Αφηρημένο

Ιστορικό

Ένα λειτουργικό -94 εισαγωγή /διαγραφή πολυμορφισμός (rs28362491) στον υποκινητή του γονιδίου NFKB1 αναφέρθηκε να επηρεάσει

NFKB1

έκφρασης και προσδίδουν ευαισθησία σε διάφορους τύπους καρκίνου. Η μελέτη αυτή έχει ως στόχο να προσδιορίσει αν ο πολυμορφισμός σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης.

Υλικά και μέθοδοι

δοκιμασία TaqMan αυτή χρησιμοποιήθηκε για τον προσδιορισμό του γονότυπου ανάμεσα σε 609 περιπτώσεις και 640 έλεγχοι σε ένα κινεζικό πληθυσμό. Λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκε για να εκτιμηθεί η συσχέτιση μεταξύ του πολυμορφισμού και τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης, και ποσοτική σε πραγματικό χρόνο αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης χρησιμοποιήθηκε για να καθοριστεί

NFKB1

έκφρασης του mRNA.

Αποτελέσματα

σε σύγκριση με το iNS /ins /ins /dEL γονότυπων, το del /del γονότυπος σχετίζεται με σημαντικά αυξημένο κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης [προσαρμοσμένη περίεργο λόγο (OR) = 1,92, 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI) = 1,42 – 2,59] . Ο αυξημένος κίνδυνος ήταν πιο εμφανείς μεταξύ των ατόμων άνω των 65 ετών (OR = 2,37, 95% CI = 1,52 – 3,70), οι άρρενες (OR = 1,97, 95% CI = 1,40 – 2,79) και σε άτομα με αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου (OR = 3,59, 95% CI = 01.19 έως 10.09). Επιπλέον, ο πολυμορφισμός σχετίζεται με υψηλότερο κίνδυνο ανάπτυξης μη μυών διηθητικό καρκίνο της ουροδόχου κύστης (OR = 2,07, 95% CI = 1,51 – 2,85), βαθμού 1 του καρκίνου της ουροδόχου κύστης (OR = 2.40, 95% CI = 1,68 – 3,43), καρκίνο της ουροδόχου κύστης και μόνο του όγκου (OR = 2,04, 95% CI = 1,48 – 2,82) και το μικρότερο μέγεθος των όγκων καρκίνου της ουροδόχου κύστης (OR = 2,10, 95% CI = 1,51 – 2,92). Η έκφραση του

NFKB1

mRNA σε ιστούς του καρκίνου της ουροδόχου κύστης με ομόζυγο γονότυπο εισαγωγής ήταν υψηλότερο από εκείνο με το αλληλόμορφο διαγραφή.

Συμπεράσματα

Εν κατακλείδι, οι -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποκινητής μπορεί να συμβάλλει στην αιτιολογία του καρκίνου της ουροδόχου κύστης στην κινεζική πληθυσμό

Παράθεση:. Li P, Gu J, Yang Χ, Cai η, Τάο J, Yang Χ, et al. (2013) Λειτουργική υποστηρικτής -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

γονιδίου σχετίζεται με καρκίνο της ουροδόχου κύστης του κινδύνου σε ένα κινεζικό πληθυσμό. PLoS ONE 8 (8): e71604. doi: 10.1371 /journal.pone.0071604

Επιμέλεια: Αντωνία Βλάχου, Ίδρυμα Ιατροβιολογικών Ερευνών της Ακαδημίας Αθηνών, Ελλάδα |

Ελήφθη: 1 Απρ 2013? Αποδεκτές: 8 Ιουλίου 2013? Δημοσιεύθηκε: 20 Αυγ, 2013

Copyright: © 2013 Li et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Πρόγραμμα για την Ανάπτυξη Καινοτόμων ερευνητικής ομάδας του πρώτου Ενταγμένο Νοσοκομείο Ιατρικό Πανεπιστήμιο Nanjing, το Πρόγραμμα Επαρχιακό Πρωτοβουλία για την εξοχότητά κλάδους της επαρχία Jiangsu, το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (επιχορηγήσεις Νο 81272832 και 81201997), το Φυσικό Science Foundation της επαρχίας Jiangsu (χορηγήσουν αρ BK2011848) και η προτεραιότητα Ακαδημαϊκό Πρόγραμμα Ανάπτυξης των Jiangsu Ιδρυμάτων Ανώτατης Εκπαίδευσης (PAPD). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνου της ουροδόχου κύστης, καρκίνωμα κυρίως urothelial κυττάρων (UCC), είναι η δεύτερη πιο συχνή κακοήθεια του ουροποιογεννητικού συστήματος που οδηγεί σε σημαντική νοσηρότητα και θνησιμότητα [1]. UCC είναι μια ετερογενής νόσος, με 70% των ασθενών που παρουσιάζουν μη μυών επεμβατικές όγκους και 30% παρουσιάζουν μυ-διεισδυτικής νόσου που σχετίζεται με κακή πρόγνωση από μακρινές μεταστάσεις [2] – [4]. Οι όγκοι αυτοί έχουν μια δια βίου κίνδυνο υποτροπής, αλλά γενικά δεν είναι απειλητική για τη ζωή. Οι παράγοντες κινδύνου για την ογκογένεση κύστης μπορεί να ταξινομηθούν σε τρεις υποομάδες: γενετικές και μοριακές ανωμαλίες, χημική ή περιβαλλοντική έκθεση, και χρόνιο ερεθισμό [5], [6]. Παρά το γεγονός ότι πολλοί άνθρωποι εκτίθενται στους προαναφερθέντες παράγοντες κινδύνου, μόνο ένα κλάσμα των εκτιθέμενων ατόμων αναπτύσσει UCC. Έτσι, ατομικές διαφοροποιήσεις στην ευαισθησία να διακινδυνεύσουν μπορεί να υπάρχουν παράγοντες που οδηγούν στην καρκινογένεση της ουροδόχου κύστης.

πυρηνικού παράγοντα-κΒ (NF-κΒ) εντοπίστηκε για πρώτη φορά το 1986 ως παράγοντας Β-κυττάρων που συνδέεται με μια τοποθεσία στην περιοχή ενισχυτή του γονιδίου που κωδικοποιεί την ανοσοσφαιρίνη κ ελαφριάς αλυσίδας [7]. Από τότε, ο ΝΡ-κΒ έχει δειχθεί ότι ρυθμίζουν τη μεταγραφή πολλών γονιδίων για ανοσοαπόκριση, κυτταρική προσκόλληση, διαφοροποίηση, τον πολλαπλασιασμό, αγγειογένεση, αντιδράσεις κυτταρικού στρες, ογκογένεση, και η επιβίωση των κυττάρων και την απόπτωση [4]. Αρκετοί ερευνητές έχουν αναφέρει την συστατική ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ σε διάφορα καρκινικά κύτταρα και κυτταρικές σειρές, όπως ο καρκίνος του μαστού [8], ορθοκολικό καρκίνο [9], [10], ο καρκίνος του πνεύμονα [11], [12], και του καρκίνου του παγκρέατος [13]. Η ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ αναφέρθηκε ότι ενδεχομένως συνδέονται με την ανάπτυξη του καρκίνου της ουροδόχου κύστης, προστατεύοντας τα καρκινικά κύτταρα από αποπτωτικό κυτταρικό θάνατο [14]. ΝΡ-κΒ είναι ένα ετεροδιμερές της οικογένειας Rel με πέντε μέλη, δηλαδή, ΚεΙΑ, RelB, c-Rel, ρ50 (NF-κB1) και ρ52 (NF-κΒ2)? είναι επίσης το σημείο σύγκλισης κάποιας μεταβολικής και ογκογόνο οδών [15].

Το

NFKB1

γονίδιο, το οποίο βρίσκεται στο ανθρώπινο χρωμόσωμα 4q24, κωδικοποιεί πρωτεΐνη p50 που θα μπορούσε να λειτουργήσει ως μεταγραφή παράγοντας για τη ρύθμιση του γονιδίου στόχου μεταγραφή του [16], [17]. Το -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός (rs28362491) στο

NFKB1

υποστηρικτής αποσπά πληροφορίες μια ρυθμιστική επίδραση στην

NFKB1

γονιδίων και παίζει ένα ρόλο στην ευαισθησία των ατόμων σε διάφορες κακοήθειες, συμπεριλαμβανομένου του γαστρικού καρκίνος [18], τον καρκίνο των ωοθηκών [19], του καρκίνου του προστάτη [20], και στοματικό καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων [21]. Riemann

et al.

[22] ανέφεραν ότι η έκφραση του mRNA

NFKB1

(Ρ50) είναι υψηλότερη σε ιστούς όγκων με τη ins /ins γονότυπο από ό, τι σε εκείνες με τη ins /del + del /del γονότυπο. Βρήκαν επίσης ότι οι ασθενείς με ομόζυγη διαγραφή διαθέτουν ένα στατιστικώς υψηλότερο κίνδυνο υποτροπής του όγκου από φορείς με ένα ή περισσότερα αλληλόμορφα ένθεση σε μη μυϊκό διηθητικό καρκίνο της ουροδόχου κύστης. Ωστόσο, στη μελέτη τους, δεν διαπιστώθηκε καμία συσχέτιση μεταξύ των -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

κίνδυνο καρκίνου του υποκινητή και της ουροδόχου κύστης [22].

Στην παρούσα μελέτη, υποθέσαμε ότι οι -94 ins /del πολυμορφισμός ATTG στο

NFKB1

υποστηρικτής συνδέεται με τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Αυτή η υπόθεση εξετάστηκε σε εξέλιξη, το νοσοκομείο με βάση, μελέτη ασθενών-μαρτύρων μας σε ένα κινεζικό πληθυσμό.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Η μελέτη εγκρίθηκε από το θεσμική επιτροπής αναθεώρησης του πρώτου Ενταγμένο Νοσοκομείο Ιατρικό Πανεπιστήμιο Nanjing, Nanjing, Κίνα. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες που εμπλέκονται σε αυτή τη μελέτη.

Οι ασθενείς και οι έλεγχοι

Οι συμμετέχοντες της μελέτης περιελάμβανε 609 ασθενείς με καρκίνο της ουροδόχου κύστης και 640 μάρτυρες ίδιας ηλικίας. Όλα τα άτομα ήταν από τον πληθυσμό που ζουν Χαν στην επαρχία Jiangsu και Anhui επαρχία της ανατολικής Κίνας. ασθενείς με καρκίνο της ουροδόχου κύστης είχαν προσληφθεί από Ιούλιος 2006 – Ιούλιος 2012 στο Τμήμα Ουρολογίας, την Πρώτη Ενταγμένο Νοσοκομείο Ιατρικό Πανεπιστήμιο Nanjing. Οι ασθενείς με ιστορικό καρκίνου, μετάσταση καρκίνου από άλλες ή άγνωστες προελεύσεις, και αποκλείστηκαν προηγούμενη ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία. Η διάγνωση του καρκίνου της ουροδόχου κύστης επιβεβαιώθηκε με ιστοπαθολογική ανάλυση. άτομα ελέγχου χωρίς καρκίνο ήταν η συχνότητα ταιριάζει με την ηλικία (± 5 έτη) και το φύλο, και ήταν γενετικά άσχετη με τις περιπτώσεις. Όλοι οι έλεγχοι είχαν προσληφθεί από υγιή άτομα που αναζητούσαν τη φυσική εξέταση στα εξωτερικά ιατρεία του ίδιου νοσοκομείου. Έλεγχοι αποκλείστηκαν αν είχαν συμπτώματα ενδεικτικά του καρκίνου της ουροδόχου κύστης, όπως αιματουρία. Πριν από την πρόσληψη, όλα τα άτομα ερωτήθηκαν στο πρόσωπο για τη συλλογή δημογραφικών δεδομένων και κλινικά χαρακτηριστικά, όπως η ηλικία, το φύλο, τη φυλή, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Σύμφωνα με την ταξινόμηση των όγκων-node-μετάσταση για το στάδιο (2002 Διεθνής Ένωση κατά του Καρκίνου), το κλινικό στάδιο κατά το χρόνο της διάγνωσης ταξινομηθούν σε δύο υποομάδες: μη-μυϊκή επεμβατική ομάδα (ΡΤΑ-ρΤ1) και των μυών επεμβατική ομάδα (pT2- pT4). Σύμφωνα με ιστοπαθολογικές Βαθμός (WHO 1973, διαβάθμιση των ουροφόρων θηλωμάτων), οι ασθενείς ταξινομήθηκαν σε τρεις υποομάδες: κατηγορίες 1, 2 και 3. Τα άτομα που κάπνιζαν καθημερινά για & gt? 1 χρόνια ορίστηκαν ως ποτέ καπνιστές, και οι υπόλοιποι θεωρήθηκαν όπως ποτέ καπνιστές. Τα άτομα που έπιναν τουλάχιστον τρεις φορές την εβδομάδα για περισσότερο από 6 μήνες ορίστηκαν ως ποτέ πότες, και οι υπόλοιποι θεωρούνταν ποτέ πότες.

εξαγωγή DNA και πολυμορφισμός του γονότυπου

Το γονιδιακό DNA του καθενός ατομική εξήχθη από 150 μΙ δείγματα ΕϋΤΑ αντιπηκτικό περιφερικό αίμα χρησιμοποιώντας ένα κιτ εκχύλισης DNA (Tiangen Biotech, Beijing, China) ακολουθώντας τις οδηγίες του κατασκευαστή. Οι -94 ins /delATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποκινητή γονότυπου χρησιμοποιώντας TaqMan πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου (SNP) γονοτυπικός Αναλύσεις 2.4 λογισμικό (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA), και SDS χρησιμοποιήθηκε για διακρίσεις αλληλομόρφων. Οι εκκινητές, ανιχνευτές, και οι συνθήκες αντίδρασης για κάθε SNP είναι διαθέσιμα κατόπιν αιτήματος. Η ενίσχυση διεξήχθη υπό τις ακόλουθες συνθήκες: 50 ° C για 2 λεπτά? 95 ° C για 10 λεπτά? και 45 κύκλους των 95 ° C για 15 s και 60 ° C για 1 λεπτό. Για τον έλεγχο της ποιότητας, τέσσερα αρνητικοί έλεγχοι περιλήφθηκαν σε κάθε πλάκα, και 5% των δειγμάτων επιλέχθηκαν τυχαία για επαναλαμβανόμενες γονότυπου. Τα αποτελέσματα ήταν 100% συγκλίνουσες.

Ποσοτική PCR πραγματικού χρόνου

RNA από 35 κατεψυγμένοι ιστοί καρκίνου της ουροδόχου κύστης (η = 8 για ins /ins γονότυπο και η = 27 για τους μεταφορείς των del αλλήλιο) εκχυλίζεται με τη χρήση τυποποιημένων μεθόδων (RNeasy kit, Qiagen). Ένα δείγμα του 1 μα ολικού RNA χρησιμοποιήθηκε για τη σύνθεση cDNA με ολιγο-dT εκκινητές (Invitrogen, Karlsrule, Germany) και Superscript II αντίστροφη μεταγραφάση (Takara Bio, Shiga, Japan). PCR πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας PCR κύριο (Roche, Mannheim, Germany) με τους ακόλουθους εκκινητές του

NFKB1

: 5′-GTGAAGGCCCATCCCATGGT-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-TGTGACCAACTGAACAATAACC-3’ (αντίστροφο) και τους εκκινητές για

β-ακτίνης

ήταν 5′-ACTGGAACGGTGAAGGTGAC-3 ‘(προς τα εμπρός) και 5′-AGAGAAGTGGGGTGGCTTTT-3’ (αντίστροφο). PCR σε διπλότυπα έγινε σε 384 φρεατίων ABI 7900HT PCR Πραγματικού χρόνου System (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Η σχετική έκφραση του

NFKB1

σε σχέση με το

β-ακτίνης

υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τον τύπο

NFKB1

/

β-ακτίνης

= 2

-ΔCt.

η στατιστική ανάλυση

Οι κατανομές συχνότητας των επιλεγμένων δημογραφικές μεταβλητές και κάθε αλληλόμορφο και τον γονότυπο του -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποκινητή μεταξύ των περιπτώσεις και οι έλεγχοι αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας χ

2 διανομή τύπου. Hardy-Weinberg ισορροπία (HWE) ελέγχθηκε χρησιμοποιώντας ένα χ

2 τεστ καλοσύνη-of-fit. Άνευ όρων μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης διεξήχθησαν για τον υπολογισμό του αργού και προσαρμόζονται αναλογίες πιθανοτήτων (OR) και τα διαστήματα τους εμπιστοσύνης 95% (ΚΠ) για τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Αλληλεπίδραση δοκιμάστηκε χρησιμοποιώντας έναν όρο πολλαπλασιαστική αλληλεπίδραση που περιλαμβάνονται στο πολυπαραγοντικό μοντέλο. Να διερευνήσει πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ του πολυμορφισμού και το κάπνισμα καπνού, εκτιμήσαμε ένα πολλαπλασιαστικό γονιδίου – περιβάλλοντος αλληλεπίδρασης με ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης, συμπεριλαμβανομένων των κύριων μεταβλητών αποτέλεσμα και τους όρους των προϊόντων τους. Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας SPSS 13.0 στατιστικού λογισμικού. Ένα δύο-side

P

τιμή μικρότερη του 0,05 θεωρήθηκε ότι υποδηλώνουν στατιστική σημαντικότητα.

Αποτελέσματα

χαρακτηριστικά του πληθυσμού της μελέτης

Οι κατανομές συχνοτήτων των επιλεγμένων χαρακτηριστικών των περιπτώσεων και ελέγχων παρουσιάζονται στον πίνακα 1. οι περιπτώσεις και μάρτυρες έδειξαν να συνδυάζεται επαρκώς με την ηλικία και το φύλο (

P

= 0,180 για την ηλικία και

P

= 0,606 για σεξ). Περισσότερες ποτέ καπνιστές βρέθηκαν μεταξύ των περιπτώσεων από τους μάρτυρες (47,9% έναντι 38,0%?

P

& lt? 0.001). Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διαφορά στην κατάσταση του πόσιμου βρέθηκε μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων (

P

= 0,169). Επιπλέον, η συχνότητα των συγγενών με καρκίνο ήταν υψηλότερη στις περιπτώσεις σε σχέση με τους ελέγχους (27,8% έναντι 6,6%?

P

& lt? 0.001). Αυτές οι μεταβλητές, προσαρμοσμένη στην πολυπαραγοντική ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης για την εκτίμηση της κύρια επίδραση των -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποστηρικτής σχετικά με τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Τα κλινικοπαθολογοανατομικών χαρακτηριστικά των 609 κύστης περιπτώσεις καρκίνου που παρατίθενται στον Πίνακα 1.

Η

Σύνδεσης μεταξύ -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

κίνδυνο καρκίνου του υποκινητή και της ουροδόχου κύστης

Ο γονότυπος και η συχνότητα αλληλόμορφου κατανομές των -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποστηρικτής μεταξύ των περιπτώσεων και ελέγχων, καθώς και τις ενώσεις τους με τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης, παρουσιάζονται στον πίνακα 2. Ο γονότυπος συχνότητες στους ελέγχους σύμφωνη προς HWE (

P

= 0.164). Οι συχνότητες των ins /ins, ins /del, και del /del γονότυπων ήταν 31,0%, 44,2%, και 24,8% μεταξύ των περιπτώσεων, αντίστοιχα, και 34,8%, 50,6%, και 14,5% στους μάρτυρες, αντίστοιχα (

P

& lt? 0.001). Χρησιμοποιώντας τα ins /INS και ins /της ντε γονότυπους ως σημείο αναφοράς, βρήκαμε ότι η del /del γονότυπος σχετίζεται με στατιστικά σημαντική αύξηση του κινδύνου για καρκίνο της ουροδόχου κύστης (

P

& lt? 0.001, OR = 1,92, 95% CI = 1,40 – 2,59). Ένα παρόμοιο αποτέλεσμα παρατηρήθηκε στη del /del γονότυπο σε σύγκριση με το γονότυπο ins /ins (

P

& lt? 0.001, OR = 2,10, 95% CI = 1,48 – 2,97).

Η

Στρωματοποιημένη ανάλυση των -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

η κίνδυνο υποκινητή και του καρκίνου της ουροδόχου κύστης

Εμείς αξιολογηθεί περαιτέρω η επίδραση του -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1 υποστηρικτής

σχετικά με τον κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης στρωματοποιημένη ανά ηλικία, το φύλο, το κάπνισμα, το καθεστώς πόσιμο, και αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 3, ο αυξημένος κίνδυνος ήταν πιο έντονη μεταξύ των ηλικιωμένων ατόμων (

P

& lt? 0.001, OR = 2.37, 95% CI = 1,52 – 3,70), οι άρρενες (

P

& lt? 0.001, OR = 1,97, 95% CI = 1,40 – 2,79) και σε άτομα με αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου (

P

= 0.024, OR = 3.59, 95% CI = 01.19 – 10.09) ( Πίνακας 3).

η

σύνδεσης μεταξύ -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποκινητή και κλινικοπαθολογικών χαρακτηριστικά των ασθενών με καρκίνο της ουροδόχου κύστης

σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (Πίνακας 4), ο κίνδυνος καρκίνου της ουροδόχου κύστης αυξήθηκε σημαντικά στη del /del γονότυπο σε σύγκριση με το ins /del + ins /ins γονότυπο σε μη-μυϊκό επεμβατική περιπτώσεις (

P

& lt? 0.001, OR = 2,07 , 95% CI = 1,51 – 2,85), βαθμού 1 περιπτώσεις καρκίνου της ουροδόχου κύστης (

P

& lt? 0.001, OR = 2.40, 95% CI = 1,68 – 3,43), περιπτώσεις και μόνο όγκου (

P

& lt? 0.001, OR = 2,04, 95% CI = 1,48 – 2,82) και περιπτώσεις με μικρότερο μέγεθος του όγκου (

P

& lt? 0.001, OR = 2,10, 95% CI = 1,51 – 2,92). Καμία σημαντική συσχέτιση παρατηρήθηκε στην διαστρωμάτωση του βαθμού του όγκου και το στάδιο των περιπτώσεων καρκίνου της ουροδόχου κύστης. (Πίνακας 5).

Η

Η αλληλεπίδραση μεταξύ του -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

υποκινητή και του καπνού NFKB1

κάπνισμα

Σε σύγκριση με τους μη καπνιστές με το iNS /iNS και ins /dEL γονότυπους, οι καπνιστές με τη del /del γονότυπο είχαν σημαντικά αυξημένο κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης (

P

& lt? 0.001, OR = 2.53, 95% CI = 1,55 – 4,11) ( Πίνακας 6). Δεδομένου ότι η del /del γονότυπος σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο στους καπνιστές, αξιολογήσαμε κατά πόσο το κάπνισμα συνδέεται με το -94 ins /del ATTG πολυμορφισμού σε

NFKB1

υποκινητή. Δεν παρατηρήσαμε μια πολλαπλασιαστική επίδραση της αλληλεπίδρασης μεταξύ του καθεστώτος του πολυμορφισμού και το κάπνισμα (

P

= 0,783) (Πίνακας 6).

Η

Σύνδεσης μεταξύ -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός

NFKB1

υποκινητή και

NFKB1

έκφραση του mRNA

το ποσό της σχετικής

NFKB1

mRNA στην κύστη καρκινικούς ιστούς που λαμβάνονται από το ομόζυγο γονότυπο εισαγωγής (n = 8 ) ήταν υψηλότερη από ότι σε ιστούς από το ins /del + del /del γονότυπο (n = 27) (

P

= 0,025), ακόμα κι αν υπήρχε σημαντική επικάλυψη μεταξύ των δύο ομάδων (Σχήμα 1).

Συζήτηση

σε αυτή τη μελέτη, εντοπίσαμε μια ένωση μεταξύ του -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

κίνδυνο καρκίνου του υποκινητή και της ουροδόχου κύστης σε ένα κινεζικό πληθυσμό. Παρατηρήσαμε ότι τα άτομα με τη del /del γονότυπο έχουν 1,92 φορές μεγαλύτερο κίνδυνο για καρκίνο της ουροδόχου κύστης από εκείνους με τους ins /INS και ins /del γονότυπους (

P

& lt? 0.001). Επιπλέον, τα άτομα ομόζυγα για del έχουν υψηλότερο κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης από εκείνους ομοζυγώτες για ins (OR = 2.10,

P

& lt? 0.001). Εκτός αυτού, τα άτομα με την del /del γονότυπο συσχετίστηκε επίσης με αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης μη-μυϊκό επεμβατική, βαθμός 1, μονό όγκου και μικρότερου μεγέθους του όγκου καρκίνου της ουροδόχου κύστης.

Ως υπομονάδα του συμπλόκου ΝΡ-κΒ , p50 κωδικοποιείται από το

NFKB1

γονίδιο [16]. Η υπερ-έκφραση της ρ50 (NF-κB1) παρατηρήθηκε σε διάφορες κακοήθειες [22], [23], συμπεριλαμβανομένων μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα, καρκίνος του παχέος εντέρου, ο καρκίνος του προστάτη, ο καρκίνος του μαστού, ο καρκίνος των οστών, και καρκίνο του εγκεφάλου. Λαμβάνοντας υπόψη ότι η p50 υπερέκφραση παρατηρείται συχνά σε διάφορους ιστούς όγκων, p50 είναι δυνητικά εμπλέκονται στην καρκινογένεση.

Η γενετική παραλλαγή διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στον καθορισμό του κινδύνου του καρκίνου, και αρκετές μελέτες έχουν διερευνήσει τη σχέση μεταξύ των -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

κίνδυνο υποκινητή και του καρκίνου [18] – [21]. Μέχρι σήμερα, μόνο δύο μελέτες έχουν προσπαθήσει να αξιολογήσει τη σχέση μεταξύ αυτού του κινδύνου καρκίνου του πολυμορφισμού και της ουροδόχου κύστης [24], [25]. Riemann

et al

. [24] ανέφεραν ότι ο πολυμορφισμός δεν σχετίζεται με αυξημένη ευαισθησία σε μεταβατικό κυτταρικό καρκίνωμα της ουροδόχου κύστης σε Καυκάσιους. Στη μελέτη μας, το del /del γονότυπο βρέθηκε να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκινώματος ουροδόχου κύστης μεταβατικών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των μη-μυϊκή επεμβατικές και των μυών επεμβατική τύπους. Η διαφορά των αποτελεσμάτων θα μπορούσε να αποδοθεί στη διαφορετική εθνικότητα του πληθυσμού της μελέτης. Tang

et al.

[25] μελέτησαν μια νοτιοδυτική κινεζική πληθυσμό 207 περιπτώσεις και ανέφερε ότι τα άτομα με το γονότυπο ins /ins έχουν αυξημένο κίνδυνο μη μυών διηθητικό καρκίνωμα από μεταβατικό επιθήλιο της ουροδόχου κύστης. Αν και η έρευνα του πληθυσμού των Τανγκ

et al.

[25] και παρούσα μελέτη ήταν και οι δύο Κινέζοι Χαν πληθυσμού, η γεωγραφική κατανομή μεταξύ του πληθυσμού της μελέτης μας και δικοί τους ήταν διαφορετική, η οποία θα μπορούσε να οδηγήσει σε αποκλίνουσες γενετικό υπόβαθρο. Ως εκ τούτου, θα μπορούσε να είναι μια πιθανή εξήγηση για τα αντιφατικά αποτελέσματα μεταξύ των σπουδών μας και δικοί τους. Επιπλέον, το μέγεθος του δείγματος στη μελέτη μας ήταν μετρίως μεγαλύτερο από δύο προαναφερθείσες μελέτες καρκίνου της ουροδόχου κύστης, η οποία μπορεί επίσης να εξηγήσει εν μέρει τη διαφορά.

Ο πιθανός μηχανισμός πίσω από την παρατηρούμενη συσχέτιση μπορεί να συνδέεται με την έκφραση και δραστικότητα της ρ50 ( NF-κB1), η οποία ρυθμίζει σημαντικά κυτταρικά γεγονότα, όπως απόπτωση και κυτταρικό θάνατο ανεξάρτητη από την ΝΡ-κΒ συμπλόκου [17]. Χρησιμοποιώντας μια δοκιμασία ρεπόρτερ, μια προηγούμενη μελέτη διαπίστωσε ότι οι -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός έχει ρυθμιστική επίδραση στην

NFKB1

γονιδιακής έκφρασης και ότι η δραστηριότητα του αλληλομόρφου ins είναι διπλάσια από εκείνη της del αλληλόμορφου [ ,,,0],26]. Riemann

et al.

[24] ανέφεραν ότι η p50 (

NFKB1

) έκφρασης σε ιστούς του καρκίνου της ουροδόχου κύστης είναι υψηλότερος σε άτομα με τη ins /ins γονότυπο σε σχέση με εκείνους που φέρουν το αλληλόμορφο del. Στην παρούσα μελέτη, εντοπίσαμε επίσης μια θετική συσχέτιση μεταξύ του ins /ins γονότυπο και την αύξηση της p50 (

NFKB1

) έκφρασης σε ιστούς του καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Η διαφορά στην έκφραση της ρ50 (

NFKB1

) σε ιστούς του καρκίνου της ουροδόχου κύστης μεταξύ του ins /ins γονότυπο και φορείς του αλληλόμορφου del μπορεί να υποδεικνύει τη ρυθμιστική δράση του -94 ins /del ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποστηρικτής σε p50 (

NFKB1

) έκφρασης. Προηγούμενο έργων αποκάλυψε ότι p50 επάγει την ενεργοποίηση MEKK4 από πρωτεασώματος εξαρτώμενη από την υποβάθμιση GADD45α [27], [28]. Επιπλέον, η ενεργοποίηση των MEKK4 ενεργοποιεί ειδικά την JNK οδό σηματοδότησης, η οποία εμπλέκεται στην επαγόμενη από στρες απόπτωση των κυττάρων του περιβάλλοντος [29], [30]. Ως εκ τούτου, η προκλητική εξήγηση για την παρατηρούμενη σύνδεση μεταξύ των -94 ins /del ATTG κινδύνου πολυμορφισμού και της ουροδόχου κύστης καρκίνος είναι ότι η del /del γονότυπο επάγει την ανάπτυξη του καρκίνου της ουροδόχου κύστης από τα κάτω ρύθμιση της έκφρασης της ρ50 (

NFKB1

), η οποία παίζει ρόλο στην επαγωγή απόπτωσης των κυττάρων μέσω του προαναφερθέντος μηχανισμού.

ομοδιμερή ρ50 (NF-κB1) μπορούν να καταστέλλουν τη μεταγραφή των γονιδίων που ρυθμίζονται από ΝΡ-κΒ [31]. Το αυξημένο σχηματισμό του συμπλόκου ρ50-ρ50 που είναι εν μέρει από την αυξημένη ρ50 (

NFKB1

) έκφραση [32], [33] προτείνει μια μειωμένη ικανότητα να προάγει

ΤΝΡ-α

έκφραση σε κύτταρα [34] – [36]. Τα επίπεδα έκφρασης πολλών γονιδίων που ρυθμίζονται από ΝΡ-κΒ, όπως

ΤΝΡ-α

, Προτάθηκαν επίσης να είναι υψηλότερη σε

NFKB1

(ρ50) knockout ποντικών [37], [38] . Η κυτοκίνη ΤΝΡ-α προάγει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών επάγοντας την απελευθέρωση της μεταλλοπρωτεϊνάσης μήτρας (ΜΜΡ) [39] – [43], ιδίως οι ζελατινάσες ΜΜΡ-2 και ΜΜΡ-9, που προωθούν την ανάπτυξη και μετάσταση όγκου [44], [45] . Έτσι, εικάζουν ότι ο ins /ins γονότυπο μπορεί να μειώσει τη μεταγραφή των γονιδίων που ρυθμίζονται από ΝΡ-κΒ, όπως

ΤΝΡ-α

, με την ενίσχυση της έκφρασης ρ50. Αντιστρόφως, ο del /del γονότυπο μπορεί να προωθήσει τον πολλαπλασιασμό του καρκίνου της ουροδόχου κύστης μέσω της μεταγραφικής ενεργοποίησης του

ΤΝΡ-α

που προκαλείται από την ανασταλτική δράση της del /del γονότυπο σχετικά με το σχηματισμό ομοδιμερών ρ50 [44], [ ,,,0],45].

Η ανάλυση των υποομάδων σύμφωνα με κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά, συμπεριλαμβανομένων στάδιο, βαθμός, αριθμός όγκων, και το μέγεθος του όγκου, μπορεί να βοηθήσει στον εντοπισμό των προγνωστικών παραγόντων που εμπλέκονται σε διάφορες πορείες εξέλιξης του καρκίνου της ουροδόχου κύστης [46]. Riemann

et al.

[24] ανέφεραν ότι ο χρόνος μέχρι την υποτροπή είναι σημαντικά μικρότερη σε ασθενείς με τη del /del γονότυπο σε σχέση με εκείνους που φέρουν το αλληλόμορφο ins. Μια μεγάλη πλειοψηφία (70%) του καρκίνου της ουροδόχου κύστης θεωρήθηκε ότι είναι του μη-μυ επεμβατική τύπου, η οποία τείνει να επαναληφθεί και σπάνια εξελίσσεται [2]. Σε αυτή τη μελέτη, ο del /del γονότυπο επίσης σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο ανάπτυξης μη-μυϊκό επεμβατικές ή βαθμού 1 καρκίνου της ουροδόχου κύστης (Πίνακας 4). Αυτό το εύρημα είναι σε συμφωνία με τη μελέτη του Riemann

et al.

[24]. Ωστόσο, απαιτούνται περαιτέρω μελέτες παρακολούθησης με μεγαλύτερα μεγέθη δειγμάτων που απαιτούνται για την επικύρωση αυτών των αποτελεσμάτων. Επιπλέον, το del /del γονότυπο συσχετίστηκε με μια πιο έντονη κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης στο υποκείμενο γέροντα και υποκείμενο με αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου του σε σχέση με το INS /ins + ins /del γονότυπο (Πίνακας 3). Ηλικία είναι πλέον ευρέως αποδεκτή ως το μεγαλύτερο μεμονωμένο παράγοντα κινδύνου για την ανάπτυξη καρκίνου της ουροδόχου κύστης [47], [48]. Αρκετές θεωρίες έχουν προταθεί για να εξηγήσουν τη σχέση μεταξύ της καρκινογένεσης και της γήρανσης [49]. Ως άτομα συνεχίζουν να ηλικία, βιώνουν αθροιστική περιβαλλοντική έκθεση σε καρκινογόνους παράγοντες, καθώς και τη συσσώρευση των κυτταρικών γεγονότων, όπως γενωμική αστάθεια. Οι ασθενείς με αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου ήταν επίσης πιστεύεται ότι πάσχουν από αυξημένο κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης [50]. Το γεγονός αυτό εξηγεί την ισχυρότερη συσχέτιση μεταξύ del /del γονότυπου και της ουροδόχου κύστης ογκογένεση στην υποομάδα των ηλικιωμένων και των υποομάδων με αυτο-αναφερόμενη οικογενειακό ιστορικό καρκίνου. Στην παρούσα μελέτη, ο κίνδυνος βρέθηκε να είναι πιο σημαντική στους άνδρες. Οι άρρενες ασθενείς θεωρήθηκαν ότι περισσότερο εκτεθειμένοι σε καπνίσματος και άλλους παράγοντες κινδύνου που εμπλέκονται στην αιτιολογία του καρκίνου της ουροδόχου κύστης, η οποία μπορεί να εξηγήσει γιατί οι άνδρες είναι πιο επιρρεπείς σε καρκίνο της ουροδόχου κύστης.

Αρκετές πιθανούς περιορισμούς της παρούσας μελέτης θα πρέπει να είναι εξετάζονται. Κατ ‘αρχάς, η μελέτη μας ήταν μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων νοσοκομείο. Έτσι, δεν μπορούμε να αποκλείσουμε την πιθανότητα μεροληψία επιλογής σε υποκείμενα που μπορεί να συσχετιστεί με ένα συγκεκριμένο γονότυπο. Δεύτερον, το μέγεθος του δείγματος (609 περιπτώσεις και 640 έλεγχοι) στη μελέτη αυτή μπορεί να μην είναι αρκετά μεγάλη για να ανιχνεύσει μικρές επιπτώσεις από πολύ SNPs χαμηλής διεισδυτικότητα και την αξιολόγηση των γονιδίων – επαρκώς την αλληλεπίδραση περιβάλλοντος. Ωστόσο, σύμφωνα με το τρέχον μέγεθος του δείγματος, έχουμε 99,5% δύναμη για την ανίχνευση μιας ή της ≥1.92 με συχνότητα έκθεσης 39,8% σε επίπεδο σημαντικότητας 0.05.

Εν κατακλείδι, εντοπίσαμε σύνδεσης μεταξύ των -94 εισαγωγή /διαγραφή ATTG πολυμορφισμός στο

NFKB1

υποκινητή και της ουροδόχου κύστης κίνδυνο καρκίνου σε ένα κινεζικό πληθυσμό. Η del /del γονότυπο βρέθηκε να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου της ουροδόχου κύστης.