Αφηρημένο

Μόνο τα τελευταία χρόνια έχουν φωσφολιπάση Α

2 ένζυμα (PLA

2s) αναδείχθηκε ως στόχους του καρκίνου. Στην εργασία αυτή, αναφέρουμε την πρώτη ανίχνευση αυξημένων

2 δραστηριότητες PLA σε πλάσμα από ασθενείς με ορθοκολικό, πνεύμονα, παγκρέατος, και καρκίνους της ουροδόχου κύστης σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες. Ανεξάρτητα σύνολα κλινικά δείγματα πλάσματος ελήφθησαν από δύο διαφορετικές θέσεις. Το πρώτο σετ ήταν από ασθενείς με καρκίνο του παχέος (CRC? N = 38) και των υγιών μαρτύρων (n = 77). Το δεύτερο σετ ήταν από ασθενείς με πνευμονική (n = 95), της κύστης (n = 31), ή καρκίνους του παγκρέατος (n = 38), και των υγιών μαρτύρων (n = 79). PLA

2 δραστηριότητες αναλύθηκαν με επικυρωμένη μέθοδο ποσοτικής φθορισμού δοκιμασία και τον υπότυπο PLA

2 δραστηριότητες που ορίζονται με την παρουσία των εκλεκτικών αναστολέων. Το φυσικό

δραστηριότητα PLA 2, καθώς και κάθε υπότυπο του

2 δραστικότητα PLA ανυψώθηκε σε κάθε ομάδα του καρκίνου σε σύγκριση με υγιείς μάρτυρες. PLA

2 δραστηριότητες αυξήθηκαν σε προχωρημένο στάδιο εναντίον νωρίς περιπτώσεις στάδιο της CRC. PLA

2 δραστηριότητες δεν επηρεάζεται από το φύλο, το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, ή το δείκτη μάζας σώματος (ΔΜΣ). Δείγματα από τους δύο ανεξάρτητους τόπους επιβεβαίωσε τα αποτελέσματα. PLA πλάσμα

2 δραστηριότητες είχαν περίπου 70% ειδικότητα και ευαισθησία για την ανίχνευση του καρκίνου. Ο δείκτης και στόχευση τιμές

2 δραστηριότητας PLA έχουν προταθεί

Παράθεση:. Cai Η Chiorean EG, Chiorean MV, Rex DK, Robb BW, Hahn NM, et al. (2013) Αυξημένα φωσφολιπάση Α

2 Δραστηριότητες σε δείγματα πλάσματος από πολλαπλές μορφές καρκίνου. PLoS ONE 8 (2): e57081. doi: 10.1371 /journal.pone.0057081

Επιμέλεια: Mohammad O. Hoque, Johns Hopkins University, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 27 Σεπτεμβρίου 2012? Αποδεκτές: 17 Γενάρη 2013? Δημοσιεύθηκε: 22 Φεβρουαρίου 2013

Copyright: © 2013 Cai et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίζεται εν μέρει από το τεχνικό έργο Cancer Care, Υπουργείο άμυνας, USAMRMC, W81XWH-08-1-0065 και W81XWH-10-1-0540 (https://www.grants.gov/search/search.do?mode = AGENCYSEARCH & amp? πρακτορείο = DOD), καθώς και των Εθνικών Ινστιτούτων Υγείας R21 CA133744 (https://www.cancer.gov/researchandfunding) και της Μαρίας Fendrich Hulman Φιλανθρωπικό Ταμείο να YX. Η χρηματοδότηση για την Ογκολογική Ομάδα Μελέτης Hoosier δόθηκαν από το Ίδρυμα Καρκίνου Walther Ινστιτούτο, Indianapolis, IN. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα. Οι συγγραφείς έχουν γεμίσει μια αίτηση διπλώματος ευρεσιτεχνίας PCT «PLA2 Δραστηριότητα ως δείκτης για ωοθηκών και άλλων καρκίνων γυναικολογική» το 2011. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

εισαγωγή

Ο καρκίνος είναι ένα από τα κύρια προβλήματα της υγείας σε όλο τον κόσμο. Περισσότεροι από 1,6 εκατομμύρια νέα κρούσματα καρκίνου και πάνω από 577.000 θανάτους από καρκίνο αναμένεται να συμβεί στις Ηνωμένες Πολιτείες το 2012 [1]. Ο καρκίνος του πνεύμονα (LC) και του καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) είναι από τις πιο συχνές μορφές καρκίνου. Παγκρέατος και της ουροδόχου κύστης καρκίνους μετράνε (3-7% όλων των καρκίνων), αλλά ο καρκίνος του παγκρέατος (PC) είναι ένας από τους deadest καρκίνων, με μελαγχολική ποσοστό επιβίωσης 5 ετών 6% [1]. Η επιτυχία των σημερινών θεραπειών κατά του καρκίνου εξαρτάται έντονα από τη στιγμή της διάγνωσης, με την έγκαιρη ανίχνευση και την ταυτοποίηση των πληθυσμών ασθενών υψηλού κινδύνου με αποτέλεσμα τις πλέον ευνοϊκές συνολική επιβιώσεις σε αυτές τις ασθένειες [1], [2]. Αναμένεται ότι η έγκαιρη ανίχνευση και διαλογή των πληθυσμών ασθενών υψηλού κινδύνου μπορεί να έχει την πιο σημαντική επίδραση στην αλλαγή συνολική επιβίωση σε αυτές τις ασθένειες. Επομένως, υπάρχει επείγουσα ανάγκη για αποτελεσματικές και ευαίσθητες μέθοδοι έγκαιρης ανίχνευσης [3]. Ενώ οι μέθοδοι ανίχνευσης απεικόνισης που βασίζονται, συμπεριλαμβανομένων σπείρα αξονική τομογραφία (CT) και κολονοσκόπηση είναι αποτελεσματικά νωρίς μεθόδων ανίχνευσης LC και CRC, αντίστοιχα [4], είναι μάλλον ακριβά και άβολο. Επιπλέον, η σύγχρονη τεχνικές απεικόνισης έχουν υψηλή συχνότητα εμφάνισης της ανακάλυψης οζιδίων του πνεύμονα, πολλά από τα οποία είναι ψευδώς θετική, αλλά εξακολουθεί να ζητά πρόσθετες και συχνά επώδυνες εξετάσεις [5]. Μοριακή προσεγγίσεις για τη διάγνωση του καρκίνου μέσω βιοδεικτών μετρηθεί με μη-επεμβατικά μέσα θα μπορούσε να βελτιώσει σημαντικά την ειδικότητα και ευαισθησία της ανίχνευσης του καρκίνου του [5]. Ειδικότερα, οι βιοδείκτες ορολογικές μπορεί να είναι η πιο χρήσιμη στην έγκαιρη ανίχνευση, λόγω της ελάχιστης εισβολής, σχέσης κόστους-αποτελεσματικότητας, και την ευκολία. Επιπλέον, ορολογική βιοδείκτες εντοπισμό νέων γονιδίων ή /και των μορίων σχετίζονται με τον καρκίνο μπορεί να παρέχει νέες γνώσεις σχετικά με την βιολογία του καρκίνου και μπορεί επίσης να γίνουν ελκυστικοί στόχοι για τη θεραπεία [3].

Η φωσφολιπάση Α

2 ένζυμα (PLA

2s) είναι τα κύρια ένζυμα που παράγουν την κυκλοοξυγενάση-2 (COX-2) υποστρώματος, το αραχιδονικό οξύ (ΑΑ), όπως επίσης και λυσοφωσφολιπίδια. Και οι δύο αυτές κατηγορίες προϊόντων τα μόρια που εμπλέκονται σε καρκίνους σηματοδότησης. Ωστόσο, μόνο τα τελευταία χρόνια έχουν PLA

2s αναδειχθεί ως στόχους του καρκίνου [6]. Περισσότερα από 30 ένζυμα που διαθέτουν PLA

2 ή συναφή δραστηριότητα έχουν ταυτοποιηθεί σε θηλαστικά [7]. Αυτά χωρίζονται σε τέσσερις ομάδες με βάση την κυτταρική εντόπιση τους, εξειδίκευση υποστρώματος, και ασβέστιο εξάρτηση [8], συμπεριλαμβανομένων κυτοσολική (cPLA

2), ασβέστιο-ανεξάρτητη (IPLA

2), που εκκρίνεται (SPLA

2), και λιποπρωτεΐνη σχετιζόμενη PLA

2 (Lp-PLA

2). Στον καρκίνο, το μεγαλύτερο μέρος της προσοχής έχει επικεντρωθεί στην SPLA

2 και cPLA

2 [8]. Εμείς και άλλοι έχουν δείξει ότι IPLA

2 είναι λειτουργικά συμμετέχουν στην προώθηση της ανάπτυξης του καρκίνου των ωοθηκών (OC) και άλλες μορφές καρκίνου,

in vitro

και

in vivo

[9] – [ ,,,0],13]. SPLA

2 και Lp-PLA

2 εκκρίνονται ένζυμα. Σε αντίθεση, τόσο cPLA

2 και IPLA

2 είναι κυτοσολικά ένζυμα και εξωκυτταρικό ύπαρξή τους μόνο έχει δειχθεί ότι σχετίζεται με εξωσώματα από κύτταρα RBL-2Η3 (μία γραμμή ιστού και κυττάρων βασεοφίλου) [14]. Τα εξωσώματα είναι 40-100 κυστίδια μεμβράνης nm διάμετρο απελευθερώνεται από πολυκυψελιδωτά φορείς με άθικτα κύτταρα και είναι γνωστό ότι συμμετέχουν στην διακυτταρική σηματοδότηση [15]. Έχουμε πρόσφατα ανιχνεύθηκε extracellular- και εξωσωμάτων χωρίς IPLA

2 και cPLA

2 δραστηριότητες στον ασκίτη και ιστών από ασθενείς OC [16].

Στην παρούσα εργασία έχουμε επικεντρωθεί στην PLA

2 δραστηριότητες και όχι έκφραση των ατομικών ΡΙΑ

2 ένζυμα και εξετάζονται PLA

2 δραστηριότητες σε δείγματα πλάσματος αίματος από ασθενείς με διαφορετικές μορφές καρκίνου, σε σύγκριση με εκείνες από υγιείς ελέγχους. Χρησιμοποιήσαμε πρόσφατα επικυρωμένη ποσοτική μας, βολικό, πολύ επαναλήψιμη

2 Μέθοδος προσδιορισμού PLA [16] και έδειξε για πρώτη φορά ότι το πλάσμα PLA

2 δραστηριότητες από ασθενείς με CRC, LC, PC, και του καρκίνου της ουροδόχου κύστης (BC) ήταν σημαντικά υψηλότερα από εκείνα των υγιών μαρτύρων. Επιπλέον, PLA

2 δραστηριότητες συσχετίστηκαν με τα στάδια του όγκου σε CRC. Άλλες πιθανές σημαίνοντες παράγοντες, συμπεριλαμβανομένου του φύλου, της ηλικίας, του καπνίσματος και της κατανάλωσης αλκοόλ εξετάστηκαν επίσης σε αυτή τη μελέτη.

Υλικά και Μέθοδοι

συλλογή του Ανθρώπου δείγματος και επεξεργασία

Δύο σύνολα ανεξάρτητα συλλέγονται κλινικά δείγματα πλάσματος ελήφθησαν για αυτή τη μελέτη. Το πρώτο σετ από το Indiana University School of Medicine (IUSM) επικεντρώθηκε στην CRC ασθενείς και υγιείς μάρτυρες εξετάζονται με κολονοσκόπηση και βρέθηκαν αρνητικά για αδενωματώδεις πολύποδες και CRC. Τα δείγματα αίματος συλλέχθηκαν σε παρουσία EDTA φυγοκεντρήθηκαν στα 1750 g για 15 λεπτά στους 15-24 ° C, κλασματοποιήθηκε σε σιλικοναρισμένα σωληνάρια Eppendorf και φυλάχθηκαν στους -80 ° C. Το δεύτερο σύνολο δειγμάτων ήταν από ασθενείς με πνεύμονα, της ουροδόχου κύστης, ή του παγκρέατος, καθώς και υγιείς μάρτυρες. Αυτά τα δείγματα συλλέχθηκαν από την Ογκολογική Ομάδα Hoosier (HOG) στην Indianapolis, IN ως μέρος της μελέτης με τίτλο, «ένα βιολογικό δείγμα Συλλογή Πρωτόκολλο ασθενείς με και χωρίς Μεταστατικό συμπαγών οργάνων Κακοήθειες: Hoosier Ογκολογική Ομάδα Μελέτης BANK09-138». Τα δείγματα αίματος φυγοκεντρήθηκαν σε 3500 rpm για 30 λεπτά. Τα διαιρέθηκε σε ίσα κλάσματα δείγματα φυλάχθηκαν στους -70 ° C. HOG είναι ένας μη-κερδοσκοπικός οργανισμός ιατρική έρευνα. Αν και είναι μια ξεχωριστή οντότητα, IUSM είναι μια οργάνωση υποστήριξης για τις συναντήσεις του σκάφους και IRB εγκρίσεις για HOG. Τρεις ξεχωριστές IRB πρωτόκολλα για τη συλλογή ή /και τη χρήση των δειγμάτων αίματος που σχετίζονται με αυτό το έργο έχει εγκριθεί από τα ίδια IUSM Institutional Review Board (αριθμοί πρωτοκόλλου: 0670 με 81, 0808-24, 0905-20). Γραπτή ενημέρωσε έντυπα συγκατάθεσης ελήφθησαν από όλα τα άτομα και όλες οι κλινικές έρευνες είχαν διεξαχθεί σύμφωνα με τις αρχές που διατυπώνονται στη Διακήρυξη του Ελσίνκι.

Αντιδραστήρια και αναστολείς

Το PLA

2 υπόστρωμα 1 Ο- (6-Dabcyl-αμινοεξανοϋλ) -2-Ο- (6- (12-ΒΟϋΙΡΥ-Δωδεκανοϋλο) αμινοεξανοϋλ) -Sn-3-γλυκερύλιο φωσφατιδυλοχολίνη (DBPC) ήταν από την Echelon Βιοεπιστημών (Salt Lake City, UT, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής) . Bromoenol λακτόνη (BEL) και μεθυλο arachidonylfluorophosphonate (MAFP) ήταν από την Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)

PLA

2 ενζυματική δραστηριότητα αναλύει

PLA

2. δραστηριότητες αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το φθορίζον υπόστρωμα DBPC, ένα φθορογόνο υπόστρωμα φωσφατιδυλοχολίνη [17]. Δείγματα πλάσματος (0.1 μL) αναμείχθηκαν με DBPC (0,2 μg σε PBS) προς τελικό όγκο 200 μL. Ο φθορισμός αναγνώσθηκε σε διαστήματα κατά τη διάρκεια αρκετών ωρών σε ένα Victor

αναγνώστη πλάκας 3V (Perkin Elmer, Waltham, ΜΑ, USA). PLA

2 δραστηριότητες εκφράστηκαν ως αλλαγή στην ένταση φθορισμού /min /μL πλάσματος. Όπως περιγράφηκε προηγουμένως [16], επιλέξαμε συνθήκες να διακρίνουμε PLA

2 δραστικότητα που προέρχονται από διαφορετικούς υποτύπους: α) ο «φυσικός» PLA

2 δραστηριότητα χωρίς εξωγενή πρόσθετα, β) ο IPLA

2 δραστηριότητα σε η παρουσία 5 mM EDTA (α χήλωσης δισθενούς κατιόντος να δεσμεύσουν το σύνολο PLA

2s απαιτούν ασβέστιο, συμπεριλαμβανομένων SPLA

2 και cPLA

2), γ) ο

2 δραστηριότητα SPLA παρουσία 1.2 mM χλωριούχο ασβέστιο (το φυσικό συγκέντρωση ιόντων ασβεστίου στο αίμα [18]) και MAFP (10 μΜ, ένας διπλός αναστολέας του cPLA

2 και IPLA

2), και δ) το

2 δραστηριότητα cPLA στην παρουσία 100 μΜ χλωριούχου ασβεστίου και bromoenol λακτόνη (BEL, 10 μΜ, έναν εκλεκτικό αναστολέα για IPLA

2).

Στατιστική Ανάλυση

κατηγορικές μεταβλητές συνοψίστηκαν ως μετρήσεις με ποσοστά και συνεχή μεταβλητές συνοψίστηκαν ως μέσα με τυπικές αποκλίσεις (SD) σε όλη την υγιή ελέγχου, και ομάδες του καρκίνου. Η Chi-square test χρησιμοποιήθηκε για τη δοκιμή των συσχετίσεων μεταξύ καταστάσεις ασθένειας και κατηγορηματική συμπαράγοντες όπως το φύλο, τη φυλή, το κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ. Για συνεχή συμπαράγοντες όπως η ηλικία και το ΒΜΙ, μονόδρομη ANOVA χρησιμοποιήθηκε για να δοκιμαστεί η συνολική διαφορά και Φοιτητικής

t-test

χρησιμοποιήθηκε για να ελεγχθεί η κατά ζεύγη διαφορά σε όλη καταστάσεις ασθένειας. Γραμμική παλινδρόμηση χρησιμοποιήθηκε για να εκτιμηθεί η μονοπαραγοντική συσχέτιση μεταξύ PLA

2 μετρήσεις και συμπαράγοντες. Λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει την απόδοση ταξινόμησης του PLA

2 μετρήσεις. Bootstrap χρησιμοποιήθηκε για την εσωτερική επικύρωση της απόδοσης της κατάταξης σύμφωνα με 1000 δείγματα [19]. Κάθε δείγμα είχε το ίδιο μέγεθος με το πρωτότυπο σετ δεδομένων και χρησιμοποιήθηκε για την ανάπτυξη του μοντέλου. Τα αποτελέσματα στη συνέχεια εξετάστηκαν στα αρχικά δεδομένα. Περιοχές κάτω από την καμπύλη (καμπύλη AUC) υπολογίστηκαν για κάθε επανάληψη. Όλες οι δοκιμασίες ήταν δύο όψεων. Λαμβάνοντας υπόψη τη διερευνητική φύση αυτής της μελέτης, δεν εγκρίθηκε καμία προσαρμογή για πολλαπλές συγκρίσεις.

P

τιμές & lt? 0,05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές. Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του λογισμικού SAS έκδοση 9.3 (SAS Institute Inc., Cary, NC, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής).

Αποτελέσματα

Θέμα δημογραφικά δεδομένα

Τα δημογραφικά στοιχεία για τη μελέτη οι συμμετέχοντες συνοψίζονται στον πίνακα 1. Για τα σετ δειγμάτων IUSM CRC, το 41,7% των συνολικών συμμετεχόντων ήταν άνδρες, 88,7% ήταν λευκοί, και η μέση ηλικία ήταν 53,1 χρόνια. Η ηλικία, το φύλο, και τη σύνθεση κούρσα δεν ήταν σημαντικά διαφορετική σε έλεγχο εναντίον ομάδων CRC (

P

τιμές & gt? 0,05? Πίνακας 1). Για το δεύτερο σύνολο δειγμάτων, η ηλικία στην υγιή ομάδα ελέγχου ήταν σημαντικά νεότερος από κάθε μία από τις τρεις ομάδες του καρκίνου (Πίνακας 1). Παρά το γεγονός ότι τα αρσενικά ήταν κυρίαρχη σε κάθε ομάδα, δεν ήταν σημαντικά διαφορετικό από το δεύτερο σύνολο υγιών μαρτύρων. 71,2% των συνολικών συμμετεχόντων ήταν άνδρες, το 90,4% ήταν λευκοί, και η μέση ηλικία ήταν 58,3 χρόνια (Πίνακας 1).

Η

Επαναληψιμότητα και σταθερότητα του PLA

2 δοκιμασίες

Έχουμε επικυρωθεί πρόσφατα την ποσοτική φύση της DBPC με βάση PLA

2 δοκιμασίες και βελτιστοποιημένη τις προϋποθέσεις για βιολογικά υγρά και δείγματα ιστών [16]. Όταν κάθε 8 αντιπροσωπευτικών δειγμάτων πλάσματος αναλύθηκαν τρεις φορές, η PLA

2 δραστικότητα τιμές επαναλήψιμη, με μια μέση τυπική απόκλιση (SD) 13,5 (1,3%). Δοκιμάσαμε επίσης τη σταθερότητα

2 δραστικότητα PLA με σύγκρισή τους σε δείγματα πριν από την αποθήκευση σε εκείνους στα ίδια δείγματα αποθηκεύονται στους -80 ° C για ένα μήνα, καθώς και την επίδραση της καταψύξεως και-απόψυξης για την PLA

2 δραστηριότητες σε 8 αντιπροσωπευτικά δείγματα. Όπως έχει ήδη αναφερθεί [16], PLA

2 δραστηριότητες ήταν σταθερά με υποδοχή SDS & lt? 35,8 (5,8%). Επιπλέον, δείξαμε ότι με την παρουσία όλων των άλλων συστατικών του προσδιορισμού, συμπεριλαμβανομένων αναστολέα (ων) που χρησιμοποιούνται σε αυτή τη μελέτη, αλλά απουσία του αίματος ή άλλων βιολογικών δειγμάτων, η μη-ειδική υδρόλυση του υποστρώματος DBPC ήταν αρνητική και αμελητέα (δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Το φυσικό PLA

2, cPLA

2, IPLA

2, και SPLA

2 δραστηριότητες ήταν αυξημένα σε δείγματα καρκίνου του εναντίον υγιείς μάρτυρες

Αίμα IPLA

2 και cPLA

2 δραστηριότητες δεν έχουν προηγουμένως αναφερθεί σε ανθρώπινα δείγματα. Αναλύσαμε το φυσικό PLA

2 (ορίζεται ως το PLA

2 δραστηριότητες μετρούμενη υπό τις συνθήκες χωρίς τροποποιητές, η οποία μπορεί να είναι μικρότερη από το άθροισμα της υποομάδας PLA

2 δραστηριότητες που μετράται υπό τροποποιημένες συνθήκες), όπως καθώς και cPLA

2, IPLA

2, και SPLA

2 δραστηριότητες σε δείγματα πλάσματος.

Εκτός από την υγιεινή εναντίον CRC cPLA

2 δραστηριότητας, όλες οι άλλες συγκρίσεις έδειξαν ότι PLA

2 δραστηριότητες ήταν σημαντικά αυξημένα στις ομάδες του καρκίνου (Σχ. 1Α και 1Β). PLA

2 τιμές δραστηριότητα σε δείγματα πλάσματος από LC, π.Χ., και οι ασθενείς PC δεν διέφεραν σημαντικά (

P

τιμές & gt? 0,05)

Σύγκριση των PLA

2 δραστηριότητες. στον υγιή έλεγχο (κανονική κολονοσκόπηση? n = 77) και CRC (n = 38) ομάδες. Α Σύγκριση των PLA

2 δραστηριότητες στον υγιή (n = 79) και άλλες ομάδες του καρκίνου. Ο καρκίνος του πνεύμονα (LC, n = 95), καρκίνος της ουροδόχου κύστης (BC, n = 31) και τον καρκίνο του παγκρέατος (PC, n = 38). Η κατανομή των φυσικών και μεμονωμένες ομάδες PLA

2 δραστηριότητες αναλύθηκαν όπως περιγράφεται στο Υλικά και Μέθοδοι. Οι μέσες τιμές των PLA

2 δραστηριότητες παρουσιάστηκαν από το «+» στην εικόνα. *

P

& lt? 0,05? **

P

& lt? 0,01? ***

P

& lt?. 0.001

Η

Από SPLA

2 εκκρίνεται, ήταν αναμενόμενο ότι

2 δραστηριότητας SPLA θα αποτελούν το μεγαλύτερο μέρος του

2 δραστηριότητα PLA ανιχνεύεται στο αίμα. Ωστόσο, στα αποτελέσματά μας, τα υψηλά επίπεδα της IPLA

2 και cPLA

2 και τα χαμηλά επίπεδα του SPLA

2 δραστηριότητες παρατηρήθηκαν σε όλα τα δείγματα πλάσματος. εξωσώματα αίματος μπορεί να είναι οι φορείς των δραστηριοτήτων αυτών [15]. Χρησιμοποιήσαμε διαφορική βήματα φυγοκέντρησης όπως περιγράφηκε πρόσφατα [16], για να καθοριστεί αν οι δραστηριότητες αυτές θα μπορούσαν να συνδέονται με τα αιμοπετάλια, εξωσώματα, ή άλλα μικροκυστίδια. Δύο δείγματα αίματος πρώτα σε φυγοκέντρηση σε 1750 g για 15 λεπτά για να απομακρυνθούν τα περισσότερα κύτταρα του αίματος και το υπερκείμενο υγρό ονομάζεται S1. S1 φυγοκεντρήθηκε στις 20.000

g

για 20 λεπτά, που είχε ως αποτέλεσμα S2 και το σφαιρίδιο 2 (Ρ2? Θραύσματα κυττάρου και μεγάλα κυστίδια). S2 υπερφυγοκεντρήθηκε σε 110.000

g

για 2 ώρες, η οποία οδήγησε σε S3 και Ρ3 (εξωσώματα). Μια τελική φυγοκέντρηση του S3 σε 200.000

g

για 2 ώρες οδήγησε σε S4 και Ρ4 (άλλα μικροκυστίδια). Βρήκαμε ότι όλα PLA

2 δραστηριότητες επελέγησαν για τον S1 έως S4 κλάσματα, γεγονός που υποδηλώνει ότι ήταν «ελεύθερη» και δεν συνδέονται με μικροκυστίδια (λεπτομερή δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Αυτό είναι παρόμοιο με αυτό που έχουμε αναφερθεί πρόσφατα σε ανθρώπινο ασκίτη με καρκίνο των ωοθηκών και των νέων μηχανισμών έκκρισης για IPLA

2s και cPLA

2s μπορεί να συμμετέχει [16].

κλινικές παραμέτρους και PLA

2 δραστηριότητες σε δείγματα καρκίνου του πλάσματος

Είναι ενδιαφέρον ότι η φυσική, IPLA

2, και SPLA

2 δραστηριότητες στο πλάσμα των ασθενών CRC αυξήθηκαν σε άτομα με προχωρημένα στάδια (III και IV), σε σύγκριση με προγενέστερο στάδιο (Ι και ΙΙ) της νόσου (

P

= 0,0335, 0,0367, 0,0778, 0,0345 και για PLA

2, IPLA

2, cPLA

2, και SPLA

2 , αντίστοιχα? Εικ. 2), υποδηλώνοντας ότι αυτές οι ενζυματικές δραστηριότητες μπορούν να συμμετέχουν εις την πρόοδον CRC. Συγκρίναμε την PLA

2 δραστηριότητες στο παχύ έντερο (n = 24) έναντι του ορθού (n = 14) δείγματα. Ακόμα κι αν η φύση, καθώς και η υπο-ομάδα PLA

2 δραστηριότητες σε ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου ήταν υψηλότερες από ό, τι εκείνων που προέρχονται από ασθενείς με καρκίνο του ορθού, οι διαφορές δεν ήταν στατιστικά σημαντική (

P

& gt? 0,05 σε όλες τις περιπτώσεις ? Πίνακας 2). Επιπλέον, δεν διαπιστώθηκε καμία διαφορά στην Pla

2 δραστηριότητες μεταξύ των διαφόρων υποομάδων ασθενών CRC με προηγούμενες θεραπείες (χειρουργική επέμβαση, χημειοθεραπεία, ακτινοθεραπεία, ή μη επεξεργασμένα? Πίνακας 2). Αντίθετα, βρήκαμε ότι PLA

2 δραστηριότητες δεν συσχετίζεται είτε Τ ή Ν στάδια της LC, BC, ή PC (Πίνακας 3).

Τα φυσικά και μεμονωμένες ομάδες PLA

2 δραστηριότητες αυξάνονται σταδιακά από το στάδιο του όγκου. Σταδίου Ι και ΙΙ (n = 7), Φάση ΙΙΙ και IV (n = 31). * Student t-test,

P

& lt?. 0.05

Η

Η

Αντίκτυπος άλλων παραγόντων σχετικά με PLA

2 δραστηριότητας

έχουν συλλέξει άλλοι παράγοντες που θα μπορούσαν να επηρεάσουν PLA

2 δραστηριότητες, όπως το κάπνισμα, η κατανάλωση αλκοόλ, και ο δείκτης μάζας σώματος (ΔΜΣ). Για τη μελέτη CRC, από τα 80 άτομα με τις διαθέσιμες πληροφορίες το κάπνισμα (27 CRC και 53 υγιείς περιπτώσεις), η πλειοψηφία (96%) των ανθρώπων που δεν καπνίζουν όταν συλλέχθηκαν τα δείγματα, με μέσο όρο 50,5% οι άνθρωποι δεν είχαν καπνίσει ποτέ και το 45,7% του παρελθόντος καπνιστής, και μόνο το 9,4% και 19,2% οι άνθρωποι είχαν δεύτερο χέρι έκθεσης σε κάθε ομάδα καπνίσματος. Οι καταστάσεις του καπνίσματος ομοίως κατανεμημένα στις δύο ομάδες (

P

τιμές & gt? 0,05? Λεπτομερή στοιχεία στον Πίνακα 4) και δεν υπήρχαν στατιστικές διαφορές σε PLA

2 δραστηριότητες μεταξύ των διαφορετικών καθεστώτων κάπνισμα (Σχήμα 3Α. ). Στο δεύτερο σετ της μελέτης, οι καταστάσεις του καπνίσματος ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των υγιών μαρτύρων και κάθε μία από τις ομάδες του καρκίνου με υψηλότερα ποσοστά των ανθρώπων που ήταν το ρεύμα, το παρελθόν, ή καπνιστές από δεύτερο χέρι σε ομάδες καρκίνου (

P

τιμές & lt? 0,05, εκτός από ένα σύγκριση, Πίνακας 5). Παρ ‘όλα αυτά, δεν παρατηρήθηκαν στατιστικά σημαντικές διαφορές στη PLA

2 δραστηριότητες μεταξύ των διαφορετικών καταστάσεων του καπνίσματος, υποστηρίζοντας την ιδέα που λαμβάνεται από την πρώτη σειρά της μελέτης ότι το πλάσμα PLA

2 δραστηριότητες δεν επηρεάζονται από το κάπνισμα (Σχ. 3Β).

δραστηριότητες PLA2 σε υγιείς και CRC δείγματα με διαφορετικά καθεστώτα κάπνισμα (α) και το δεύτερο καταστάσεις χέρι του καπνίσματος (β). Α Σύγκριση των δραστηριοτήτων PLA2 μεταξύ των διαφορετικών καταστάσεων του καπνίσματος (α) και το δεύτερο καταστάσεις χέρι του καπνίσματος (β) σε συμμετέχοντες με LC, BC, και τον υπολογιστή.

Η

Η

Το αλκοόλ κατανάλωση στην ελέγχου και ομάδες CRC δεν ήταν σημαντικά διαφορετικές (Πίνακας 4). Οι καταναλωτές αλκοόλ στις ομάδες CRC τείνουν να έχουν υψηλότερα επίπεδα στο πλάσμα PLA

2 δραστηριότητες, αλλά οι διαφορές δεν ήταν στατιστικά σημαντική (Εικ. 4). Ωστόσο, λόγω των χαμηλών αριθμών στην ομάδα κατανάλωση μη-αλκοόλης (n = 7), θα πρέπει να ερμηνεύσουμε αυτά τα δεδομένα με προσοχή. Για άλλους καρκίνους, ελήφθησαν παρόμοια αποτελέσματα. Παρά το γεγονός ότι υπήρχαν σημαντικές υψηλότερα ποσοστά των θεμάτων της κατανάλωσης αλκοόλ και σε άλλες ομάδες του καρκίνου (Πίνακας 5), η PLA

2 δραστηριότητες που δεν σχετίζονται σημαντικά με το αλκοόλ (Εικ. 5).

Σύγκριση των δραστηριοτήτων PLA2 μεταξύ » μη-αλκοόλη «και» ομάδες αλκοόλης »με τα υγιή και CRC συμμετέχοντες. Α Σύγκριση των δραστηριοτήτων PLA2 μεταξύ «μη-αλκοόλ» και «αλκοόλ» ομάδων στα το δεύτερο σετ από μελέτες με υγιείς, LC, π.Χ., και οι συμμετέχοντες PC.

Η

σύγκριση δραστηριότητα PLA2 σε άνδρες και γυναίκες στην η υγιεινή και οι ομάδες CRC. σύγκριση Α PLA2 ενεργότητα σε αρσενικά και θηλυκά στις υγιείς και άλλες ομάδες του καρκίνου. Τα δεδομένα από όλα τα άτομα σε κάθε σύνολο των μελετών παρουσιάζονται επίσης.

Η

Οι διαφορές στα PLA

2 δραστηριότητες μεταξύ των δύο φύλων δεν έφθασε στατιστική σημασία στον έλεγχο ή τυχόν ομάδες καρκίνο είτε σε σετ μελέτες (Σχ. 5Α και 5Β). Ομοίως, δεν υπήρχε διαφορά ή συσχέτιση σε PLA

2 δραστηριότητες σε άτομα με ΒΜΙ & lt? 25 vs. ΒΜΙ ≥25 ομάδες στη μελέτη CRC (Τα Σχ. 6Α και 6Β), αν και η μέση ΔΜΣ στο CRC και ομάδες PC ήταν σημαντικά μικρότερες από εκείνες στις ομάδες ελέγχου (πίνακες 4 και 5)

Η υποβληθεί σε υγιείς και CRC ομάδες χωρίστηκαν σε δύο ομάδες:. ΔΜΣ 18,5 έως & lt? 25 (για όλα τα μαθήματα, n = 43) και ΔΜΣ & gt? 25 (Για όλα τα μαθήματα, n = 80). A. Η υποβληθεί σε υγιείς και σε άλλες ομάδες του καρκίνου χωρίστηκαν σε δύο ομάδες: BMI≤25 (Για όλα τα μαθήματα, n = 80) και ΒΜΙ & gt? 25 (Για όλα τα μαθήματα, n = 148)

Η

Η ηλικία είναι ένας από τους πιο σαφώς προσδιορισμένους παράγοντες κινδύνου για την ανάπτυξη CRC και άλλων καρκίνων. Η Αμερικανική Αντικαρκινική Εταιρεία και η Task Force των ΗΠΑ Προληπτικές Υπηρεσίες προτείνουμε ότι οι άνθρωποι λαμβάνουν κολονοσκόπηση προβολές κάθε 10 χρόνια αρχίζοντας από την ηλικία των 50. Αναλύσαμε τον τρόπο αυτό τις συνέπειες της ηλικίας για PLA

2 δραστηριότητες διαιρώντας τα θέματα σε δύο ομάδες (ηλικίας & lt? 50 χρόνου, n = 37 και ≥50 ετών, n = 78). Παρά το γεγονός ότι υπήρξε μια τάση αύξησης της PLA

2 δραστηριότητες στην ≥50 ετών της ομάδας στην ομάδα CRC, οι διαφορές δεν ήταν στατιστικά σημαντικές (Σχ. 7Α). Ομοίως, καμία διαφορά εντοπίστηκε ανάμεσα στις δύο ηλικιακές ομάδες στην LC, BC, και σετ υπολογιστή, αν και όταν ενώθηκαν όλα τα θέματα (συμπεριλαμβανομένων υγιείς μάρτυρες), υπήρξαν σημαντικές αυξήσεις σε PLA

2 ενεργοποιεί τα παλαιότερα θέματα ( Εικ. 7Β)

Οι συμμετέχοντες σε υγιείς και CRC ομάδες χωρίστηκαν σε δύο ομάδες:. ηλικίας & lt? 50 (Για όλα τα μαθήματα, n = 42) και την ηλικία ≥50 (Για όλα τα μαθήματα, n = 153). Student t-τεστ εκτελέστηκε για να αναλυθούν οι διαφορές μεταξύ αυτών των δύο ομάδων. A. Οι συμμετέχοντες σε υγιή και άλλες ομάδες καρκίνος χωρίστηκαν σε δύο ομάδες: την ηλικία & lt? 50 (Για όλα τα υποκείμενα, n = 61) και την ηλικία ≥50 (Για όλα τα υποκείμενα, η = 144). Student t-τεστ εκτελέστηκε για να αναλυθούν οι διαφορές μεταξύ αυτών των δύο ομάδων. *** P & lt?. 0.001

Η

Μια άμεση σύγκριση των δύο συνόλων υγιείς μάρτυρες έδειξε ότι αν και το φύλο, την ηλικία, το παθητικό κάπνισμα και η κατανάλωση αλκοόλ τους ήταν διαφορετική, δεν υπήρχαν διαφορές στην κάθε

2 δραστικότητα PLA μετρήθηκε (Πίνακας 6). Αυτό περαιτέρω υποστηρίζει ότι το πλάσμα PLA είναι

2 δραστηριότητες δεν επηρεάζονται σημαντικά από την ηλικία, το φύλο, η κατανάλωση αλκοόλ, ή /και το κάπνισμα.

Η

Η απόδοση ταξινόμησης του πλάσματος PLA

2 δραστηριότητες

λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει την απόδοση ταξινόμησης του PLA

2 δραστηριότητες σε καρκίνους. Και οι τέσσερις PLA

2 μετρήσεις κρατήθηκαν ως προάγγελοι ανεξάρτητα από τη σημασία τους. Οι παραστάσεις ταξινόμησης συνοψίστηκαν από λειτουργικού χαρακτηριστικού δέκτη (ROC) καμπύλη (Εικ. 8). τύπους πρόβλεψη παρήχθησαν χρησιμοποιώντας τις εκτιμήσεις παραμέτρου.

CRC περιπτώσεις εναντίον υγιή άτομα. A. Όλες οι καρκίνοι εναντίον υγιή άτομα στο 2ο σετ. καρκίνος του πνεύμονα Β vs. υγιή άτομα. καρκίνο της ουροδόχου κύστης Γ εναντίον υγιή άτομα. καρκίνο του παγκρέατος Δ εναντίον υγιή άτομα. Ε. Όλοι οι καρκίνοι εναντίον όλα τα υγιή άτομα με συνδυασμό δύο σύνολα

Η

Ο τύπος πρόβλεψη για το διαχωρισμό περιπτώσεις CRC από υγιή άτομα είναι: όπου «

P

CRC» περίπτερα για την πιθανότητα να έχουν CRC. Η καμπύλη ROC που φαίνεται στο Σχ. 8Α έχει μια περιοχή κάτω από την καμπύλη (AUC) = 0.7502.

Από την εξωτερική επικυρώσεις θα απαιτούσε μια ανεξάρτητη μελέτη, αντίθετα ενέκρινε τις εσωτερικές μεθόδους για την επικύρωση των επιδόσεων ταξινόμησης. Μεταξύ των διαφόρων μεθόδων εσωτερικής επικύρωσης, έχει αποδειχθεί ότι η bootstrap υπερτερεί jackknife, cross-επικύρωση και μεθόδους δεδομένα διάσπαση [19]. Ως εκ τούτου, bootstrap εγκρίθηκε για την επικύρωση. Συγκεκριμένα, ο τύπος πρόβλεψης ελήφθη με την τοποθέτηση του ίδιου μοντέλου για κάθε bootstrapped δείγμα. Ο τύπος εφαρμόστηκε στα αρχικά δεδομένα για τον υπολογισμό των πιθανοτήτων πρόβλεψη. Η απόδοση για το συγκεκριμένο δείγμα bootstrap συνοψίζεται από την AUC της καμπύλης ROC. Η συνολική απόδοση αξιολογήθηκε συνοψίζοντας AUCs όλη 1.000 bootstrapped δείγματα. Στο 95% των 1000 bootstrapped δείγματα, AUCs είναι υψηλότερη από 0,7143 για CRC εναντίον υγιή. Ως εκ τούτου, τα αποτελέσματα αυτά επιβεβαιώνουν εσωτερικά τις επιδόσεις ταξινόμηση των μοντέλων που αναπτύχθηκαν παραπάνω.

Ο τύπος της πρόβλεψης και η καμπύλη ROC για το διαχωρισμό όλων των περιπτώσεων καρκίνου από υγιή υποκείμενα στην δεύτερη σειρά μελέτης έχουν ως εξής και φαίνεται στο Σχ. 8Β, με μια απόδοση AUC = 0.8337.This είχε επικυρωθεί το 1000 bootstrapped δείγματα. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγματα, AUCs είναι υψηλότερη από 0,8205 για LC, PC, BC συνδυασμό έναντι του δεύτερου σετ των υγιών μαρτύρων.

Οι τύποι πρόβλεψης και οι καμπύλες ROC για την ξεχωριστή LC, BC, και οι περιπτώσεις PC από υγιή άτομα στο δεύτερο σετ της μελέτης που αναφέρονται παρακάτω και Σχ. 8C έως 8Ε, με AUCs & gt? 0.811, υποδεικνύοντας καλές επιδόσεις κατάταξη των δοκιμών. Για LC έναντι υγιών ελέγχου, η AUC = 0,8119 (Εικ. 8C). Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από 0.7923.For BC έναντι υγιών ελέγχου, το AUC = 0,8624 (Σχ. 8D). Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από ό, τι 0.8161.For PC έναντι υγιών έλεγχο, την AUC = 0,8671. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από 0,8426.

Τέλος, αφού έχουμε βρει ότι ο PLA

2 δραστηριότητες ουσιαστικά καμία διαφορά στις δύο ομάδες υγιών ελέγχων, συνδυάσαμε όλα υγιείς μάρτυρες και όλες οι περιπτώσεις καρκίνου σε δύο σειρές μελετών και δημιουργείται μια συνδυασμένη τύπο, με μια AUC = 0,8011 (Σχ. 8F). Στο 95% των 1000 bootstrapped δείγματα, AUCs είναι υψηλότερες από 0.7907.The ευαισθησίες και εξειδικεύσεις μπορούν να ληφθούν από τις καμπύλες ROC φαίνεται στο Σχ. 8. Για την σειρά CRC μελέτης, 60,5% ευαισθησία και 77,9% ειδικότητας λήφθηκαν (Πίνακας 7). Για το 2

ου σετ μελέτη και τα στοιχεία συνδυάζονται και για τις δύο ομάδες, ευαισθησίες & gt? 80% και οι ιδιαιτερότητες & gt?. 66% ελήφθησαν για όλες τις περιπτώσεις (Πίνακας 7)

Η

Η ενδεχόμενες συνεισφορές από άλλους παράγοντες

Αν και οι περισσότερες άλλες δημογραφικές και /ή περιβαλλοντικούς παράγοντες που δοκιμάστηκαν δεν ήταν σημαντικά διαφορετική σε καρκίνο και ομάδες ελέγχου (Σχήματα 3-7), ελέγξαμε δυνητικές συνεισφορές τους στις επιδόσεις όταν αξιολογούνται σε μεμονωμένα επίπεδα. Κρατήσαμε τα τέσσερα PLA

2 μετρήσεις στα μοντέλα, αλλά αφήστε τους άλλους προγνωστικούς παράγοντες που υπόκεινται σε μοντέλο επιλογές σε σημαντικό επίπεδο 0.05.

Ο τύπος της πρόβλεψης και η καμπύλη ROC για να διαχωρίσετε CRC από υγιή άτομα κατά το πρώτο σύνολο μελέτης έχουν ως εξής και φαίνεται στο Σχ. 9Α, με μια AUC = 0,8162. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από 0.7589.The τύπου πρόβλεψη και την καμπύλη ROC για το διαχωρισμό όλων των περιπτώσεων καρκίνου από υγιή υποκείμενα στην δεύτερη σειρά μελέτης έχουν ως εξής και φαίνεται στο Σχ. 9Β, με μια απόδοση AUC = 0.9728.This είχε επικυρωθεί το 1000 bootstrapped δείγματα. Στο 95% των 1000 bootstrapped δείγματα, AUCs είναι υψηλότερη από 0,9625 για LC, PC, και BC συνδυασμό εναντίον του δεύτερου σετ των υγιών μαρτύρων.

CRC περιπτώσεις εναντίον υγιή άτομα. A. Όλες οι περιπτώσεις καρκίνου εναντίον υγιών ατόμων στο δεύτερο σετ. καρκίνος του πνεύμονα Β vs. υγιή άτομα. καρκίνο της ουροδόχου κύστης Γ εναντίον υγιή άτομα. καρκίνο του παγκρέατος Δ εναντίον υγιή άτομα. E. Όλοι οι καρκίνοι εναντίον όλα τα υγιή άτομα με συνδυασμό δύο σύνολα.

Η

Οι τύποι πρόβλεψης και οι καμπύλες ROC για την ξεχωριστή LC, π.Χ., και περιπτώσεις PC από υγιή άτομα στο δεύτερο σετ της μελέτης είναι αναφέρονται παρακάτω και Σχ. 9Γ 9E, με AUCs & gt? 0.968, υποδεικνύοντας υψηλές ευαισθησίες και εξειδικεύει των δοκιμών. Για LC έναντι υγιών ελέγχου, η AUC = 0,9742. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από ό, τι 0.9598.For π.Χ. έναντι υγιών έλεγχο, την AUC = 0,9682. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερες από ό, τι 0.9398.For PC έναντι υγιών έλεγχο, την AUC = 0,9907. Στο 95% του 1000 bootstrapped δείγμα, AUCs είναι υψηλότερη από 0,9740.

Τέλος, από τη στιγμή που διαπιστώθηκε ότι ο PLA

2 δραστηριότητες ουσιαστικά καμία διαφορά στις δύο ομάδες υγιών μαρτύρων, συνδυάσαμε όλα τα υγιή έλεγχοι και όλες οι περιπτώσεις καρκίνου σε δύο σειρές μελετών και δημιουργείται μια συνδυασμένη τύπο, με μια AUC = 0,9140 (Εικ. 9F). Στο 95% των 1000 bootstrapped δείγματα, AUCs είναι υψηλότερες από 0.9018.The ευαισθησίες και εξειδικεύσεις που λαμβάνονται με αυτές τις καμπύλες ROC με πρόσθετες παραμέτρους αυξάνονται σε & gt? 85% (εκτός CRC έναντι υγιών περιπτώσεις? Πίνακας 7).

Συζήτηση

Σε αυτό το έργο, έχουμε παρουσιάσει τις πρώτες μετρήσεις του πλάσματος φυσικών και υπότυπο PLA

2 δραστηριότητες και οι επιδόσεις τους ως πιθανοί δείκτες για τέσσερις διαφορετικούς καρκίνους, CRC, LC, π.Χ., και τον υπολογιστή. Έχουμε μετρήσει τις PLA

2 δραστηριότητες σε περισσότερες από 20 δείγματα αίματος με ή χωρίς την προσθήκη 1,2 mM ασβεστίου (η φυσική συγκέντρωση ιόντων ασβεστίου στο αίμα) στους τελικούς μείγματα δοκιμασία και δεν εντοπίζονται τυχόν σημαντικές διαφορές. Ως εκ τούτου, ορίζουμε τις PLA

2 δραστηριότητες που λαμβάνονται χωρίς πρόσθετα όπως το «φυσικό» PLA

2 δραστηριότητα. Έχουμε επιλέξει τις βέλτιστες συνθήκες για τη μέτρηση της κάθε υπο-οικογένεια του PLA

2 δραστηριότητες. Αυτές οι τροποποιημένες συνθήκες δεν συνυπάρχουν στο αίμα. Ως εκ τούτου, δεν προκαλεί έκπληξη το γεγονός ότι το άθροισμα των υποοικογένειας PLA

2 δραστηριότητες είναι μεγαλύτερο από το «φυσικό»

2 δραστικότητα PLA. Ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι αν και χρησιμοποιούνται τροποποιημένες συνθήκες για την απόκτηση των δραστηριοτήτων για τις υπο-οικογένειες των PLA

2s, τα τελικά αποτελέσματα είναι από τα φυσικά PLA

2s υπάρχει στα δείγματα αίματος.

Ενώ τα πλεονεκτήματα της χρήσης βολικό ορολογικών δεικτών είναι προφανή, δεν υπάρχουν αξιόπιστα δείκτες αίματος για οποιαδήποτε από αυτές τις μορφές καρκίνου είναι σήμερα διαθέσιμα. Για CRC, την ανάπτυξη /επικύρωση μη επεμβατικές και επεμβατικές μέθοδοι ανίχνευσης είναι μια σημαντική εστίαση στον τομέα. Οι τρέχουσες μέθοδοι περιλαμβάνουν σκαμνί και αιματολογικές εξετάσεις, όπως κοπράνων ανοσοχημική εξετάσεις (κρίσεις) και guaiac με βάση κοπράνων δοκιμές λανθάνουσας αιμορραγίας (πήρε). Παρά το γεγονός ότι η ειδικότητα είναι υψηλή (& gt? 85%), οι δοκιμές αυτές έχουν χαμηλή ευαισθησία (& lt? 23%) για αδενώματα του παχέος εντέρου και συνεπώς είναι απίθανο να είναι σε θέση να αυξήσουν την έγκαιρη ανίχνευση της CRC [20], [21]. Γενετικές εξετάσεις κοπράνων ανίχνευση μεταλλάξεων στα κόπρανα που μπορεί να βρεθεί σε CRC.