Αφηρημένο

Στόχοι

Ο καρκίνος του πνεύμονα είναι μία από τις πιο θανατηφόρες των καρκίνων? διάμεση επιβίωση από τη διάγνωση είναι μικρότερη από ένα έτος σε άτομα με προχωρημένη νόσο. Μυθιστόρημα βιοδείκτες του καρκίνου του πνεύμονα είναι απολύτως αναγκαία. Σε αυτή τη μελέτη, αξιολογήσαμε έκφραση SULF2 με ανοσοϊστοχημεία και η σύνδεσή της με τη συνολική επιβίωση σε μια σειρά ασθενών με μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC). Πρέπει επίσης να εξεταστεί για την παρουσία SULF2 πρωτεΐνης στο πλάσμα να αξιολογήσει το δυναμικό του ως ένα πρώιμο δείκτη ανίχνευσης για NSCLC.

Μέθοδοι

Εντοπίσαμε τους ασθενείς που υποβλήθηκαν σε χειρουργική εκτομή για πνευμονικό αδενοκαρκίνωμα ή πλακώδες καρκίνωμα στο ίδρυμά μας. Ένα τμήμα από κάθε εμπεδωθεί με παραφίνη δείγμα κηλιδώθηκε με αντίσωμα SULF2. Ένας παθολόγος καθόρισε το ποσοστό και την ένταση της χρώσης των καρκινικών κυττάρων. Ανάλυση επιβίωσης πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας ένα πολυμεταβλητό μοντέλο Cox αναλογικών κινδύνων. Χρησιμοποιώντας μια νέα δοκιμασία SULF2 ELISA, αναλύσαμε τα επίπεδα της SULF2 πλάσμα σε μια μικρή ομάδα από υγιείς δότες και ασθενείς με πρώιμο στάδιο NSCLC.

Αποτελέσματα

χρώση SULF2 ήταν παρούσα στο 82% του πνεύμονα δείγματα καρκίνου. Ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα είχαν υψηλότερο μέσο ποσοστό της χρώσης από αδενοκαρκινώματα (100% έναντι 60%? P & lt? 0.0005). Μετά την προσαρμογή ως προς την ηλικία, το φύλο, τη φυλή, ιστολογικός τύπος, το στάδιο, και εισαγωγική θεραπεία, υπήρχε μία μη σημαντική (31%? P = 0.65) αύξηση στον κίνδυνο θανάτου για τους ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα με χρώση SULF2 σε καρκινικά κύτταρα. Αντίθετα, υπήρξε μια σημαντική μείωση του κινδύνου θανάτου (89%? P = 0.02) για ασθενείς με πλακώδες καρκίνωμα με χρώση SULF2 σε καρκινικά κύτταρα. SULF2 πρωτεΐνη ήταν παρούσα στο πλάσμα των ασθενών με πρώιμο NSCLC στάδιο, και επίπεδα διαλυτού SULF2 αυξάνεται με την ηλικία. Τέλος, τα επίπεδα SULF2 πλάσμα ήταν σημαντικά αυξημένα σε πρώιμο στάδιο ασθενείς με NSCLC, σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες.

Συμπεράσματα

έκφραση του όγκου των SULF2 μπορεί να επηρεάσει την πρόγνωση σε NSCLC, ενώ τα επίπεδα SULF2 αίματος μπορεί να έχουν σημαντική ρόλο στη διάγνωση αυτής της θανατηφόρου νόσου

Παράθεση:. Lui NS, Yang YW, van Ζάκυνθος α, Buchanan P, Jablons DM, Lemjabbar-Alaoui η (2016) Έκφραση SULF2 Είναι πιθανό διαγνωστικό και προγνωστικό δείκτη σε Καρκίνος του πνεύμονα. PLoS ONE 11 (2): e0148911. doi: 10.1371 /journal.pone.0148911

Επιμέλεια: Renato Franco, Istituto dei Tumori Fondazione Pascale, Ιταλία

Ελήφθη: 17, Σεπ 2015? Αποδεκτές: 20 Ιανουαρίου, 2016? Δημοσιεύθηκε: 16 Φεβ, 2016

Copyright: © 2016 Lui et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Όλη η δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:. το έργο αυτό χρηματοδοτήθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Καρκίνου (NCI), η οποία αποτελεί μέρος του Εθνικού Ινστιτούτου Υγείας (NIH), ΝΙΗ /NCI U01 U01CA168878 επιχορήγηση (http: //www.nih.gov/about/almanac/organization/NCI.htm). Ο δικαιούχος αυτής της επιδότησης είναι HLA. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του πνεύμονα είναι η πιο συχνά διαγιγνώσκεται μη δερματική κακοήθεια και η κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο σε όλο τον κόσμο [1-4]. Υπάρχουν δύο μεγάλες κατηγορίες ιστολογική πνευμονικό καρκίνωμα: μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα (SCLC) και μη μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα (NSCLC). NSCLC αντιπροσωπεύει περίπου το 90% όλων των καρκίνων του πνεύμονα και αποτελείται από τρεις υποκατηγορίες: αδενοκαρκίνωμα (ADC), πλακώδες καρκίνωμα (SCC), και καρκίνωμα μεγάλου κυττάρου [5]. Η πλειονότητα των καρκίνων του πνεύμονα οφείλονται στο κάπνισμα, η οποία εκθέτει τους αεραγωγούς σε καρκινογόνους καπνό. Ενεργά κάπνισμα αυξάνει τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου του πνεύμονα κατά 13 φορές και η μακροχρόνια παθητική έκθεση στον καπνό του τσιγάρου κατά 1,5 φορές [2]. Περίπου το 90% όλων των θανάτων από καρκίνο του πνεύμονα που σχετίζονται με προκαλούνται από τη χρήση καπνού [6]. Όπως και με άλλους καρκίνους [7], δεν υπάρχει ενιαία μεταλλαγή που είναι υπεύθυνη για τον καρκίνο του πνεύμονα, αλλά μια διαδοχή των μοριακών αλλαγών συμβάλουν στο σχηματισμό όγκου. Ο καρκίνος του πνεύμονα είναι μια ετερογενής νόσος που περιλαμβάνει σωματικές μεταλλάξεις και επιγενετική διαταραχή ενός αριθμού οδών σηματοδότησης. Αρκετοί υποδοχείς κινάσες της τυροσίνης (RTKs) (EGFR, IGF-1 R, και cMet), καθώς και η ΟΤΡάση Kras, έχουν ενοχοποιηθεί ως ογκογονίδια, ενώ οι απώλειες του κύκλου λειτουργίας μεταλλάξεις που βρίσκονται συχνότερα στην ρ53, RB και p16INK4a [1 , 2]. Παρά τις βελτιώσεις στη διάγνωση και τη θεραπεία κατά τη διάρκεια των τελευταίων 25 ετών, η πρόγνωση για τους ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα είναι ακόμη κακή [8,9]. Περαιτέρω κατανόηση της μοριακής βάσης του καρκίνου του πνεύμονα, συμπεριλαμβανομένης της ανακάλυψης βιοδεικτών συγκεκριμένες ασθένειες, θα βελτίωνε σημαντικά την ικανότητά μας να διαγνώσουν, να παρέχουν προγνωστικές πληροφορίες, και ενδεχομένως καθοδηγούν τη θεραπεία των ασθενών.

πρωτεογλυκάνες θειικής ηπαράνης (HSPGs) αποτελούνται από πυρήνα πρωτεΐνες που τροποποιούνται από την ομοιοπολική προσθήκη αλυσίδων HS περιέχουν μεταβλητά θειωμένων επαναλαμβανόμενες μονάδες δισακχαρίτη [10]. HSPGs πραγματοποιήσει αναρίθμητες λειτουργίες σηματοδότησης, χρησιμοποιώντας θειωμένη αλυσίδες τους να δεσμεύουν διαφορετικές πρωτεΐνες συνδέτες, όπως παράγοντες ανάπτυξης, μορφογόνα, χημειοκίνες, και κυτοκίνες. Αυτές οι αλληλεπιδράσεις συνδέτη εξαρτώνται σε μεγάλο βαθμό από το πρότυπο και την πυκνότητα των τροποποιήσεων θείωση με 6-Ο-θείωση της γλυκοζαμίνης (6ος) που είναι γνωστό ότι είναι το κλειδί [11]. Δύο πρόσφατα ανακαλύφθηκε σουλφατάσες (SULF1 και SULF2) παρέχουν ένα νέο μηχανισμό για τη ρύθμιση των HSPG-εξαρτώμενη σηματοδότηση αφαιρώντας 6ος. SULFs είναι ουδέτερο pH, εξωκυτταρικά ένζυμα που απομακρύνουν 6ος από ανέπαφη ηπαρίνη /HSPGs? προωθούν κλειδί μονοπάτια σηματοδότησης μέσω της κινητοποίησης συνδέτες πρωτεΐνη (π.χ., Wnt, GDNF, PDGF-Β, ΒΜΡ-4) από HSPG παγίδευση, απελευθερώνοντας έτσι τις συνδέτες για δέσμευση σε υποδοχείς σήματος μεταγωγής [12].

Ένα ή τόσο θειο μεταγραφές είναι σε γενικές γραμμές υπερεκφράζεται σε πολλούς ανθρώπινους καρκίνους, συμπεριλαμβανομένων των NSCLC, γλοιοβλάστωμα, ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, καρκίνο μαστού, καρκίνο κεφαλής και λαιμού, παγκρεατικό αδενοκαρκίνωμα, το πολλαπλό μυέλωμα, και γαστρικό καρκίνωμα [11,13]. SULF2 έχει άμεσα ενοχοποιηθεί ως οδηγός της καρκινογένεσης στον NSCLC [14], ποντικού και ανθρώπου κακόηθες γλοίωμα, που περιλαμβάνει το γλοιοβλάστωμα και ολιγοδενδρογλοιώματος [15,16], καρκίνο του παγκρέατος [17], και ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [18]. Η πιο εμπεριστατωμένη διερεύνηση του ρόλου της SULF2 στον καρκίνο έχει πραγματοποιηθεί από εμάς σε NSCLC. Εν συντομία, σε NSCLC βρήκαμε [14]: 1) προς τα πάνω ρύθμιση των δύο SULFs στο επίπεδο μεταγραφής? 2) έκφραση της πρωτεΐνης SULF2 σε 20 από 20 ανθρώπινων όγκων NSCLC με ελάχιστη επίπεδα σε φυσιολογικό πνεύμονα? 3) πρωτεΐνη SULF2 προάγει την in vitro κακοήθη φαινότυπο, και την ογκογονικότητα σε ποντικούς του θειο-2 θετικά ανθρώπινες κυτταρικές σειρές NSCLC? και 4) SULF2 προωθεί ανθρώπινο πνεύμονα καρκινογένεση με ρύθμιση της σηματοδότησης Wnt και τη δραστικότητα κινάσης του τρία κρίσιμα υποδοχέων (δηλαδή, EGFR, IGF-1 R και cMet) (αδημοσίευτο). Δυσλειτουργία του καθενός από αυτούς τους τρεις υποδοχείς έχει αιτιακή σχέση με την ανάπτυξη του καρκίνου του πνεύμονα, της εξέλιξης, και αυξημένη αντίσταση στη χημειοθεραπεία [19-21]. Αυτά τα ευρήματα δείχνουν ότι SULF2 ρυθμίζει έναν αριθμό οδών που υπόκεινται σε ανώμαλη ενεργοποίηση σηματοδότησης στον καρκίνο. Αυτή η ρύθμιση ασκείται ανάντη της αλληλεπίδραση των αυξητικών παραγόντων με RTKs και την ενεργοποίηση των ενδοκυτταρικών κινασών. Επιπλέον, η μεθυλίωση προαγωγού SULF2 και έκφραση έχει συσχετισθεί με τη συνολική επιβίωση στον καρκίνο του πνεύμονα, γαστρικό καρκίνο, και ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [6,7]. Ο στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να αξιολογήσει την έκφραση SULF2 με ανοσοϊστοχημεία και συσχετίζονται αυτό με την εξέλιξη της νόσου και τη συνολική επιβίωση σε μια σειρά ασθενών με NSCLC.

Μέθοδοι

Ασθενείς

εντοπίσαμε 121 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε εκτομή του πνεύμονα καρκίνο είτε για επεμβατικές ADC (52 ασθενείς) ή επεμβατικές SCC (69 ασθενείς) στο ίδρυμά μας από το 2000 έως το 2006. Αποκλείσαμε ασθενείς με υποτροπιάζοντα καρκίνο του πνεύμονα, χωρίς διάθεση δείγμα ιστού εγκλεισμένα σε παραφίνη, ή λιγότερο από 3 mm διηθητικού όγκου σε έναν ενισχυτή H &? Ε διαφάνεια. Κλινικοπαθολογικοί δεδομένα που λαμβάνονται μέσω αναθεώρησης των ηλεκτρονικών ιατρικών αρχείων. Ιστολογικά δεδομένα που λαμβάνονται μέσω της αναθεώρησης των εκθέσεων παθολογίας και επιβεβαιώθηκε με επανεξέταση των H & amp? Τμήματα Ε από έναν παθολόγο (AVZ). Παθολογικό στάδιο καθορίστηκε από την κοινή επιτροπή Αμερικής για τον Καρκίνο (AJCC) σύστημα σταδιοποίησης, 7

η έκδοση [8]. Vital κατάσταση αποκτήθηκε μέσω του κύριου αρχείου Κοινωνικής Ασφάλισης θανάτου. Η συνολική επιβίωση υπολογίστηκε από την ημερομηνία της επέμβασης. Το διοικητικό συμβούλιο θεσμική αναθεώρηση UCSF ενέκρινε την εν λόγω μελέτη. στοιχεία και πληροφορίες των ασθενών ήταν ανώνυμες και de-εντοπίστηκαν πριν από την ανάλυση.

Η ανοσοϊστοχημεία

Ένα τμήμα 5 μm από κάθε δείγμα ιστού σε παραφίνη ενσωματωμένο βάφτηκε με ένα μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού για να SULF2 ( 2Β4) [12] σε συγκέντρωση 2 μg /ml με αβιδίνη-βιοτίνη μπλοκάρισμα. Αυτό το αντίσωμα είχε προηγουμένως αναπτυχθεί και επικυρωθεί [12]. Ένας παθολόγος (AVZ) τυφλωμένοι με αποτέλεσμα ασθενή καθορίζεται το ποσοστό και την ένταση της χρώσης των καρκινικών κυττάρων. Το ποσοστό της χρώσης των κυττάρων του όγκου βαθμολογήθηκε από 0 έως 100%. Η ένταση της χρώσης των κυττάρων του όγκου εκτιμήθηκε σε μεγέθυνση 100Χ και σημείωσε από 0 έως 3. Μία βαθμολογία 0 αντιπροσωπεύονται καθόλου χρώση? 1, ασθενής χρώση? 2, μέτρια χρώση? και 3, ισχυρή χρώση. Όταν τα δείγματα έδειξε μια σειρά από ένταση, η μέση ένταση καταγράφηκε. Η παρουσία της χρώσης των ενδοθηλιακών κυττάρων αξιολογήθηκε για κάθε διαφάνεια και λειτούργησε ως εσωτερικός θετικός έλεγχος. Χρώση που σχετίζονται με όγκους στρώματος Σημειώθηκε επίσης.

SULF2 Sandwich ELISA

Σάντουιτς ELISA για την ανίχνευση του SULF2 στο αίμα πραγματοποιήθηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως [22]. Εν συντομία, για τον ποσοτικό προσδιορισμό των SULF2 σε πλάσμα από ασθενείς με NSCLC, ο προσδιορισμός πραγματοποιήθηκε με 12,5% αραιωμένο πλάσμα. Εις τριπλούν προσδιορισμούς διεξήχθησαν για κάθε δείγμα πλάσματος. Οι τιμές υποβάθρου προσδιορίστηκαν με mIgG1 υποκαθιστώντας για το αντι-αντίσωμα SULF2 ως το αντιδραστήριο σύλληψης. Η μέση τιμή υποβάθρου αφαιρέθηκε από ότι με το αντι-SULF2 αντίσωμα σύλληψης για να δώσει το ειδικό σήμα, το οποίο χρησιμοποιήθηκε για να υπολογιστεί SULF2 σε σύγκριση με το πρότυπο τρέξιμο SULF2 στην ίδια πλάκα. Τα δείγματα πλάσματος που είχαν υπόβαθρο μεγαλύτερη από το διπλάσιο της εγγενούς φόντο (σήμα σύλληψη mIgG1 χωρίς προσθήκη ορού) ή απέδωσε αποκλείστηκαν μια αρνητική τιμή.

Στατιστική Ανάλυση

Ο ασθενής αρχικά χαρακτηριστικά και τα αποτελέσματα ανοσοϊστοχημείας συνοψίστηκαν και συγκρίθηκαν με ιστολογικός τύπος, χρησιμοποιώντας t-test του Student για τις συνεχείς μεταβλητές και της δοκιμής χι-τετραγώνου για κατηγορικές μεταβλητές. ανάλυση επιβίωσης πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική Cox μοντέλα αναλογικών κινδύνων. Την ηλικία, το φύλο και τη φυλή περιελήφθησαν στο πολυπαραγοντικό μοντέλο a priori. Ιστολογικός τύπος, το στάδιο, το βαθμό, εισαγωγική θεραπεία, και το έτος της λειτουργίας συμπεριλήφθηκαν στην πολυπαραγοντική ανάλυση μόνο αν η τιμή p ήταν κάτω από 0,10 στην μονοπαραγοντική ανάλυση. Επαναλάβαμε τις αναλύσεις μας σε προκαθορισμένες υποομάδες από ιστολογικός τύπος (ADC και SCC) και εισαγωγική θεραπεία (ναι και όχι). Για όλες τις στατιστικές δοκιμασίες, ένα δύο όψεων επίπεδο άλφα της τάξης του 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση Stata έκδοση 11.

Αποτελέσματα

Ασθενείς

Εντοπίσαμε 121 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε χειρουργική εκτομή για καρκίνο του πνεύμονα σε ίδρυμα μας κατά τη διάρκεια της περιόδου 6 ετών από το 2000 έως το 2006. Ενενήντα τρία από αυτά τα 121 ασθενείς πληρούσαν τα κριτήρια ένταξης μας, συμπεριλαμβανομένων 42 ασθενών με ADC και 51 ασθενείς με SCC (Σχήμα 1).

επιλογή των ασθενών με ανασκόπηση των 121 ασθενών που υποβλήθηκαν σε εκτομή του πνεύμονα για τον καρκίνο του πνεύμονα κατά την περίοδο 6 ετών από το 2000 έως το 2006.

η

Υπήρχαν αρκετές διαφορές στα χαρακτηριστικά κατά την έναρξη μεταξύ των ασθενών με ADC και εκείνων με SCC (Πίνακας 1). Ασθενείς με SCC είχε ένα υψηλότερο ποσοστό των ανδρών (69% έναντι 43%? P = 0,012), είχαν περισσότερες πιθανότητες να είναι παρελθόν ή νυν καπνιστές (90% έναντι 76%? P = 0,006), είχαν περισσότερες πιθανότητες να υποστούν pneumonectomy (14% έναντι 2%? p = 0.03), και είχε μια υψηλότερη συχνότητα εισαγωγική θεραπεία (47% έναντι 26%? p = 0,039).

* τιμές ρ υπολογίστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμή t για συνεχείς μεταβλητές και η x

2 τεστ για τις κατηγορικές μεταβλητές.

η

η ανοσοϊστοχημεία

χρώση SULF2 είτε σε καρκινικά κύτταρα ή στρωματικά ανιχνεύθηκε σε 72/93 από τα δείγματα, συμπεριλαμβανομένων 25 /42 (60%) των δειγμάτων ADC και 51/51 (100%) των δειγμάτων SCC (Πίνακας 2). Όλα τα δείγματα είχαν θετική χρώση των ενδοθηλιακών κυττάρων, η οποία χρησίμευσε ως εσωτερικός θετικός έλεγχος. Εντυπωσιακά, χρώση των καρκινικών κυττάρων ανιχνεύθηκε μόνο σε 19% (8/42) των περιπτώσεων ADC, σε σύγκριση με 94% (42/51) των περιπτώσεων SCC (Σχήμα 2). Ωστόσο, το 50% (17/42) ADC και 88% (45/51) δείγματα SCC έδειξε εμφανή χρώση του στρώματος του όγκου, συμπεριλαμβανομένων ατρακτοειδή στρωματικά κύτταρα εκτός από τα ενδοθηλιακά κύτταρα που ευθυγραμμίζουν τα αιμοφόρα αγγεία. Εκτός από διάσπαρτες επιθηλιακών βασικών κυττάρων, το φυσιολογικό επιθήλιο των αεραγωγών που γειτνιάζουν με όγκους ήταν αρνητική για SULF2 χρώση (Σχήμα 2).

Αντιπροσωπευτικές τομές από δείγματα πλακώδες καρκίνωμα χωρίς χρώση (Α), ασθενής χρώση (Β) και μέτρια χρώση (C) έντονη χρώση (D), και γειτονικό φυσιολογικό πνεύμονα χωρίς χρώση (Ε). Πίνακας F δείχνει χρώση από όγκο που σχετίζεται με στρωματικά κύτταρα 2Β4 αντίσωμα. Πίνακες Α, Β, Γ, Δ, και Ε είναι χαμηλής μικρογραφίες ισχύος (10X, γραμμή κλίμακας = 100 μm). Πίνακας F είναι ένα υψηλής ισχύος μικρογραφίες (20Χ, γραμμή κλίμακας = 50 μm).

Η

χρώση SULF2 ήταν θετική για το 82% των δειγμάτων (είτε όγκου ή χρώση στρώμα). Οι πλακώδες καρκίνωμα (SCC) δείγματα είχαν υψηλότερο μέσο ποσοστό χρώσης όγκου σε σύγκριση με το αδενοκαρκίνωμα (ADC) δείγματα (100% έναντι 60%? Ρ & lt? 0,0005). * P Οι τιμές υπολογίστηκαν με τη χρήση της δοκιμασίας t για συνεχείς μεταβλητές και το x

2 τεστ για τις κατηγορικές μεταβλητές

Η

Επιπλέον, χρώση SULF2 διέφερε από ιστολογικό τύπο, πιθανόν αντανακλώντας την χαρακτηριστική τους αιτιολογίες. δείγματα SCC είχαν υψηλότερη μέση ποσοστό (50,5% έναντι 8,1%? p & lt? 0,0005) και την ένταση (1,7 έναντι 0,3? p & lt?. 0 0005) της χρώσης των κυττάρων του όγκου σε σύγκριση με τα δείγματα ADC. Ωστόσο, δεν βρέθηκε κανένας συσχετισμός μεταξύ είτε του όγκου ή χρώση στρωματικών κυττάρων και εισαγωγική θεραπεία είτε σε ιστολογικό τύπο. Επιπλέον, ούτε το ποσοστό ούτε την ένταση του όγκου ή χρώση των κυττάρων στρωματικών συσχετίστηκε σημαντικά με τις άλλες κλινικές και παθολογικές μεταβλητές, συμπεριλαμβανομένων στάδιο και βαθμό.

Επιβίωση ανάλυση

Ο διάμεσος χρόνος παρακολούθησης ήταν 53,6 μήνες . Στην μονοπαραγοντική Cox μοντέλα αναλογικού κινδύνου (πίνακας 3), παθολογικό στάδιο και η ηλικία σχετίζονταν σημαντικά με τη συνολική επιβίωση. Όπως ήταν αναμενόμενο, τα υψηλότερα στάδιο συσχετίστηκε σημαντικά με χειρότερο συνολική επιβίωση. Υπήρχε μια τάση προς μια συσχέτιση μεταξύ της συνολικής επιβίωσης και τόσο εισαγωγική θεραπεία και ιστολογικός τύπος. Αυτά περιλαμβάνονται στην πολυμεταβλητή μοντέλο (Πίνακας 4). Είναι ενδιαφέρον ότι, οι ασθενείς που υποβλήθηκαν σε εισαγωγική θεραπεία είχαν χειρότερη συνολική επιβίωση σε σχέση με όσους δεν το έκανε. Το αποτέλεσμα αυτό πιθανόν αντανακλά προκατάληψη επιλογής στην οποία οι ασθενείς διαγιγνώσκονται με πιο επιθετικούς όγκους είναι πιο πιθανό να λάβουν εισαγωγική θεραπεία. Έτος της χειρουργικής επέμβασης και ιστολογική βαθμό δεν σχετίζονται με την επιβίωση? αυτά δεν συμπεριλήφθηκαν στο μοντέλο πολλών μεταβλητών (Πίνακας 4). Σε όλους τους ασθενείς, η παρουσία του SULF2 χρώση είτε καρκινικών κυττάρων ή στρώμα συσχετίστηκε με αύξηση 42% του κινδύνου θανάτου, αλλά αυτό το αποτέλεσμα δεν ήταν στατιστικά σημαντική (p = 0.39). Μετά από προσαρμογή για την ηλικία, το φύλο, τη φυλή, το ιστολογικό τύπο, το στάδιο, και εισαγωγική θεραπεία, οι ασθενείς με ADC με χρώση SULF2 στα καρκινικά κύτταρα είχαν 31% αυξημένο κίνδυνο θανάτου (p = 0,65) (Πίνακας 4), και ασθενείς με SCC με χρώση SULF2 στα καρκινικά κύτταρα είχαν ένα 89% μειωμένο κίνδυνο θανάτου (ρ = 0,02) (Πίνακας 4).

(* 100% των όγκων χρωματίστηκαν θετικά για είτε όγκου ή ινώδους υμένα).

η

Ανάλυση των SULF2 σε

αίματος

Η ομάδα μας ανέπτυξε προηγουμένως ένα ισχυρό σάντουιτς ELISA για την ανίχνευση SULF2 στο ανθρώπινο αίμα (πλάσμα και στον ορό) [22]. Για τη μελέτη αυτή εξετάσαμε τα επίπεδα SULF2 πλάσμα σε μία ομάδα από 43 ασθενείς με νεοδιαγνωσμένο πρώιμο στάδιο NSCLC. Πλάσμα συλλέχθηκαν πριν από την χειρουργική εκτομή για καρκίνο του πνεύμονα σε ίδρυμα μας. Οι ασθενείς αυτοί είχαν σταδίου ΙΑ ή ΙΒ (71%) ή σταδίου ΙΙ (29%) NSCLC. Διαλυτό SULF2 ήταν παρούσα στο αίμα των ασθενών με πρώιμο στάδιο NSCLC (Μέση τιμή ± SEM = 1024,2 ± 82,8 pg /ml) (Σχήμα 3Α). Περαιτέρω, υπήρχε μια σχετιζόμενη με την ηλικία αύξηση των επιπέδων στο πλάσμα SULF2 (Σχήμα 3Β). Αυτή είναι η πρώτη φορά που τα επίπεδα SULF2 έχουν ποσοτικοποιηθεί στο αίμα από ασθενείς με NSCLC. Σημαντικά, οι αναλύσεις μας αποκάλυψαν ότι SULF2 πρωτεΐνη είναι σημαντικά αυξημένα σε πλάσματα από ασθενείς με NSCLC με SULF2 θετικούς όγκους (Μέση τιμή ± SEM = 1108,0 ± 125,5 pg /ml), σε σύγκριση με τους ασθενείς με NSCLC με αρνητικούς όγκους SULF2 (Μέση τιμή ± SEM = 489,3 ± 131,4 pg /ml) (ρ = 0.0003) (Σχήμα 3C). Επιπρόσθετα, αναλύσαμε τα επίπεδα SULF2 σε εμπορικά διαθέσιμο πλάσμα από 16 υγιείς δότες. Τα αποτελέσματα μας αποκάλυψαν ότι το επίπεδο της SULF2 πρωτεΐνες του πλάσματος είναι σημαντικά αυξημένη σε NSCLC πλάσμα, σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες (Μέση τιμή ± SEM = 1024,2 ± 82,8 pg /ml έναντι 574,1 ± 78,15 pg /ml, αντίστοιχα) (σχήμα 3Α). Τα στοιχεία αυτά είναι συναρπαστικό και παρέχει την πρώτη ένδειξη ότι τα επίπεδα στο αίμα SULF2 μπορεί να είναι χρήσιμη βιοδείκτες για την έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου του πνεύμονα. Ωστόσο, οι συμπληρωματικές μελέτες που απαιτούνται για την επικύρωση αυτών των ευρημάτων σε δείγματα αίματος από μια μεγαλύτερη ομάδα ασθενών με NSCLC που συλλέγονται από ειδικά κέντρα με δική τους εγγενή υγιείς μάρτυρες, σε συνδυασμό με την ηλικία, το φύλο και το κάπνισμα, και συλλέγονται στο ίδιο πρωτόκολλο.

Α) τα δείγματα πλάσματος από 45 νεοδιαγνωσθέντες ασθενείς με ΜΜΚΠ πρώιμο στάδιο και 16 υγιείς μάρτυρες αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας δοκιμασία SULF2 ELISA. Τα επίπεδα πρωτεΐνης SULF2 στο αίμα είναι αυξημένα σε ασθενείς με NSCLC ((Μέση τιμή ± SEM = 1024,2 ± 82,8 pg /ml) σε σχέση με τους υγιείς μάρτυρες άτομα (Μέση τιμή ± SEM = 574,1 ± 78,15 pg /ml), (ρ = 0.004). τιμή Ρ ήταν καθορίζεται από την T-test με την ουαλική διόρθωση για άνισες διακυμάνσεις. Β) σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων SULF2 πλάσμα και η ηλικία βρέθηκε σε ασθενείς με ΜΜΚΠ (

r

= 0,3656, p = 0.159). r και Ρ τιμές προσδιορίστηκαν με μη παραμετρική δύο ουρών Spearman συσχέτιση. Γ) πρωτεΐνη SULF2 είναι σημαντικά αυξημένα σε πλάσματα από ασθενείς με NSCLC με SULF2 θετικούς όγκους (Μέση τιμή ± SEM = 1108,0 ± 125,5 pg /ml), σε σύγκριση με τους ασθενείς με NSCLC με αρνητικούς όγκους SULF2 (Μέση τιμή ± SEM = 489,3 ± 131,4 pg /ml) (ρ = 0,0003). αξία Ρ προσδιορίστηκε από την T-test με την ουαλική διόρθωση για άνισες διακυμάνσεις.

Η

Συζήτηση

Οι μονοδιάστατες αναλογικών κινδύνων κατά Cox μοντέλα αποκάλυψε ότι οι ασθενείς με NSCLC με υψηλό επίπεδο έκφρασης SULF2 σε όγκους όπως αξιολογείται με ανοσοϊστοχημεία έτειναν να έχουν μικρότερη συνολική επιβίωση, υποδεικνύοντας ότι ένα υψηλό επίπεδο SULF2 μπορεί να είναι ένας δείκτης κακής πρόγνωσης σε αυτούς τους ασθενείς. Περιέργως, μετά την προσαρμογή για την ηλικία, το φύλο, τη φυλή, το ιστολογικό τύπο, το στάδιο, και εισαγωγική θεραπεία, χρώση των καρκινικών κυττάρων για SULF2 συνδέθηκε με μια τάση προς την αύξηση του κινδύνου θανάτου (31%, NS) σε ασθενείς ADC. Αντίθετα σε ασθενείς με SCC, χρώση SULF2 σε καρκινικά κύτταρα συσχετίστηκε με σημαντικά μειωμένο κίνδυνο θανάτου (89%, ρ = 0,02). Η προαναφερθείσα διαφορά στην έκβαση που σχετίζονται με όγκο SULF2 χρώση μεταξύ ADC και ACC ασθενείς, πιθανόν αντανακλά διαφορετικές αιτιολογία και τη συμπεριφορά του όγκου αυτών των δύο υποτύπων καρκίνου του πνεύμονα. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι η ομάδα SCC έχει έναν πολύ περιορισμένο αριθμό SULF2 αρνητικές περιπτώσεις (3 από 49 περιπτώσεις). Ως εκ τούτου, τα ευρήματά μας χρειάζονται περαιτέρω επιβεβαίωση σε μεγαλύτερες ομάδες ασθενών με NSCLC να επιβεβαιώσει μια πιθανή απόκλιση αποτελέσματος μεταξύ της SCC και ADC που σχετίζονται με SULF2 θετική χρώση σε όγκους.

Όπως ήταν αναμενόμενο, ανώτερο στάδιο ήταν επίσης σημαντικά που συνδέονται με την χειρότερη συνολική επιβίωση . Είναι ενδιαφέρον ότι, οι ασθενείς που υποβλήθηκαν σε εισαγωγική θεραπεία είχαν χειρότερη συνολική επιβίωση σε σχέση με όσους δεν το έκανε. Το αποτέλεσμα αυτό πιθανόν αντανακλά προκατάληψη επιλογής, στην οποία ασθενείς με πιο επιθετικούς όγκους είχαν περισσότερες πιθανότητες να λάβουν εισαγωγική θεραπεία.

Αυτή η μελέτη έδειξε επίσης ότι η χρώση SULF2 διέφερε από ιστολογικός τύπος, πιθανόν αντανακλώντας την χαρακτηριστική τους αιτιολογίες. δείγματα πλακώδες καρκίνωμα είχαν σημαντικά υψηλότερο ποσοστό και η ένταση της χρώσης των καρκινικών κυττάρων από τα δείγματα αδενοκαρκινώματος. Αυτά τα αποτελέσματα είναι σε συμφωνία με προηγούμενα ευρήματα μας, στα οποία η έκφραση SULF2 σε καρκινικά κύτταρα με ανοσοϊστοχημεία ήταν παρούσα σε δείγματα δέκα στους δέκα πνεύμονα καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων, αλλά μηδέν από τα δέκα δείγματα αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα [12]. Ωστόσο, τα δύο αδενοκαρκινώματα και καρκινώματα πλακωδών κυττάρων έδειξε εμφανή χρώση του στρώματος του όγκου [12].

Η ένωση SULF2 και τη συνολική επιβίωση αντιστοιχεί σε προηγούμενα ευρήματα σε διάφορους τύπους καρκίνου. Στην αρχική μας έρευνες, δείξαμε ότι τα υψηλότερα επίπεδα της πρωτεΐνης SULF2 όπως αξιολογείται με ανοσοχημεία σχετίζεται με αυξημένη σοβαρότητα της νόσου και χειρότερη επιβίωση σε ασθενείς με καρκίνο του οισοφάγου [23]. Lai et al. έδειξε ότι η αυξημένη έκφραση μεταγράφου SULF2 με μικροσυστοιχία συνδέθηκε με επιθετικούς όγκους και φτωχότερη επιβίωση σε ασθενείς με ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [24]. Bret et al. έδειξαν ότι η έκφραση SULF2 σε πρωτογενή κύτταρα πολλαπλού μυελώματος συσχετίστηκε με κακή πρόγνωση σε δύο ανεξάρτητες μεγάλες ομάδες ασθενών [13]. Τέλος, Tessema et al. και Wang et al. έδειξαν ότι η μεθυλίωση προαγωγού SULF2 συσχετίστηκε με βελτιωμένη συνολική επιβίωση σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα και γαστρικό καρκίνο, αντίστοιχα [25,26]. Σε συμφωνία, τα αποτελέσματά μας δείχνουν για πρώτη φορά ότι SULF2 στο επίπεδο της πρωτεΐνης συνδέεται με τη συνολική επιβίωση σε NSCLC, επιβεβαιώνοντας έτσι σημαντικό ρόλο της στην καρκινογένεση και δυνατότητες ως προγνωστικό βιοδείκτη.

Τα εξωκυττάρια endosulfatases (SULF1 και SULF2) υπερεκφράζονται σε μια ευρεία ποικιλία καρκίνων του ανθρώπου [11,13,16] και SULF2, ειδικότερα, έχει εμπλακεί, από εμάς και άλλους, ως οδηγός της καρκινογένεσης στον NSCLC [12], παγκρεατικό καρκίνωμα [17], κακοήθες αστροκύτωμα [15,16], ορθοκολικό καρκίνωμα [27], και ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [18]. Όπως εξωκυτταρικών ενζύμων που είναι τόσο δεμένοι με την κυτταρική μεμβράνη και εκκρίνεται, τα SULFs και θειική ηπαράνη πρωτεογλυκάνης αυτών (HSPG) υποστρώματα είναι παρόντα στο εξωκυτταρικό περιβάλλον. HSPGs πραγματοποιήσει αναρίθμητες λειτουργίες σηματοδότησης χρησιμοποιώντας θειωμένη αλυσίδες τους να δεσμεύουν διαφορετικές πρωτεΐνες συνδέτες, όπως παράγοντες ανάπτυξης, μορφογόνων, και κυτοκίνες. Αυτές οι αλληλεπιδράσεις εξαρτώνται από το σχέδιο των τροποποιήσεων θείωσης [10]. Η 6-Ο-θείωση της γλυκοζαμίνης (6ος) είναι γνωστό ότι είναι το κλειδί για πολλές συνδέτη αλληλεπιδράσεις. SULFs επιλεκτική αφαίρεση των κρίσιμων τροποποιήσεις 6ος από HSPGs, και με τον τρόπο αυτό, SULFs αποτρέψει την παγίδευση συνδετήρα, επιτρέποντας αυτοί οι συνδετήρες για να αλληλεπιδρούν με τους αντίστοιχους υποδοχείς τους. Αυτό το φαινόμενο έχει αποδειχθεί για Wnt, VEGF, FGF-1, PDGF, CXCL12 (SDF-1), CCL21, IL-8, και ΙΡ-10 [28,29]. Η ανώμαλη ενεργοποίηση των προαναφερθέντων οδών σηματοδότησης έχει εμπλακεί σε πολλές μορφές της καρκινογένεσης.

Αρχικά, SULFs θεωρούνταν καταστολείς όγκων [30-32]. Αυτή η πεποίθηση προήλθε από πειράματα στα οποία αναγκάζονται έκφραση ενός θειο σε αρκετές γραμμές όγκου προκάλεσε μειωμένη αυξητικό παράγοντα σηματοδότηση από ΗΒ-EGF, FGF-2 ή HGF, και μειωμένη ογκογονικότητα. Οι αρνητικές επιπτώσεις της SULFs επί FGF-2 σηματοδότηση είναι συνεπής με την απαίτηση για 6S επί HSPGs στο FGF-2 σηματοδότηση σύμπλοκο [33]. Ωστόσο, σύμφωνα με μια πιθανή ογκογόνο ρόλο, ένα ή αμφότερα

θειο

γονίδια σύντομα βρέθηκε να υπερεκφράζεται σε υποσύνολα πολλαπλούς όγκους (μαστού, του παγκρέατος, ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα, κακόηθες αστροκύτωμα, κεφαλής και λαιμού, του πνεύμονα, και πολλαπλές μυέλωμα) [11]. Ειδικότερα, SULF2 έχει άμεσα ενοχοποιηθεί ως ένα γονίδιο που προκαλούν καρκίνο υποψήφιος σε ανθρώπινο καρκίνο του μαστού και καρκίνο του εγκεφάλου ποντικού [34,35]. Επιπλέον, σε κακοήθη αστροκύτωμα, και του παγκρέατος, του παχέος εντέρου, και του πνεύμονα καρκινικές κυτταρικές γραμμές SULF2 knockdown οδήγησε σε μειωμένη πολλαπλασιασμό και μειωμένη ανάπτυξη των ξενομοσχευμάτων σε ποντικούς, πιθανώς λόγω της επίδρασης του σχετικά με τις οδούς που επάγεται από παράγοντες δέσμευσης HSPG [14,16-18 σηματοδότησης, 27]. Σε ηπατοκυτταρικό καρκινικές κυτταρικές σειρές, η υπερέκφραση του SULF2 οδήγησε σε αυξημένο πολλαπλασιασμό και τη μετανάστευση και σημαντικά ενίσχυσε την ογκογονικότητα αυτών των κυττάρων σε γυμνά ποντίκια [18].

Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι SULF2 εκφράστηκε σε 72 από 93 ανθρώπινα καρκίνου του πνεύμονα όγκων, συμπεριλαμβανομένων 25 από 41 δείγματα αδενοκαρκινώματος (60%) και 51 από 51 δείγματα καρκινώματος (100%) πλακώδες. Σημαντικά, υψηλή έκφραση SULF2 σχετίστηκε με χειρότερη πρόγνωση σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα. Τα ευρήματα αυτά είναι σε συμφωνία με προηγούμενη έκθεση που δείχνει μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ μεθυλίωσης SULF2 υποκινητή και την επιβίωση σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα [25]. Παραδόξως, SULF2 χρώση των καρκινικών κυττάρων σε ασθενείς με καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων συνδέθηκε με μια καλύτερο ποσοστό επιβίωσης. Παρ ‘όλα αυτά, τα ευρήματα αυτά είναι πολύ ενθαρρυντικά, και φαίνεται ότι η πλειοψηφία των δειγμάτων αδενοκαρκινωμάτων (συμπεριλαμβανομένης της νόσου πρώιμο στάδιο), και όλα τα δείγματα όγκων πλακωδών κυττάρων καρκίνωμα έχουν κάποιο βαθμό χρώσης για SULF2 πρωτεΐνη. Μαζί, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν το δυναμικό της SULF2 πρωτεΐνης ως προγνωστικός βιοδείκτη σε ασθενείς με καρκίνο του πνεύμονα. Επιπλέον, ως εκκρινόμενο μόριο που μπορεί να συσσωρεύεται στο αίμα ή άλλα σωματικά υγρά, είναι επίσης έχει δυνατότητες ως διαγνωστικός βιοδείκτη.

Τόσο στις ΗΠΑ και σε όλο τον κόσμο, ο καρκίνος του πνεύμονα έχει εδώ και καιρό το νούμερο ένα αιτία σχετίζονται με το θάνατο του καρκίνου [3,4,36]. Λόγω της καθυστερημένης υποβολής και τη διάγνωση της, ο καρκίνος του πνεύμονα έχει πολύ κακή πρόγνωση και η κακή θεραπεία σε ποσοστό [37,38]. Η πλειοψηφία των περιπτώσεων (άνω του 60%) διαγιγνώσκονται σε προχωρημένο στάδιο της νόσου, όπου οι τρέχουσες μέθοδοι θεραπείας είναι απίθανο να είναι αποτελεσματική [35-37]. Το ποσοστό της συνολικής επιβίωσης 5 ετών είναι λιγότερο από 10% σε ασθενείς με προχωρημένη νόσο, αλλά μεγαλύτερη από 60% σε ασθενείς με στάδιο 1 της νόσου [3,4]. Ως εκ τούτου, υπάρχει επιτακτική ανάγκη για αποτελεσματικά εργαλεία που επιτρέπουν την έγκαιρη διάγνωση και τη θεραπεία. Δεν υπάρχουν βιολογικοί δείκτες που χρησιμοποιούνται κλινικά λόγω της έλλειψης επαρκούς ευαισθησίας και ειδικότητας. SULF2 είναι σημαντική από την άποψη αυτή, δεδομένου ότι είναι ένα εκκρινόμενο ένζυμο με αποδεδειγμένη σχέση με πνεύμονα καρκινογένεση. Ως εκ τούτου, η ανάπτυξη της SULF2 ως βιοδείκτη μπορεί να βοηθήσει στον εντοπισμό μια ομάδα υψηλού κινδύνου, που θα κάνουν τη διαλογή εφικτό.

Στην παρούσα μελέτη μας, 20 από τα 34 (59%) πρώιμο στάδιο (Ι ή ΙΙ) των πνευμόνων δείγματα αδενοκαρκινώματος είχε χρώση SULF2. Επίσης, 40 από τα 40 (100%) πρώιμο στάδιο (Ι ή ΙΙ) δείγματα πλακώδες καρκίνωμα πνεύμονα είχαν χρώση SULF2. Όπως εκκρίνονται ένζυμα, υποθέτουμε ότι η διαλυτή SULF2 δυνητικά απελευθερώνεται από όγκους μπορούν να ανιχνευθούν στο αίμα και έτσι μπορεί να χρησιμεύσει ως βιοδείκτη για την έγκαιρη ανίχνευση του NSCLC με SULF2 υπερέκφραση. Για να ελεγχθεί αυτή η υπόθεση, χρησιμοποιήσαμε πρόσφατα αναπτυχθεί και επικυρωθεί δοκιμασία ELISA μας για την ανίχνευση SULF2 στο ανθρώπινο αίμα [22]. Βρήκαμε ότι το πλάσμα από ασθενείς με πρώιμο στάδιο NSCLC περιέχει ένα μέσο επίπεδο Μέση τιμή ± SEM = 1024,2 ± 82,8 pg /ml SULF2 (Σχήμα 3Α). Επιπλέον, τα αποτελέσματα μας υποδηλώνουν ότι υπάρχει μια σχετιζόμενη με την ηλικία αύξηση των επιπέδων στο πλάσμα SULF2, έτσι ηλικία μπορεί να είναι ένας πιθανός συγχητικές μεταβλητή. Αυτά τα δεδομένα παρέχουν την πρώτη απόδειξη ότι SULF2 πρωτεΐνη μπορεί να ποσοτικοποιηθεί στο αίμα από έναν ασθενή με καρκίνο του πνεύμονα πρώιμο στάδιο. Επίσης, έχουμε πραγματοποιήσει προκαταρκτικές αναλύσεις των επιπέδων SULF2 στο αίμα από το πρώιμο στάδιο ασθενείς με καρκίνο του NSCLC. Βρήκαμε ότι σημαίνουν τα επίπεδα SULF2 στο αίμα είναι σημαντικά αυξημένα σε ασθενείς με NSCLC και σε σύγκριση με υγιείς δότες αίματος (Μέση τιμή ± SEM = 1024,2 ± 82,8 pg /ml έναντι 574,1 ± 78,15 pg /ml, αντίστοιχα) (σχήμα 3Α). Τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι υπάρχει μία σχετιζόμενη με την ηλικία αύξηση των επιπέδων στο πλάσμα SULF2, έτσι ηλικία μπορεί να είναι ένας πιθανός συγχητικές μεταβλητή. Παρ ‘όλα αυτά, τα αποτελέσματα αυτής της πρώτης ανάλυσης παρέχουν αποδεικτικά στοιχεία ότι ο καρκίνος του πνεύμονα πρώιμο στάδιο σχετίζεται με αυξημένη συγκέντρωση του SULF2 πλάσμα. Ως εκ τούτου, παρέχουμε την πρώτη επικύρωση SULF2 αίματος ως μια πιθανή βιοδείκτη για την έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου χρησιμοποιώντας μία ποσοτική ELISA. Επιπλέον, τα ευρήματα αυτής της αρχικής ανάλυσης ανοικτό το ενδεχόμενο του αίματος SULF2 ως πιθανό βιοδείκτη για την έγκαιρη διάγνωση του καρκίνου, χρησιμοποιώντας μια ποσοτική SULF2 ELISA. Αν και δοκιμασία ανίχνευσης SULF2 χρειάζεται περαιτέρω επικύρωση σε μια μεγαλύτερη κλινική ομάδα με την ηλικία και το φύλο μάρτυρες και μπορεί να μην είναι κατάλληλο ως ένα τεστ stand-alone, ο συνδυασμός του με προσδιορισμούς που μετρούν τα επίπεδα άλλων κυκλοφορούντων βιολογικών δεικτών, όπως Cyfra, μπορούν να παρέχουν επαρκή ειδικότητα για τη συμπλήρωση των μεθόδων απεικόνισης που χρησιμοποιούνται συνήθως στη διαλογή του πληθυσμού για τον καρκίνο.

Συμπερασματικά, στην παρούσα μελέτη δείξαμε ότι με ανοσοϊστοχημεία SULF2 πρωτεΐνη είναι παρούσα στην πλειοψηφία των αδενοκαρκινώματα του πνεύμονα και σε όλα τα πλακωδών κυττάρων του πνεύμονα δείγματα καρκινώματος που δοκιμάσαμε. Δείξαμε για πρώτη φορά ότι SULF2 χρώση των καρκινικών κυττάρων συνδέθηκε με μια τάση προς χειρότερη συνολική επιβίωση σε ασθενείς με αδενοκαρκινώματα του πνεύμονα. Αυτό είναι σημαντικό, όπως περίπου εννέα στους δέκα περιπτώσεις καρκίνου του πνεύμονα μπορεί να χαρακτηριστεί ως NSCLC, και μη-πλακώδες NSCLC περιλαμβάνει μέχρι και 70% αυτών των περιπτώσεων. Επιπλέον, έχουμε καταδείξει ότι διαλυτές SULF2 αυξάνεται στο αίμα από ασθενείς πρώιμο στάδιο NSCLC έτσι, παρέχοντας την πρώτη απόδειξη του διαλυτού SULF2 αίματος ως μια πιθανή βιοδείκτη για την έγκαιρη ανίχνευση του NSCLC. Μαζί, αυτά τα ευρήματα είναι πολύ ενθαρρυντικά και επιβεβαιώνουν τις δυνατότητες του SULF2 πρωτεΐνης ως διαγνωστικό και προγνωστικό βιοδείκτη σε ασθενείς με NSCLC.

Ευχαριστίες

Χάρη σε Loretta Chan στο UCSF Ελένης Diller Οικογένεια Περιεκτική Cancer Center ιστών πυρήνα για την εκτέλεση της ανοσοϊστοχημική χρώση.