Αφηρημένο

MTDH

(metadherin), ένα σημαντικό ογκογονίδιο που είναι ευρέως υπερεκφράζεται σε διάφορους καρκίνους, είναι ένας πιθανός βιολογικός δείκτης της κακοήθειας του όγκου. Παραλλαγές σε

MTDH

έχουν συσχετιστεί με ευαισθησία σε καρκίνο του μαστού. Ωστόσο, υπάρχουν μελέτες που αξιολογούν

έχουν MTDH

πολυμορφισμούς γονιδίων και το δυναμικό της σχέσης τους με την ευαισθησία του καρκίνου των ωοθηκών έχουν αναφερθεί. Έτσι, διερευνήσαμε τη συσχέτιση των

MTDH

(-470G & gt? Α) πολυμορφισμού με την ανάπτυξη καρκίνου των ωοθηκών σε 145 ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών και 254 ταιριαστούς μάρτυρες, χρησιμοποιώντας ανάλυση της αλληλουχίας. Βρήκαμε ότι το

MTDH

(-470G & gt? Α) πολυμορφισμός ήταν στατιστικά συσχετίζονται με τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών (κάτω από το προσθετικό γενετικό μοντέλο, ΦΕΚ εναντίον GA vs AA, P = 0,042). Σε σύγκριση με γονότυπους που περιέχει το αλληλόμορφο G (ΦΕΚ και GA), ο γονότυπος ΑΑ μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών (P = 0.0198, OR = 0,33, 95% CI [0.12~0.78]). Σε σύγκριση με το αλληλόμορφο G, ο Α αλληλόμορφο είναι προστατευτική έναντι του κινδύνου καρκίνου των ωοθηκών (Ρ = 0,01756, OR = 0.66, 95% CI [0.46~0.93]). Επιπλέον, μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ του GG και GA + γονότυπους ΑΑ και το κλινικό στάδιο παρατηρήθηκε (P = 0,038). Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι το

MTDH

(-470G & gt? Α) θα μπορούσε να αποτελέσει ένα χρήσιμο μοριακό δείκτη για την εκτίμηση του κινδύνου καρκίνου των ωοθηκών και για την πρόβλεψη του καρκίνου των ωοθηκών πρόγνωση των ασθενών

Παράθεση:. Yuan C, Λι Χ, Γιαν S, Yang Q, Liu Χ, Κονγκ Β (2012) Η

MTDH

(-470G & gt? Α) Πολυμορφισμός σχετίζεται με καρκίνο των ωοθηκών Ευαισθησία. PLoS ONE 7 (12): e51561. doi: 10.1371 /journal.pone.0051561

Επιμέλεια: Goli Σαμίμι, Kinghorn Κέντρο Καρκίνου, Garvan Institute of Medical Research, Αυστραλία

Ελήφθη: 5 Οκτωβρίου 2012? Αποδεκτές: 2 Νοέμβρη του 2012? Δημοσιεύθηκε: 11, Δεκεμβρίου του 2012

Copyright: © 2012 Yuan et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Εθνικό Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της Κίνας (81001166, 30872738), Ίδρυμα Φυσικών Επιστημών της επαρχίας Shandong (ZR2010HQ050), Ίδρυμα Shandong Υπουργείο Δημόσιας Υγείας (2009Q2012), η Κίνα Ίδρυμα Μεταδιδακτορικός Science (201.104.636, 20100471551), Ανεξάρτητο Ίδρυμα Καινοτομίας Πανεπιστήμιο Shandong (2012TS142). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος των ωοθηκών έχει το υψηλότερο ποσοστό θνησιμότητας όλων των γυναικείων κακοηθειών αναπαραγωγικό σύστημα, και το 2008 υπήρχαν περίπου 225.500 νέα περιστατικά και 140.200 θανάτους παγκοσμίως [1]. Όπως συμβαίνει για πολλές κακοήθειες, καρκίνο των ωοθηκών είναι μια πολυπαραγοντική νόσος, και ορμονικοί παράγοντες, επούλωση τραυμάτων και η φλεγμονή μπορεί να διαδραματίσουν ένα ρόλο στην ανάπτυξη της. Οι αλληλεπιδράσεις μεταξύ του περιβάλλοντος και γενετικοί παράγοντες παίζουν επίσης σημαντικό ρόλο [2]. Πολλές μελέτες έχουν ερευνήσει την γενετική βάση της ευαισθησίας στον καρκίνο των ωοθηκών. Για παράδειγμα,

BRCA1

,

BRCA2

,

MLH1

,

MSH2

,

RAD51C

,

RAD51D

,

RB1 ​​

,

SMAD6

,

CASP8

, και

LIN28B

έχουν όλα ενοχοποιηθεί για καρκίνο των ωοθηκών [3], [4], [5 ], [6], [7], [8], [9], [10]. Πρόσφατα, μελέτες συσχέτισης γονιδιώματος-ευρεία (GWAS) έχουν βρει ισχυρές συσχετίσεις μεταξύ του καρκίνου των ωοθηκών και πολλά κοινά αλληλόμορφα ευαισθησίας σε τέσσερις τόπους [11], [12], [13]. Braem et al. επανεξετάζονται 147 υποψήφια γονίδια, και οι 3 GWAS μελέτες που δημοσιεύονται από το 1990 έως τον Οκτώβριο του 2010 προέκυψε, περίπου 1100 γενετικές παραλλαγές σε περισσότερα από 200 υποψήφια γονίδια και 20 διαγονιδιακές περιοχές [8]. Ωστόσο, οι σχέσεις μεταξύ γνωστών γενετικών παραλλαγών και τον καρκίνο των ωοθηκών περιορισμένες, και περισσότερες μελέτες χρειάζεται να διενεργείται για τη διαλεύκανση αιτιώδη γενετικές παραλλαγές και διευκολύνει τον εντοπισμό των υψηλού κινδύνου υποομάδες εντός του γενικού πληθυσμού [5].

MTDH

, επίσης γνωστή ως αστροκυττάρων αυξημένα γονίδιο-1 (

AEG-1

) και

Λυρική

, ταυτοποιήθηκε αρχικά ως HIV-επαγώγιμο γονίδιο σε πρωτογενείς εμβρυϊκά αστροκύτταρα ανθρώπινο [14] .

MTDH

βρίσκεται στο 8q22, αποτελείται από 12 εξώνια και 11 εσώνια και κωδικοποιεί μια πρωτεΐνη 582 αμινοξέων με ένα υπολογιζόμενο μοριακό βάρος των 64 kDa.

MTDH

υπερ-έκφραση έχει ανιχνευθεί σε οισοφαγικό καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων [15], γαστρικού καρκίνου [16], νεφρικό καρκίνο [17], του καρκίνου του προστάτη [18], μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα [19], ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [20], του καρκίνου του μαστού [21] – [22], και νευροβλάστωμα [23], σε σύγκριση με τα φυσιολογικά κύτταρα και τα συμφωνημένα μη νεοπλαστικά περιοχές [24]. Το επίπεδο του

MTDH

υπερ-έκφραση συσχετίστηκε σημαντικά με την ογκογένεση, εισβολή, τη μετανάστευση, την εξέλιξη, την αγγειογένεση [25], EMT (επιθηλιακό μετάβαση μεσεγχυματικά), χημειοαντίσταση και ραδιοαντοχή σε διάφορους τύπους καρκίνου [17], [26 ], [27], [28], [29], [30], [31]. MTDH overe-xPression συσχετίζεται με περιτοναϊκή διάχυση, μετάσταση στους λεμφαδένες, η Διεθνής Ομοσπονδία Γυναικολογίας και Μαιευτικής στάδιο, ιστολογικό βαθμό, παρουσία υπολειμματικού όγκου και υποτροπή του όγκου στον καρκίνο των ωοθηκών [32], [33]. Υψηλή

MTDH

έκφραση συσχετίστηκε με την εξέλιξη και την πρόγνωση του καρκίνου των ωοθηκών [32], [33].

Η ομάδα μας έχει επίσης προηγουμένως διαπιστωθεί ότι οι παραλλαγές στο

MTDH

είναι σημαντική συσχέτιση με τον καρκίνο του μαστού [34]. Ωστόσο, η ένωση των

MTDH

παραλλαγές με την ευαισθησία του καρκίνου των ωοθηκών δεν έχει διερευνηθεί

Αποτελέσματα

Η σχέση μεταξύ του

MTDH

(-470G & gt.? Α) Πολυμορφισμός και καρκίνου των ωοθηκών Κίνδυνος

Οι συμμετέχοντες στις ομάδες περίπτωση και ελέγχου ήταν όλοι από την ηπειρωτική Κίνα. Δεν υπήρχαν σημαντικές κλινικές διαφορές (δηλαδή, του δείκτη μάζας σώματος [BMI], διάμεση ηλικία, ιστορικό της εμμήνου ρύσεως ή άλλες σχετικές παραμέτρους) μεταξύ των 2 ομάδων.

Hardy-Weinberg ισορροπία έδειξε ότι οι chi-square τιμές του ομάδα υπόθεση και ομάδα ελέγχου ήταν 0,1 και 3,94, αντίστοιχα? και οι δύο ήταν p & gt? 0,05. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1, η

MTDH

(-470G & gt? Α) γονότυπους και διανομές αλληλόμορφο είχαν μια στατιστικά σημαντική διαφορά μεταξύ των ομάδων υπόθεση και ελέγχου. Παρατηρήσαμε μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση με τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών (το πρόσθετο γενετικό μοντέλο, ΦΕΚ εναντίον GA vs AA, P = 0,042). Χρησιμοποιώντας το κυρίαρχο γενετικό μοντέλο (ΦΕΚ + GA vs AA), παρατηρήσαμε μια στατιστικά σημαντική διαφορά στον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών (P = 0.0198, OR = 0,33, 95% CI [0,12 ~ 0. 78]). Αυτά τα δεδομένα έδειξαν ότι η ομόζυγη ΑΑ γονότυπο μπορεί να είναι προστατευτική έναντι της ανάπτυξης του καρκίνου των ωοθηκών και μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών. Το A αλληλόμορφο φαίνεται να είναι προστατευτική (Ρ = 0. 01756, OR = 0.66, 95% CI [0.46~0.93]) έναντι του καρκίνου των ωοθηκών. Τα αλληλουχίας χρωματογραφήματα από τυχαία επιλεγμένα περιπτώσεις χρησιμοποιούνται για να απεικονίσουν τις παραλλαγές του

MTDH

(Εικ. 1).

Α-Γ, τα αποτελέσματα χρωματογράφημα αλληλουχίας του GG γονότυπο, GA και ΑΑ, αντίστοιχα. Τα δείγματα επιλέγονται τυχαία

Η

Η σχέση μεταξύ του

MTDH

(-470G & gt? Α). Πολυμορφισμός και κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητές

Ο Πίνακας 2 δείχνει τη σύνδεση της οι γονότυποι GG και GA + AA με κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικά, όπως η ηλικία κατά τη διάγνωση, το βαθμό διαφοροποίησης του όγκου, το κλινικό στάδιο, λεμφικό μετάσταση στους λεμφαδένες, έκφραση CA125, το μέγεθος του όγκου και ιστολογία του όγκου. Μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση με το κλινικό στάδιο βρέθηκε (P = 0,038). Δεν σχέσεις μεταξύ του πολυμορφισμού και την ηλικία κατά τη διάγνωση, το βαθμό διαφοροποίησης του όγκου, λεμφικό μετάσταση στους λεμφαδένες, έκφραση CA125, το μέγεθος του όγκου ή ιστολογία του όγκου βρέθηκαν. Έτσι, η

MTDH

(-470G & gt? Α). Πολυμορφισμός μπορεί να είναι ένας δείκτης της κλινικής στάδιο του καρκίνου των ωοθηκών

Η

Η σχέση μεταξύ του

MTDH

(- 470g & gt? Α) πολυμορφισμός και MTDH πρωτεΐνη επίπεδα

Μελετήσαμε περαιτέρω την πιθανή σχέση μεταξύ του

MTDH

(-470G & gt? Α) πολυμορφισμό και το επίπεδο έκφρασης της πρωτεΐνης MTDH in vivo. Όπως φαίνεται στο Σχ. 2, τα επίπεδα της πρωτεΐνης MTDH σε 15 ωοθηκών καρκινικούς ιστούς ήταν σημαντικά υψηλότερες από εκείνες σε 17 φυσιολογικούς ιστούς (Ρ & lt? 0,01). Όπως φαίνεται στο Σχ. 2Β και 2C, η έκφραση της πρωτεΐνης MTDH ήταν υψηλότερη σε ασθενείς με τη GG ή γονότυπους GA σε σχέση με εκείνους με το γονότυπο ΑΑ, αλλά αυτές οι διαφορές δεν ήταν σημαντικές (Ρ & gt? 0,05). Τα ευρήματα αυτά υποδηλώνουν ότι το SNP -470G & gt?. Α δεν μπορεί να επηρεάσει σημαντικά την έκφραση του

MTDH

γονίδιο

Α, σχετικό επίπεδο έκφρασης της πρωτεΐνης MTDH σε ιστούς του καρκίνου των ωοθηκών σε σύγκριση με φυσιολογικούς ιστούς των ωοθηκών . Β, σχετικό επίπεδο έκφρασης πρωτεΐνης MTDH στους καρκινικούς ιστούς των ωοθηκών των ασθενών με διαφορετικές -470G & gt? A γονότυπους. C, σχετικό επίπεδο έκφρασης πρωτεΐνης MTDH σε φυσιολογικούς ιστούς των ατόμων με διαφορετικές -470G & gt? A γονότυπους. Ένας κύκλος αντιπροσωπεύει το μέσο όρο τριών ανεξάρτητων μετρήσεων από έναν ασθενή. Η κατανομή των τριών γονότυπων ήταν τυχαίες μεταξύ των ομάδων. Ν αντιπροσωπεύει τον αριθμό δειγμάτων των αντίστοιχων ομάδα. Ράβδοι αντιπροσωπεύουν την τυπική απόκλιση. t-test του Student χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει τις διαφορές στα επίπεδα έκφρασης των διαφορετικών κατασκευασμάτων.

Η

Συζήτηση

MTDH

διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στη βιολογία του όγκου, αυτό και εμπλέκεται σε μία ποικιλία όγκων βιολογικών συμπεριφορών. Η ομάδα μας ήταν ο πρώτος που ανακάλυψε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ

MTDH

και την ευαισθησία του όγκου: δηλαδή, ότι 2

MTDH

παραλλαγές που σχετίζονται με τον καρκίνο του μαστού [34]. Σε αυτή τη μελέτη, αναλύσαμε περαιτέρω διάφορες SNPs στο

MTDH

και βρήκε ένα άλλο SNP (rs16896059, -470G & gt? Α) με στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των περιπτώσεων και τον έλεγχο του καρκίνου των ωοθηκών ομάδες. Επιπλέον, rs16896059 ήταν στατιστικά σημαντική σχετιζόμενη με το κλινικό στάδιο του όγκου. Για το καλύτερο της γνώσης μας, αυτή είναι η πρώτη μελέτη παραλλαγή συνδέσμου

MTDH

SNPs και τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών. Αναμένουμε ότι

MTDH

θα αποτελέσει ένα χρήσιμο μοριακό δείκτη για την εκτίμηση του κινδύνου καρκίνου των ωοθηκών και για την πρόβλεψη του καρκίνου των ωοθηκών πρόγνωση του ασθενούς. Ωστόσο, η διαπίστωση αυτή πρέπει να επαληθεύεται σε ένα μεγαλύτερο δείγμα.

Η rs16896059 SNP βρίσκεται στον υποκινητή του

MTDH

και έτσι πολυμορφισμοί δεν μεταβάλλουν την αλληλουχία ή δομή της πρωτεΐνης. Ερευνήσαμε το επίπεδο έκφρασης πρωτεΐνης MTDH με κηλίδωση Western. Όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, τα επίπεδα έκφρασης του MTDH σε ιστούς καρκίνου των ωοθηκών ήταν σημαντικά υψηλότερα από τα επίπεδα σε φυσιολογικούς ιστούς παρακείμενα (Ρ & lt? 0,0001) [32], [33]. Ωστόσο, δεν βρέθηκε καμία στατιστικά σημαντική επίδραση της -470G & gt? Ένα SNP στην πρωτεΐνη έκφραση του

MTDH

γονιδίου σε ιστούς με καρκίνο των ωοθηκών ή των φυσιολογικών ιστών. Έτσι, καμία επίπτωση του SNP στο

MTDH

έκφραση ήταν εμφανής. Λόγω της -470G & gt? A SNP βρισκόταν στην περιοχή του υποκινητή, και τότε θα μπορούσε επίσης να επηρεάσει υποκινητή activeity. Ως εκ τούτου, η ένωση του

MTDH

(-470G & gt? Α) πολυμορφισμός με

MTDH

activeity υποκινητή και την επίδρασή της στην ανάπτυξη του καρκίνου των ωοθηκών θα πρέπει να μελετηθεί in vitro για την περαιτέρω διερεύνηση των μοριακών μηχανισμών που εμπλέκονται.

Όπως προαναφέρθηκε, οι περισσότεροι ασθενείς που συμμετείχαν στη μελέτη μας ζούσαν στην επαρχία Shandong, Κίνα. Λόγω της γενικής γενετική ομοιογένεια αυτής της εθνοτικής πληθυσμού, εμείς εικάζουν ότι τα ευρήματα αυτά θα είναι συνεπείς σε μεγαλύτερα μεγέθη δειγμάτων σε ολόκληρη την Κίνα. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ του

MTDH

πολυμορφισμό και τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών απαιτεί περαιτέρω διερεύνηση σε διαφορετικές εθνοτικές πληθυσμούς [34].

Εν κατακλείδι, το Α αλληλόμορφο του

MTDH

SNP rs16896059 (-470G & gt? α) είναι προστατευτική έναντι του καρκίνου των ωοθηκών, και η ομόζυγη ΑΑ γονότυπος μπορεί να είναι μια προστατευτική γονότυπο. Ο πολυμορφισμός είναι στατιστικά σημαντική συσχέτιση με το κλινικό στάδιο.

Υλικά και Μέθοδοι

Ασθενείς και δείγματα

Η μελέτη εγκρίθηκε από την Επιτροπή Δεοντολογίας του Πανεπιστημίου Shandong. Όλοι οι συμμετέχοντες έδωσαν γραπτή συγκατάθεση για να συμμετάσχουν σε αυτή τη μελέτη. 145 ασθενείς (μέση ηλικία 51,8 ± 13,1 χρόνια) συμμετείχαν στη μελέτη, διαγνώστηκε με καρκίνο των ωοθηκών σε Qilu Νοσοκομείο του Πανεπιστημίου της Shandong μεταξύ Σεπτεμβρίου 2008 και Ιουλίου 2011. Οι κλινικές πληροφορίες στοιχεία, όπως η ηλικία κατά τη διάγνωση, το βαθμό διαφοροποίησης, κλινικό στάδιο, θετική λεμφαδένα, CA125, το μέγεθος του όγκου και του όγκου ιστολογία ελήφθησαν από τα ιατρικά αρχεία των ασθενών. 254 ίδιας ηλικίας υγιείς γυναίκες (μέση ηλικία 49,2 ± 12,8 χρόνια) είχαν προσληφθεί ως μάρτυρας. Οι περισσότεροι συμμετέχοντες ήταν Κινέζοι Χαν που κατοικούν στην επαρχία Shandong, Κίνα. DNA από κυττάρων περιφερικού αίματος s εκχυλίζεται με TIANamp Genomic DNA Kit (Tiangen, Πεκίνο, Κίνα), με τις οδηγίες. Η καθαρότητα και η συγκέντρωση του DNA μετρήθηκε με φασματοφωτόμετρο υπεριώδους (GE Healthcare, USA). ϋΝΑ δείγματα συμβατικά αποθηκεύτηκαν στους -80 ° C όπως περιγράφηκε προηγουμένως [34], [35]

γονοτυπικός Ανάλυση του

MTDH

(-470G & gt? Α).

γονοτυπικός του rs16896059 SNP (-470G & gt? Α) πολυμορφισμός προσδιορίστηκε με PCR και τη μέθοδο προσδιορισμού αλληλουχίας. Η ακολουθία του

MTDH

γονίδιο λήφθηκε από το NCBI (ID Gene: 92140, νουκλεοτιδικές: AC_000140.1, GI: 157734173). Οι εκκινητές σχεδιάστηκαν με Primer Premier 5 σύμφωνα με την αλληλουχία του rs16896059 ως εξής: εμπρόσθιος εναρκτήρας 5′-CTGGCAACTGGTAGGCACGC -3 ‘και αντίστροφος εκκινητής 5′-GAGGGACTCGCAGGATGACG -3’. Το παραγωγές μέγεθος PCR ήταν 893 bp. PCR ενίσχυση πραγματοποιήθηκε σε συστήματα αντιδράσεως 50 μΙ που περιείχε 1 μΐ γονιδιωματικού DNA (100 ng /μl), 4 μΐ 2,5 mM dNTPs, ρυθμιστικό 10 μΐ, 2 μΐ του κάθε εκκινητή (0,4 μΜ) και 0.5 U Primestar HS DNA πολυμεράσης (TAKARA , Νταλιάν, Κίνα). Οι συνθήκες ενίσχυσης PCR ήταν: 94 ° C για 5 λεπτά, 35 κύκλους στους 98 ° C για 10 δευτερόλεπτα, 55 ° C για 15 δευτερόλεπτα, και 72 ° C για 2 λεπτά, και ένα τελικό στάδιο επέκτασης των 72 ° C για 5 λεπτά . Όλες οι PCR παραγωγές αλληλουχία από BioSune Βιοτεχνολογία Co, Ltd (Σαγκάη, Κίνα), και τα δεδομένα ακολουθίας αναλύθηκαν με χρωματισμούς 2.31 και MegAlign 7.0 του λογισμικού.

Western Blot

ανάλυση Western blot διεξήχθη όπως περιγράφεται προηγουμένως [31], [36], ο ιστός διαλύθηκε σε ρυθμιστικό RIPA (1 χ PBS, 0,1% δωδεκυλοθειικό νάτριο, 1% ΝΡ40, 5 mM EDTA, 1 mM ορθοβαναδικό νάτριο, αναστολείς δεοξυχολικό νάτριο και πρωτεάση 0,5% ). 40 μg των πρωτεϊνών υποβλήθηκαν σε ηλεκτροφόρηση σε 10% SDS-PAGE και μεταφέρθηκαν σε PVDF (Millipore) με χρήση ενός Mini Trans-Blot Κυττάρων (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA). Ανοσοκηλίδωση διεξήχθη χρησιμοποιώντας ένα πρωτογενές αντίσωμα

MTDH

(ab45338, 1:500, Abcam, Cambridge, MA, USA) και β-ακτίνη (1:5,000, Sigma-Aldrich, St. Louis, ΜΟ, USA ). Τα δευτερεύοντα αντισώματα (1:5,000, ΚΡί, Gaithersburg, MD, USA) επισημάνθηκαν με HRP (ραφανιδική υπεροξειδάση). Οι μεμβράνες οπτικοποιούνται χρησιμοποιώντας ένα κιτ ECL (Merck, Darmstadt, Germany). Ο έλεγχος φόρτωσης ήταν β-ακτίνης.

Στατιστική Ανάλυση

Τα στατιστικά δεδομένα αναλύθηκαν όπως περιγράφηκε προηγουμένως [34]. δοκιμή ισορροπία Hardy-Weinberg διεξήχθη δ χρησιμοποιώντας ένα web-based στατιστικό εργαλείο OEGE (https://www.oege.org/software/hwe-mr-calc.shtml). Οι κατανομές γονότυπου και αλληλόμορφο στο ωοθηκών ομάδες του καρκίνου και των ομάδων ελέγχου αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας chi-τετράγωνο τεστ, και ακριβής δοκιμασία του Fisher χρησιμοποιήθηκε, όταν ένας αριθμός των κυττάρων ήταν & lt? 5. Ο κίνδυνος ανάπτυξης καρκίνου των ωοθηκών υπολογίστηκε ως ποσοστό πιθανοτήτων (OR) με διάστημα εμπιστοσύνης 95% (CI) χρησιμοποιώντας μια άνευ όρων ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης. Όλες οι στατιστικές δοκιμασίες ήταν δύο όψεων με επίπεδο σημαντικότητας p ≤ 0,05. Τα στατιστικά δεδομένα αναλύθηκαν με το λογισμικό SPSS 17.0 (SPSS, Chicago, Illinois, USA).

Ευχαριστίες

Σας ευχαριστούμε για την υποστήριξη του Ning Yang, Xiao Γκουάν για τη συλλογή δεδομένων για τη μελέτη αυτή.