Αφηρημένο

Ιστορικό

επιφάνεια των κυττάρων σιαλικυλίωσης αναδύεται ως ένα σημαντικό χαρακτηριστικό των καρκινικών κυττάρων της μετάστασης. Σιαλυλοτρανσφεράση έκφραση έχει αναφερθεί ότι μεταβάλλεται σε όγκους και μπορεί να ευθύνεται για τον σχηματισμό των αντιγόνων σιαλυλιωμένης όγκου. Έχουμε επικεντρωθεί στην επίδραση της άλφα-2,3-σιαλυλοτρανσφεράση ST3Gal ΙΙΙ βασικά βήματα του παγκρέατος ογκογόνο διαδικασία.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

ST3Gal III υπερεκφράζουν αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος κυτταρικές σειρές Capan- 1 και MDAPanc-28 παρήχθησαν. Έδειξαν μια αύξηση του όγκου αντιγόνο που σχετίζεται με σιαλυλο-Lewis

x. δεσμευτική ικανότητα της Ε-σελεκτίνης μορφομετατροπέων ήταν ανάλογη με κυτταρική επιφάνεια σιαλυλο-Lewis

x επίπεδα. Κυτταρική μετανάστευση συσχετίζεται θετικά με ST3Gal III και σιαλυλο-Lewis

x επίπεδα. Επιπλέον, ενδοσπληνική έγχυση του ST3Gal III επιμολυσμένα κύτταρα σε αθυμικά γυμνά ποντίκια έδειξαν μια μείωση στην επιβίωση και υψηλότερες σχηματισμού μετάστασης σε σύγκριση με τα ψευδο-κύτταρα.

Συμπέρασμα

Συνοπτικά, η υπερέκφραση του ST3Gal III σε αυτές τις αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος κυτταρικές σειρές υπογραμμίζει τον ρόλο αυτού του ενζύμου και των προϊόντων της σε βασικά στάδια της εξέλιξης του όγκου όπως ο σχηματισμός προσκόλληση, η μετανάστευση και η μετάσταση

Παράθεση:. Pérez-Garay Μ, Arteta Β, σελίδες L, de Llorens R, de Βόλος C, Vidal-Vanaclocha F, et al. (2010) α2,3-σιαλυλτρανσφεράσης ST3Gal ΙΙΙ ρυθμίζει καρκίνο του παγκρέατος κυτταρική κινητικότητα και πρόσφυση

In Vitro

και ενισχύει μεταστατικό δυναμικό του

In Vivo

. PLoS ONE 5 (9): e12524. doi: 10.1371 /journal.pone.0012524

Επιμέλεια: Terence Lee, Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ, Χονγκ Κονγκ

Ελήφθη: 7 Μάη 2010? Αποδεκτές: 31 του Ιουλίου, 2010? Δημοσιεύθηκε: 1 του Σεπτέμβρη, 2010

Copyright: © 2010 Pérez-Garay et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από La Marato de TV3 θεμελίωσης (επιχορήγηση 050.932, το οποίο απονέμεται σε RP), Ισπανικά Ministerio Επιστημών e Innovación (χορηγήσουν ΒΙΟ 2007-61323, απονέμεται σε RP), η κυβέρνηση της Καταλονίας (επιχορήγηση 2005SGR00065, απονέμεται σε RL), η Comisión διυπουργική Επιστημών y Tecnología (CICYT) της ισπανικής κυβέρνησης στη Μαδρίτη (αρ. SAF2006-09341, απονέμεται σε FVV) και η Χώρα των Βάσκων κυβέρνηση (αρ. ΙΤ-487-07 απονέμεται σε FVV). M.P.-G. χάρη Fundació La Marató για ένα προ-διδακτορική υποτροφία και το Πανεπιστήμιο της Girona για μια βραχυπρόθεσμη υποτροφία κινητικότητας. Οι χρηματοδότες δεν έχουν κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν ανταγωνιστικά συμφέροντα υπάρχουν

Εισαγωγή

κυτταρικής επιφάνειας σιαλυλίωση αναδύεται ως ένα σημαντικό χαρακτηριστικό του καρκινικού κυττάρου μετάστασης. Τα σιαλικά οξέα και τα παράγωγά τους είναι πανταχού παρόντα σε τερματικές θέσεις του γλυκοσυζευγμάτων. Αυτές οι όξινες σάκχαρα προσδίδουν καθαρό αρνητικό φορτίο και είναι σε θέση να ρυθμίζει μια ευρεία ποικιλία των γεγονότων στην κυττάρου-κυττάρου, κυττάρου-μήτρας και αλληλεπιδράσεις κυττάρου μόριο [1]. Η μεταφορά των σιαλικών οξέων από κυτιδίνη-5-monophospho-Ν-ακετυλονευραμινικό οξύ (CMP-NeuAc) με τις τερματικές θέσεις των ομάδων υδατάνθρακα του γλυκοπρωτεΐνη και γλυκολιπίδια καταλύεται από σιαλυλοτρανσφερασών [2].

Ανθρώπινο σιαλυλοτρανσφερασών είναι μία οικογένεια 20 διαφορετικών ενδοκυτταρικών, Golgi δεσμευμένη σε μεμβράνη γλυκοσυλτρανσφεράσες? ομαδοποιούνται σε τρεις υπο-οικογένειες [3]. Άλφα-2,6-σιαλυλοτρανσφερασών μεσολαβούν την μεταφορά του σιαλικού οξέος με μια άλφα 2,6-δεσμό με τερματικό Gal (ST6Gal Ι-ΙΙ) [4], [5] ή κατάλοιπα ΟαΙΝΑο (ST6Gal NAc I-VI). Άλφα-2,8-σιαλυλοτρανσφερασών μεσολαβούν την μεταφορά του σιαλικού οξέος με μια άλφα 2,8-δεσμού (ST8 Sia I-IV). Άλφα-2,3-σιαλυλοτρανσφερασών μεσολαβούν την μεταφορά του σιαλικού οξέος με μια άλφα 2,3-δεσμού προς τερματικά υπολείμματα Gal. ST3Gal Ι-ΙΙ και IV καταλύουν την μεταφορά στο υπόλειμμα Gal βρίσκεται στο τερματικό δομές Galβ1-3GalNAc? ST3Gal IV και VI μεταφορά σιαλικού οξέος (με άλφα 2,3-δεσμός) στο υπόλειμμα Gal που βρίσκεται στο τερματικό δομές Galβ1-4GlcNAc? ST3Gal V δρα επί του υπολείμματος Gal που βρίσκεται στο τερματικό δομές Galβ1-4Glc-Cer και τέλος, ST3Gal III καταλύει τη μεταφορά σιαλικού οξέος με μια άλφα 2,3-δεσμού προς τερματικά υπολείμματα Gal βρίσκεται είτε Galβ1-3GlcNAc ή δομές Galβ1-4GlcNAc [6].

οι αλλαγές στην ειδική σιαλυλτρανσφεράση έκφραση έχουν αναφερθεί ότι μεταβάλλεται σε διάφορες όγκους και μπορεί να ευθύνεται για τον σχηματισμό των αντιγόνων σιαλυλιωμένη όγκου, όπως σιαλυλ Lewis-x, sialyl- Lewis a, σιαλυλ-T και sialyl- Tn. Στην εξωηπατικών καρκίνωμα του χοληφόρου πόρου επίπεδα ST3Gal III συσχετίζεται με την πρόοδο του όγκου, της διαφοροποίησης και μετάσταση [7]. Στον καρκίνο του μαστού, η πιο εκφρασμένη σιαλυλοτρανσφεράση ST3Gal III η οποία συσχετίζεται θετικά με το μέγεθος του όγκου και τον αριθμό των κόμβων axilary? και επιπλέον υψηλή αναλογία ST3Gal III /ST6Gal Ι συσχετίστηκε με μικρότερη συνολική επιβίωση και την κακή πρόγνωση [8], [9]. Επιπλέον, ST6GalNAc V έχει πρόσφατα αναφερθεί ότι μεσολαβεί στον εγκέφαλο μετάσταση των καρκινικών κυττάρων του μαστού [10]. Στον καρκίνο της ουροδόχου κύστης ST3Gal Ι παίζει τον κύριο ρόλο στη σιαλυλίωση του αντιγόνου Τ και υπερέκφραση του φαίνεται να είναι μέρος της αρχικής ογκογόνο μετασχηματισμό [11]. Σε τραχήλου καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων, τα επίπεδα έκφρασης ST6Gal Ι και ST3Gal III ήταν σημαντικά αυξημένη σε ασθενείς με μετάσταση λεμφαδένα, σε σύγκριση με εκείνους χωρίς μεταστάσεις [12], [13] και ST3Gal III, ST3Gal IV και ST6Gal Ι αυξήθηκαν σε τραχηλική ενδοεπιθηλιακή νεοπλασία . Στην ανθρώπινη νεφρικό καρκίνωμα μια ρύθμιση προς τα κάτω του ST3Gal IV mRNA μπορεί να είναι ένας από τους παράγοντες που συνδέονται με κακοήθη εξέλιξη του [14]. Σε καρκίνο του παχέος εντέρου ST6Gal Ι και III ST3Gal αυξημένη έκφραση τους σε δείγματα καρκίνωμα [15]. ST3Gal III ήταν σε περίοπτη θέση αυξήθηκε σε ιστούς του καρκίνου σε σύγκριση με μη-κακοήθεις παχέος βλεννογόνο [16] και μια αύξηση της δράσης της ST6Gal Ι παρατηρήθηκε σε κακοήθη και μεταβατικές ιστών [17]. Σε γαστρικό καρκίνο, τα υψηλά επίπεδα του ST3Gal III a στον ιστό του όγκου συσχετίζεται με δευτερογενή υποτροπή του όγκου [18].

Αν και άλφα-2,3-σιαλυλτρανσφεράση έκφραση ST3Gal III συσχετίζεται με κακοήθεια όγκων σε διάφορα καρκινώματα μηχανιστική ρόλο της δεν έχει αξιολογηθεί πλήρως. ST3Gal III εμπλέκεται στη βιοσύνθεση των αντιγόνων σιαλυλ-Lewis, τα οποία υπερεκφράζονται σε παγκρεατικό αδενοκαρκίνωμα (PDAC) [19], [20], [21], [22], [23], [24], και συσχετίζονται με του κακή πρόγνωση [25], [26], [27], [28]. Στην παρούσα εργασία, στόχος μας ήταν να διερευνηθεί η ειδική επιρροή του άλφα-2,3-σιαλυλτρανσφεράση ST3Gal III σε ορισμένα από τα βασικά βήματα της εξέλιξης PDAC όπως προσκόλληση, η μετανάστευση και η μετάσταση. Γι ‘αυτό, έχουμε επιλέξει δύο καρκίνου του παγκρέατος αδενοκαρκίνωμα κυτταρικές σειρές Capan-1 και MDAPanc-28, με διαφορετικές ST3Gal III και τα επίπεδα έκφρασης του αντιγόνου σιαλυλ-Lewis, και δημιουργούνται ST3Gal ΙΙΙ υπερεκφράζουν κλώνους. ST3Gal III αυξημένη έκφραση σχετιζόταν με αύξηση σιαλυλο-Lewis

επίπεδο x επιφάνεια και να διοχετεύονται σε μια ενισχυμένη E-σελεκτίνης ικανότητα και τη μετανάστευση των κυττάρων δεσμευτική. Επιπλέον, η ενδοσπληνική ένεση σε αθυμικούς γυμνούς ποντικούς των κυττάρων overepressing ST3Gal III έδειξαν μείωση στα ποντίκια επιβίωση και υψηλότερες σχηματισμού μετάστασης. Εν ολίγοις, η αυξημένη έκφραση του ST3Gal III σε αυτές τις αδενοκαρκίνωμα του παγκρέατος κυτταρικές σειρές τονίζει το ρόλο αυτού του ενζύμου και των προϊόντων της σε βασικά στάδια της εξέλιξης του όγκου, όπως η προσκόλληση, η μετανάστευση και η μετάσταση.

Αποτελέσματα

σταθερό υπερέκφραση του ST3Gal ΙΙΙ στην Capan-1 και MDAPanc-28 κύτταρα

Για να εξερευνήσετε το μηχανιστικό ρόλο της ST3Gal ΙΙΙ του παγκρέατος εξέλιξη αδενοκαρκίνωμα, το γονίδιο ST3Gal III αρουραίου, το οποίο εμφανίζει σχεδόν πανομοιότυπο εξειδίκευση δέκτη και ενζυματική δραστηριότητα του ανθρώπου ST3Gal III γονίδιο [29], χρησιμοποιήθηκε. Έτσι, Capan-1 και MDAPanc-28 κύτταρα επιμολύνθηκαν με το γονίδιο III ST3Gal pcDNA 3.1 φορέα που κωδικοποιεί αρουραίου. Η γονική κύτταρα ταυτόχρονα επιμολύνθηκαν με τον κενό φορέα pcDNA3.1. Αρκετοί σταθεροί κυτταρικοί κλώνοι επιλέχθηκαν με την παρουσία γενετικίνη και mRNA ST3Gal III υπερέκφραση αναλύθηκε με ημι-ποσοτική PCR (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα). mRNA ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνους, C31 και C32 (για το μοντέλο Capan-1) και M33 και M34 (για το μοντέλο MDAPanc-28) επιλέχθηκαν για περαιτέρω μελέτες. Ως μάρτυρες, γονικές κυτταρικές σειρές (Capan-1 και MDAPanc-28) και ψευδο-επιμολυσμένα κλώνους (CP για Capan-1 και ΜΡ για MDA-Panc 28) χρησιμοποιήθηκαν. mRNA έκφραση ST3Gal III ποσοτικοποιήθηκε με ποσοτική PCR (qPCR) (Σχήμα 1). Capan-1 γονικά κύτταρα είχαν 3 φορές υψηλότερες (

P & lt? 0.001

) έκφραση ST3Gal ΙΙΙ από MDAPanc-28 γονικών κυττάρων. Όσον αφορά το μοντέλο Capan-1, η έκφραση mRNA ST3Gal III ήταν 140 φορές υψηλότερη (

P & lt? 0.001

) σε C31 κλώνο και 100 φορές υψηλότερη (P & lt? 0.001) σε C32 κλώνο από ό, τι στην Capan-1 και CP κύτταρα ελέγχου. Για το μοντέλο MDAPanc-28, η έκφραση του mRNA ST3Gal III ήταν 7 φορές υψηλότερη (

P & lt? 0.001

) σε M34 κλώνο και 3,6 φορές υψηλότερη (P & lt? 0.001) σε M33 κλώνο από ό, τι στις δύο κύτταρα ελέγχου, MDAPanc -28 και ΜΡ. Αξιολόγηση των γενικών σιαλυλτρανσφεράσης δραστηριότητα εκτελέστηκε με δοκιμασία ανοσοαπορρόφησης Η γλυκοζυλίωση (GISA) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [24]. Όπως ήταν αναμενόμενο, ένα γενικό σιαλυλτρανσφεράση αύξηση δραστικότητα ανιχνεύθηκε στα επιμολυσμένα κύτταρα σε σύγκριση με αντίστοιχους ελέγχους τους, να είναι περίπου 3,2 φορές υψηλότερη στον ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνοι Capan-1

έναντι

CP και Capan-1 και 1,3 φορές υψηλότερη στις ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνους MDAPanc-28

έναντι

MP και MDAPanc-28

MDAPanc-28 γονικών κυττάρων, MP:. MDAPanc-28 mock κύτταρα, M34 και M33: MDAPanc-28 κύτταρα επιμολυσμένα με το γονίδιο ST3Gal III. Capan-1: γονικά κύτταρα, CP: Capan-1 mock κύτταρα, C31 και C32: Capan-1 κύτταρα επιμολυσμένα με το γονίδιο ST3Gal III. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή ± SD από 3 ξεχωριστά πειράματα, το καθένα σε έξι επαναλήψεις (n = 18). * Σημαντικά διαφορετική (

P & lt? 0.001

).

Η

ST3Gal III αυξημένη de novo έκφραση SLex με ενζυματική

ανταγωνισμό

επιφάνεια των κυττάρων γλυκάνης μοτίβο έκφρασης και για τα δύο μοντέλα ήταν μελετήθηκε με κυτταρομετρία ροής χρησιμοποιώντας ειδικά μονοκλωνικά αντισώματα έναντι αντιγόνων Lewis και ειδικές λεκτίνες (αποτελέσματα που φαίνονται στο Σχήμα 2). Η ανάλυση του τύπου ΙΙ Lewis αντιγόνων στο μοντέλο Capan-1 (Σχήμα 2Α) αποκάλυψε ότι Capan-1 και CP κύτταρα είχαν υψηλής-μέσης επίπεδα της Le

x, ΣΕΛ

x και αντιγόνων Η2 και τα υψηλά επίπεδα του η Le

y αντιγόνο. Σε σύγκριση με τους ελέγχους, C31 και C32 κλώνοι εμφανίζεται μια μεγάλη αύξηση στο ΣΕΛ

x έκφραση σε βάρος της εντελώς χάσει την έκφραση των μη-σιαλυλιωμένης αντιγόνων (Le

x, Η2 και το Le

y). Επιπλέον, που συνοδεύει την αύξηση των ΣΕΛ

x, μια μείωση της α2,6-σιαλικού οξέος παρατηρήθηκε, ανιχνεύθηκε με

Sambucus nigra αγλουτινίνης

(ΣΕΛ).

Maackia amurensis συγκολλητίνη

(ΜΑΑ) δεν έδειξε διαφορές μεταξύ των κλώνων, πιθανώς λόγω του γεγονότος ότι δεν είναι σε θέση να συνδεθεί με SLE

x δομή (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Τύπος Ι Lewis αντιγόνα ΣΕΛ

α, Le

α, Le

b και H1 δεν ανιχνεύθηκαν στο μοντέλο Capan-1 (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Έτσι, αυτά τα αποτελέσματα αποδεικνύεται μία πολλαπλή ενζυμική ανταγωνισμός για τις αλυσίδες Τύπου II. Η ανάλυση των MDAPanc-28 μοντέλο (Σχήμα 2Β) έδειξε ότι τα κύτταρα ελέγχου MDAPanc-28 και ΜΡ είχαν πολύ χαμηλά ΣΕΛ

x έκφρασης και έκφραση υψηλού α2,6-σιαλικού οξέος και στερούνταν επίσης αντιγόνα Τύπου Ι Lewis. Όταν M33 και M34 κλώνοι σύγκριση με τους μάρτυρες, μια αύξηση στο ΣΕΛ

χ με ταυτόχρονη μείωση της α2,6-σιαλικού οξέος ανιχνεύθηκε επίσης. Όπως και παραπάνω, MAA δεν έδειξε διαφορές μεταξύ των κλώνων πιθανόν επειδή δεν αναγνωρίζει ΣΕΛ

x (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Από ST3Gal III επιμολυσμένων κλώνων C31 και C32 συμπεριφέρθηκαν παρομοίως στο μοντέλο Capan-1, καθώς και το M33 και M34 ST3Gal III επιμολυσμένων κλώνων στο μοντέλο MDAPanc-28, η ακόλουθη

in vitro

και

in vivo

μελέτες διεξήχθησαν μόνο με τα υψηλότερα ST3Gal III και σΕΛ

x εκφράζοντας κλώνων: C31 για το μοντέλο Capan-1 και M34 για το μοντέλο MDAPanc-28

Εικόνα 2Α.. Capan-1 (συνεχής dot περίγραμμα: ………), CP (απόσταση dot περίγραμμα:…..), C31 (έντονο περίγραμμα: _______), C32 (απλό περίγραμμα: ______). Σχήμα 2Β. MDAPanc-28 (συνεχή dot περίγραμμα: ………), MP (απόσταση dot περίγραμμα:…..), M34 (έντονο περίγραμμα: _______), M33 (απλό περίγραμμα: ______). Τα πειράματα διεξήχθησαν για τριπλούν. Αντιπροσωπευτικά κυτταρομετρία ιστογράμματα φαίνονται. Anti-Le

x MAb δεσμεύεται να Galβ1,4 [Ρυοα1,3] GlcNAc-? αντι-ΣΕΛ

x MAb δεσμεύεται σε NeuAcα2-3Galβ1,4 [Ρυοα1,3] GlcNAc-? αντι-Η2 MAb δεσμεύεται σε [Fucα1,2] Galβ1,4GlcNAc-? αντι-Le

y MAb δεσμεύεται σε [Fucα1,2] Galβ1,4 [Ρυοα1,3] GlcNAc-? SNA λεκτίνη (

Sambucus nigra

αγλουτινίνη) συνδέεται με δομές NeuAcα2-6Galβ-.

Η

ST3Gal III ενισχυμένη παγκρέατος πρόσφυση κύτταρα αδενοκαρκινώματος να rh-Ε-σελεκτίνη

Ε -selectin είναι ένα μόριο προσκόλλησης κυττάρου που εκφράζεται επί ενεργοποιημένων ενδοθηλιακών κυττάρων που αναγνωρίζει και δεσμεύεται σε ειδικούς καθοριστικούς παράγοντες υδατάνθρακα, όπως SLE

x και ΣΕΛ

a παρούσα στην γλυκοσυζεύγματα επιφάνεια [30]. Οι δοκιμασίες πρόσδεσης για rh-Ε-σελεκτίνη πραγματοποιήθηκαν για να αναλυθεί το κατά πόσον η διαφορετική μοτίβο της έκφρασης του αντιγόνου Lewis ήταν σε θέση να προκαλέσει αλλαγές στην προσκόλληση (αποτελέσματα δείχνονται στο Σχήμα 3). Και τα δύο μοντέλα έδειξαν διαφορετικά μοτίβα πρόσφυση σε rh-Ε-σελεκτίνης. MDAPanc-28 γονικά κύτταρα εμφανίζονται κάτω πρόσφυση σε rh-Ε-σελεκτίνη από Capan-1 γονικά κύτταρα, τα οποία ήταν σύμφωνη με το χαμηλότερο επίπεδο έκφρασης του ST3Gal III και ΣΕΛ

x του MDAPanc-28 σε σύγκριση με κύτταρα Capan-1. Στο μοντέλο Capan-1 (Σχήμα 3Α) ο ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνος, C31, τριπλασιάστηκε η πρόσφυση (

P & lt? 0.001

) να rh-Ε-σελεκτίνη σε σύγκριση με αντίστοιχους ελέγχους Capan-1 και CP. Για να επιβεβαιωθεί ότι SLE

x έκφραση που προκαλείται από ST3Gal III προκάλεσε δέσμευσης up-ρυθμιζόμενη Ε-σελεκτίνης, τα κύτταρα προηγουμένως επωάσθηκαν με τον αντι-SLE

x μονοκλωνικό αντίσωμα (MAb) και την πρόσδεση σε Ε-σελεκτίνη ανεστάλη . Στο μοντέλο MDAPanc-28 (Σχήμα 3Β), η ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνος, Μ34, τετραπλασιάζεται (

P & lt? 0.001

) η προσκόλληση σε rh-Ε-σελεκτίνη σε σύγκριση με τους αντίστοιχους ελέγχους MDAPanc-28 και ΜΡ . Όταν τα κύτταρα είχαν προηγουμένως επωάστηκαν με το αντι-SLE

x MAb πρόσδεση σε Ε-σελεκτίνη ήταν πλήρως καταργηθεί. Αυτά τα αποτελέσματα έδειξαν ότι, σε αυτά τα μοντέλα, τα επίπεδα ST3Gal III διαμορφώνεται η

in vitro

σύνδεση με rh-Ε-σελεκτίνη μέσω ΣΕΛ

x έκφρασης.

Capan-1 παραλλαγή κύτταρα (Σχήμα 3Α) και MDAPanc-28 κύτταρα παραλλαγής (Σχήμα 3Β), προηγουμένως επωαστεί με PBS-1% BSA (φως μπάρες) ή αντι-SLE

x MAb (σκοτεινές ράβδοι), προστέθηκαν σε 96 φρεατίων μικροπλάκες επικαλυμμένων με rh E -selectin ή PBS-1% BSA (αρνητικός έλεγχος). Τα προσκολλημένα κύτταρα εκτιμήθηκαν με μια χρωματομετρική δοκιμασία ΜΤΤ-based. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως η Ειδική σύνδεση προς Ε-σελεκτίνη (OD 570 nm των κυττάρων που οριοθετούνται στην Ε-σελεκτίνη – OD 570 nm των κυττάρων συνδέεται με PBS-1% BSA)

έναντι

κύτταρα προηγουμένως επωάσθηκαν είτε όχι με αντι -SLe

x MAb. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή ± SD από 3 ξεχωριστά πειράματα, το καθένα σε πέντε επαναλήψεις (n = 15). * Σημαντικά διαφορετική (

P & lt? 0.001

).

Η

Η επίδραση των διαφορετικών κυτοκινών στην προσκόλληση των καρκινικών κυττάρων του παγκρέατος με ηπατική ημιτονοειδή ενδοθηλιακά κύτταρα (HSE)

Επειδή τα επίπεδα

x έκφραση ST3Gal III και ΣΕΛ ευθέως ανάλογη προς

in vitro

rh-Ε-σελεκτίνη πρόσφυσης, η σύνδεση του παγκρεατικά καρκινικά κύτταρα σε πρωτογενή καλλιεργημένα κύτταρα HSE αξιολογήθηκε. Το μοντέλο Capan-1 επιλέχθηκε για αυτό το πείραμα, λόγω υψηλότερων προσκόλληση του να rh-Ε-σελεκτίνης. Πρώτον, προσδιορίσαμε την ειδική προσκόλληση των Capan-1 γονικά κύτταρα να HSEC διεγερμένα με TNF-α, IL1-β ή λιποπολυσακχαρίτη (LPS) επί 16 ώρες πριν από τη δοκιμασία (αποτελέσματα δείχνονται στο σχήμα 4Α). Η θεραπεία με TNF-α και IL1-β αύξησε σημαντικά τον αριθμό των προσκολλημένων κυττάρων, και IL1-β είχε ως αποτέλεσμα να είναι οι καλύτερες ερεθίσματα για το μοντέλο μας. Όταν επώαση με αντι-Ε-σελεκτίνης mAb, η αύξηση στην προσκόλληση πλήρως καταργηθεί. Τα εν λόγω δεδομένα έδειξαν ότι HSE κύτταρο κυτοκίνη προ-θεραπείας, ειδικά IL-1β, προωθείται η έκφραση Ε-σελεκτίνης τους, η οποία προκάλεσε μια αύξηση Capan-1 προσκόλληση

κύτταρα HSE επωάστηκαν με & lt?. Sel & gt? = Αντι-ποντικού CD62 Ε (Ε-σελεκτίνη) MAb ή & lt? IgG & gt? = Αντίσωμα ελέγχου ισότυπο. Γονικά κύτταρα Capan-1 σημάνθηκαν με καλσεΐνη και προστέθηκαν σε κύτταρα HSE ελέγχου, TNF-α κύτταρα διεγερμένα HSE, LPS διεγερμένα κύτταρα HSE ή IL-1β διεγερμένα κύτταρα HSE. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως η% Ειδική προσκόλληση σε κύτταρα HSE [78]. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή ± SD από 3 ξεχωριστά πειράματα, το καθένα σε τρεις επαναλήψεις (n = 9). * Σημαντικά διαφορετική (

P & lt? 0.001

) κατά τη σύγκριση των αντι-Ε-σελεκτίνης επωάζονται HSEC για τον έλεγχο των κυττάρων. # Σημαντικά διαφορετικές (

P & lt? 0.001

) κατά τη σύγκριση των θεραπειών. Όγκου δοκιμασία προσκόλλησης κυττάρου προς Πρωτογενή καλλιεργημένα κύτταρα HSE (Εικόνα 4Β). Capan-1 παραλλαγή κύτταρα σημάνθηκαν με Calcein και προστέθηκαν σε IL-1β διεγερμένα κύτταρα HSE ή (-) δεν διεγερμένα κύτταρα ελέγχου HSE. & Lt? Sel & gt? = Αντι-ποντικού CD62 E (Ε-σελεκτίνη) MAb προστέθηκε σε IL-1β κύτταρα HSE ή – κύτταρα HSE πριν την προσθήκη των κυττάρων του όγκου. * Σημαντικά διαφορετική (

P & lt? 0.001

) κατά τη σύγκριση Capan-1, CP, και τα κύτταρα C31. # Σημαντικά διαφορετικές (

P & lt? 0.001

). Κατά τη σύγκριση κάθε κλώνος (Capan-1, CP και C31) προσκόλλησης για τις διάφορες HSE κύτταρα θεραπείες

Η

ST3Gal III αυξημένη πρόσφυση των καρκινικών κυττάρων σε κύτταρα HSE

επόμενο προσδιορίστηκε η προσκόλληση των διαφορετικών ST3Gal III και σΕΛ

x επίπεδα κυττάρων που εκφράζουν Capan-1 έως IL-1β προεπεξεργασμένα ή ελέγχουν κύτταρα HSE (αποτελέσματα δείχνονται στο σχήμα 4Β). Capan-1 και ελέγχου CP κύτταρα έδειξαν ένα βασικό προσκόλληση σε κύτταρα HSE, η οποία αυξήθηκε σημαντικά σε IL-1β προ-επεξεργασμένα κύτταρα HSE και επέστρεψαν στα βασικά επίπεδα σε αντι-Ε-σελεκτίνης mAb προ-επωάστηκαν κύτταρα HSE. C31 έδειξε μια βασική προσκόλληση σε κύτταρα HSE (υψηλότερα από Capan-1 και ελέγχου CP κύτταρα), η οποία αυξήθηκε σημαντικά σε IL-1β προ-επεξεργασμένα κύτταρα HSE και επίσης επέστρεψαν στα βασικά επίπεδα σε αντι-Ε-σελεκτίνης mAb προεπωασμένα κύτταρα HSE. Τα εν λόγω δεδομένα έδειξαν ότι η Ε-σελεκτίνη έπαιξε σημαντικό ρόλο μεσολαβώντας προσκόλληση σε κύτταρα HSE, αν και ένας μη-Ε-σελεκτίνη που εξαρτάται βασικά προσκόλλησης (υψηλότερα για C31 ό, τι για τα κύτταρα ελέγχου) υπήρχε. Επιπλέον, η υψηλή ST3Gal III και ΣΕΛ

x κύτταρα που εκφράζουν C31 είχε υψηλότερη πρόσφυση σε κύτταρα HSE από μέσο ST3Gal III και ΣΕΛ

x κύτταρα που εκφράζουν τον έλεγχο.

αυξημένη έκφραση ST3Gal III μετανάστευση των κυττάρων

για να διερευνηθεί αν ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνους θα μπορούσε να οδηγήσει στην απόκτηση ενός πιο μεταναστευτικών κυτταρικό φαινότυπο, αξιολογήσαμε τη μετανάστευση των κυττάρων στο κολλαγόνο τύπου Ι χρησιμοποιώντας μία δοκιμασία μετανάστευσης transwell (αποτελέσματα δείχνονται στο Σχήμα 5). Και τα δύο μοντέλα κυττάρων έδειξαν διαφορετικές μεταναστευτικές δυνατότητες, με το μοντέλο Capan-1 είναι εννέα φορές περισσότερες μεταναστευτικών από το μοντέλο MDAPanc-28. Όσον αφορά το μοντέλο Capan-1 (Σχήμα 5Α), το ST3 Gal III και ΣΕΛ

x υπερεκφράζουν τον κλώνο C31 παρουσίασαν διπλό (

P & lt? 0.001

) δυνατότητες μετανάστευσης από τα κύτταρα ελέγχου Capan-1 και CP. Για το μοντέλο MDAPanc-28 (Σχήμα 5Β), την ST3Gal III και ΣΕΛ

x υπερεκφράζουν κλώνος M34 αυξημένη μετανάστευση από τέσσερις σε σχέση με τα κύτταρα ελέγχου MDAPanc-28 και ΜΡ. Τα αποτελέσματα έδειξαν θετική συσχέτιση μεταξύ ST3Gal III και ΣΕΛ

x επίπεδα και μεταναστευτικών δυνατότητες.

Capan-1 παραλλαγή κύτταρα (Capan-1, CP και C31)

(

Εικόνα 5Α

)

και MDAPanc-28 παραλλαγή κύτταρα (MDAPanc-28, MP και M34)

(

Εικόνα 5Β

)

σπάρθηκαν επί 8 μm-πόρους Type-Ι-επικαλυμμένων με κολλαγόνο ένθετα, τοποθετείται στην κορυφή του φρεάτια που περιέχουν DMEM-1% FBS και επωάζονται στους 37 ° C (6 ώρες για Capan-1 μοντέλο και 18 ώρες για MDAPanc-28 μοντέλο). Μη κύτταρα που μετανάστευσαν εξαλειφθεί και μετανάστευσαν κύτταρα μονιμοποιούνται, χρωματίστηκαν και μετρήθηκαν. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως μεταναστεύσει κύτταρα ανά φρεάτιο. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν τη μέση τιμή ± SD των τιμών που λαμβάνονται σε 3 ξεχωριστά πειράματα, (n = 9). * Σημαντικά διαφορετική (

P & lt? 0.001

).

Η

ST3Gal III υπερέκφραση αυξάνει ογκογένεσης και μειώνει την επιβίωση σε αθυμικά γυμνά ποντίκια

Από την

in vitro

αποτελέσματα που περιγράφονται παραπάνω προτείνεται ένα σημαντικό ρόλο για το γονίδιο ST3Gal III στην πρόοδο του όγκου,

in vivo

προσδιορισμοί πραγματοποιήθηκαν για να μελετηθεί εάν ST3Gal III θα μπορούσε να είναι σημαντική στην μετάσταση των όγκων. Πρώτον, ο σχηματισμός της μετάστασης και την επιβίωση των αθυμικών γυμνών ποντικών μετά ενδοσπληνική ένεση με διαφορετικές ποσότητες των γονικών κυττάρων Capan-1 και MDAPanc-28 προσδιορίστηκαν. Στα χέρια μας, όταν 1,5 × 10

6, 3 × 10

6 και 5 × 10

6 κύτταρα Capan-1 εγχύθηκαν, ο γυμνά ποντίκια πέθαναν σχηματισμού εμβολών, πιθανώς λόγω της Capan-1 το μέγεθος και την ικανότητα συγκέντρωσης. Η ένεση του 1 × 10

6 Capan-1 κύτταρα δεν αποτελούν έμβολα και δημιουργούνται οι όγκοι σπλήνα, αν και χωρίς μεταστατικό εστιάζει. Από MDAPanc-28 κύτταρα είναι 4-5 φορές μικρότερες από Capan-1 κύτταρα, 7 × 10

6 MDAPanc-28 κύτταρα εγχύθηκαν ενδοσπληνικά σε γυμνά ποντίκια, τα οποία δημιουργούνται μικρά μακροσκοπική μεταστατικό εστιάζει σε 2/3 των ποντικών, 20 -22 εβδομάδες αργότερα. Ως εκ τούτου, MP και M34 κύτταρα επιλέχθηκαν για να μελετηθεί η επίδραση του ST3Gal III υπερέκφραση σε σχηματισμό μετάστασης και γυμνούς επιβίωση ποντικών. Εκθετικά αναπτυσσόμενα 7 × 10

6 βιώσιμα MP και Μ34 κύτταρα, τα οποία έχουν τα ίδια μορφολογικά χαρακτηριστικά, ενέθηκαν στον σπλήνα αθυμικών γυμνών ποντικών (η = 8 /ομάδα) και η επιβίωση ανάλυση διεξήχθη χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Kaplan-Meier ( Εικόνα 6). Ποντικοί ενέθηκαν με ST3Gal III κύτταρα που υπερεκφράζουν (M34) έδειξε μεγάλη μείωση στην επιβίωση (

Ρ = 0,019

) όταν συγκρίνεται με ποντικούς που ενέθηκαν με κύτταρα MP ελέγχου. Τα περισσότερα από τα M34 εγχύθηκε ποντίκια (5/8) πέθανε μετά από 103-110 ημέρες μετά την ένεση, ενώ MP εγχέονται ποντικοί επιβίωσαν μέχρι το τέλος της μελέτης (190 ημέρες). Όλα M34 ενεμένους ποντικούς υποβλήθηκαν σε νεκροψία και η ανάλυση έδειξε όγκους σπλήνα σε 62,5% από αυτούς (5/8) και αρκετές μακροσκοπική μεταστατικό επικεντρώνεται στο έντερο, το διάφραγμα, των νεφρών, των γαγγλίων ή επινεφριδίων σε 75% των ποντικών (6/8) . Όλα MP ενεμένους ποντικούς υποβλήθηκαν σε νεκροψία (ημέρα 103, 138, 161 και 190 μετά την έγχυση) και κανένας από αυτούς (8/8) έδειξε στοιχεία είτε όγκων σπλήνα ή μακροσκοπική μετάσταση. Έτσι, η υπερέκφραση του ST3Gal III σε MDAPanc-28 κύτταρα, τα οποία οδηγούν σε υψηλότερη έκφραση του ΣΕΛ

x και υψηλότερη προσκόλληση και μετανάστευση, θα μπορούσαν να συσχετιστούν άμεσα με μία μείωση στην επιβίωση όταν εγχέονται σε γυμνούς ποντικούς. Επιπλέον, προικισμένο κύτταρα με μεγαλύτερη ικανότητα σχηματισμού όγκου και το μεταστατικό δυναμικό όταν ενδοσπληνικά εγχέεται.

Τα κύτταρα (7 Χ 10

6) έχουν ενδοσπληνικά εγχύθηκαν σε γυμνούς ποντικούς την ημέρα 1 του πειράματος. Τα ποντίκια καθημερινά εξετάστηκαν και θυσιάστηκαν όταν φαινόταν άρρωστος. Οι διαφορές μεταξύ των ομάδων αξιολογήθηκαν από τη δοκιμή μακράς-rank (

P

= 0,019? N = 7-8 /ομάδα).

Η

Συζήτηση

νωρίτερα μας μελέτες έδειξαν ότι άλφα-2,3-σιαλυλτρανσφεράση δραστικότητα συσχετίζεται με σιαλυλο-Lewis έκφραση αντιγόνου επί του παγκρέατος επιφάνειες καρκινικών κυττάρων [24]. Εμείς αυτό επεκτάθηκε ερευνών μας για να μελετήσει ειδικά το μηχανιστικό ρόλο της ST3Gal ΙΙΙ στην απόκτηση της κόλλας, μεταναστευτικών και μεταστατικό δυνατότητες σε κυτταρικές σειρές καρκίνου του παγκρέατος αδενοκαρκίνωμα. Βρήκαμε ότι: 1) Τα επίπεδα έκφρασης του mRNA ST3Gal III συσχετίζεται με ΣΕΛ

x έκφραση επιφάνεια? 2) ST3Gal III επάγεται σιαλυλίωση αυξημένη παγκρεατικό καρκίνο προσκόλληση προς rh-Ε-σελεκτίνη και IL1-β προ-διεγερμένα κύτταρα HSE, μέσω SLE

x-Ε-σελεκτίνης αλληλεπίδραση? 3) θετική συσχέτιση μεταξύ της μετανάστευσης και ST3Gal III και ΣΕΛ

x έκφραση? και 4) η ενδοσπληνική ένεση ST3Gal III υπερεκφράζουν κυτταρικές σειρές σε αθυμικούς γυμνούς ποντικούς προκάλεσε μια αύξηση στην ογκογένεση και μια μείωση της επιβίωσης.

ST3Gal III υπερεκφράζουν κλώνοι (C31, C32, M33 και M34) που εμφανίζονται σε μια αύξηση ΣΕΛ

x έκφραση σε σύγκριση με τους αντίστοιχους ελέγχους (μη επιμολυσμένα κύτταρα, Capan-1 και MDAPanc-28, και κύτταρα επιμολυσμένα με τον κενό φορέα, CP και MP). Παρόλο τύπου Ι υπόστρωμα θεωρείται ST3Gal III προτιμώνται δέκτη, το υπόστρωμα τύπου ΙΙ είναι επίσης ένας καλός δέκτης. Οι ενζυματικές μελέτες που έχουν διεξαχθεί, προκειμένου να χαρακτηρίσει δραστηριότητα ST3Gal III έδειξε ότι τύπου Ι και τύπου ΙΙ υποστρώματα αποδέκτη οδήγησε σε αρκετά παρόμοια V

max τιμές, ενώ η Κ

τιμές m ήταν πολύ υψηλότερες για τον τύπο ΙΙ. Ως συνέπεια, τα ποσοστά ενσωμάτωσης ήταν περίπου δύο φορές για τύπου Ι από ό, τι για τις δομές τύπου II [31]. Παρόμοια αποτελέσματα ελήφθησαν σε μεταγενέστερα έργα για τη μελέτη των φυσικών [32], [33] ή συνθετικές αποδέκτες ιδιαιτερότητες [34], [35], [36], [37], [38]. Λαμβάνοντας υπόψη ότι οι κυτταρικές σειρές που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη δεν εκφράζουν Ι αντιγόνα Lewis και ότι ST3Gal III μπορούν να δράσουν τόσο τύπου Ι και τα υποστρώματα τύπου II, η υπερέκφραση του ST3Gal III ενήργησε για τις πρόδρομες τύπου II οδηγεί σε αυξημένη έκφραση του ΣΕΛ

x. Πρόσφατα, και σε συμφωνία με τα αποτελέσματά μας, έχει περιγραφεί ότι η υπερέκφραση του ST3Gal III στα κύτταρα του γαστρεντερικού καρκινώματος οδήγησε επίσης στο ΣΕΛ

x καθοριστικός παράγοντας αύξησης [39]. Επιπλέον, αυτοί οι συγγραφείς περιέγραψαν ότι τα επίπεδα του mRNA του ST3Gal III συσχετίζονται με αυξημένη ΣΕΛ

x επίπεδα έκφρασης σε συρρέοντα κύτταρα, αλλά όχι με τα επίπεδα του mRNA της ST3Gal IV και ST3Gal VI, τα οποία είναι τα ένζυμα που έχουν αναφερθεί να δρουν κατά προτίμηση για τύπου ΙΙ αλυσίδες. Λαμβανόμενα μαζί, τα δεδομένα αυτά ενισχύουν το ρόλο των ST3Gal III στη βιοσύνθεση του ΣΕΛ

x σε αυτά τα κύτταρα καρκινώματος. Μαζί με ΣΕΛ

αύξηση x, μείωση της α2,6-σιαλικού οξέος παρατηρήθηκε και στα δύο μοντέλα. Επιπλέον, C31 και C32 έδειξε πλήρη απώλεια των μη σιαλυλιωμένη τύπου ΙΙ αντιγόνα Lewis (Le

x, Η2 και το Le

y). Αυτά τα αποτελέσματα είναι πιθανόν εξηγείται από πολλαπλές ενζυματικές ανταγωνισμός για τις αλυσίδες Τύπου II. Από τη μία πλευρά, δεν υπήρχε ανταγωνισμός μεταξύ των άλφα-1,2-φουκοζυλοτρανσφεράσες, άλφα-1,3 (4) φουκοσυλοτρανσφερασών και άλφα-2,3-σιαλυλοτρανσφερασών [23], [40], [41], και από την άλλη μεταξύ άλφα-2,3-σιαλυλοτρανσφερασών και άλφα-2,6-σιαλυλοτρανσφερασών [6], [31], [42].

Οι μοριακοί μηχανισμοί που ρυθμίζουν παγκρέατος μετάσταση όγκου είναι ακόμη πλήρως κατανοητό. Ένα κρίσιμο στάδιο είναι η προσκόλληση των καρκινικών κυττάρων σε ενεργοποιημένα ενδοθηλιακά κύτταρα, η οποία περιλαμβάνει προσκόλληση τους σε ενδοθηλιακά σελεκτίνες που αναγνωρίζουν ολιγοσακχαριτών καθοριστικούς παράγοντες που εκφράζονται σε καρκινικά κύτταρα επιφάνεια. ΣΕΛ

x έχει αναφερθεί να συμμετάσχει στα πρώτα στάδια της εξαγγείωσης μέσω αλληλεπίδρασης με Ε-σελεκτίνης με τη διευκόλυνση της κύλισης και προσκόλληση των καρκινικών κυττάρων στα ενδοθηλιακά κύτταρα [27], [28], [43], [44 ], [45]. Μία άμεση συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων ST3Gal III, SLE

x επίπεδα και προσκόλληση κυττάρου καρκίνου του παχέος εντέρου σε IL-1β ενεργοποιημένα ανθρώπινα ενδοθηλιακά κύτταρα ομφάλιας φλέβας (HUVEC) έχει περιγραφεί [46]. ΣΕΛ

x έχουν εκφράζοντας τον καρκίνο του παχέος εντέρου κύτταρα έχουν επίσης αναφερθεί να συμμορφώνονται με ηπατική ημιτονοειδή ενδοθηλιακά κύτταρα μέσω Ε-σελεκτίνη-ΣΕΛ

x αλληλεπίδρασης [47]. Επιπλέον, αρκετά έργα αναφερθεί μία συσχέτιση μεταξύ SLE

x, και η πρόσφυση σε κυτοκίνη διεγερμένα HUVEC σε H7721 ηπατοκαρκινώματος [48], [49], [50], [51] και σε κύτταρα αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα [52]. Σε συμφωνία με τα δεδομένα αυτά, τα αποτελέσματά μας έδειξαν μια άμεση συσχέτιση μεταξύ του παγκρέατος πρόσφυση αδενοκαρκίνωμα να

in vitro

rh-Ε-σελεκτίνης επίπεδα ST3Gal III και σε παγκρεατικά καρκινικά κύτταρα, μέσω ΣΕΛ

x. Επιπλέον, κατά τη μελέτη της πρόσφυσης των παγκρεατικών κυττάρων αδενοκαρκινώματος σε ηπατική ημιτονοειδή ενδοθηλιακά κύτταρα, ST3Gal III και ΣΕΛ

x κύτταρα που υπερεκφράζουν C31 επέδειξε μια ενισχυμένη ικανότητα να προσκολλώνται σε IL-1β διεγερμένα κύτταρα HSE σε σύγκριση με τους μάρτυρες. HSE κύτταρο προ-θεραπεία με IL1-β και ΤΝΡ-α κυτοκινών αυξήθηκε σημαντικά Capan-1 προσκόλλησης κυττάρων σε κύτταρα HSE και επέστρεψαν στα βασικά επίπεδα σε αντι-Ε-σελεκτίνης προ-επωάστηκαν κύτταρα HSE. Αυτά τα αποτελέσματα είναι σύμφωνα με προηγούμενες εργασίες ανέφεραν ότι η έκφραση Ε-σελεκτίνης είναι χαμηλή ή απούσα σε κύτταρα HSE υπό κανονικές συνθήκες, αλλά μπορεί να είναι μέχρι ρυθμίζεται από κυτοκίνες [53], από ηπατοκύτταρα [54] ή ως απόκριση σε μεταστατικά κύτταρα όγκου [ ,,,0],55]. Η προσκόλληση των ST3Gal III και ΣΕΛ

x κύτταρα που υπερεκφράζουν C31 σε κύτταρα μη διεγερμένα HSE ήταν σημαντικά μεγαλύτερη σε σύγκριση με τα κύτταρα ελέγχου Capan-1 και CP. Αυτό προσκόλληση δεν επανήλθε όταν προ-επώαση HSE κυττάρων με αντι-Ε-σελεκτίνης, η οποία θα μπορούσε να εξηγηθεί από ένα μη-Ε-σελεκτίνη που εξαρτώνται, αλλά SLE

x μεσολάβηση, παγκρεατικού προσκόλληση καρκινικών κυττάρων σε κύτταρα μη διεγερμένα HSE . Αυτή η αλληλεπίδραση μπορεί να διαμεσολαβείται από άλλους SLE

x Κυττάρων δεσμευτικός Adhesion Μόρια όπως Ρ-σελεκτίνης [55], [56] ή Ι-τύπου λεκτίνες. Στην πραγματικότητα, μια προηγούμενη μελέτη ανέφερε η σύνδεση του ST3Gal III υπερεκφράζουν κύτταρα καρκίνου κόλου σε μη ενεργοποιημένα HUVEC, υποδεικνύοντας αυτή μη-Ε-σελεκτίνης που εξαρτώνται από ΣΕΛ

x προσκόλληση θα μπορούσε να οφείλεται σε λεκτίνες I-Type [46].

για τις γνώσεις μας, αυτή είναι η πρώτη έκθεση σχετικά με μια θετική συσχέτιση μεταξύ της μετανάστευσης των κυττάρων και ST3Gal III και σΕΛ

x επίπεδα έκφρασης σε παγκρεατικά κύτταρα αδενοκαρκινώματος. Παρά την απουσία μελετών για καρκινικά κύτταρα του παγκρέατος, μερικές έρευνες υποστηρίζουν τα ευρήματά μας. Όταν η έκφραση οξύ α2,3-σιαλικού επιφάνεια των καρκινικών κυττάρων στο καρκίνο του μαστού κυτταρική γραμμή MDA-MB-231 είχε συμπιεσθεί (με αναστολή κυτταρικής α2,3-σιαλυλτρανσφεράση δραστηριότητα με soyasaponin Ι), κυτταρική μετανάστευση μειώθηκε σημαντικά [57]. ST3Gal ΙΙΙ υπερέκφραση στην κυτταρική σειρά γλοιώματος αυξημένη έκφραση α2,3-συνδεδεμένα σιαλικού οξέος U-374 στην επιφάνεια των κυττάρων και οδήγησε σε μια πιο

in vitro

επεμβατική φαινότυπο [58]. Επιπλέον, τα κύτταρα ηπατοκαρκινώματος H7721 έδειξε μια άμεση συσχέτιση μεταξύ της ποσότητας των επιφανειακών ΣΕΛ

x έκφραση και μετανάστευση [50], [51], [59]. Επιπλέον, ΣΕΛ

x ήταν ζωτικής σημασίας για τη μετανάστευση H7721, δεδομένου ότι η μετανάστευση αναστάλθηκε από αντι-ΣΕΛ

x MAb και μετά την απομάκρυνση σιαλικού υπόλειμμα οξέος [60]. Η κυτταρική μετανάστευση είναι μία διαδικασία πολλών σταδίων που παίζει κεντρικό ρόλο στη μετάσταση. Η αρχική αντίδραση των μεταναστευτικών κυττάρων σε έναν παράγοντα μετανάστευσης-προώθηση είναι να πολώσει και να επεκτείνει προεξοχές. Αυτές οι προεξοχές σταθεροποιούνται με εξωκυττάρια μόρια προσκόλλησης μήτρας, όπως ιντεγκρίνες και χρησιμεύουν ως θέσεις έλξης για τη μετανάστευση ως το κύτταρο κινείται προς τα εμπρός πάνω τους [61]. Υπάρχει μια ταχέως αυξανόμενο σώμα της στοιχεία που να αποδεικνύουν ότι οι δυνατότητες επιρροές σιαλικυλίωσης μετανάστευσης διαμορφώνοντας τη λειτουργία ιντεγκρίνης [58], [62], [63], [64]. Έτσι, υποθέτουμε ότι ST3Gal III θα μπορούσαν να επηρεάζουν την κυτταρική μετανάστευση μεταβάλλοντας ιντεγκρίνη σιαλυλίωση. Μια αύξηση στην α2,3-σιαλικό οξύ επί της κυτταρικής επιφάνειας C31 και M34 θα μπορούσε επίσης να μεταβάλλουν τα επίπεδα σιαλυλίωσης των ιντεγκρινών τους, διαμορφώνοντας εξωκυττάριας μήτρας προσκόλληση τους.