Αφηρημένο

Polysaccharopeptide (PSP), από το

Coriolus versicolor

, έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως ως ανοσοενισχυτικό σε χημειοθεραπεία με αποδεδειγμένη κατά του όγκου και ευρύ επιδράσεις ανοσοτροποποιητική. Ενώ μηχανισμός PSP δράσης της εξακολουθεί να παραμένει άγνωστη, ενισχυμένη δυνατότητα ανοσοτροποποιητικές της με κόμμι ακακίας έχει μεγάλο ενδιαφέρον. Κόμμι ακακίας, το οποίο επίσης περιέχει πολυσακχαρίτες και γλυκοπρωτεΐνες, έχει αποδειχθεί ότι είναι ανοσο. Για να διαλευκανθεί αν PSP ενεργοποιεί άμεσα Τ-κυττάρων-εξαρτώμενες αποκρίσεις κυττάρων-Β

in vivo

, χρησιμοποιήσαμε ένα καθιερωμένο απτίνης σύστημα φορέα (γάμμα-Νιτροφαινυλ κοτόπουλο σφαιρίνη (NP-CGG)). 6-εβδομάδων C57BL /6 αρσενικοί ποντικοί ανοσοποιήθηκαν με 50 μα ΝΡ

25-CGG στυπτηρία κατακρήμνιση ενδοπεριτοναϊκώς. Οι ποντικοί καθετηριάστηκαν καθημερινά με 50 mg /kg PSP σε ένα όχημα που περιέχει κόμμι ακακίας και θυσιάστηκαν στις ημέρες 0, 4, 7, 10, 14 και 21. ELISA χρησιμοποιήθηκε για να μετρηθεί η συνολική και η σχετική απτένιο-ειδικό αντι-ΝΡ IgA, IgM και επίπεδα IgG τίτλος σύγκριση με τους ελέγχους. Διαπιστώθηκε ότι το PSP, σε συνδυασμό με κόμμι ακακίας, αύξησε σημαντικά τα συνολικά επίπεδα τίτλος IgG την ημέρα 4 (Ρ & lt? 0,05), μειωμένα επίπεδα τίτλος IgM τις ημέρες 4 και 21 (Ρ & lt? 0,05) χωρίς αλλοιώσεις παρατηρήθηκαν στην IgA ή IgE τίτλος επίπεδα σε οποιοδήποτε από τα χρονικά σημεία μετρήθηκαν. Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι ενώ το PSP σε συνδυασμό με κόμμι ακακίας εμφανίζεται να ασκεί αδύναμος ανοσολογικές επιδράσεις μέσω εξαρτώμενη ειδικών Τ-κυττάρων αποκρίσεις Β-κυττάρων, είναι πιθανό να είναι ευρεία και μη ειδικών η οποία υποστηρίζει την τρέχουσα βιβλιογραφία στο PSP. Αναφέρουμε για πρώτη φορά η εφαρμογή μιας καθιερωμένης σύστημα απτενίου-φορέα που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να χαρακτηρίσει και οριοθετηθούν εξαρτώμενη ειδικών Τ-κυττάρων αποκρίσεις Β-κυττάρων των δυνητικών ανοσορυθμιστική γλυκοπρωτεΐνης με βάση τα φυτικά φάρμακα συνδυασμών

in vivo

Παράθεση:. Sekhon BK, Roubin RH, Li Υ, Devi PB, Nammi S, Fan K, et al. (2016) Αξιολόγηση Επιλεγμένων Ανοσορρυθμιστικά γλυκοπρωτεΐνες ως συμπλήρωμα του καρκίνου ανοσοθεραπεία. PLoS ONE 11 (1): e0146881. doi: 10.1371 /journal.pone.0146881

Συντάκτης: Valerie Α Ferro, University of Strathclyde, Ηνωμένο Βασίλειο

Ελήφθη: 12 Αυγ. 2015? Αποδεκτές: 24 Δεκ 2015? Δημοσιεύθηκε: 22 Ιανουαρίου 2016

Copyright: © 2016 Sekhon et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Όλη η δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση: το έργο υποστηρίχθηκε από Cancer Institute NSW:. DMS? Εθνικό Ινστιτούτο συμπληρωματικά φάρμακα. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

εισαγωγή

Αποφυγή ανοσοκαταστροφή έχει κριθεί ως αναδυόμενη χαρακτηριστικό γνώρισμα του καρκίνου [1]. Ειδικότερα, η απουσία ισχυρών καρκίνο αντιγόνων, απώλεια της MHC τάξης Ι, ή διεγερτική ή συν-διεγερτικά μόρια μπορεί να οδηγήσει σε αποτυχία της αναγνώρισης των Τ-κυττάρων, της παρουσίασης αντιγόνου και την εξάλειψη του όγκου [2,3]. Οι παρενέργειες που σχετίζονται με τη χημειοθεραπεία θέσεις πρόσθετη επιβάρυνση στην ικανότητα του ξενιστή να εξαπολύσουν μία αποτελεσματική ανοσοαπόκριση έναντι αντιγόνων και το εξασθενημένο ανοσοποιητικό σύστημα είναι επομένως ευάλωτο σε μολύνσεις δυνητικά απειλητικές για τη ζωή [4]. Απόπειρες στόχευσης και τόνωση της ανοσολογικής απόκρισης του κατασταλεί ξενιστή έναντι τέτοιων επιθέσεων έχει συναντήθηκε με ανάμεικτα επιτυχία στην παροχή αποτελεσματικών θεραπειών. Αν και διάφορες ανοσοθεραπευτικές προσεγγίσεις, όπως τα δενδριτικά εμβολιασμό κυττάρων έχουν χαμηλή τοξικότητα, δυστυχώς σπάνια υπερβαίνουν αντικειμενική κλινική ποσοστό ανταπόκρισης του όγκου του 15% [5]. Θεραπείες, όπως η ογκο-διηθητικά λεμφοκύτταρα έχουν (TILs) πρωτόκολλα αξιολογήθηκε πρόσφατα σε μια συγκεντρωτική ανάλυση εκθέσεων ένα πλήρες ποσοστό ανταπόκρισης 20%, με συνολικό ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης 70% σε ασθενείς με μελάνωμα [6]. Cytokine θεραπείες, ιδίως την συστημική χορήγηση της IL-12 έχουν συσχετιστεί με σοβαρές παρενέργειες και ένα πολύ στενό θεραπευτικό δείκτη [7]. Λίγοι τέτοιες κλινικές δοκιμές χορήγηση IL-12 σε ασθενείς με καρκίνο έδειξαν ενθαρρυντικά αποτελέσματα [7]. Ωστόσο, η ανοσοθεραπεία με άλλες ιντερλευκίνες, όπως η υψηλή δόση IL-2 εξακολουθεί να είναι μια αποτελεσματική θεραπεία για τα τελευταία 20 χρόνια σε ασθενείς με μεταστατικό νεφροκυτταρικό καρκίνωμα, που προσδίδει καλά τεκμηριωμένες πλήρης ανθεκτικό αποκρίσεις σε 10-15% των ασθενών επιλέξτε [8] . Οι θεραπείες μεσολάβηση αντισωμάτων όπως η ανάπτυξη μονοκλωνικών αντισωμάτων έχουν χρησιμοποιηθεί για τη στόχευση επιτυχώς διάφορους υποδοχείς, συμπεριλαμβανομένων του VEGF, EGFR, Her-2 ασκώντας διάφορες επιδράσεις επί διαφορετικών καρκίνων με αποτέλεσμα την παρατεταμένη επιβίωση [9]. Ειδικότερα, η ανάπτυξη του πλήρως εξανθρωπισμένου ipilimumab IgG1 μονοκλωνικό αντίσωμα στοχεύει το κυτταροτοξικό Τ λεμφοκύτταρο αντιγόνο-4 (CTLA-4) επί της επιφανείας των βοηθητικών Τ-κυττάρων αναστέλλοντας έτσι την ανάπτυξη της ανοσολογικής ανοχής. Ipilimumab έχει εγκριθεί από το FDA για τη θεραπεία του μελανώματος [10]. Πιο πρόσφατα, η ανακάλυψη του MDX-1106 (nivolumab), ένα πλήρως εξανθρωπισμένου στόχων αναστολέα IgG4 οδοφράγματος προγραμματισμένος θάνατος 1 (PD-1) ασκώντας ανοσοκατασταλτικά αποτελέσματα επί Τ-κυττάρων πρόληψη ανοχής. Οι φάσεις Ι και ΙΙ μελέτες έχουν διεξαχθεί σε διάφορες μορφές καρκίνου, δείχνει αντικειμενικές ανταποκρίσεις του όγκου και βελτίωση της συνολικής επιβίωσης των ασθενών προχωρημένο μελάνωμα [11]. Ως αποτέλεσμα, nivolumab έχει εγκριθεί από το FDA για τη θεραπεία ασθενών με ανεγχείρητο ή μεταστατικό μελάνωμα που δεν είναι πλέον ανταποκρίνονται σε άλλα φάρμακα, και σε ασθενείς με μεταστατικό πλακώδους μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) με πρόοδο κατά ή μετά με βάση την πλατίνα χημειοθεραπεία. Ο στόχος είναι να αναπτύξει και να συνδυάσουν διάφορες θεραπευτικές στρατηγικές μαζί που προσφέρουν ευρύ φάσμα επιπτώσεων με δυνητικά μικρότερη τοξικότητα, ελαχιστοποιώντας ταυτόχρονα την αντίσταση, βελτιώνοντας έτσι τα αποτελέσματα της θεραπείας για τα άτομα με καρκίνο. Η θαλιδομίδη είναι ένα τέτοιο φάρμακο που χρησιμοποιείται για την αποτελεσματική διαχείριση του πολλαπλού μυελώματος, που έχουν πολύπλοκη, αλλά πολύπλευρη επιπτώσεις, συμπεριλαμβανομένων ισχυρή κυτταροτοξική και ανοσορρυθμιστικές δραστηριότητες [12]. Ειδικότερα, η θαλιδομίδη έχει την ικανότητα να διεγείρει προγνωστικά σημαντικές κυτταροτοξικά Τ-κύτταρα αποκρίσεις σε ασθενείς με πολλαπλό μυέλωμα [13] και Waldenström μακροσφαιριναιμία [14].

Πολυάριθμες διατροφικές παρεμβάσεις έχουν δείξει δυναμικό στην ρύθμιση της dsyregulated ανοσολογική απόκριση. Ειδικότερα, παράγωγα μανιτάρι έχουν μελετηθεί καλά και είναι γνωστό ότι διαθέτουν ανοσο-διεγερτικές επιδράσεις, αλλά σαφή απόδειξη της ικανότητας τους να αυξάνουν ανοσολογικές αποκρίσεις έναντι ειδικών αντιγόνων εμφανίζεται σιγά σιγά [15]. Πρωτεΐνη δεσμευμένο πολυσακχαρίτες ή polysaccharopeptides (PSP), είναι μια κατηγορία ενώσεων που βρίσκονται σε αφθονία σε ορισμένα μανιτάρια και έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως ως τροποποιητές της βιολογικής απόκρισης (BRM) στην Ανατολική Ασία [16]. PSP προέρχονται από

Coriolus versicolor

έχει αναφερθεί ότι ενισχύουν το ανοσοποιητικό σύστημα, και είναι ένα ισχυρό ανοσορρυθμιστή έναντι καρκίνων και λοιμώξεων [17-19]. Ανοσοδιεγερτικά αποτελέσματα του PSP περιλαμβάνουν ανύψωση του προ-φλεγμονωδών κυτοκινών όπως γ ιντερφερόνη (IFN-γ), ιντερλευκίνες όπως IL-2? δραστικότητα των φυσικών φονικών (ΝΚ) κυττάρου, ενεργοποίηση του συμπληρώματος (C3), και τον πολλαπλασιασμό των Τ-κυττάρων [20]. Είναι σημαντικό, εμείς έχουν αναφερθεί στο παρελθόν ότι η PSP ρυθμίζει προς τα πάνω το ποσοστό των μονοκυττάρων, αλλά δεν μεταβάλλει υποσύνολα Τ-κυττάρων, ΝΚ κύτταρα ή Β-κύτταρα [21]. Ειδικότερα, δεν βρήκαμε σημαντικές διαφορές στην αναλογία CD4 /8 μετά τη θεραπεία PSP [21]. Αυτό το εύρημα υποστηρίζει κλινικές μελέτες που έχουν αναφέρει σημαντικές αλλαγές στην αναλογία CD4 /8 μετά τη θεραπεία PSP [22,23]. Ενώ η προηγούμενη μελέτη μας στο PSP διεξήχθη in vitro, δεν έλαβε υπόψη τα ζητήματα της βιοδιαθεσιμότητας ή τα αποτελέσματά της στο μεταβολισμό του ήπατος. Είναι εύλογο ότι οι αρνητικά αποτελέσματα των Τ-κυττάρων μπορεί να οφείλεται στην απουσία ενός εντελώς άθικτο ανοσοποιητικό τριάδα του DC, Τ και Β-κύτταρα. Η επιβεβαιωτική μελέτη που χρησιμοποιούν ζώα είναι επομένως ζωτικής σημασίας και το αντικείμενο της παρούσας μελέτης.

εξαρτώμενες αποκρίσεις Β-κυττάρων αντίσωμα Τ-κυττάρων, ένα αντιγόνο παραλαμβάνεται από DC ή μακροφάγα παρουσιάζονται σε παρθένα Τ-βοηθητικά κύτταρα όπου συγγενές αλληλεπίδραση μεταξύ Β-κύτταρα μπορεί να συμβεί. Η Β-κυττάρων με την ίδια ειδικότητα ως ιδιαίτερο Τ-κυττάρων καταπίνει και χωνεύει το αντιγόνο και εμφανίζει τα αντιγονικά θραύσματα δεσμεύονται σε μόρια του μοναδικές MHC II επί της επιφανείας του για περαιτέρω παρουσίαση. Ένα Τ-κυττάρων ώριμη αντιστοίχιση αλληλεπιδρά με το Β-κυττάρων και εκκρίνει κυτοκίνες που οδηγούν σε κυτταρική διαίρεση των Β-κυττάρων και παραγωγή αντισωμάτων. Αυτή η διαδικασία μπορεί να οδηγήσει στην παραγωγή της μνήμης Β-κυττάρων (Σχήμα 1).

Η

Είναι ενδιαφέρον ότι, πολλά από τα στοιχεία (συμπεριλαμβανομένης και της δικής μας) υποδηλώνουν μια αύξηση των επιπέδων κυτοκίνης και ανοσολογικών υποσύνολα που παρέχει το ΠΜΣ μη -εξειδικευμένης αλλά ευρείες δραστηριότητες. Είτε PSP εξασκεί εξαρτώμενες αποκρίσεις Β-κυττάρων αντίσωμα Τ-κυττάρων, ή ανεξάρτητος αποκρίσεις Β-κυττάρων αντίσωμα Τ-κυττάρων δεν έχει διασαφηνιστεί εν μέρει λόγω της έλλειψης κατάλληλων δοκιμασιών περιλαμβανομένων ζωικά μοντέλα. Μια προσπάθεια να αξιολογήσει επικουρική αποτελέσματα του εμβολιασμού με γλυκοπρωτεΐνη που βασίζονται σε φυτικά φάρμακα με δυναμικό ανοσοτροποποιητικά (ιδιαίτερα

Astragalus

και ΠΥΠ από

Coriolus versicolor

) σε συνδυασμό με συζεύξεις ΚΙ, έχουν διεξαχθεί [24,25] . Ενώ αυτή η μελέτη ήταν σε θέση να αποδείξει σημαντική επικουρική αποτελέσματα με αυτά τα φυτικά φάρμακα, τα μοντέλα ΚΙ, παρουσιάζουν μια σειρά από περιορισμούς. Πρώτον, η αντίδραση των κυττάρων Β στο σύμπλεγμα πρωτεΐνη KLH είναι μια πολυκλωνική απόκριση σε σχέση με ένα ευρύ ρεπερτόριο αντιγονικών επιτόπων καθιστώντας τον προσδιορισμό των ειδικών αποκρίσεων όπως αποκρίσεις που εξαρτώνται από Β-κυττάρων Τ-κυττάρων αδύνατη. Δεύτερον αυτό εξαρτώμενη απόκριση Τ-κυττάρων Β-κυττάρων στο μοντέλο KLH εκτείνεται σε μια παρατεταμένη διάρκεια καθιστά δύσκολο να γίνει διάκριση μεταξύ των άμεσων και έμμεσων επιδράσεων. Τα ανοσοενισχυτικά αποτελέσματα του εμβολιασμού με γλυκοπρωτεΐνη που βασίζονται φυτικά φάρμακα σε αυτή τη μελέτη KLH είναι πιθανό να είναι ευρεία και μη ειδική. Συνεπώς, οι διευθύνσεις μοντέλο NP-CGG τόσο αυτοί οι περιορισμοί του μοντέλου KLH να είναι σε θέση να προσδιορίσει άμεση και συγκεκριμένη εξαρτώμενη από Β-κυττάρων Τ-κυττάρων ανοσοενισχυτικά αποτελέσματα του ανοσοδιαμορφωτικού φυτικών φαρμάκων σε συνδυασμό με παράγοντες ανοσο. Προκειμένου να μεγιστοποιηθεί η σπληνική ανοσολογική απόκριση, NP-CGG χορηγήθηκε μέσω της ί.ρ. διαδρομή. Δεδομένου ότι αυτό είναι μια μηχανιστική μελέτη για την επιβεβαίωση προσαρμοστική ανοσία, δεν υπάρχει καμία ενδεχόμενη κλινική εφαρμογή για το μοντέλο NP-CGG μέσω της ε.π. την ίδια διαδρομή. Με τη μέτρηση των ειδικών αποκρίσεων αντι-ΝΡ σε διαφορετικά χρονικά σημεία, μια σύγχρονη Τ-κυττάρων-εξαρτώμενη απόκριση των Β-κυττάρων μπορεί να περιγραφεί με σαφήνεια.

Αναφέρουμε εδώ για πρώτη φορά η εφαρμογή μιας καθιερωμένης απτένιο -carrier σύστημα NP-CGG να χαρακτηρίσει και να οριοθετηθούν τα ειδικά Τ-κυττάρων που εξαρτάται ανοσολογικές αποκρίσεις των Β-κυττάρων με την παρουσία PSP, μια ευρέως χρησιμοποιούμενη ανοσοενισχυτικό για ανοσοθεραπεία καρκίνου. Τ-κυττάρων αποκρίσεις Β-κυττάρων που εξαρτάται αντίσωμα, ειδικότερα, έχει τεράστιες δυνατότητες για την απονομή προσαρμοστική ανοσία έναντι αντιγόνων καρκίνου (αυξημένη απληστία) [26-28]. Ως εκ τούτου, η ικανότητα PSP να ασκήσει Τ-κυττάρων που εξαρτάται αποκρίσεις

in vivo

συνέπεια είναι ιδιαίτερα επιθυμητή και έχει διερευνηθεί στην παρούσα μελέτη.

Υποθέσαμε ότι στο μοντέλο NP-CGG, PSP εξασκεί ανοσολογική του αποτελεσμάτων μέσα εξαρτώμενη Τ-κυττάρων αλληλεπιδράσεις κυττάρων-Β με μεταβολή της μετέπειτα ανοσοσφαιρίνης (Ig) κατηγορίας ισοτύπου καθώς η ποσότητα του Ig σε ζώα αρχικά αμφισβητήθηκε από ΝΡ-CGG και στη συνέχεια δίνεται PSP.

Ενώ είναι καλά Διαπιστώθηκε ότι σε αυτό το μοντέλο παραγωγής αιχμή αντίσωμα συγκεκριμένων κατηγοριών λαμβάνει χώρα σε συγκεκριμένα χρονικά σημεία (IgM = ημέρα 10, IgG = 14η ημέρα, IgA = ημέρα 18 [29]), κάθε αύξηση κατά PSP μπορεί να προσδιοριστεί εύκολα. Έχει προηγουμένως δειχθεί ότι για πρωτογενή αποκρίσεις έναντι ΝΡ, υπάρχει μια αρχική φάση υστέρησης 3-4 ημέρες εκκίνησης των Τ-κυττάρων [30]. Στη συνέχεια, τα NP-ειδικά Β-κύτταρα θα προσληφθούν σε σπληνός αποκρίσεις αντισωμάτων, ενεργοποιείται και αυξάνεται με γεωμετρική πρόοδο. Αυτά τα Β-κυτταρικοί κλώνοι στη συνέχεια είτε να εξελιχθεί σε βραχύβια plasmablasts σε extrafollicular εστίες, ή μεταναστεύουν μέσα ωοθυλάκια όπου σχηματίζουν βλαστικού κέντρου μακρόβια κύτταρα πλάσματος. Όχι μόνο οι διάρκειες ζωής των κυττάρων του πλάσματος από τις δύο αυτές πηγές διαφέρουν, οι βλαστικού κέντρου προερχόμενα κύτταρα πλάσματος έχουν βρεθεί να είναι πολύ μεγαλύτερες χημικές συγγένειες προς το συγκεκριμένο ανοσογόνο [30]. Αυτή η βελτιωμένη αντιγόνου-αντισώματος τύφλωση θα έχει ένα σημαντικό ρόλο για την αποτελεσματική λειτουργίες δράστη των Β-κυττάρων, και έτσι κλινικά σχετική επιπτώσεις. Ο σκοπός της μελέτης ήταν να καθορίσει τις αποκρίσεις αντισώματος σε διάφορα χρονικά σημεία και να αξιολογήσει την κατηγορία ανοσοσφαιρίνης που παράγεται. Η μελέτη μας μας επιτρέπει να διευκρινιστεί ο μηχανισμός της δράσης ενός κλινικά χρήσιμη φυτοθεραπεία ως συμπλήρωμα στη διαχείριση του καρκίνου. Acacia είναι ένα πολύ γνωστό ανοσοενεργοποιητής, όπου οι μελέτες έχουν δείξει ότι το κόμμι ακακίας μπορεί να ενεργοποιήσει δενδριτικά κύτταρα [31], παρέχουν έμφυτη και επίκτητη ανοσία (Strobel και Ferguson, 1982) [32], καθώς και να ασκήσει αντι-παρασιτικές επιδράσεις

στο vivo

[33]. Επιπλέον, Strobel και άλλοι (1986) βρήκαν ότι μεταγενέστερα κόμμι ακακίας μπορούν να χρησιμοποιηθούν για να επάγουν στοματική ανοχή, ανάλογα με το μοντέλο που χρησιμοποιήθηκε [34]. Στη μελέτη μας, κόμμι ακακίας χρησιμοποιήθηκε ως ανοσοδυναμικοποιητή να διερευνήσει τις συνδυασμένες επιπτώσεις με το PSP για να διαπιστώσει αν τα Τ-κυττάρων που εξαρτάται Β-κύτταρα απαντήσεις αυξημένη σε σύγκριση με μόνη

Υλικά και Μέθοδοι

Ζώα και δίαιτα

5 εβδομάδες παλιά C57BL /6 αρσενικά ποντίκια ελήφθησαν από το Κέντρο ζώων πόρων (Canning Vale, Αυστραλία) και διατηρήθηκε σε ένα συγκεκριμένο παθογόνο ελεύθερη εγκατάσταση με ακτινοβολημένα τρόφιμα και νερό κατά βούληση.

Όλες οι διαδικασίες ζώων πραγματοποιήθηκαν σε αυστηρή συμφωνία με τις συστάσεις των λειτουργικών διαδικασιών του εργαστηρίου ζώων Υπηρεσίες πρότυπο και τις πολιτικές που αναπτύχθηκε από το Πανεπιστήμιο του Σίδνεϊ. Το πρωτόκολλο εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας Ζώων του Πανεπιστημίου του Σίδνεϊ (Έγκριση αριθ: L24 /2 έως 2.007 /1/4484). Ανατρέξτε στο διάγραμμα ροής στο σχήμα 2. Όλα τα ποντίκια παρακολουθούνται τακτικά και ειδικά μετά από υπερκορεσμό και ανοσοποίησης για οποιεσδήποτε δυσμενείς θέματα υγείας και διαχειρίζονται ανάλογα. Κατάλληλες μέθοδοι για την ευθανασία διεξήχθησαν.

5 εβδομάδων ποντίκια αφέθηκαν να εγκλιματιστούν για μία εβδομάδα, που έχουν ανοσοποιηθεί με ΝΡ

25-CGG σε 6 εβδομάδες, ομάδες ποντικών έπειτα καθετηριάζονται καθημερινά με PSP, ακακία ή MQ για μέχρι 21 ημέρες και θυσιάζονται σε διάφορα χρονικά σημεία (ημέρες 0, 4, 7, 10, 14 και 21).

Η

Ανοσοποίηση και αντιγόνο

4-υδροξυ 3-νιτροφαινυλακετυλ (ΝΡ) απτένιο συζευγμένο με σφαιρίνη γ κοτόπουλου (CGG) (NP

25-CGG? Biosearch Technologies, Novato, CA) καταβυθίστηκε σε στυπτηρία [35]. 6 εβδομάδων ανοσοποιήθηκαν με 50 μg στυπτηρία ίζημα (σε 200 μL PBS) εγχύθηκαν ί.ρ. κατά την έναρξη (ημέρα 0) και στη συνέχεια χωρίστηκαν σε 4 ομάδες: NPCGG = κανένας έλεγχος διασωλήνωση ή χωρίς θεραπεία, έλεγχος MQ = MQ όχημα νερού, ACACIA = κόμμι ακακίας, PSP = PSP αντιμετωπίζονται

PSP και ορό συλλογή

Polysaccharopeptide (PSP) που προέρχεται από την κινεζική

Cov-1

στέλεχος του

λήφθηκε Coriolus versicolor

(Winsor Health Products Ltd, Χονγκ Κονγκ) και περιγράφηκε προηγουμένως [21]. PSP αιωρήθηκε σε 5% αποστειρωμένο κόμμι ακακίας σε νερό MQ (Sigma, St. Louis, ΜΟ, USA) σε μια τελική συγκέντρωση 5 mg /ml. 50 mg /kg (200 μΙ) του PSP χορηγήθηκε καθημερινά στους ποντικούς στην ομάδα θεραπείας με από του στόματος καθετηριασμό (PSP) και σταμάτησε μετά από 21 ημέρες. Από κόμμι ακακίας ήταν η ανοσορρυθμιστική δυναμικό αναφοράς για τη μελέτη, PSP χορηγήθηκε μαζί με κόμμι ακακίας. Τυχόν ανοσοτροποποιητικές επιδράσεις της PSP θα αναμενόταν να είναι μεγαλύτερες από εκείνες του κόμμι ακακίας. Τα υπόλοιπα ποντίκια ήταν έλεγχοι και κόμμι ακακίας χορηγηθούν (ακακία), MQ νερό (MQ), ή χωρίς καθετηριασμό (NP-CGG). PSP δεν χορηγήθηκε σε ποντικούς στην ομάδα MQ

Ομάδες των 6 ποντικών στη συνέχεια θυσιάστηκαν διαδοχικά στη βασική γραμμή (ημέρα 0).? 4, 7, 10, 14 και 21 ημέρες μετά την ανοσοποίηση. PSP και ακακία αγωγή ποντικοί θανατώθηκαν κατά τις ημέρες 4, 7, 10, 14 και 21? ενώ MQ και ΝΡ-CGG ποντικούς που υπέστησαν αγωγή θυσιάστηκαν στις ημέρες 10 και 21. Ο ορός συλλέχθηκε σε όλα αυτά τα χρονικά σημεία.

Σύζευξη ηλεκτριμιδίου εστέρα ΝΡ στους μεταφορείς πρωτεΐνη

Χρησιμοποιώντας τη μέθοδο με Lalor [36], η ηλεκτριμιδίου εστέρας του ΝΡ (4-υδροξυ-5-ιωδο-3-νιτροφαινυλο) καπροϊκό-ο-σουκκινιμίδιο (ΝΙΡ-OSu) (Biosearch Technologies, Novato, CA, USA) συζεύχθηκε με βόεια λευκωματίνη ορού (BSA? Sigma) αποδίδοντας μια αναλογία κατά προσέγγιση υποκατάσταση των NP

2-BSA και ΝΡ

18-BSA, αντίστοιχα.

Ανίχνευση NP-ειδικών αντισωμάτων στον ορό με ELISA

NP-ειδικό ορό IgM, IgG, IgA και IgE ποσοτικοποιήθηκαν με ELISA σε διάφορα χρονικά σημεία. Για να καθοριστεί εάν το PSP ήταν σε θέση να αυξήσει την πρωτίστως πρώιμη απόκριση αντισώματος IgM σε NP-CGG που κορυφώνεται την ημέρα 10, μετρήσαμε τα επίπεδα των ποντικών ορού σε 0, 4, 7, 10, 14 και 21 ημέρες μετά την ανοσοποίηση. Ομοίως για την αξιολόγηση αλλαγών στις αποκρίσεις IgA προς NP-CGG οποία κορυφώνεται την ημέρα 18, μετρήσαμε τα επίπεδα τίτλων ορού των ποντικών σε 0, 10, 14 και 21 ημέρες μετά την ανοσοποίηση. Για να εξεταστεί εάν το PSP έχει τη δυνατότητα να αυξήσει μακροπρόθεσμες ανοσολογικές αποκρίσεις που συμβαίνουν μετά την 14 ημερών από την ανοσοποίηση, μετρήθηκε υψηλή συγγένεια και συνολική αποκρίσεις αντισωμάτων IgG σε NP-CGG με άμεση ELISA χρησιμοποιώντας ΝΡ

2-BSA και ΝΡ

18-BSA αντίστοιχα, όπως πρωτεΐνη επικάλυψης. Τίτλοι ορού προσδιορίστηκαν σε 0, 4, 7, 10, 14 και 21 ημέρες μετά την ανοσοποίηση για NP

25-CGG. Να αποκλείσει τυχόν φλεγμονώδεις ή αλλεργικές αντιδράσεις που μπορεί να έχουν συμβεί ως απάντηση στην χορήγηση PSP για μια παρατεταμένη χρονική περίοδο, μετρήσαμε τα επίπεδα IgE τίτλος 7 ημέρες μετά την ανοσοποίηση. Εν συντομία πλάκες 96-φρεατίων επικαλύφθηκαν με είτε 100 μΙ 5 μg /ml NP

2-BSA ή ΝΡ

18-BSA σε 0,5 Μ ανθρακικού ρυθμιστικού διαλύματος (ρΗ 9.6) στους 4 ° C όλη τη νύχτα και φράχθηκαν με 1% BSA σε PBS. Μετά από τέσσερις εκπλύσεις με PBS που περιέχει 0.05% Tween 20 (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA), σειριακά αραιωμένο δείγματα ορού προστέθηκαν σε κάθε φρεάτιο εις διπλούν και επωάστηκαν για 1 ώρα στους 37 ° C σε υγροποιημένη κουτί. Μετά την πλύση, συζευγμένο με βιοτίνη αντι-ποντικού κατσίκας IgM, IgG, IgA (Caltag Laboratories) ή IgE (Southern Biotech) αραιώσεις κυμαινόμενες από 1: 3000 έως 1: 10.000 προστέθηκαν και επωάστηκαν για 1 ώρα στους 37 ° C σε υγροποιημένη κουτί . δραστηριότητα SA-HRP εμφανίσθηκε με τη χρήση Ο-φαινυλενοδιαμίνης (OPD? Sigma). Μετά την ανάπτυξη η έγχρωμη αντίδραση διακόπηκε με 50 μΐ 20% Η

2SO

4 και οπτικές πυκνότητες προσδιορίστηκαν στα 492 nm χρησιμοποιώντας αναγνώστη πλακός Polarstar (BMG Labtech, Αυστραλία). Θετικοί οροί μάρτυρες συμπεριλήφθηκαν έτσι ώστε θα μπορούσαν να παραχθούν πρότυπες καμπύλες βαθμονόμησης για τον προσδιορισμό της σχετικής τίτλων αντισωμάτων.

Στατιστική ανάλυση

Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση της μη παραμετρικής Kruskall-Wallis ή

post-hoc

Mann-Whitney τεστ κατά περίπτωση. Η στατιστική σημαντικότητα επιτεύχθηκε όταν p & lt? 0.05 σε σύγκριση με τις ομάδες ελέγχου.

Αποτελέσματα

Acacia και το PSP δεν έχουν καμία επίδραση στο σωματικό βάρος και τη σπλήνα

Όπως PSP και ακακίας και οι δύο είναι γνωστό ότι είναι άνοσο, το είναι εύλογο ότι οι ενισχυμένες ανοσολογικές αντιδράσεις που προκαλούνται από αυτούς τους παράγοντες στο μοντέλο NP-CGG είναι πιθανό να συμβεί στο σπλήνα και να αντικατοπτρίζεται στις αλλαγές στο βάρος σπλήνας. Το σωματικό βάρος εκτιμήθηκε επίσης να αντιστοιχούν με τις αλλαγές στο βάρος σπλήνα και αποκλείει οποιαδήποτε δυσμενή αποτελέσματα των PSP και ακακίας που μπορεί αντίθετα να δει σε μια μείωση στο βάρος του σώματος. Δεν βρήκαμε καμία σημαντική διακύμανση στα βάρη σώματος των ποντικών πριν ή κατά τη διάρκεια της ανοσοποίησης (Πίνακας 1). Ούτε υπήρξε σημαντική μεταβολή στα βάρη σώματος των ποντικών σε μεταξύ ομάδων ή σε διαφορετικά χρονικά σημεία, εκτός από την ημέρα 21, όπου NPCGG και MQ (Ρ & lt? 0,05) εκεί ήταν σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με ACACIA (Πίνακας 2). Υπάρχει μια τάση αύξησης του βάρους σπλήνας δει από τις ημέρες 7-14 στην ομάδα ACACIA παρόλο που η αύξηση αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική. Συνολικά δεν υπήρχε σημαντική διακύμανση των βαρών σπλήνα στο θάνατο μεταξύ των ομάδων (Πίνακας 3).

Η

Η

PSP μειώνεται NP-συγκεκριμένα επίπεδα τίτλος IgM στις ημέρες 4 και 21

αξιολογούνται τα επίπεδα τίτλου IgM δεδομένου ότι είναι το πρώτο αντίσωμα να παράγονται από Β-κύτταρα έναντι ενός αντιγόνου σε ποντίκια όσο και στους ανθρώπους και είναι ιδιαίτερα ισχυρός στην ενεργοποίηση του συστήματος συμπληρώματος. επίπεδα τίτλος IgM εκτιμήθηκαν σε κάθε χρονικό σημείο (ημέρα 4, 7, 10, 14 και 21), προκειμένου να καθοριστεί αν το PSP σε συνδυασμό με Acacia θα μπορούσε να αυξήσει το γνωστό επίπεδο τίτλος IgM, σύμφωνα με τον πρότυπο ΝΡ-CGG. Σε αυτό το μοντέλο θα περιμέναμε ότι το επίπεδο τίτλος IgM να κορυφωθεί κατά την ημέρα 10. Τυχόν αποκλίσεις, όπως μια αλλαγή στην κορυφή αυτή ή νωρίτερα ή αργότερα οι αλλαγές θα πρέπει να αντικατοπτρίζεται σε αυτό το μέγιστο που συμβαίνουν σε διαφορετικά χρονικά σημεία. Είναι ενδιαφέρον ότι βρήκαμε μια σημαντική μείωση στον ορό επίπεδα τίτλων ΝΡ ειδικών IgM στα ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με PSP τις ημέρες 4 και 21 (σχήμα 3Β και 3F) σε σύγκριση με εκείνους που έλαβαν με την ακακία (Ρ & lt? 0,05). Αντίθετα, βρήκαμε μια σημαντική αύξηση στην ομάδα ACACIA σύγκριση με την ομάδα ελέγχου NP-CGG (Ρ & lt? 0,05) κατά την ημέρα 21 (Σχήμα 3F). Η ομάδα MQ παρουσίασε μικρή αύξηση σε συγκεκριμένα επίπεδα IgM ορού τίτλος NP την ημέρα 10 η οποία είναι περισσότερο εμφανής κατά την 21η ημέρα (Σχήμα 3D και 3F), παρόλο που δεν ήταν σημαντικά διαφορετικές από οποιαδήποτε από τις άλλες ομάδες. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στα συγκεκριμένα επίπεδα τίτλος IgM ΝΡ σε 7, 10 ή 14 ημέρες μετά την ανοσοποίηση στις ομάδες PSP ή ακακία ούτε στην MQ ή ομάδες NP-CGG ελέγχου (Ρ & gt? 0,05) (Σχ 3C-3E).

C57BL /6 ποντίκια ανοσοποιήθηκαν με ΝΡ

25CGG και συλλέχθηκε ορός τις ημέρες 0, 4, 7, 10, 14 και 21. NP-ειδικούς τίτλους IgM μετρήθηκαν από δύο φορές σε σειριακά αραιωμένου ( 1 /40-1 /80) δείγματα ορού με ELISA. ACACIA αυξηθεί σημαντικά απαντήσεις NP-ειδικά IgM κατά την ημέρα 21 σε σύγκριση με μόνη NP-CGG. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως η μέση από δύο ανεξάρτητα πειράματα με 5-6 ποντίκια ανά ομάδα. * P & lt? 0.05.

Η

PSP αυξάνει NP-συγκεκριμένα επίπεδα τίτλος IgG κατά την ημέρα 4

Εμείς αξιολογούνται τα επίπεδα IgG όπως δεδομένου ότι ακολουθούν την παραγωγή IgM και IgA αν και πιο ισχυρή σε μακροπρόθεσμα δευτερογενή ανοσολογική αποκρίσεις, επίπεδα τίτλων IgG εκτιμήθηκαν σε κάθε χρονικό σημείο (ημέρα 4, 7, 10, 14 και 21), προκειμένου να καθοριστεί αν το PSP σε συνδυασμό με Acacia θα μπορούσε να αυξήσει το γνωστό επίπεδο τίτλος IgG, σύμφωνα με τον πρότυπο ΝΡ-CGG. Σε αυτό το μοντέλο θα περιμέναμε ότι το επίπεδο τίτλου IgG να κορυφωθεί την ημέρα 14. Τυχόν αποκλίσεις, όπως μια αλλαγή στην κορυφή αυτή ή νωρίτερα ή αργότερα οι αλλαγές θα πρέπει να αντικατοπτρίζεται σε αυτό το μέγιστο που συμβαίνουν σε διαφορετικά χρονικά σημεία. Βρήκαμε μια σημαντική αύξηση στην χαμηλή συγγένεια NP-ειδικών IgG επίπεδα τίτλων στον ορό σε ποντικούς που υπέστησαν αγωγή με PSP την ημέρα 4 σε σύγκριση με ACACIA (Ρ & lt? 0,05) όπως φαίνεται στο Σχήμα 4. Αυτή η αύξηση της στάθμης τίτλος κατά την ημέρα 4 παρουσιάζεται πολύ νωρίτερα από το αναμενόμενο. Η αναλογία μεταξύ της έκφρασης του συνολικού υψηλή συγγένεια με τον χαμηλής συγγένειας NP-ειδική απόκριση αντισώματος IgG ήταν σημαντική για ACACIA την ημέρα 4 (Ρ = 0,008) σε σύγκριση με PSP (Σχήμα 4). Η ομάδα MQ έδειξε μια μικρή αύξηση στα επίπεδα τίτλου ορού ΝΡ ειδικών IgG κατά την ημέρα 10 η οποία είναι περισσότερο εμφανής κατά την 21η ημέρα (Σχήμα 4D και 4F) για αποκρίσεις τόσο η συνολική υψηλή συγγένεια και χαμηλή συγγένεια, αν και δεν ήταν σημαντικά διαφορετικά από οποιοδήποτε από τα άλλες ομάδες.

η έκφραση της συνολικής υψηλής συγγένειας και χαμηλής συγγενείας NP-ειδικών IgG τίτλοι μετρήθηκαν από δύο φορές διαδοχικά αραιωμένα δείγματα ορού (από 1 /40-1 /80 για την ημέρα 4 έως 1 /8000- 1/10000 για την ημέρα 10 και μετά) με τη χρήση ΝΡ

2 ανά BSA (NP

2) και NP

18 ανά BSA (NP

18) αντίστοιχα με ELISA. Η χαμηλή συγγένεια NP-ειδικές αποκρίσεις IgG αντισώματος σε ACACIA ήταν σημαντικές κατά την ημέρα 4, αλλά σε κανένα άλλο χρονικό σημείο (7 ημέρες, 10, 14 ή 21) σε σύγκριση με PSP. Η αναλογία μεταξύ της έκφρασης του συνόλου των υψηλής συγγένειας και χαμηλής συγγενείας NP-ειδικών IgG αποκρίσεις ήταν σημαντική για ACACIA την ημέρα 4 σε σύγκριση με το PSP. ΝΡ

2 βασικής γραμμής πολύ χαμηλή (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως η μέση από δύο ανεξάρτητα πειράματα με 5-6 ποντίκια ανά ομάδα. * P & lt? 0.05.

Η

Σε γενικές γραμμές, δεν βρήκαμε σημαντικές διαφορές στην έκφραση του συνόλου των υψηλής συγγένειας ή χαμηλής συγγένειας NP-συγκεκριμένα επίπεδα ορού IgG σε NP-CGG σε οποιοδήποτε από τα άλλα χρονικά σημεία ή ομάδες (P & gt? 0,05).

PSP δεν μεταβάλλει NP-συγκεκριμένα επίπεδα IgA τίτλο

Εμείς αξιολογούνται τα επίπεδα IgA τίτλο, δεδομένου ότι είναι το πρώτο επίπεδο της άμυνας ενεργεί ως εξουδετερωτικών αντισωμάτων έναντι αντιγόνων που εισβάλλουν μέσω του βλεννογόνου. επίπεδα τίτλων IgA αξιολογήθηκαν σε κάθε χρονικό σημείο (ημέρα 4, 7, 10, 14 και 21), προκειμένου να καθοριστεί αν το PSP σε συνδυασμό με Acacia θα μπορούσε να αυξήσει το γνωστό επίπεδο τίτλο IgA, σύμφωνα με τον πρότυπο ΝΡ-CGG. Σε αυτό το μοντέλο θα περιμέναμε ότι το επίπεδο τίτλος IgA να κορυφωθεί την ημέρα 18. Τυχόν αποκλίσεις, όπως μια αλλαγή στην κορυφή αυτή ή νωρίτερα ή αργότερα οι αλλαγές θα πρέπει να αντικατοπτρίζεται σε αυτό το μέγιστο που συμβαίνουν σε διαφορετικά χρονικά σημεία. Ως εκ τούτου, δεν βρήκαμε σημαντικές διαφορές στα NP-συγκεκριμένα επίπεδα ορού IgA σε οποιοδήποτε από τα χρονικά σημεία που διερευνώνται, ούτε σε καμία από τις ομάδες (P & gt? 0,05). (Σχήμα 5)

Μετά την NP- CGG ανοσοποίηση καμία αλλαγή σε αποκρίσεις αντισώματος IgA παρατηρήθηκαν σε οποιοδήποτε χρονικό σημείο (ημέρα 0, 10, 14 ή 21) για να PSP ή ακακία. NP-ειδικούς τίτλους IgA μετρήθηκαν από δύο φορές αραιώνονται σειριακά δείγματα ορού (1 /50-1 /100) με ELISA. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως τη μέση από δύο ανεξάρτητα πειράματα με 5-6 ποντίκια ανά ομάδα.

Η

PSP δεν μεταβάλλει NP-συγκεκριμένα επίπεδα τίτλος IgE

Εμείς αξιολογούνται τα επίπεδα IgE τίτλος να αποφανθεί εάν το PSP είναι ικανό να επάγει αλλεργιογόνος δράση σε αυτό το μοντέλο, δεδομένου δέσμευση αντιγόνου μπορεί να πυροδοτήσει την μαστοκυττάρων να απελευθερώσει χημικών μεσολαβητών όπως η ισταμίνη που επάγουν αντι-παράσιτο ανοσίας και αλλεργίας. Δεν βρήκαμε καμία σημαντική αλλαγή στα επίπεδα IgE στις ημέρες 10, 14 ή 21 στην ομάδα που λάμβανε PSP συγκριτικά με την αρχική τιμή (ομάδα ΝΡ-CGG την ημέρα 0 μετά την ανοσοποίηση) (Ρ & gt? 0,05) όπως φαίνεται στο σχήμα 6. Είναι απίθανο ότι PSP εξασκεί αλλεργικές αντιδράσεις σε αυτό το μοντέλο.

Μετά την NP-CGG ανοσοποίηση καμία αλλαγή σε ανταποκρίσεις αντισωμάτων IgE παρατηρήθηκαν σε οποιοδήποτε χρονικό σημείο (ημέρα 4, 7, 10, 14 ή 21) για να PSP NP-ειδικών οι τίτλοι IgE μετρήθηκαν από δύο φορές αραιώνονται σειριακά δείγματα ορού (1 /5-1 /20) με ELISA. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως τη μέση από δύο ανεξάρτητα πειράματα με 5-6 ποντίκια ανά ομάδα.

Η

Συζήτηση

ανοσολογικής τον καρκίνο συμβαίνει όταν οι διαδικασίες ελέγχου του ανοσοποιητικού συστήματος όρασης, οδηγώντας έτσι σε μια αδυναμία να προσδιορίσει σωστά, αποτελεσματικά στοχεύσει και να καταστρέψει τα καρκινικά κύτταρα τα οποία μπορεί να οδηγήσει σε ανάπτυξη όγκου και μετάσταση. Πιο πρόσφατα, «καρκίνος ανοσοδιαμόρφωσης» έχει χρησιμοποιηθεί για να περιγράψει αυτή τη δυναμική διαδικασία της αποβολής, της ισορροπίας και να ξεφύγουν [37]. Ενώ η ανοσοθεραπεία είναι μια καλή στοχευμένη προσέγγιση για την αντιμετώπιση και να αυξήσει την κάθε μία από αυτές τις διαδικασίες, η χρήση των φυτικών φαρμάκων προσφέρει μεγάλη υπόσχεση. Polysaccharopeptides όπως PSK και PSP που προέρχονται από το μανιτάρι

Coriolus versicolor

έχουν μελετηθεί καλά και φιλοδοξούσε να ενισχύσει το ανοσοποιητικό σύστημα με ευρείες δραστηριότητες κατά του καρκίνου, που προσδίδει ένα πλεονέκτημα επιβίωσης σε ασθενείς με καρκίνο [38]. PSK (αλλιώς γνωστό ως κρεστίνη) έχει χρησιμοποιηθεί στην Ιαπωνία ως ανοσοενισχυτικό σε συμβατικές αντικαρκινικές αγωγές από το 1977 [39].

Ομοίως, PSP έχει χρησιμοποιηθεί ως ενισχυτικό του ανοσοποιητικού στην Κίνα και έχει αποτελέσει αντικείμενο 30 χρόνια έρευνας? Ωστόσο, παρά τις εκτεταμένες

in vitro

,

in vivo

και κλινικές μελέτες, η συγκεκριμένη ανοσολογική μηχανισμός δράσης δεν έχει ακόμη προσδιοριστεί σαφώς. Είμαστε οι πρώτοι που αναφέρουν την εφαρμογή μιας καθιερωμένης

in vivo

μοντέλο NP-CGG στα φυτικά φάρμακα με ανοσοθεραπευτικό δυναμικό. Αναφέρουμε ότι το PSP δεν ασκεί συγκεκριμένες ανοσολογικές επιδράσεις μέσω εξαρτώμενη Τ-κυττάρων αποκρίσεις Β-κυττάρων. Αυτό μπορεί να δει σε Ελλείψει σημαντικών αλλαγών στις διάφορες αντι NP-ανοσοσφαιρίνες δοκιμαστεί συμπεριλαμβανομένων των IgM, IgG, IgA ή IgE (Εικόνες 3-6). Παρόλο που παρατηρήθηκε μια στατιστικά σημαντική μείωση στο συγκεκριμένο επίπεδο τίτλος IgM στον ορό σε ποντικούς που υπέστησαν αγωγή PSP τις ημέρες 4 και 21 (σχήμα 3Β και 3F) σε σύγκριση με εκείνους που έλαβαν ACACIA (Ρ & lt? 0,05), τα αποτελέσματα αυτά αν και μικρή είναι ενδεικτικά μιας τάση. Επιπλέον, παρατηρήσαμε μια σημαντική αύξηση του συνολικού επιπέδου τίτλος του ορού IgG σε ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με PSP την ημέρα 4 σε σύγκριση με ACACIA (Ρ & lt? 0,05) όπως φαίνεται στο Σχήμα 4. Από την άποψη των γνωστών μηχανικών του μοντέλου NP-CGG, IgG απαντήσεις είναι πιθανό να συμβεί κατά την ημέρα 14 και μετά [30], αυτές οι πρώιμες αλλαγές που παρατηρούνται είναι μικρές, αλλά χαμηλότερα από το αναμενόμενο. Ενώ PSP δεν μετέβαλλε σημαντικά τα επίπεδα IgE τίτλος σε ποντίκια που έλαβαν θεραπεία με PSP (Σχήμα 6), είναι απίθανο ότι το PSP συμβάλλει σε αλλεργικές αντιδράσεις. Στην παρούσα μελέτη έχουμε επιδείξει μια συνεπή τάση αύξησης σε όλες τις κατηγορίες Ig, εκτός IgE, την ΝΡ-CGG με PSP. Αυτό είναι σύμφωνο με την εναλλαγή IgM σε IgG ισότυπου. IgA απαντήσεις αποκοιμιέμαι την πάροδο του χρόνου, όπως αναμένεται, λόγω της ανοχής που προκαλείται από συνεπή βλεννογόνου διέγερση υπερκορεσμό. Ως εκ τούτου, PSP παράγει μικρές επιπτώσεις στο Τ-κυττάρων που εξαρτάται αποκρίσεις των Β-κυττάρων

in vivo

. Υπάρχει μια τάση αύξησης του βάρους σπλήνας δει από τις ημέρες 7-14 σε βάρος της ομάδας ACACIA με αντίστοιχη μείωση του σωματικού βάρους, αν και η αύξηση αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική. Επιπλέον, δεν παρατηρήσαμε καμία σημαντική μεταβολή στο σωματικό ή σπλήνα βάρη σε οποιαδήποτε από τις ομάδες που μετράται λόγω της προσθήκης του PSP (Πίνακες 2 και 3) ή ανεπιθύμητες ενέργειες που σχετίζονται με την ανοσοποίηση. Αυξημένη σωματικά βάρη μέσα στις ομάδες ήταν όπως αναμενόταν.

Είναι ενδιαφέρον ότι, οι επιπτώσεις της κόμμι ακακίας στις εξαρτώμενες αποκρίσεις Τ-κυττάρων έχουν σημασία. Σε αντίθεση με PSP, βρήκαμε μια σημαντική αύξηση στο επίπεδο τίτλου IgM στην ομάδα ACACIA σύγκριση με την ομάδα ΝΡ-CGG (Ρ & lt? 0,05) κατά την ημέρα 21 (Σχήμα 3F), η οποία είναι μεταγενέστερη από την αναμενόμενη ως IgM κορυφές σε ημέρες 10. Είναι ενδιαφέρον ότι, η αναλογία μεταξύ της έκφρασης του συνολικού υψηλής συγγένειας και χαμηλής συγγενείας -NP-ειδική απόκριση αντισώματος IgG ήταν σημαντική για ACACIA την ημέρα 4 (Ρ = 0,008) σε σύγκριση με PSP (Σχήμα 4), επίσης συμβαίνουν νωρίτερα από το αναμενόμενο. Υπήρξε μια μικρή αλλά μη σημαντική αύξηση στον ορό ΝΡ ειδικών IgM και IgG τίτλος επίπεδα για MQ, ειδικά κατά την ημέρα 21, η οποία μπορεί να οφείλεται στο μεγαλύτερο μεταβολή των επιμέρους αποκρίσεις που παρατηρούνται εντός αυτής της συγκεκριμένης ομάδας (Ρ & gt? 0,05). Επιπλέον, δεν βρήκαμε σημαντικές διαφορές στην έκφραση της συνολικής υψηλής συγγένειας ή χαμηλής συγγένειας επίπεδα ορού IgG σε NP-CGG σε οποιοδήποτε από τα άλλα χρονικά σημεία ή ομάδες (Ρ & gt? 0,05). Αν και αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι θα μπορούσαν να επηρεάσουν ACACIA εξαρτώμενη Τ-κυττάρων αποκρίσεις Β-κυττάρων, οι φορές διαφορές είναι μικρές και θα πρέπει να επιβεβαιωθεί. Μελέτες έχουν δείξει ότι το κόμμι ακακίας μπορούν να ενεργοποιήσουν τα δενδριτικά κύτταρα [31], παρέχουν έμφυτη και προσαρμοστική ανοσία, καθώς ασκούν αντι-παρασιτικές επιδράσεις

in vivo

.