Αφηρημένο

Σκοπός

Ελέγξαμε την υπόθεση ότι υψηλής πλάσμα YKL-40 και IL-6 συνεργάτης με καρκίνο του παγκρέατος και σύντομη συνολική επιβίωση.

Ασθενείς και Μέθοδοι

Σε όλες, 559 ασθενείς με καρκίνο του παγκρέατος από προοπτικές μελέτες βιοδεικτών από τη Δανία (n = 448) και τη Γερμανία (n = 111) μελετήθηκαν. Πλάσμα YKL-40 και IL-6 προσδιορίστηκαν από τις δοκιμές ELISA και CA ορό 19,9 από χημειοφωταύγειας ανοσομετρική ανάλυση.

Αποτελέσματα

αναλογίες πιθανοτήτων (OR) για την πρόβλεψη του καρκίνου του παγκρέατος ήταν σημαντική για όλους τους βιοδείκτες, με CA 19.9 έχουν την υψηλότερη AUC (CA 19.9: OR = 2.28, 95% CI 1,97 – 2,68, p ». Κλινικά κριτήρια επιλεξιμότητας για ένταξη ήταν ηλικίας άνω των 18 ετών και ιστολογική ή κυτταρολογική επιβεβαίωση του παγκρέατος αδενοκαρκινώματα. Σαράντα δύο ασθενείς με τοπικά PC υποβλήθηκε σε μια pancreaticoduodenectomy, ένα άπω παγκρεατεκτομή, ή ένα σύνολο παγκρεατεκτομή, και 37 από αυτούς τους ασθενείς έλαβαν επικουρική γεμσιταμπίνη μετά την επέμβαση. Τρεις-100-90 ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ή μεταστατικό PC έλαβε την πρώτη γραμμή της παρηγορητικής γεμσιταβίνη (n = 361), γεμσιταβίνη σε συνδυασμό με καπεσιταβίνη (n = 17), γεμσιταβίνη σε συνδυασμό με ερλοτινίμπη (n = 1), 5-FU σε συνδυασμό με ιρινοτεκάνη και οξαλιπλατίνη (n = 6), ή χημειο-ακτινοθεραπείας (n = 5) μέχρι την εξέλιξη της νόσου. Δεκαέξι ασθενείς (όλα τα μη-λειτουργική) δεν υποβλήθηκαν σε θεραπεία. Ο Πίνακας 1 παρουσιάζει τα κλινικά χαρακτηριστικά των ασθενών με PC. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν μέχρι το θάνατο ή 6 Οκτωβρίου 2012. αξονικές τομογραφίες πραγματοποιήθηκαν κάθε 3

ου μήνα ή με την υποψία της εξέλιξης της νόσου. Όλοι οι ασθενείς με την προϋπόθεση γραπτή συγκατάθεση. Η «Μελέτη ΒΙΟΡΑΧ» εγκρίθηκε από την Περιφερειακή Επιτροπή Δεοντολογίας (VEK διαιτητή. KA-20060094) και η δανική Υπηρεσία Προστασίας Δεδομένων.

Η

Χαϊδελβέργη μελέτη.

Από τον Αύγουστο του 2003 έως τον Νοέμβριο 2009, προεπεξεργασία συλλέχθηκαν δείγματα αίματος από 111 ασθενείς που διαγνώστηκαν με PC και προσλαμβάνονται διαδοχικά στο Τμήμα Γενικής, σπλαγχνική, και χειρουργική επέμβαση μεταμόσχευσης, Πανεπιστήμιο της Χαϊδελβέργης, στη Γερμανία. Κλινικά κριτήρια επιλεξιμότητας για ένταξη ήταν ηλικίας άνω των 18 ετών, ιστολογικά επιβεβαιωμένο PC, υποβληθεί σε χειρουργική επέμβαση με τη ριζοσπαστική πρόθεση για PC, και επαρκή λειτουργία των οργάνων. Μόνο ένας από τους ασθενείς βρέθηκε μη χειρουργικά κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης. Μετά τη λειτουργία, 107 ασθενείς έλαβαν επικουρική γεμσιταβίνη. Οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν μέχρι το θάνατο ή 7 Οκτωβρίου 2011. Όλοι οι ασθενείς παρέχεται γραπτή συγκατάθεση και η μελέτη (συμπεριλαμβανομένης της ανάλυσης των βιοδεικτών) εγκρίθηκε από την επιτροπή περιφερειακής δεοντολογίας.

βιοδεικτών Ανάλυση

Πρότυπο λειτουργίας διαδικασίες χρησιμοποιήθηκαν για δειγματοληψία αίματος. Αίμα για το πλάσμα ορό και EDTA φυγοκεντρήθηκαν εντός ½-2 ώρες μετά τη δειγματοληψία αίματος και στη συνέχεια αποθηκεύεται στους -80 ° C μέχρι την ανάλυση. Οι συγκεντρώσεις πλάσματος του YKL-40 και IL-6 προσδιορίστηκαν εις διπλούν με εμπορική ανοσοπροσροφητικές ανιχνεύσεις ενζυματικής δεσμεύσεως (ELISA) (YKL-40: Quidel, Santa Clara, CA, USA? IL-6: Αριθμός καταλόγου HS600, R &? D Systems , Abingdon, Οχοη, UK) σύμφωνα με τις οδηγίες των κατασκευαστών. YKL-40 χαρακτηριστικά ELISA: Όριο ανίχνευσης 20 μg /l, και ενδο- και δια-δοκιμασίας συντελεστές διακύμανσης (CV) ήταν & lt? 5% και & lt? 6% [30]. IL-6 χαρακτηριστικά ELISA: όριο ανίχνευσης 0,01 ng /l, και ενδο- και δια-δοκιμασίας βιογραφικά ήταν ≤ 8% και ≤ 11% [31]. Ορός CA 19.9 αναλύθηκε χρησιμοποιώντας το GI-ΜΑ IMMULITE 2000 (Siemens, Catalogue Number L2KG12) δοκιμασία, μία στερεάς φάσης, δύο θέσεων διαδοχικών χημειοφωταύγειας ανοσομετρικό προσδιορισμό.

YKL-40, IL-6, και CA 19.9 σε υγιή άτομα και ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα

υγιή άτομα.

Το διάστημα αναφοράς για το πλάσμα YKL-40 καθορίστηκε σε 3.130 υγιή άτομα (1293 άνδρες, 1837 γυναίκες) ηλικίας 21 έως 84 ετών από δανική γενικό πληθυσμό του, το Copenhagen City Heart Study. Δεν είχαν καμία γνωστή νόσο κατά τη στιγμή της δειγματοληψίας αίματος κατά την περίοδο 1991-1994 και παρέμεινε υγιές και ζωντανό κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης 16 ετών [31]. Η διάμεση YKL-40 πλάσματος σε αυτούς τους 3.130 υγιή άτομα ήταν 40 μg /l (min-max: 20 – 1098 μg /l? 5-95% Εύρος εκατοστημόριο, από 20 έως 116 μg /l). Το διάστημα αναφοράς για την IL-6 στο πλάσμα προσδιορίστηκε σε 318 υγιείς αιμοδότες (196 άνδρες, 122 γυναίκες) ηλικίας 18-64 ετών. Αυτά τα άτομα ήταν όλα υγιή, δεν ήταν σε φαρμακευτική αγωγή, και δεν είχε σημεία ή κλινικά συμπτώματα της νόσου. Η διάμεση IL-6 στο πλάσμα σε αυτούς 306 υγιή άτομα ήταν 1,3 ng /l (min-max: 0,33 – 26 ng /l? 5-95% Εύρος εκατοστημόριο, 0,63 να 4,50 ng /l) [32]. Το ανώτερο φυσιολογικό όριο για ορό CA 19,9 ήταν 37 KU /l σύμφωνα με τον κατασκευαστή. Τα μεσοδιαστήματα αναφοράς για CA ορό 19,9 για τις καμπύλες ROC προσδιορίστηκαν σε 142 υγιείς δότες αίματος (72 άνδρες, 70 γυναίκες) ηλικίας 41 έως 66 ετών (μέσος όρος 57 χρόνια). Αυτά τα υποκείμενα ήταν υγιή, δεν ήταν σε φαρμακευτική αγωγή, και δεν είχε σημεία ή κλινικά συμπτώματα της νόσου. Η διάμεση τιμή του ορού CA 19.9 σε αυτά τα 142 υγιή άτομα ήταν 4,25 KU /l (min-max: 2,50 – 77 KU /l? 5-95% Εύρος εκατοστημόριο, 2,50 έως 28 KU /l)

Ασθενείς με. χρόνια παγκρεατίτιδα.

Τα μεσοδιαστήματα αναφοράς για YKL-40 στο πλάσμα, IL-6 και ο ορός CA 19.9 προσδιορίστηκαν σε 80 ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα (58 άνδρες, 22 γυναίκες) ηλικίας 32 έως 85 ετών. Η διάμεση πλάσμα YKL-40 ήταν 102 μg /l (min-max: 20-1661 μg /l? 5-95% Εύρος εκατοστημόριο το 22 έως 1047 μg /l). Η IL-6 διάμεσος του ορού ήταν 3,5 ng /l (min-max: 0,51 – 64,7 ng /l? 5-95% Εύρος εκατοστημόριο, 0,81 να 12,75 ng /l), και το μεσαίο ορού CA 19.9 ήταν 15 KU /l ( min-max:. 2,5-1134 KU /l? 5-95% εύρος εκατοστημόριο, 2,5 – 287 KU /l)

Στατιστική Ανάλυση

Τα αποτελέσματα αυτού του έργου αναφέρονται σύμφωνα με οι κατευθυντήριες γραμμές ΠΑΡΑΤΗΡΗΣΗ [33]. Τα περιγραφικά στατιστικά στοιχεία για τις συνεχείς μεταβλητές παρουσιάζονται με διάμεσο επίπεδο και το εύρος τους. Αναλύσεις συγκρίνοντας ασθενείς σε φυσιολογικά επίπεδα αναφοράς έγιναν χρησιμοποιώντας ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης. Τα αποτελέσματα παρουσιάζονται από την καμπύλη λειτουργικών χαρακτηριστικών δέκτη (ROC) και των διακρίσεων αξιολογούνται από την περιοχή κάτω από την ROC (AUC). Παρόμοιες αναλύσεις έγιναν σε υποσύνολα των ασθενών. Για τις συσχετίσεις που χρησιμοποιούνται συσχετίσεις Spearman rank του.

Διάρκεια της επιβίωσης ενημερώθηκε 6 του Οκτωβρίου 2012 (ΒΙΟΡΑΧ Μελέτη) και 7 του Οκτ 2011 (Heidelberg Μελέτη). Περιπτώσεις στις οποίες οι ασθενείς ήταν ζωντανοί κατά την ημερομηνία αυτή είχαν λογοκριθεί. Το πρωτεύον καταληκτικό σημείο ήταν η συνολική επιβίωση (OS). Επιβίωση πιθανότητες για το OS εκτιμήθηκαν με τη μέθοδο Kaplan-Meier, και οι δοκιμές για τις διαφορές μεταξύ των στρωμάτων έγιναν χρησιμοποιώντας το στατιστικό log-rank. Γραφική παρουσίαση χρησιμοποιώντας τις εκτιμήσεις Kaplan-Meier του OS παρουσιάστηκε ομαδοποίηση των ασθενών με υψηλά έναντι YKL-40 φυσιολογικό πλάσμα, IL-6, και το επίπεδο CA 19.9 ορό. Η Cox μοντέλο αναλογικών κινδύνων χρησιμοποιήθηκαν για την ανάλυση του χρόνου μέχρι θανάτου, ρυθμίζοντας το μοντέλο για τη φάση, την ηλικία και το φύλο. Τα επίπεδα των βιοδεικτών αναλύθηκαν είτε από την διχοτομήθηκε τιμή χρησιμοποιώντας το 95

ο εκατοστημόριο των δεδομένων αναφοράς, όπως το κόψιμο σημείο ή από την πραγματική αξία των βιοδεικτών στην κλίμακα (log βάση 2). Μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν. Δοκιμές για πιθανές αλληλεπιδράσεις έγιναν ανάλογα με την περίπτωση. αξιολόγησης του μοντέλου έγινε χρησιμοποιώντας γραφικές μεθόδους, Schoenfeld και Martingale κατάλοιπα. Ρ-τιμές μικρότερες από 5% θεωρήθηκαν σημαντικές. Όλοι οι υπολογισμοί πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του λογισμικού SAS (έκδοση 9.1, SAS Institute, Cary, NC, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής).

Αποτελέσματα

YKL-40, IL-6 και CA 19.9 και κίνδυνος PC

Ο Πίνακας 1 δίνει τα κλινικά χαρακτηριστικά των ασθενών 559 με το PC. Προ-επεξεργασίας πλάσματος YKL-40, IL-6, και ορό CA 19.9 ήταν αυξημένα σε 36%, 54%, και 82% όλων των ασθενών με PC, αντίστοιχα. Plasma YKL-40, IL-6 και ορό CA 19.9 αυξάνεται με την αύξηση στάδιο (Συμπληρωματικές Πίνακα 1 και Συμπληρωματική Εικόνα 1). Αυξημένα ορού CA 19.9 βρέθηκε στο 52% με το στάδιο ΙΑ, ΙΒ, και ΙΙΑ, 76% με το στάδιο ΙΙΒ, το 85% με το στάδιο ΙΙΙ, και 89% με το στάδιο IV. Λιγότεροι ασθενείς είχαν αυξημένα πλάσμα YKL-40 (29%, 26%, 26%, και 46% για τα διάφορα στάδια) και IL-6 (41%, 39%, 44%, και 66%) (Συμπληρωματική Πίνακας 1). Plasma YKL-40 και IL-6 ήταν αυξημένα σε 35% και 42% των ασθενών PC με φυσιολογικό ορό CA 19.9. Πενήντα-δύο τοις εκατό των ασθενών με PC με φυσιολογική CA 19.9 είχαν είτε αυξημένα πλάσμα YKL-40 ή IL-6. Ενενήντα δύο τοις εκατό του συνόλου των ασθενών με PC είχαν αυξημένη συγκέντρωση τουλάχιστον μιας από τις τρεις αυτές βιοδείκτες.

Η

Ο OR για την πρόβλεψη του PC σε ολόκληρο τον πληθυσμό της μελέτης ήταν σημαντική και για τις τρεις βιοδείκτες, με ορό CA 19.9 έχουν την υψηλότερη AUC (ορού CA 19.9: OR = 2,28, 95% διάστημα εμπιστοσύνης (CI), 1,97 to2.68, σ & lt? 0,0001, AUC = 0,94? πλάσμα YKL-40: OR = 4,50, 3,99 – 5,08, p & lt ? 0,0001, AUC = 0,87? και IL-6 στο πλάσμα: OR = 3,68, CI 3,08 – 4,44, p & lt? 0,0001, AUC = 0,87). Οι καμπύλες ROC φαίνονται στο Σχήμα 1.

Σε ασθενείς που υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση για πλάσματος PC, προ-θεραπεία YKL-40 συσχετίζεται με πλάσμα της IL-6 (rho = 0.45, ρ & lt? 0,0001), ορό CA 19.9 (rho = 0.40, p & lt? 0,0001) και την ηλικία (rho = 0.40, p & lt? 0,0001). Κάτω συσχετίσεις βρέθηκαν μεταξύ της IL-6 στο πλάσμα και CA 19.9 (rho = 0.21, p = 0.03) και την ηλικία (rho = 0.18, p = 0,052) και μεταξύ των CA ορού 19.9 και την ηλικία (rho = 0.29, p = 0,0021). Στους ασθενείς που δεν λειτουργούν σε, (στάδιο ΙΙΒ, III, και IV) πλάσματος προ της θεραπείας YKL-40 συσχετίζεται με πλάσμα της IL-6 (rho = 0.51, ρ & lt? 0,0001) και την ηλικία (rho = 0.21, ρ & lt? 0,0001), αλλά όχι με CA ορού 19.9 (rho = 0,079, p = 0,12). Χαμηλή συσχετίσεις βρέθηκαν μεταξύ της IL-6 στο πλάσμα και CA 19.9 (rho = 0.22, p & lt? 0,0001). Δεν συσχετίσεις βρέθηκαν μεταξύ της ηλικίας και του πλάσματος της IL-6 (rho = 0.03) και CA ορού 19.9 (rho = 0.02).

YKL-40, IL-6 και CA 19.9 σε ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα

Οι ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα είχαν υψηλότερες πλάσμα YKL-40 (διάμεση τιμή 102 μg /l, 35% είχαν αυξημένα επίπεδα σε σύγκριση με ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο), IL-6 (3,5 ng /l, 27%) και CA 19-9 ορού (15 KU /l, 25%) σε σύγκριση με υγιή άτομα. Οι ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα είχαν σημαντικά χαμηλότερες συγκεντρώσεις και των τριών βιοδεικτών σε σύγκριση με ασθενείς με PC (όλα τα στάδια σε συνδυασμό) (YKL-40 p = 0,047? IL-6 ρ & lt? 0,0001? CA 19-9 ρ & lt? 0,0001) (Συμπληρωματική Εικόνα 1) .

OS και προεπεξεργασίας YKL-40, IL-6 και CA 19.9 σε ασθενείς που χειρουργήθηκαν για PC

μονοπαραγοντική Cox ανάλυση των ασθενών που υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση για PC έδειξαν ότι αυξημένα πλάσματος προ-επεξεργασίας IL YKL-40 -6 και ορό CA 19.9 (διχοτομήθηκε σύμφωνα με τα φυσιολογικά επίπεδα), αλλά όχι πλάσμα συνδέθηκαν με σύντομη OS, ανάλυση πίνακα 2. Η πολυπαραγοντική Cox συμπεριλαμβανομένων YKL-40 στο πλάσμα, IL-6, ορό CA 19.9, στάδιο, την ηλικία, και το φύλο έδειξε ότι η IL-6 και CA 19.9 (διχοτομήθηκε σύμφωνα με τα φυσιολογικά επίπεδα) ήταν ανεξάρτητες βιοδείκτες της OS, Πίνακας 2. Παρόμοια αποτελέσματα βρέθηκαν και αν η IL-6 και CA 19.9 συμπεριλήφθηκαν ως συνεχής τιμές log-μετασχηματιστεί (Πίνακας 2).

το σχήμα 2 απεικονίζει τις καμπύλες Kaplan-Meier για τους ασθενείς που υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση, σύμφωνα με φυσιολογικά ή αυξημένα πλάσμα YKL-40 (2Α), IL-6 (2Β), και τα επίπεδα στον ορό CA 19.9 (2C). Ασθενείς με φυσιολογική IL-6 και CA 19.9 είχαν σημαντικά μεγαλύτερη λειτουργικά συστήματα σε σύγκριση με ασθενείς με αυξημένα επίπεδα. Το σχήμα 2D δείχνει ότι η διάμεση OS ήταν μόνο 11,8 μήνες (95% CI, 7,8 to18.8? Και 45% ζωντανός μετά από 1 έτος (95% CI, 25 έως 63%)) αν και οι δύο IL-6 και CA 19.9 ήταν αυξημένα. Η μέση επιβίωση δεν επιτεύχθηκε στην ομάδα των ασθενών με φυσιολογική IL-6 και CA 19.9 (πρώτο τεταρτημόριο 30,4 μήνες, 95% CI, 11,0 έως 33,7? Με 92% ζωντανός μετά από 1 έτος (95% CI, 71 έως 98% )). Η στατιστική log-rank έδειξε μια σημαντική διαφορά (p & lt? 0.005). Μεταξύ επιβιώσεις σε αυτές τις δύο ομάδες

D δείχνει τις καμπύλες επιβίωσης για καμία αυξημένα βιοδείκτες (κίτρινο), μόνο αυξημένα IL-6 (μπλε), μόνο αυξημένα CA 19.9 (πράσινο), ή και τα δύο IL-6 και CA 19.9 αυξημένα (μωβ). Η τιμή P αναφέρεται στην δοκιμασία log-rank για την ισότητα των στρωμάτων. Οι ασθενείς διαχωρίστηκαν μεταξύ τους από το ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο για κάθε βιοδείκτη.

Η

OS και προεπεξεργασίας YKL-40, IL-6 και CA 19.9 σε ασθενείς με PC δεν υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση.

μονοπαραγοντική Cox ανάλυση ασθενών με PC δεν υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση έδειξαν ότι τα αυξημένα πλάσμα προκατεργασία YKL-40, IL-6, και CA ορού 19.9 (διχοτομήθηκε σύμφωνα με τα φυσιολογικά επίπεδα) σχετίστηκαν (ρ & lt? 0,0001) με σύντομη OS, Πίνακας 3 . η πολυπαραγοντική ανάλυση Cox, συμπεριλαμβανομένων YKL-40, IL-6, CA 19.9, στάδιο, την ηλικία και το φύλο έδειξε ότι το YKL-40, IL-6 και CA 19.9 (διχοτομήθηκε σύμφωνα με τα φυσιολογικά επίπεδα) ήταν ανεξάρτητες βιοδείκτες της OS, Πίνακας 3. Παρόμοια αποτελέσματα βρέθηκαν όταν YKL-40, IL-6 και CA 19.9 συμπεριλήφθηκαν ως συνεχής τιμές log-μετασχηματισμένα (Πίνακας 3).

η

Σχήμα 3 απεικονίζει τις καμπύλες Kaplan-Meier για ασθενείς με σταδίου ΙΙΒ και ΙΙΙ δεν υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση, σύμφωνα με κανονικές ή αυξημένες πλάσμα YKL-40 (3Α), IL-6 (3Β) και τα επίπεδα CA 19,9 ορού (3C). Ασθενείς με φυσιολογική YKL-40, IL-6, και CA 19.9 είχαν σημαντικά μεγαλύτερη από ό, τι OS ασθενείς με αυξημένα επίπεδα. Η Εικόνα 3D δείχνει ότι η διάμεση OS ήταν μόνο 7,5 μήνες (95% CI, 2,3 να 10,6? Και 20% ζωντανός μετά από 1 έτος), εάν τα τρία βιοδεικτών ήταν αυξημένα έναντι 34,4 μήνες (7.2 να 51,1? Και το 90% ζωντανός μετά από 1 έτος) αν και οι τρεις βιοδείκτες ήταν φυσιολογική (p = 0,003).

D δείχνει τις καμπύλες επιβίωσης για 0-3 αυξημένα βιοδείκτες. Η τιμή P αναφέρεται στην δοκιμασία log-rank για την ισότητα των στρωμάτων. Οι ασθενείς διαχωρίστηκαν μεταξύ τους από το ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο για κάθε βιοδείκτη.

Η

Το σχήμα 4 δείχνει τις καμπύλες Kaplan-Meier για ασθενείς με σταδίου IV δεν υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση, σύμφωνα με φυσιολογικά ή αυξημένα πλάσμα YKL-40 (4Α), IL-6 (4Β), και τα επίπεδα στον ορό CA 19.9 (4C). Ασθενείς με φυσιολογική YKL-40, IL-6, και CA 19.9 είχαν σημαντικά μεγαλύτερη από ό, τι OS ασθενείς με αυξημένα επίπεδα. Εικόνα 4D δείχνει ότι η διάμεση OS ήταν μόνο 3,0 μήνες (02.02 – 03.09? Και 13% ζωντανός μετά από 1 χρόνο), αν και οι τρεις βιοδείκτες ήταν αυξημένα έναντι 10,0 μηνών (03.09 – 12.09? Και 39% ζωντανός μετά από 1 χρόνο), εάν τα τρία βιοδείκτες ήταν φυσιολογική (p & lt? 0.0001).

D δείχνει τις καμπύλες επιβίωσης για 0-3 αυξημένα βιοδείκτες. Η τιμή P αναφέρεται στην δοκιμασία log-rank για την ισότητα των στρωμάτων. Οι ασθενείς διαχωρίστηκαν μεταξύ τους από το ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο για κάθε βιοδείκτη.

Η

Συμπληρωματική Εικόνα 2 δείχνει τις καμπύλες Kaplan-Meier για όλους τους ασθενείς με τα στάδια ΙΙΒ, III, και IV σε συνδυασμό.

Συζήτηση

Ερευνήσαμε την διαγνωστική και προγνωστική αξία των συγκεντρώσεων στο πλάσμα της YKL-40 και IL-6 σε 559 ασθενείς με PC που περιλαμβάνονται σε δύο μεγάλες προοπτικές μελέτες βιοδεικτών των ασθενών με PC από τη Δανία και τη Χαϊδελβέργη. Τα αποτελέσματα συγκρίθηκαν με αυτά του ορού CA 19.9. Τριάντα έξι τοις εκατό είχαν αυξημένα YKL-40, και 54% όλων των ασθενών με PC είχαν αυξημένα IL-6 στο πλάσμα. Αν και τα επίπεδα και των δύο βιοδεικτών αυξανόταν με την αύξηση το στάδιο του όγκου, δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν μόνα τους για την έγκαιρη διάγνωση του PC, και ΟΑ19.9 ορού είχαν υψηλότερο OR για την πρόβλεψη του PC.

IL-6 διεγείρει την παραγωγή YKL- 40, και μια συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ αυτών των δύο βιοδείκτες. Plasma YKL-40 και IL-6 θα μπορούσε να είναι πολύτιμο διαγνωστικό βιοδεικτών σε ασθενείς αρνητικών σε αντιγόνο Lewis με υπολογιστή και κανονικές συγκεντρώσεις στον ορό της CA 19.9 [29], δεδομένου ότι το 52% αυτών των ασθενών είχαν αυξημένα YKL-40 ή IL-6. Ο όγκος του όγκου σε PC είναι συχνά μέτρια, αλλά η συχνότητα των ασθενών με αυξημένα πλάσμα YKL-40 είναι υψηλότερη από ό, τι σε ασθενείς με άλλους συμπαγείς όγκους και αιματολογικές κακοήθειες [5], [34]. Ένα υψηλότερο ποσοστό των ασθενών με αυξημένα πλάσμα YKL-40 [35] παρατηρείται μόνο στον καρκίνο των ωοθηκών.

Υψηλές συγκεντρώσεις YKL-40 και IL-6 στο πλάσμα είναι ανεξάρτητος προγνωστικός βιοδείκτες που σχετίζονται με σύντομη OS σε ασθενείς με πολλούς διαφορετικών τύπων καρκίνου, αλλά μόνο λίγες μελέτες έχουν αξιολογήσει την προγνωστική αξία του πλάσματος YKL-40 και IL-6 σε ασθενείς με υπολογιστές [34]. Τα κύρια αποτελέσματα της μελέτης μας οι ασθενείς με τον υπολογιστή είναι ότι η υψηλή (δηλαδή σε σχέση με τις κανονικές αξίες) προεγχειρητική πλάσμα της IL-6 και τα επίπεδα CA 19,9 ορού ήταν ανεξάρτητοι προγνωστικοί βιοδείκτες της μικρής OS. Αν και οι δύο πλάσματος της IL-6 και ο ορός CA 19.9 ήταν αυξημένα πριν το χειρουργείο, οι ασθενείς είχαν μικρότερη OS από ασθενείς με κανονικό επίπεδο βιοδείκτες (45% έναντι 92% ζωντανός μετά από 1 έτος). πολυπαραγοντική ανάλυση Cox έδειξε ότι το πλάσμα YKL-40, IL-6 και ορού CA 19.9 ήταν όλα ανεξάρτητος προγνωστικός βιοδείκτες της OS σε ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ή μεταστατικό PC. Σε αυτούς τους ασθενείς, τα υψηλά επίπεδα των τριών βιοδεικτών εντόπισε μια υποομάδα ασθενών με μια πολύ μικρή διάμεση επιβίωση, δηλαδή μόνο 7,5 μήνες, έναντι 34,4 μηνών, αν όλοι οι βιοδείκτες ήταν φυσιολογικές σε ασθενείς με σταδίου ΙΙΒ και ΙΙΙ, και 3,0 μήνες έναντι 10,0 μήνα εάν όλοι οι βιοδείκτες ήταν φυσιολογικές σε ασθενείς με σταδίου IV. IL-6 διεγείρει YKL-40 παραγωγή, και στους περισσότερους τύπους καρκίνου το ποσοστό των ασθενών με αυξημένες συγκεντρώσεις YKL-40 πλάσματος είναι πολύ υψηλότερη σε ασθενείς με μεταστατική νόσο από ό, τι σε ασθενείς με εντοπισμένη νόσο [5], [10]. Αυτό μπορεί να εξηγήσει γιατί το πλάσμα YKL-40 στην παρούσα μελέτη ήταν ένα ανεξάρτητο προγνωστικό βιοδείκτη του OS σε ασθενείς με τοπικά προχωρημένο ή μεταστατικό PC, αλλά όχι σε ασθενείς με εντοπισμένο PC που έχουν λειτουργήσει.

Υπάρχει ένα αυξανόμενο ενδιαφέρον για την ογκογόνο μικροπεριβάλλον [36], [39]. Ένα σημαντικό μέρος αυτής της μικροπεριβάλλον είναι ένας όγκος προώθηση της φλεγμονής και ένα μεταβαλλόμενο πυκνότητα διείσδυση ανοσοκυττάρων [36]. PC χαρακτηρίζεται από διάσπαρτες καρκινικά κύτταρα ενσωματωμένα σε μια ινωτική δεσμοπλαστικό στρώμα [40]. Ούτε YKL-40 ούτε IL-6 είναι μια ειδική για τον καρκίνο βιοδεικτών, και οι δύο παράγονται από τα καρκινικά κύτταρα και φλεγμονώδη κύτταρα και είναι βιοδείκτες της φλεγμονής και του ιστού αναδιαμόρφωση [3], [5], [6], [14], [ ,,,0],15], [41] – [43]. Αυξημένα πλάσμα YKL-40 βρίσκεται σε μια υποομάδα ασθενών με καρκίνο και σε ασθενείς με μη κακοήθεις ασθένειες που χαρακτηρίζονται από φλεγμονή ή /και του ιστού αναδιαμόρφωση [5]. Πρόσφατες μελέτες έχουν εμπλέξει YKL-40 σε διάφορες βιολογικές διεργασίες όπως η φλεγμονή, αγγειογένεση, απόπτωση, κυτταρικό πολλαπλασιασμό, διαφοροποίηση και ρύθμιση του εξωκυτταρικού ιστού αναδιαμόρφωση [5], [7] – [21], όλες οι διεργασίες σημαντικές για την πρόοδο του καρκίνου κυτταρική ανάπτυξη, αγγειογένεση όγκου, και μεταστατικό δυναμικό [36] – [38]. Ωστόσο, απαιτούνται περαιτέρω μελέτες για να κατανοήσουμε πλήρως τις λειτουργίες της YKL-40 στην ανάπτυξη και εξέλιξη του καρκίνου. Στο γενικό πληθυσμό, αυξημένα πλάσμα YKL-40 προβλέπει αυξημένο κίνδυνο γαστρεντερικού καρκίνου και κακή OS σε αυτούς τους ασθενείς [23], αλλά ορό YKL-40 έχει μικρή διαγνωστική αξία για την έγκαιρη διάγνωση του ήπατος και των χοληφόρων καρκίνου [44].

IL-6 παράγεται από τα καρκινικά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων των PC, μακροφάγα, λεμφοκύτταρα, και ενδοθηλιακά κύτταρα [6], [24] – [26]. IL-6 παίζει ένα ρόλο στην φλεγμονή και την απόκριση οξείας φάσης, δρα ως παρακρινής και αυτοκρινής αυξητικός παράγοντας για τα καρκινικά κύτταρα, και αναστέλλει ράδιο- και προκαλούμενη από χημειοθεραπεία απόπτωση των κυττάρων PC [6], [25], [27] , [28], [43]. Η παρουσία των στρωματικών desmoplasia είναι ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα στο PC, οδηγείται από τα παγκρεατικά αστεροειδή κύτταρα και οι αλληλεπιδράσεις του με κυτοκίνες όπως η IL-6 [45]. Καχεξία σε ασθενείς με PC και άλλους καρκίνους ρυθμίζεται επίσης από την IL-6 [24], [46], [47].

Πρόσφατα, μελέτες συσχέτισης γονιδιώματος σε επίπεδο [48], [49] έχουν εντοπίσει SNPs (ενιαία ploymophisms νουκλεοτιδίου) που συνδέονται με ευαισθησία σε PC. Ορισμένα SNPs που σχετίζονται με τις συγκεντρώσεις στο πλάσμα της CA 19.9 σε υγιή άτομα, αλλά δεν διαπιστώθηκε καμία συσχέτιση μεταξύ αυτών των SNPs και PC. Δεν είναι γνωστό αν ορισμένες SNPs στις YKL-40 και IL-6 γονίδια συνδέονται με τον υπολογιστή.

Η ισχύς της μελέτης μας είναι προοπτική σχεδίαση της και ότι YKL-40 και IL-6 μετρήσεις στο πλάσμα ήταν καθορίζεται στα τυφλά, δηλαδή χωρίς τη γνώση των κλινικών δεδομένων και το λειτουργικό σύστημα των ασθενών. Εσφαλμένο χαρακτηρισμό των YKL-40 και IL-6 επίπεδα θα συμβεί πάντα σε κάποιο βαθμό ακόμη και αν μετρήσαμε όλα τα δείγματα εις διπλούν και είχαν χαμηλή συντελεστές διακύμανσης. Οι συγκεντρώσεις στο πλάσμα προεπεξεργασία YKL-40 σε ασθενείς με PC διαχωρίστηκαν μεταξύ τους, ανάλογα με το ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο 95% YKL-40 σε μια μεγάλη ομάδα 3.130 υγιών ατόμων από δανική γενικό πληθυσμό της [31]. Δεδομένου ότι το πλάσμα YKL-40 αυξάνει με την ηλικία, χρησιμοποιήσαμε την ηλικία διορθωμένη πλάσμα YKL-40 επίπεδα. Η ομάδα των φυσιολογικών ατόμων μας είναι αρκετά μοναδική? δεν είχαν καμία γνωστή νόσο κατά τη στιγμή της δειγματοληψίας αίματος κατά την περίοδο 1991-1994 και παρέμεινε υγιές και ζωντανό κατά τη διάρκεια της περιόδου παρακολούθησης 16 ετών [30]. Συνεπώς, θεωρούμε ότι οι ταξινομήσεις των ασθενών μας PC με YKL-40 κανονική και αυξημένη πλάσμα είναι σωστές. Οι συγκεντρώσεις πλάσματος της IL-6 δεν αυξάνουν με την ηλικία, και πιστεύουμε ότι ο αριθμός των υγιών ατόμων χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστεί η κανονική περιοχή πλάσματος IL-6 είναι επαρκής.

Εν κατακλείδι, το πλάσμα YKL-40 και IL -6 από μόνη της δεν είναι χρήσιμες ως νέες διαγνωστικές βιοδείκτες για τον εντοπισμό ασθενών με PC σε πρώιμο στάδιο ή να διακρίνει μεταξύ ασθενών με υπολογιστή και χρόνια παγκρεατίτιδα. Ορού CA 19-9 ήταν η καλύτερη διαγνωστική βιοδεικτών. Ωστόσο, οι συγκεντρώσεις του YKL-40 και IL-6 στο πλάσμα μπορεί να παρέχει πληροφορίες στην υποομάδα των ασθενών με PC και φυσιολογικό ορό CA 19.9, αφού YKL-40 ή IL-6 ανυψώθηκε σε 52% αυτών των ασθενών. Στην ομάδα των ασθενών με PC που υποβάλλονται σε χειρουργική επέμβαση, ένα υψηλό πλάσμα προεγχειρητική IL-6 και ορό CA 19.9 εντοπίσει μια υπο-ομάδα ασθενών με πολύ σύντομο επιβίωση. Μελλοντικές μελέτες θα μπορούσαν να ελέγξετε αν αυτοί οι ασθενείς μπορεί να ωφεληθούν από την νεο-επικουρική χημειοθεραπεία. Ενενήντα δύο τοις εκατό των ασθενών μας με τοπικά προχωρημένο ή μεταστατικό PC υποβλήθηκαν σε θεραπεία με πρώτη γραμμή παρηγορητική μονοθεραπεία με γεμσιταμπίνη, και αν και οι τρεις βιοδείκτες ήταν αυξημένα σε αυτούς τους ασθενείς, πρόγνωσή τους ήταν θλιβερή. Δεν είναι γνωστό αν αυτή η υποομάδα των ασθενών με PC και πολύ φτωχή πρόγνωση θα μπορούσε να ωφεληθεί από μια πιο επιθετική θεραπεία, όπως FOLFIRINOX ή Abraxane.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1.

Box-οικόπεδα των προ-επεξεργασίας πλάσματος YKL-40 (Α), IL-6 στο πλάσμα (Β) και στον ορό CA 19.9 (C) σε ασθενείς με PC σύμφωνα με το στάδιο και σε ασθενείς με χρόνια παγκρεατίτιδα. Η μέση τιμή είναι η γραμμή στη μέση του κουτιού και το 25

ου και 75

ου εκατοστημόριο είναι η άνω και κάτω μέρος του κουτιού. Τα μουστάκια είναι οι 5

ου και 95

ου εκατοστημόρια. Οι ακραίες τιμές δίνονται ως κουκκίδες

doi:. 10.1371 /journal.pone.0067059.s001

(PDF)

Εικόνα S2. Καμπύλες

Kaplan-Meier επιβίωσης που δείχνει τη συσχέτιση μεταξύ του πλάσματος προ-επεξεργασίας YKL-40 (Α), IL-6 στο πλάσμα (Β) και στον ορό CA 19.9 (C) σε μη λειτουργούν ασθενείς με σταδίου PC ΙΙΒ, III και IV . D δείχνει τις καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier για 0-3 αυξημένα βιοδείκτες. Η τιμή P αναφέρεται στην δοκιμασία log-rank για την ισότητα των στρωμάτων. Οι ασθενείς διαχωρίστηκαν μεταξύ τους από το ανώτερο φυσιολογικό επίπεδο για κάθε βιοδείκτη

doi:. 10.1371 /journal.pone.0067059.s002

(PDF)

Πίνακα S1.

Προ-επεξεργασία πλάσματος YKL-40, IL-6 και CA ορό 19,9 σε ασθενείς με PC σύμφωνα με το στάδιο

doi:. 10.1371 /journal.pone.0067059.s003

(DOCX)

ευχαριστίες

Πολλά ευχαριστώ σε βιοϊατρικές εργαστήριο επιστήμονες Tonni αγάπη Hansen, Dorthe Mogensen, Ulla Kjærulff-Hansen, Beata Gregersen, Charlotte Falk, και Vibeke Hinzte Holm, Χέρλεβ Νοσοκομείο? Teresa Rozenfeld, Glostrup Νοσοκομείο? Torben Kibøl και Palle L. Pedersen, Næstved Hospital? και το προσωπικό στα τμήματα της Κλινικής Βιοχημείας στο Χέρλεβ Νοσοκομείο, Hillerød Νοσοκομείο, Aalborg Νοσοκομείο και το Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο της Χαϊδελβέργης για την άριστη τεχνική βοήθεια με τη συλλογή δειγμάτων αίματος.