Αφηρημένο

μετριέται στο αίμα παρεκκλίνουσα μήκους των τελομερών έχει συσχετιστεί με αυξημένο κίνδυνο εμφάνισης διαφόρων τύπων καρκίνου. Στον τομέα της κληρονομικής μη πολυποδίαση ορθοκολικό καρκίνο (CRC), και πιο συγκεκριμένα στο σύνδρομο Lynch, που προκαλείται από μεταλλάξεις βλαστικής σειράς στην επισκευή αναντιστοιχία (

MMR

) γονίδια, πρόσφατα βρέθηκε ότι ο καρκίνος που πλήττονται

MMR

φορείς μετάλλαξης του γονιδίου είχαν μικρότερη τελομερή και πιο έντονη μείωση του μήκους των τελομερών με την ηλικία από ό, τι οι έλεγχοι και ανεπηρέαστη

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης. Εδώ αξιολογούμε το μήκος των τελομερών αίματος στο MMR-καλά κληρονομικά μη πολυποδίαση CRC, δηλαδή οικογενής CRC τύπου Χ (FCRC-X). Συνολικά 57 καρκίνου που πλήττονται και 57 χωρίς καρκίνο άτομα από 34 Άμστερνταμ-θετική οικογένειες FCRC-X αναλύθηκαν και συγκρίθηκαν με τα δεδομένα που προηγουμένως δημοσιευθεί σε 144 τον καρκίνο που επλήγησαν και 100 του καρκίνου χωρίς

MMR

γονιδιακή μετάλλαξη φορείς, και 234 μάρτυρες. Σχετική μήκος των τελομερών μετρήθηκε χρησιμοποιώντας μια μονόχρωμη multiplex ποσοτική μέθοδο PCR, μετά από αυστηρά μέτρα για την αποφυγή πηγές μεροληψίας και προσαρμογή ανάλογα με την ηλικία. Παρά την αναδρομική φύση της μελέτης μας, τα αποτελέσματα δείχνουν ότι πλέον τελομερή συνεργάτης με τον κίνδυνο καρκίνου στο FCRC-Χ, εντοπίζοντας έτσι διαφορετικά πρότυπα του μήκους των τελομερών ανάλογα με την κατάσταση του MMR συστήματος

Παράθεση:. Segui Ν, Guinó Ε, Pineda Μ, Navarro Μ, Bellido F, Lázaro C, et al. (2014) Μεγαλύτερη τελομερή συνδέονται με τον κίνδυνο καρκίνου στο MMR-Έμπειρος Κληρονομική μη πολυποδίαση ορθοκολικού καρκίνου. PLoS ONE 9 (2): e86063. doi: 10.1371 /journal.pone.0086063

Συντάκτης: Amanda Ewart Toland, Πολιτειακό Πανεπιστήμιο του Οχάιο Medical Center, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 8 Οκτωβρίου του 2013? Αποδεκτές: 9 Δεκεμβρίου του 2013? Δημοσιεύθηκε: 3, Φεβρουαρίου του 2014

Copyright: © 2014 Segui et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο έχει χρηματοδοτηθεί από το ισπανικό Υπουργείο Οικονομίας (μέλος Γραμματείας Έρευνας, Ανάπτυξης και Καινοτομίας) (επιχορηγήσεις SAF2012-38885 να LV και SAF2012-33636 την GC? και Ramón y Cajal σύμβαση με την LV)? L’OREAL-UNESCO «Για τις Γυναίκες στην Επιστήμη»? η επιστημονική Ίδρυμα Asociación Española Contra el καρκίνου? η καταλανική κυβέρνηση (επιδότηση 2009SGR290)? και Carlos III Ινστιτούτο Υγείας (υποτροφία στην NS). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

το οικογενειακό ιστορικό είναι ένας από τους ισχυρότερους παράγοντες κινδύνου για την ανάπτυξη του καρκίνου του παχέος εντέρου (CRC) και εμπλέκεται σε περίπου 20% όλων των CRC περιπτώσεων. Ωστόσο, μόνο 2-6% του συνόλου των CRCs εξηγούνται από βλαστικής γραμμής μεταλλάξεων σε γνωστά γονίδια CRC υψηλής διεισδυτικότητα. Τα κριτήρια Amsterdam ορίστηκαν για τον εντοπισμό κληρονομικών υποθέσεων CRC μη πολυποδίαση, θεωρώντας νεαρή ηλικία (& lt? 50 ετών) κατά τη διάγνωση του καρκίνου και την υψηλή οικογενούς συσσωμάτωση του CRC (Άμστερνταμ Ι) ή άλλων συναφών όγκων (Amsterdam II). Περίπου το 60% των οικογενειών που πληρούν τα κριτήρια του Άμστερνταμ δείχνουν επιδιόρθωση του DNA αναντιστοιχία (MMR) ανεπάρκεια, ως συνέπεια μιας μετάλλαξης βλαστικής σειράς ή epimutation σε

MMR

γονίδιο, δηλαδή

MLH1

, em

MSH2

,

MSH6

ή

PMS2

(σύνδρομο Lynch? LS). Το υπόλοιπο 40% δεν δείχνουν MMR ελαττωμάτων και την γενετική αιτία της οικογενούς συνάθροισης CRC είναι ακόμη άγνωστη, αφού έχουν ομαδοποιηθεί ως οικογενής CRC τύπου Χ (FCRC-X) [1], [2].

χρωμοσωμάτων τελομερή αποτελούνται από πολλαπλές σύντομες επαναλήψεις (TTTAGG) που προστατεύουν από γονιδιωματικές μεταθέσεις μεγάλης κλίμακας. Τελομερή συντομεύσει με την κυτταρική διαίρεση, οδηγώντας τελικά σε κυτταρική γήρανση. Σε σπάνιες περιπτώσεις, τα κύτταρα που παρακάμπτουν έκτροπα κυτταρική γήρανση με κριτικό πνεύμα σύντομη τελομερή μπορεί να αναπτυχθεί γενωμική αστάθεια και ενδεχομένως να γίνουν ογκογόνο. Στα καρκινικά κύτταρα, ωστόσο, όπως και σε βλαστικά κύτταρα, τελομεράση, το ένζυμο που προσθέτει τελομερείς επαναλήψεις στα άκρα των χρωμοσωμάτων, εκφράζεται, αντισταθμίζοντας τη διάβρωση των τελομερών και την πρόληψη γηρασμό /απόπτωσης [3] – [5].

μεταλλάξεις βλαστικής σειράς στις συνιστώσες της τελομεράσης συγκρότημα αιτία συγγενή δυσκεράτωση. Οι ασθενείς με αυτή τη διαταραχή έχουν σύντομη τελομερή, τα οποία οδηγούν σε αποτυχία του μυελού των οστών και αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του [6]. Παρομοίως, μοντέλα ποντικού με ανεπάρκεια τελομεράσης και σύντομη τελομερή έχουν υψηλό κίνδυνο καρκίνου του [7]. Πρόσφατες επιδημιολογικές μελέτες έχουν αξιολογήσει μετράται σε DNA περιφερικού αίματος ως μια πιθανή βιοδείκτης του κινδύνου καρκίνου του μήκους των τελομερών. Αρκετές μελέτες έχουν αναφέρει ενώσεις μεταξύ του μήκους των τελομερών και τον κίνδυνο του καρκίνου, αν και τα δεδομένα είναι ασυνεπή μεταξύ των μελετών και τύπων όγκων [8]. Σε μελέτες CRC, έχουν αντιφατικά αποτελέσματα έχουν παρατηρηθεί, προφανώς λόγω των διαφορών στον πληθυσμό της μελέτης, σχεδιασμού της μελέτης, αναλυτική προσέγγιση, το μέγεθος του δείγματος, ή της έκθεσης σε περιβαλλοντικούς παράγοντες [9] – [15].

Όσον αφορά την κληρονομική CRC, η ομάδα μας ανέφερε πρόσφατα ότι ο καρκίνος που πλήττονται

MMR

φορείς μετάλλαξης του γονιδίου είχαν μικρότερη τελομερή και έδειξαν ταχύτερη τελομερών τριβή με την ηλικία, που μετράται στο αίμα, από τους ελέγχους και τον καρκίνο-free

MMR

φορείς μετάλλαξης του γονιδίου [ ,,,0],16]. Παρ ‘όλα αυτά, ο ρόλος του μήκους των τελομερών ως τροποποιητής τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου στο LS δεν θα μπορούσε να υποστηριχθεί, δεδομένου ότι είχε υποστηριχθεί ότι οι μειωθεί τελομερή παρατηρήθηκαν σε αναδρομικά συλλέγονται δείγματα από τον καρκίνο που επλήγησαν από τα άτομα μπορεί να είναι μια συνέπεια της νόσου [8], [14] . Ωστόσο, το γεγονός ότι ο καρκίνος χωρίς φορείς μετάλλαξης είχαν πλέον τελομερή από καρκίνο χωρίς ελέγχους που προβλέπονται πρόσθετα αποδεικτικά στοιχεία για την υποστήριξη στην υπόθεση ότι το μήκος των τελομερών μπορεί να δράσει ως τροποποιητής κίνδυνο καρκίνου στο LS [16].

Εδώ αναφέρουν την πρώτη μελέτη της συμπεριφοράς του μήκους των τελομερών αίματος στο MMR-καλά κληρονομική CRC μη πολυποδίαση, δηλαδή FCRC-Χ, και συγκρίνετέ την με τη συμπεριφορά που παρατηρήθηκε σε ελέγχους και σε κληρονομικά μη πολυποδίαση CRC με MMR ελάττωμα, δηλαδή LS ( δημοσιευθεί προηγουμένως [16]).

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους ασθενείς. Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας της IDIBELL (ref. PR221 /09).

Οι συμμετέχοντες στη μελέτη

Ένα σύνολο 114 ατόμων, 57 με καρκίνο που επλήγησαν και 57 χωρίς καρκίνο, από 34 οικογένειες FCRC-X συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Οι οικογένειες αυτές πληρούσαν τα κριτήρια του Άμστερνταμ, αλλά δεν δείχνουν MMR ελαττώματα (μικροδορυφορικού αστάθεια ή η απώλεια της έκφρασης των πρωτεϊνών MMR MLH1, MSH2, MSH6 και PMS2). Συνολικά, το 76,5% (26/34) των οικογενειών πληρούνται τα κριτήρια του Άμστερνταμ Ι και 23,5% (8/34) του Άμστερνταμ II. Για συγκριτικούς σκοπούς, προηγουμένως δημοσιευμένα δεδομένα το μήκος των τελομερών από άτομα που ανήκουν σε οικογένειες και LS από τους ελέγχους συμπεριλήφθηκαν στις αναλύσεις [16]. Η οικογενής CRC-X, LS και ελέγχου δείγματα ήταν όλα του Καυκάσου προέλευσης και προσλαμβάνονται από την ίδια ομοιογενή πληθυσμό (η ισπανική περιφέρεια της Καταλονίας), μέσω της Κληρονομική Πρόγραμμα Καρκίνου της καταλανικής Ινστιτούτου Ογκολογίας, IDIBELL. Ο Πίνακας 1 δείχνει τα χαρακτηριστικά των περιπτώσεων FCRC-Χ που μελετήθηκαν, συγκρίνοντάς τα με τα LS άτομα και τους ελέγχους που έχουν ήδη αναλυθεί [16].

Η

Σχετική τελομερούς

μέτρησης μήκους

Μήκος Σχετική τελομερών ( RTL) αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας ένα μονόχρωμο multiplex μέθοδος ποσοτικής PCR [17], υπό τους ίδιους όρους όπως και στην Segui et al. [16]. Επιπλέον, MMR-καλά κληρονομικών υποθέσεων έτρεξαν μαζί με LS περιπτώσεις και τους ελέγχους. Για να αποκλειστεί αντικείμενα ή τεχνικές πηγές μεταβλητότητας, μια τυπική καμπύλη συμπεριλαμβάνονται σε κάθε εκτέλεση (πλάκα 384 φρεατίων), κάθε δείγμα αναλύθηκε εις τριπλούν, και όποτε είναι δυνατόν, ίσο αριθμό δειγμάτων από διαφορετικές κλινικές ομάδες έτρεξαν στο ίδια πλάκα. Αποθήκευση και DNA εκχύλιση από περιφερικό αίμα εκτελέστηκαν στην ίδια εγκατάσταση και χρησιμοποιώντας τις ίδιες μεθόδους εξόρυξης, όπως συνιστάται για αναδρομικές μελέτες μήκος των τελομερών [8].

Στατιστικές Αναλύσεις

RTL προσαρμόστηκε ανάλογα με την ηλικία με βάση το μήκος των τελομερών που συμβαίνουν με την ηλικία στο γενικό πληθυσμό (μάρτυρες), όπως αναφέρθηκε προηγουμένως [16], [18]. Οι διαφορές στην ηλικία προσαρμοσμένου μήκη των τελομερών αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ rank sum Wilcoxon (Mann-Whitney U). Το τεστ rank sum Kruskal-Wallis χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση των δημογραφικών χαρακτηριστικών μεταξύ των ομάδων. Όλες οι δοκιμασίες ήταν δύο όψεων και ρ-τιμές κάτω από 0,05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές. Οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση R στατιστικό λογισμικό.

Αποτελέσματα

Ηλικία προσαρμοσμένο RTL εκτιμήθηκε σε 57 ασθενείς FCRC-X καρκίνου που πλήττονται και 57 μη προσβεβλημένα άτομα από 34 οικογένειες FCRC-X. Τα αποτελέσματα συγκρίθηκαν με τα αποτελέσματα που δημοσιεύονται σε μια προηγούμενη μελέτη των 144 καρκίνου που πλήττονται

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης, 100 ανεπηρέαστη

MMR

φορείς μετάλλαξης των γονιδίων και 234 ελέγχους [16].

καρκίνος πλήττονται περιπτώσεις FCRC-X έδειξαν σημαντικά μεγαλύτερη από ό, τι τα τελομερή μη προσβεβλημένων ατόμων FCRC-X (p = 0,009) και του καρκίνου χωρίς ελέγχους (ρ = 0,013) (Εικ. 1). Τα αποτελέσματα αυτά ήταν σε έντονη αντίθεση με εκείνες που παρατηρήθηκαν στο παρελθόν σε LS, όπου τα μήκη των τελομερών ανιχνεύονται στον καρκίνο πλήττονται

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης ήταν μικρότερες από αυτές που επηρεάζονται φορείς μετάλλαξης (p = 0,032) [16]. Από την άλλη πλευρά, χωρίς καρκίνο περιπτώσεις FCRC-X έδειξε μικρότερη τελομερή από καρκίνο χωρίς

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης (p = 0,015), αλλά παρόμοιου μήκους με τους μάρτυρες (Εικ. 1).

Οι διαφορετικές ομάδες αντιστοιχούν σε: καρκίνο που πλήττονται από τις περιπτώσεις FCRC-X (μέση ηλικία προσαρμοσμένο RTL: 0.017)? χωρίς καρκίνο άτομα από οικογένειες FCRC-X (διάμεση τιμή: -0.215)? καρκίνο που πλήττονται

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης (διάμεση τιμή: -0.131)? χωρίς καρκίνο

MMR

φορείς γονιδιακής μετάλλαξης (διάμεση τιμή: -0.079)? και του καρκίνου χωρίς ελέγχους (διάμεση τιμή: -0.092). Οι διαφορές στην ηλικία προσαρμοσμένου RTL αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ rank sum Wilcoxon (Mann-Whitney U). Τα κουτιά αντιπροσωπεύουν το διατεταρτημοριακό εύρος των κατανομών (25

ου και 75

ου εκατοστημόρια)? οι οριζόντιες γραμμές μέσα στα κουτιά, τα διάμεσοι? και οι κάθετες γραμμές, το 5

ου και 95

ου εκατοστημόρια. Δεδομένα από LS οικογένειες και οι έλεγχοι έχουν δημοσιευθεί στο παρελθόν [16].

Η

Συζήτηση

Βρήκαμε ότι οι πλέον τελομερή συνδέονται με τον καρκίνο στο FCRC-X. Επιπλέον, με βάση τα στοιχεία που δημοσιεύτηκαν στο παρελθόν από την ομάδα μας [16], MMR ανεπάρκεια και -proficient μη πολυποδίαση κληρονομικών υποθέσεων δείχνουν διαφορετικά πρότυπα του μήκους των τελομερών του αίματος, γεγονός που υποδηλώνει ότι η κατάσταση του συστήματος MMR είναι το κλειδί για τον προσδιορισμό του μήκους των τελομερών σε κληρονομικές υποθέσεις .

Πολλές επιδημιολογικές μελέτες έχουν διερευνήσει τη σχέση του μήκους των τελομερών με CRC κινδύνου στο γενικό πληθυσμό, που παράγουν αντικρουόμενα αποτελέσματα [19]. Τα στοιχεία από αναδρομικές μελέτες δείχνουν ότι τα τελομερή στα κύτταρα του περιφερικού αίματος είναι μικρότερη σε CRC περιπτώσεις από τους ελέγχους. Ωστόσο, η συσχέτιση αυτή δεν έχει αναπαραχθεί σε προοπτικές μελέτες, γεγονός που υποδηλώνει ότι η συσχέτιση μεταξύ βραχυπρόθεσμων τελομερή και CRC σε αναδρομικές μελέτες είναι κατά κάποιο τρόπο το αποτέλεσμα της νόσου, η θεραπεία ή διαφορική επιβίωση και όχι η αιτία (αποτέλεσμα της αντιστροφής της αιτιώδους συνάφειας) [14]. Σχετικά με προοπτικές μελέτες, δεν διαπιστώθηκε καμία συσχέτιση σε τρεις σχετικά μικρές μελέτες (134-191 υποθέσεις εναντίον 306 – 406 ελέγχους) [9] – [11]. Ωστόσο, πιο πρόσφατα, μεγαλύτερες προοπτικές μελέτες διαπίστωσαν ότι πλέον τελομερή συσχετίστηκαν με υψηλότερο κίνδυνο CRC (περιπτώσεις /έλεγχοι = 2.157 /3921) [14], ή ότι τόσο μακροπρόθεσμα όσο και βραχυπρόθεσμα τελομερή αυξημένο CRC κινδύνου (περιπτώσεις /έλεγχοι = 441/549) [15].

Παρά την αναδρομική φύση της μελέτης μας, βρήκαμε ότι ο καρκίνος που πλήττονται FCRC-Χ άτομα είχαν πλέον τελομερή από καρκίνο χωρίς τα μέλη του ίδιου τύπου οικογένειες Χ, τους ελέγχους, και τον καρκίνο-προσβεβλημένα μέλη των οικογενειών LS (

MMR

γονιδιακή μετάλλαξη φορείς). Ως εκ τούτου, είναι πλέον τελομερή συνδέονται με τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου στο MMR-καλά κληρονομικά μη πολυποδίαση CRC, όπως παρατηρήθηκε σε μεγάλη προοπτική βασισμένη στον πληθυσμό σειρά CRC [14], [15]. Περαιτέρω μελέτες που αξιολογούν το μήκος των τελομερών, πριν και μετά τη διάγνωση του καρκίνου σε περιπτώσεις FCRC-X θα είναι ζωτικής σημασίας για να αποδειχθεί η ακριβής επίπτωση του καρκίνου με το μήκος των τελομερών του αίματος σε αυτή την ομάδα ασθενών.

Προηγούμενη αποδείξεις υποστηρίζουν την υπόθεση ότι μακριά τελομερή μπορούσε αυξάνουν τον κίνδυνο καρκίνου: πρώτον, μακριά τελομερή μπορεί να καθυστερήσει κυτταρική γήρανση και την απόπτωση, αυξάνοντας την πιθανότητα ότι οι γενετικές ανωμαλίες θα συσσωρεύονται [5], [20]? δεύτερον, ένα υποσύνολο των όγκων παχέος εντέρου έχει πλέον τελομερή από το γειτονικό μη-όγκου βλεννογόνο του παχέος εντέρου [21]. Τελομερών αξιολόγηση μήκος σε όγκους FCRC-X θα παράσχει πρόσθετη διορατικότητα αν MMR-καλά κληρονομική όγκων, επίσης, έχουν επιμηκυνθεί τελομερή. Ομοίως, γνωρίζοντας τα επίπεδα έκφρασης της τελομεράσης ή ενζυματικής δραστικότητας σε δείγματα περιφερικού αίματος και του όγκου θα μπορούσε να βοηθήσει το σχεδιασμό ειδικών θεραπευτικών ή /και προληπτικών προσεγγίσεων για ασθενείς FCRC-X στο μέλλον [22].

Τα ευρήματά μας , μαζί με εκείνες που παρατηρούνται σε μεγάλο μέρος του πληθυσμού με βάση σειρά CRC [14], [15], δείχνουν ότι πλέον τελομερή είναι ένας παράγοντας κινδύνου για κληρονομικές και σποραδικές MMR-καλά CRC. Μετά από αυτή την παρατήρηση, είναι εύλογο να υποθέσουμε ότι πλέον τελομερή ενεργεί επίσης ως τροποποιητές της ηλικίας έναρξης της νόσου του καρκίνου ή /και πολυποδίαση σε άλλες MMR-καλά σύνδρομα CRC.

Εν κατακλείδι, σε αντίθεση με τις παρατηρήσεις για την LS, αλλά σύμφωνα με τα αποτελέσματα των μεγάλων CRC προοπτικές μελέτες, οι επιμήκεις τελομερή συνδέονται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου στο Άμστερνταμ-θετικά MMR-καλά κληρονομικά μη πολυποδίαση CRC.