Αφηρημένο

Ιστορικό

μεταβολισμό One-άνθρακα φαίνεται να παίζει σημαντικό ρόλο στην αντίδραση μεθυλίωσης του DNA. Τα στοιχεία δείχνουν ότι η χαμηλή πρόσληψη βιταμινών Β ή υψηλή κατανάλωση αλκοόλ αυξάνει τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου. Πώς τα θρεπτικά συστατικά ενός άνθρακα επηρεάζουν τον φαινότυπο νησί methylator CpG (CIMP) ή

BRAF

κατάσταση μετάλλαξης στον καρκίνο του παχέος εντέρου παραμένει αβέβαιο.

Μέθοδοι

Αξιοποιώντας καρκίνων του παχέος εντέρου περιστατικό σε ένα μεγάλο υποψήφιους ομάδα των γυναικών (Μελέτη Nurses ‘Health), προσδιορίσαμε

BRAF

καθεστώς (Ν = 386) και την κατάσταση CIMP (Ν = 375) από 8 CIMP-ειδικούς δείκτες [

CACNA1G

,

CDKN2A

(p16),

CRABP1

,

IGF2

,

MLH1

,

NEUROG1

,

RUNX3

και

SOCS1

], και 8 άλλα νησιά CpG (

CHFR

,

HIC1

,

IGFBP3

,

MGMT

, ΜΕΝΤΑ -1, ΜΕΝΤΑ-31, Ρ14, και

WRN

). Έχουμε εξετάσει τη σχέση μεταξύ της πρόσληψης των θρεπτικών συστατικών ενός άνθρακα και το αλκοόλ και τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου, από

BRAF

κατάσταση μετάλλαξης ή CIMP.

Αποτελέσματα

Η αυξημένη πρόσληψη φυλλικού οξέος συσχετίστηκε με μια τάση προς χαμηλό κίνδυνο CIMP χαμηλής /0 όγκους [συνολική πρόσληψη φολικού οξέος ≥400 μg /ημέρα έναντι του & lt? 200 μg /ημέρα? η πολυμεταβλητή σχετικός κίνδυνος = 0,73? 95% CI = 0,53 – 1,02], ενώ η συνολική πρόσληψη φολικού οξέος δεν είχε καμία επίδραση σχετικά με τους κινδύνους CIMP-υψηλής όγκου (P

ετερογένεια = 0,73). Ούτε η βιταμίνη Β

6, μεθειονίνη ή κατανάλωση αλκοόλ φάνηκε να διαφορικά επιρροή κινδύνους για CIMP-υψηλής και CIMP-χαμηλό /0 όγκους. Χρησιμοποιώντας την 16-δείκτη CIMP πίνακα δεν μετέβαλε σημαντικά τα αποτελέσματά μας. Βιταμίνες του συμπλέγματος Β, μεθειονίνη ή την κατανάλωση αλκοόλ δεν επηρέαζε τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου διαφορετικά από

BRAF

κατάσταση.

Συμπεράσματα

Αυτή η μελέτη μοριακής επιδημιολογίας παθολογικές υποδηλώνει ότι η χαμηλή πρόσληψη επίπεδο φυλλικού οξέος μπορεί να να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο CIMP-χαμηλού /μηδέν όγκων του παχέος εντέρου, αλλά όχι εκείνη της CIMP-υψηλής όγκους. Ωστόσο, η διαφορά μεταξύ CIMP-υψηλής και CIMP-χαμηλό /0 κινδύνους καρκίνου δεν ήταν στατιστικά σημαντικές, και πρόσθετες μελέτες είναι απαραίτητες για να επιβεβαιώσει αυτές τις παρατηρήσεις

Παράθεση:. Schernhammer ES, Giovannucci Ε, Baba Υ, Fuchs CS , Ogino S (2011) Βιταμίνες Β, μεθειονίνη και την κατανάλωση αλκοόλ και του κινδύνου καρκίνου του παχέος εντέρου σε σχέση με το

BRAF

Μετάλλαξη και CpG νησί Methylator φαινότυπο (CIMP). PLoS ONE 6 (6): e21102. doi: 10.1371 /journal.pone.0021102

Επιμέλεια: Qian Τάο, το Κινεζικό Πανεπιστήμιο του Χονγκ Κονγκ, Χονγκ Κονγκ

Ελήφθη: 10 Ιανουαρίου, 2011? Αποδεκτές: 20 Μαΐου, 2011? Δημοσιεύθηκε: 27 του Ιούνη 2011

Copyright: © 2011 Schernhammer et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από τις Ηνωμένες Πολιτείες Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας (NIH) [P01 CA87969 (με Σ Hankinson), P01 CA55075 (σε W. Willett), Ρ50 CA127003 (για να ΚΠΣ), Κ07 CA122826 (σε SO), R01 CA151993 (σε SO)], ο Bennett Ταμείο Οικογένεια για στοχευμένες θεραπείες Έρευνας? και το Ίδρυμα βιομηχανίας της ψυχαγωγίας μέσω της Εθνικής παχέος Cancer Research Alliance. Το περιεχόμενο είναι αποκλειστική ευθύνη των συγγραφέων και δεν αντιπροσωπεύουν απαραίτητα τις επίσημες απόψεις του NCI ή ΝΙΗ. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

η μεθυλίωση του DNA είναι ένα σημαντικό επιγενετική μηχανισμό στη γονιδιακή σίγηση και αποτύπωση [1], [2], [3]. Παρεκκλίνουσα επιγενετική αποσιώπηση των καταστολείς των όγκων από CpG νησί υπερμεθυλίωση παρατηρείται συνήθως σε ανθρώπινες κακοήθειες. Ο φαινότυπος νησί methylator CpG (CIMP) χαρακτηρίζεται από την τάση για εκτεταμένη νησί CpG υπερμεθυλίωση [4], [5]. Υψηλός βαθμός CIMP (CIMP-υψηλή) είναι μια ξεχωριστή φαινότυπο σε καρκίνο του παχέος εντέρου, που συνδέονται με την ηλικία, το γυναικείο φύλο, εγγύς θέση του όγκου, αστάθεια μικροδορυφόρου,

BRAF

μετάλλαξη, και του όγκου υψηλού επιπέδου LINE-1 μεθυλίωσης [6], [7], [8], [9]. Ωστόσο, αιτιολογικός παράγοντες για CIMP-υψηλής παραμένουν σε μεγάλο βαθμό θεωρητική. Παρά την ισχυρή συσχέτιση μεταξύ CIMP και

BRAF

μετάλλαξη σε καρκίνο του παχέος εντέρου [5], [6], [7], [8], η υπόθεση ότι

BRAF

μετάλλαξη προκαλεί παρεκκλίνουσα CpG νησί μεθυλίωση [10] ήταν εξαιρετικά αμφιλεγόμενη [11]. Πρόσφατα, DNMT3B έχει αναδειχθεί ως ένα από τα αίτια της νησίδας CpG μεθυλίωσης σε όγκο [12], [13], [14]? παρ ‘όλα αυτά, η σχέση μεταξύ DNMT3B και CIMP σε καρκίνο του παχέος εντέρου είναι πιο σεμνός και όγκου νησί CpG μεθυλίωση φαίνεται να επηρεάζεται από άλλους παράγοντες.

Το φολικό οξύ και τα συναφή βιταμίνες [13] Β

2, Β

6 και Β

12, είναι απαραίτητα για τη μεθυλίωση του DNA και την παραγωγή πουρίνης και πυριμιδίνης νουκλεοτίδια που απαιτούνται για τη σύνθεση του DNA. Σημαντική επιδημιολογικά στοιχεία δείχνουν ότι ένα χαμηλό-φολικό διατροφή συνδέεται με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου [15], [16], [17]. Ομοίως, η κατανάλωση αλκοόλ αυξάνει τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου [18], πιθανόν μέσω της αντι-φολικού οξέος τα αποτελέσματά της [19]. Έχουμε δείξει πρόσφατα ότι η επαρκής πρόσληψη φυλλικού οξέος και χαμηλή κατανάλωση αλκοόλ είναι προστατευτικά έναντι LINE-1-μεθυλιωμένος καρκίνο του παχέος εντέρου, αλλά όχι εναντίον LINE-1 υπερμεθυλίωση καρκίνου του παχέος εντέρου [20]. Ενώ μια πρόσφατη μελέτη έδειξε τη σύνδεση μεταξύ φυλλικό οξύ και CpG νησί μεθυλίωσης στο φυσιολογικό ορθοκολικό ιστό [21], πώς φυλλικού οξέος ή άλλων πρόσληψη βιταμίνης Β επηρεάζει νησί CpG μεθυλίωση ή

BRAF

μετάλλαξη στο όγκος παραμένει λιγότερο καλά κατανοητό, και η στοιχεία από τη βιβλιογραφία είναι σχετικά περιορισμένες [22], [23], [24], [25].

Ως εκ τούτου, αξιολόγησε κατά πόσο η επίδραση του φυλλικού οξέος στον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου διέφερε ανάλογα με CIMP και

BRAF

κατάσταση. Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιήσαμε δείγματα όγκων από μια προοπτική μελέτη κοόρτης που έχει δείξει στο παρελθόν ότι η πρόσληψη φυλλικού οξέος συσχετίστηκε αντίστροφα με τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου [26]. Η διαθεσιμότητα λεπτομερείς και ενημερωμένες πληροφορίες σχετικά με το φυλλικό οξύ δείγματα εισαγωγής και όγκου εντός αυτής της σειράς επιτρέπεται μια πιο ολοκληρωμένη εξέταση της επίδρασης της πρόσληψη φυλλικού οξέος σε κίνδυνο ανάπτυξης CIMP-υψηλής και μη CIMP-υψηλής καρκίνων του παχέος εντέρου, καθώς και από το

BRAF

κατάστασης μεταλλάξεων. Εξειδίκευση στη σχέση μεταξύ φολικού οξέος και του καρκίνου του παχέος εντέρου σε συγκεκριμένα φαινοτύπων όγκων θα ενισχύσει περαιτέρω την υπόθεση για την αιτιότητα και θα προσφέρει σημαντικές γνώσεις σχετικά με τις καρκινογόνες μηχανισμούς του φυλλικού οξέος.

Υλικά και Μέθοδοι

Θέματα Μελέτη

Μελέτη η Nurses ‘Health (NHS) ιδρύθηκε το 1976, όταν 121.701 ΗΠΑ γυναικεία νοσηλευτές, 30 έως 55 ετών, συμπλήρωσαν ένα ερωτηματολόγιο ταχυδρομηθεί [27]. Συνέχεια στην ομάδα αυτή τη στιγμή υπερβαίνει το 92%. Εμείς ταχυδρομηθεί διετή ερωτηματολόγια να ενημερώσετε τα στοιχεία και να εντοπίσει νέες περιπτώσεις καρκίνου. Το 1980, το ερωτηματολόγιο NHS επεκτάθηκε για να συμπεριλάβει μια επικυρωμένη αξιολόγηση της διατροφής, και έχουν ενημερωθεί διαιτητικές εκτιμήσεις έχουν διεξαχθεί κάθε τέσσερα χρόνια [28]. Οι θεσμικές συμβούλια αναθεώρηση του Νοσοκομείου Brigham και Γυναικών και το Harvard School of Public Health ενέκρινε αυτή τη μελέτη και τη διαδικασία συναίνεσης.

Αξιολόγηση των θρεπτικά συστατικά

Διατροφική πρόσληψη των διαφόρων θρεπτικών ουσιών, συμπεριλαμβανομένων φυλλικό οξύ, βιταμίνη Β

6, Β

12, και μεθειονίνη αξιολογήθηκαν από αυτοδιοικούμενα ημιποσοτική ερωτηματολόγια συχνότητας κατανάλωσης τροφίμων (SFFQ), οι οποίες ολοκληρώθηκαν το 1980, 1984, 1986, 1990, 1994, και 1998. πρόσληψη θρεπτικών ουσιών υπολογίστηκαν πολλαπλασιάζοντας το αναφερόμενη συχνότητα κατανάλωσης της κάθε καθορίζονται τρόφιμο από το θρεπτικό περιεχόμενο του συγκεκριμένου μέγεθος της μερίδας και στη συνέχεια αθροίζοντας τα προϊόντα αυτά για όλα τα είδη τροφίμων. Πληροφορίες σχετικά με τη χρήση πολυβιταμινών και η χρήση άλλων συμπληρωμάτων επίσης συλλέγονται, καθώς και λεπτομέρειες για τα οποία το εμπορικό σήμα και τον τύπο. Μια εκτεταμένη βάση δεδομένων του σκευάσματος συμπληρώματος στη συνέχεια χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό των ειδικών εισφορών σε θρεπτικά συστατικά από αυτά συμπληρωματικές πηγές. Αυτές οι συνεισφορές των θρεπτικών συστατικών στη συνέχεια προστίθεται στο συγκεκριμένο θρεπτικό πρόσληψη από τα τρόφιμα για να υπολογίσει μια ημερήσια πρόσληψη για κάθε γυναίκα. Αυτή η μέθοδος διατροφικής αξιολόγησης έχει εκτενώς επικυρωθεί και την αξιοπιστία της αξιολόγησης [28]. Ο συντελεστής συσχέτισης ήταν 0,55 για τη συσχέτιση μεταξύ της συνολικής πρόσληψης φυλλικού οξέος υπολογίζεται από τη δεκαετία του 1980 ερωτηματολόγιο και ερυθροκυττάρων συγκεντρώσεις φολικού οξέος μετρήθηκαν το 1987 στην ομάδα αυτή [29]. Επιπλέον, η βιταμίνη Β

6 πρόσληψη όπως εκτιμήθηκε από το 1980, το 1984 και το 1986 SFFQs έχει αποδειχθεί ότι συσχετίζεται με τα αρχεία δίαιτα μιας εβδομάδας, με τις συσχετίσεις που κυμαίνονται 0,54 – 0,58 [28], [30].

Αξιολόγηση άλλων συμμεταβλητές

το αλκοόλ ήταν το άθροισμα των τιμών για τρεις τύπους ποτών: μπύρα, κρασί και αλκοολούχα ποτά. Έχουμε αναλάβει η περιεκτικότητα σε αιθανόλη 13,1 g για 12-ουγγιά (38-dl) μπορεί ή μπουκάλι μπίρα, 11,0 g για ένα ποτήρι 4-ουγκιά (12-dl) του κρασιού, και 14,0 g για μια τυπική μερίδα των πνευμάτων. Σε μελέτες επικύρωσης, ο συντελεστής συσχέτισης για τη συσχέτιση μεταξύ της κατανάλωσης αλκοόλ που προέρχεται από το 1980 SFFQ και το μέσο όρο των τεσσάρων εγγραφών δίαιτα μιας εβδομάδας ήταν 0,90 [31]. Άλλοι παράγοντες κινδύνου για καρκίνο του παχέος εντέρου, όπως η σωματική άσκηση και το δείκτη μάζας σώματος γενικά έχουν εκτιμηθεί ανά διετία σχετικά με τα κύρια ερωτηματολόγια.

Διαπίστωση του καρκίνου του παχέος εντέρου υποθέσεις και όγκου ιστών Προμηθειών

συμπεριλάβαμε καρκίνων του παχέος εντέρου αναφερθεί σχετικά με τις διετείς ερωτηματολόγια μεταξύ της επιστροφής του ερωτηματολογίου 1980 και την 1η Ιουνίου, 2004. Με την άδεια από τους συμμετέχοντες της μελέτης, καρκίνου του παχέος εντέρου επιβεβαιώθηκε μέσω «επανεξέταση της νοσοκόμων γιατρών ιατρικά αρχεία. Αν άδεια απορρίφθηκε, προσπαθήσαμε να επιβεβαιώσει την αυτο-αναφερόμενη καρκίνο με μια πρόσθετη επιστολή ή τηλεφώνημα. Ψάξαμε επίσης το Εθνικό Δείκτης θανάτου για τον εντοπισμό των θανάτων μεταξύ των nonrespondents σε κάθε ερωτηματολόγιο δύο ετών. Το μηχανογραφημένο Εθνικό Δείκτης θανάτου είναι μια ιδιαίτερα ευαίσθητη μέθοδος για τον εντοπισμό των θανάτων σε αυτή την ομάδα [32]. Για όλους τους θανάτους που οφείλονται σε καρκίνο του παχέος εντέρου, ζητήσαμε την άδεια από τα μέλη της οικογένειας (που υπόκεινται σε κρατική ρύθμιση) για την επανεξέταση των ιατρικών αρχείων. Έχουμε λάβει επιτυχώς δείγματα για το 58% των περιπτώσεων (n = 527) πάνω από 22 χρόνια παρακολούθησης στο NHS. Δεν υπήρχε σημαντική διαφορά στα δημογραφικά ή έκθεση μεταβλητές μεταξύ των περιπτώσεων με τις διαθέσιμες ιστού και εκείνων που δεν διατίθενται ιστού [33].

Γονιδιωματική εξαγωγή DNA και αλληλούχιση του

BRAF

Η

Γονιδιωματική DNA από εγκλεισμένο σε παραφίνη ιστός εκχυλίστηκε, και ενίσχυση ολόκληρο το γονιδίωμα εκτελέστηκε με PCR χρησιμοποιώντας τυχαίους πριμοδότες 15-μερούς [34]. PCR και αλληλούχιση στόχο για

BRAF

κωδικόνιο 600 εκτελέστηκαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [35].

Real-time PCR (MethyLight) για την ποσοτική μεθυλίωσης του DNA

Για να προσδιορίσετε την κατάσταση CIMP , έχουμε ποσοτικά μεθυλίωση του DNA σε οκτώ CIMP-ειδικούς προαγωγούς. Κατεργασία όξινου θειώδους για γονιδιωματικό ΟΝΑ και επακόλουθη πραγματικού χρόνου PCR (MethyLight) [36] επικυρώθηκαν και εκτελέστηκαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [37]. Οι οκτώ CIMP ειδικά προαγωγούς που έχουμε ποσοτικά (

CACNA1G

,

CDKN2A

(p16),

CRABP1

,

IGF2

,

MLH1

,

NEUROG1

,

RUNX3

, και

SOCS1

) [5], [38] επιλέχθηκαν από τον έλεγχο ασφαλείας των 195 CpG νησίδων [5], [39] . CIMP-υψηλής ορίστηκε ως ≥6 /8 μεθυλιωμένου δείκτες με τη χρήση της σήμανσης οκτώ CIMP πάνελ, και CIMP-χαμηλή /0 ορίστηκε ως 0/8 έως 5/8 μεθυλιωμένη δείκτες, σύμφωνα με τα προηγουμένως ορισθέντα κριτήρια [38]. Σε δευτερεύουσες αναλύσεις, προσθέσαμε οκτώ περισσότερους δείκτες (

CHFR

,

MGMT

,

P14

,

WRN

,

HTC1

,

MINT1

,

MINT31

,

IGFBP3

) [7] για ένα πάνελ 16-δείκτη. Χρησιμοποιώντας αυτόν τον πίνακα 16-δείκτη, δημιουργήσαμε δύο κατηγορίες CIMP (CIMP-υψηλή ορίζεται ως ≥11 /16 μετουσιωμένο δείκτες? Και CIMP-χαμηλό /0 ως 0/16 έως 10/16 μετουσιωμένο δείκτες). Συμφωνία της CIMP-υψηλής διάγνωση μεταξύ των πινάκων 8 σήμανσης και 16-δείκτη ήταν υψηλή. (0,97? K = 0,89) [7]

Στατιστική Ανάλυση

Εμείς αποκλείονται οι γυναίκες που δεν ολοκληρώθηκε απίθανο διαιτητικά στοιχεία της βασικής γραμμής 1,980 διαιτητικές ερωτηματολόγιο ή καταγράφονται (n = 29.279), ανέφεραν μια βασική γραμμή ιστορικό καρκίνου (εκτός τον καρκίνο του δέρματος μη-μελανώματος? n = 3627), η φλεγμονώδης νόσος του εντέρου, κληρονομική μη-πολυποειδούς καρκίνο του παχέος εντέρου, ή σύνδρομο οικογενούς πολυποδίασης ( n = 103), ή είχε πεθάνει πριν από την έναρξη (n = 1). Μετά από αυτές τις εξαιρέσεις, 88.691 γυναίκες ήταν επιλέξιμες για την ανάλυση και δεδουλευμένα παρακολούθηση του χρόνου αρχίζει από την μήνα μετά την επιστροφή του αρχικού ερωτηματολογίου τους και καταλήγουν στο μήνα της διάγνωσης του καρκίνου του παχέος εντέρου, του θανάτου από άλλες αιτίες, ή 1 Ιουνίου 2002 όποιο ήρθε πρώτα. Σε μια προηγούμενη ανάλυση αυτής της σειράς, φυλλικό οξύ πρόσληψη συσχετίστηκε σημαντικά με τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου, αλλά δεν είχε καμία επίδραση στον κίνδυνο καρκίνου του ορθού [26]? ως εκ τούτου, δεν είχαμε εξετάσει καρκίνο του ορθού περιστατικό μεταξύ των συμμετεχόντων στη μελέτη σε αυτή την ανάλυση. Όπως ορθού περιπτώσεων καρκίνου, περιπτώσεις καρκίνου του παχέος εντέρου, για τα οποία δεν μπορέσαμε να ποσοτικοποιηθεί μεθυλίωσης του DNA είχαν λογοκριθεί από τις αναλύσεις κατά την ημερομηνία της διάγνωσης και δεν περιλήφθηκαν τελικά σημεία.

Εμείς υπολογίζονται τα ποσοστά εμφάνισης καρκίνου του παχέος εντέρου για τους συμμετέχοντες σε μια συγκεκριμένη κατηγορία πρόσληψη φυλλικού οξέος από τη διαίρεση του αριθμού των περιπτώσεων περιστατικό με τον αριθμό των ατόμων-ετών. Εμείς υπολογίζεται σε σχέση με τους κινδύνους (RR) με τη διαίρεση του ποσοστού επίπτωσης σε μία κατηγορία από το ποσοστό επίπτωσης στην κατηγορία αναφοράς και χρησιμοποιείται αναλογικών κινδύνων κατά Cox μοντέλων για τον έλεγχο για πολλαπλές μεταβλητές και ταυτόχρονα να υπολογιστεί το 95% διαστήματα εμπιστοσύνης (CI). Με την εξαίρεση του φυλλικού οξέος, βιταμίνης Β

6, μεθειονίνη, και το αλκοόλ, για την οποία χρησιμοποιήσαμε βασικές πληροφορίες σε πρωτογενείς αναλύσεις μας, χρησιμοποιήσαμε τις πιο ενημερωμένες πληροφορίες για όλους τους συμπαράγοντες πριν από κάθε διάστημα δύο ετών.

για να συγκριθεί η συγκεκριμένη επίδραση της πρόσληψης φυλλικού οξέος και άλλων θρεπτικών συστατικών στον κίνδυνο για καρκίνο του παχέος εντέρου, σύμφωνα με CIMP και

BRAF

κατάσταση, χρησιμοποιήσαμε μια προηγουμένως περιγραφείσα μέθοδο ανταγωνιστικών ανάλυσης κινδύνου που χρησιμοποιούν οι επικαλύψεις μέθοδο Cox παλινδρόμησης [40], [41]. Αυτή η μεθοδολογία επιτρέπει την εκτίμηση των ξεχωριστοί συντελεστές παλινδρόμησης για θρεπτικών συστατικών πρόσληψη στρωματοποιημένη από τον τύπο της έκβασης [π.χ. CIMP-υψηλής καρκίνο εναντίον CIMP-χαμηλό καρκίνο του /0?

BRAF

μετάλλαξη (+) έναντι (-)]. Εκτιμήσαμε την στατιστική σημαντικότητα της αλληλεπίδρασης μεταξύ των εκτιμήσεων κινδύνου σύμφωνα με τον τύπο του όγκου χρησιμοποιώντας ένα τεστ λόγου πιθανοφάνειας που σε σύγκριση με το μοντέλο που επιτρέπεται για ξεχωριστές ενώσεις του φολικού οξέος και άλλων θρεπτικών συστατικών, σύμφωνα με CIMP /

BRAF

κατάσταση με ένα μοντέλο ότι ανέλαβε μια κοινή ένωση. Εμείς συντηρητικά ερμηνεύεται στατιστική σημαντικότητα των ευρημάτων, λόγω των πολλαπλών έλεγχο υποθέσεων. Προκειμένου να ληφθούν υπόψη πολλαπλές δοκιμές (πέντε θρεπτικά συστατικά μία-άνθρακα εξετάστηκαν) θα ρυθμιστεί το επίπεδο σημαντικότητας για p = 0,01 (= 0,05 /5). Χρησιμοποιήσαμε SAS έκδοση 9.1.3 (Cary, NC) για όλες τις αναλύσεις. Όλες οι τιμές P είναι δύο όψεων.

Αποτελέσματα

Μεταξύ 88.691 γυναικών που περιλαμβάνονται σε αυτές τις αναλύσεις, τα άτομα με πρόσληψη φυλλικού οξέος αρχική τιμή κάτω των 200 μg /ημέρα ήταν ελαφρώς πιο πιθανό να καπνίζουν και να είναι καθιστική ζωή, σε σύγκριση με τις γυναίκες με 400 μg ημερησίως πρόσληψη φυλλικού οξέος ή περισσότερο (Πίνακας 1). Θα ήταν επίσης λιγότερο πιθανό να χρησιμοποιήσουν ασπιρίνη ή μετεμμηνοπαυσιακές ορμόνες τακτικά. Επιπλέον, μόνο το 8% των γυναικών με λιγότερα από 200 μg /ημέρα πρόσληψη φυλλικού οξέος που χρησιμοποιούνται πολυβιταμίνες, ενώ μεταξύ εκείνων με 400 μg φυλλικού οξέος ή περισσότερο την ημέρα, το 84% ανέφερε την τρέχουσα χρήση πολυβιταμινών. Περαιτέρω λεπτομέρειες έχουν αναφερθεί αλλού [42].

Η

τεκμηριωμένες 375 νέες περιπτώσεις καρκίνου του παχέος εντέρου προσιτά για την ποσοτικοποίηση της μεθυλίωσης του DNA κατά τη διάρκεια 1.861.934 άτομα-έτη. Χρησιμοποιώντας δοκιμασίες μεθυλίωσης του DNA σε αυτά τα 375 καρκίνους του παχέος εντέρου, 87 (23%) όγκους βρέθηκαν να είναι CIMP-υψηλής. Ομοίως,

BRAF

μεταλλάξεων κατάσταση ήταν διαθέσιμες για 386 προσιτές περιπτώσεις καρκίνου του παχέος εντέρου περιστατικό τεκμηριωθεί κατά την διάρκεια 1.861.927 χρόνια άτομο, εκ των οποίων 86 (22%) ήταν

BRAF

μεταλλαχθεί.

Όπως σε προηγούμενες μελέτες μας [18], [26], [43], [44], παρατηρήσαμε μια αντίστροφη σχέση μεταξύ φολικού οξέος και βιταμίνης Β

6 πρόσληψη και τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου μεταξύ όλων των περιπτώσεων ομάδα μας (πίνακες 1 και 2 ).

η

Αξιολογήσαμε περαιτέρω την επίδραση των θρεπτικών συστατικών ενός άνθρακα στον κίνδυνο για καρκίνο του παχέος εντέρου, σύμφωνα με το καθεστώς CIMP στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Συνολικά, καμία από τις ενώσεις που εξετάστηκαν έφθασε στατιστική σημαντικότητα σε συντηρητική επίπεδο σημαντικότητας (p = 0.01). Για συνολική πρόσληψη φυλλικού οξέος (Πίνακας 2), το όφελος από την κατανάλωση πέραν των 200 μg ημερησίως φάνηκε να περιορίζεται σε CIMP-χαμηλό /0 καρκίνους. Σε σύγκριση με τις γυναίκες με λιγότερα από 200 μg φυλλικού οξέος ημερησίως, την πολυμεταβλητή RR για την ανάπτυξη της CIMP χαμηλής /0 καρκίνου του παχέος εντέρου μεταξύ εκείνων που αναφέρουν 400 μg ή περισσότερα από πρόσληψη φυλλικού οξέος ανά ημέρα ήταν 0,73 (95% CI, 0,53 – 1,02? P για την τάση = 0,15) αν και η στατιστική σημαντικότητα δεν επιτεύχθηκε. Σε αντίθεση, η συνολική πρόσληψη φυλλικού οξέος δεν είχε καμία επίδραση στον κίνδυνο CIMP-υψηλών όγκων (RR, 0,98? 95% CI, 0,54 έως 1,77).

Εξετάσαμε περαιτέρω την επίδραση της βιταμίνης Β

6 και B

12 πρόσληψη ανάλογα με την κατάσταση CIMP (Πίνακας 2). Το όφελος της βιταμίνης Β

6 πρόσληψη εμφανιστεί επίσης περιορίζεται σε CIMP-χαμηλό /0 καρκίνου (πολυμεταβλητή RR 0,77? 95% CI, 0,48 έως 1,23 συγκρίνοντας ακραία πεμπτημόρια), ενώ Β

6 πρόσληψη δεν είχε καμία επίδραση στον κίνδυνο της CIMP-υψηλών όγκων. Ωστόσο, δεν υπήρχε διαφορική επίδραση της βιταμίνης Β

12 σχετικά με τον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου κατά όγκων κατάσταση CIMP και καμία από τις παρατηρούμενες συσχετίσεις έφθασε στατιστική σημαντικότητα.

Επίσης εξετάσαμε την επίδραση της πρόσληψης της μεθειονίνης και της πρόσληψης αλκοόλ σύμφωνα στην κατάσταση CIMP (Πίνακας 2). φαινόταν να είναι μια συγκρατημένα μεγαλύτερη μείωση του κινδύνου CIMP υψηλής καρκίνους με αύξηση της πρόσληψης μεθειονίνη εκεί. Δεν παρατηρήσαμε μια σημαντική επιρροή της κατανάλωσης αλκοόλ στον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου, και το αποτέλεσμα δεν φαίνεται να διαφέρουν ανάλογα με την κατάσταση CIMP.

Όταν χρησιμοποιείτε πίνακα 16-δείκτη μας, σε γενικές γραμμές, τα αποτελέσματα παρέμειναν αμετάβλητες (τα δεδομένα δεν φαίνεται).

Ομοίως, για

BRAF

κατάσταση μετάλλαξης, κανένας από τους εξετάζονται τα θρεπτικά συστατικά που εμφανίζονται σημαντικές επιπτώσεις συνολικά, ή με κατάστασης μεταλλάξεων (πίνακας 3).

η

Συζήτηση

τρέχουσα μελέτη μας είναι μια πρωτότυπη μελέτη σε «

Μοριακής Παθολογικής Επιδημιολογίας

«, η έννοια των οποίων έχει περιγραφεί πρόσφατα και ενοποιήθηκε με Ogino et al. [45]. Αντιπροσωπεύει ένα σχετικά νέο, εξειδικευμένο τομέα της επιδημιολογίας με βάση το μοριακό χαρακτηρισμό του καρκίνου. Στη μοριακή παθολογική επιδημιολογία, ένα γνωστό ή υπάρχουν υπόνοιες ότι αιτιολογικός παράγοντας εξετάζεται σε σχέση με ένα συγκεκριμένο σωματικό μοριακή αλλαγή, προκειμένου να αποκτήσουν γνώσεις σχετικά με την καρκινογόνο μηχανισμό [45]. Ας υποθέσουμε, ένα δεδομένο αιτιολογικός παράγοντας (τρόπος ζωής, διατροφικές, περιβαλλοντικές ή γενετικές) υποτίθεται να προκαλέσει σε κάποιο σωματικό μοριακή αλλαγή. Αν μπορούμε να δείξουμε μια ειδική σχέση μεταξύ του αιτιολογικός παράγοντας και η μοριακή αλλαγή, μπορεί να παρέχει αποδείξεις για την αιτιότητα. Επιπλέον, για ένα άτομο που έχει μια ευαισθησία σε ένα συγκεκριμένο σωματικό μοριακή αλλαγή που οδηγεί σε καρκίνο, μπορεί να είμαστε σε θέση να αναπτύξει ένα εξατομικευμένο προληπτικό μέτρο, το οποίο στοχεύει συγκεκριμένα μόρια ή πορείες [45]. Ως εκ τούτου, η μοριακή παθολογική έρευνα επιδημιολογία μπορεί να συμβάλει στην αποκρυπτογράφηση του καρκινογόνου διαδικασία, καθώς και τη βελτιστοποίηση των στρατηγικών πρόληψης [45].

Σε αυτή την προοπτική μελέτη κοόρτης, βρήκαμε προτάσεις για τόσο χαμηλά φυλλικό οξύ και βιταμίνη Β

6 προσλήψεις να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο CIMP-χαμηλού /μηδέν καρκίνων του παχέος εντέρου, αλλά όχι με εκείνη του CIMP-υψηλής όγκους. Η αύξηση του κινδύνου περιορίστηκε κυρίως στους συμμετέχοντες με τα χαμηλότερα επίπεδα φυλλικού οξέος και βιταμίνης Β

6 πρόσληψη. Επιπλέον, παρατηρήσαμε ότι η επίδραση ενός υψηλότερη πρόσληψη της μεθειονίνης στον κίνδυνο καρκίνου του παχέος εντέρου συγκρατημένα διέφεραν από καρκινική κατάσταση CIMP, με την ευεργετική επίδραση της μεθειονίνης περιορίζεται κυρίως σε CIMP-υψηλή καρκίνου. Δεν υπήρχε διαφορά στα αποτελέσματα του φολικού οξέος ή Β βιταμινών σε καρκίνους του παχέος εντέρου στρωματοποιημένη από

BRAF

κατάσταση. Επιπλέον, καμία από τις παρατηρούμενες συσχετίσεις δεν ήταν στατιστικά σημαντική.

Μηχανιστικά, φαίνεται εύλογο ότι η χρόνια έλλειψη φυλλικού οξέος μπορεί να εμπλέκονται σε CpG νησί μεθυλίωση [46]. Σε ένα ιαπωνικό πληθυσμό, μειωμένη δραστηριότητα του ενζύμου μεθυλενετετραϋδροφυλλικού αναγωγάσης (MTHFR), λόγω του

MTHFR

κωδικόνιο 429 παραλλαγή (rs1801131), αλλοιώνοντας έτσι το φυλλικό οξύ μεταβολισμό, έχει συνδεθεί με CIMP-υψηλή όγκους στο εγγύς κόλον [ ,,,0],47]. Σε έναν Καυκάσιο πληθυσμό, γενετική παραλλαγή στο

MTHFR

παραλλαγή rs1801131 φαίνεται να αυξάνουν τον κίνδυνο της CIMP υψηλών όγκων του παχέος εντέρου [48], [49] αν και αυτό δεν έχει επιβεβαιωθεί από τα δεδομένα των Κάτω Χωρών Cohort Study [22] , [50]. Η σχέση μεταξύ του

MTHFR

SNP και CIMP στον καρκίνο του παχέος εντέρου είναι ισχυρή σε συνδυασμό με χαμηλή πρόσληψη φολικού οξέος και της μεθειονίνης, καθώς και υψηλή κατανάλωση αλκοόλ [49], [51]. Μια πιο πρόσφατη μελέτη δείχνει ότι η χαμηλή έκφραση της υδρολάσης γάμμα-γλουταμυλ (GGH) συνδέεται στενά με CIMP-υψηλή όγκων, παρέχοντας περαιτέρω υποστήριξη για ένα ρόλο του μεταβολισμού ενός άνθρακα σε αυτό το φαινότυπο [52].

μελέτη πριν από την περίπτωση ελέγχου των 1.154 όγκων του παχέος εντέρου αξιολόγησε την επίδραση της πρόσληψης θρεπτικών συστατικών ενός άνθρακα για CIMP καθώς και

BRAF

κατάσταση σε αυτούς τους όγκους και τους βρήκε να μην συνδέονται είτε με CIMP-υψηλή ή

BRAF

μετάλλαξη [51]. Ωστόσο, σε σύγκριση με την τρέχουσα μελέτη μας, nonquantitative μεθυλίωσης-ειδική PCR σε ένα διαφορετικό πίνακα νησί CpG, και ένα λιγότερο αυστηρό ορισμό της CIMP-υψηλή (2 ή περισσότερα από 5 δείκτες μεθυλιωμένων) χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη. Είναι ενδιαφέρον ότι, οι συγγραφείς παρατήρησαν επίσης ότι η παχυσαρκία συσχετίστηκε με δύο φορές τον κίνδυνο να έχουν ένα μη-CIMP υψηλή όγκου [51]. Στη μελέτη μας, μετά από προσεκτική προσαρμογή για την παχυσαρκία, τόσο φυλλικό οξύ και βιταμίνη Β

6 (η πρόσληψη των οποίων έχει υψηλή συσχέτιση με τον πληθυσμό μας) σχετίστηκαν με τον κίνδυνο της CIMP χαμηλής /0 όγκους.

μια άλλη μελέτη περίπτωσης χωριστά εντός των Κάτω Χωρών Cohort Study, ασθενείς με ορθοκολικό καρκίνο στην ομάδα χαμηλή πρόσληψη φολικού οξέος /υψηλό αλκοόλ είναι πιο πιθανό να έχουν υπερμεθυλίωση προαγωγού από τους ασθενείς στην /ομάδα χαμηλής αλκοόλ υψηλή φυλλικό οξύ [53]. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η Ολλανδία Cohort Study έχει δείξει μια πιθανή σχέση μεταξύ της βιταμίνης Β

6 και

MLH1

μεθυλίωση [22] και μια αντίστροφη σχέση μεταξύ

MTR

rs1805087 πολυμορφισμό και CIMP σε άνδρες [22 ].

σε ένα από τα πιο πρόσφατη μελέτη για την αξιολόγηση των ενώσεων μεταξύ του μεταβολισμού ενός άνθρακα και του καρκίνου του παχέος εντέρου κατά CIMP /

BRAF

κατάσταση, μέχρι σήμερα, χρησιμοποιώντας μια ένθετη προσέγγιση περίπτωση ελέγχου εντός της Βόρεια Σουηδία Υγεία και μελέτη των Νόσων (190 περιπτώσεις και 1:02 μάρτυρες) [24], van Guelpen et al. παρουσιάζουν χαμηλότερο κίνδυνο CIMP χαμηλής /CIMP-υψηλής παχέος όγκους με πολύ χαμηλά επίπεδα φυλλικού οξέος. Συλλογικά, υπάρχει συσσώρευση στοιχεία για την υπόθεση ότι η ισορροπία μεταξύ των διαφόρων μεταβολικών ενδιάμεσα της μεθυλο-ομάδας επηρεάζει ειδικής θέσεως CpG αντίδραση νησί μεθυλίωσης. Αξιοποιώντας δεδομένα από ένα δίκη πρόληψη αδένωμα του φολικού οξέος και της ασπιρίνης, τέλος, τα υψηλότερα επίπεδα φολικού οξέος RBC, αλλά όχι μεγαλύτερη κατανάλωση διαιτητικών φολικών, συνδέθηκε με υψηλότερα επίπεδα μεθυλίωσης [21].

Εκτός επιρροή των θρεπτικών συστατικών ενός άνθρακα , τα στοιχεία δείχνουν ότι οι τοπικές πλαίσιο ακολουθία DNA μπορεί να επηρεάσει τη συναρμολόγηση του εξοπλισμού αντίδραση μεθυλίωσης και ειδικής θέσεως μεθυλίωσης του DNA. Μελέτες έχουν δείξει ότι

cis-δράσης

στοιχεία αιτία αλληλόμορφο-ειδική μεθυλίωση στο γονιδίωμα των θηλαστικών [54], [55], [56]. Έτσι, παραλλαγές βλαστικής σειράς στο

cis-δράσης

στοιχεία μπορεί να επηρεάσουν την επιγενετική κατάσταση συμπεριλαμβανομένων μεθυλίωσης του DNA. Η

MLH1

rs1800734 SNP υποκινητή έχει συσχετισθεί με

MLH1

μεθυλίωση προαγωγού [57], [58] και MSI [59] σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Μια άλλη μελέτη έδειξε ότι

MGMT

rs16906252 SNP υποκινητή συνδέεται στενά με το

MGMT

μεθυλίωση προαγωγού και η απώλεια της έκφρασης σε καρκίνο του παχέος εντέρου [60], και με το

MGMT

μεθυλίωση σε κυττάρων περιφερικού αίματος και φυσιολογικό βλεννογόνο του κόλου σε άτομα χωρίς καρκίνο του παχέος [61], [62]. Απομένει να διερευνηθεί εάν αυτά ή άλλα

cis-δράσης

παραλλαγές βλαστική αλληλεπιδρούν με άλλους παράγοντες one-άνθρακα που σχετίζονται με την τροποποίηση ευαισθησία σε παρεκκλίνουσα μεθυλίωση του DNA.

Η μελέτη μας έχει πολλές σημαντικές δυνάμεις. Πρώτον, γιατί συγκέντρωσε τις λεπτομερείς, ενημερωμένες πληροφορίες σχετικά με τον αριθμό των διατροφικών συνηθειών και του τρόπου ζωής συμπαράγοντες που σχετίζονται με την καρκινογένεση του παχέος εντέρου πάνω από 22 χρόνια παρακολούθησης και με υψηλά ποσοστά παρακολούθησης, ήμασταν σε θέση να εξετάσουν μακροπρόθεσμες εκθέσεις σε θρεπτικά συστατικά το ένα του άνθρακα και να ληφθούν υπόψη σημαντικές συγχυτικούς παράγοντες. Δεύτερον, η μελέτη μας είναι η προοπτική, εξαλείφοντας τις ανησυχίες για διαφορική προκατάληψη ανάκληση, ιδίως όσον αφορά τις διατροφικές εκτιμήσεις μας. Οποιοδήποτε υπόλοιπο προκατάληψη από τον εσφαλμένο χαρακτηρισμό της έκθεσης ήταν έτσι πιθανό nondifferential από τη φύση, την πόλωση αποτελέσματά μας μόνο προς το null. Περαιτέρω, έχουμε συνδεθεί με επιτυχία αυτές τις θρεπτικές ουσίες, όπως αξιολογήθηκε μέσω ενός ερωτηματολογίου ημιποσοτική συχνότητας κατανάλωσης τροφίμων (SFFQ) -για άλλες σχετικές παραμέτρους σε προηγούμενες αναλύσεις, που δείχνει ότι το σφάλμα μέτρησης δεν είναι αρκετά μεγάλη για να κρύψει καμία πραγματική ενώσεις.

Περιορισμοί της σημείωσης σχετίζονται με φυλλικό οξύ οχύρωση, η οποία έγινε υποχρεωτική το 1998 [63]. Έχουμε πολλαπλές εκτιμήσεις πρόσληψη θρεπτικών συστατικών ενός άνθρακα πριν από την οχύρωση. Επιπλέον, τα αποτελέσματα μας παρέμεινε αμετάβλητο όταν περιορίζεται στις περιπτώσεις που προέκυψαν πριν από το φυλλικό οξύ οχύρωση (1998), η οποία έχει επίσης αποδειχθεί σε προηγούμενες αναλύσεις [20], [42], [64]. Άλλοι περιορισμοί και προειδοποιήσεις ειδικά για μοριακή παθολογική επιδημιολογία σε γενικές γραμμές έχουν συζητηθεί αλλού [45]

Δεν μπορούμε να αποκλείσουμε την πιθανότητα υπολειπόμενης σύγχυση ως μια πιθανή εξήγηση για τα ευρήματά μας.? παρ ‘όλα αυτά, στην πολυπαραγοντική μας αναλύει τα οποία περιλαμβάνονται πολλά γνωστά ή ύποπτα παράγοντες κινδύνου για καρκίνο του παχέος εντέρου, οι εκτιμήσεις πολλών μεταβλητών κινδύνου δεν διαφέρουν ουσιωδώς από τα αποτελέσματα προσαρμοσμένη στην ηλικία. Περαιτέρω, ήμασταν σε θέση να λάβει ιστό του όγκου από όλες τις περιπτώσεις επιβεβαιωμένης καρκίνου του παχέος εντέρου ανιχνεύθηκε σε ομάδα μελέτης Nurses ‘Health, αλλά οι παράγοντες κινδύνου σε αυτές τις περιπτώσεις δεν διαφέρουν σημαντικά από εκείνες τις περιπτώσεις με τον ιστό του όγκου διαθέσιμα. Τέλος, ακόμη και πριν από την εντολή οχύρωση το 1998 [63], οι συμμετέχοντες μας είχε ακόμη σχετικά υψηλό φυλλικού οξέος και βιταμίνης Β

6 επίπεδα. Ως εκ τούτου, είναι πιθανό ότι μπορεί να έχουμε βρει ακόμη ισχυρότερη ενώσεις στην παρούσα μελέτη, εάν τα επίπεδα φολικού οξέος μας θα περιλάμβανε ένα ακόμη χαμηλότερο εύρος.

Εν ολίγοις, έχουμε αποδείξει ότι η μείωση του κινδύνου του καρκίνου του παχέος εντέρου σχετίζεται με κορεσμένη φυλλικό οξύ κατάσταση είναι κάπως περιορισμένη σε CIMP-χαμηλό /0 καρκίνους. Πρόσθετες μελέτες είναι απαραίτητο να διευκρινίσει τον ακριβή μηχανισμό της μια ανωμαλία στο μεταβολισμό ενός άνθρακα που οδηγούν σε παρεκκλίνουσα CpG νησί μεθυλίωση.

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε Caroline Niu για την υποστήριξη του προγραμματισμού, και η συμμετέχοντες της μελέτης Nurses ‘Health για τη συνεργασία και τη συμμετοχή τους.