεχή μεταβλητή, παρατηρήθηκε μια αδύναμη συσχέτιση με υποτροπή σε μη μυϊκό επεμβατικές όγκους (p-value = 0,048). Στην πολυπαραγοντική ανάλυση, η έκφραση COX2 δεν ανεξάρτητα προβλέψει κάποια από τις θεωρηθεί αποτελέσματα. Η μετα-ανάλυση επιβεβαίωσε αυτά τα αποτελέσματα. Εμείς δεν βρήκε στοιχεία που αποδεικνύουν ότι η έκφραση COX2 είναι ένας ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της υποτροπής, εξέλιξης ή την επιβίωση σε ασθενείς με UCB

Παράθεση:. Czachorowski MJ, Amaral AFS, Montes-Moreno S, Lloreta J, Carrato Α, Tardón Α, et al. (2012) της κυκλοοξυγενάσης-2 Εκφραση σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης και των ασθενών Πρόγνωση: Τα αποτελέσματα από μια μεγάλη κλινική Cohort και μετα-ανάλυση. PLoS ONE 7 (9): e45025. doi: 10.1371 /journal.pone.0045025

Επιμέλεια: Xiaolin Zi, του Πανεπιστημίου της Καλιφόρνια Irvine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: May 20, 2012? Αποδεκτές: 11 Αύγ. του 2012? Δημοσιεύθηκε: 13 Σεπτεμβρίου 2012 |

Copyright: © Czachorowski et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Το έργο υποστηρίχθηκε εν μέρει από το Fondo de Investigaciones Sanitarias, Instituto de Salud Carlos III, Υπουργείο Επιστημών και Καινοτομίας, η Ισπανία (G03 /174, 00/0745, PI051436, PI061614 και G03 /174)? Κόκκινο Temática de Investigación Cooperativa en Καρκίνος RD06 /0020-RTICC? Consolider ONCOBIO? ΕΕ-FP6-ΕΣΕΕ-37739-drop-top? ΕΕ-FP7-HEALTH-F2-2008-201663-UROMOL? ΕΕ-FP7-HEALTH-F2-2008-201333-DECanBio? ΗΠΑ-ΝΙΗ-RO1-CA089715? και μια υποτροφία διδακτορικό απονέμεται σε MJC από το ίδρυμα «la Caixa», την Ισπανία, και ένας μεταδιδακτορικός υπότροφος απονέμεται σε AFSA από την Fundación Científica de la AECC. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ουροθηλιακά καρκίνωμα της ουροδόχου κύστης (UCB) είναι ο πιο κοινός τύπος καρκίνου της ουροδόχου κύστης στις αναπτυγμένες χώρες [1]. UCB κυρίως δηλωτικά (70-80% των ασθενών) ως μη επεμβατική μυϊκό όγκο (NMIBC: pTa-ρΤ1) χαρακτηρίζεται από μια συνολική καλή πρόγνωση μετά από διουρηθρική εκτομή σε ασθενείς με όγκους χαμηλού βαθμού (pTaG1 /2), και ενδοκυστική χημειοθεραπεία και /ή Bacillus Calmette Guerin (BCG) ενστάλαξη σε ασθενείς με όγκους υψηλού βαθμού (pTaG3 ή pT1G2 /3) [2]. Περίπου το 70% των ασθενών που πάσχουν NMIBC υποτροπή μετά τη θεραπεία και ένα επιπλέον 15% πρόοδο, την ανάπτυξη νέων όγκων που εμφανίζουν μυϊκή εισβολή (MIBC: pT2-pT4)? ο κίνδυνος της εξέλιξης είναι υψηλότερο μεταξύ των ασθενών με όγκους υψηλού βαθμού [2]. Λόγω του υψηλού ποσοστού υποτροπής και την ανάγκη για στενή παρακολούθηση κατά τη διάρκεια ζωής του ασθενούς, UCB παραμένει ένα από τα πιο ακριβά όγκων για τη θεραπεία σε κάθε ασθενή βάση [3]. Ένα χαμηλότερο ποσοστό (20-30%) των ασθενών UCB έχουν διαγνωστεί με μυϊκή επεμβατικές όγκους (MIBC? PT2-pT4) χαρακτηρίζονται από κακή πρόγνωση: 50% αυτών των ασθενών πεθαίνουν από καρκίνο τους [2]. Γονιδιακό προφίλ του και η έκφραση του γονιδίου αναλύσεις δείχνουν μια ισχυρή συσχέτιση μεταξύ αυτών των παθολογικών ταξινομήσεων και την υποκείμενη μοριακή αρχιτεκτονική της UCB [4].

Growing στοιχεία δείχνουν ότι η χρόνια φλεγμονή μπορεί να αυξήσει τον κίνδυνο της UCB [5]. Μελέτες που διερευνούν τη παρατεταμένη χρήση της κυκλοοξυγενάσης-2 (COX2) αναστολή μη-στεροειδή αντι-φλεγμονώδη φάρμακα (NSAIDs) έχουν αναφέρει μια μείωση της UCB κίνδυνος [6], [7]. COX2 είναι μια προσταγλανδίνη ενδοϋπεροξειδίου συνθετάσης που καταλύει την παραγωγή προστανοειδών μετά από επαγωγή από προφλεγμονώδεις κυτοκίνες, αυξητικούς παράγοντες, προαγωγούς όγκου και άλλα εξωτερικά ερεθίσματα [8]. ενεργοποίηση COX2 διαμεσολαβεί κυτταρικές διεργασίες εμπλέκονται επίσης στην καρκινογένεση όπως η αγγειογένεση, κυτταρική επιβίωση /πολλαπλασιασμό και την απόπτωση [9]. Επιπλέον, μελέτες έχουν δείξει ότι ιστό της ουροδόχου κύστης από ασθενείς με κυστίτιδα ή UCB εκθέματα αυξημένα επίπεδα COX2 σε αντίθεση με καλοήθη ιστό της ουροδόχου κύστης [10], [11].

Ενώ πολλές ομάδες έχουν διερευνήσει την προγνωστική δυναμικό της έκφρασης COX2 σε UCB [12] – [31], δεν υπάρχει σαφής συναίνεση σχετικά με τη χρησιμότητά του. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να αξιολογηθεί εάν η έκφραση της πρωτεΐνης σε κύτταρα COX2 UCB σχετίζεται με πρόγνωση χρησιμοποιώντας ένα μεγάλο και τυποποιημένη σειρά ασθενών πρόσφατα διαγνωσμένο καρκίνο της ουροδόχου κύστης. Μια μετα-ανάλυση έγινε επίσης να συνοψίσει τα αποτελέσματα αυτά, μαζί με εκείνα από άλλες μελέτες που δημοσιεύθηκαν σχετικά με το θέμα.

Υλικά και Μέθοδοι

Πληθυσμός μελέτης

Ένα σύνολο 773 νέων διαγνωσμένα κρούσματα UCB ηλικίας 22-80 ετών (μέση τιμή ± SD = 66 ± 10 ετών) με διάμεση παρακολούθηση 70,7 μηνών (εύρος 0,7 έως 117,7 μήνες) και διατίθεται ιστό του όγκου χρησιμοποιήθηκαν στην παρούσα ανάλυση. Όλες οι περιπτώσεις είχαν προσληφθεί μεταξύ 1998 και 2001, από 18 νοσοκομεία σε πέντε περιφέρειες της Ισπανίας, στο πλαίσιο του ισπανικού καρκίνο της ουροδόχου κύστης (SBC) /Επιδημιολογίας του Καρκίνου της μελέτης ουροδόχου κύστης (EPICURO), μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο με βάση περιγράφηκε προηγουμένως [32 ]. Μια επιτροπή αναθεώρησης παθολόγος ταξινομούνται ομοιόμορφα το στάδιο Τ και του βαθμού (G) κάθε βιοψία του όγκου σύμφωνα με τα κριτήρια της ταξινόμησης ΤΝΜ και την ΠΟΥ-ISUP [33], χρησιμοποιώντας τον επαναπροσδιορισμό τρεις βαθμό που παρέχονται από τον ΠΟΥ [34], [35 ]. Όλα τα δείγματα όγκου κύστης που χρησιμοποιήθηκαν στη μελέτη συλλέχθηκαν πριν από τη χορήγηση οποιασδήποτε ενδοκυστική ή συστηματική θεραπεία. Οι κλινικές πληροφορίες που σχετίζονται με διαγνωστικές διαδικασίες, χαρακτηριστικά του όγκου και της θεραπείας συλλέχθηκαν από ιατρικά αρχεία, καθώς και ένα ηλεκτρονικό ερωτηματολόγιο χρησιμοποιήθηκε για τη συλλογή των κοινωνικο-δημογραφικών δεδομένων. NMIBCs αφαιρέθηκαν από διουρηθρική εκτομή και οι ασθενείς έλαβαν ενδοκυστική χημειοθεραπεία ή ανοσοθεραπεία (δηλαδή BCG) ανάλογα με την περίπτωση. Η πλειοψηφία των ασθενών που εμφανίζουν MIBCs υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ριζική κυστεκτομή? σε περιπτώσεις όπου η χειρουργική επέμβαση δεν ήταν δυνατή, ακτινοθεραπεία ή συστηματική χημειοθεραπεία χορηγήθηκαν. Συνέχεια πληροφορίες που συλλέγονται ετησίως από τα αρχεία του νοσοκομείου και μέσω της άμεσης τηλεφωνικών συνεντεύξεων από εκπαιδευμένο οθόνες απεικόνισης που χρησιμοποιούν δομημένα ερωτηματολόγια. Μεταξύ NMIBCs, υποτροπή ορίστηκε ως η εμφάνιση ενός νέου NMIBC μετά από προηγούμενη αρνητική παρακολούθηση κυστεοσκόπηση, και την εξέλιξη, καθώς η ανάπτυξη ενός MIBC. Σε ασθενείς που παρουσιάζουν αρχικά με MIBCs, οποιαδήποτε επανεμφάνιση του όγκου μετά από αγωγή θεωρήθηκε εξέλιξη, ανεξάρτητα από το αν η υποτροπή του όγκου ήταν τοπικό ή απομακρυσμένο. Όγκου-ειδική επιβίωση αξιολογήθηκε μόνο σε ασθενείς με MIBCs. Ενημέρωσε γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από τους συμμετέχοντες της μελέτης σύμφωνα με τις Επιτροπές Δεοντολογίας της κάθε συμμετέχουσας στο νοσοκομείο.

Η ανοσοϊστοχημεία

μπλοκ ιστών της φορμόλης-σταθερό, παραφίνη-ενσωματωμένες πρωτοπαθείς όγκους της ουροδόχου κύστης που χρησιμοποιούνται για την κατασκευή του ιστού μικροσυστοιχίες (ΤΜΑ) που περιέχει πυρήνες του όγκου των 0,6-mm σε διάμετρο εκπροσωπούνται εις διπλούν και επιλέγονται από τις πιο αντιπροσωπευτικές περιοχές του όγκου επί του οποίου βασίστηκαν T και G. Μετά deparaffinisation και ανάκτηση αντιγόνου θερμότητα επαγόμενη, όλα τα πλακίδια χρωματίσθηκαν ταυτόχρονα στον Ιστολογίας και ανοσοϊστοχημεία μονάδα πυρήνα της CNIO χρησιμοποιώντας το σύστημα ΡΤ LINK σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή (Dako Inc., Glostrup, Δανία). Εν συντομία, τομές ιστών επωάστηκαν με αντι-COX2 μονοκλωνικό αντίσωμα κουνελιού (ThermoFisher Scientific, Fremont, CA, USA? # RM-9121-R7? Προ-αραιωμένο, έτοιμο προς χρήση) σε θερμοκρασία δωματίου, που ακολουθείται από οπτικοποίηση χρησιμοποιώντας την EnVision Flex σύστημα οπτικοποίησης (Dako Inc., Glostrup, Δανία) και την έκθεση σε diaminobenzedine. Οι ιστοί στη συνέχεια αντιχρωματίστηκαν με αιματοξυλίνη, αφυδατώνονται και τοποθετημένα. Ένα τμήμα του ιστού του κόλου χρησιμοποιήθηκε σαν ένας θετικός έλεγχος.

Αξιολόγηση της COX2 ανοσοχρώση

έκφραση COX2 ποσοτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το Ariol SL-50 (έκδοση 3.1.2, Applied Imaging Corp., San Jose, CA, USA) υψηλής απόδοσης σαρωτής απεικόνισης διαφανειών. Όλες οι πυρήνες απεικονίστηκαν και επεξεργασία χρησιμοποιώντας ένα ελαφρύ μικροσκόπιο και το συνοδευτικό λογισμικό TMA Multistain απεικόνισης. Το πρόγραμμα είχε εκπαιδευτεί από έναν παθολόγο (SM) για να μεγιστοποιηθεί η συμπερίληψη των θετικά χρωσμένων επιθήλιο του όγκου, ελαχιστοποιώντας ταυτόχρονα υλικό στρωματικά, όπως περιγράφηκε προηγουμένως [36]. σκορ έκφραση COX2 υπολογίστηκε ως το γινόμενο της μέσης έντασης της χρώσης (με τον καθορισμό των υποβάθρου και του κορεσμού όρια του αισθητήρα αντισώματος και απεικόνισης, αντίστοιχα) και το ποσοστό των κυτταρικών περιοχής αντισώματος-θετικές διαιρούμενο με το συνολικό κυτταρικό περιοχή. Οι τιμές από επαναληπτικές πυρήνες τέθηκαν στον μέσο όρο για να παρέχει μια τελική βαθμολογία έκφρασης για κάθε ασθενή. Επιπλέον, ένα επιλεγμένο τυχαία ΤΜΑ (που αντιπροσωπεύουν το 10% του συνόλου των πυρήνων) αναλύθηκε με άμεση οπτική μικροσκοπική εξέταση από ανεξάρτητο παθολόγο (ΜΜΜ) που επιτρέπουν τη σύγκριση με την αυτοματοποιημένη προσέγγιση βαθμολόγησης. Ο παθολόγος προερχόμενο βαθμολογία υπολογίστηκε ως το γινόμενο της COX2 ένταση χρώσης (1 = ασθενής, 2 = ενδιάμεσος, 3 = ισχυρή) και ένα τεταρτημόριο του ποσοστού των επιθηλιακών κυττάρων του όγκου χρωματίζονται (0-4? Με το 0 να αντιπροσωπεύει 0% χρώσης) , παρέχοντας μια τελική κατηγορηματική βαθμολογία στην κλίμακα 0-12. Υπήρχε μια μεγάλη και σημαντική συσχέτιση μεταξύ του μηχανήματος και βαθμολογίες προέρχονται παθολόγο (Spearman rho = 0,85? 95% CI = 0,79 – 0,90? p-value & lt? 0,00001). έκφραση COX2 αναλύθηκε τόσο ως συνεχή μεταβλητή και κατηγορικές μεταβλητές κατανέμεται στο μέσο και ακραία τριτημόρια. Επιπλέον, η έκφραση εξετάστηκε ως κατηγορική μεταβλητή διχοτομήθηκε σε ένα κατώτατο όριο (0.340 αυθαίρετες μονάδες [au]) πάνω από το οποίο η έκφραση COX2 θεωρήθηκε ότι είναι

θετική

. Αυτό το κατώτατο όριο έκφραση προήλθε από τη σύγκριση του Ιατροδικαστή (ΜΜΜ) δυαδική ανάθεση θετική έκφραση (δηλαδή βαθμολογία από 0 έναντι ≥1 βαθμολογίας, όπως περιγράφεται παραπάνω) με τη μηχανή που προέρχονται από τη συνεχή βαθμολογίας με χρήση λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη (ROC) ανάλυση καμπύλης (περιοχή κάτω από την καμπύλη = 0,95?. 86% ευαισθησία και 92% ειδικότητα) [37]

Η μετα-ανάλυση

Η μετα-ανάλυση περιλάμβανε COX2 αποτελέσματα έκφρασης από τη δική μας σειρά (με τη χρήση του ROC- προέρχεται κατηγορική μεταβλητή έκφραση) και τις σχετικές μελέτες που δημοσιεύθηκαν πριν από την 1 του Ιανουαρίου, 2012 προσδιορίζονται από την αναζήτηση PubMed και ISI Web of Knowledge. Η συμβολοσειρά αναζήτησης που χρησιμοποιήθηκε ήταν: (COX2 ή COX-2 ή της κυκλοοξυγενάσης-2 ή «κυκλοοξυγενάσης 2» ή ptgs2) ΚΑΙ (Prognos * Ή η επιβίωση ή θνησιμότητα ή επανεμφάνισης ή υποτροπή ή εξέλιξη) ΚΑΙ ( «καρκίνος της ουροδόχου κύστης»). Μελέτες θεωρήθηκαν επιλέξιμες εφόσον: (i) ανέφεραν το μέτρο αποτελέσματος (όπως ώρες, καμπύλες επιβίωσης ή p-τιμές log-rank) της πρωτεϊνικής έκφρασης COX2 σχετικά με την επανάληψη, την εξέλιξη ή συγκεκριμένες ασθένειες επιβίωση? (Ii) COX2 αξιολογήθηκε σε πρωτογενείς όγκους που παρουσιάζουν ομοιογένεια στην ιστολογία του όγκου (≥75% UCB), και subphenotype (≥75% NMIBC

ή

MIBC)? (Iii) ήταν γραμμένο στα αγγλικά ή τα ισπανικά (Πίνακας S1). Αξιολογήσεις, περιλήψεις, μη κλινικές μελέτες, και διπλές εκδόσεις αποκλείστηκαν. Ώρες και 95% ΚΠ άμεσα εξάγεται από τους όποτε διαθέσιμες εκδόσεις. Για εκείνους που αναφέρουν μόνο την τιμή p log-rank ή τις καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier, τις ώρες και 95% ΚΠ ήταν ανεξάρτητα υπολογίζεται με δύο από τους συν-συγγραφείς (MJC, AFSA) χρησιμοποιώντας το υπολογιστικό φύλλο παρασκευάζεται με Sydes και Tierney με οποιαδήποτε διαφορές επιλύονται με τη συζήτηση [38]. Σε μερικές περιπτώσεις ενδείκνυται, οι συγγραφείς είχαν άμεση επαφή για την αποσαφήνιση ή την παροχή των δεδομένων δεν εμφανίζονται στις δημοσιευμένες χειρόγραφα (Πίνακας S1). Το επίπεδο της ετερογένειας μεταξύ των μελετών υπολογίστηκε με τη βοήθεια του I

2 Στατιστική [39], και η μεροληψία δημοσίευσης αξιολογήθηκε αναλύοντας οικόπεδα χωνί και δοκιμή ασυμμετρία Egger του [40].

Στατιστική Ανάλυση

Σύλλογοι μεταξύ δημογραφικών και κλινικο-παθολογικών παραμέτρων και της έκφρασης COX2 αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας το ακριβές τεστ του Fisher. Σε NMIBCs, έκφραση αξιολογήθηκε επίσης ευδιάκριτα σε χαμηλού βαθμού /κινδύνου (pTaG1 /G2) και υψηλής ποιότητας /κινδύνου (PTA /pT2G3) όγκους, με βάση τα προηγούμενα στοιχεία που δείχνουν απόκλιση προγνωστικών, γενετικών και μοριακών προφίλ μας μεταξύ αυτών των υποομάδων [41 ], [42]. Χωρίς υποτροπή, χωρίς εξέλιξη, και η συνολική καμπύλες επιβίωσης για συγκεκριμένες ασθένειες παρήχθησαν χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier, με στατιστική σημαντικότητα αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία log-rank. Χρόνος σε κάθε τελικό σημείο ήταν υπολογίζονται από την ημερομηνία πρωτοβάθμια επεξεργασία με την ημερομηνία της εκδήλωσης, ημερομηνία τελευταίας παρακολούθησης, ή την ημερομηνία του θανάτου του ασθενούς. Τα άτομα που δεν παρουσιάζουν καμία περίπτωση μέχρι το τέλος της μελέτης, όσοι έχασαν την παρακολούθηση, ή εκείνοι που πέθαναν από άλλα αίτια είχαν λογοκριθεί, είτε κατά το χρόνο της τελευταίας ιατρικής επίσκεψης ή σε θάνατο. Ώρα να υποτροπής και εξέλιξης ορίστηκαν με την εφαρμογή του «μεσαίου χρόνου» μεταξύ της ημερομηνίας της προηγούμενης επίσκεψης απαλλαγμένη από την ασθένεια και ότι, όταν ένα νέο συμβάν είχε διαγνωστεί. χρόνος επιβίωσης μετρήθηκε ως ο χρόνος από την αρχική θεραπεία σε θάνατο που προκύπτει από καρκίνο. Μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση Cox-αναλογικών κινδύνων χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό των λόγων κινδύνου (HR) και τα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI). Schoenfeld υπολειμματική ανάλυση δεν έδειξε κάποια απόκλιση από την υπόθεση των αναλογικών κινδύνων σε μοντέλα πολλαπλών μεταβλητών.

Όλες οι στατιστικές αναλύσεις έγιναν με τη χρήση του λογισμικού STATA (έκδοση 10.1 SE, StataCorp, College Station, TX, USA). Στατιστική δοκιμασίες ήταν δύο όψεων και ρ-τιμές μικρότερες από 0,05 θεωρήθηκαν σημαντικές. Η ΠΑΡΑΤΗΡΗΣΗ [43] Κατευθυντήριες γραμμές για την προγνωστική μελέτες, καθώς και την PRISMA [44] Κατευθυντήριες γραμμές για συστηματικές ανασκοπήσεις και μετα-αναλύσεις τηρήθηκαν κατά την προετοιμασία του χειρογράφου.

Αποτελέσματα

Οι ασθενείς και οι COX2 έκφραση σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης TMAs

έκφραση COX2 αξιολογήθηκε σε 557 ασθενείς με NMIBCs και 216 άτομα με MIBCs. Η διάμεση έκφραση COX2 ήταν 0,121 au (εύρος μηδέν έως 42,590? Διατεταρτημοριακό εύρος 1.382) σε NMIBCs, και 0.760 au (μηδέν έως 30,806? 3.600) σε MIBCs (p-value = 4 × 10

-12). Αντιπροσωπευτικά πρότυπα ανοσοχρώση COX2 στην UCBs φαίνεται στο Σχήμα S1. Από τους ασθενείς με NMIBCs, 41% (230/557) υποβλήθηκαν σε επεξεργασία μόνο με διουρηθρική, με το υπόλοιπο (56%) που έλαβαν endovesical ανοσοθεραπεία με BCG και /ή χημειοθεραπεία εξής διουρηθρική εκτομή, ή άλλη θεραπεία (3%? Πίνακας 1). Σχεδόν οι μισοί (46%) των ασθενών με MIBCs υποβλήθηκαν σε θεραπεία με κυστεκτομή, με το υπόλοιπο λαμβάνουν συστηματική χημειοθεραπεία, ακτινοθεραπεία, επιφανειακή ή άλλης επεξεργασίας, ή κάποιο συνδυασμό αυτών (Πίνακας 2).

Η

COX2 έκφραση και κλινικοπαθολογικών Χαρακτηριστικά

διακόσια έντεκα (38%) και 137 NMIBCs (58%) MIBCs εκφράζεται COX2 (πίνακες 1 και 2, αντίστοιχα), με θετική έκφραση ορίζεται ως ένα σκορ ίσο ή μεγαλύτερο από η ROC που προέρχονται από το όριο των 0.340 au. Ασθενής και όγκου χαρακτηριστικά στο αναλυόμενο δείγμα δεν διέφερε σημαντικά από τον αρχικό πληθυσμό μελέτης SBC /EPICURO με εξαίρεση την γεωγραφική περιοχή και το μέγεθος του όγκου σε ασθενείς NMIBC (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Η κατανομή των COX2 θετικότητας αξιολογήθηκε σύμφωνα με καθιερωμένες prognosticators καρκίνου της ουροδόχου κύστης συμπεριλαμβανομένης της εισβολής των όγκων και του βαθμού, πολλαπλότητα του όγκου, το μέγεθος του όγκου και τη θεραπεία, μεταξύ άλλων. Δημογραφικούς παράγοντες όπως η ηλικία, το φύλο και την περιοχή δεν σχετίζεται με την έκφραση της COX2, ούτε το είδος της πρωτοβάθμιας επεξεργασίας που λαμβάνονται από τους ασθενείς (Πίνακες 1 και 2). Σε NMIBCs, έκφραση COX2 ήταν σημαντικά σχετίζεται μόνο με T και G? να είναι πιο εμφανή σε pTaG1 /2 όγκους χαμηλού βαθμού /κινδύνου από ό, τι σε υψηλής ποιότητας /pTa /pT1G3 όγκους κινδύνου (p-value & lt? 0,0001? Πίνακας 1). Περαιτέρω αξιολόγηση της κατανομής COX2 σε σχετική μοριακή υποτύπους της UCB [4], αποκάλυψε ένα μεγαλύτερο ποσοστό των pTaG2 από pTaG1 όγκων που εκφράζουν θετικά COX2 σε χαμηλού βαθμού NMIBCs (p & lt? 0,0001, υποτύπου 1? Εικόνα S2). έκφραση COX2 δεν διέφεραν μεταξύ των υψηλής ποιότητας /NMIBCs κινδύνου (p = 0,075), αλλά ένα μεγαλύτερο ποσοστό των MIBCs θετικά εκφράζεται COX2 από ό, τι όλα τα υψηλής ποιότητας /NMIBCs κινδύνου σε συνδυασμό (p & lt? 0.0001, υπότυπος 2? Εικόνα S2). Μόνο πολλαπλότητα των όγκων που σχετίζονται με θετική έκφραση COX2 σε MIBC ασθενείς (p-value = 0,008? Πίνακας 2).

COX2 έκφραση και πρόγνωση σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης ασθενείς

Εμείς ανέλυσε τη συσχέτιση της έκφρασης COX2 με υποτροπή του όγκου και την εξέλιξη σε ασθενείς με NMIBCs και με την εξέλιξη και την ασθένεια-ειδικές επιβίωση σε ασθενείς με MIBCs (Πίνακας 3? Εικόνα 1). Όταν θεωρείται ως συνεχής μεταβλητή στο μονοπαραγοντική ανάλυση, η έκφραση της COX2 ήταν οριακά σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο υποτροπής σε NMIBCs (HR = 1,02, 95% CI = 1,00-1,04, ρ-τιμή = 0.048? Πίνακας 3). Ωστόσο, η συσχέτιση αυτή εξαφανίστηκε μετά από πολυπαραγοντική ανάλυση κατά τη ρύθμιση για την περιοχή, το φύλο, το στάδιο του όγκου και της ποιότητας, πολλαπλότητα, το μέγεθος του όγκου, και τη θεραπεία. Επιπλέον, η έκφραση της COX2 δεν συσχετίστηκε σημαντικά με επανάληψη σε NMIBCs όταν θεωρείται ως κατηγορική μεταβλητή, ούτε στις μονοπαραγοντική ούτε πολυπαραγοντική ανάλυση (Σχήμα 1Α? Σχήμα S3AC? Πίνακας 3). Τέλος, καμία σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης COX2 και την εξέλιξη ή την επιβίωση παρατηρήθηκε σε ασθενείς με NMIBCs ή MIBCs, ανεξάρτητα από το αν η έκφραση θεωρήθηκε ως συνεχής ή κατηγορική μεταβλητή σε μη προσαρμοσμένους ή να ρυθμίζεται αναλύσεις (Εικόνα 1Β-D? Σχήμα S3b, 3D -Η? Πίνακας 3)

Η

Οι διακεκομμένες καμπύλες:. ασθενείς με όγκους θετική για χρώση πρωτεϊνών COX2? στερεά καμπύλες: ασθενείς με όγκους αρνητικό για χρώση πρωτεϊνών COX2. τιμές σημασία από δοκιμή δύο όψεων logrank.

Η

Μετα-ανάλυση των COX2 Έκφρασης και καρκίνο της ουροδόχου κύστης πρόγνωση

Είκοσι δημοσιεύσεις σχετικά με COX2 έκφραση και καρκίνου της ουροδόχου κύστης πρόγνωση εντοπίστηκαν μέσα από την ανασκόπηση της βιβλιογραφίας ( Πίνακας S1) [12] – [31]. Τρεις από αυτούς δεν είχαν προγνωστικά στοιχεία, δύο επικαλύπτονται με άλλες μεγαλύτερες μελέτες και τέσσερα περιλαμβάνονται ομάδες ασθενών που δεν πληρούν τα κριτήρια επιλεξιμότητας που περιγράφονται νωρίτερα, αφήνοντας 11 αξιολογήσιμη δημοσιεύσεις [12] – [14], [19], [21] – [25 ], [28], [29] καθώς και η παρούσα μελέτη για τη μετα-ανάλυση (Σχήμα S4). Μελέτες έχουν ταξινομηθεί από τον υπότυπο (ες) των όγκων που αναφέρθηκαν στο (δηλ NMIBC ή MIBC), και αν προσαρμογή για συμπαράγοντες θεωρήθηκε για κάθε προγνωστικό παράμετρο που εξετάστηκαν (δηλαδή μονοπαραγοντική ή πολυπαραγοντική? Σχήματα 2 και 3). Των τεσσάρων μετα-αναλύσεις που διεξάγονται με μονοπαραγοντική δεδομένα, μόνο η metaHR της συσχέτισης μεταξύ της έκφρασης COX2 και στην επανάληψη σε NMIBCs έδειξαν οριακή σημασία (metaHR = 1,35, 95% CI = 1,00 – 1,83? Σχήμα 2). Αυτό το αποτέλεσμα δεν επηρεάστηκε από την ετερογένεια της μελέτης (Ι

2 p-value = 0,13), αλλά εμφάνισε σημαντική προκατάληψη δημοσίευση, όπως αποδεικνύεται με δοκιμή Egger του (p-value = 0,019). Το υπόλοιπο μετα-αναλύσεις σχετικά με μονοπαραγοντική δεδομένα υποδηλώνουν αυξημένη, αν και μη σημαντικές, οι κίνδυνοι της εξέλιξης του όγκου σε ασθενείς με NMIBCs (metaHR = 2,07, 95% CI = 0,76 – 5,64) και MIBCs (metaHR = 1.45, 95% CI = 0.77- 2,74), και του θανάτου σε ασθενείς με MIBCs (metaHR = 1,13, 95% CI = 0,8 – 1,59? Σχήμα 2). Αξίζει να σημειωθεί ότι, η περίληψη επίδραση για την εξέλιξη στην NMIBCs και αυτή που παρατηρήθηκε για την επιβίωση σε MIBCs ήταν τόσο επηρεάζεται σημαντικά από την ετερογένεια της μελέτης (Ι

2 p-τιμές: 0.006 και 0.004, αντίστοιχα), με την πρώην, επίσης, επηρεάζεται σημαντικά από την προκατάληψη δημοσίευση ( p-value test Egger είναι = 0.001).

η

Λόγω της έλλειψης των δημοσιευμένων προγνωστικών μελετών εκτέλεση πολυπαραγοντική ανάλυση σε ασθενείς με NMIBCs, θα μπορούσαμε να αντιμετωπίσει μόνο την πολυμεταβλητή μετα-σύνδεσης με την εξέλιξη και την επιβίωση σε ασθενείς με MIBCs (Σχήμα 3). Μια μικρή, μη σημαντική αύξηση της περίληψης κίνδυνο εξέλιξης (metaHR = 1,12, 95% CI = 0,53 – 2,35? Σχήμα 3) παρατηρήθηκε σε COX2 έκφραση MIBCs που ήταν ανεπηρέαστη από ετερογένεια μελέτη (Ι

p-value = 0,139 2 ). Ομοίως, μια μηδενική περίληψη αποτέλεσμα παρατηρήθηκε για την επιβίωση (metaHR = 0.97, 95% CI = 0,69 – 1,36? Σχήμα 3). Το αποτέλεσμα αυτό επηρεάστηκε ούτε από ετερογένεια μελέτη (Ι

2 p-value = 0,114), ούτε από την προκατάληψη δημοσίευση (p-value test Egger είναι = 0.108.

Η

Συζήτηση

Παρά πολλές δημοσιευμένες μελέτες, αντιφατικά ευρήματα επικρατούν στην έκφραση COX2 ως ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης σε ασθενείς με UCB. Η παρούσα μελέτη δείχνει ότι η έκφραση COX2 δεν είναι ένας ανεξάρτητος δείκτης που σχετίζεται με υποτροπή, την εξέλιξη ή την επιβίωση σε ασθενείς με UCB.

Χρησιμοποιώντας τη μεγαλύτερη ομάδα ασθενών με NMIBCs αξιολογήθηκαν για έκφραση COX2 μέχρι σήμερα, παρατηρήσαμε ότι το 38% των όγκων αυτών εξέφρασαν την πρωτεΐνη Άλλες ομάδες έχουν αναφέρει συχνότητες που κυμαίνονται από 53-88%?. ωστόσο, οι μελέτες αυτές χρησιμοποιήθηκαν διαφορετικά αντισώματα COX2 και αξιολόγηση της έκφρασης τεχνικές και είχε μικρότερα μεγέθη δείγματος [16], [28], [29], [45], [46]. σύμφωνα με την αναφορά των αποτελεσμάτων [11], [18], [45] παρατηρήσαμε σημαντικά υψηλότερη έκφραση COX2 στην MIBCs (58%) από ό, τι σε NMIBCs. Αυτή η συχνότητα είναι παρόμοιο με εκείνο που παρατηρήθηκε σε άλλα μεγάλα, ιστολογικά ομοιογενής μελέτες [21], [28], ενώ οι ομάδες που χρησιμοποιούν ετερογενή κοόρτες πλακώδους και μεταβατικών καρκινώματα αναφέρουν συχνότητες διαφορετικές από τις δικές μας [12] , [29]. Συλλογικά, τα ευρήματα αυτά επαναλάβω τη σημασία της ομοιογένειας, ή διαστρωμάτωση, σε μελέτες καρκινικός δείκτης.

Η συσχέτιση μεταξύ της COX2 και τα χαρακτηριστικά κλινικο-παθολογικές παραμένει ένα επίμαχο θέμα στη βιβλιογραφία. Η πλειοψηφία των μελετών αναφέρουν σύνδεσης μεταξύ COX2 υπερέκφραση και προηγμένες εισβολή όγκου και ποιότητας, αλλά χρησιμοποιούν ετερογενείς πληθυσμούς NMIBCs

και

MIBCs στις αξιολογήσεις τους [21], [25], [26], [28], [47]. Με δεδομένη τη γνωστή διαφορά στην έκφραση COX2 μεταξύ NMIBCs και MIBCs, μια ένωση του τύπου αυτού θα πρέπει να αναμένεται σε ένα μικτό πληθυσμό όγκου. Μετά τη συγκέντρωση NMIBCs και MIBCs στη μελέτη μας, παρατηρούμε επίσης μια ισχυρή σημαντική συσχέτιση μεταξύ COX2 υπερέκφραση και εισβολή προηγμένη όγκου (p & gt? 0,0001) και του βαθμού (p & gt? 0,0001). Αξίζει να σημειωθεί ότι, αρκετές ομάδες αναφέρουν καμία συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης COX2 και T και G [14], [29], [45]? ιδιαίτερα εκείνων που εργάζονται στενά με ομοιογενή ομάδες της MIBCs [12], [23]. Παρομοίως, στη μελέτη μας, η έκφραση COX2 δεν διαφέρουν σημαντικά μεταξύ pT2, ρΤ3 και pT4 όγκους (p = 0,896). Είναι ενδιαφέρον, παρατηρήσαμε χαμηλότερη θετικότητα COX2 σε ρΤ1 και NMIBCs υψηλής ποιότητας /κινδύνου, σε σχέση με το PTA και χαμηλής ποιότητας NMIBCs όγκους /κινδύνου. Το αποτέλεσμα αυτό μπορεί να φαίνεται αντιφατικό, αν την εξέλιξη της ποιότητας θεωρείται ένα γραμμικό γνώρισμα και η έκφραση COX2 θεωρείται ότι αυξάνεται γραμμικά με το Τ και Γ Ωστόσο, υπάρχουν ισχυρές ενδείξεις ότι η UCB υπάρχει ως δύο μοριακά διακριτούς υποτύπους, με NMIBCs υψηλής ποιότητας /κινδύνου που έχει μια μοριακή υπογραφή περισσότερο παρόμοια με MIBCs από το να NMIBCs /κινδύνου χαμηλού βαθμού [4], [42]. Από την άποψη αυτή, παρατηρήθηκε ότι COX2 θετικότητα αυξήθηκε σημαντικά με την αύξηση της Τ και G μέσα σε κάθε υπότυπο μοριακού όγκου (Σχήμα S2). Shirahama et al. [26] ανέφεραν μια κατανομή COX2 παρόμοια με τη δική μας, παρατηρώντας 8% θετικότητα σε όγκους ρΤ1 και 50% σε MIBCs όταν χρησιμοποιούν χρώση ολόκληρο τμήμα και ένα όριο έκφραση 5%. Συλλογικά, αυτά τα αποτελέσματα επαναλάβει τη διαφορά στην έκφραση COX2 μεταξύ NMIBCs και MIBCs αναφέρθηκε για πρώτη φορά από Komhoff et al. [47], και να τονίσει τη σημασία της εξέτασης της έκφρασης εντός του κατάλληλου μοριακού πλαίσιο.

Για την ελαχιστοποίηση των επιπτώσεων που προκύπτουν από την επιλογή ένα αυθαίρετο όριο έκφρασης, μελετήσαμε την έκφραση της πρωτεΐνης COX2 ως συνεχής μεταβλητή και τρεις κατηγορικές μεταβλητές. Μόνο όταν θεωρείται ως συνεχής μεταβλητή στο μονοπαραγοντική ανάλυση ήταν COX2 έκφραση βρέθηκε να συνδέεται με μια ελαφρά αύξηση του κινδύνου υποτροπής. Η μετα-ανάλυση, που αποτελείται από πέντε άλλες μονοπαραγοντική μελέτες, επανέλαβε αυτή την ένωση και έδειξε 35% αυξημένο κίνδυνο υποτροπής σε ασθενείς με COX2 έκφραση NMIBCs. Ωστόσο, και οι δύο εκτιμήσεις αποτελέσματος εμφανίζουν οριακή μόνο σημασία, γεγονός που υποδηλώνει ότι οι παρατηρούμενες συσχετίσεις μπορεί να οφείλεται στην τύχη. Επιπλέον, η συσχέτιση που παρατηρήθηκε στην μονοπαραγοντική ανάλυση δεν κατέχει μετά την προσαρμογή για τα συμβατικά προγνωστικοί παράγοντες της υποτροπής στην πολυπαραγοντική ανάλυση. Τέλος, η περίληψη επίδραση που παρατηρείται στη μετα-ανάλυση μπορεί να έχουν ασύμμετρη από δύο μικρές μελέτες, οι οποίες επιλέγονται μόνο υψηλής NMIBCs κινδύνου (T1G3 [19] και cis [24]). Όταν μια ανάλυση ευαισθησίας πραγματοποιήθηκε την αφαίρεση αυτών των δύο μελετών από τη μετα-ανάλυση, η σχέση μεταξύ επανάληψης και της έκφρασης COX2 δεν ήταν πλέον διατηρηθεί (metaHR = 1,14, 95% CI = 0,94 – 1,38). Η παρατηρούμενη διαφορά μεταξύ των εκτιμήσεων επίδραση της εξέλιξης στην παρούσα μελέτη και τη μετα-ανάλυση θα μπορούσε επίσης να αποδοθεί στην ένταξη των δύο αυτών μελετών. Μετά από τον αποκλεισμό τους, η περίληψη HR δεν έδειξε συσχέτιση με την εξέλιξη (metaHR = 0,98, 95% CI = 0,47 – 2,03). Αυτά τα αποτελέσματα δεν υποστηρίζουν ένα ρόλο για την έκφραση COX2 σε NMIBCs ως ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης της υποτροπής ή εξέλιξης.

Αρκετές ομάδες έχουν διερευνήσει τη δυνατότητα έκφρασης COX2 να προβλέψετε το αποτέλεσμα σε ασθενείς με MIBCs. Παρά την ευρεία διακύμανση μεταξύ μελέτης όσον αφορά τη μεθοδολογία, τα αντισώματα που χρησιμοποιούνται, το μέγεθος του δείγματος, και οι παράμετροι ρύθμισης στην περίπτωση της πολυπαραγοντική ανάλυση, η πλειοψηφία αυτών των μελετών δεν εντόπισε οποιαδήποτε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης COX2 και την εξέλιξη ή την επιβίωση, σύμφωνα με τα ευρήματά μας [13 ], [14], [23], [28], [29]. Shariat και Margulis και τους συναδέλφους τους που παρατηρήθηκε αρνητική συσχέτιση μεταξύ υψηλής έκφρασης COX2 και την εξέλιξη του όγκου και τη θνησιμότητα [21], [25]. Ωστόσο, και οι δύο μελέτες στηρίχθηκε σε ετερογενείς πληθυσμούς δείγμα το οποίο περιελάμβανε ένα μικρό ποσοστό των ασθενών με NMIBCs? δυνητικά αντιπροσωπεύουν τις παρατηρούμενες συσχετίσεις με δεδομένη την διαφορά στην έκφραση COX2 μεταξύ επιφανειακών και προχωρημένους όγκους της ουροδόχου κύστης [45]. Σε μια άλλη μελέτη, Wulfing et al. ανέφερε ότι η έκφραση υψηλής COX2 ήταν ένα ανεξάρτητο προγνωστικό δείκτη κακής συνολική επιβίωση σε μια υποομάδα των 62 ασθενών με MIBC αγωγή με σισπλατίνη χημειοθεραπεία με βάση [29]. Εμείς δεν εντόπισε οποιαδήποτε σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ της έκφρασης COX2 και θεραπείας (τα δεδομένα δεν φαίνονται), και ήταν σε θέση να αναπαράγουν τα ευρήματά τους σε ένα μικρότερο υποσύνολο 39 ασθενών που έλαβαν θεραπεία με σισπλατίνη (HR = 1,47, 95% CI = 0,48 – 4,51, ρ- value = 0,497). Aziz et al. ανέφερε πλεονέκτημα επιβίωσης 36% σχετίζεται με αυξημένα επίπεδα COX2 σε μία ομάδα από 266 ασθενείς με MIBCs (221 με την UCB), που ήταν ανεξάρτητη από την κατάσταση των λεμφαδένων και νεο /επικουρική χημειοθεραπεία [12]. Ενώ παρατηρήθηκε επίσης βελτίωση της επιβίωσης των ασθενών με COX2 υπερεκφράζουν MIBCs, αυτή η ένωση δεν έφθασε σημασία, συνάδει με άλλες μονοπαραγοντική [23], [28] και πολυμεταβλητή [26] αναλύει.

Η μελέτη μας είχε ένα μεγάλο δείγμα μέγεθος, περιλαμβάνονται μόνο περιπτώσεις περιστατικό και στηρίχθηκε στην εκτεταμένη και με ακρίβεια απέκτησε παρακολούθηση πληροφορίες που εκτείνονται σε δέκα χρόνια. Επιπλέον, χρησιμοποιήσαμε αυτοματοποιημένη βαθμολόγηση των ανοσοχρωματισμένη TMAs, μια στρατηγική παρέχει μια αναπαραγώγιμη εκτίμηση της έκφρασης που συσχετίζεται ιδιαίτερα με την ανεξάρτητη αξιολόγηση ενός υποσυνόλου δειγμάτων από ανεξάρτητο παθολόγο. χρώση COX2 έγινε σε ένα εργαστήριο για να αποφευχθεί η ανομοιογένεια της ανοσοϊστοχημική χρώση και βαθμολόγησης, και αξιολογείται ως μια συνεχής μεταβλητή στο προγνωστική αναλύσεις για να αποφευχθεί η πιθανή προκατάληψη που σχετίζονται με την επιλογή ενός κατωφλίου έκφρασης. Επιπλέον, ο πληθυσμός του δείγματος παρέχει μια ακριβή αναπαράσταση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης στον γενικό πληθυσμό, όπως αυτά επιβάλλονται κριτήρια ένταξης στη διαδικασία προσλήψεων η οποία περιελάμβανε ένα καλό μίγμα των κέντρων παραπομπής και νοσοκομεία νομών. Τέλος, οι συστάσεις των μελετών ΠΑΡΑΤΗΡΗΣΗ και PRISMA ακολουθήθηκαν σε όλες τις αναφερθείσες αναλύσεις.

Παρά τις σκέψεις αυτές και προσπαθεί να ποσοτικοποιήσει με ακρίβεια την έκφραση COX2 μόνο στα επιθηλιακά κύτταρα, το αυτοματοποιημένο σύστημα απεικόνισης παθολόγος-εκπαιδευμένο μπορεί να ενσωματωθεί μερικά από σημασμένο υλικό στρωματικών βρίσκονται στον πυρήνα ιστό, αυξάνοντας έτσι το σφάλμα τύπου Ι. Για να μειώσετε τα πιθανά σφάλματα που ο μέσος όρος των βαθμολογιών έκφρασης από διπλές πυρήνες και επίσης διερευνηθεί μια μέθοδο ερευνήθηκε από Henriksen et al. [48] ​​στην οποία η υψηλότερη βαθμολογία χρησιμοποιήθηκε (δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Και οι δύο μέθοδοι έδωσαν παρόμοια ενώσεων υλικού μεταξύ της έκφρασης COX2 και κλινικο-παθολογικών παραμέτρων ή ώρες. Επιπλέον, προσαρμοσμένες αναλύσεις για την πρόοδο στην NMIBCs πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή λόγω του μικρού αριθμού των γεγονότων σε σχέση με συμπαράγοντες. Επίσης, οι διαφορετικές πρακτικές διαχείρισης των ασθενών σε όλη νοσοκομεία προσλήψεις θα μπορούσε να αυξήσει το δείγμα ετερογένεια, καθιστά αναγκαία τη συμπερίληψη και των δύο περιοχής πρόσληψης και θεραπευτική αγωγή σε πολυπαραγοντική ανάλυση μας

Τα αποτελέσματα που παρουσιάζονται στο παρόν επικεντρώνονται σε επίπεδα έκφρασης COX2 μετρώνται στα επιθηλιακά κύτταρα των όγκων. – μόνο μία πτυχή της πολύπλοκης αλληλεπίδρασης μεταξύ του όγκου και του ξενιστή ανοσολογική /φλεγμονώδη απόκριση [49]. Η προγνωστική δυναμικό της COX2 (αν υπάρχουν) μπορεί να αποκαλυφθεί μόνο όταν εξετάζονται από κοινού με άλλες ογκοματώδεις δείκτες. Κατά τη διερεύνηση αρκετών πιθανών προγνωστικών παραμέτρων στην UCB, Hilmy et al. κατέληξε στο συμπέρασμα ότι η συστημική παράγοντες της φλεγμονώδους απόκρισης, όπως τα επίπεδα C-αντιδρώσας πρωτεΐνης ήταν ανώτερες σε παράγοντες όγκου, όπως το βαθμό, έκφραση COX2 ή Τ-λεμφοκυτταρικής διήθησης [18]. Επιπλέον, σε μοντέλα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, Ferrandina et al. παρατήρησε ότι ενώ η έκφραση της COX2 ήταν αλληλοαποκλειόμενες στον όγκο και στρωματικών φλεγμονώδη κύτταρα, υψηλή έκφραση σε δύο τύπους κυττάρων θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως ανεξάρτητη δείκτης κακή επιβίωση [50].