Αφηρημένο

Ιστορικό

Η 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου, που περιέχουν CHRNA5, θα μπορούσε να τροποποιήσει την ευαισθησία του καρκίνου του πνεύμονα και των πολλαπλών φαινοτύπων που σχετίζονται με το κάπνισμα. Ωστόσο, δεν μελέτες έχουν διερευνήσει τη σχέση μεταξύ rs3841324 CHRNA5, η οποία έχει αποδειχθεί ότι έχουν την υψηλότερη συσχέτιση με έκφραση CHRNA5 mRNA, και τον κίνδυνο άλλων καρκίνων που σχετίζονται με το κάπνισμα, εκτός από καρκίνο του πνεύμονα. Στην παρούσα μελέτη εξετάσαμε τη συσχέτιση μεταξύ rs3841324 και ευαισθησία σε καρκίνωμα ρινοφαρυγγικής κάπνισμα σχετίζεται (NPC).

Μέθοδοι

Σε αυτή τη μελέτη ασθενών-μαρτύρων που ο γονότυπος του πολυμορφισμού rs3841324 CHRNA5 με 400 NPC περιπτώσεις και 491 υγιείς μάρτυρες που ήταν Κινέζοι Χαν και η συχνότητα ταιριαστό με την ηλικία (± 5 έτη), το φύλο, και η κατανάλωση αλκοόλ. Μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό του λόγου πιθανοτήτων (OR) και 95% διαστήματα εμπιστοσύνης (95% CI).

Αποτελέσματα

Βρήκαμε ότι τα άτομα με rs3841324 CHRNA5 συνδυασμό παραλλαγή γονότυπους (ins /del + del /del) είχε ένα Πεκίνο Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών στο Xuemei Ji. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

το κάπνισμα είναι ένα μείζον πρόβλημα για τη δημόσια υγεία, αντιπροσωπεύοντας το 5 εκατομμύρια θανάτους ετησίως σε όλο τον κόσμο [1], και συμβάλλοντας στο 31% και το 6% όλων των θανάτων από καρκίνο στους άνδρες και τις γυναίκες σε όλο τον κόσμο για τα άτομα μεταξύ 30 και 69 χρόνων της ηλικίας, αντίστοιχα [2]. Η νικοτίνη, ένα συστατικό των τσιγάρων, μπορεί να προωθήσει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων, την επιβίωση, τη μετανάστευση, εισβολή, την αιτιολογία και την ανάπτυξη [3], η νικοτίνη έχει δειχθεί ότι εμπλέκεται με την παθογένεση πολλών καρκίνων, συμπεριλαμβανομένων ρινοφαρυγγικού καρκινώματος (NPC) [4] ? Ωστόσο, δεν υπάρχει καμία απόδειξη ότι οι καρκινογόνες, οι μηχανισμοί που συνδέονται με τη νικοτίνη και την ευαισθησία γενετικές παραλλαγές επιρροή για να NPC.

Γονιδίωμα-ευρύ μελέτες συσχέτισης (GWAS) έχουν προσδιορίσει ότι το χρωμόσωμα 15q25.1, που αποτελείται από νικοτινικό υποδοχέα της ακετυλοχολίνης γονίδια, συμπεριλαμβανομένων CHRNA5 και CHRNA3, είναι πνεύμονα περιοχές ευαισθησίας στον καρκίνο [5], [6] και διαδραματίζουν έναν πιθανό ρόλο σε πολλές φαινοτύπους σχετίζονται με το κάπνισμα και εξάρτηση από τη νικοτίνη [7]. CHRNA5, ένα μέλος του συνδέτη διαύλων ιόντων, ρυθμίζει δυναμικά κυτταρική μεμβράνη και φυσιολογικές διαδικασίες, συμπεριλαμβανομένης της νευροδιαβίβασης [8] και του καρκίνου σηματοδότηση [9]. αλκαλοειδές του καπνού και η νικοτίνη μπορεί να δεσμεύσει και να ενεργοποιούν τους νικοτινικούς υποδοχείς ακετυλοχολίνης και έτσι να διεγείρουν κυτταρικό πολλαπλασιασμό και προσβολή όγκου, και αναστέλλουν την απόπτωση [9] – [11]. Αν και έχει αναφερθεί ότι η ενεργοποίηση νικοτίνη μεσολάβηση του CHRNA3 και CHRNA5 μπορεί να επηρεάσει άμεσα τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του πνεύμονα, το επίσης έχει προταθεί ότι οι επιρροές θέση ευαισθησίας του καρκίνου του πνεύμονα τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου του πνεύμονα 15q25.1 τουλάχιστον εν μέρει μέσω μιας επίδρασης του καπνίσματος επιμονή [ ,,,0],12], επειδή οι παραλλαγές στο 15q25.1 συνδέονται επίσης με την καπνιστική συμπεριφορά και την εξάρτηση από τη νικοτίνη [13]. Ως εκ τούτου, οι παραλλαγές στο 15q25.1 μπορεί να επηρεάσει άλλους καρκίνους κάπνισμα συνδέεται από καρκίνο του πνεύμονα. Ωστόσο, υπάρχει μόνο μία μελέτη που εξέτασε τη σχέση μεταξύ γενετικών παραλλαγών εις τον τόπο ευαισθησίας στον καρκίνο του πνεύμονα 15q25.1 (rs8034191 και rs1051730) και ο κίνδυνος μιας άλλης κάπνισμα σχετίζεται με τον καρκίνο, εκτός από τον καρκίνο του πνεύμονα (καρκίνος του παγκρέατος) και βρέθηκε καμία σημαντική ένωση [14]. Ως εκ τούτου, δεν είναι σαφές κατά πόσον ή όχι ο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου περιορίζεται στο επιδεκτικότητα του πνεύμονα ή του καρκίνου του επιρροές που σχετίζονται με την καρκινογόνο ένωση έκθεση σε κάπνισμα τσιγάρων.

rs3841324 CHRNA5, μια ένθεση 22 bp (INS) /διαγραφής (del) στη θέση -71 ανοδικά της θέσης έναρξης της μεταγραφής, έχει αποδειχθεί ότι έχουν τη μεγαλύτερη συσχέτιση με τα επίπεδα CHRNA5 mRNA σε πνευμονικό ιστό [15], και αντιπροσωπεύει περίπου το 42% της μεταβολής έκφραση CHRNA5 mRNA [15 ]. Ωστόσο, σε σύγκριση με τις rs3841324 CHRNA5 ins /ins και ins /DEL γονότυπων, το del /del γονότυπο εμφάνιση επίπεδο ασυνεπής μεταγραφή σε διαφορετικούς πληθυσμούς. Στην ευρωπαϊκή καταγωγή, το del /del γονότυπο έχει μια 2,9-πλάσια αύξηση στα επίπεδα CHRNA5 mRNA [15] και μειώνει σημαντικά τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε γυναίκες Καυκάσιος ποτέ καπνιστές [6], ενώ στην Κινέζων Χαν ο del /del γονότυπος συσχετίζεται με υπολειτουργία του υποκινητή και μειωμένη μεταγραφή [16]. Από την άλλη πλευρά, μόνο ο CHRNA5 rs3841324 SNP έχει ερευνηθεί σε σχέση με την πιθανή σχέση με την ευαισθησία του καρκίνου του πνεύμονα. Ως εκ τούτου, υπάρχει επείγουσα ανάγκη να ερευνηθεί κατά πόσον ή όχι rs3841324 CHRNA5 εμπλέκεται στην ευαισθησία σε καρκίνους του καπνίσματος που σχετίζονται εκτός από καρκίνο του πνεύμονα.

προηγούμενο μεγάλη επιδημιολογική μελέτη μας έδειξε ότι το κάπνισμα είναι ένας σημαντικός παράγοντας κινδύνου για NPC [4], το οποίο είναι σύμφωνο με προηγούμενα ευρήματα [17], [18]. Έτσι, για να καθοριστεί εάν ή όχι γενετικές παραλλαγές στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου εμπλέκονται στην καρκινογένεση του τσιγάρου καπνίσματος με τη μεσολάβηση κίνδυνο καρκίνου εκτός από τον καρκίνο του πνεύμονα, αξιολογήσαμε τη συσχέτιση μεταξύ του rs3841324 CHRNA5 πολυμορφισμό και NPC κινδύνου γενικά και σε υποομάδες των θεμάτων στρωματοποιημένη ανά ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και την παθολογία, και να διερευνηθεί η κοινή δράση μεταξύ rs3841324 CHRNA5 και έκθεσης στον καπνό τσιγάρου στο NPC κινδύνου με 400 ασθενείς που διαγνώστηκαν πρόσφατα με NPC και 491 χωρίς καρκίνο υγιείς μάρτυρες. Οι εργασίες αυτές μπορούν να διευκολύνουν την κατανόηση των καρκινογόνων μηχανισμούς με τους οποίους γενετικές παραλλαγές σε αυτές τις περιοχές επηρεάζουν τους καρκίνους του καπνίσματος που σχετίζονται τσιγάρων και την αιτιολογία της NPC, και να βελτιώσει τις προσπάθειες πρόληψης.

Υλικά και Μέθοδοι

Θέματα μελέτη

Τετρακόσια νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς, είχαν λάβει προηγουμένως θεραπεία με ιστοπαθολογικά επιβεβαιωμένη NPC χωρίς την ηλικία, το φύλο και το στάδιο του καρκίνου ή ιστολογία περιορισμούς, και 491 του καρκίνου χωρίς υγιείς μάρτυρες οι οποίοι χωρίς ιστορικό καρκίνου, δεν λάμβαναν θεραπείας για τις ασθένειες, και ήταν συχνότητας ταιριάζουν με τις υποθέσεις σε σχέση με την ηλικία (± 5 έτη), το φύλο, την εθνικότητα, και το κάπνισμα (ποτέ ή ποτέ) είχαν προσληφθεί από Zhongnan Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου Wuhan και Beijing Chaoyang Νοσοκομείο μεταξύ Ιανουάριο 2006 και τον Δεκέμβριο του 2012. έγκριση του Ανθρώπου συμμετέχοντα ελήφθη από τις επιτροπές δεοντολογίας των Zhongnan Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου Wuhan και Beijng Chaoyang Νοσοκομείο Capital Ιατρικό Πανεπιστήμιο. Για να αποφευχθεί η σύγχυση οφείλεται σε εθνικά χαρακτηριστικά, συμπεριλάβαμε μόνο Κινέζων Χαν τόσο στην περίπτωση και των ομάδων ελέγχου. Όλοι οι συμμετέχοντες υπέγραψαν γραπτή συγκατάθεση, συμπλήρωσαν ένα ερωτηματολόγιο σχετικά με τις δημογραφικές και τις σχετικές πληροφορίες παράγοντα κινδύνου, και δώρισε 3 ml αίματος για CHRNA5 του γονότυπου.

CHRNA5

Γονοτυπικές

Εμείς εξάγεται γενωμικού DNA από ένα κύτταρο λευκοκυττάρων σφαιρίδιο, το οποίο ελήφθη από το φλεγμονώδη πλακούντα με φυγοκέντρηση 1 ml πλήρους αίματος, χρησιμοποιώντας το QIAGEN DNA Blood Mini Kit (QIAGEN, Inc., Valencia, CA, USA) σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης χρησιμοποιήθηκε Μετά την ενίσχυση χρησιμοποιώντας έναν αλύσου πολυμεράσης φθορισμού αντίδραση (PCR). Ο φθορισμός αλληλουχίες εκκινητή για PCR είχαν ως εξής: 5′-AGCAGACAGGGTTGGACCAGAG-3 ‘(προς τα εμπρός)? και 5’-CGTGAGACAAAACGAGGGCAGAC-3 ‘(αντίστροφο). Η PCR ενίσχυση πραγματοποιήθηκε σε έναν τελικό όγκο 20 μι ο οποίος περιέχει 10 ng του DNA, 1 μΜ από κάθε εκκινητή, 0.3 mM τριφωσφορικών δεοξυνουκλεοτιδίων (dATP, dCTP, dGTP και dTTP? Καθένα στα 0.3 mM), 3.0 mM MgCl

2, ρυθμιστικό 1χ HotStarTaq, και 1 μονάδα πολυμεράσης HotStarTaq (Qiagen, Inc.). Η αντίδραση άρχισε στους 95 ° C για 2 λεπτά, ακολουθούμενη από 11 κύκλους ενίσχυσης (94 ° C για 20 δευτερόλεπτα, 65 ° C για 40 sec, και 72 ° C για 90 sec), 24 κύκλους ενίσχυσης (94 ° C για 20 δευτερόλεπτα, 59 ° C για 30 δευτερόλεπτα, και 72 ° C για 90 sec), επέκταση στους 68 ° C για 60 λεπτά, και στους 4 ° C μέχρι να χρησιμοποιηθεί. Το 15-μί προϊόντος PCR προστέθηκε σε 5 U ενζύμου SAP και 2 U εξονουκλεάσης στους 37 ° C για 60 λεπτά, στη συνέχεια 75 ° C για 15 λεπτά. Το προϊόν επέκτασης 0,5-μί και το προϊόν 0,5-μι φθορισμού PCR προστέθηκαν σε 0,5-μί Lizl 20 SIZE STANDARD και 8.50.5-μι Hi-Di, επωάστηκαν στους 95 ° C για 5 λεπτά, στη συνέχεια σαρώθηκαν χρησιμοποιώντας ένα αναλυτή αλληλουχίας ABI3730XL. Δεδομένα από την συσκευή προσδιορισμού αλληλουχίας ABI3730XL αναλύθηκε χρησιμοποιώντας ένα GeneMapper 4.1 (Applied Biosystems Co., Ltd., USA). Το αναμενόμενο μέγεθος του προϊόντος PCR ήταν 267 ζεύγη βάσεων (bp) για το αλληλόμορφο ins rs3841324 και 245 bp για τη del αλληλόμορφο

Στατιστική Ανάλυση

Το λογισμικό συστήματος Στατιστικής Ανάλυσης (έκδοση 9.1?. SAS Institute, Cary, NC, USA) χρησιμοποιήθηκε για όλες τις στατιστικές αναλύσεις. Ποτέ καπνιστές ήταν άτομα που είχαν καπνίσει & gt? 100 τσιγάρα στη ζωή τους, και οι υπόλοιποι καπνιστές είχαν χαρακτηριστεί ως μη καπνιστές. Ever-πότες ήταν άτομα που έπιναν αλκοολούχα ποτά τουλάχιστον μία φορά την εβδομάδα για & gt? 1 έτους και τα υπόλοιπα πότες είχαν χαρακτηριστεί ως ποτέ πότες. NPC είχε χαρακτηριστεί από τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας (ΠΟΥ) το 1991 σε δύο κατηγορίες με βάση την ιστολογικός τύπος, ως εξής: τύπου Ι, κερατινίωση πλακώδες καρκίνωμα? και τύπου II, καρκίνωμα μη κερατινοποιημένο [19]. Οι διαφορές στις κατανομές των επιλέξτε δημογραφικές μεταβλητές, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και

CHRNA5

rs3841324 αλληλόμορφο και οι συχνότητες γονοτύπου μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα χ

2 τεστ. Οι μέσες τιμές της ηλικίας συγκρίθηκαν για τις περιπτώσεις και τους ελέγχους με τη χρήση ενός μαθητή

t-test

. Υπολογίσαμε τη συσχέτιση μεταξύ

CHRNA5

γονότυπους και τον κίνδυνο των NPC υπολογίζοντας τις αναλογίες πιθανοτήτων (OR) και 95% διαστήματα εμπιστοσύνης (ΠΙ) από αναλύσεις μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική λογιστική παλινδρόμηση. Εμείς στρωματοποιημένη περαιτέρω τα δεδομένα γονότυπο από υποομάδες της ηλικίας, του φύλου, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και την παθολογία του NPC. Για την ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης, η

CHRNA5

γονότυπο ελέγχθηκε με κυρίαρχο μοντέλο. Έχουμε δημιουργήσει μια εικονική μεταβλητή να αντιπροσωπεύει CHRNA5 κωδικοποίησης άγριου τύπου ως 0, ετερόζυγο και σπάνια αλληλόμορφο ομόζυγο ως 1. Στο πολυπαραγοντικό μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης, η OR και 95% CI προσαρμόστηκαν ανάλογα με την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ. Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με softwareand Σύστημα Στατιστικής Ανάλυσης

P

τιμές & lt?. 0.05 θεωρήθηκαν σημαντικές

Αποτελέσματα

Για τη μελέτη αυτή, η πλήρης

CHRNA5

γονότυπο δεδομένων , κατάσταση δημογραφικά χαρακτηριστικά, και το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ ήταν διαθέσιμα για 400 περιπτώσεις με NPC και 491 υγιείς ελέγχους (Πίνακας 1). Δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές διαφορές στην ηλικία, το φύλο ή την κατάσταση κατανάλωσης αλκοόλ υπήρχε μεταξύ των ασθενών NPC και υγιείς μάρτυρες (P = 0,061 για την ηλικία, 0.321 για το φύλο, και 0.186 για την κατανάλωση αλκοόλ). Ωστόσο, η μέση ηλικία των ασθενών με NPC (49,7 ± 11,1) ήταν σημαντικά μεγαλύτερη από την ομάδα ελέγχου (47,1 ± 9,65? Ρ = 0.0001). Επιπλέον, η κατανομή του καπνίσματος ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων (Ρ & lt? 0,0001), με τους καπνιστές να υπεραντιπροσωπεύονται μεταξύ της ομάδας υπόθεση. Συνεπώς, όλες αυτές οι μεταβλητές, προσαρμοσμένη για ανάλυση πολυμεταβλητή παλινδρόμηση. Βρήκαμε επίσης σημαντικές διαφορές στην rs3841324 μεταξύ των περιπτώσεων NPC και υγιείς μάρτυρες (P = 0,021).

Η

Επίσης, ελέγξτε τις κατανομές γονότυπου και τις συχνότητες αλληλόμορφο

CHRNA5

rs3841324 στο NPC περιπτώσεις και χωρίς καρκίνο ελέγχους. Τα μέσα και οι del συχνότητες αλληλόμορφο ήταν σε ισορροπία Hardy-Weinberg ισορροπία και για τις δύο περιπτώσεις και τους ελέγχους (χ

2 = 0,227, P = 0,634 και χ

2 = 3.619, P = 0,057, αντίστοιχα). Η del αλληλόμορφο ήταν πιο συχνή μεταξύ των περιπτώσεων (30%) από τους ελέγχους (25,3%), και η διαφορά αυτή ήταν στατιστικά σημαντική (χ

2 = 5.216, P = 0.022), γεγονός που υποδηλώνει ότι η ντελ αλληλόμορφο αντιπροσώπευε έναν παράγοντα κινδύνου για την NPC. Ομοίως, η διαφορά μεταξύ των

CHRNA5

ins /ins, ins /del, και DEL /DEL κατανομές γονότυπου μεταξύ των περιπτώσεων NPC και οι έλεγχοι ήταν στατιστικά σημαντικές (χ

2 = 7.762, P = 0,021) και οι ins /del ετεροζυγώτες ήταν συχνότερη μεταξύ των περιπτώσεων NPC ό, τι μεταξύ των ελέγχων, η διαφορά ήταν στατιστικά σημαντική (χ

2 = 7,676, P = 0,006). Αντίθετα, αν το del /del ομοζυγώτες ήταν πιο συχνή μεταξύ των περιπτώσεων (8,5%) από τους ελέγχους (8,2%), η διαφορά αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική (χ

2 = 0,909, P = 0,340). Σε σύγκριση με τους ομοζυγώτες ins /ins, τα ins /del ετεροζυγώτες συσχετίστηκαν με αυξημένο κίνδυνο κατά 55% (προσαρμογή OR = 1,55? 95% CI, 01.17 – 02.07) για NPC, και το del /del ομοζυγώτες είχαν επίσης αυξημένο κίνδυνο για NPC, αν και δεν είναι στατιστικά σημαντική (προσαρμογή OR = 1,34? 95% CI, 0,81 έως 2,23). Επιπλέον, βρήκαμε μια σημαντική σχέση δόσης-απόκρισης μεταξύ του αριθμού των del αλληλόμορφα και τον κίνδυνο της NPC (P = 0,011).

Για να αξιολογήσει περαιτέρω τον κίνδυνο NPC που σχετίζονται με το

CHRNA5

πολυμορφισμό , πραγματοποιήσαμε ανάλυση διαστρωμάτωση με βάση την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και παθολογία. Επειδή οι del /del παραλλαγή ομοζυγώτες ήταν σχετικά σπάνια, συνδυάσαμε τις del /της ντε παραλλαγή ομοζυγώτες με το INS /del παραλλαγή ετεροζυγώτες για την ανάλυση αυτή διαστρωμάτωση (Πίνακας 2). Σε σύγκριση με το INS /ins γονότυπους, τα συνδυασμένα παραλλαγή γονότυπους (ins /del + del /del) παρουσίασαν ένα & gt? 1,5 φορές αυξημένο κίνδυνο για NPC (προσαρμογή OR = 1,52? 95% CI, 1,16 έως 2,00). Επιπλέον, ο αυξημένος κίνδυνος NPC που σχετίζονται με τις συνδυασμένες παραλλαγή γονότυπους (ins /del + del /del) ήταν εμφανής για πάντα-καπνιστές (προσαρμογή OR = 2,07? 95% CI, 1,23 – 3,48), μέσης ηλικίας άτομα (40- 60 ετών? προσαρμογή OR = 1,60? 95% CI, 01.14 – 02.25), ποτέ δεν πότες (προσαρμογή OR = 1,53? 95% CI, 01.11 – 02.09), τα αρσενικά (προσαρμογή OR = 1,66? 95% CI, 1.19- 2.32), ή για το καρκίνωμα μη κερατινοποιημένων (προσαρμογή OR = 1,52? 95% CI, 1.15-2.00). Βρήκαμε επίσης μια οριακά σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ

CHRNA5

rs3841324 γονότυπους και το κάπνισμα (P = 0.080), και μια σημαντική αλληλεπίδραση μεταξύ

CHRNA5

rs3841324 γονότυπους και την ηλικία (P = 0,002)? Ωστόσο, δεν υπήρχε απόδειξη για μια αλληλεπίδραση μεταξύ του

CHRNA5

παραλλαγή γονότυπους και το φύλο (P = 0,373) ή την κατάσταση του πόσιμου (P = 0.510), σχετικά με τον κίνδυνο της NPC. Επιπλέον, εξετάσαμε την κοινή δράση του

CHRNA5

rs3841324 γονότυπο και το κάπνισμα κατάσταση σχετικά με τον κίνδυνο της NPC και διαπίστωσε ότι ποτέ καπνιστές με το

CHRNA5

rs3841324 ins /ντελ ή del /del αλληλόμορφο είχε μια & gt? 4 φορές αυξημένο κίνδυνο για NPC (προσαρμογή OR = 4,35? 95% CI, 2,57 έως 7,38). σε σύγκριση με τους μη καπνιστές ομόζυγο για το αλληλόμορφο ins (Πίνακας 3)

η

Συζήτηση

CHRNA5, που βρίσκεται στη θέση ευαισθησίας του καρκίνου του πνεύμονα 15q25.1 [5], είναι ένα ελκυστικό υποψήφιο γονίδιο για την καπνιστική συμπεριφορά, εξάρτηση από τη νικοτίνη, και η νόσος σχετίζονται με το κάπνισμα, όπως αυτά έχουν εύλογα συνδέονται με καρκινογένεση [20], [21]. Σε αυτή τη μελέτη σύγκρισης ασθενών-μαρτύρων, βρήκαμε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ γονότυπων CHRNA5 rs3841324 παραλλαγή και τον κίνδυνο NPC, και τα άτομα με rs3841324 CHRNA5 συνδυασμό γονοτύπων παραλλαγή (ins /del + del /del) είχαν αυξημένο κίνδυνο σε σχέση με τα ins CHRNA5 /ins γονότυπο, ιδίως μεταξύ ποτέ καπνιστές. Επιπλέον, οι συνδυασμένες γονότυπους παραλλαγή (ins /del + del /del), σε συνδυασμό με το κάπνισμα τσιγάρων, αυξημένο NPC κινδύνου, υποδεικνύοντας έτσι ότι οι rs3841324 CHRNA5 παραλλαγή όχι μόνο θα μπορούσε να είναι ένας παράγοντας κινδύνου και ένα νέο βιοδείκτη για την πρόβλεψη του καπνίσματος σχετικών NPC κινδύνου, αλλά επίσης μπορεί να εμπλέκεται στην αιτιολογία του καρκίνου του καπνίσματος μεσολάβηση τσιγάρο. Μια πιθανή εξήγηση για αυτό το εύρημα είναι ότι η ένθεση 22 bp στη θέση -71 διαγραφή ανάντη των αποτελεσμάτων αλλαγή θέσης έναρξης της μεταγραφής σε μία μεταβολή του παράγοντα μεταγραφής τοποθεσίες [22] και DNA- αλληλεπιδράσεις πρωτεϊνών [16] δέσμευσης, και ως εκ τούτου επηρεάζει την CHRNA5 mRNA επίπεδο και μεταγραφή [15].

είναι βιολογικά εύλογο ότι οι γενετικές παραλλαγές στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου επηρεάζει όχι μόνο τον κίνδυνο καρκίνου του καπνίσματος που σχετίζονται άμεσα, αλλά και ενεργεί από κοινού με τις συνήθειες καπνίσματος για η αιτιολογία της NPC. Πρώτον, η θέση 15q25.1 έχει επαληθευθεί ότι σχετίζεται με την συμπεριφορά του καπνίσματος, την εμμονή, και την εξάρτηση από τη νικοτίνη [23], επηρεάζοντας έτσι την ένταση, η διάρκεια, και η αθροιστική κατανάλωση της έκθεσης του τσιγάρου, και κατά συνέπεια αυξάνει τη συχνότητα εμφάνισης ασθενειών που σχετίζονται με το κάπνισμα , συμπεριλαμβανομένων των καρκίνων που σχετίζονται με το κάπνισμα. Επιπλέον, είναι μέσω της οδού του υποδοχέα ακετυλοχολίνης, το οποίο αποτελούνταν από CHRNA5 και CHRNA3 στον τόπο 15q25.1, ότι η νικοτίνη προάγουν τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων, την επιβίωση, τη μετανάστευση, εισβολή και αιτιολογία και την ανάπτυξη του όγκου [3]. Ως εκ τούτου, οι παραλλαγές τους τόπο 15q25.1 έχουν εμπλακεί με καρκίνους νικοτίνη μεσολάβηση.

Αυτή είναι η πρώτη μοριακή επιδημιολογική μελέτη για να διερευνήσει τη σχέση μεταξύ rs3841324 CHRNA5, ένα ευαίσθητο παραλλαγή για τον καρκίνο του πνεύμονα, και ευαισθησία στο κάπνισμα -associated καρκίνος εκτός από καρκίνο του πνεύμονα. Τα ευρήματα της παρούσας μελέτης μπορεί να παρέχει νέες πληροφορίες σχετικά με την αιτιολογία των καρκίνων του καπνίσματος μεσολάβηση, επαληθεύει το ρόλο του 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου του κινδύνου καρκίνων κάπνισμα συνδέεται, και τη διαλεύκανση των καρκινογόνων μηχανισμοί με τους οποίους γενετικές παραλλαγές σε οι περιοχές αυτές να επηρεάσουν τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου. Ως ογκογόνο παράγοντα, το κάπνισμα εκτιμάται ότι προκαλεί περίπου 31% και 6% όλων των θανάτων από καρκίνο στους άνδρες και τις γυναίκες σε όλο τον κόσμο για τους ανθρώπους μεταξύ 30 και 69 έτη αντίστοιχα. [2] Αυτοί οι τύποι καρκίνων περιλαμβάνουν τον καρκίνο του πνεύμονα [24], NPC [4], τον καρκίνο του στόματος κοιλότητα [25], καρκίνο του οισοφάγου [26], ορθοκολικό καρκίνο [27], εισβολής καρκίνο του τραχήλου [28], ο καρκίνος του δέρματος [29], του καρκίνου του προστάτη [30], του καρκίνου του νεφρού [31], του καρκίνου του μαστού [32], καρκίνος της ουροδόχου κύστης [33], και τον καρκίνο του παγκρέατος [34]. Αξιολόγηση των επιπτώσεων των γενετικών παραλλαγών για τη νόσο σχετίζονται με το κάπνισμα, ειδικά σε καρκίνους του καπνίσματος μεσολάβηση, έχει αξία για τη δημόσια υγεία [20], [35].

Πολλά GWAS έχουν δείξει ότι οι γενετικές παραλλαγές στην CHRNA5 και CHRNA3, που βρίσκεται στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου [20], [21], να επηρεάσουν τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του πνεύμονα σε ευρωπαϊκές και αμερικανικές πληθυσμού [5], [21]. Από τότε, τρεις μελέτες έχουν εξετάσει τις ενώσεις μεταξύ της παραλλαγής rs3841324 CHRNA5 και τον κίνδυνο καρκίνου των πνευμόνων, με αντιφατικά αποτελέσματα [6], [16], [36]. Για παράδειγμα, Amos

et al.

(6) διαπίστωσε ότι ποτέ καπνιστές, ομόζυγο φορείς del παραλλαγές του rs3841324 παρουσίασαν μειωμένο κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα στις γυναίκες, αλλά είχε μικρή επίδραση στους άνδρες σε 624 ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα και 766 υγιείς μάρτυρες από έναν Καυκάσιο πληθυσμό. Μια μελέτη διερεύνησε τη σχέση μεταξύ του rs3841324 CHRNA5 πολυμορφισμό και τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα σε πληθυσμό Κινέζων Χαν και δεν διαπίστωσαν σημαντική συσχέτιση, αλλά αποκάλυψε ότι 2 τουλάχιστον συχνές απλοτύπων, rs3841324 ins /rs3829787 Τ και rs3841324 del /rs3829787 C ήταν στατιστικά μειώσει τον κίνδυνο καρκίνου του πνεύμονα [16]. Πρόσφατα, μια άλλη μελέτη με Καυκάσιο πληθυσμό της νορβηγικής προέλευσης έδειξε επίσης ότι rs3841324 στατιστικά επηρέασε τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του πνεύμονα και σημαντικά μειωμένο κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του πνεύμονα μη-μικρού κυττάρου υπάρχει για Del ομοζυγώτες αλληλόμορφο, ιδιαίτερα όγκων του πνεύμονα υπόθαλψη ένα μεταλλαγμένο TP53 [36].

είναι ενδιαφέρον ότι, στις μελέτες μας, rs3841324 CHRNA5 συνδυασμό γονοτύπων παραλλαγή (ins /del + del /del) είχαν αυξημένο κίνδυνο NPC σε σύγκριση με ins αλληλόμορφο ομοζυγώτες, η οποία έρχεται σε αντίθεση με τα αποτελέσματα για τον καρκίνο του πνεύμονα στην οποία η del αλληλόμορφο ήταν ένας προστατευτικός παράγοντας για ένα Καυκάσιο πληθυσμό [6], [36]. Η διαφορά μπορεί να προκύψει από διαφορετικές περιοχές του όγκου και εθνοτήτων που μελετήθηκαν. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι del αλληλόμορφο ομοζυγώτες στο rs3841324 έχουν μια 2,9-πλάσια αύξηση στα επίπεδα mRNA CHRNA5 στο μετωπιαίο φλοιό και ότι τα χαμηλά επίπεδα του mRNA CHRNA5 συνδέονται με χαμηλότερο κίνδυνο για εξάρτηση από τη νικοτίνη και τον καρκίνο του πνεύμονα [15]. Ως εκ τούτου, η ντελ ομοζυγώτες αλληλόμορφο στο rs3841324 είναι πιο πιθανό να είναι σε αυξημένο κίνδυνο για την εξάρτηση από τη νικοτίνη και την επιμονή του καπνίσματος με αυξημένα επίπεδα CHRNA5 mRNA στο μετωπιαίο φλοιό, και είναι, κατά συνέπεια, πιο πιθανό να σχετίζεται με υψηλότερη συχνότητα εμφάνισης καρκίνου του καπνίσματος με τη μεσολάβηση. Επιπλέον, μια μελέτη [16] διεξάγεται σε ένα πληθυσμό Κινέζων Χαν δεν έδειξε σημαντική συσχέτιση μεταξύ παραλλαγών CHRNA5 rs3841324 και του κινδύνου καρκίνου του πνεύμονα, σε αντίθεση με τις εκθέσεις που διεξάγεται σε ένα Καυκάσιος πληθυσμός [6], [36], η οποία πρότεινε την επίδραση διαφόρων εθνοτήτων που μελετήθηκαν. Άλλες μελέτες έχουν δείξει ότι οι παραλλαγές στον τόπο 15q25.1, συμπεριλαμβανομένων rs3841324, μπορούν να συμβάλλουν με διαφορετικό τρόπο σε εξάρτηση από τη νικοτίνη [37] και τη χρήση των τσιγάρων [38] στην ευρωπαϊκή-Αμερικανούς και Αφρο-Αμερικανοί, το οποίο επαληθεύει επίσης την επίδραση των διαφορετικών εθνοτήτων. Τέλος, ο ρόλος του rs3841324 στην αιτιολογία των καρκίνων που σχετίζονται με το κάπνισμα δεν έχει επιβεβαιωθεί στη βασική έρευνα βιολογικών και rs3841324 θα μπορούσε απλώς να είναι ένας δείκτης σε ανισορροπία σύνδεσης με διάφορες παραλλαγές αιτιώδη σε διάφορες μορφές καρκίνου που σχετίζονται με το κάπνισμα, το οποίο επίσης θα μπορούσαν να συμβάλουν στη διαφορά στην η κατεύθυνση της σύνδεσης. Οι υποθέσεις αυτές, ωστόσο, πρέπει να επιβεβαιωθεί σε μελλοντικές μελέτες.

Η παρούσα μελέτη είναι η πρώτη που αναφέρει το συνδυασμένο αποτέλεσμα της έκθεσης στον καπνό του τσιγάρου και γενετικές παραλλαγές στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου του σχετικά με τον κίνδυνο του καρκίνου του καπνίσματος μεσολάβηση. Οι καπνιστές που είχαν ins /del ή del /del γονότυπων ήταν & gt? 4 φορές περισσότερες πιθανότητες να αναπτύξουν NPC από τους μη καπνιστές ομόζυγο για το αλληλόμορφο εισαγωγή, η οποία ήταν πολύ υψηλότερη από ό, τι τα αποτελέσματα της έκθεσης του καπνίσματος ή γενετικές παραλλαγές στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου και μόνο. Αυτό ευρήματα υποδεικνύουν ότι γενετικές παραλλαγές στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου είναι ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου που επηρεάζει την ευαισθησία κληρονομιάς και είναι επίσης εύλογο να είναι ένας συμπαράγοντας των τσιγάρων. Γενετική προδιάθεση και την περιβαλλοντική έκθεση για NPC κινδύνου έχει ευρέως επαληθεύονται σε διάφορους πληθυσμούς [39]. Ωστόσο, μελέτες σύγκρισης λίγα περίπτωση ελέγχου έχουν διερευνήσει την αλληλεπίδραση κληρονομικών προδιαθέσεων και την έκθεση κάπνισμα στην αιτιολογία του NPC. Παρ ‘όλα αυτά, υπάρχουν τρία στοιχεία που υποστηρίζουν τα ευρήματά μας. Πρώτον, η βιολογική μηχανισμός υποκείμενες πως τα τσιγάρα και τα γονίδια αλληλεπιδρούν στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου είναι κάπως σαφής. Το γεγονός ότι αλκαλοειδές του καπνού και η νικοτίνη μπορεί να δεσμεύσει και να ενεργοποιήσει τους υποδοχείς νικοτινικής ακετυλοχολίνης και έτσι διεγείρουν κυτταρικό πολλαπλασιασμό και προσβολή όγκου, και αναστέλλουν την απόπτωση [9] – [11], μπορεί να εξηγήσει εν μέρει τη συνέργεια μεταξύ της έκθεσης στο κάπνισμα τσιγάρων και τη 15q25. 1 locus για την αιτιολογία της NPC. Δεύτερον, οι παραλλαγές στο 15q25.1 καρκίνο του πνεύμονα θέση ευαισθησίας θα μπορούσε να έχει συνέπειες για την επιμονή του καπνίσματος [12], την καπνιστική συμπεριφορά, και την εξάρτηση από τη νικοτίνη [13]. Τέλος, μελέτες σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης [40], ο καρκίνος του πνεύμονα [41], και NPC [4] έχουν καταδείξει το συνδυασμένο αποτέλεσμα της έκθεσης στο κάπνισμα τσιγάρων και κληρονομικότητα επίσης να υποστηρίξει εν μέρει τα ευρήματα μας.

Ένα άλλο σημαντικό εύρημα σε μας της μελέτης ήταν ότι ο κίνδυνος NPC που σχετίζονται με rs3841324 γονότυπους υπόθαλψη της ντε αλληλόμορφα ήταν σημαντικά υψηλότερο για τους άνδρες. Η πιθανή εξήγηση για την παρατήρηση αυτή θα μπορούσε να αποδοθεί σε αρσενικά που συνδέονται περισσότερο ισχυρά με το κάπνισμα τσιγάρων. Ένα πολύ μεγαλύτερο ποσοστό των ανδρών καπνίζουν τσιγάρα και να έχουν το κάπνισμα σχετίζεται θανάτους από καρκίνο από τις γυναίκες σε όλο τον κόσμο [2]. Στην παρούσα μελέτη, η αύξηση του NPC κίνδυνος που σχετίζεται με τη γενετική παραλλαγή στο γενετικό τόπο 15q25.1 σε όλο πότες ήταν σχεδόν ίση με ποτέ-πότες. Είμαστε εικάζουν ότι η απόκλιση οφείλεται εν μέρει στα μεγέθη των δειγμάτων στο διαρκώς και ποτέ πότες, επειδή NPC κίνδυνος δεν σχετίζονται με την κατανάλωση αλκοόλ [4].

Παρά το γεγονός ότι διεξάγεται σε ένα μεγάλο, καλά χαρακτηρίζεται νομολογία σύγκριση του ελέγχου, η μελέτη μας είχε αρκετούς περιορισμούς. Κατ ‘αρχάς, είναι δυνατόν οι περιορισμοί στο νοσοκομείο με βάση το σχεδιασμό της μελέτης ασθενών-μαρτύρων μας, θα μπορούσε να εισαχθεί κάποια μεροληψία επιλογής, διότι τα θέματα δεν ήταν από τον ίδιο πληθυσμό. Ωστόσο, όλα τα άτομα ήταν Κινέζων Χαν και τους δύο τομείς στους οποίους τα νοσοκομεία που βρίσκονται είναι χαμηλές περιοχές κινδύνου NPC στην Κίνα. Επιπλέον, έχουμε βρει ότι η συχνότητα των

CHRNA5

γονότυπους στις περιπτώσεις και ελέγχων μεταξύ των δύο νοσοκομείων δεν ήταν στατιστικά διαφορετική, και η συχνότητα του

CHRNA5

γονότυπους στην ομάδα υγιών μαρτύρων στην παρούσα μελέτη ήταν παρόμοια με εκείνα στις προηγούμενες εκθέσεις με Κινέζων Χαν θέματα [16]. Δεύτερον, ο αριθμός των παρατηρήσεων σε ορισμένα στρώματα της ανάλυσης στρωματοποίησης ήταν σχετικά μικρό? Ωστόσο, μετά την προσαρμογή για την ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ μπορεί να ελαχιστοποιηθεί ο πιθανός αντίκτυπος από συγχυτικούς παράγοντες για την ΕΑΠ. Μια άλλη πιθανή πηγή μεροληψίας στη μελέτη μας, θα μπορούσε να προκύψει από την προκατάληψη της αυτο-αναφερόμενη ιστορίες της έκθεσης, συμπεριλαμβανομένων των ιστοριών του καπνίσματος και της κατανάλωσης αλκοόλ. Για να επιβεβαιωθεί ο ρόλος των γενετικών παραλλαγών στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου σε καρκίνους κάπνισμα συνδέεται και κατά πόσον θα μπορούσε να είναι ένας βιολογικός δείκτης για την ταυτοποίηση των καρκίνων του καπνίσματος που σχετίζονται ή όχι, περαιτέρω μελέτες θα πρέπει να διερευνηθεί με μεγαλύτερα μεγέθη δειγμάτων σε διαφορετικούς πληθυσμούς που αφορούν άλλες ανατομικές περιοχές των καρκίνων.

Εν κατακλείδι, η μελέτη μας έδειξε ότι γενετικές παραλλαγές του τόπου ευαισθησίας 15q25.1 καρκίνο του πνεύμονα, rs3841324, συνδέονται σημαντικά με NPC, καρκίνο κάπνισμα σχετίζεται εκτός από τον καρκίνο του πνεύμονα. Αυτή η παρατήρηση ήταν ιδιαίτερα χρήσιμη για τους καπνιστές, και θα μπορούσε να δράσει από κοινού με το κάπνισμα τσιγάρων για την αύξηση της NPC κίνδυνο, υποδεικνύοντας ότι αυτή η γενετική παραλλαγή μπορεί να χρησιμεύσει ως βιοδείκτη για τον έγκαιρο εντοπισμό των πληθυσμών που βρίσκονται σε κίνδυνο για καρκίνο του καπνίσματος που σχετίζονται. Μπορούμε επίσης να σημειωθεί ότι η συσχέτιση ήταν πιο εμφανής στους άνδρες. Αυτή είναι η πρώτη φορά που το ρόλο των γενετικών παραλλαγών στο 15q25.1 πνεύμονα θέση ευαισθησίας του καρκίνου και τον κίνδυνο NPC έχει εξεταστεί, η οποία έχει αξία. Περαιτέρω επικύρωση των ευρημάτων μας από μεγαλύτερες μελέτες και διερεύνηση των υποκείμενων μοριακών μηχανισμών είναι δικαιολογημένη

Ευχαριστίες

Το ερευνητικό έργο χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (81101561).? ένα UICC American Cancer Society Αρχίζοντας ανακριτές υποτροφία χρηματοδοτείται από την Αμερικανική Αντικαρκινική Εταιρεία για την Xuemei Ji? Πεκίνο Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών στο Xuemei Τζι (7.132.085). URL του Εθνικού Ιδρύματος Φυσικών Επιστημών της Κίνας: https://www.nsfc.gov.cn/Portal0/default152.htm, URL της American Cancer Society: https://www.cancer.org/, και το URL του Πεκίνου Φυσικής Ίδρυμα Επιστημών: https://www.bjnsf.org/#. Δεν υπάρχουν αριθμοί επιχορήγηση για ένα UICC American Cancer Society Αρχίζοντας ανακριτές υποτροφία χρηματοδοτείται από την Αμερικανική Αντικαρκινική Εταιρεία, η πιστοποίηση των οποίων είναι διαθέσιμη σε περίπτωση ανάγκης ή μπορεί να βρεθεί στη διεύθυνση URL: https://www.uicc.org/fellowships/beginning-investigators. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου.