Αφηρημένο

Ιστορικό

Καρκίνος βλαστικά κύτταρα (ΚΕΠ) είναι ένα υποσύνολο των καρκινικών κυττάρων με την ικανότητα να αυτο-ανανέωση και παράγουν τα ποικίλα κύτταρα που συνθέτουν τον όγκο. Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι να αξιολογήσει την προγνωστική αξία των ΚΕΠ σε ένα εξαιρετικά ομοιογενή πληθυσμό του σταδίου ΙΙ καρκίνο του παχέος εντέρου.

Μέθοδοι

Εκατό στάδιο ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου II αντιμετωπίζεται με την ίδια χειρουργική ομάδα μεταξύ 1977 και 2005 είχαν αναδρομική ανάλυση. Κανένας από τους ασθενείς έλαβαν επικουρική χημειοθεραπεία. έκφραση Inmunohistochemistry του CD133, Nanog και ΟΚ20 ήταν σκόραρε, χρησιμοποιώντας τέσσερα επίπεδα: & lt? 10%, 11-25%, 26-50% και & gt? 50% θετικότητα. Kaplan-Meier τεστ ανάλυσης και log rank χρησιμοποιήθηκαν για τη σύγκριση της επιβίωσης.

Αποτελέσματα

Η μέση ηλικία των ασθενών ήταν 68 έτη (οι ασθενείς ήταν ηλικίας μεταξύ 45 έως 92 ετών) και η διάμεση παρακολούθηση ήταν 5,8 χρόνια. Υπήρχε υποτροπιάζουσας νόσου σε 17 (17%)? έκφραση CD133 (που ορίζεται από & gt? 10% θετικότητα) δείχθηκε σε 60% των όγκων, σε 95% για Nanog και 78% για ΟΚ20. Δεν βρέθηκε συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων έκφρασης του CD133, Nanog ή ΟΚ20 και ελεύθερη υποτροπής επιβίωση (RFS) ή τη συνολική επιβίωση (OS). Ωστόσο, μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ καθιερωμένων παθολογικών προγνωστικούς παράγοντες και RFS και OS.

Συμπεράσματα

Stem ποσοτικοποίηση των κυττάρων που ορίζεται από CD133 και έκφραση Nanog δεν έχει καμία σχέση με το RFS ή OS σε αυτήν την ομάδα του σταδίου ΙΙ καρκίνο του παχέος εντέρου

Παράθεση:. Vaz MA, Martinez JC, Devesa JM, Trill JD, Abraira V, Riquelme A, et al. (2014) προγνωστική αξία της Βλαστικών Κυττάρων Ποσοτικοποίηση στο Στάδιο ΙΙ του καρκίνου του παχέος εντέρου. PLoS ONE 9 (2): e88480. doi: 10.1371 /journal.pone.0088480

Επιμέλεια: Daotai Nie, Southern Illinois University School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 7 Σεπτέμβρη του 2013? Αποδεκτές: 8, Ιανουαρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 21 Φεβρουαρίου 2014

Copyright: © 2014 Vaz et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

καρκίνος του παχέος εντέρου είναι μία από τις πιο κοινές αιτίες της. θανάτου από καρκίνο σε όλο τον κόσμο και την επιβίωση επηρεάζεται από τοπική υποτροπή, καθώς και την ανάπτυξη της μεταστατικής νόσου.

Η θεωρία των βλαστικών κυττάρων του καρκίνου βασίζεται στην παραδοχή της ύπαρξης ενός μικρού πληθυσμού των κυττάρων του καρκίνου-κίνηση, η οποία είναι αποκλειστικά υπεύθυνο για την ανάπτυξη και συντήρηση του συνόλου του όγκου. Αυτά τα κύτταρα έχουν χαμηλό ρυθμό πολλαπλασιασμού, υψηλή ικανότητα αυτο-ανανέωσης και ροπή να διαφοροποιηθούν σε ενεργό πολλαπλασιαζόμενα κύτταρα του όγκου και είναι ανθεκτικά στη χημειοθεραπεία και ακτινοβολία. Αυτά τα κύτταρα έχουν αναφερθεί σε διάφορες μορφές καρκίνου.

Πρόσφατα ερευνητικά ευρήματα υποδηλώνουν ότι το μοντέλο βλαστικών κυττάρων του καρκίνου ισχύει επίσης για το καρκίνωμα του παχέος εντέρου. Ricci-Vitiani και O’Brien ανέφεραν ότι τα θετικά κύτταρα CD133 σε καρκίνο του παχέος εντέρου παρουσιάζουν τις ιδιότητες των καρκινικών κυττάρων έναρξη με αυτο-ανανέωσης και της υψηλής ογκογόνο δυναμικό. Αυτά τα ΚΕΠ εκφράζουν δείκτες πλειοδυναμίας όπως CD133 και Nanog και δεν εκφράζουν δείκτες διαφοροποίησης ως cytokeratin20 (ΟΚ20) [1], [2], [3].

Η πιθανή προγνωστική αξία των ΚΕΠ σε καρκίνο του παχέος εντέρου έχει μελετηθεί με αντικρουόμενα αποτελέσματα. Ωστόσο, ορισμένα από αυτές τις σειρές βασίστηκαν σε ετερογενή καταστάσεις, με τη συμμετοχή του ορθού και του παχέος εντέρου και τα διάφορα στάδια του όγκου (Ι-IV). Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι να αξιολογήσει την προγνωστική αξία των ΚΕΠ σε ένα εξαιρετικά ομοιογενή πληθυσμό του σταδίου ΙΙ καρκίνο του παχέος εντέρου.

Υλικά και Μέθοδοι

Ένα σύνολο 100 παθολογικά επιβεβαίωσε δείγματα ελήφθησαν από το παχύ έντερο ασθενών με καρκίνο σταδίου ΤΝΜ ΙΙ, οι οποίοι υποβλήθηκαν σε θεραπεία με χειρουργική επέμβαση μεταξύ 1977 και 2005 στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο Ramon y Cajal. Για να μειωθούν οι ανεπιθύμητες των επικουρική θεραπεία για την πρόγνωση κανένας από τους περιελάμβανε ασθενείς έλαβαν επικουρική χημειοθεραπεία. Όλοι οι ασθενείς παρακολουθήθηκαν για επιβίωση χωρίς υποτροπή και η συνολική επιβίωση. Η περίοδος παρακολούθησης ήταν υπολογίζονται από την ημερομηνία της επέμβασης μέχρι το 2010. Η υποτροπή ορίστηκε ως εκ νέου εμφάνιση του αρχικού όγκου? και οι δύο μετάσταση ή τοπικής υποτροπής θεωρήθηκαν ως απόδειξη της υποτροπής του όγκου. Η συνολική επιβίωση ορίστηκε ως ο χρόνος από τη χειρουργική επέμβαση στο θάνατο ή στο σημείο όταν ο ασθενής ήταν καταγραφεί να ζουν τελευταίο. Σε αυτή τη μελέτη είναι γνωστή προγνωστικοί παράγοντες κλινικής επίσης καταχωρηθεί. ασθενείς υψηλού κινδύνου θεωρήθηκαν ότι είναι αυτά με τουλάχιστον ένα από τα ακόλουθα χαρακτηριστικά: λιγότερα από 12 λεμφαδένες υπάρχουν στις χειρουργικές δείγμα, Τ4 όγκου, lymphovascular εισβολή και χαμηλή διαφοροποίηση όγκων. Η ταξινόμηση ΤΝΜ χρησιμοποιήθηκε για την παθολογική στάσης και η κατάταξη της Παγκόσμιας Οργάνωσης Υγείας χρησιμοποιήθηκε για την παθολογική κατάταξη. Η έρευνα έχει την έγκριση της επιτροπής δεοντολογίας (Ramon y Cajal Πανεπιστήμιο του νοσοκομείου). Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε για τη χρήση του δείγματος στην έρευνα.

Η ιστολογική εξέταση

Τα δείγματα που ανακτώνται από τα αρχεία παθολογία του Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου Ramon y Cajal, Μαδρίτη, Ισπανία, και ιστολογικά αναθεωρηθεί. μπλοκ παραφίνης ανακτήθηκαν για την κατασκευή συστοιχιών ιστού που περιέχει κυλίνδρους διαμέτρου ιστού 1,5 mm από καρκίνο του παχέος εντέρου και δείγματα ελέγχου. Κάθε μπλοκ παραφίνης συστοιχία ιστού που περιέχονται τουλάχιστον 2 δείγματα κάθε περίπτωση προκειμένου να έχουν ένα σταυρό έλεγχο της έκφρασης του σήματος. Επελέγησαν Οι πιο αντιπροσωπευτικές περιοχές κάθε όγκου για τη μελέτη. Αντιδραστική λεμφοειδή ιστό (αμυγδαλές) χρησιμοποιήθηκαν ως αρνητικοί έλεγχοι της έκφρασης και ενσωματώνεται με τριπλούν σε κάθε συστοιχία ιστό. Ιστοπαθολογικά χαρακτηριστικά έγιναν ανεξάρτητα αξιολόγηση. Αυτό ακολουθήθηκε από κοινή παρατήρηση σε multihead μικροσκόπιο, όπου επιλύθηκαν αποκλίσεις.

Η ανοσοϊστοχημεία (IHC)

Anti-CD133 Κουνέλι μονοκλωνικό αντίσωμα (Cell Signaling Technology) και γίδινο πολυκλωνικό μυρμήγκι ανθρώπινη Nanog ( Novus Biologicals), χρησιμοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό των δεικτών των βλαστικών κυττάρων. Αντι-Cytokeratin20 (CK 20) μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού (Dako, Denmark), χρησιμοποιήθηκε για να αξιολογήσει διαφοροποιημένα επιθηλιακά κύτταρα. Η ανοσοϊστοχημική χρώση πραγματοποιήθηκε ακολουθώντας τη μέθοδο κουνέλι /ποντίκι Dako Ακίνητη En Vision (Dako, Denmark). Ως ένας θετικός έλεγχος της έκφρασης προτύπου και της ειδικότητας του σήματος, χρησιμοποιήσαμε τομές εμβρυϊκού ιστού ανθρώπινου εγκεφάλου, συμπεριλαμβανομένου του επιθηλίου εγκεφάλου κοιλιακή νευρο. Αυτή ήταν η πρώτη θέση όπου η έκφραση CD133 ανιχνεύθηκε στο κορυφαίο σύνορα neuroephitelial κυττάρων [4]. Αργότερα, η απελευθέρωση ως σωματίδια μεμβράνη CD133 θετική, παρατηρήθηκε στα υγρά κοιλιακή ρευστού και διαφορετικές ανθρώπινου σώματος, συμπεριλαμβανομένων του εντέρου [5]. Επώαση με ένα άσχετο αντίσωμα που χρησιμοποιείται ως έλεγχος της αντιγονική διατήρησης και αποκατάστασης. Η επώαση παραλείποντας το πρώτο αντίσωμα χρησιμοποιήθηκε ως αρνητικός έλεγχος μη-ειδική χρώση σύστημα ανίχνευσης.

Ανοσοϊστοχημική εξέταση

εξέταση ανοσοϊστοχημεία έγινε από τομές ιστού ενσωματωμένα σε παραφίνη που περιλάμβανε τις πιο αντιπροσωπευτικές περιοχές των όγκων . CD133, Nanog και ΟΚ20 αναλύθηκαν. Οι όγκοι δόθηκε μια ημι-ποσοτική βαθμολογία χρησιμοποιώντας τέσσερα επίπεδα: & lt? 10%, 11-25%, 26-50% και & gt? 50% θετικότητα. Ορίσαμε ένα δείγμα να είναι θετική αν υπήρχαν & gt?. 10% θετικά κύτταρα

Στατιστική Ανάλυση

Η ανάλυση Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό του καρκίνου ειδικά για επιβίωση και οι ομάδες συγκρίθηκαν με η δοκιμασία log-rank. Στατιστικές διαδικασίες πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση SPSS έκδοση 15.0, και η P & lt? 0.05 ήταν considerer στατιστικά σημαντική. Όλες οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του στατιστικού πακέτου για Κοινωνικές Επιστήμες (SPSS) Λογισμικό.

Αποτελέσματα

κλινικοπαθολογοανατομικές Ευρήματα

Τα κλινικοπαθολογοανατομικές συμπεράσματα που παρατίθενται στον Πίνακα 1. Η μέση ηλικία των οι ασθενείς ήταν 68 ετών (οι ασθενείς κυμαίνονται 45 έως 92 ετών), το 53% ήταν άνδρες και το 47% ήταν γυναίκες.

η

Γνωστή κλινικοπαθολογοανατομικές ευρήματα υψηλού κινδύνου για υποτροπή ήταν εγγεγραμμένοι, που ορίζεται από λιγότερους από 12 λεμφαδένες υπάρχουν στις χειρουργικές δείγμα, όγκους Τ4, lymphovascular εισβολή και κακώς διαφοροποιημένοι όγκοι, και οι ασθενείς ταξινομήθηκαν στην κατηγορία υψηλού κινδύνου εάν υπήρχαν ένα ή περισσότερα από αυτούς τους παράγοντες κινδύνου ή στην κατηγορία χαμηλού κινδύνου εάν δεν υπήρχαν παράγοντες κινδύνου. Πενήντα δύο τοις εκατό ήταν υψηλού κινδύνου και 48% ήταν ασθενείς χαμηλού κινδύνου. Τριάντα πέντε τοις εκατό των ασθενών είχαν & lt? 12 λεμφαδένες στις χειρουργικές δείγμα. Μόνο το 4% ήταν Τ4, το 9% των ασθενών είχαν ελάχιστα διαφοροποιημένο ιστολογία και 11% είχαν lymphovascular εισβολή. Κατά τη διάρκεια της τελευταίας παρακολούθησης 17% των ασθενών είχαν υποτροπή της νόσου και το 61% ήταν ζωντανοί? 36% ήταν νεκροί, 16% του καρκίνου του παχέος εντέρου και 20% από άλλα αίτια.

Το CD133 αντιγόνο Θέση στο Colon Cancer

Η θετική inmunohistochemical μοτίβο αντιδραστικότητας για CD133 που παρατηρείται σε περικοιλιακή νευροπεπιθηλιακά κύτταρα (έλεγχος περιπτώσεις) (Εικ. 1), είναι σε κρατήσει με αυτό που παρατηρήθηκε σε προηγούμενες μελέτες [5], και δρα ως ένας θετικός έλεγχος της ειδικότητας του σήματος. Το αντιγόνο CD133 έχει προηγουμένως δειχθεί ότι βρίσκεται στο κορυφαίο προεξοχές μεμβράνης πλάσματος της κυτταρικής γραμμής καρκίνου του καλλιέργειες Caco-2 [5].

Η

Παρατηρήσαμε μια πολική χρώση του CD133 περιορίζεται στο ακραίο κύτταρο αυλού επιφάνεια του παχέος αδένες καρκίνου. Συνήθως αρκετά θετικά κύτταρα CD133 ομαδοποιήθηκαν μαζί. έκφραση CD133 έτειναν να προφέρεται κοντά στην επεμβατική περιθώριο των όγκων.

έκφραση πρωτεΐνης CD133 παρατηρήθηκε στο κορυφαίο σύνορα του κόλου καρκινικών κυττάρων και αδένων, συχνά ρίχνοντας CD133 θετική συντρίμμια στα αυλού αδένες (Σχ. 2 ). Περιστασιακές ομάδες νεοπλασματικών κυττάρων έδειξαν θετικά ολόκληρο κυτταροπλασματική έκφραση (Εικ. 3).

Η

αριθ CD133 θετικό σήμα βρέθηκε σε κανένα από τα δείγματα ιστού αμυγδαλής, ούτε στην επιφάνεια του βλεννογόνου από αυτούς, χρησιμοποιήθηκε ως αρνητικός έλεγχος. Αυτό αποκλείσει το ενδεχόμενο εσφαλμένης θετικότητας, ή μη-ειδική δέσμευση του αντισώματος CD133 που χρησιμοποιείται, για να βλεννογόνου /αυλού χώρους.

Με την εξέταση σε διαδοχικές τομές ιστού, συγκρίναμε CD133 και την έκφραση της πρωτεΐνης ΟΚ20 (Εικ. 4 ). Τα πεδία που περιέχει CD133 θετικά κύτταρα συνήθως έδειξε αδύναμη ή καθόλου έκφραση της πρωτεΐνης ΟΚ20, ενώ οι περιοχές με υψηλή έκφραση ΟΚ20 ήταν συνήθως CD133 αρνητικά. Ωστόσο ομάδες νεοπλασματικά κύτταρα που εκφράζουν ταυτόχρονα CD133 και ΟΚ20 έδειξαν επίσης (Σχ. 5).

Η

Έκφραση Ανοσοϊστοχημική CD133

έκφραση CD133 ανιχνεύθηκε στο 100% των ασθενών . Σαράντα τοις εκατό των ασθενών είχαν & lt? 10% θετικότητα? 22% των ασθενών είχαν 11-25% θετικότητα? 6% των ασθενών είχαν 26-50% θετικότητα και 22% των ασθενών είχαν & gt?. 50% θετικότητα

Όλοι οι 100 ασθενείς παρακολουθήθηκαν για επιβίωση για να αναλύσει την έκφραση CD133 ως προγνωστικός παράγοντας. Η μέση περίοδος παρακολούθησης ήταν 5,8 έτη. Από τους 100 ασθενείς, 16,3% πέθανε από καρκίνο και 20,4% από άλλα αίτια. Υπήρχαν 7 περιπτώσεις τοπικής υποτροπής, 11 περιπτώσεις των μακρινών μεταστάσεων.

καμπύλες επιβίωσης χωρίς υποτροπή δεν διέφεραν μεταξύ των διαφόρων επιπέδων έκφρασης θετικότητας CD133. Καμπύλη Kaplan-Meier για ολική επιβίωση δεν έδειξε στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των διαφόρων ομάδων (εικ. 6).

Η

Έκφραση Nanog

Nanog πυρηνική και κυτταροπλασματική έκφραση ανιχνεύθηκε στο 99% των ασθενών . Πέντε ασθενείς είχαν & lt? 10% θετικότητα? 9 ασθενείς είχαν 11-25% θετικότητα? 34 ασθενείς είχαν 26-50% θετικότητα και 51 ασθενείς είχαν & gt? 50% θετικότητα. Θετική χρώση παρατηρήθηκε κυρίως σε επιθηλιακά αυτός νεοπλασματικά κύτταρα, πολλά από αυτά συμπτωματικά με CD133 θετικά κύτταρα. Ωστόσο, Nanog θετική /αρνητική CD133 νεοπλασματικά κύτταρα έδειξαν επίσης. Επιπλέον, η έκφραση Nanog παρατηρήθηκε επίσης σε νεοπλασματικά κύτταρα στρώμα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Kaplan-Meier καμπύλη για υποτροπή και η συνολική επιβίωση δεν έδειξαν στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των διαφορετικών επιπέδων έκφρασης (Εικ. 7).

η έκφραση ΟΚ20

έκφραση ΟΚ20 ανιχνεύθηκε στο 78% των ασθενών. Είκοσι δύο τοις εκατό των ασθενών είχαν & lt? 10% θετικότητα? 29% των ασθενών είχαν 11-25% θετικότητα? 26% των ασθενών είχαν 26-50% θετικότητα και 23% των ασθενών είχαν & gt?. 50% θετικότητα

Καμπύλη Kaplan-Meier για υποτροπή και η επιβίωση δεν έδειξε στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των διαφόρων ομάδων της έκφρασης

.

Η σχέση μεταξύ κλινικοπαθολογοανατομικές γνωστούς παράγοντες υψηλού κινδύνου για τους ασθενείς, που ορίζονται ως έχοντες τουλάχιστον ένα από τα ακόλουθα: λιγότερα από 12 λεμφαδένες υπάρχουν στις χειρουργικές δείγμα, όγκους Τ4, lymphovascular εισβολή και ελάχιστα διαφοροποιημένη όγκους και υποτροπής και επιβίωσης ήταν αναλύθηκαν. Μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση βρέθηκε μεταξύ γνωστών κλινικούς παράγοντες και RFS και OS (p = 0,034) (εικ. 8).

Η

Συζήτηση

CD133 είναι το επιτόπιο μιας γλυκοζυλιωμένης μορφής ανθρώπινο προμινίνη-1, η οποία είναι μέλος της pentaspan διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη [1], και την έκφραση του CD133 έχει αναφερθεί ότι εντοπίζεται σε κανονική νεογνών και ενηλίκων πρόδρομο κύτταρο καθώς και καρκίνο κύτταρα έναρξης [2], [3]. Αξιοσημείωτα, προμινίνη-1 είναι ειδικά σχετίζεται με προεξοχές μεμβράνη του πλάσματος [4]. Πράγματι, κατά τη διάρκεια της νευρογένεσης, τα σωματίδια που εκφράζουν CD133 έχουν δειχθεί στο νευρικό αυλούς σωλήνα, όπου η απελευθέρωση του CD133 εκφράζουν μεμβράνη σωματίδια φαίνεται να είναι ένα ευρέως διαδεδομένο συμβάν [6]. Επιπλέον, το ανθρώπινο CD133 βλαστικών κυττάρων αντιγόνο εκφράζεται επίσης από διαφορετικά ανθρώπινα επιθηλιακά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων εντέρου, και στοχεύουν σε προεξοχές μεμβράνη του πλάσματος [5].

CD133 θεωρείται σήμερα ένας χρήσιμος δείκτης για τον εντοπισμό CSCs σε καρκίνο του παχέος εντέρου. Είναι ενδιαφέρον ως προς το εάν CD133 θετικά κύτταρα μπορεί να θεωρηθεί ένας προγνωστικός παράγοντας. Αυτή η μελέτη έχει ανοσοϊστοχημικά ανέλυσε την έκφραση CD133 και αξιολογείται η επιβίωση σε μια μεγάλη σειρά από το στάδιο ΙΙ του καρκίνου του παχέος εντέρου και βρήκαμε ότι η έκφραση CD133 δεν ήταν ένας ανεξάρτητος παράγοντας κινδύνου που σχετίζεται με την υποτροπή ή την επιβίωση των ασθενών.

Η σχέση μεταξύ της έκφρασης CD133 και πρόγνωση σε ορθοκολικό καρκίνωμα εξετάστηκε προηγουμένως. Horst

et al

ανέφεραν ότι η έκφραση CD133 είναι ένα ανεξάρτητο προγνωστικό δείκτη [7], ενώ αυτό το είδος της συσχέτισης δεν παρατηρήθηκε από Kojima

et al

[8]. Ωστόσο, ορισμένα από αυτές τις σειρές βασίστηκαν σε ετερογενή καταστάσεις, με τη συμμετοχή του ορθού και του παχέος εντέρου και τα διάφορα στάδια του όγκου (Ι-IV). Li

κ.ά.

αναλύεται μια ομοιογενή ομάδα ΙΙΙΒ (104 ασθενείς) και έδειξε ότι CD133 θετικά καρκινικά κύτταρα συνέβαλαν στην εξέλιξη του καρκίνου του παχέος εντέρου [9]. Nian-Hua Zang

et al

ανέλυσε μια ομάδα του καρκίνου του παχέος εντέρου ΙΙΙ σταδίου ΙΙ και ιδρυτικό αρνητική συσχέτιση επιβίωση σε ασθενείς με συν-έκφραση con CDXCR4 και CD133 [10].

Η διαφορά μεταξύ οι διάφορες μελέτες ενδέχεται να προκύψουν από ανεπαρκή ποσότητα ασθενή και το στάδιο μικτού όγκου (στάδιο Ι έως IV και του παχέος εντέρου και του καρκίνου του ορθού).

από την άλλη πλευρά, είναι απίθανο οι ΚΕΠ μπορεί να χαρακτηρίζεται από ένα μόνο σημειωτή . ιδιότητες των βλαστικών κυττάρων, όπως έχουν πρόσφατα αναφερθεί σε αρνητικά κύτταρα CD133, όπως καλά. Ως εκ τούτου, τα κύτταρα όγκων θετικά CD133 δεν μπορεί να εκπροσωπεί το σύνολο του καρκίνου-έναρξη του πληθυσμού. Ένας συνδυασμός δεικτών κυτταρικής επιφάνειας είναι ανάγκη για τον ορισμό των βλαστικών κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου. Ωστόσο, ο πληθυσμός των βλαστικών κυττάρων του καρκίνου είναι ετερογενής. Ως εκ τούτου, τα επίπεδα έκφρασης των διαφορετικών καρκινικών δεικτών των βλαστικών κυττάρων είναι μεταβλητή, ως αποτέλεσμα της βιολογικής ποικιλότητας λειτουργία του καθενός από αυτά.

Nanog, ένας παράγοντας μεταγραφής ομοπεδίου, αποτελεί ουσιαστικό ρυθμιστής για την προώθηση του εαυτού -renewal των εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων και αναστολή της διαφοροποίησης τους. Προηγούμενες μελέτες έδειξαν ότι Nanog εκφράζεται σε καρκινικά κύτταρα κόλου, και πρότεινε ότι η έκφραση τους συμβάλλει στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων καρκίνου του παχέος εντέρου [11]. Επιπλέον, διάφορες μελέτες έχουν δείξει ότι Nanog ρυθμίζει διάφορες λειτουργίες της ανάπτυξης του καρκίνου, όπως ο πολλαπλασιασμός των καρκινικών κυττάρων, τα ναρκωτικά αντίσταση και την επικοινωνία των καρκινικών κυττάρων με την περιβάλλουσα στρώμα, που οδηγεί σε κυτταρική κινητικότητα, επιθηλιακά-μεσεγχυματικά μετάβασης και ανοσολογική διαφυγή [12].

Εμείς αποφασίσαμε να αναλύσουμε Nanog σε αυτή την ομάδα ασθενών. έκφραση Nanog και CD133 παρατηρήθηκε στο ίδιο υποσύνολο των νεοπλασματικών κυττάρων. Ωστόσο, τα επίπεδα έκφρασης Nanog ήταν υψηλότερες από εκείνες των CD133, όπως προσδιορίζεται με Nanog θετική /αρνητική CD133 νεοπλασματικά κύτταρα, τα οποία εμφανίζονται ως καλά. Επιπλέον, η έκφραση Nanog παρατηρήθηκε επίσης σε κύτταρα στρώματος, πιθανώς σχετίζονται με τη λειτουργία της επικοινωνίας μικροπεριβάλλον.

Εμείς δεν βρήκε καμία συσχέτιση μεταξύ CD133 ή έκφραση Nanog και την επιβίωση (χωρίς υποτροπή επιβίωση και τη συνολική επιβίωση).

Ως εκ τούτου, CD133 ίδιοι θετικά κύτταρα μπορεί να μην έχουν βιολογική ικανότητα που σχετίζεται με κακοήθη δυναμικό σε καρκίνο του παχέος εντέρου.

Προηγούμενες μελέτες χρησιμοποιώντας κυτταρικά εναιωρήματα των δειγμάτων καρκίνου του παχέος εντέρου έδειξε ότι CD133 θετικά κύτταρα ήταν αρνητικά ΟΚ20 [3]. Στην ομάδα μας, το 78% των δειγμάτων ήταν θετικά ΟΚ20 (ορίζεται από & gt? 10% θετικότητα), και επίσης δεν βρέθηκε συσχέτιση με την επιβίωση

Αρκετοί παράγοντες μπορούν να εξηγήσουν τις διαφορές με τις προηγούμενες εκθέσεις: α.) Αναμιγνύεται στάδια όγκου όπου αναλύουμε ένα πολύ ομοιογενές μία, β) διαφορετικά αντισώματα που χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση του μορίου CD 133. Πράγματι, διαφορετικά αποτελέσματα μπορούν να ληφθούν με τη χρήση διαφόρων αντισωμάτων [13], [14] γ) διάφορα κριτήρια που χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό θετική χρώση και διαφορετικές αποκοπής χρησιμοποιείται για τη διάκριση θετικών και αρνητικών όγκων. Στη μελέτη μας, έχουμε δημιουργήσει τέσσερα επίπεδα της θετικότητας: & lt? 10%, 11-25%, 26-50% και & gt? 50%. Άλλοι θεωρείται θετικό αν & gt? 50% θετικότητα, (Horst

et al

), & gt? 10% (Kojima

et al

) ή & gt? 5% (Li

et al

), δ) ανεπαρκής ομάδα ασθενών, αυτό θα μπορούσε να εξηγήσει τα αρνητικά αποτελέσματα για τη συσχέτιση σε μια τέτοια ομάδα με χαμηλό προσδόκιμο επανάληψης, με αποτέλεσμα μόνο σε 17% των περιπτώσεων. Παρ ‘όλα αυτά, θα μπορούσαμε να αποδείξει ένα συσχετισμό με γνωστούς κλινικοπαθολογική παράγοντες και την επιβίωση.

Επιπλέον, παρατηρήσαμε ένα υψηλό επίπεδο CD133 και Nanog θετικότητα σε αυτή την ομάδα των ασθενών σε ένα πιο αρχικό στάδιο, το 60% CD133 θετικότητα. Επιπλέον, σε 22% ήταν υψηλότερες από 50%. Βρήκαμε επίσης 94% Nanog θετικότητα και το 51% από αυτούς ήταν υψηλότερο από το 50%. Τα αποτελέσματα αυτά αντιβαίνουν με αυτά που βρέθηκαν από τον Li

et al,

στην οποία χορηγήθηκαν έως 40% των περιπτώσεων στη φάση ΙΙΙΒ είχε & lt? 5% θετικότητα

Αυτή η απροσδόκητη συμπεριφορά της έκφρασης CD133 που βρέθηκαν στο. μελέτη μας, οι υψηλότερες σε χαμηλότερες όγκους στάδιο από ό, τι σε πιο προχωρημένες βλάβες, έχει παρατηρηθεί σε άλλες αναφορές [15]. Αυτή η κατανομή είναι συνεπής με τα προηγούμενα ευρήματα σε ένα μοντέλο ποντικού της καρκινογένεσης του παχέος εντέρου [16] και σε ανθρώπινα πρωτογενή καρκίνων του παχέος εντέρου [16]. Σε ποντίκι κόλον καρκινογένεση μια σημαντικά αυξημένη έκφραση του CD133 έχουν παρατηρηθεί, η οποία αξιολογείται με ανοσοϊστοχημεία, στις αρχές νεοπλασματικές βλάβες οι οποίες έτειναν να μειώνονται με την ανάπτυξη του όγκου [17] και μία αυξημένη έκφραση CD133 αναφέρθηκε στο Dukes Α σε σύγκριση με Dukes Β και Γ καρκίνων του παχέος εντέρου [16]. Προηγούμενες μελέτες ανέφεραν ότι η ένταση του CD133 είναι κυτταρικό κύκλο-εξαρτώμενη και αυξημένη CD133 Τα θετικά κύτταρα συσχετίζεται με αυξημένη περιεκτικότητα σε DNA, και όλα αυτά τα ευρήματα είναι σε συμφωνία με την προτεινόμενη ικανότητα της πρωτεΐνης να προσδιοριστούν τα συγκεκριμένα κύτταρα όγκου κίνηση η οποία σχετίζεται με το ανάπτυξη τόσο της πρωτοβάθμιας και της μεταστατικής νόσου [18] και, επομένως, ασχολείται κυρίως με τις πιο ενεργές φάσεις της ανάπτυξης του όγκου.

Αυτή η διαφορετική έκφραση CD133 μέσα από διαφορετικά στάδια έχει επίσης προταθεί από Shmelkov

et al

, ο οποίος πρότεινε ότι κατά τη διάρκεια της μετάστασης, CD133 θετικά καρκινικά κύτταρα παράγουν αρνητικά κύτταρα CD133, τα οποία είναι πιο επιθετική και επίσης σε θέση να κινήσει όγκους σε γυμνούς ποντικούς. Οι συγγραφείς ανέφεραν ότι το 40% των μεταστατικών όγκων σε μελέτη τους ήταν CD133 αρνητικά [19].

Εν κατακλείδι, σε αυτή τη μελέτη 100 σταδίου ΙΙ ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου, Βλαστικών Κυττάρων ποσοτικοποίηση ορίζεται από CD133 και έκφραση Nanog δεν έχει συσχέτιση με RFS ή OS. Ωστόσο, ένας συσχετισμός με την καθιερωμένη προγνωστικούς παθολογικοί παράγοντες βρέθηκε. Ως εκ τούτου, τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι τα ΚΕΠ δεν μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο στα αρχικά στάδια του καρκίνου του παχέος εντέρου.

Ευχαριστίες

Σας ευχαριστούμε δρχ Υ Κάστρο και ME Fernandez-Santos PhD, για την ανάγνωση του χειρογράφου και παρέχοντας χρήσιμες συμβουλές και ιδέες. ΜΑ Gonzalez-Nicolas BSc & amp? Μια Acosta BSc συνέβαλε με την άριστη τεχνική βοήθεια τους κατά την εκτέλεση των πειραμάτων χρώσης σε δείγματα εγκεφάλου του εμβρύου για τη μελέτη της έκφρασης CD133, καθώς και για τις χρήσιμες παρατηρήσεις τους και ακριβής ερμηνεία.