Αφηρημένο

Αυτή η μελέτη αξιολόγησε τα ανοσοτροποποιητικά αποτελέσματα σε προηγούμενη θεραπεία

KRAS

ασθενείς μεταλλαγμένου μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου συμμετέχουν σε μια πολυκεντρική φάσης ΙΙ, ανοικτή κλινική δοκιμή που λαμβάνουν λεναλιδομίδη μόνος ή λεναλιδομίδη συν cetuximab. Τα κύρια ευρήματα δείχνουν τις ιδιότητες των κυττάρων Τ ανοσοδιεγερτικό λεναλιδομίδης καθώς το φάρμακο προκάλεσε μία μείωση στο ποσοστό CD45RA

+ αθώα Τ κύτταρα 3 φορές ενώ αυξάνεται το ποσοστό HLA-DR

+ ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ και το ποσοστό συνολικής CD45RO

+ CD8

+ μνήμης Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, 2.6- και 2,1 φορές αντίστοιχα (p & lt? 0,0001). Επιπλέον, η λεναλιδομίδη μείωσε το ποσοστό των κυκλοφορούντων CD19

+ Β κυττάρων 2.6 φορές (ρ & lt? 0,0001). Λεναλιδομίδη αυξημένη μια μέτρια, αλλά σημαντική, μεταβολή 1,4 φορές του ποσοστού των κυκλοφορούντων φυσικών κυττάρων δολοφόνων. Τα ευρήματά μας υποδεικνύουν ότι η λεναλιδομίδη ενεργοποιεί σημαντικά Τ κύτταρα, που υποδηλώνουν ενός ανοσοθεραπευτικού ρόλο για αυτό το φάρμακο στις ρυθμίσεις της θεραπείας συντήρησης και την ασυλία του όγκου. Επιπλέον, αναφέρθηκε για πρώτη φορά είναι η επίδραση της λεναλιδομίδης σε συνδυασμό με cetuximab στη λειτουργία των Τ κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των αυξήσεων στα κυκλοφορούντα αφελή και κεντρική μνήμη Τ κύτταρα. Εν ολίγοις, η λεναλιδομίδη και cetuximab έχουν σημαντικές επιπτώσεις στα κυκλοφορούντα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος σε ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνωμα

Δίκη ΕΓΓΡΑΦΕΣ

ClinicalTrials.gov NCT01032291

Παράθεση:. Γκάντι AK, Shi Τ , Λι Μ, Jungnelius U, Romano Α, Tabernero J, et al. (2013) ανοσορρυθμιστικά αποτελέσματα σε μια μελέτη φάσης ΙΙ του λεναλιδομίδη συνδυασμό με cetuximab σε Πυρίμαχα

KRAS

μεταλλαγμένου μεταστατικό ορθοκολικό καρκίνο ασθενείς. PLoS ONE 8 (11): e80437. doi: 10.1371 /journal.pone.0080437

Επιμέλεια: Εβρέν Αγοραστής, του Ινστιτούτου Καρολίνσκα, στη Σουηδία

Ελήφθη: 29 του Γενάρη του 2013? Δεκτές: 7, Οκτ 2013? Δημοσιεύθηκε: 11 Νοεμβρίου 2013

Copyright: © 2013 Gandhi et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς θα ήθελα να ευχαριστήσω τον Robert Beck για τον συντονισμό των μεταφορών και ανάλυση δεδομένων. Ιατρικές υπηρεσίες συντακτική δόθηκαν από Kim Grootscholten, MSc, των Excerpta Medica BV, που χρηματοδοτείται από Celgene Corporation. Salvatore Σιένα υποστηρίζεται από Oncologia Ca ‘Granda Onlus (OCGO) Fondazione. Οι συγγραφείς είναι πλήρως υπεύθυνος για το περιεχόμενο και συντακτικές αποφάσεις για αυτό το χειρόγραφο. Celgene Corporation χρηματοδοτούνται αυτή τη μελέτη και ήταν εξ ολοκλήρου υπεύθυνος για το σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή δεδομένων και την ανάλυση και την απόφαση να δημοσιεύσει

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Anita Γκάντι, Τάο Shi, Mingyu Λι, Ulf Jungnelius, Alfredo Romano, Peter Schafer, και Rajesh Chopra είναι υπάλληλοι της Celgene Corporation, του οποίου η εταιρεία που χρηματοδοτούνται αυτή τη μελέτη. Salvatore Σιένα είναι μέλος των συμβουλευτικών επιτροπών για την Sanofi-Aventis, η AstraZeneca, Roche, Genentech, Celgene, Genomic Health, Bayer, και Amgen. Josep Tabernero έχει συμμετάσχει σε συμβουλευτικά συμβούλια για την Amgen, Celgene, Genentech, η Merck Serono-, Novartis, Roche, Sanofi-Aventis, και Symphogen. Λεναλιδομίδη (Revlimid®) είναι ένα εμπόριο προϊόν Celgene. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Η λεναλιδομίδη ανοσοτροποποιητική φάρμακο είναι ένας από του στόματος δραστικός παράγοντας με σημαντική δραστηριότητα σε μια σειρά αιματολογικών διαταραχές, όπως μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα (MDS), πολλαπλό μυέλωμα (ΜΜ), και μη-Hodgkin λέμφωμα (NHL).

η λεναλιδομίδη έχει λάβει έγκριση αμερικανική Υπηρεσία Τροφίμων και Φαρμάκων για τη θεραπεία της ΜΜ σε ασθενείς που έχουν λάβει τουλάχιστον μία προηγούμενη θεραπεία, και για τη θεραπεία της εξαρτώνται από μετάγγιση αναιμία σε ασθενείς με τα Διεθνή Προγνωστικοί Scoring System που ορίζονται από μικρής ή MDS Intermediate-1-κινδύνου με del (5q) κυτταρογενετική ανωμαλία, με ή χωρίς περαιτέρω κυτταρογενετικές ανωμαλίες. Ο μοριακός στόχος της λεναλιδομίδη είναι η πρωτεΐνη cereblon (ΧΒΡΠ). CRBN είναι μια πανταχού εκφραζόμενη πρωτεΐνη και μέλος του δακτυλίου cullin λιγάση 4 ουβικιτίνης συγκρότημα λιγάση (CRL4) Ε3, και αναγνωρίστηκε ως η κύρια τερατογόνο στόχο της θαλιδομίδης [1]. CRBN μεσολαβεί τόσο τις αντιπολλαπλασιαστικές δραστηριότητες της λεναλιδομίδης σε κύτταρα μυελώματος και την ενεργοποίηση των Τ κυττάρων [2], [3]. Οι ανοσοτροποποιητικές επιδράσεις της σειράς λεναλιδομίδη σε διάφορους τύπους κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων τόσο λεμφοειδείς και μυελοειδείς γραμμώσεις. Ειδικότερα,

in vitro δεδομένα δείχνουν

λεναλιδομίδη έχει δραστικότητα στα Τ κύτταρα, Τ ρυθμιστικά κύτταρα (Tregs), Β κύτταρα, μονοκύτταρα, φυσικά φονικά (ΝΚ) κύτταρα Τ και κύτταρα ΝΚ.

Σε αντι-CD3 διεγερμένα κύτταρα Τ, η λεναλιδομίδη διεγείρει τον πολλαπλασιασμό των Τ κυττάρων, καθώς και την παραγωγή της ιντερλευκίνης (IL) -2, IL-12, και η ιντερφερόνη γάμμα [4], [5]. Επιπλέον, η λεναλιδομίδη έχει δειχθεί ότι αναστέλλει τον πολλαπλασιασμό Tregs και λειτουργία καταστολέα

in vitro

[6]. Σε προχωρημένο ασθενών με συμπαγείς όγκους που έλαβαν θεραπεία με λεναλιδομίδη, αφελείς CD4

+ βοηθητικά και CD8

+ κυτταροτοξικά Τ κύτταρα μειώθηκε, ενώ μνήμης CD4

+ βοηθητικά Τ κύτταρα μνήμης και CD8

+ κυτταροτοξικά κύτταρα μνήμης αυξήθηκε [7 ]. Οι προηγούμενες μελέτες του ανοσοτροποποιητική δράση της λεναλιδομίδη έχουν αναληφθεί σε αιματολογικές κακοήθειες, όπου ανοσολογικές παράμετροι μπορεί να συγχέεται με τη νόσο. Ωστόσο, υπάρχουν περιορισμένα στοιχεία που περιγράφουν τη λειτουργία ανοσοδιαμορφωτική λεναλιδομίδη σε συμπαγείς όγκους.

Σε μια κλινική δοκιμή με στόχο να αξιολογήσει την αποτελεσματικότητα και την ασφάλεια της θεραπείας συνδυασμού με λεναλιδομίδη και cetuximab σε

KRAS

(v -Ki-Ras2 Kirsten σαρκώματος αρουραίου ιικό ογκογονίδιο ομόλογο) ασθενείς μεταλλαγμένου μεταστατικό ορθοκολικό καρκίνο, αξιολογήσαμε 25 διαφορετικές υποπληθυσμών CD45

+ ανοσοκύτταρα (Τ κύτταρα, Β κύτταρα και κύτταρα ΝΚ). Αυτή ήταν μια φάση ΙΙ πολυκεντρική, ανοιχτή δοκιμή περιλαμβάνει μια φάση μολύβδου στον τομέα της ασφάλειας (φάση ΙΙα) για να προσδιοριστεί η μέγιστη ανεκτή δόση, και μια τυχαιοποιημένη απόδειξη της φάσης έννοιας (φάση IIb) για να καθοριστεί το ποσοστό ανταπόκρισης των λεναλιδομίδη και cetuximab συνδυασμό θεραπεία. Φάση της θεραπείας ΙΙα αποτελείται από του στόματος λεναλιδομίδη (αρχική δόση 25 mg /ημέρα) και ενδοφλέβια cetuximab (400 mg /m

2 ακολουθούμενη από εβδομαδιαίες 250 mg /m

2) σε κύκλους των 28 ημερών. Στη φάση IIb ασθενείς τυχαιοποιήθηκαν είτε στην ΙΙα πρόγραμμα θεραπείας φάση της θεραπείας συνδυασμού με λεναλιδομίδη συν cetuximab ή λεναλιδομίδη 25 mg /ημέρα ως μονοθεραπεία. Ο συνδυασμός της με λεναλιδομίδη και cetuximab φαινόταν να είναι καλά ανεκτή, αλλά δεν είχε κλινικά σημαντική δραστηριότητα στην

KRAS

ασθενείς μεταλλαγμένου μεταστατικό καρκίνο του παχέος εντέρου (12).

Υλικά και Μέθοδοι

οι ασθενείς, τα υλικά και τις μεθόδους

Αυτή η φάση II, δοκιμή πολυκεντρική, ανοιχτή διεξήχθη σύμφωνα με τις ηθικές αρχές της Διακήρυξης του Ελσίνκι και της ορθής κλινικής πρακτικής, και σύμφωνα με τη Διεθνή Διάσκεψη για την εναρμόνιση των Τεχνικές Απαιτήσεις για την καταχώριση φαρμακευτικών προϊόντων για ανθρώπινη χρήση. Το πρωτόκολλο της μελέτης, το προτεινόμενο έντυπο συγκατάθεσης, καθώς και άλλες πληροφορίες για θέματα, εγκρίθηκαν από το Comitato Etico-Scientifico, Ospedale Niguarda Ca ‘Granda, Μιλάνο, Ιταλία και δεόντως συσταθεί Institutional Review Boards /Ανεξάρτητη Ηθική Επιτροπές όλων των συμμετεχόντων ιδρυμάτων (Ιατρική Ηθική Επιτροπή του UZ KULeuven, Leuven, Βέλγιο? Clinical Research επιτροπή δεοντολογίας του Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου Vall d’Hebron της Βαρκελώνης, στην Ισπανία? επιστημονική Επιτροπή Δεοντολογίας του Ospedale Niguarda Ca ‘Granda, Μιλάνο, Ιταλία? Επιτροπή Δεοντολογίας Azienda Ospedaliero-Universitaria San Martino, Γένοβα, Ιταλία? Δεοντολογίας Επιτροπής Azienda Ospedaliero-Universitaria Ospedali Riuniti Umberto I – GM Lancisi – Γ Salesi di Ancona, Torrette, Ιταλία? Περιφερειακής κριτική Ηθική Διοικητικού συμβουλίου της Στοκχόλμης, Ινστιτούτο Καρολίνσκα, στη Σουηδία? και Flinders Κλινική Επιτροπή Ερευνητικής Δεοντολογίας, Νότια Australia, Australia). Η μελέτη αυτή πρωτοκολλήθηκε στη Clinicaltrials.gov με αναγνωριστικό NCT01032291. Το πρωτόκολλο για αυτή τη δοκιμή και την υποστήριξη κατάλογος CONSORT είναι διαθέσιμα ως υποστηρικτικές πληροφορίες? βλέπε Λίστα ελέγχου S1 και το πρωτόκολλο S1.

Γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση λήφθηκε από όλους τους συμμετέχοντες που εμπλέκονται στη μελέτη. Η μελέτη αποτελούνταν από μια φάση μολύβδου στον τομέα της ασφάλειας (φάση ΙΙα), στο οποίο ο πρωταρχικός στόχος ήταν να καθοριστεί η μέγιστη ανεκτή δόση των λεναλιδομίδη σε συνδυασμό με cetuximab σε άτομα με

KRAS

μεταλλαγμένου mCRC, και μια απόδειξη της έννοιας φάσης (POC) (φάση IIb), στον οποίο ο πρωταρχικός στόχος ήταν να καθοριστεί το ποσοστό ανταπόκρισης σε αυτά τα θέματα σύμφωνα με τα κριτήρια απόκρισης αξιολόγησης σε συμπαγείς όγκους (RECIST) έκδοση 1.1. Ένα σύνολο 48 50 άτομα που έλαβαν το φάρμακο αξιολογήθηκαν ως προς την ανάλυση του ανοσοποιητικού κυτταρομετρίας ροής.

Η συλλογή των δειγμάτων

Αίμα συλλέχθηκε κατά την έναρξη (κύκλος 1 ημέρα 1 [C1D1]), τον κύκλο 2 ημέρες 1 (C2D1) και τον κύκλο 3 ημέρες 1 (C3D1) είτε σε 5 ml Λεβάντα /γυάλινους σωλήνες Μαύρο Cyto-Chex® BCT (Streck Καινοτομίες, Omaha, NE, USA) ή 2,6 ml κίτρινο σωλήνες δεξτρόζη κορυφή κιτρικό οξύ ανάλογα με όπου το δείγμα παρελήφθη και διατηρήθηκε σε θερμοκρασία περιβάλλοντος μέχρι κυτταρομετρία ροής πραγματοποιήθηκε σε ICON Κεντρικά Εργαστήρια (Farmingdale, ΝΥ, USA) εντός 72 ωρών από τη συλλογή του δείγματος. αναλύσεις σταθερότητας έγιναν κατά τη διάρκεια της επικύρωσης της ανάλυσης και υποστηρίζει έως και 72 ώρες χρόνο επεξεργασίας από τη συλλογή του δείγματος για ανάλυση. Αντισώματα (αντι-CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, CD45, CD45RA, CD45RO, CD62L, CD107a, CD127, γρανζύμου Β, και HLA-DR? BD Biosciences, San Jose, CA, USA) και 100 μΙ ασθενής πλήρους αίματος μεταφέρθηκαν σε σωλήνες 12 χ 75 mm δοκιμή (BD Falcon ™? BD Biosciences) ακολουθούμενο από ήπια περιδίνηση και επώαση 15 λεπτών σε θερμοκρασία δωματίου. Σε αυτό το διάλυμα λύσης BD Pharm Lyse ™ (BD Biosciences) προστέθηκε για 10 λεπτά. Ο σωλήνας φυγοκεντρήθηκε, πλύθηκε σε ΡΒΑ (PBS του Dulbecco /0,2%) και το ίζημα επαναιωρήθηκε σε ΡΒΑ πριν από την ανάλυση του Β, υποσυνόλων Τ και ΝΚ κυττάρων σε μια ροή FACSCanto ™ II κυτταρόμετρο (BD Biosciences). Για τη χρώση ενδοκυτταρικής πρωτεΐνης, ένα επιπρόσθετο στάδιο διαπερατότητας προστέθηκε μετά την πρώτη προσθήκη του ΡΒΑ με διάλυμα στερέωσης διαπερατοποίηση εργασίας (eBioscience, Inc., San Diego, CA, USA), που ακολουθείται από δύο πλύσεις σε ρυθμιστικό διάλυμα διαπερατότητας (eBioscience, Inc.) , επώαση με ενδοκυτταρικά αντισώματα, και μια άλλη πλύση ρυθμιστικού διαπερατότητας. Κατάλληλοι έλεγχοι αποζημίωση συμπεριλήφθηκαν σε κάθε ανάλυση. Κάθε πληθυσμός κυττάρων υποσύνολο αναφέρθηκε ως απόλυτη τιμή ανά 1 mm

3 του αίματος ή ως ποσοστό των CD45 + κυττάρων

.

Στατιστικές αναλύσεις

Για την αξιολόγηση των μεταβολών στο διαφορετική ανοσολογική κυτταρικών πληθυσμών στο C2D1 και C3D1 έναντι βασικής γραμμής, κάθε μία από τις μετρήσεις κυτταρομετρίας 50 ροής (δηλαδή ένα απόλυτο αριθμό των κυττάρων και μία μέτρηση ποσοστό για κάθε μία από τις 25 υποπληθυσμών CD45 + κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος) έχουν πρώτα log2 μετασχηματίζονται και ένα γραμμικό μοντέλο στη συνέχεια τοποθετούνται με αριθμό κύκλου (δηλ C1D1, C2D1, και C3D1) ως ανεξάρτητη μεταβλητή 3 επιπέδων και των ασθενών ως μεταβλητή μπλοκαρίσματος χρησιμοποιώντας το πακέτο λογισμικού R LIMMA [8]. Μετριάστηκε t-στατιστικές και οι αντίστοιχες τιμές ρ για τις δύο αντιθέσεις των ενδιαφερομένων: C2D1 εναντίον C1D1 και C3D1 εναντίον C1D1 υπολογίστηκαν με χρήση της εμπειρικής μεθόδου Bayes εφαρμόζεται σε LIMMA. Αυτή η εμπειρική βήμα Bayes διεξήχθη ξεχωριστά για απόλυτο αριθμό των κυττάρων και το ποσοστό των μετρήσεων λόγω των πολύ διαφορετικές κλίμακες και τις παραλλαγές τους. Για καθεμία από τις δύο αντιθέσεις, ρ-τιμές αργότερα συνδυάζονται για απόλυτες μετρήσεις κυττάρων και μετρήσεις ποσοστό και ρυθμίστηκαν για πολλαπλές συγκρίσεις σύμφωνα με τη μέθοδο Benjamini-Hochberg [9]. Προσαρμοσμένο τιμές p ≤ 0,05 θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές, το οποίο είναι ισοδύναμο με τον έλεγχο της ψευδούς ποσοστό ανακάλυψη στο 5%. Πραγματοποιήσαμε παραπάνω αναλύει χωριστά σε τρεις διαφορετικούς πληθυσμούς ασθενών, δηλαδή 20 ασθενείς από το βραχίονα λεναλιδομίδη, 28 ασθενείς από τη λεναλιδομίδη συν cetuximab βραχίονα, ή 48 ασθενείς από τα δύο σκέλη συνδυάζονται (κύριες αναλύσεις). Έχουμε, επίσης, πραγματοποίησε τις αναλύσεις των τριών πληθυσμών, αλλά με τους 19 ασθενείς που ήταν σε μια ταυτόχρονη φαρμακευτική αγωγή που κωδικοποιούνται σε μια ανατομική θεραπευτική χημική κατηγορία που υποδηλώνει μια συστημική ή τοπική κορτικοστεροειδή αφαιρεθεί (αναλύσεις ευαισθησίας, τα αποτελέσματα δεν φαίνονται). Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του λογισμικού R [10].

Αποτελέσματα

Ένα σύνολο 48 50 άτομα που έλαβαν το φάρμακο της μελέτης αξιολογήθηκαν ως προς την ανάλυση ανοσοποιητικών κυττάρων περιφερικού αίματος. Το σχήμα της μελέτης παρουσιάζεται στην Εικόνα 1 και τα χαρακτηριστικά βασικής γραμμής του ασθενούς συνοψίζονται στον Πίνακα 1. Υπήρχαν 20 άτομα στο σκέλος λεναλιδομίδης και 28 στην λεναλιδομίδης συν cetuximab βραχίονα. Η βιοδεικτών και διασυνδέσεων αναλύσεις και ο αριθμός ασθενών που συμπεριελήφθησαν σε κάθε ανάλυση παρατίθεται στον Πίνακα S1. Ο απόλυτος αριθμός και το ποσοστό των 25 διαφορετικών υποομάδων Τ, κύτταρα Β και ΝΚ αναλύθηκαν σε αυτούς τους 48 ασθενείς και οι κυτταρικές φαινότυποι που παρατίθενται στον Πίνακα 2. πληθυσμούς κυττάρων με τουλάχιστον μια ρ-τιμή ≤ 0,05 στις συγκρίσεις των C2D1 και C3D1 έναντι C1D1 στο σκέλος μονοθεραπείας με λεναλιδομίδη, η λεναλιδομίδη συν cetuximab βραχίονα, και σε όλους τους ασθενείς που παρουσιάζονται στους πίνακες 3, 4, και 5, αντίστοιχα.

τερματίστηκε Μελέτη πριν από το τμήμα επέκτασης της φάσης IIb. * Ένας ασθενής που τυχαιοποιήθηκαν στην ομάδα της μονοθεραπείας με λεναλιδομίδη, αλλά διακόπηκαν πριν πάρετε οποιοδήποτε φάρμακο μελέτη και, ως εκ τούτου, εξαιρούνται από τις αναλύσεις. ΑΕ, ανεπιθύμητο συμβάν? ITT, με σκοπό την θεραπεία? PD, προοδευτική ασθένεια.

Η

Η

Η

Τα κύρια ευρήματα περιλαμβάνουν τέσσερις ανοσοποιητικό κυτταρικούς πληθυσμούς με ιδιαίτερα σημαντική (p ≤ 0,0001) μεταβολές από C1D1 (βασική ) να C2D1 και να C3D1 τόσο στον απόλυτο αριθμό και το ποσοστό των κυττάρων που μετράται στα δύο σκέλη της θεραπείας. Οι αλλαγές σε αυτούς τους πληθυσμούς που φαίνεται στο Σχήμα 2 και περιλαμβάνουν μια αύξηση του συνόλου των Τ μνήμης κυτταροτοξικά κύτταρα και ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ, και μία μείωση σε Β κύτταρα και συνολική αφελή Τ βοηθητικών κυττάρων. Οι αλλαγές στα υπόλοιπα υποσύνολα κυττάρων σε όλα τα θέματα που φαίνεται στο Σχήμα S1.

σημαντική (p ≤ 0,0001) αλλαγές στο ποσοστό και απόλυτο αριθμό σε τέσσερις υποσυνόλων ανοσοκυττάρων από τον κύκλο 1 ημέρα 1 (C1D1) σε κύκλο 2 1η ημέρα (C2D1) ή κύκλος 3 την ημέρα 1 (C3D1) σε όλα τα μαθήματα. Το άνω άκρο του πλαισίου υποδηλώνει τον 75ο εκατοστημόριο, ενώ το κάτω άκρο δηλώνει το 25ο εκατοστημόριο. Η γραμμή μέσα σε κάθε κουτί είναι το μεσαίο. Οι γραμμές εκτείνονται προς τις μέγιστες και ελάχιστες τιμές εξαιρουμένων των ακραίων τιμών. Οι γκρίζες γραμμές δηλώνουν ατομικό υποκείμενο των δεδομένων. ABS, απόλυτη.

Η

Ανοσορρυθμιστικά αποτελέσματα σε ασθενείς που λαμβάνουν λεναλιδομίδη μόνο

Στο λεναλιδομίδη μόνο βραχίονα (n = 20), 12 πληθυσμούς κυττάρων Τ, συνολική κύτταρα ΝΚ, συνολικού Β κύτταρα, και η συνολική λεμφοκυττάρων πληθυσμούς (είτε ποσοστό ή απόλυτος αριθμός) μεταβλήθηκαν σημαντικά (p ≤ 0,05) είτε σε C2D1 ή C3D1 έναντι C1D1, ή και τα δύο. Αυτά τα Τ κυτταρικών πληθυσμών, ξεκινώντας από το πιο σημαντικό, να περιλαμβάνει σύνολο αφελή Τ βοηθητικά κύτταρα, ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ, τα ενεργοποιημένα κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, τα ρυθμιστικά κύτταρα Τ, συνολική αφελείς κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, ενεργά Τ βοηθητικά κύτταρα, κυτταροτοξικά κύτταρα τελεστές Τ, συνολική μνήμη κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, Τ μνήμης τελεστών κυτταροτοξικά κύτταρα, Τ βοηθητικά κύτταρα, κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, και συνολικά Τ κύτταρα. Απόλυτη και ποσοστιαία Β κύτταρα μειώθηκε 1.78- σε 3,41 φορές. Το ποσοστό των ΝΚ κυττάρων αυξήθηκε σημαντικά σε C2D1 κατά 1,4 φορές σε ολόκληρη άτομα που λαμβάνουν μόνο λεναλιδομίδη. Οι απόλυτοι λεμφοκύτταρα μειώθηκαν σημαντικά 1,36 φορές σε ολόκληρη άτομα που λαμβάνουν λεναλιδομίδη μόνο (Πίνακας 3). Αξίζει να σημειωθεί ότι, σε αντίθεση με

in vitro

δεδομένα που δείχνουν λεναλιδομίδη αναστέλλει Tregs επέκταση [11], η λεναλιδομίδη αυξηθεί σημαντικά το ποσοστό των Tregs από 4 έως 12 φορές.

Ανοσορρυθμιστικά αποτελέσματα σε ασθενείς που λαμβάνουν λεναλιδομίδη συν cetuximab

στο λεναλιδομίδη και cetuximab βραχίονα (n = 28), 15 πληθυσμούς κυττάρων Τ, 1 πληθυσμού των ΝΚ κυττάρων, το σύνολο των Β κυττάρων, και το σύνολο των λεμφοκυττάρων πληθυσμών (είτε ποσοστό ή απόλυτο αριθμό) ήταν σημαντικά αλλάξει ( p ≤ 0,05) είτε σε C2D1 ή C3D1 έναντι C1D1, ή και τα δύο. Αυτά τα Τ κυτταρικών πληθυσμών, ξεκινώντας με το πιο σημαντικό, να περιλαμβάνουν ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ, τα συνολικά κυτταροτοξικά κύτταρα μνήμης Τ, το σύνολο των αθώων Τ βοηθητικά κύτταρα, τα συνολικά αθώα Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, κυτταροτοξικά κύτταρα Τ μνήμης τελεστών, ενεργοποιημένα Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, ενεργά Τ κυτταροτοξικά κύτταρα , κεντρική κυτταροτοξικά κύτταρα μνήμης Τ, ενεργά Τ βοηθητικά κύτταρα, μνήμης τελεστών Τ βοηθητικών κυττάρων, η συνολική μνήμη βοηθητικά κύτταρα Τ, κεντρική μνήμη βοηθητικά κύτταρα Τ, αφελείς κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, και αφελή Τ βοηθητικών κυττάρων. Απόλυτη και ποσοστιαία Β κύτταρα μειώθηκε 2.01- σε 3,6 φορές. Το ποσοστό του γρανζύμου Β

+ ΝΚ κυττάρων αυξήθηκε σημαντικά σε C2D1 κατά 1,15 φορές και σε C3D1 κατά 1,25 φορές σε άτομα που λαμβάνουν λεναλιδομίδη συν cetuximab. Το ποσοστό των λεμφοκυττάρων αυξήθηκε σημαντικά 1.11- σε 1,45 φορές σε υποκείμενα που λαμβάνουν λεναλιδομίδη συν cetuximab (Πίνακας 4). Από αυτές, οι ακόλουθες επτά υποπληθυσμούς σημαντικά διαφοροποιείται σε λεναλιδομίδης συν cetuximab βραχίονα, αλλά όχι στο σκέλος λεναλιδομίδης μόνο: κεντρική κυτταροτοξικά κύτταρα μνήμης Τ, Τ μνήμης τελεστών βοηθητικά κύτταρα, συνολική μνήμη βοηθητικά κύτταρα Τ, κεντρική μνήμη βοηθητικά κύτταρα Τ, αφελείς Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, αφελή Τ βοηθητικά κύτταρα, και γράνζυμο Β

+ ΝΚ κυττάρων. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η προσθήκη του cetuximab με λεναλιδομίδη δεν οδήγησε σε αύξηση των Tregs, όπως παρατηρήθηκε με λεναλιδομίδη και μόνο. ​​

Ανοσορρυθμιστικά επιπτώσεις σε όλα τα μαθήματα

Σε όλες τις 48 άτομα, 16 πληθυσμούς κυττάρων Τ, 1 πληθυσμοί κυττάρων ΝΚ, σύνολο Β κύτταρα, και οι συνολικές λεμφοκύτταρα (είτε ποσοστό ή απόλυτος αριθμός) ήταν σημαντικά διαμορφωμένο (p ≤ 0,05) είτε σε C2D1 ή C3D1 έναντι C1D1, ή και τα δύο. Αυτά τα Τ κυτταρικών πληθυσμών, ξεκινώντας με το πιο σημαντικό, να περιλαμβάνουν ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ, το σύνολο των αθώων Τ βοηθητικά κύτταρα, τα συνολικά κυτταροτοξικά κύτταρα μνήμης Τ, συνολική αφελείς κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, τα ενεργοποιημένα κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, Τ μνήμης τελεστών κυτταροτοξικά κύτταρα, ενεργά Τ βοηθητικά κύτταρα , δραστικά Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, κεντρική μνήμη Τ κυτταροτοξικά κύτταρα, Τ μνήμης τελεστών βοηθητικά κύτταρα, ρυθμιστικά κύτταρα Τ, κεντρική μνήμη βοηθητικά κύτταρα Τ, αφελή κύτταρα Τ κυτταροτοξικά, συνολική μνήμη Τ βοηθητικά κύτταρα, κυτταροτοξικά κύτταρα Τ, και αφελή Τ βοηθητικών κυττάρων. Απόλυτη και ποσοστιαία Β κύτταρα μειώθηκε μεταξύ 2.35- και 3,05 φορές. Το ποσοστό του γρανζύμου Β

+ ΝΚ κυττάρων αυξήθηκε σημαντικά 1,21 φορές σε C3D1, ενώ το ποσοστό των λεμφοκυττάρων αυξήθηκε 1,33 φορές σε C3D1 σε όλα τα θέματα (Πίνακας 5).

επιδράσεις της ταυτόχρονης ανοσοκατασταλτικών παραγόντων

Συνολικά, 19 από τους 48 ασθενείς που ταυτοποιήθηκαν ως είτε καθημερινά ή διαλείπουσα, η ταυτόχρονη συστηματική ή τοπικά κορτικοστεροειδή. Από αυτούς τους 19 ασθενείς σε ταυτόχρονη κορτικοστεροειδή για διάφορες χρονικές περιόδους, 5 έλαβαν δεξαμεθαζόνη (που κυμαίνονται από 8 mg ημερησίως έως 10 mg εβδομαδιαίως), 10 έλαβαν πρεδνιζόνη (που κυμαίνεται από 25 mg δύο φορές ημερησίως για 4 mg ημερησίως), 5 έλαβαν βηταμεθαζόνη (που κυμαίνονται από 4 mg ημερησίως σε 4 mg ανάλογα με τις ανάγκες), και 5 έλαβαν ultrapotent τοπικά κορτικοστεροειδή. Για να αποκλειστεί οποιαδήποτε πιθανή επίδραση αυτών των ανοσοκατασταλτικών κορτικοστεροειδή θεραπείες για την έκφραση οποιασδήποτε από τις κυτταρικών πληθυσμών, μια ανάλυση ευαισθησίας έγινε με εξαίρεση τους ασθενείς σχετικά με την ταυτόχρονη ανοσοκατασταλτικών φαρμάκων και η ανάλυση επαναδιενεργούνται. Σε αναλύσεις ευαισθησίας, οι ίδιες τέσσερις κυτταρικούς πληθυσμούς έδειξαν με συνέπεια σημαντική (p ≤ 0,0001) μεταβολές από C1D1 (βάσης) μέχρι την C2D1 ή C3D1 και στις δύο μετρήσεις που αξιολογήθηκαν (απόλυτος αριθμός και ποσοστό) σηματοδοτώντας τα αποτελέσματα αυτά δεν οφείλονται σε στεροειδή χρήση. Στην πραγματικότητα, ασθενείς σε ανοσοκατασταλτική συγχορηγούμενα φάρμακα είχαν παρόμοια ανοσολογική δράση (ενεργοποίηση των Τ κυττάρων και η αναστολή των κυττάρων Β), και ένα μεγαλύτερο αριθμό υποσυνόλων ανοσοκυττάρων διαμορφώνονται σε σύγκριση με ασθενείς που δεν ακολουθούσαν ταυτόχρονη θεραπείες. Επιπλέον, η ανάλυση της ανοσολογικής αλλαγές στην ταυτόχρονη χρήστες στεροειδών έναντι nonusers διεξήχθη και τα αποτελέσματα ήταν συγκρίσιμα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συσχέτιση ανοσορρυθμιστικά αποτελέσματα με την κλινική ανταπόκριση

Όπως αναφέρθηκε από Siena et al. [12], 8 ασθενείς εντάχθηκαν στη φάση ΙΙα μέγιστο μέρος ανεκτή δόση της μελέτης και 43 ασθενείς εντάχθηκαν στο τμήμα ΙΙβ POC φάση. Καλύτερη ανταπόκριση ήταν σταθερή νόσο (SD) σε 9 ασθενείς και μελέτη τερματίστηκε πρόωρα την εγγραφή λόγω έλλειψης αποτελεσματικότητας σε οποιοδήποτε από τα σκέλη της θεραπείας και της αποτυχίας να επιτευχθεί ο στόχος προγραμματισμένη απόκριση. Δεν υπήρχαν σημαντικές (p ≤ 0,05) συσχετίσεις ανάμεσα στις αλλαγές από την αρχική τιμή (C1D1) για να C2D1 ή C3D1 τυχόν ανοσοποιητικού κυτταρικού πληθυσμού στη συνολική επιβίωση (OS), ανεξάρτητα από το σκέλος θεραπείας (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Συζήτηση

η λεναλιδομίδη έχει εγκριθεί για χρήση τόσο σε ΜΜ και MDS, και έχει αναφερθεί κλινική δραστικότητα σε χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία (CLL) και NHL [13], [14]. Ένα μεγάλο μέρος της δραστηριότητας της λεναλιδομίδης σε αυτές τις αιματολογικές κακοήθειες έχει αποδοθεί σε κυτταρικό αυτόνομες επιδράσεις θανάτωσης. Σε μία κλινική μελέτη που αναφέρθηκαν από τη Σιένα et al (12), με στόχο να αξιολογηθεί η αποτελεσματικότητα και η ασφάλεια της θεραπείας συνδυασμού με λεναλιδομίδη και cetuximab σε

KRAS

(v-Ki-Ras2 Kirsten σαρκώματος αρουραίου ιικό ογκογονίδιο ομόλογο) μεταλλαγμένου μεταστατικό ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο, αξιολογήσαμε 25 διαφορετικές υποπληθυσμών CD45

+ ανοσοκύτταρα (Τ κύτταρα, Β κύτταρα και κύτταρα ΝΚ) σε αυτόν τον πληθυσμό ασθενών που δεν έχει συγχητικές αιματολογικές ανωμαλίες. Τα κύρια ευρήματα είναι σημαντικά (p ≤ 0,0001) από την αρχή ως C2D1 και να C3D1 στους ακόλουθους τέσσερις πληθυσμούς λεμφοκυττάρων: τα Β κύτταρα (μειωμένη), ενεργοποιημένα βοηθητικά κύτταρα Τ (αυξημένη), η συνολική μνήμη Τ κυτταροτοξικών κυττάρων (αυξημένη), και το συνολικό αφελή Τ βοηθητικά κύτταρα (μειωμένη). Μια πιθανή κλινική σημασία αυτών των ευρημάτων ενοχοποιούν λεναλιδομίδη είναι ένας ενεργοποιητής των Τ κυττάρων που μπορεί να διαδραματίσει έναν ρόλο στην δράση κατά των όγκων του. Επιπλέον, η προς τα κάτω ρύθμιση του αριθμού των κυττάρων Β μπορεί να συνδέεται με τη δραστηριότητά της σε Β κυτταρικές κακοήθειες. Οι επιδράσεις αυτές εντοπίστηκαν και στα δύο σκέλη της θεραπείας. Όπως όλα τα υποκείμενα υποβλήθηκαν σε θεραπεία με λεναλιδομίδη, αυτές οι αλλαγές μπορεί να αποδοθεί στις φαρμακοδυναμικές επιδράσεις της λεναλιδομίδη. Οι αλληλένδετες αναλύσεις έδειξαν ότι οι αλλαγές στους πληθυσμούς κυττάρων (απόλυτος αριθμός ή ποσοστό) δοκιμάστηκαν δεν συσχετίζονται με το χέρι θεραπεία, η ανταπόκριση ανά έκδοση RECIST 1.1 κριτήρια, ή OS. Οι κλινικές απαντήσεις από αυτή τη μελέτη που αναφέρθηκε λεπτομερώς από Siena et al. [12].

Επιπλέον, η λεναλιδομίδη συν cetuximab είχε αξιοσημείωτα αποτελέσματα (μέχρι αυξήσεις 60-φορές) στην κεντρική μνήμη και αφελή κύτταρα Τ υποδηλώνει ότι η ίδια cetuximab μπορεί να παίζει ένα ρόλο στην ενεργοποίηση των Τ κυττάρων και τη λειτουργία. Παρόμοια αποτελέσματα αναφέρθηκαν από Botta et al. [15] σε ένα cetuximab με βάση το σχήμα πολυχημειοθεραπεία σε ασθενείς με προχωρημένη mCRC. Αυτή είναι η πρώτη μελέτη, με τις γνώσεις μας, για να αναφέρετε μια ολοκληρωμένη προφίλ των κυκλοφορούντων υποσυνόλων ανοσοκυττάρων σε ασθενείς που λαμβάνουν λεναλιδομίδη και να αποδεικνύουν του Τ κυττάρου λειτουργία του λεναλιδομίδη και cetuximab ενεργοποίηση.

Οι ασθενείς με mCRC χορηγείται με το rituximab παράγοντα καταστρέφουν Β κυττάρων έχουν δείξει τόσο υποχώρηση των μεταστάσεων και την επίτευξη των SD [16]. Στη μελέτη μας, αν και η πλειοψηφία των ασθενών που έλαβαν θεραπεία με λεναλιδομίδη έδειξαν σημαντικές μειώσεις στα Β κύτταρα, αυτή η φαρμακοδυναμική επίδραση δεν συσχετίζονται με το OS. Ομοίως, ένα ανάλογο που σχετίζονται pomalidomide, έχει αναφερθεί ότι μειώνουν CD19

+ περιφερικού αίματος Β κύτταρα σε ασθενείς με ΠΜ που λαμβάνουν χορήγηση κάθε δεύτερη ημέρα από 1-10 mg [17].

Τα προκλινικά και κλινικά δεδομένα υποδεικνύουν ότι λεναλιδομίδη ενεργοποιεί τα Τ κύτταρα. Bartlett et al. [7] έδειξε ότι σε ασθενείς με προχωρημένους συμπαγείς όγκους, η θεραπεία με λεναλιδομίδη για 4-5 εβδομάδες μειώθηκαν τα ποσοστά των αφελή βοηθητικών και κυτταροτοξικών Τ κυττάρων και αυξημένη τα ποσοστά των βοηθητικών μνήμης και κυτταροτοξικά κύτταρα-δύο από αυτά τα ευρήματα επιβεβαιώθηκαν στην παρούσας μελέτης. Pomalidomide έχει επίσης αναφερθεί ότι αυξάνει περιφερικού αίματος CD3

+ και CD8

+ Τ κυττάρων σε ασθενείς με MM [17]

In vitro

, η λεναλιδομίδη αναστέλλει Tregs.? Ωστόσο, σε αυτή τη μελέτη μια ανοδική τάση (p & lt? 0,05) παρατηρήθηκε σε τόσο απόλυτος αριθμός και το ποσοστό των κυκλοφορούντων Tregs στο περιφερικό αίμα, τόσο C2D1 και C3D1 σε άτομα που λαμβάνουν λεναλιδομίδη και μόνο. Ομοίως, το επίπεδο του κυκλοφορούντος Tregs αυξήθηκε σε ασθενείς με ΠΜ μέσα σε 2 εβδομάδες από την παραλαβή λεναλιδομίδη [18]. Αυτοί οι ασθενείς με ΠΜ παρουσίασαν σημαντική αύξηση σε HLA-DR

+ Τ κύτταρα (και τα δύο CD4

+ και CD8

+ υποσύνολα). Η αύξηση των CD4

+ FOX-Ρ3

+ ρυθμιστικά Τ κύτταρα παρατηρήθηκε μετά από 9 κύκλους (9 μήνες) θεραπείας συντήρησης με λεναλιδομίδη. Ως εκ τούτου, η αύξηση των ρυθμιστικών Τ κυττάρων μπορεί να είναι μια καθυστερημένη ανταπόκριση στην αύξηση του αριθμού ενεργών Τ κυττάρων και τη δραστηριότητα.

Η ενεργοποίηση των ΝΚ κυττάρων με λεναλιδομίδη έχει αποδειχθεί ότι

in vitro από

τόσο αυξημένη ΝΚ παραγωγής κυτοκίνης των κυττάρων, καθώς και σε λειτουργικές μελέτες. Σε ένα περιφερειακό κύτταρο /καρκινικών κυττάρων μοντέλο συν-καλλιέργειας μονοπύρηνα αίματος, Τ κυττάρου συν-διέγερση οδηγεί σε αυξημένη ΝΚ κυτταρική λύση με τη μεσολάβηση διαφόρων κυττάρων όγκου, συμπεριλαμβανομένων προστάτη και του καρκίνου των ωοθηκών κύτταρα [19]. Λεναλιδομίδη ενισχύει ΝΚ κυττάρων και μονοκυττάρων μεσολάβηση εξαρτώμενη από αντίσωμα κυτταρική κυτταροτοξικότητα (ADCC) του rituximab έναντι μιας ποικιλίας κυτταρικών σειρών αιματολογικών

in vitro

, συμπεριλαμβανομένων NHL και CLL Β-[20], καθώς και η ενίσχυση με τη μεσολάβηση κυττάρων ΝΚ λύση των cetuximab και trastuzumab επικαλυμμένα παχέος εντέρου και του καρκίνου του μαστού κύτταρα, αντίστοιχα [21]. Στην παρούσα μελέτη, αν και δεν παρατηρήθηκαν σημαντικές επιδράσεις σε αλλαγές περιφερικά κύτταρα ΝΚ, ένας μη σημαντική αυξητική τάση παρατηρήθηκε και σε απόλυτο αριθμό και το ποσοστό του συνόλου των κυττάρων ΝΚ και ενεργοποιημένα ΝΚ κύτταρα (γρανζύμου Β

+ και NKD

+) μετά από 28 ημέρες χορήγησης σε σχέση με την αρχική τιμή. Αυτά τα δεδομένα δεν αποκλείουν την πιθανότητα ότι η λεναλιδομίδη αυξημένη ΝΚ κυττάρων και ADCC στη θέση του όγκου. Τα δεδομένα μας αναφέρει προηγουμένως ότι η δεξαμεθαζόνη ανταγωνίζεται την διεγερτική ικανότητα της λεναλιδομίδης στις δύο ΝΚ κύτταρα και Τ

in vitro

[22]. Η επίδραση της δεξαμεθαζόνης στην ενεργοποίηση λεναλιδομίδη των κυττάρων ΝΚ σε ασθενείς με ΠΜ δείχνουν ότι, παρόλο που ο αριθμός των κυκλοφορούντων ΝΚ κυττάρων αυξάνεται μετά λεναλιδομίδη και δεξαμεθαζόνη θεραπεία, η κυτταροτοξική ικανότητα των ΝΚ κυττάρων εξασθενεί λόγω δεξαμεθαζόνη επαγόμενη καταστολή της παραγωγής της IL-2 από CD4

+ Τ κύτταρα [23]. Για τον έλεγχο για πιθανές φαρμακοδυναμικές επιδράσεις της ταυτόχρονης χρήσης στεροειδών για τις αλλαγές από την αρχική τιμή για τους πληθυσμούς των

+ κύτταρα CD45 αναλύονται στην παρούσα μελέτη, αναλύσεις ευαισθησίας πραγματοποιήθηκαν για τον αποκλεισμό στοιχεία για τα άτομα που είχαν χρησιμοποιήσει συστηματικά κορτικοστεροειδή ή μια ισχυρή τοπική κορτικοστεροειδή κατά τη διάρκεια της μελέτης. Τα αποτελέσματα της ευαισθησίας αναλύσεις ήταν συνεπή με εκείνα του κύριου ανάλυση, υποδεικνύοντας ότι η αναστολή των Β κυττάρων είναι ένα πραγματικό φαρμακοδυναμική επίδραση της λεναλιδομίδης και αυτό το αποτέλεσμα δεν διαταράσσεται από διαλείπουσα συγχορηγείται ανοσοκατασταλτικές θεραπείες. Οι δόσεις και η συχνότητα της δεξαμεθαζόνης που λαμβάνονται σε αυτή τη μελέτη ήταν ανεπαρκής για να ανταγωνίζονται τα αποτελέσματα των κυττάρων Τ του λεναλιδομίδη, συνεπές με προηγούμενα ευρήματα ότι η δεξαμεθαζόνη χαμηλή δόση επιτρέπει μεγαλύτερη ενεργοποίηση των κυττάρων Τ με λεναλιδομίδη.

Εν κατακλείδι, παρά προκλινικές αποδεικτικά στοιχεία, τα παρόντα κλινικά δεδομένα από τη Σιένα et al (12) υποδηλώνουν ότι η ρυθμιστική δράση των λεναλιδομίδη δεν είναι σε θέση να ξεπεράσει την πρωτογενή αντοχή του

KRAS

μεταλλαγμένου mCRC σε EGFR στοχευμένη αναστολή από cetuximab. Είναι σημαντικό, τα στοιχεία αυτά απεικονίζουν τα ανοσοτροποποιητικά αποτελέσματα της λεναλιδομίδη που βοηθά στην κατανόηση του μηχανισμού του φαρμάκου και τις δυνατότητες εφαρμογής σε άλλους τύπους καρκίνου.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Σχήμα S1.

Αλλαγές στο ποσοστό ή απόλυτο αριθμό στα υπόλοιπα 21 υποσυνόλων ανοσοκυττάρων από τον κύκλο 1 ημέρα 1 (C1D1) σε κύκλο 2 ημέρες 1 (C2D1) ή κύκλος 3 την ημέρα 1 (C3D1) σε όλα τα μαθήματα. Το άνω άκρο του πλαισίου υποδηλώνει τον 75

ου εκατοστημόριο, ενώ το κάτω άκρο δηλώνει το 25

ου εκατοστημόριο. Η γραμμή μέσα σε κάθε κουτί είναι το μεσαίο. Οι γραμμές εκτείνονται προς τις μέγιστες και ελάχιστες τιμές εξαιρουμένων των ακραίων τιμών. Οι γκρίζες γραμμές δηλώνουν ατομικό υποκείμενο των δεδομένων. Σύντμηση: Abs:. Απόλυτος

doi: 10.1371 /journal.pone.0080437.s001

(DOC)

Πίνακα S1.

βιοδεικτών και διασυνδέσεων αναλύσεις και ο αριθμός ασθενών που συμπεριελήφθησαν σε κάθε ανάλυση.

Α1 ασθενής είχε εγγραφεί αλλά δεν έλαβαν το φάρμακο της μελέτης. Σύντμηση: Len:. Λεναλιδομίδη

doi: 10.1371 /journal.pone.0080437.s002

(DOC)

Λίστα ελέγχου S1.

CONSORT Λίστα ελέγχου

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080437.s003

(DOC)

πρωτόκολλο S1.

Δίκη Πρωτόκολλο

doi:. 10.1371 /journal.pone.0080437.s004

(PDF)