Αφηρημένο

καρκίνος του παχέος εντέρου είναι ένας από τους πιο κοινούς τύπους καρκίνου με πάνω από πενήντα τοις εκατό των ασθενών που προσέρχονται σε προχωρημένο στάδιο. Το ρετινοϊκό οξύ είναι ένας μεταβολίτης της βιταμίνης Α και είναι απαραίτητη για τη φυσιολογική ανάπτυξη των κυττάρων και το μεταβολισμό παρεκκλίνουσα ρετινοϊκό οξύ εμπλέκεται στην ογκογένεση. Η μελέτη αυτή έχει προφίλ της έκφρασης των ενζύμων που μεταβολίζουν το ρετινοϊκό οξύ χρησιμοποιώντας ένα καλώς χαρακτηρισμένο ορθοκολικό καρκίνο μικροσυστοιχία ιστού που περιέχει 650 πρωτογενείς ορθοκολικούς καρκίνους, 285 λέμφου μετάσταση στους λεμφαδένες και 50 κανονικής κολονικής βλεννογόνου δείγματα. Ανοσοϊστοχημεία εκτελέστηκε στη μικροσυστοιχία ιστού με τη χρήση μονοκλωνικών αντισωμάτων τα οποία έχουμε αναπτύξει στο μεταβολισμού ρετινοϊκού οξέος ένζυμα CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και λεκιθίνη ρετινόλη ακυλο τρανσφεράσης (LRAT) χρησιμοποιώντας ένα ημι-ποσοτική σύστημα βαθμολόγησης για την αξιολόγηση της έκφρασης. Μέτρια ή ισχυρή έκφραση της CYP26A1was παρατηρήθηκε στο 32,5% των καρκίνων σε σύγκριση με το 10% της κανονικής κολονικής δειγμάτων επιθήλιο (ρ & lt? 0.001). CYP26B1 ήταν μέτρια ή έντονα εκφρασμένη σε 25,2% των όγκων και ήταν σημαντικά λιγότερο εκφράζεται σε φυσιολογικό κολονικό επιθήλιο (ρ & lt? 0.001). CYP26C1 δεν εκφράζονται σε οποιοδήποτε δείγμα. LRAT επίσης έδειξαν σημαντικά αυξημένη έκφραση σε πρωτογενείς ορθοκολικούς καρκίνους σε σύγκριση με την κανονική επιθήλιο του κόλου (ρ & lt? 0.001). Ισχυρή έκφραση CYP26B1 ήταν σημαντικά σχετίζεται με κακή πρόγνωση (HR = 1,239, 95% CI = 1,104 – 1,390, χ

2 = 15.063, p = 0,002). Ισχυρή LRAT συσχετίστηκε επίσης με φτωχότερη έκβαση (HR = 1,321, 95% CI = 1,034 – 1,688, χ

2 = 5.039, p = 0.025). Σε αναντιστοιχία επισκευή καλά όγκους ισχυρή CYP26B1 (HR = 1,330, 95% CI = 1,173 – 1,509, χ

2 = 21.493, p & lt? 0.001) και ισχυρή LRAT (HR = 1,464, 95% CI = 1,110 – 1,930, χ

2 = 7.425, p = 0.006) επίσης συνδέεται με φτωχότερη πρόγνωση. Αυτή η μελέτη έχει δείξει ότι η μεταβολίζει ρετινοϊκό οξύ ένζυμα CYP26A1, CYP26B1 και LRAT υπερεκφράζονται σημαντικά σε καρκίνο του παχέος εντέρου και ότι CYP26B1 και LRAT είναι σημαντικά με την πρόγνωση τόσο στο σύνολο κοόρτη και εκείνων των όγκων που αναντιστοιχία επισκευή καλά. CYP26B1 ήταν ανεξάρτητο προγνωστικό σε ένα πολυπαραγοντικό μοντέλο τόσο στο σύνολο της κοόρτης ασθενών (HR = 1,177, 95% CI = 1,020 – 1,216, p = 0,026) και στην αναντιστοιχία επισκευή καλά όγκους (HR = 1,255, 95% CI = 1,073 έως 1,467, p = 0,004)

Παράθεση:. Μπράουν GT, Cash BG, Blihoghe D, Johansson P, Alnabulsi Α, Murray GI (2014) η έκφραση και η προγνωστική σημασία του ρετινοϊκού οξέος μεταβολικών ενζύμων στον Καρκίνο του παχέος εντέρου. PLoS ONE 9 (3): e90776. doi: 10.1371 /journal.pone.0090776

Επιμέλεια: Νατάσα Κυπριανού, Πανεπιστήμιο του Κεντάκι College of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 21 Νοέμβρη του 2013? Αποδεκτές: 4 του Φλεβάρη του 2014? Δημοσιεύθηκε: 7, Μαρτίου 2014

Copyright: © 2014 Brown et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Η μελέτη χρηματοδοτήθηκε από το Πανεπιστήμιο του Aberdeen Ανάπτυξης Εμπιστοσύνη (https://www.abdn.ac.uk/giving/) και περιλαμβάνουν (https://www.encompass-scotland.co.uk/). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Graeme Murray είναι ένας επιστημονικός σύμβουλος για να σπονδυλωτών αντισώματα, τα οποία συνέβαλαν σε αυτή την έρευνα. Καμία οικονομική αμοιβή ήταν ή έχει ληφθεί για τη θέση αυτή ούτε ο ίδιος κατέχει οποιεσδήποτε μετοχές στην εταιρεία αυτή. Beatriz Μετρητά και Ayham Alnabulsi είναι υπάλληλοι των σπονδυλωτών αντισώματα. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων να PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

καρκίνος του παχέος εντέρου είναι μία από τις συχνότερες μορφές κακοήθειας των οποίων πέντε χρόνια επιβίωσης παραμένει σε περίπου πενήντα τοις εκατό παρά την εισαγωγή των προγραμμάτων προσυμπτωματικού ελέγχου του καρκίνου του εντέρου [1]. Ενώ η μοριακή παθογένεση αυτού του τύπου όγκου ολοένα νοείται και ορίζεται ειδικά τα πρώτα στάδια της ανάπτυξης του καρκίνου του παχέος όπου οι μοριακές αλλαγές οριοθετηθεί με υψηλό βαθμό λεπτομέρειας [2] – [4]. Ωστόσο, εξακολουθεί να υπάρχει μια σαφής ανάγκη για τον εντοπισμό βιοδείκτες του καρκίνου του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένων προγνωστικών, προβλεπτική και διαγνωστικών δεικτών [5] – [15].

Το ρετινοϊκό οξύ (RA) είναι ένας μεταβολίτης της βιταμίνης Α (ρετινόλη), το οποίο επιτελεί ουσιώδεις λειτουργίες στην κανονική κυτταρική ανάπτυξη και διαφοροποίηση και απορρυθμισμένης μεταβολισμού ρητινοϊκού οξέως έχει εμπλακεί σε ογκογένεση [16], [17]. Ρετινοειδή, ένας όρος που χρησιμοποιείται για να περιγράψει φυσικές ή συνθετικές ενώσεις που δείχνει μια δομική ή λειτουργική ομοιότητα με ρετινόλη, έχει εξέχοντα ρόλο να διαδραματίσει στην ανάπτυξη των κυττάρων, τη διαφοροποίηση και την απόπτωση [16]. Η πιο δραστική μορφή της RA, all-trans ρετινοϊκού οξέος (atRA), έχει μία ρυθμιστική λειτουργία γονιδίου και παίζει κρίσιμο ρόλο στην ανάπτυξη των πολλαπλών οργάνων. 4-οξο-9-cis-ρετινοϊκό οξύ (9-cis-RA) και 4-οξο-13-cis-ρετινοϊκό οξύ (13-cis-RA) είναι στερεο-ισομερή ΑΤΡΑ και επίσης να παίξουν σημαντικό ρόλο στη σηματοδότηση RA . Ορισμένα ρετινοειδή έχουν αντικαρκινικές ιδιότητες που έχουν ήδη γίνει αντικείμενο εκμετάλλευσης για τη θεραπεία διαφόρων τύπων καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας και προμυελοκυτταρική λευχαιμία.

Η ενδοκυτταρική επεξεργασία της ρετινόλης περιλαμβάνει λεκιθίνη ρετινόλη ακυλο τρανσφεράσης (LRAT), η οποία είναι υπεύθυνη για την η εστεροποίηση της ρετινόλης [18], [19] ενώ υδροξυλίωση της ρετινόλης εκτελείται από υδροξυλασών ρετινοϊκό οξύ (CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1) τα οποία είναι όλα τα μέλη του κυτοχρώματος Ρ450 (Ρ450) οικογένεια ενζύμων [20], [21] .

Τα τρία μέλη της οικογένειας CYP26 είναι όλα ικανά να μεταβολίζουν atRA σε λιγότερο βιολογικά ενεργό 4-υδροξυ, 4-οξο-, και τα ενδιάμεσα 18-υδροξυ-RA [22] – [24], του η οποία, 4-οξο-RA είναι η συνηθέστερη μεταβολίτης [16]. Αν και προηγούμενες μελέτες έχουν διερευνήσει έκφρασης Ρ450 σε όγκους και εμφανίζονται όγκου επιλεκτική έκφραση των ατομικών Ρ450 κυρίως ΟΥΡ1Β1 [25] η οικογένεια CYP26 των Ρ450 έχει λάβει λίγο πριν την προσοχή σε σχέση με την έκφρασή τους σε όγκους.

Αυτή η μελέτη έχει μορφοποιημένης η έκφραση του μεταβολισμού ρετινοϊκού οξέος ένζυμα CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και LRAT χρησιμοποιώντας ένα καλώς χαρακτηρισμένο ορθοκολικό μικροσυστοιχιών καρκινικού ιστού με μονοκλωνικά αντισώματα προς CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και LRAT αντίστοιχα, που έχουν αναπτυχθεί και χαρακτηρισθεί για τη χρήση τους με ανοσοϊστοχημεία σε φορμαλίνη σταθερό κερί ενσωματωμένο ιστό.

Υλικά και Μέθοδοι

τα μονοκλωνικά αντισώματα

αναπτύχθηκαν

τα μονοκλωνικά αντισώματα για να CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και LRAT σε συνεργασία με αντισώματα σπονδυλωτών Ltd (Αμπερντίν, Ηνωμένο Βασίλειο ) χρησιμοποιώντας συνθετικά πεπτίδια. Τα πεπτίδια εντός των υποθετικών πρωτεϊνικές αλληλουχίες ταυτοποιήθηκαν τα οποία ήταν αντιγονικό, εκτίθενται στην επιφάνεια και μοναδική για την πρωτεΐνη στόχο. Οι αλληλουχίες αμινοξέων και τη θέση επί των πρωτεϊνών που αναφέρονται στον πίνακα 1. Τα πεπτίδια αποκτήθηκαν από Almac Sciences Ltd, (Edinburgh, UK) και συζευγμένο μεμονωμένα σε ωολευκωματίνη για τις ανοσοποιήσεις και για λευκωματίνη βόειου ορού για τις δοκιμασίες ELISA [26]. Η ανοσοποίηση των ποντικών, η παραγωγή των κυττάρων υβριδώματος και διαλογή ELISA διεξήχθηκαν ουσιαστικά όπως περιγράφηκε προηγουμένως [26] εκτός του ότι το αντιγόνο δόθηκε υποδόρια. Τα υβριδώματα κλωνοποιήθηκαν με περιοριστική αραίωση μέχρι μια ενιαία ELISA θετική αποικία αναπτύχθηκε σε πλάκα 96 φρεατίων. Μεμονωμένα κυτταρικές γραμμές αναπτύχθηκαν τότε σε υψηλή πυκνότητα κυττάρων για την παρασκευή του αποθέματος αντισώματος το οποίο χρησιμοποιήθηκε στη συνέχεια για τον χαρακτηρισμό τους με ανοσοαποτύπωση και ανοσοϊστοχημεία.

Η

ανοσοαποτύπωσης

ολόκληρου κυτταρολύματα από κύτταρα (ανθρώπινα εμβρυϊκά νεφρικά κύτταρα) που υπερεκφράζουν CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και LRAT χρησιμοποιήθηκαν ως θετικοί μάρτυρες για ανοσοκηλίδωση ενώ προϊόντα λύσης από κύτταρα που περιέχουν τον φορέα χρησιμοποιήθηκαν μόνο ως αρνητικοί μάρτυρες. Το προϊόν λύσης CYP26A1 κύτταρο και του ελέγχου του αγοράστηκαν από Abnova (Taipei, Ταϊβάν), ενώ CYP26B1, που περιέχει κυτταρικά λύματα CYP26C1 και LRAT και τα αντίστοιχα τους ελέγχους τους ελήφθησαν από (Novus Biologicals, Cambridge, UK). Τα κυτταρικά λύματα (5 μg πρωτεΐνης /λωρίδα) διαχωρίστηκαν με ηλεκτροφόρηση σε NuPAGE 4-12% δις-Τρις γέλες (Fisher Scientific, Loughborough, UK). Μετά τη μεταφορά της πρωτεΐνης οι μεμβράνες αποκλείστηκαν για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου σε ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατούχο διάλυμα-Tween-20 (PBST) που περιέχει 1% (w /v) σκόνη αποβουτυρωμένου γάλακτος. Οι μεμβράνες επωάστηκαν για μια νύχτα στους 4 ° C με CYP26A1 (1/5 αραίωση), CYP26B1 (1/2 αραίωση), CYP26C1 (1/2 αραίωση) ή LRAT (1/2 αραίωση) μονοκλωνικά αντισώματα αραιωμένα σε PBST. Οι μεμβράνες πλύθηκαν (6 φορές) για 1 ώρα σε 1% αποβουτυρωμένο γάλα. Οι μεμβράνες στη συνέχεια ανιχνεύθηκαν για 1 ώρα με ένα δευτερεύον αντίσωμα συζευγμένο με υπεροξειδάση αρμορακίας-συζευγμένο αντι-ποντικού IgG (1/2000, Sigma-Aldrich, Dorset, UK). Οι μεμβράνες στη συνέχεια πλύθηκαν (6 φορές) για 1 ώρα σε 1% αποβουτυρωμένο γάλα και πρωτεϊνικές ζώνες οπτικοποιούνται χρησιμοποιώντας το σύστημα ανίχνευσης ενισχυμένης χημειοφωταύγειας (Fisher Scientific).

Ο ορθοκολικός καρκίνος ιστού microarray

Όλες οι περιπτώσεις καρκίνο του παχέος εντέρου που περιλαμβάνονται σε αυτή τη μελέτη εκ των υστέρων επιλέγονται από την τράπεζα του παχέος όγκου Αμπερντίν (τώρα ενσωματώνονται και governanced από το NHS Grampian Biorepository, Αμπερντίν, Ηνωμένο Βασίλειο). Συνολικά, τα δείγματα όγκων από 650 ασθενείς συμμετείχαν σε αυτή τη μελέτη, σε κάθε περίπτωση, η διάγνωση του πρωτοπαθούς καρκίνου του παχέος εντέρου είχαν γίνει, και οι ασθενείς είχαν υποβληθεί σε εκλεκτική χειρουργική επέμβαση για την πρωτογενή καρκίνο του παχέος εντέρου, στο Aberdeen, μεταξύ του 1994 και του 2009. Κανένα από οι ασθενείς είχαν λάβει οποιαδήποτε μορφή προεγχειρητική χημειοθεραπεία ή ακτινοθεραπεία. Ειδικότερα, οι ασθενείς με καρκίνο του ορθού οι οποίοι είχαν λάβει εισαγωγική θεραπεία συμπεριλαμβανομένων των βραχυπρόθεσμων ακτινοθεραπεία φυσικά αποκλείστηκαν. Τα δεδομένα για τους ασθενείς και οι όγκοι τους περιλαμβάνονται στην παρούσα μελέτη περιγράφεται λεπτομερώς στο Πίνακα S1. πληροφοριών επιβίωσης (όλες τις αιτίες θνησιμότητας) ήταν διαθέσιμη για όλους τους ασθενείς και κατά το χρόνο της να λογοκρίνει τα δεδομένα έκβαση των ασθενών είχαν υπάρξει 309 (47,5%) των θανάτων. Η μέση επιβίωση των ασθενών ήταν 115 μήνες (95% CI 108 με 123 μήνες).

Οι όγκοι έχουν αναφερθεί σύμφωνα με το Ηνωμένο Βασίλειο, το Royal College of Παθολόγοι κατευθυντήριες γραμμές για την ιστοπαθολογική αναφορά του παχέος δείγματα καρκίνου εκτομή και η οποία ενσωματώνει καθοδήγηση από έκδοση 5 του συστήματος σταδιοποίησης TNM [27]. Η ιστοπαθολογική επεξεργασία των δειγμάτων καρκίνου του παχέος εκτομή λεπτομερώς στο Υλικά και Μέθοδοι S1.

Ένα ορθοκολικό καρκίνο μικροσυστοιχία ιστός δομήθηκε που περιέχει φυσιολογικά δείγματα βλεννογόνου του παχέος εντέρου (n = 50), τα πρωτογενή (n = 650) και μεταστατικό ορθοκολικό δείγματα καρκίνου (n = 285) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [28] – [30]. Οι λεπτομέρειες της κατασκευής της μικροσυστοιχίας ιστού δίνεται στο Υλικά και Μέθοδοι S1.

Ανοσοϊστοχημεία

Ανοσοϊστοχημεία για κάθε αντίσωμα έγινε με τη βιοτίνη-free σύστημα Dako Envision (Dako, Ely, Ηνωμένο Βασίλειο) χρησιμοποιώντας ένα Autostainer Dako (Dako) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [28] – [30]. Λεπτομέρειες της ανοσοϊστοχημείας δίδεται στο Υλικά και Μέθοδοι S1. Οι τομές αξιολογήθηκαν με φως μικροσκοπική εξέταση και η ένταση της ανοσοχρώσης σε κάθε πυρήνα αξιολογείται ανεξάρτητα από δύο ερευνητές (GTB και GIM) χρησιμοποιώντας ένα σύστημα βαθμολόγησης που περιγράφηκε προηγουμένως για την αξιολόγηση της έκφρασης πρωτεΐνης σε μικροσυστοιχίες όγκου [28] – [30]. Η ένταση της ανοσοχρώσης σε κάθε πυρήνα βαθμολογήθηκε ως αρνητική, αδύναμη, μέτρια ή ισχυρή. Η υπο-κυτταρικό εντοπισμό (πυρηνικά, κυτταροπλασματική ή μεμβρανώδη) της ανοσοχρώσης καταγράφηκε επίσης. Διακύμανση ανοσοχρώση μεταξύ πυρήνες κάθε περίπτωση δεν είχε εντοπιστεί. Τυχόν διαφορές στην ανοσοϊστοχημική αξιολόγηση των τεμαχίων των ιστών μεταξύ των δύο παρατηρητές επιλύθηκαν με ταυτόχρονη μικροσκοπική επαναξιολόγηση.

Αξιολόγηση της αναντιστοιχίας επισκευής κατάσταση

Ασυμφωνία κατάστασης επισκευής (MMR) εκτιμήθηκε με ανοσοϊστοχημεία χρησιμοποιώντας αντισώματα προς MLH1 και MSH2 όπως περιγράφηκε προηγουμένως [28], [30]. κατάστασης MMR καταγράφηκε είτε ως καλά ή ελαττωματικά.

Στατιστικά

Η στατιστική ανάλυση των δεδομένων, συμπεριλαμβανομένου του Mann-Whitney U, Wilcoxon signed rank test, test chi-τετράγωνο, Kaplan-Meier επιβίωσης ανάλυση, δοκιμασία log-rank και Cox ανάλυση πολλαπλών περιγραφικές (μεταβλητές εισαχθεί ως κατηγορικές μεταβλητές) συμπεριλαμβανομένου του υπολογισμού των δεικτών κινδύνου και 95% ΠΙ πραγματοποιήθηκε με τη χρήση του IBM SPSS έκδοση 21 για Windows 7 ™ (IBM, Πόρτσμουθ, Ηνωμένο Βασίλειο). Η δοκιμή log rank χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό των διαφορών επιβίωση μεταξύ των επιμέρους ομάδων. Μια τιμή πιθανότητας p ≤ 0,05 θεωρήθηκε ως σημαντική. Η επίδραση διαφορετικών σημείων αποκοπής σε σχέση με την επιβίωση διερευνήθηκε από διχοτομηθεί το σκορ έντασης για κάθε δείκτη. Οι ομάδες που αναλύθηκαν ήταν αρνητική χρώση έναντι οποιασδήποτε θετικής χρώσης, τα αρνητικά και τα ασθενή χρώση σε σχέση με μέτρια και ισχυρή χρώση και αρνητικό, ασθενές και μέτρια χρώση έναντι ισχυρή χρώση.

Ηθική

Το έργο είχε η έγκριση της Επιτροπής Βόρεια Σκωτία δεοντολογίας στην έρευνα (σχετ. αρ. 08 /S0801 /81 και 11 /NS /0015). Η επιτροπή δεοντολογίας στην έρευνα δεν απαιτεί γραπτή συγκατάθεση του ασθενούς για τα δείγματα αναδρομική ιστού που συμπεριλήφθηκαν στην ορθοκολικό καρκίνο μικροσυστοιχιών ιστού.

Αποτελέσματα

Τα μονοκλωνικά αντισώματα

Η ιδιαιτερότητα της μονοκλωνικά αντισώματα προς CYP26A1, CYP26B1, CYP26C1 και LRAT προσδιορίστηκαν με ELISA χρησιμοποιώντας τα ανοσογόνα πεπτίδια και επίσης με ανοσοκηλίδωση (εικόνα 1) χρησιμοποιώντας προϊόντα λύσης ολικού κυττάρου από κύτταρα που υπερεκφράζουν κάθε πρωτεΐνη. Μια ταινία που μεταναστεύει στο αναμενόμενο μοριακό βάρος παρατηρήθηκε για κάθε αντίσωμα σε ένα προϊόν λύσης παρασκευάζεται από κύτταρα που υπερεκφράζουν την σχετική πρωτεΐνη ενώ δεν ανιχνεύτηκαν ζώνες με το αντίστοιχο προϊόν λύσης ελέγχου.

Η αριστερή λωρίδα κυκλοφορίας του κάθε πίνακα περιέχει κύτταρο ελέγχου λύμα ενώ η δεξιά λωρίδα του κάθε πίνακα περιέχει λύμα παρασκευάζεται από κύτταρα που υπερεκφράζουν την σχετική πρωτεΐνη. 5 μικρογραμμάρια πρωτεΐνης φορτώθηκαν ανά πηγάδι.

Η

Η ανοσοϊστοχημεία

CYP26A1, CYP26B1 και LRAT όλα έδειξαν ανοσοδραστικότητα τόσο φυσιολογικό εντερικό επιθήλιο και πρωτογενή και μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου και σε κάθε περίπτωση ανοσοχρώση ήταν εντοπίζεται στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων (σχήμα 2). Δεν υπήρχε imunoreactivity πυρηνικών ή επιφάνεια της κυτταρικής μεμβράνης. Σε κανονική ανοσοχρώση κολονικό επιθήλιο ήταν κυρίως εντοπισμένη επιφανειακά επιθηλιακά κύτταρα και όχι ετερογένεια εντός του όγκου παρατηρήθηκε σε είτε πρωτοταγή ή μεταστατικό ορθοκολικό όγκων. CYP26C1 δεν παρουσίασαν καμία ανοσοχρώση σε οποιοδήποτε από τα δείγματα ιστού που εξετάστηκαν.

Η

Η ένταση του ανοσοχρώση ήταν σημαντικά υψηλότερη σε πρωτογενή ορθοκολικό καρκίνο συγκριτικά με φυσιολογικό βλεννογόνο του κόλου για CYP26A1 (p = 0,002), CYP26B1 (ρ & lt ? 0.001) και LRAT (ρ & lt? 0.001) (σχήμα 3, πίνακας 2). Δεν υπήρχε διαφορά στην ένταση της έκφρασης είτε CYP26A1 ή CYP26B1 μεταξύ Dukes C καρκίνο του παχέος εντέρου και την αντίστοιχη μετάσταση λεμφαδένα τους, ενώ για LRAT υπήρξε σημαντική μείωση στην ανοσοαντιδραστικότητα στην μετάσταση λεμφαδένα σε σύγκριση με τις αντίστοιχες πρωτογενείς όγκους (ρ & lt? 0.001 ) (Σχήμα 3 και πίνακας 2)

Η

Η έκφραση της CYP26A1 έντονα σχετίζεται τόσο με την έκφραση CYP26B1 (χ

2 = 192.2, p & lt?. 0,001) και έκφραση LRAT (χ

2 = 89,54, p & lt? 0.001) ενώ η έκφραση CYP26B1 συσχετίζεται επίσης με την έκφραση της LRAT (χ

2 = 144.88, p & lt?. 0.001)

Σχέση με κλινικο-παθολογικών παραμέτρων

οι

συγκρίσεις της έκφρασης CYP26A1, CYP26B1 και LRAT και κλινικο-παθολογικές παράμετροι συνοψίζονται στον πίνακα 3. CYP26B1 και LRAT τόσο έδειξε σημαντικές συσχετίσεις με το site του όγκου, του όγκου (Τ) στάδιο, εκτός των τειχών φλεβική εισβολή και τη συνολική σκηνή. Σε αντίθεση, CYP26A1 έδειξε μόνο μια σχέση με το site του όγκου και δεν δείχνουν μια σχέση με οποιοδήποτε από τα άλλα κλινικο-παθολογικών παραμέτρων που εξετάστηκαν.

Η

Επιβίωση ανάλυση

Ολόκληρο ομάδα ασθενών.

Η σχέση της έκφρασης του CYP26A1, CYP26B1 και LRAT με συνολική επιβίωση διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας διαφορετικά σημεία αποκοπής (αρνητικό κατά αδύναμη ν μέτρια ν ισχυρή, αρνητική κατά θετικό, αρνητικό /ασθενές θετικό κατά μέτρια /strong και αρνητικά /αδύναμα /μέτρια v ισχυρή) της ανοσοϊστοχημική βαθμολόγησης και συνοψίζεται στον πίνακα 4 και στο σχήμα 4.

Α-Δ ολόκληρη την ομάδα των ασθενών. Α συνολική επιβίωση δείχνει επιμέρους κατηγορίες CYP26B1. Σε Β-Δ, η επίδραση των διαφόρων κομμένων σημείων δείχνεται. E-H Ασυμφωνία επισκευή ικανός ομάδα. Ε συνολική επιβίωση δείχνει επιμέρους κατηγορίες CYP26B1. Σε F-H η επίδραση των διαφορετικών σημείων αποκοπής εμφανίζεται.

Η

Υπήρξε μια συνεπή και σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης CYP26B1 και το αποτέλεσμα (Σχήμα 4). Λαμβάνοντας υπόψη κάθε ομάδα ένταση CYP26B1 ξεχωριστά, αυξάνοντας την ένταση της CYP26B1 ανοσοδραστικότητας συσχετίστηκε με χειρότερη πρόγνωση (HR = 1,239, 95% CI = 1,104 – 1,390, χ

2 = 15.063, p = 0,002). Για αρνητικούς όγκους CYP26B1 (n = 242), η μέση επιβίωση ήταν 133 μήνες (95% CI = 118 – 148 μήνες), για CYP26B1 αδύναμη εκφράζοντας όγκους (n = 216), η μέση επιβίωση ήταν 106 μήνες (95% CI = 95-116 μήνες), για CYP26B1 μέτρια έκφραση όγκους (n = 106), η μέση επιβίωση ήταν 103 μήνες (95% CI = 85-120 μήνες) και για την έκφραση έντονα όγκους CYP26B1 (n = 58), η μέση επιβίωση ήταν 81 μήνες (95% CI = 60-101 μήνες).

Συγκρίνοντας αρνητικούς όγκους CYP26B1 με όγκους που παρουσίασαν καμία ανοσοδραστικότητα CYP26B1 τότε φτωχότερες επιβίωση σχετίζεται με την έκφραση CYP26B1 (HR = 1,352, 95% CI = 1,054 – 1,735, χ

2 = 5.707, p = 0.017). Για αρνητικούς όγκους CYP26B1 (n = 242), η μέση επιβίωση ήταν 133 μήνες (95% CI = 118 – 148 μήνες), ενώ για CYP26B1 θετικούς όγκους (n = 380), η μέση επιβίωση ήταν 107 μήνες (95% CI = 98 έως 116 μήνες ). Συγκρίνοντας CYP26B1 αρνητική και ασθενώς θετικό όγκους με CYP26B1 μέτρια και ισχυρή όγκων που εκφράζουν έδειξε ότι υπήρχε μια πολύ σημαντική σχέση με την επιβίωση (HR = 1,465, 95% CI = 1,151 – 1,865, χ

2 = 9.832, p = 0.002). Η μέση επιβίωση για τις αρνητικές /αδύναμους όγκους (n = 458) ήταν 125 μήνες (95% CI = 115-135 μήνες), ενώ η μέση επιβίωση για τη μέτρια /ισχυρή ομάδα των όγκων (n = 164) ήταν 96 μήνες (95% CI = 108-124 μήνες). CYP26B1 αρνητική /αδύναμα /μέτρια εκφράζοντας όγκους σε σύγκριση με CYP26B1 όγκους έντονα εκφράζοντας έδειξε επίσης μια πολύ σημαντική συσχέτιση με την επιβίωση (HR = 1,737, 95% CI = 1,248 – 2,418, χ

2 = 11.092, p = 0,001). Η μέση επιβίωση για την CYP26B1 αρνητική /αδύναμα /μέτρια ομάδα (n = 564) ήταν 119 μήνες (95% CI = 111 – 128 μήνες), ενώ η μέση επιβίωση για CYP26B1 ισχυρή όγκους (n = 58) ήταν 80 μήνες (95% CI = 60-101 μήνες).

Για LRAT υπήρχε σημαντική σχέση με την επιβίωση (HR = 1,321, 95% CI = 1,034 – 1,688, χ

2 = 5.039, p = 0.025), όταν η ανοσοϊστοχημεία σκορ έντασης dichotomised σε LRAT αρνητικό και ασθενές περιπτώσεις (n = 239) έναντι LRAT μέτρια και ισχυρή περιπτώσεις (n = 383) (Σχήμα 5). Για LRAT αρνητική και αδύναμα περιπτώσεις η μέση επιβίωση ήταν 132 μήνες (95% CI = 119 – 146 μήνες), ενώ για LRAT μέτρια και ισχυρή περιπτώσεις η μέση επιβίωση ήταν 106 μήνες (95% CI = 96 – 116 μήνες). Δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ CYP26A1 και την επιβίωση σε όλη την ομάδα των ασθενών.

Α. Η σχέση των LRAT και επιβίωσης σε όλες του παχέος εντέρου και B. Η σχέση του LRAT και επιβίωσης σε αναντιστοιχία επισκευή καλά όγκους.

Η

Η αναλυτική σχέση μεταξύ CYP26A1, CYP26B1 και έκφραση LRAT, παθολογικές παραμέτρους και τη συνολική επιβίωση παρουσιάζεται στους πίνακες S2, S3, S4, S5 και.

στην πολυπαραγοντική ανάλυση CYP26B1 παρέμεινε ανεξάρτητο προγνωστικό (p = 0,026), ενώ δεν υπήρχε καμία ανεξάρτητη προγνωστική σημασία της έκφρασης LRAT (πίνακας 5). Αν το πολυπαραγοντικό μοντέλο ανάλυσης περιέχει μόνο τις μεταβλητές που θα είναι διαθέσιμα από μια βιοψία του καρκίνου του παχέος εντέρου (δηλαδή δεν υπάρχουν πληροφορίες σχετικά με το στάδιο Pt, στάδιο Pn και EMVI), τότε CYP26B1 είναι ένα σημαντικό ανεξάρτητο προγνωστικό δείκτη (p = 0,017, Πίνακας S6)

MMR ικανοί ομάδα.

Σε MMR ικανοί όγκους υπήρχε μια σταθερή σχέση μεταξύ της έντασης της έκφρασης CYP26B1 και τη συνολική επιβίωση (πίνακας 6, σχήμα 4). Αύξηση της έντασης της CYP26B1 ανοσοδραστικότητας συσχετίστηκε με χειρότερη πρόγνωση (HR = 1,330, 95% CI = 1,173 – 1,509, χ

2 = 21.493, p & lt? 0.001). Για αρνητικούς όγκους CYP26B1 (n = 200), η μέση επιβίωση ήταν 143 μήνες (95% CI = 127 – 158 μήνες), για CYP26B1 αδύναμη όγκους (n = 186), η μέση επιβίωση ήταν 106 μήνες (95% CI = 94-116 μήνες ), για CYP26B1 μέτρια όγκους (n = 87), η μέση επιβίωση ήταν 96 μήνες (95% CI = 82 – 112 μήνες) και για την έκφραση έντονα όγκους CYP26B1 (n = 49), η μέση επιβίωση ήταν 77 μήνες (95% CI 56- 98 μήνες).

η

Συγκρίνοντας αρνητικούς όγκους CYP26B1 με όγκους που παρουσίασαν καμία ανοσοδραστικότητα CYP26B1 τότε φτωχότερες επιβίωση σχετίζεται με την έκφραση CYP26B1 (HR = 1,604, 95% CI = 1,207 – 2,132, χ

2 = 10.796, p = 0,001). Για αρνητικούς όγκους CYP26B1 (n = 200), η μέση επιβίωση ήταν 143 μήνες (95% CI = 127 – 158 μήνες), ενώ για CYP26B1 θετικούς όγκους (n = 322), η μέση επιβίωση ήταν 104 μήνες (95% CI = 94 έως 114 μήνες ). Συγκρίνοντας CYP26B1 αρνητική και ασθενώς θετικό όγκους με CYP26B1 μέτρια και ισχυρή όγκων που εκφράζουν έδειξε μια πολύ σημαντική συσχέτιση με την επιβίωση (HR = 1,617, 95% CI = 1,242 – 2,105, χ

2 = 12.962, p & lt? 0.001). Η μέση επιβίωση για τις αρνητικές /αδύναμους όγκους (n = 386) ήταν 130 μήνες (95% CI = 120 – 141 μήνες) και η μέση επιβίωση για τη μέτρια /ισχυρή ομάδα των όγκων ήταν 92 μήνες (95% CI = 79 – 106 μήνες ). CYP26B1 αρνητική /αδύναμα /μέτρια εκφράζοντας όγκους σε σύγκριση με CYP26B1 όγκους έντονα εκφράζοντας έδειξε επίσης μια πολύ σημαντική συσχέτιση με την επιβίωση (HR = 1,948, 95% CI = 1,366 – 2,777, χ

2 = 14.149, p & lt? 0.001). Η μέση επιβίωση για την CYP26B1 αρνητική /αδύναμα /μέτρια ομάδα (n = 473) ήταν 123 μήνες (95% CI = 113 – 132 μήνες) και η μέση επιβίωση για CYP26B1 έντονα εκφράζοντας όγκους ήταν 77 μήνες (95% CI = 56-98 μήνες).

Για LRAT υπήρχε σημαντική σχέση με την επιβίωση (HR = 1,464, 95% CI = 1,110 – 1,930, χ

2 = 7.425, p = 0.006), όταν dichotomised οι βαθμολογίες έντασης ανοσοϊστοχημεία σε LRAT αρνητικό και ασθενές περιπτώσεις (n = 198) έναντι LRAT μέτρια και ισχυρή περιπτώσεις (n = 326) (Σχήμα 5). Για LRAT αρνητική και αδύναμα περιπτώσεις η μέση επιβίωση ήταν 139 μήνες (95% CI = 124-156 μήνες), ενώ για LRAT μέτρια και ισχυρή περιπτώσεις η μέση επιβίωση ήταν 106 μήνες (95% CI = 96 – 116 μήνες). Δεν υπήρχε συσχέτιση μεταξύ CYP26A1 και την επιβίωση στην ομάδα καλά ασθενή MMR.

Στην πολυπαραγοντική ανάλυση CYP26B1 παρέμεινε ανεξάρτητο προγνωστικό (p = 0,026), ενώ δεν υπήρχε καμία ανεξάρτητη προγνωστική σημασία της έκφρασης LRAT (πίνακας 7). Αν το πολυπαραγοντικό μοντέλο ανάλυσης περιέχει μόνο τις μεταβλητές που θα είναι διαθέσιμα από μια βιοψία του καρκίνου του παχέος εντέρου (δηλαδή δεν υπάρχουν πληροφορίες σχετικά με το στάδιο του όγκου, κομβικό στάδιο και εξω-τοιχογραφία φλεβική εισβολή), τότε CYP26B1 είναι ένα πολύ σημαντικό ανεξάρτητο προγνωστικό δείκτη (p = 0,001, Πίνακας S6)

η

δεν υπήρχε σχέση MMR ελαττωματικών όγκων με CYP26A1, CYP26B1 ή έκφραση LRAT και η συνολική επιβίωση.

Συζήτηση

καρκίνος του παχέος εντέρου είναι ένας από τους συχνότερη τύπους καρκίνου της οποίας τα κρούσματα συνεχίζει να αυξάνεται και, ενώ έχουν τα μοριακά γεγονότα που χαρακτηρίζουν τη πρώιμο στάδιο του παχέος ανάπτυξης του καρκίνου έχουν περιγραφεί λεπτομερώς υπάρχει ακόμη σαφής απαίτηση για τον εντοπισμό, το χαρακτηρισμό και την επικύρωση βιοδεικτών του καρκίνου του παχέος εντέρου [4] – [6] , [12].

Αυτή η μελέτη έχει προσδιορίσει το προφίλ έκφρασης του μεταβολισμού του ρετινοϊκού οξέος ένζυμα CYP26A1, CYP26B1 και CYP26C1 που είναι μέλη της οικογένειας των Ρ450 ενζύμων και LRAT σε μια μεγάλη ομάδα και χαρακτηρίζεται παχέος εντέρου. Η προγνωστική σημασία της έκφρασης αυτών των ενζύμων που μεταβολίζουν το ρετινοϊκό οξύ έχει επίσης αποδειχθεί

Οι Ρ450 είναι μια μεγάλη ομάδα των εξαρτώμενων NADP υδροξυλασών ταξινομηθεί σε οικογένειες, υπο-οικογένειες και μεμονωμένα μέλη [31] – [34]. . Υπάρχουν δύο διαφορετικές λειτουργικές ομάδες του Ρ450 με βάση την ειδικότητα υποστρώματος τους είτε για ξενοβιοτικών ουσιών ή ενδογενείς ενώσεις. ΛΚ1, CYP2 και CYP3 είναι τα κυρίαρχα οικογένειες που εμπλέκονται στο μεταβολισμό των ξενοβιοτικών ενώ άλλες οικογένειες από ΛΚ4 προς τα πάνω που εμπλέκονται στο μεταβολισμό των συγκεκριμένων ομάδων βιολογικώς δραστικών ενδογενών ενώσεων συμπεριλαμβανομένων εικοσανοειδών, στεροειδείς ορμόνες, τα χολικά οξέα και βιταμίνες συμπεριλαμβανομένης της βιταμίνης Α και D [ ,,,0],35] – [42]. Έχουν πολλαπλές μεταγραφική και μετα-μεταγραφικών ρυθμιστικών μηχανισμών [43]. Οι ξενοβιοτικών μορφές μεταβολισμού του Ρ450 έχουν μελετηθεί εκτενώς σε όγκους και πολλά μεμονωμένα μέλη έχει αποδειχθεί ότι υπερεκφράζεται σε συγκεκριμένους τύπους όγκων κυρίως ΟΥΡ1Β1 η οποία έχει αποδειχθεί ότι έχουν αυξημένη έκφραση σε ένα ευρύ φάσμα όγκων [25], [44 ] – [52]. Ο όγκος επιλεκτική έκφραση του Ρ450 έχει προταθεί ως θεραπευτικός στόχος ειδικά ενζύμων Ρ450 ενεργοποίηση του προ-φαρμάκου [51] – [57]. Τα Ρ450 που εμπλέκονται στην ενδογενή μεταβολισμό ένωση γενικά έλαβαν πολύ λιγότερα μελέτη σε όγκους με εξαίρεση τα Ρ450 που εμπλέκονται στην σεξουαλική ορμόνη (οιστρογόνο και τεστοστερόνη) μεταβολισμός σε σχέση με τους στόχους στον καρκίνο του μαστού και του προστάτη αντίστοιχα [58] – [60].

Δομικά οι Ρ450 δείχνουν μεγαλύτερη ποικιλία αμινοξέων στα C-άκρα τους, που είναι το υδρόφιλο συστατικό της πρωτεΐνης σε αντίθεση με το Ν-τελικό άκρο που είναι το πιο λιπόφιλο συστατικό της πρωτεΐνης. Δεδομένης της σηματοδότησε Ο-τερματικό παραλλαγή αμινοξέος και υδροφιλικότητας της, η χρήση πεπτιδίων στο Ο-άκρο των ατομικών Ρ450 ως ανοσογόνα για την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων σε μεμονωμένες μορφές P450 έχει αποδειχθεί για πολλές ερευνητικές ομάδες περιλαμβανομένης της δικής μας να είναι μια ιδιαίτερα αποτελεσματική στρατηγική να αναπτύξουν ατομικές μορφή ειδικών Ρ450 μονόκλωνα και πολύκλωνα αντισώματα [30], [61], [62].

σε αυτή τη μελέτη έχουμε παράγει αντισώματα τα οποία είναι ειδικά για ατομικές μορφές της οικογένειας CYP26 δηλαδή CYP26A1, CYP26B1 και CYP26C1. Όλα τα τρία ένζυμα CYP26 υδροξυλιωμένο ρετινοϊκό οξύ και η πιο πλήρως χαρακτηριζόμενη είναι CYP26A1 η οποία είναι η κυρίαρχη μορφή που εμπλέκονται στην υδροξυλίωση ρετινοϊκό οξύ. CYP26B1 και CYP26C1 εντοπίζονται πιο πρόσφατα μέλη της οικογένειας CYP26 και είναι λιγότερο καλά χαρακτηρισμένες σε σύγκριση με CYP26A1. CYP26C1 φαίνεται να έχει κυρίαρχο, αλλά όχι απαραίτητα αποκλειστική έκφραση σε συγκεκριμένες περιοχές του εγκεφάλου [22], [23].

καρκίνων του παχέος εντέρου μπορούν να ταξινομηθούν σύμφωνα με αστάθεια μικροδορυφόρου /MMR τους κατάσταση και αυτό αποτελεί ένα σημαντικό μονοπάτι της ανάπτυξη καρκίνου του παχέος εντέρου [63], [64]. Σε αυτή τη μελέτη βρήκαμε προγνωστική σημασία για CYP26B1 τόσο στο σύνολο της κοόρτης του ασθενούς και εκείνων των όγκων που ορίστηκαν ως μικροδορυφόρων άθικτο ή σταθερό. Σε αντίθεση εκείνων των όγκων που είχαν MMR ελαττωματικά δεν δείχνουν οποιαδήποτε προγνωστική σημασία που υποδηλώνει ότι διακριτή ρυθμιστικούς μηχανισμούς μπορεί να λειτουργούν σε MMR καλά και MMR ελαττωματικά όγκων.

Τα ένζυμα CYP26 έχουν προταθεί ως στόχοι φάρμακο κατά του καρκίνου [65 ] και η αυξημένη έκφραση του CYP26A1 και CYP26B1 σε καρκίνο του παχέος εντέρου θα προτείνουν ότι αυτά τα ένζυμα μπορεί να είναι σχετική θεραπευτικοί στόχοι σε αυτόν τον τύπο των όγκων. Αρκετές σειρά ενώσεων που βασίζονται σε διαφορετικές δομικές ιδιότητες έχουν συντεθεί που αναστέλλουν CYP26 [66] – [69]. Αυτές οι ενώσεις είναι πολύ εκλεκτικοί για CYP26 και δείχνουν υψηλή ανασταλτική δραστικότητα (νανομοριακή δραστικότητα) προς CYP26A1. Ωστόσο, η ανασταλτική δράση αυτών των ενώσεων έναντι CYP26B1 και CYP26C1 δεν έχει ακόμη αξιολογηθεί. Επιδημιολογικά στοιχεία έχει επίσης προτείνει τη στόχευση των ρετινοειδών και τα μονοπάτια του ρετινοϊκού οξέος για χημειοπροφύλαξη του καρκίνου του παχέος εντέρου και την αυξημένη έκφραση του CYP26A1 και CYP26B1 στον καρκίνο του παχέος εντέρου θα έδειχνε ότι η στόχευση αυτά τα ένζυμα μπορεί να είναι μια χρήσιμη προσέγγιση [70] – [72].

Αυτή η μελέτη διαπίστωσε επίσης αυξημένη έκφραση του LRAT στην πρωτοβάθμια καρκίνο του παχέος εντέρου σε σύγκριση με το φυσιολογικό επιθήλιο του κόλου. Αυτό το εύρημα φαίνεται να έρχεται σε αντίθεση με προηγούμενες μελέτες από άλλους τύπους καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου της ουροδόχου κύστης [73], του καρκίνου του μαστού [74] και του καρκίνου του προστάτη [75] οι οποίες έχουν προταθεί μειωμένη έκφραση LRAT σε καρκινικά κύτταρα παρά σε αυτές τις μελέτες σχετικά μικρό αριθμό των δειγμάτων όγκου ήταν αναλύονται και κυρίως βιοχημικές δοκιμασίες ολόκληρου εκχυλίσματα όγκων χρησιμοποιήθηκαν ως αποτέλεσμα την εκτίμηση ενός «μέσου επιπέδου» όπως στρώματος του όγκου και νεκρωτικό ιστό θα έχουν συμπεριληφθεί. Υπήρξαν σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης LRAT τόσο στο σύνολο της κοόρτης ασθενών και MMR ικανοί όγκους όταν οι βαθμολογίες LRAT ήταν dichotomised σε αρνητικό /αδύναμα /μέτρια και ισχυρή. Αυτή η ένωση δεν ήταν όπως αναγράφεται για άλλα σημεία αποκοπής και ήταν λιγότερο ισχυρή από ό, τι παρατηρήθηκε για CYP26B1 όσον αφορά την προγνωστική έννοιες.

Το μεγάλο πρόβλημα με τους περισσότερους τύπους καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του παχέος εντέρου, είναι μεταστατική νόσο και τη θεραπεία συνήθως απευθύνεται σε μετάσταση αν φαινοτυπική αξιολόγηση στην οποία οι αποφάσεις της θεραπείας συχνά γίνονται από την ανάλυση των δειγμάτων πρωτογενούς όγκου. Σε αντίθεση με τις καλά καθορισμένες μοριακών γεγονότων που οδηγούν στην ανάπτυξη του καρκίνου του παχέος εντέρου οι οδοί μεταστάσεως έχουν λάβει πολύ λιγότερη προσοχή [76]. Αυτή η μελέτη σχεδιάστηκε για να περιλαμβάνει την αξιολόγηση της φαινοτυπική έκφραση σε αμφότερες τις πρωτογενείς όγκους και τις αντίστοιχες μετάσταση λεμφαδένα τους. Διαπιστώθηκε ότι δεν υπήρχε διαφορά στην έκφραση σε CYP26A1 ή CYP26B1 μεταξύ πρωτογενών όγκων και των αντίστοιχων μετάσταση λεμφαδένα. Ωστόσο, LRAT έδειξε σημαντική μείωση στην έκφραση σε μετάσταση λεμφαδένα σε σύγκριση με τις αντίστοιχες πρωτογενείς όγκους. Αυτό υποδηλώνει αμφότερες πρωτογενείς παράγοντες που σχετίζονται με όγκο και μικροπεριβάλλον παράγοντες που εμπλέκονται στη ρύθμιση της έκφρασης αυτών των ενζύμων σε μετάσταση του καρκίνου του παχέος εντέρου. Οι πιθανές συνέπειες των αλλαγμένη έκφραση CYP26A1, CYP26B1 και LRAT στο μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου κύτταρα και τη συμβολή τους σε μια προ-μεταστατικό φαινότυπο που περιγράφεται στο σχήμα 6.

Α.