Αφηρημένο

α-εμβρυϊκής πρωτεΐνης (AFP) -την παραγωγή γαστρικού καρκίνου (AFPGC), εκπροσωπούμενη από την παραγωγή του AFP, έχει μια πιο επιθετική συμπεριφορά από κοινού με γαστρικό καρκίνο. Οι υποκείμενοι μηχανισμοί δεν είναι καλά κατανοητοί. τριοξείδιο του αρσενικού (As

2O

3) χρησιμοποιείται κλινικά για τη θεραπεία της οξείας προμυελοκυτταρικής λευχαιμίας (APL) και έχει δραστικότητα

in vitro

έναντι αρκετών κυτταρικών σειρών συμπαγών όγκων, με επαγωγή της απόπτωσης και αναστολής του πολλαπλασιασμού οι πρωταρχικοί αποτελέσματα. μετατροπέα σήματος και ενεργοποιητής της μεταγραφής 3 (STAT3) έχει ένα σημαντικό ρόλο στην ογκογένεση διαφόρων πρωτογενείς καρκίνους και καρκινικών κυττάρων με προς τα πάνω ρύθμιση κυτταρικής επιβίωσης και προς τα κάτω ρύθμιση πρωτεΐνες καταστολής όγκου. Εδώ βρήκαμε μειωμένη έκφραση του AFP και STAT3 μετά την επαγωγή απόπτωσης από Σαν

2O

3 στα κύτταρα AFPGC FU97. Επίσης, το επίπεδο του ογκογονιδίου στόχου STAT3 Bcl-2 μειώθηκε με Όπως

2O αυξήθηκε

3, και ότι το ογκοκατασταλτικό Bax. Επιπλέον, η έκφραση STAT3 και το βάθος της εισβολής και της μετάστασης λεμφαδένα συνδέθηκαν. Επιβίωση των ασθενών με καρκίνο του στομάχου ήταν χαμηλότερη με AFP και STAT3 διπλό υπερέκφραση ό, τι με υπερέκφραση του είτε μόνο του. Προς τα κάτω ρύθμιση της AFP και της έκφρασης STAT3 παίζει σημαντικό ρόλο ως

2O

3-επαγόμενη απόπτωση κυττάρων AFPGC, η οποία προτείνει ένα νέο μηχανισμό Όπως

2O

3-επαγόμενη απόπτωση κυττάρων. Ως

2O

3 μπορεί να είναι μια πιθανή παράγοντας για τη θεραπεία AFPGC

Παράθεση:. Jia Υ, Liu D, Xiao D, Ma Χ, Χαν S, Zheng Y, et al. (2013) Έκφραση του AFP και STAT3 εμπλέκεται σε τριοξείδιο του αρσενικού απόπτωση και αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων AFP παράγουν γαστρικό καρκίνο. PLoS ONE 8 (1): e54774. doi: 10.1371 /journal.pone.0054774

Επιμέλεια: Matias Α Avila, Πανεπιστήμιο της Ναβάρα Ιατρική Σχολή και το Κέντρο Εφαρμοσμένης Ιατρικής Έρευνας (CIMA), Ισπανία

Ελήφθη: 4 Νοεμβρίου 2012? Αποδεκτές: 14, Δεκεμβρίου του 2012? Δημοσιεύθηκε: 30, Ιαν 2013

Copyright: © 2013 Jia et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίζεται από το Εθνικό Nature Science Foundation Επιχορήγηση της Κίνας (NSFC, Νο 81000869 και 81272588). (https://www.nsfc.gov.cn/Portal0/default166.htm.). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

α-εμβρυϊκής πρωτεΐνης (AFP) είναι μια σημαντική πρωτεΐνη του πλάσματος που παράγεται από το σάκο κρόκο και το συκώτι κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ζωής. Στην κλινική πρακτική, AFP χρησιμοποιείται συχνά ως δείκτης όγκου του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος και τον κρόκο σάκο όγκους. Μερικές μελέτες έχουν δείξει ότι οι άλλοι όγκοι σε ανθρώπινο μπορούσε επίσης να παράγουν AFP και γαστρικού καρκίνου ήταν ένα από τα πιο κοινά [1] – [8]. AFP παραγωγής γαστρικού καρκίνου (AFPGC) έχει μια πιο επιθετική συμπεριφορά από κοινού με γαστρικό καρκίνο, επειδή η νόσος εξελίσσεται ταχέως και μετάσταση συχνά στις περιφερειακές λεμφαδένες και ήπαρ [7] – [10]. Επιπλέον, AFPGC συνδέεται με μικρότερο διάστημα χωρίς μετάσταση στο ήπαρ μετά από ριζική χειρουργική επέμβαση, και το ποσοστό επιβίωσης είναι σημαντικά φτωχότερη με AFPGC ό, τι χωρίς την παραγωγή AFP [1], [9], [10]. Έτσι, AFP μπορεί να είναι ένας παθητικός δείκτη όγκου και ένας ενεργός διεγέρτης της ανάπτυξης του όγκου. Προς τα κάτω ρύθμιση της έκφρασης AFP μπορεί να είναι μια αποτελεσματική προσέγγιση για την AFP παράγουν καρκίνο

Το τριοξείδιο του αρσενικού (As

2O

3) έχει χρησιμοποιηθεί επιτυχώς για τη θεραπεία της λευχαιμίας [11] – [13]. Και είναι ενεργή σε πολλές συμπαγείς όγκους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του στομάχου [14]. Ο μηχανισμός δράσης της Όπως

2O

3 περιλαμβάνει επηρεάζουν τις δραστηριότητες των Akt, κινασών JNK, ΝΡ-κΒ, γλουταθειόνη, σηματοδότηση ασβέστιο, αντιδραστικά είδη οξυγόνου (ROS), και κασπάσες, καθώς και προ- και αντι -apoptotic πρωτεΐνες [15] – [18]. Αριθ κλασική χημειοθεραπεία είναι διαθέσιμη για AFPGC, αν και ορισμένοι σχήματα έχουν επιδείξει αποτελεσματικότητα σε ένα μικρό αριθμό περιπτώσεων [19] – [21]. Επίσης, τα αποτελέσματα και το μηχανισμό της Όπως

2O παραμένουν ασαφείς

3 εναντίον AFPGC.

μετατροπέας σήματος και ενεργοποιητής της μεταγραφής 3 (STAT3) εμπλέκεται τόσο στην μεταγωγή σήματος και την ενεργοποίηση της μεταγραφής και έχει σημαντικό ρόλο σε διάφορες βιολογικές διεργασίες όπως ο μεταβολισμός και ογκογένεση [22], [23]. STAT3 ιδιοσυστατικά ενεργοποιημένη σε μια ευρεία ποικιλία τύπων καρκίνου [24], [25]. Στόχευση STAT3 μπορεί να είναι μια αποτελεσματική προσέγγιση για την αντιμετώπιση της προόδου του όγκου. Αυτό το αποτέλεσμα STAT3 διαμεσολαβείται μέσω της ρύθμισης των διαφόρων STAT3 γονιδίων στόχων, συμπεριλαμβανομένων των αναστολέων της απόπτωσης και ρυθμιστές του κυτταρικού κύκλου, όπως Bcl-2, Mcl-1, survivin, ρ53, c-myc, κυκλίνη D1 [26] – [31], και αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) [32]. Ωστόσο, ο ρόλος της STAT3 στο AFPGC είναι ελάχιστα κατανοητή.

Εδώ, εξετάσαμε την επίδραση της Όπως

2O

3 επί του πολλαπλασιασμού και της AFP και της έκφρασης STAT3 στα κύτταρα AFPGC FU97. Αξιολογήσαμε κατάντη γεγονότα της STAT3 σηματοδότησης, Bcl-2 και την έκφραση Bax, να διερευνήσει τις πιθανές μηχανισμοί που διέπουν αυτό το φαινόμενο. Επιπλέον, αξιολογήσαμε την έκφραση της AFP και STAT3 με ανοσοϊστοχημεία σε ανθρώπινο γαστρικό δείγματα καρκίνου. Προς τα κάτω ρύθμιση AFP και της έκφρασης STAT3 συνέβαλαν Όπως

2O

3-επαγόμενη απόπτωση και αναστολή του πολλαπλασιασμού σε AFPGC.

Υλικά και Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

Η πρωτόκολλο της μελέτης εγκρίθηκε από την Ιατρική Ηθική andHuman Κλινική δοκιμή Επιτροπής της Τζινάν Κεντρικό Νοσοκομείο. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς.

Cell Culture and Drug Θεραπεία

Το ανθρώπινο AFPGC κυτταρική σειρά FU97 αποκτήθηκε από την ιαπωνική συλλογή της έρευνας Bioresources (Ιαπωνία) και διατηρήθηκε σε DMEM ( Invitrogen) συμπληρωμένου με 10% ορό εμβρύου βοός (FBS?. Invitrogen), με 1% αντιβιοτικά στους 37 ° C σε 5% CO

2 υγραμένου αέρα

Όπως

2O

3 ( Sigma) διαλύθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών (PBS) σε 1 mol /L, όπως ένα απόθεμα διαλύματος και αποθηκεύθηκε στους 4 ° C. Για

in vitro

χρήση, το απόθεμα διαλύματος αραιώθηκε στην κατάλληλη συγκέντρωση σε μέσο ανάπτυξης χωρίς FBS. Εκθετικά αναπτυσσόμενα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με Όπως

2O

3 σε τελικές συγκεντρώσεις 1, 5, ή 10 μmol /L. Οι καλλιέργειες ελέγχου υποβλήθηκαν σε αγωγή με απεσταγμένο PBS σε μια τελική συγκέντρωση 0.1% σε μέσο καλλιέργειας. Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν εις τριπλούν.

Δοκιμασία κυτταροτοξικότητας ΜΤΤ

Η επίδραση του As

2O

3 στην αναστολή

in vitro

ανάπτυξη του FU97 κυττάρων προσδιορίστηκε με ΜΤΤ μετρήσεων (3- [4,5-διμεθυλθειαζολ-2-υλ] -2,5-διφαινυλοτετραζολίου) χρωστικής απορρόφησης των ζωντανών κυττάρων. FU97 κύτταρα σπάρθηκαν σε πλάκες 96-φρεατίων σε 1.6 × 10

3 κύτταρα ανά φρεάτιο σε 100 μL DMEM που περιείχε 10% FBS όλη τη νύκτα. Μετά από έκθεση σε διάφορες συγκεντρώσεις Όπως

2O

3 για 24, 48 και 72 ώρες, 20 μι (5 g /L) ΜΤΤ (Sigma, St. Louis, ΜΟ) προστέθηκε σε κάθε φρεάτιο και οι πλάκες επωάστηκαν για επιπλέον 4 ώρες στους 37 ° C. Φορμαζίνης διαλύθηκε σε 150 μL /φρεάτιο διμεθυλοσουλφοξειδίου (DMSO) και η απορρόφηση ανιχνεύθηκε στα 490 nm. Η ανασταλτική ποσοστό (%) = (1-Α τιμή σε πειραματική ομάδα /A τιμή στην ομάδα ελέγχου) Χ 100%. Η ομάδα 0 μmol /L χρησιμοποιήθηκε ως μάρτυρα.

DNA κατακερματισμός ανάλυση με ηλεκτροφόρηση

Ένα σύνολο 10

6 κυττάρων απαλά ξύνεται από τα πιάτα, πλένονται δύο φορές σε κρύο PBS, και φυγοκεντρήθηκε στις 15.000 rpm για 10 λεπτά, στη συνέχεια λύθηκαν σε 200 μι ρυθμιστικού διαλύματος λύσης (1 mL από ένα διάλυμα 1 Μ Tris-HCl, ρΗ 7,4, 0,2 mL από 0,5 Μ αιθυλενοδιαμινοτετραοξικού οξέος [EDTA], 0,5 ml 10% Triton Χ-100 ). Λυμένα κύτταρα διατηρήθηκαν στους 4 ° C για 10 λεπτά, και τα υπερκείμενα επωάστηκαν με 2 μL RNase Α (10 mg /mL σε ρυθμιστικό διάλυμα Tris-EDTA) στους 50 ° C για 30 λεπτά, στη συνέχεια με 2 μι πρωτεϊνάση Κ (10 mg /mL σε απεσταγμένο νερό) για 45 λεπτά στους 50 ° C. Το διάλυμα αναμίχθηκε με 5 Μ NaCl (20 μL) και 2-προπανόλη (120 μL), επωάστηκαν στους 20 ° C για 24 ώρες, στη συνέχεια φυγοκεντρήθηκε στις 15.000 rpm για 20 λεπτά. Το κατακρημνισθέν DNA διαλύθηκε σε Tris-EDTA (5 μL) ρυθμιστικό διάλυμα και υποβλήθηκαν σε ηλεκτροφόρηση με 2% πηκτή αγαρόζης και ρυθμιστικό διάλυμα Tris-οξικού-ΕϋΤΑ στους 50 V. Το πρότυπο κλασμάτωσης DNA οπτικοποιήθηκε με χρήση του μια συσκευή υπεριώδους.

Hoechst 33258 χρώσης Ανάλυση κυτταρικής απόπτωσης

κύτταρα αναπτύσσονται επί γυάλινων καλυπτρίδες στερεώθηκαν με 4% παραφορμαλδεϋδη /PBS για 30 λεπτά, πλύθηκαν για 15 λεπτά σε 0.1% Triton Χ-100 /PBS και επωάστηκαν σε σκοτάδι με Hoechst 33258 (10 μg /ml) για 15 λεπτά. Αφού οι καλυπτρίδες πλύθηκαν σε PBS, θετικό πυρήνες μετρήθηκαν. Κανονική πυρήνες και αποπτωτικών πυρήνων (συμπυκνωμένη ή κατακερματισμένη χρωματίνη) ήταν διακρίνονται εύκολα.

ποσοτική πραγματικού χρόνου PCR

Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν με Όπως

2O

3 (5 μmol /L ) για 72 ώρες. Ολικό RNA εκχυλίστηκε με χρήση του αντιδραστηρίου ΤπζοΙ (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) και ποσοτικοποιήθηκε με φασματοφωτομετρία. Πρώτου κλώνου cDNA παρασκευάστηκε με χρήση τυχαίων εναρκτήρων ακολουθώντας τις οδηγίες του κιτ (Takara, Ιαπωνία). Πραγματικού χρόνου ποσοτική PCR του AFP, STAT3 και κατάντη γονίδια που εμπλέκονται στην 7300 πραγματικού χρόνου PCR System (ΑΒΙ, ΗΠΑ) με αντιδραστήρια Takara SYBR πρόμιγμα Ex Taq (Takara, Ιαπωνία). Σχεδιάστηκαν εκκινητές και επικυρώνεται από την Invitrogen. Το αστάρι πληροφορίες στον Πίνακα 1. PCR αντιδράσεις διεξήχθησαν εις τριπλούν σε έναν όγκο 20-μί για 2 λεπτά στους 94 ° C για την αρχική μετουσίωση, ακολουθούμενη από 30 κύκλους στους 94 ° C για 30 s και στους 60 ° C για 45 μικρό. Ένα γονίδιο GAPDH ελέγχου housekeeping χρησιμοποιήθηκε ως εσωτερικός έλεγχος. Κάθε σετ εκκινητής πρώτα εξετάστηκαν για να προσδιοριστεί βέλτιστες συγκεντρώσεις, και τα προϊόντα έτρεξαν σε ένα πήκτωμα αγαρόζης 1% για να επιβεβαιωθεί το κατάλληλο μέγεθος. Στη συνέχεια, ΑΒΙ λογισμικό καμπύλη διαστάσεως χρησιμοποιήθηκε για τον έλεγχο για πολλαπλά είδη σε κάθε ενίσχυση PCR. cDNA από FU97 κύτταρα χωρίς Όπως

2O

3 θεραπεία χρησιμοποιήθηκε για να κατασκευαστεί μια πρότυπη καμπύλη για κάθε γονίδιο.

Η

Ανάλυση Western Blot

Τα κυτταρικά ιζήματα ομογενοποιήθηκαν σε εκχύλιση ρυθμιστικού διαλύματος (50 mmol /L Tris-HCl, ρΗ 6.8, 0.1% SDS, 150 μmol /L NaCl, 100 mg /L φθοριούχο φαινυλμεθυλσουλφονύλιο, 1 mg /L απροτινίνη, 1% ΝΡ-40 και 0,5% ορθοβαναδικό νάτριο), επωάστηκαν σε 4 ° C για 30 λεπτά, και φυγοκεντρήθηκε για 20 λεπτά στα 12 000 g /min. Η συνολική πρωτεΐνη στο προϊόν λύσης κυττάρου μετρήθηκε με τη χρήση του χρωματομετρικού σετ Bio-Rad (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). Για ανάλυση στυπώματος Western, συνολικής πρωτεΐνης διαχωρίστηκαν σε 10% SDS-PAGE και μεταφέρθηκαν σε μεμβράνες νιτροκυτταρίνης (0.45 μm, Millipore, Billerica, ΜΑ, USA), τα οποία επωάστηκαν για 24 ώρες στους 4 ° C με των αντισωμάτων για AFP (1 :500, R & amp? D), STAT3 (1:1000), κασπάσης 3 (1:500), Bcl-2 (1:500), ΒΑΧ (1:500) και GAPDH (1:1000? όλα τα τηλέφωνα τεχνολογίας σηματοδότησης) , τότε χρένο συζευγμένο με υπεροξειδάση αντι-ποντικού /κουνελιού IgG αντίσωμα (Santa Cruz Biotechnology) μετά από μία τελική πλύση. Οι αντιδράσεις αναπτύχθηκαν με χρήση του 4-χλωρο-1-ναφθόλη (Sigma) και Η

2O

2. Σήματα ανιχνεύθηκαν με χρήση μιας ενισχυμένης χημειοφωταύγειας κιτ (Amersham Pharmacia, Buckinghamshire, UK). επίπεδο GAPDH ήταν ένα εσωτερικό πρότυπο.

Ανοσοπροσδιορισμός του AFP Συγκέντρωση σε υπερκείμενο

Το υπερκείμενο FU97 κύτταρα συλλέχθηκαν μετά από επεξεργασία με Όπως

2O

3 ή αρνητικό μάρτυρα για 24, 48 και 72 συγκέντρωση h.AFP σε υπερκείμενο προσδιορίστηκε με δύο θέσεων ανοσοενζυμομετρικής δοκιμασία σε ένα σύστημα TOSOH ΑΙΑ (Ιαπωνία). Η τιμή αποκοπής για το AFP ήταν 10 ng /ml.

Ασθενείς

εξέτασαν στοιχεία από χειρουργικές και παθολογικές αρχεία για 24 ασθενείς με AFPGC και 24 τυχαία επιλεγμένους ασθενείς με φυσιολογικά επίπεδα της AFP στον ορό και να συνδυαστούν για να AFPGC ασθενείς με γαστρικό καρκίνο σταδίου. Οι ασθενείς που είχαν υποβληθεί σε χειρουργική εκτομή στην Κλινική Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου της Shandong, Κίνα, από τον Ιανουάριο 1996 έως τον Δεκέμβριο του 2011. ασθενείς AFPGC έδειξε επίπεδο αυξημένα στον ορό AFP, αλλά δεν ταυτόχρονη ασθένειες του ήπατος. Ιστοπαθολογικές παρουσία AFP θετικότητα επιβεβαιώθηκε με ανοσοϊστοχημεία. Ήρθαμε σε επαφή με κάθε ασθενή για να επιβεβαιώσετε την επιβίωση ή την ημερομηνία του θανάτου.

Η ανοσοϊστοχημεία

Η ανοσοϊστοχημεία συμμετέχουν χρήση βιοτίνης-στρεπταβιδίνης-υπεροξειδάσης με ένα κιτ Vectastain ABC (Vector Laboratories, CA, USA). Εν συντομία, τομές ιστών (4 mm) παρασκευάστηκαν από δείγματα ιστών εγκλεισμένα σε παραφίνη. Οι τομές αποπαραφινώθηκαν με ξυλόλιο που ακολουθείται από αφυδάτωση σε διαβαθμισμένη αλκοόλη. Τμήματα θερμάνθηκαν σε φούρνο μικροκυμάτων για 2 λεπτά στους 900 W για να ανακτήσει το αντιγόνο, και στη συνέχεια επωάστηκαν με 0,3%

2O

2 διάλυμα H σε μεθανόλη για 30 λεπτά για να εμποδίσει ενδογενούς υπεροξειδάσης. Μετά από 3 πλύσεις με phosphatebuffered αλατούχο (PBS), τα πλακίδια επωάστηκαν με 10% κανονικό ορό αλόγου για να εμποδίσει μη ειδική χρώση υποβάθρου, στη συνέχεια επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα κουνελιού αντι-AFP (1:100 αραίωση) και αντι-STAT3 (1:200) σε ένα υγρό θάλαμο στους 4 ° C όλη τη νύκτα. Μετά από μια πλύση με PBS, οι τομές επωάστηκαν με αντισώματα αντι-ποντικού βιοτινυλιωμένο-άλογο για 30 λεπτά, πλύθηκαν 3 φορές με PBS και επωάστηκαν με στρεπταβιδίνη συζευγμένη με υπεροξειδάση για 30 λεπτά. Οι τομές ορατές με επώαση με 3, διάλυμα 3′-διαμινοβενζιδίνη (0,3% Η

2O

2 και 0,05% 3, 3′-διαμινοβενζιδίνη) και με αιματοξυλίνη. Η παράλειψη του πρωτογενούς αντισώματος ήταν ένας αρνητικός έλεγχος. Κάθε τρέξιμο περιελάμβανε ένα θετικό έλεγχο και έναν αρνητικό μάρτυρα. Για τον αρνητικό έλεγχο, το πρωτογενές αντίσωμα αντικαταστάθηκε με PBS.

Στατιστική Ανάλυση

Τα δεδομένα εκφράζονται ως μέση τιμή ± SD και αναλύθηκαν με χρήση του SPSS v11.5 (SPSS Inc., Chicago , IL, USA). Η ένωση των κλινικοπαθολογική μεταβλητών και AFP και της έκφρασης STAT3 προσδιορίστηκε με δοκιμή χ-τετράγωνο, και τη διόρθωση Yate ήταν εφαρμόστηκε σε ένα μικρό αριθμό δειγμάτων. Chi-square test ή δύο ουρά

t

δοκιμή Student χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση των διαφορών μεταξύ των ομάδων. Ανάλυση επιβίωσης που συμμετέχουν στη δοκιμασία log-rank, με καμπύλες Kaplan-Meier. P & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

Αναστολή ανάπτυξης και την απόπτωση επαγωγή σε FU97 κύτταρα από Καθώς

2O

3

FU97 κύτταρα υποβλήθηκαν σε θεραπεία με. διαφορετικές συγκεντρώσεις Όπως

2O

3 (1, 5 και 10 μmol /L) σε 24, 48 και 72 ώρες. Ως

2O

3 ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των FU97 συγκέντρωση κυττάρων και το χρόνο εξαρτώμενο τρόπο (Εικ. 1Α). Σε κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με 5 μmol /L και 10 μmol /L, όπως

2O

3 για 72 ώρες, η αναστολή αύξησης ήταν 56,27 ± 3,91% και 73,46 ± 4,64%, αντίστοιχα. κατακερματισμού του DNA είναι ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα της αποπτωτικής διεργασίας. σκάλες κατακερματισμού Τυπικά DNA ανιχνεύθηκαν σε FU97 κύτταρα κατεργασμένα με 5 μmol /L και 10 μmol /L, όπως

2O

3 (Σχ. 1Β). Εδώ, έχουμε μελετήσει περαιτέρω τη μορφολογική μεταβολή των αποπτωτικών κυττάρων. FU97 κύτταρα κατεργασμένα με 5 μmol /L και 10 μmol /L, όπως

2O

3 για 72 ώρες χρωματίστηκαν χρησιμοποιώντας Hoechst 33258, και παρατηρήθηκαν κάτω από φθορίζον αποτελέσματα έδειξαν ότι microscope.The Όπως

2O

3 επάγεται FU97 κύτταρα απόπτωσης σε ένα εξαρτώμενο από τη συγκέντρωση τρόπο, όπως υποδεικνύεται από κατακερματισμένη και συμπυκνωμένους πυρήνες (Εικ. 1 C). Για να διευκρινιστεί η περαιτέρω επιρροή Όπως

2O

3 για την κυτταρική απόπτωση, caspase3 μετρήθηκε με τη δυτική blot.The αποτελέσματα από το Σχ. 1D κατέδειξε σαφώς ότι κασπάσης 3 πρωτεϊνική έκφραση αυξήθηκε σημαντικά σε FU97 cells.Therefore, Όπως

2O

3 θα μπορούσε να αναστείλει την ανάπτυξη των κυττάρων και να προκαλέσουν απόπτωση των κυττάρων AFPGC FU97.

(Α) αναστολή Κυτταρική ανάπτυξη μετριέται με δοκιμασία ΜΤΤ. Τα δεδομένα είναι μέσες ± SD 3 ανεξάρτητων πειραμάτων. (Β) αγαρόζη ανάλυση πηκτώματος του κατακερματισμού του DNA σε FU97 κύτταρα κατεργασμένα με As2O3 για 72 ώρες. (C) αποπτωτικών πυρήνων χρωματίστηκαν με Hoechst 33258 δείχνουν έντονο φθορισμό που αντιστοιχεί σε συμπύκνωση χρωματίνης και κατακερματισμό. (D) Ανάλυση Western blot πρωτείνης caspase3 συνολικά κύτταρο εκχυλίσματα FU97 κύτταρα επεξεργασμένα με την υποδεικνυόμενη συγκέντρωση του As2O3 για 72 ώρες. έκφραση GAPDH χρησίμευσε ως έλεγχος φόρτωσης.

Η

ανασταλτική επίδραση του Σαν

2O

3 στην Έκφραση της AFP και STAT3 στο FU97 κύτταρα

Για να διαλευκανθεί ο ρόλος της AFP και STAT3 στο Όπως

2O

3 επαγόμενη αναστολή του πολλαπλασιασμού και της απόπτωσης, την επίδραση της Όπως

2O

3 για AFP και STAT3 έκφραση εξετάστηκε χρησιμοποιώντας ποσοτική PCR πραγματικού χρόνου και στύπωμα western. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε αγωγή με 1, 5 και 10 μmol /L, όπως

2O

3 για 72 h.The mRNA και πρωτεΐνης έκφραση του AFP και STAT3 και φωσφορυλίωση STAT3 ήταν σημαντικά ρυθμισμένη προς τα κάτω με Όπως

2O

3 θεραπεία εξαρτώμενο από τη συγκέντρωση τρόπο (Εικ. 2, Σχ. 7).

τα κύτταρα εκτέθηκαν σε As2O3 στα 5 μmol /L για 72 ώρες. (Α) Ποσοτική RT-PCR της έκφρασης του mRNA. (Β) ανάλυση κηλίδας Western και ποσοτικοποίηση της έκφρασης πρωτεϊνών. Τα δεδομένα είναι αντιπροσωπευτικά 3 ανεξάρτητων πειραμάτων με παρόμοια αποτελέσματα. * P & lt?. 0.05 σε σύγκριση με 0 μmol /L

Η

AFP συγκέντρωση που συνδέεται με την ανάπτυξη Αναστολή και απόπτωση στην FU97 Cell Culture υπερκείμενο

Για να επιβεβαιωθεί περαιτέρω η ανασταλτική επίδραση του As

2O

3 στο AFP, μετρήθηκε το επίπεδο της πρωτεΐνης AFP σε υπερκείμενο FU97 κυττάρων. Ως

2O

3 θα μπορούσε να μειώσει τη συγκέντρωση του επιπέδου της πρωτεΐνης AFP εξαρτώμενο τρόπο (Εικ. 3, Εικ. 7). Αυτό το αποτέλεσμα συμφώνησε με την αναλογία κυτταρική ανάπτυξη αναστολής (Σχ. 1Α), η απόπτωση των FU97 κύτταρα (Σχ. 1 Β, C, D), και μειωμένη έκφραση του mRNA του AFP και STAT3 (Εικ. 2Α) και πρωτεΐνη έκφραση του AFP, STAT3 και pSTAT3 (Εικ. 2Β).

Όπως

2O

3 μειωμένη συγκέντρωση επίπεδο πρωτεΐνης AFP εξαρτώμενο τρόπο. Τα δεδομένα είναι αντιπροσωπευτικά 3 ανεξάρτητων πειραμάτων με παρόμοια αποτελέσματα. * P & lt?. 0.05 σε σύγκριση με 0 μmol /L

Η

μειωμένα επίπεδα της STAT3 στόχευση γονιδίων, Bcl-2 και Bax, με Όπως

2O

3 Μεταχείριση στην FU97 κύτταρα

Για να διερευνηθεί η έκφραση του STAT3 στόχευσης γονιδίων, εξετάσαμε την έκφραση του αντι-αποπτωτική Bcl-2 και προ-αποπτωτικά Bax σε FU97 κύτταρα κατεργασμένα με Όπως

2O

3. Η έκφραση mRNA και πρωτεΐνης Bcl-2 ρυθμίζεται προς τα κάτω ως

2O

3 κύτταρα κατεργασμένα (Εικ. 4), αλλά ότι του Βαχ ρυθμίζεται αυξητικά, γεγονός που υποδηλώνει ότι η επίδραση της Όπως

2O

3 στο κελί απόπτωση που διαμεσολαβείται από την αναστολή της ιδιοσυστατικά ενεργοποιημένη STAT3 (Εικ. 7).

(Α) Ποσοτική RT-PCR και (Β) ανάλυση κηλίδος Western και ποσοτικοποίηση των κυττάρων σε επεξεργασία με Όπως

2O

3 σε 5 μmol /L για 72 ώρες. Η έκφραση mRNA και πρωτεΐνης Bcl-2 ρυθμίζεται προς τα κάτω ως

2O

3 κύτταρα κατεργασμένα, αλλά αυτό του Βαχ ρυθμίζεται αυξητικά. Όλα τα πειράματα διεξήχθησαν εις τριπλούν. *

σ

& lt?. 0.05 σε σύγκριση με τον έλεγχο

Η

Κλινικά Χαρακτηριστικά του επιλεγμένου πληθυσμού

Υπήρχαν 34 άνδρες (70,8%) και 14 γυναίκες (29,2% ) ασθενείς, με μέση ηλικία 66 έτη (εύρος, 45 έως 83 ετών). Τα κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των ασθενών συνοψίζονται στον Πίνακα 2. Υπήρχαν 48 ασθενείς είχαν πλήρη στοιχεία παρακολούθησης, και η περίοδος παρακολούθησης ήταν από 3 μήνες έως 60 μήνες, με μέση διάρκεια 33,7 μήνες. Ο συνολικός χρόνος επιβίωσης ορίστηκε ως τους μήνες από την ημερομηνία της χειρουργικής επέμβασης για την ημερομηνία του θανάτου ή απώλειας παρακολούθησης.

Η

Ανοσοϊστοχημική έκφραση της STAT3

Επειδή έχουμε έλλειψη πληροφοριών σχετικά με το έκφραση της STAT3 σε AFPGC, προσδιορίσαμε έκφραση του με ανοσοϊστοχημική χρώση του ιστού AFPGC ασθενούς. Στις 24 AFPGC πρωτογενείς όγκους, 11 ήταν θετικά (46%) και 13 ήταν αρνητικά (54%) για έκφραση STAT3. Στις 24 AFP-αρνητικά δείγματα γαστρικού καρκίνου, 8 (33%) πρωτογενείς όγκους ήταν θετικά και 16 (67%) ήταν αρνητικά για έκφραση STAT3. Επιπλέον, παρά τις σχετικά χαμηλό αριθμό των ασθενών με πλήρη στοιχεία, STAT3 υπερέκφραση συσχετίστηκε σημαντικά με το βάθος της εισβολής και λεμφαδένα μετάσταση (p & lt? 0,05). Στο AFP-θετικών και -αρνητικοί ομάδες (Σχήμα 5, Πίνακας 2, Σχ . 7).

(Α) Ανοσοκηλίδωση για AFP. (Β) Ισχυρή STAT3 ανοσοχρώση με καφέ σε κόκκους καταθέσεις στο κυτταρόπλασμα και πυρήνες. (Γ) Αρνητική χρώση ανοσοϊστοχημική ελέγχου για AFP. (D) Αρνητικός μάρτυρας χρώση ανοσοϊστοχημική για STAT3.

Η

Η έκφραση της AFP και STAT3 συνδέονται με την κακή πρόγνωση της γαστρικός καρκίνος

Ο διάμεσος χρόνος επιβίωσης της AFP-θετικούς ασθενείς ήταν 23 μήνες ( 95% διάστημα εμπιστοσύνης, 16-30 μήνες). η οποία ήταν σημαντικά μικρότερη από ότι στα AFP-αρνητικούς ασθενείς, 53 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης, 47-59 μηνών) (Ρ & lt? 0,05) .Το μέσο χρόνο επιβίωσης σε STAT3-θετική ομάδα ήταν 38 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης , 29-47 μήνες), η οποία ήταν σημαντικά μικρότερη από ότι στην STAT3-αρνητική ομάδα, 54 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης, 47-61 μηνών) (Ρ & lt?. 0.05, Σχήμα 6Α και Β, Σχήμα 7) .Furthermore. , η επιβίωση ήταν χαμηλότερη για AFP και STAT3 διπλό θετικούς ασθενείς απ ‘ότι με την έκφραση της AFP ή STAT3 μόνο (P & lt? 0.05, Σχήμα 6C και D, Εικ. 7).. Σε ασθενείς με AFP και STAT3 διπλά θετική έκφραση ο διάμεσος χρόνος επιβίωσης ήταν 22 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης 11-33 μήνες). Σε σύγκριση, σε ασθενείς με ενιαία έκφραση του AFP ή STAT3, ο διάμεσος χρόνος επιβίωσης ήταν 54 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης 44-64 μήνες) και 59 μήνες (95% διάστημα εμπιστοσύνης 47-71 μήνες).

(Α) AFP θετικότητα μόνο. (Β) STAT3 θετικότητα μόνο. (C) AFP και STAT3 διπλή θετικότητα σε σύγκριση με το AFP θετικότητα. (D) AFP και STAT3 διπλή θετικότητα σε σύγκριση με STAT3 θετικότητα (όλα τα P & lt? 0,05).

Η

Η απενεργοποίηση του γονιδίου ATBF1 στο AFPGC, μέσω μετάλλαξης ή μειωμένη έκφραση, μπορεί να επιτρέψει κύτταρα AFPGC να παράγουν AFP πρωτεΐνη και υπερεκφράζουν STAT3, η οποία συμβάλλει στην επιθετική συμπεριφορά και κακή πρόγνωση της AFPGC. As2O3 μπορούν να αναστείλουν την ανάπτυξη των κυττάρων AFPGC και να επάγει την κυτταρική απόπτωση. Οι υποκείμενοι μηχανισμοί μπορεί να περιλαμβάνουν ρύθμιση προς τα κάτω της AFP και της έκφρασης STAT3 και STAT3 προς τα κάτω ρύθμιση της έκφρασης της αντι-αποπτωτική Bcl-2 και προς τα πάνω ρύθμιση αυτή του ογκοκατασταλτικό Bax. Επιπλέον, AFP μπορεί να διμερίζονται με άλλες πρωτεΐνες όπως πυρηνικοί υποδοχείς, παράγοντες μεταγραφής και κασπάσες, το σύνολο των οποίων μπορεί να προωθήσει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων. AFP μπορεί να διμερίζεται με τον παράγοντα μεταγραφής STAT3 για την προώθηση της ανάπτυξης AFPGC. Ως εκ τούτου, AFP μπορεί να αλληλεπιδρά με STAT3 στην οδό σήματος για χημειοθεραπευτικούς αποτελεσματικότητας των παραγόντων επί AFPGC.

Η

Συζήτηση

AFPGC ήταν δύσκολο να αντιμετωπιστεί κυρίως λόγω της τάσης για μετάσταση και την αντίσταση στις συμβατικές θεραπείες. Εναλλακτικές θεραπείες ειδικά την αντιμετώπιση αυτών των θεμάτων χρειάζονται επειγόντως. Ως

2O

3 έχει χρησιμοποιηθεί σε κλινικές δοκιμές της APL για χρόνια, και 10 mg /ημέρα ως

2O

3 βρέθηκε αποτελεσματική στην επαγωγή πλήρη ύφεση σε ασθενείς με νεοδιαγνωσμένο και υποτροπίασαν APL [ ,,,0],33]. Όπως

2O

3 πολλαπλασιασμό ανέστειλε κυττάρων και επαγόμενη απόπτωση της κυτταρικής ηπατοκυτταρικού καρκινώματος σειρά ανθρώπινου HepG2 [34], η οποία ενισχύεται περαιτέρω από μια κλινική δοκιμή που δείχνει Όπως

2O να είναι αποτελεσματική

3 και ασφαλής για ασθενείς με προχωρημένο πρωτογενές καρκίνωμα του ήπατος [35], η τοξικότητα ήταν ήπια και ο ορός επίπεδο AFP μειώθηκε. Ως εκ τούτου, ερευνήσαμε αν Όπως

2O

3 και προκαλείται από την αναστολή της ανάπτυξης των κυττάρων και την απόπτωση των hepatoid αδενοκαρκίνωμα του στομάχου κυττάρων AFPGC FU97 και βρέθηκαν οι αντικαρκινικές ιδιότητες του Σαν

2O

3 σε κύτταρα AFPGC.

παρέχουμε αποδείξεις ότι Όπως

2O

3 έχει μια ισχυρή αντι-πολλαπλασιαστική δράση επί FU97 κύτταρα σε μία συγκέντρωση και το χρόνο εξαρτώμενο τρόπο. Το επίπεδο πλάσματος του αρσενικού στην κλινική αντιμετώπιση της οξείας προμυελοκυτταρικής λευχαιμίας μπορεί να φτάσει 5.5 με 7.3 mM [36]. Στη μελέτη μας, όλα τα αποτελέσματα έδειξαν ότι 5 μmol /L, όπως

2O

3 ανέστειλαν αποτελεσματικά τον πολλαπλασιασμό και την επαγωγή απόπτωσης σε 72 ώρες. Αυτή η δόση είναι κλινικά σημαντική, γεγονός που υποδηλώνει ότι τα κύτταρα AFPGC είναι ευαίσθητα σε As

2O

3.

AFPGC, όπως αντιπροσωπεύεται από την παραγωγή του AFP, παρουσιάζει υψηλότερη πολλαπλασιαστική δραστηριότητα, ασθενέστερη απόπτωση, και πλουσιότερη νεοαγγείωση από AFP-αρνητικών γαστρικών καρκίνων. Από την άλλη πλευρά, τα υψηλά επίπεδα της AFP σε πλήρως ανεπτυγμένη ηπατοκαρκινώματος ή σε ορό του ξενιστή που συνδέεται με πιο επιθετική συμπεριφορά, και αυξημένη ανάπλαση [37], [38]. Μελέτες AFP νοκ ντάουν από siRNA που βρέθηκαν πολλαπλασιασμό ανέστειλε κύτταρο στο ηπατώματα [39]. Ως εκ τούτου, AFP μπορεί να λειτουργεί σε ένα θεμελιώδες βήμα στην εξέλιξη του AFP-θετικού καρκίνου. Η ελαττωμένη έκφραση της AFP μπορεί να αντιπροσωπεύει μια σχετική θεραπευτική στρατηγική. Βρήκαμε ότι Καθώς

2O

3 θα μπορούσε να ρυθμίζουν προς τα κάτω AFP mRNA και την έκφραση της πρωτεΐνης. Επίσης, αρνητική ρύθμιση του AFP από Καθώς

2O

3 θα μπορούσε να αναστείλει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και επάγει κυτταρική απόπτωση στα κύτταρα AFPGC FU97. Επιπλέον, AFP έκκριση ως

2O

3-κατεργασμένα κύτταρα ήταν δόση και το χρόνο εξαρτώμενο μειώθηκε στο υπερκείμενο. Η ελαττωμένη έκφραση της AFP θα μπορούσε να συμβάλει σε As

2O

3-επαγόμενη αναστολή της κυτταρικής ανάπτυξης και της απόπτωσης. Έτσι, αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι η έκφραση AFP ρυθμίζεται μειωτικά σε απόκριση Όπως

2O

3 θεραπεία. AFP μπορεί να διαδραματίσει σημαντικό ρόλο στον πολλαπλασιασμό και την απόπτωση των AFPGC.

Εκτός του ότι είναι ένα σημείο σύγκλισης για πολλές πορείες ογκογόνο σηματοδότηση, STAT3 συμμετέχει επίσης στην ανάπτυξη των κυττάρων και την επιβίωση. Σε κύτταρα λευχαιμίας, As

2O

3 ενεργοποιεί πολλές ενδοκυτταρικές οδούς μεταγωγής σήματος, με αποτέλεσμα διέγερση απόπτωσης [40]. Όπως

2O

3 αναστολή της STAT3, πριν αναστολή του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, έχει περιγραφεί σε πολλά κύτταρα μυελώματος [41]. Επίσης, όπως

2O

3 αναστέλλει την πρωτεϊνική κινάση της τυροσίνης, με τον τρόπο αυτό έμμεσα μειώνοντας την ενεργοποίηση των πρωτεϊνών STAT [42] .Ως εκ τούτου, προς τα κάτω ρύθμιση της STAT3 έχει θεωρηθεί ένας από τους μηχανισμούς δράσης των Όπως

2O

3 σε οξεία προμυελοκυτταρική λευχαιμία (APL) Εμείς βρέθηκε STAT3 ενεργοποιούνται σε κύτταρα AFPGC, και As

2O

3 θα μπορούσε να ρυθμίζουν προς τα κάτω την έκφραση STAT3 mRNA και η έκφραση της πρωτεΐνης STAT3 και pSTAT3. Ειδικά, μειωτικά την έκφραση της STAT3 και pSTAT3 ήταν σύμφωνη με μειωτικά την έκφραση του AFP από Καθώς

2O

3. STAT3 θα μπορούσε να ανασταλεί από κάποιο παράγοντα κατά τη διάρκεια ενεργοποίησης της σε απάντηση Όπως

2O

3. σε AFPGC. Ανεξάρτητα από τους πιθανούς μηχανισμούς που εμπλέκονται στην ρύθμιση της STAT3, η υψηλή έκφραση AFP σε AFPGC θα μπορούσε να έχει σημαντικές συνέπειες. Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει επίσης ότι η AFP μπορεί να διμερίζονται με άλλες πρωτεΐνες, όπως πυρηνικών υποδοχέων (δηλαδή, υποδοχέα ρετινοϊκού), παράγοντες μεταγραφής και κασπάσες, το σύνολο των οποίων μπορεί να προωθήσει την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων [43], [44]. Αυτό, με τη σειρά του, έχει οδηγήσει σε εικασίες ότι θα μπορούσε να AFP διμερίζεται με παράγοντες μεταγραφής STAT3 για την προώθηση της ανάπτυξης AFPGC. Οι περαιτέρω έρευνες σχετικά με την ρύθμιση της έκφρασης STAT3 που σχετίζονται με το AFP χρειάζεται.

STAT3 μπορεί να προκαλέσει κυτταρική απόπτωση από μεταγραφικά ρύθμιση προς τα κάτω Bcl-2 έκφρασης [45]. Bcl-2 είναι μια ανάντη μόριο τελεστή στο αποπτωτικό μονοπάτι και ένας ισχυρός καταστολέας της απόπτωσης. Μπορεί ολιγομερισμό Βαχ, η οποία στη συνέχεια αποπολώνει το δυναμικό μιτοχονδριακής μεμβράνης για την απελευθέρωση κυτοχρώματος c και επάγουν απόπτωση [46]. Η αναλογία του Bcl-2 για να Bax είναι σημαντική προκειμένου να προσδιοριστεί αν τα κύτταρα θα υφίστανται απόπτωση ή την επιβίωση. Βρήκαμε μειωμένη έκφραση του Bcl-2, μαζί με ανέστειλε την έκφραση STAT3 με Όπως

2O

3 θεραπεία σε κύτταρα AFPGC. Σε αντίθεση, η έκφραση του Bax αυξήθηκε. Μαζί με τα ευρήματα σε άλλα κυτταρικά συστήματα, όπου ανέστειλαν επίπεδο STAT3 βρέθηκε να μειώνει την έκφραση Bcl-2 και επάγει απόπτωση [45], το As

2O

3 αποτελέσματα που προκαλούνται βρήκαμε μπορεί να προκαλείται από την αναστολή της συστατικώς ενεργοποιημένου STAT3.

Για να καταδειχθεί περαιτέρω αν STAT3 διαδραματίζει καίριο ρόλο στην AFPGC, εξετάσαμε ασθενείς AFPGC από την άποψη της έκφρασης STAT3. STAT3 θετικότητα στο AFP-θετικούς όγκους ήταν 46% και το AFP-αρνητικούς όγκους 33%. Οι ασθενείς με AFPGC είχαν υψηλότερο ποσοστό έκφρασης STAT3, αν και όχι σημαντική ίσως λόγω του μικρού αριθμού ασθενών. Ωστόσο, η έκφραση STAT3 θετικά συνδέθηκε με καρκινικό ιστό, το βάθος της εισβολής και λεμφαδένα μετάστασης σε AFPGC. Κλινικά, οι ασθενείς με AFPGC έχουν φτωχή πρόγνωση [1], [9], [10]. Επιβεβαιώσαμε ότι η πρόγνωση ήταν χειρότερη για τους ασθενείς με ό, τι χωρίς AFP που αντιστοιχήθηκαν με το στάδιο του καρκίνου. Επιπλέον, η επιβίωση των ασθενών με τόσο AFP και STAT3 θετικότητα ήταν σημαντικά χειρότερες από εκείνες που μόνο με AFP ή STAT3 θετικότητα. Έτσι, σε αυτό συγκεκριμένο τύπο καρκίνου του στομάχου, STAT3 φαίνεται να έχει έναν σημαντικό ρόλο στην επιβίωση και πολλαπλασιασμό κυττάρου. έκφραση STAT3 στο AFPGC μπορεί να εξηγήσει την κλινική επιθετική συμπεριφορά των AFPGC, και η έκφραση STAT3 μπορεί να είναι ένας χρήσιμος δείκτης της εξέλιξης, αν επικυρωθεί από εκτεταμένες προοπτικές μελέτες σε μεγαλύτερες ομάδες. Η ελαττωμένη έκφραση της AFP και STAT3 μπορεί να αντιπροσωπεύει μια σχετική θεραπευτική στρατηγική σε AFPGC. Όσον αφορά τη σχέση μεταξύ της παραγωγής και της έκφρασης AFP STAT3, δεν υπάρχει διαθέσιμη έκθεση που περιγράφει τις υποκείμενων μηχανισμών για date.It έχει αναφερθεί ότι η έκφραση AFP σε γαστρικό καρκίνο οφείλεται στην έλλειψη του ATBF1 παράγοντα μεταγραφής [47]. Επιπλέον, ATBF1, ως ογκοκατασταλτικό γονίδιο, enhancesthe καταστολή της σηματοδότησης STAT3 από την αλληλεπίδραση με PIAS3 [48] .Ως εκ τούτου, είναι λογικό να θεωρηθεί ότι η απενεργοποίηση του γονιδίου ATBF1 σε AFPGC, μέσω μετάλλαξης ή μειωμένη έκφραση, μπορεί να επιτρέψει AFPGC κύτταρα να παράγουν πρωτεΐνες AFP και overexpres STAT3. Για να διευκρινιστεί ποιοι παράγοντες εμπλέκονται στην έκφραση της παραγωγής και STAT3 AFP, χρειάζεται περαιτέρω μελέτη.

Εν κατακλείδι, όπως

2O

3 μπορούν να αναστείλουν AFPGC κυτταρική σειρά FU97 ανάπτυξη και επάγει την απόπτωση. Οι πιθανοί μηχανισμοί που σχετίζονται με την ρύθμιση προς τα κάτω του AFP και STAT3 και STAT3 στόχευσης αντι-αποπτωτικό γονίδιο Bcl-2 και να ενεργοποιούν την ογκοκατασταλτικό γονίδιο Βαχ (Εικ. 7). Η έκφραση της STAT3 σε AFPGC διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην εισβολή του όγκου και την πρόγνωση. Ως

2O

3 μπορεί να είναι μια πιθανή νέα επικουρική φαρμάκων στη θεραπεία της AFPGC. Η παρούσα μελέτη παρέχει κάποια θεωρητική βάση για την κλινική χρήση της αξίζει περαιτέρω μελέτης.