Abstract

Ιστορικό

αμφιρεγουλίνη, ένας συνδέτης του υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR), συνδέεται με την αποτελεσματικότητα του cetuximab, ένα αντίσωμα έναντι EGFR, ως θεραπεία για καρκίνο του παχέος εντέρου ( CRC). Σε αντίθεση, η heregulin συνδέτη HER3 συσχετίζεται με αντίσταση cetuximab. Στην παρούσα μελέτη, αξιολογήσαμε το πώς τα συνδυασμένα επίπεδα των κυκλοφορούντων αμφιρεγουλίνη και heregulin επηρεάζουν τα κλινικά αποτελέσματα σε ασθενείς που λαμβάνουν cetuximab ως θεραπεία ενάντια προηγμένη CRC.

Μέθοδοι

πλάσματος μετρήθηκαν τα επίπεδα της αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης με ένζυμο-συνδεδεμένη ανοσορροφητική δοκιμασία σε 50 ασθενείς με CRC σε προπόνηση ομάδα, και σε 10 ασθενείς σε μια κοόρτη επικύρωσης. Η συνδυασμένη έκφραση στη συνέχεια αξιολογήθηκε με την κλινική έκβαση, μετά τα λειτουργικά χαρακτηριστικά του δέκτη ανάλυση.

Αποτελέσματα

Το συνολικό ποσοστό ανταπόκρισης ήταν 26%, και η διάμεση επιβίωση χωρίς εξέλιξη ήταν 110 ημέρες στην ομάδα της κατάρτισης. Οι ασθενείς με υψηλό αμφιρεγουλίνη και χαμηλή ερεγουλίνης είχαν σημαντικά υψηλότερο ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης στο 58% και σημαντικά μεγαλύτερη επιβίωση χωρίς εξέλιξη της 216 ημέρες. Το αποτέλεσμα αυτό επιβεβαιώθηκε στην ομάδα επικύρωσης

Συμπέρασμα

Μια υποομάδα των ασθενών CRC με υψηλή αμφιρεγουλίνη και χαμηλή ερεγουλίνης ανταποκρίνονται σε θεραπεία με cetuximab καλύτερα από άλλους ασθενείς

Αιτιολογική αναφορά..: Yonesaka Κ, Takegawa Ν, Satoh Τ, Ueda Η, Yoshida Τ, Takeda Μ, et al. (2015) συνδυασμένη ανάλυση της αμφιρεγουλίνη Plasma και Ερεγκουλίνη Προβλέπει Response to Το cetuximab σε μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου. PLoS ONE 10 (11): e0143132. doi: 10.1371 /journal.pone.0143132

Επιμέλεια: Mariko Okada (Hatakeyama), RIKEN Κέντρο Ολοκληρωμένης Ιατρικών Επιστημών, ΙΑΠΩΝΙΑ

Ελήφθη: 6 του Ιούνη του 2015? Αποδεκτές: 30η Οκτωβρίου του 2015? Δημοσιεύθηκε: 16 του Νοεμβρίου, 2015

Copyright: © 2015 Yonesaka et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

χρηματοδότηση:.. Οι συγγραφείς δεν έλαβαν καμία ειδική χρηματοδότηση για το έργο αυτό

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν αντικρουόμενα συμφέροντα

Εισαγωγή

ορθοκολικούς καρκίνους (CRC) υπερεκφράζουν συχνά υποδοχέα του επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGFR), η οποία συνδέεται με την εξέλιξη του όγκου και κακή πρόγνωση [1]. Έτσι, EGFR είναι ένας θεραπευτικός στόχος, όχι μόνο έναντι CRC, αλλά και έναντι άλλων μορφών καρκίνου στο οποίο εκφράζεται άφθονα. Θεραπευτικοί παράγοντες που στοχεύουν EGFR είναι είτε αναστολείς κινάσης EGFR-τυροσίνης ή μονοκλωνικά αντισώματα [2]. Κινάσης αναστολείς όπως gefitinib και erlotinib είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικές κατά των μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα με ιδιοσυστατικά ενεργή μεταλλάξεις του EGFR [3]. Από την άλλη πλευρά, τα μονοκλωνικά αντισώματα όπως cetuximab και panitumumab βελτιώσει την πρόγνωση σε ασθενείς με CRC και το καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων της κεφαλής και του τραχήλου που εκφράζουν EGFR φυσικού τύπου [4-7].

Προκλινικές μελέτες έδειξαν ότι μερικοί καρκίνοι ευαίσθητοι σε αντι-EGFR θεραπεία επίσης εκφράζουν άφθονα προσδέματα EGFR, ειδικά αμφιρεγουλίνη [8]. Ως αποτέλεσμα, EGFR ιδιοσυστατικά ενεργοποιημένα σε αυτά τα κύτταρα από αυτοκρινείς μόδας. Αξίζει να σημειωθεί ότι, οι ασθενείς με CRCs που άφθονα ρητή εμπειρία αμφιρεγουλίνη σημαντικά καλύτερα αποτελέσματα με τη θεραπεία με cetuximab από ό, τι οι ασθενείς με χαμηλό CRC έκφραση αμφιρεγουλίνη [9, 10]. Πράγματι, τα επίπεδα του αμφιρεγουλίνη στο πλάσμα σχετίζονται με την αποτελεσματικότητα cetuximab [11].

Ερεγκουλίνη, επίσης συνδέτης του HER3, είναι επίσης εξαιρετικά εκφράζεται σε κάποιο CRCs, και σε ορισμένες πνεύμονα, της κεφαλής, του λαιμού και των καρκίνων [12 -15]. Φυσιολογικά, heregulin δεσμεύεται με HER3 και πυροδοτεί τον ετεροδιμερισμό μεταξύ HER2 και HER3, ένα γεγονός που ενεργοποιεί αμφότερους τους υποδοχείς [16, 17]. Με τη σειρά του, ενεργοποιεί HER3 ΑΚΤ, και ως εκ τούτου αποτρέπει την απόπτωση. Τα δημοσιευμένα στοιχεία δείχνουν ότι η υπερέκφραση της ερεγουλίνης προκαλεί αντίσταση cetuximab σε CRC, αν και η ταυτόχρονη αναστολή της HER2 και HER3 υπερνικά αυτό αντίσταση [13, 18]. Επιπλέον, heregulin πλάσμα συσχετίζεται αρνητικά με την ελεύθερη εξέλιξης επιβίωση και τη συνολική επιβίωση σε ασθενείς με CRC υποβάλλονται σε θεραπεία με cetuximab.

Σαφώς, αμφιρεγουλίνη και heregulin επηρεάζουν σημαντικά την πρόγνωση των ασθενών CRC που έλαβαν θεραπεία με cetuximab. Ωστόσο, τα κλινικά αποτελέσματα δεν είναι πάντα εξηγούνται από έναν παράγοντα ή το άλλο. Μερικοί ασθενείς CRC άφθονα εκφράζουν αμφιρεγουλίνη, καθώς επίσης και άλλες με χαμηλά επίπεδα ερεγουλίνης, δεν ανταποκρίνονται στο cetuximab [11, 13]. Ένας πιθανός λόγος μπορεί να είναι ότι τα μόρια αυτά αλληλεπιδρούν. Πράγματι, προηγούμενες μελέτες αποδεικνύουν ότι ενώ η κυτταρική γραμμή CRC DiFi εκφράζει απόλυτα την αμφιρεγουλίνη και είναι ευαίσθητη στο cetuximab, σταθερή επιμόλυνση με ερεγουλίνη προκαλεί αντίσταση [18]. Ως εκ τούτου, εξετάστηκε κατά πόσο το συνδυασμένο επίπεδο των κυκλοφορούντων αμφιρεγουλίνη και heregulin μπορούσε πιο αξιόπιστα να προβλέψει τα κλινικά αποτελέσματα της θεραπείας με cetuximab σε ασθενείς CRC.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς και θεραπεία

η μελέτη περιέλαβε ασθενείς που έλαβαν θεραπεία για μεταστατικό CRC σε Κίνκι Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου μεταξύ Σεπτέμβρη του 2010 και τον Αύγουστο του 2015. Οι ασθενείς έλαβαν FOLFIRI (λευκοβορίνη, 5-φθοριοουρακίλη, και ιρινοτεκάνη) ή FOLFOX (λευκοβορίνη, 5-φθοριοουρακίλη, και οξαλιπλατίνη) ως πρώτης ή χημειοθεραπεία δεύτερης γραμμής. Οι περισσότεροι ασθενείς είχαν λάβει επιπρόσθετα bevacizumab, αλλά όχι αντισώματα εναντίον EGFR. Όπως τρίτης γραμμής χημειοθεραπεία, οι ασθενείς έλαβαν θεραπεία κάθε δύο εβδομάδες με cetuximab, μόνη ή σε συνδυασμό με ιρινοτεκάνη. Εκτός αν ρυθμίζεται από τον θεράποντα ιατρό, το cetuximab χορηγήθηκε σε αρχική δόση 400 mg /m

2 και, στη συνέχεια, στα 250 mg /m

2 την εβδομάδα. Η μελέτη εγκρίθηκε από το Διοικητικό Συμβούλιο Institutional Review της Κίνκι Ιατρική Σχολή του Πανεπιστημίου. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς. Οι ασθενείς χωρίστηκαν σε μια εκπαίδευση κοόρτη των 50, και μία ομάδα επικύρωση των 10.

Μέτρηση αμφιρεγουλίνη πλάσματος και ερεγουλίνης

Δείγματα πλάσματος λήφθηκαν από ασθενείς πριν από τη θεραπεία με αντι-EGFR. Αμφιρεγουλίνη και τα επίπεδα ερεγουλίνης μετρήθηκαν χρησιμοποιώντας εμπορικά διαθέσιμο ένζυμο-συνδεδεμένη ανοσορροφητική δοκιμασία κιτ (Ανθρώπινο αμφιρεγουλίνη και Ερεγκουλίνη Quantikine κιτ ELISA, R &? D Systems, Minneapolis, ΜΝ, USA), ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή. Εν συντομία, ένα μικροπλάκα 96-φρεατίων επικαλύφθηκε με αντίσωμα σύλληψης, πλύθηκαν, και επωάστηκαν με τα δείγματα και τα πρότυπα. Η πλάκα πλύθηκε μία δεύτερη φορά, ανιχνεύθηκαν με αντίσωμα ανίχνευσης, και επισημασμένο με ένα χρωμογόνο. Τέλος, η απορρόφηση στα 450 nm μετρήθηκε χρησιμοποιώντας έναν αναγνώστη φασματοφωτομετρικής πλάκας. Οι συγκεντρώσεις αμφιρεγουλίνη και heregulin προσδιορίστηκαν με βάση το πρότυπο καμπύλες.

Η αξιολόγηση της θεραπείας με cetuximab

Στόχος ανταπόκριση στο cetuximab αξιολογήθηκε σύμφωνα με τα Κριτήρια Αξιολόγησης απόκρισης σε συμπαγείς όγκους, ver. 1.1 [19]. Η απόκριση όγκου εκτιμήθηκε από έναν ιατρό κάθε 2 έως 3 μήνες χρησιμοποιώντας υπολογιστικής τομογραφίας. Επιβίωση χωρίς εξέλιξη ορίστηκε ως το διάστημα από την έναρξη της αντι-EGFR θεραπεία για την εξέλιξη του όγκου ή θάνατο χωρίς ενδείξεις εξέλιξης. Η συνολική επιβίωση μετρήθηκε ως ο αριθμός των ημερών μεταξύ της έναρξης του cetuximab σχήμα και το θάνατο

Στατιστικές αναλύσεις

.

Το κύριο τελικό σημείο αυτής της μελέτης είναι να αξιολογήσει την αμφιρεγουλίνη και heregulin ως βιοδείκτες που σχετίζονται με την αντικειμενική ανταπόκριση συντελεστή για αντι-EGFR θεραπείας. ROC (χαρακτηριστικά λειτουργίας δέκτη) οι καμπύλες αναλύθηκαν για να προσδιοριστεί αποκοπής σημεία για την αμφιρεγουλίνη και έκφραση heregulin. Τα βέλτιστα σημεία αποκοπής ορίστηκαν ως η ελάχιστη απόσταση από (1 -ειδικότητα, ευαισθησία) = (0, 1). Οι διαφορές στην κατανομή των μεταβλητών αξιολογήθηκαν με τη χρήση

t

δοκιμή για τις ποσοτικές μεταβλητές και ακριβές τεστ του Fisher για την ποιοτική μεταβλητές. Για τις ομάδες που κατατάσσονται σύμφωνα με cut-off σημεία, το ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης σε σύγκριση με την ακριβή δοκιμή του Fisher, ενώ χωρίς εξέλιξη και η συνολική επιβίωση συγκρίθηκαν με καμπύλες Kaplan-Meier και δοκιμασία log-rank. Όλες οι στατιστικές δοκιμασίες ήταν δύο όψεων, και

σ

αξία & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Στατιστικές αναλύσεις και οπτικοποίηση πραγματοποιήθηκαν σε GraphPad Prism v.5.0 για Windows (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA).

Αποτελέσματα

Τα χαρακτηριστικά των ασθενών

τα χαρακτηριστικά των ασθενών συνοψίζονται στον πίνακα 1. Όλοι οι ασθενείς είχαν άγριου τύπου

KRAS

. Από τους 50 ασθενείς που αναλύθηκαν, 39 έλαβαν cetuximab και ιρινοτεκάνη ως τρίτης γραμμής χημειοθεραπεία. Ωστόσο, όλοι οι άλλοι ασθενείς έλαβαν cetuximab μόνο λόγω της κακής γενικής υγείας ή κατακράτηση υγρών. Δεκατρείς ασθενείς παρουσίασαν μερική ανταπόκριση στο cetuximab. Έτσι, το συνολικό ποσοστό ανταπόκρισης ήταν 26%. Δεκαοκτώ ασθενείς είχαν σταθερή όγκους για περισσότερο από 8 εβδομάδες ενώ 19 ασθενείς είχαν βραχυπρόθεσμη εξέλιξη του καρκίνου. Το συνολικό ποσοστό ελέγχου της νόσου ήταν 62%. Η διάμεση χωρίς εξέλιξη και η συνολική επιβίωση ήταν 110 ημέρες και 201 ημέρες αντίστοιχα. Η θεραπεία διεκόπη για όλους τους ασθενείς, λόγω της εξέλιξης του καρκίνου, εκτός από τρεις ασθενείς οι οποίοι μετακινούνται σε άλλο νοσοκομείο. Η τοξικότητα δεν ήταν εμφανής. Δεν υπήρχαν σημαντικές διαφορές στο ποσοστό ανταπόκρισης όταν οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ανάλογα με την κάθε μεταβλητή, όπως η ηλικία, το φύλο, πρωτογενούς όγκου, ECOG PS και σχήμα (ακριβής δοκιμασία του Fisher,

σ

& gt? 0,05, S1 πίνακα) .

η

Κυκλοφορούν αμφιρεγουλίνη και heregulin

οι συγκεντρώσεις αμφιρεγουλίνη και heregulin στο πλάσμα φαίνεται στο σχήμα 1Α και 1Β, με μέση τιμή 11,5 pg /mL (εύρος 0-327 pg /mL) και 1,357.5 pg /mL (εύρος 0-18,045 pg /mL), αντίστοιχα. Συσχέτιση μεταξύ των συγκεντρώσεων των μορίων αυτών δεν παρατηρήθηκε (Pearson συσχετισμού r = 0.067), και τα επίπεδα δεν συσχετίζονταν σημαντικά με τα χαρακτηριστικά του ασθενούς συμπεριλαμβανομένου του φύλου, της ηλικίας, πρωτογενή θέση όγκου, κατάσταση συμπεριφοράς και αγωγή (Πίνακας 2,

t

test, p & gt? 0,05). επίπεδο αμφιρεγουλίνη τείνει να είναι υψηλότερη σε ασθενείς με cetuximab-απόκρισης, ενώ το επίπεδο heregulin είναι σημαντικά χαμηλότερη σε ανθεκτικούς ασθενείς (

t

δοκιμής,

σ

= 0.001). Έτσι, πραγματοποιήσαμε ROC αναλύσεις για τον προσδιορισμό αποκοπής σημεία στα οποία αμφιρεγουλίνη και heregulin έχουν βέλτιστη ευαισθησία και ειδικότητα για την πρόβλεψη ανταπόκριση ή μη ανταπόκριση στο cetuximab, αντίστοιχα (σχήμα 1Γ και 1Δ). Στο 16,8 pg /mL, αμφιρεγουλίνη είχε ευαισθησία 76,9% (95% CI: 46,2% -95,0%) και ειδικότητα 67,6% (95% CI: 50,2% -82,0%). Χρησιμοποιώντας αυτό το σημείο αποκοπής, 22 ασθενείς (44%) θεωρήθηκαν αμφιρεγουλίνη θετική για την πρόβλεψη της ανταπόκρισης με ποσοστό ανταπόκρισης 45% (10/22). Από την άλλη πλευρά, η έκφραση heregulin σε 1.292 pg /ml είχαν ευαισθησία 62,2% (95% CI: 44,8% -77,5%) και ειδικότητα 69,2% (95% CI: 38,6% -90,9%). Με βάση αυτό το σημείο αποκοπής, 27 ασθενείς (54%) θεωρήθηκαν heregulin θετικό για την πρόβλεψη της μη απάντησης με ποσοστό ανταπόκρισης είναι 15% (4/27).

αμφιρεγουλίνη πλάσματος (Α) και heregulin (Β) ήταν μετρήθηκε με ανοσορροφητική δοκιμασία συνδεδεμένη με ένζυμο. Κάθε γραμμή αντιπροσωπεύει ένα μόνο ασθενή. Λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη είναι (ROC) καμπύλη που φαίνεται για την ικανότητα της αμφιρεγουλίνη (C) και heregulin (D) για να προβλέψουν την ανταπόκριση και μη ανταπόκριση στο cetuximab.

Η

Σύλλογος αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης με απάντηση cetuximab

Ερευνήσαμε κατά πόσο το συνδυασμένο επίπεδο αμφιρεγουλίνη πλάσμα και heregulin συνδέθηκε με την απάντηση σε αντι-EGFR θεραπεία (Πίνακας 3). Έχουμε κατηγοριοποιούνται οι ασθενείς σε τέσσερις κατηγορίες ανάλογα με το αν η έκφραση του κάθε μορίου ήταν υψηλή ή χαμηλή, με τιμές αποκοπής καθορίζεται από την ανάλυση ROC (Σχήμα 2). Έτσι, 15 ασθενείς θεωρήθηκαν ότι έχουν χαμηλή αμφιρεγουλίνη και υψηλή ερεγουλίνης, ενώ το 13 θεωρήθηκαν να έχουν χαμηλά επίπεδα και των δύο. Από τους υπόλοιπους ασθενείς, 10 είχαν χαρακτηριστεί ως έχοντα υψηλά επίπεδα και των δύο, και 12 περιγράφονται ως έχοντα υψηλή αμφιρεγουλίνη και χαμηλή ερεγουλίνης. Το ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης αξιολογήθηκε σε κάθε κατηγορία. Σε ασθενείς που εκφράζουν απόλυτα την αμφιρεγουλίνη, αλλά δεν ερεγουλίνης, το ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης ήταν 58%. Αξίζει να σημειωθεί ότι, αυτό το ποσοστό ανταπόκρισης είναι σημαντικά διαφορετική (

σ

= 0,0069, ακριβής δοκιμασία του Fisher) από το ποσοστό ανταπόκρισης 16% σε άλλους ασθενείς (n = 38). Επιπλέον, το ποσοστό ανταπόκρισης ήταν 7% σε ασθενείς με χαμηλό αμφιρεγουλίνη και υψηλή ερεγουλίνης, 15% σε ασθενείς με χαμηλό αμφιρεγουλίνη και χαμηλή heregulin, και 30% σε ασθενείς που εκφράζουν και τις δύο συνδέτες άφθονα.

Οι ασθενείς ταξινομήθηκαν σε τέσσερις ομάδες με βάση διάμεσος επίπεδα αμφιρεγουλίνη (16,8 pg /ml) ή ερεγουλίνη (1292 pg /ml). Κόκκινες κουκκίδες είναι οι ασθενείς που ανταποκρίθηκαν στην αντι-EGFR θεραπείας.

Η

Σύλλογος αμφιρεγουλίνη πλάσματος και ερεγουλίνης με την επιβίωση

Έχουμε αναλύσει τον αντίκτυπο των επιπέδων αμφιρεγουλίνη και heregulin στις εξέλιξης, ελεύθερη και συνολική επιβίωση. Συνεπής με καλύτερα ποσοστά ανταπόκρισης, ασθενείς οι οποίοι άφθονα ρητή αμφιρεγουλίνη, αλλά δεν heregulin παρουσίασαν σημαντικά μεγαλύτερη επιβίωση χωρίς εξέλιξη σε σχέση με άλλους ασθενείς (δοκιμασία log-rank,

σ

& lt? 0.05), με μέση τιμή 216 ημέρες και 81 ημέρες, αντίστοιχα (Σχήμα 3). Ασθενείς που εκφράζουν και τα δύο μόρια σε υψηλά επίπεδα παρουσίασαν μέση τιμή των 65 χωρίς εξέλιξη ημέρες, ενώ εκείνα που εκφράζουν τόσο σε χαμηλά επίπεδα είχαν διάμεση επιβίωση χωρίς εξέλιξη από 119 ημέρες. Τέλος, οι ασθενείς που έχουν χαμηλά αμφιρεγουλίνη και υψηλή ερεγουλίνη είχε διάμεσο 76 χωρίς εξέλιξη της ημέρας (Σχ Α στο S1 File).

επίπεδα αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης πλάσματος μετρήθηκαν με ELISA. Οι ασθενείς διαιρούνται σε υποομάδες με βάση την αμφιρεγουλίνη (AR) ή ερεγουλίνη (HRG) αφθονία, όπως φαίνεται στο Σχ 2. Η κόκκινη καμπύλη αναπαριστά την επιβίωση σε ασθενείς με υψηλή και χαμηλή αμφιρεγουλίνη ερεγουλίνη (n = 12), και η πράσινη γραμμή παριστά την επιβίωση σε όλοι οι άλλοι ασθενείς (n = 38).

Η

οι τάσεις αυτές αντανακλώνται στη συνολική επιβίωση. Έτσι, οι ασθενείς με υψηλά επίπεδα αμφιρεγουλίνη και χαμηλά επίπεδα ερεγουλίνης έτειναν να παρουσιάζουν μεγαλύτερη συνολική επιβίωση από άλλους ασθενείς με διάμεση τιμή 356 ημέρες (Σχήμα 4). Άτομα με χαμηλά ή υψηλά επίπεδα και των δύο μορίων επιβίωσαν για ένα μέσο διάστημα 231 και 164 ημέρες αντίστοιχα. Τέλος, οι ασθενείς οι οποίοι εκφράζουν heregulin άφθονα αλλά όχι αμφιρεγουλίνη είχε διάμεση συνολική επιβίωση 150 ημέρες (Σχήμα Β στο S1 File).

επίπεδα αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης πλάσματος μετρήθηκαν με ELISA. Οι ασθενείς διαιρούνται σε υποομάδες με βάση την αμφιρεγουλίνη (AR) ή ερεγουλίνη (HRG) αφθονία, όπως φαίνεται στο Σχ 2. Επιβίωση σε ασθενείς με υψηλή και χαμηλή αμφιρεγουλίνη ερεγουλίνη (n = 12) απεικονίζεται με κόκκινο χρώμα. Επιβίωσης σε όλους τους άλλους ασθενείς (n = 38) σχεδιάζεται με πράσινο χρώμα.

Η αμφιρεγουλίνη

Plasma, ερεγουλίνη, και η ανταπόκριση cetuximab σε μια ομάδα επικύρωσης

Εμείς επικυρωθεί με τη σύνδεση των δύο συνδετήρων με cetuximab απάντηση χρησιμοποιώντας ένα ανεξάρτητο σύνολο 10 ασθενών. Τρεις από αυτούς τους ασθενείς είχαν υψηλή αμφιρεγουλίνη και χαμηλή ερεγουλίνης, ενώ τρεις είχε χαμηλή αμφιρεγουλίνη και υψηλή heregulin. Από τους υπόλοιπους ασθενείς, τρεις εκφράζεται τόσο συνδετήρες σε χαμηλά επίπεδα, και που εκφράζεται τόσο άφθονα (Εικ C σε S1 File). Τρεις ασθενείς είχαν ανταποκρίνονται στις αντι-EGFR θεραπεία, που όλοι τους είχαν υψηλά αμφιρεγουλίνη, αλλά δεν ερεγουλίνη (Πίνακας 4).

Η

Συζήτηση

Εμείς και άλλοι έχουν αναφερθεί στο παρελθόν ότι συνδέτες του EGFR, ειδικά αμφιρεγουλίνη, συνδέονται με cetuximab αποτελεσματικότητα [8-10]. Σε αντίθεση, η heregulin συνδέτης HER3 συσχετίστηκε σημαντικά με αντίσταση cetuximab [13, 18]. Αυτή η μελέτη είναι η πρώτη που εξετάζει αν η συνδυασμένη έκφραση των αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης επηρεάζει το αποτέλεσμα του αντι-ΕΟΡΚ θεραπεία σε ασθενείς CRC. Βρήκαμε ότι οι ασθενείς με υψηλά επίπεδα αμφιρεγουλίνη και τα χαμηλά επίπεδα της ερεγουλίνης ανταποκριθεί πολύ καλύτερα στο cetuximab, με 58% ποσοστό αντικειμενικής ανταπόκρισης και 216 ημερών διάμεση επιβίωση χωρίς εξέλιξη. Η απόκριση είναι κυρίως καλύτερα από ό, τι το δημοσιευμένο συνολική απόκριση στο γενικό πληθυσμό CRC [4, 20, 21]. Τα αποτελέσματα αυτά επικυρώθηκαν σε ένα μικρότερο, αλλά ανεξάρτητη ομάδα, και προτείνουν ότι η αξιολόγηση και των δύο αμφιρεγουλίνη και heregulin στο πλάσμα μπορεί να προβλέψει με μεγαλύτερη ακρίβεια cetuximab αποτέλεσμα, και έτσι μπορεί να αποτελέσει τη βάση για τη βελτιστοποίηση της θεραπείας CRC.

Σε αντίθεση , οι ασθενείς που εκφράζουν απόλυτα τόσο την αμφιρεγουλίνη και την εμπειρία ερεγουλίνης κακή έκβαση. Αυτή η κλινική παρατήρηση είναι σύμφωνη με τα εργαστηριακά πειράματα χρησιμοποιώντας την κυτταρική γραμμή CRC DiFi [18]. Πράγματι, τα κύτταρα DiFi με υψηλά επίπεδα αμφιρεγουλίνη έχουν αυξημένη ευαισθησία σε cetuximab, ενώ κυττάρου που υπερεκφράζει ερεγουλίνη είναι ανθεκτικά στην cetuximab

in vitro

και σε ξενομοσχεύματα ποντικών. Ως εκ τούτου, οι ασθενείς με αυτά τα χαρακτηριστικά μπορεί να απαιτούν επιπλέον, νέες ή εναλλακτικές θεραπείες για να ξεπεράσει την αντίσταση. Για παράδειγμα, έχει αποδειχθεί ότι τα κύτταρα που υπερεκφράζουν heregulin είναι ευαίσθητα σε ένα συνδυασμό cetuximab και patritumab, ένα αντίσωμα έναντι HER3, αν και κάθε αντίσωμα από μόνη της είναι αναποτελεσματική [18]. Εναλλακτικά, συνδυάζοντας cetuximab με κατάντη αναστολέα της HER3 μπορεί να αποδειχθεί επίσης να αποδειχθεί αποτελεσματική. Τέτοιες ενώσεις περιλαμβάνουν αναστολείς της ΡΙ3Κ και ΑΚΤ.

Ειδικότερα, τρεις ασθενείς με χαμηλά επίπεδα αμφιρεγουλίνη ανταποκρίθηκαν επίσης να cetixumab, γεγονός που υποδηλώνει ότι EGFR ενεργοποιείται με άλλα προσδέματα σε μια μικρή ομάδα ασθενών. Πράγματι, EGFR είναι γνωστό ότι συνδέεται έξι διαφορετικούς συνδετήρες, συμπεριλαμβανομένων EGF, το μετασχηματιστικό αυξητικό παράγοντα-α, την αμφιρεγουλίνη, betacelluline, EGF δέσμευσης ηπαρίνης, ή επιρεγουλίνη [8]. Από αυτούς, επιρεγουλίνη έκφραση σε όγκους έχει βρεθεί επίσης να συσχετίζεται με την αποτελεσματικότητα cetuximab [9, 10]. Στο τέλος, μπορεί να έχουν όλοι οι συνδέτες του EGFR που πρέπει να αξιολογηθούν για να προβλέψει το cetuximab απάντηση.

Ωστόσο, η μελέτη αυτή περιορίζεται από μικρά μεγέθη δείγματος, και η αναδρομική φύση της ανάλυσης. Για την αντιμετώπιση αυτών των περιορισμών, είμαστε τώρα διεξάγει μια προοπτική, τυχαιοποιημένη κλινική δοκιμή της αντι-EGFR θεραπείας σε ασθενείς με προχωρημένο CRC, στο οποίο μετράμε την κλινική έκβαση σε συνάρτηση με την αμφιρεγουλίνη πλάσματος και heregulin. Αναμένουμε ότι αυτή η δίκη θα παράσχει περισσότερα στοιχεία για τη χρήση των αμφιρεγουλίνη και ερεγουλίνης ως βιοδείκτες.

Υποστήριξη Πληροφορίες

S1 συνόλου δεδομένων. Πλήρες σετ δεδομένων

doi:. 10.1371 /journal.pone.0143132.s001

(XLSX)

S1 αρχείου. Καμπύλες κατά Kaplan-Meier επιβίωσης χωρίς εξέλιξη (Σχήμα Α). συνολική καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier (Σχήμα Β). διάγραμμα διασποράς των αμφιρεγουλίνη πλάσματος και heregulin στην επικύρωση ομάδα, συμπεριλαμβανομένων 10 ασθενών με καρκίνο του παχέος εντέρου (Σχήμα Γ)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0143132.s002

(PDF)

S1 πίνακα. Το ποσοστό ανταπόκρισης όταν οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ανάλογα με την κάθε μεταβλητή

doi:. 10.1371 /journal.pone.0143132.s003

(PPTX)

Ευχαριστίες

Σας ευχαριστούμε όλους τους ασθενείς που είχαν συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη.