Αφηρημένο

διήθησης υψηλής μακροφάγων έχει συσχετιστεί με βελτιωμένη επιβίωση στον καρκίνο του παχέος εντέρου (CRC). Σχετίζεται με όγκο μακροφάγων (ΤΑΜ) παίζουν ρόλους συγκρότημα στην ογκογένεση δεδομένου ότι πιστεύεται ότι κατέχει τόσο στον όγκο όσο πρόληψη (Μ1 μακροφάγων) και προαγωγής όγκου (M2 μακροφάγα) δραστηριότητες. Εδώ έχουμε εφαρμόσει μια ανοσοϊστοχημική προσέγγιση για τον προσδιορισμό του βαθμού που διηθούν μακροφάγα με φαινότυπο Μ1 ή Μ2 σε κλινικά δείγματα του CRC σε σχέση με την πρόγνωση, τόσο CRC γενικά, αλλά επίσης σε υποομάδες των CRC που ορίζεται από μικροδορυφορική αστάθεια (MSI) κατάσταση διαλογής και το ΚΚΕ φαινότυπο νησί methylator (CIMP). Ένα σύνολο 485 διαδοχικών CRC δείγματα χρωματίστηκαν για συνθάσης νιτρικού οξειδίου 2 (NOS2) (συμβολίζεται επίσης iNOS) ως δείκτης για τον φαινότυπο μακροφάγων Μ1 και τον υποδοχέα καθαριστή CD163 ως δείκτης για τον φαινότυπο μακροφάγων Μ2. Η μέση διείσδυση του NOS2 και CD163 εκφράζουν μακροφάγα κατά μήκος της διεισδυτικής μέτωπο όγκου ήταν ημι-ποσοτικά αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας μία τεσσάρων βαθμολογούνται κλίμακα. Δύο υπότυποι των μακροφάγων, εμφανίζοντας M1 (NOS2

+) ή M2 (CD163

+) φαινότυποι, αναγνωρίστηκαν. Παρατηρήσαμε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ της ποσότητας της NOS2

+ και CD163

+ κύτταρα (

P

& lt? 0,0001). Μια ισχυρή αντίστροφη συσχέτιση με το στάδιο του όγκου βρέθηκε τόσο για NOS2 (

P

& lt? 0.0001) και CD163 (

P

& lt? 0,0001) διείσδυση. Επιπλέον, οι ασθενείς που φέρουν όγκους εξαιρετικά μολυσμένο από NOS2

+ κύτταρα είχαν σημαντικά καλύτερη πρόγνωση από εκείνους που διείσδυσε από λίγες NOS2

+ κύτταρα, και αυτό βρέθηκε να είναι ανεξάρτητη από το καθεστώς ελέγχου MSI και την κατάσταση CIMP. Δεν βρέθηκε σημαντική διαφορά σε ειδική για τον καρκίνο επιβίωση σε ομάδες CRC με διαφορετικές αναλογίες NOS2 /CD163. Συμπερασματικά, η αυξημένη διείσδυση των μακροφάγων με ένα φαινότυπο Μ1 στο μπροστινό του όγκου συνοδεύεται από ταυτόχρονη αύξηση των μακροφάγων με ένα φαινότυπο Μ2, και σε ένα στάδιο με τρόπο που εξαρτάται συσχετίζεται με καλύτερη πρόγνωση σε ασθενείς με CRC.

Παράθεση: Edin S, Wikberg ML, Dahlin AM, Rutegård J, Öberg Α, Oldenborg PA, et al. (2012) Η κατανομή των μακροφάγων με ένα Μ1 ή Μ2 φαινότυπου σε σχέση με την πρόγνωση και τα μοριακά χαρακτηριστικά του καρκίνου του παχέος εντέρου. PLoS ONE 7 (10): e47045. doi: 10.1371 /journal.pone.0047045

Επιμέλεια: Ιωσήφ Najbauer, City of Hope Εθνικό Ιατρικό Κέντρο και Beckman Research Institute, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 29 Ιουνίου 2012? Δεκτές: 7 Σεπτεμβρίου 2012? Δημοσιεύθηκε: 15 Οκτωβρίου 2012

Copyright: © Edin et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από επιχορηγήσεις από τη σουηδική Εταιρεία Καρκίνου (δεν χορηγούν CAN 2011/839, Palmqvist?. www.cancerfonden.se), σουηδικό Συμβούλιο Έρευνας (δεν χορηγούν B03488901, Palmqvist?. www.vr.se), έρευνα αιχμής Grant από το Νομαρχιακό Συμβούλιο του Västerbotten, Σουηδία (δεν χορηγούν VLL-132981, Palmqvist.), Ίδρυμα Έρευνας για τον Καρκίνο στη Βόρεια Σουηδία (δεν χορηγούν AMP 09-619, Edin?. www.cancerforskningsfonden.se), και Tore Nilsons Ίδρυμα (Edin, www.torenilsonsstiftelse.nu). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

φλεγμονώδη κύτταρα είναι παρόντα στο μικροπεριβάλλον του όγκου των περισσότερων καρκίνων και έχουν αναφερθεί ότι επηρεάζουν το περιβάλλον των φλεγμονωδών μεσολαβητών και των σημάτων κυτταρικού πολλαπλασιασμού, της αγγειογένεσης και την αναδιαμόρφωση του ιστού με τρόπους που θα μπορούσε να προωθήσει την εξέλιξη του όγκου [1] – [3 ]. Οι μακροφάγοι όγκου που σχετίζεται (ΤΑΜ) και τους ρόλους τους στην εισβολή και μετάσταση όγκου έχουν συζητηθεί σε αρκετές πρόσφατες αξιολογήσεις [4] – [8]. Γενικά, οι ΤΑΜ βρίσκεται εντός και περιβάλλει περισσότεροι όγκοι και μπορεί, όταν ενεργοποιείται, απελευθερώνουν πολυάριθμους παράγοντες που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τη συμπεριφορά των κυττάρων του όγκου και άλλα κύτταρα του στρώματος του όγκου. Η ικανότητα των μακροφάγων να προσαρμόζονται στο περιβάλλον τους έχει οδηγήσει στην ταυτοποίηση δύο κύριων πολωμένων φαινότυποι των μακροφάγων [7], [9]. Εν συντομία, οι κλασικά ενεργοποιημένα μακροφάγα Μ1 χαρακτηρίζεται από την έκφραση της συνθετάσης του νιτρικού οξειδίου 2 (NOS2) (συμβολίζεται επίσης iNOS), καθώς επίσης και πολλά προ-φλεγμονώδεις κυτοκίνες (π.χ. IL-1β, IL6, IL12, IL23 και TNF) και αναφέρονται να έχουν υψηλή βακτηριοκτόνο και ογκοκτόνο ικανότητα. Οι κύριες λειτουργίες των εναλλακτικά ενεργοποιημένων μακροφάγων M2 είναι, αντί να σαρώνουν τα συντρίμμια και να προωθήσει την επισκευή των ιστών, αλλά έχουν επίσης το ανοσοποιητικό ρυθμιστικές λειτουργίες. Πολλοί από τους παράγοντες που παράγονται από Μ2 μακροφάγα δρουν υπέρ της προόδου των όγκων, την τόνωση της ανάπτυξης του όγκου (π.χ. επιδερμικό αυξητικό παράγοντα (EGF), αυξητικό παράγοντα ινοβλαστών 1 (FGF1) και μετασχηματιστικό παράγοντα ανάπτυξης βητα 1 (TGFβ1), την αγγειογένεση (π.χ. αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικού παράγοντα Α (VEGFA)) και αναδιαμόρφωση μήτρας (π.χ. FGF1, ινώδες και μήτρα μεταλλοπεπτιδασών (MMPs)). Επιπλέον, Μ2 μακροφάγα παράγουν επίσης ανοσορυθμιστική παράγοντες (π.χ. IL10 και TGFβ1), που επιβραδύνει την ανοσολογική απόκριση.

ΤΑΜ συχνά βρεθεί να έχουν ένα φαινότυπο Μ2 και έχουν συσχετιστεί με μειωμένη επιβίωση σε ασθενείς με π.χ. μελάνωμα [10], [11], του μαστού [12], [13], των νεφρών [14] και της ουροδόχου κύστης [15] ., [16] Ωστόσο, αυτό δεν ισχύει για όλους τους καρκίνους Εμείς και άλλοι έχουν δείξει προηγουμένως ότι μια αυξημένη πυκνότητα των μακροφάγων σε CRC συσχετίζεται με καλύτερη πρόγνωση [17] -.. [20] Επίσης, το στομάχι ασθενών με καρκίνο έχουν αναφερθεί να έχουν μια καλύτερη πρόγνωση με υψηλό αριθμό ΤΑΜ [21], [22] Τα αποτελέσματα επί του προστάτη [23], [24], του πνεύμονα [25] – [29]. και καρκίνου του ενδομητρίου [30] – [32] είναι ωστόσο αντικρουόμενες. Καθίσταται ολοένα και πιο προφανές ότι τα μακροφάγα μπορεί να παίζουν διαφορετικούς ρόλους στην ογκογένεση εξαρτάται από ιστό και τον τύπο του καρκίνου. Είναι ενδιαφέρον να υποθέσουμε ότι οι διαφορετικοί ρόλοι παίζονται από μακροφάγα σε διάφορους καρκίνους θα μπορούσε να περιλαμβάνει παραλλαγές στην ισορροπία μεταξύ Μ1 και Μ2 φαινοτύπους (πρόληψη όγκων έναντι προαγωγή όγκων), οδηγείται από παράγοντες στο μικροπεριβάλλον του όγκου των μεμονωμένων καρκίνων. θα μπορούσαν επίσης να υπάρχουν διαφορές στο εσωτερικό ορισμένων τύπων καρκίνου.

έχουν CRCs έχουν υποτύπου σύμφωνα με μικροδορυφορικού τους (MSI) την κατάσταση και το φαινότυπο νησί methylator CpG (CIMP). Περίπου το 15% του ΚΕΣ ορίζονται ως μικροδορυφορική αστάθεια (MSI), ενός φαινοτύπου που προκαλούνται από ελαττώματα στην επιδιόρθωση αναντιστοιχία DNA, το οποίο έρχεται σε αντίθεση με μικροδορυφορικών σταθερές (MSS) CRCs [33]. Σε σποραδικές CRCs, MSI έχει ιδιαίτερα σχετίζεται με CIMP [34]. CIMP μπορεί να χαρακτηριστεί ως CIMP-υψηλή ή CIMP χαμηλή σύμφωνα με την κατάσταση hypermetylation των CpG νησίδων σε ένα σύνολο γονιδίων που είναι μη μεθυλιωμένα στο φυσιολογικό ορθοκολικό ιστό ή σε CIMP-αρνητικούς όγκους [35] – [38].

στην παρούσα μελέτη, η κατανομή των διαφορετικών υποτύπων των μακροφάγων αξιολογούνται κατά 485 κλινικά δείγματα του CRC, χρησιμοποιώντας συνθάσης νιτρικού οξειδίου 2 (NOS2) ως δείκτης για τον φαινότυπο μακροφάγων Μ1 και τον υποδοχέα καθαριστή CD163 ως δείκτης για την M2 μακροφάγων φαινότυπο. Η διείσδυση του NOS2

+ και CD163

+ κυττάρων που σχετίζονται με κλινικοπαθολογική και μοριακών μεταβλητών, καθώς και πρόγνωση, τόσο στην πλήρη ομάδα CRC και σε υποομάδες CRC καθορίζονται με βάση την κατάσταση διαλογής MSI και την κατάσταση CIMP. Θα μπορούσαμε να συμπεράνουμε ότι η διείσδυση του Μ1 μακροφάγων σε CRC συνοδεύεται από διηθητικά μακροφάγα και Μ2 συσχετίζεται με βελτιωμένη επιβίωση σε ένα στάδιο με τρόπο που εξαρτάται σε CRC, και ότι αυτή είναι ανεξάρτητη της κατάστασης διαλογής MSI και την κατάσταση CIMP.

Υλικά και μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

Ο χειρισμός των δειγμάτων ιστού και των δεδομένων των ασθενών στην παρούσα μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας της έρευνας στο Πανεπιστημιακό Νοσοκομείο της Umea (Περιφερειακό ηθικά Διοικητικό συμβούλιο κριτική στη Umeå, Σουηδία), συμπεριλαμβανομένων η διαδικασία με την οποία οι ασθενείς έδωσαν προφορικά ενημερωμένη συγκατάθεση τους. Η συγκατάθεση αυτή τεκμηριώθηκε σε κάθε εγγραφή του ασθενούς, και θεωρούνται από την Επιτροπή Δεοντολογίας να είναι επαρκής. δείγματα ιστού που έχει καταχωρηθεί ως αριθμός της υπόθεσης και χρόνο σε μια βάση δεδομένων που χρησιμοποιείται για τις αναλύσεις, χωρίς ονόματα ή τον προσωπικό αριθμό αναγνώρισης που αναφέρεται.

πληθυσμός Μελέτη

Κλινικά δείγματα από ασθενείς του Καρκίνου του παχέος εντέρου σε Umeå Μελέτη (CRUMS) [39], χειρουργικά για CRC συλλέχθηκαν μεταξύ 1995 και 2003 στο τμήμα της Χειρουργικής, Umeå University Hospital, Umeå, Σουηδία. Από όλους τους ασθενείς, σταθεροποιημένο με φορμαλίνη ενσωματωμένα σε παραφίνη ιστός υποβλήθηκε σε δειγματοληψία και παθολογικές μεταβλητές που χαρακτηρίζεται από ένα παθολόγο επανεξετάζοντας ρουτίνας βάφονται τμήματα. Τα κλινικά δεδομένα, συμπεριλαμβανομένων των δεδομένων επιβίωσης, ελήφθησαν από έναν χειρουργό με την αναθεώρηση των φακέλων των ασθενών. Ένα σύνολο 485 ασθενών (300 καρκίνους του παχέος εντέρου, του ορθού 180 καρκίνους, και 5 δεν προσδιορίζονται δευτερεύουσα εντός του παχέος εντέρου) συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη. Με 28 ασθενείς που λείπουν πληροφορίες είτε για NOS2 ή έκφραση CD163, 474 δείγματα για NOS2 και 468 δείγματα για CD163 ήταν διαθέσιμα για ανάλυση. Επικουρική χημειοθεραπεία χορηγήθηκε σε 68 (14.0%) ασθενείς. Προεγχειρητική ακτινοθεραπεία χορηγήθηκε σε 108 (60,0%) ασθενείς με καρκίνο του ορθού από τους οποίους 83 έλαβαν 5 × 5 Gy, και 25 έλαβαν 25 × 2 Gy. Για τις αναλύσεις επιβίωσης, 37 ασθενείς αποκλείστηκαν λόγω ελλιπών στοιχείων παρακολούθηση ή λόγω θανάτου από περιεγχειρητική επιπλοκές. Για τις αναλύσεις επιβίωσης βαθμολογίες όσον αφορά την αναλογία NOS2 /CD163, συνολικά 422 ασθενείς ήταν διαθέσιμοι.

Ανοσοϊστοχημεία και immunoflourescense

Δείγματα σταθεροποιήθηκαν σε 4% φορμαλδεΰδη και εμβαπτίστηκαν σε παραφίνη, σύμφωνα με συνήθεις διαδικασίες στο Τμήμα Κλινικής Παθολογίας, Umeå University Hospital, Umeå της Σουηδίας. Ένα τμήμα 4-μm από κάθε ασθενή ήταν κομμένα, αποξηραμένα, απο-κερωμένο και επανυδατώθηκαν. Τα πλακίδια στη συνέχεια υποβλήθηκαν σε ανάκτηση αντιγόνου θερμότητα μεσολάβηση χρησιμοποιώντας διάλυμα Diva (Biocare Medical, Concord, CA) σε μια χύτρα ταχύτητας Decloaker ™. Για ανοσοϊστοχημικές διαδικασίες, χρησιμοποιήθηκε μια ημιαυτόματη μηχανή χρώση (Ventana ES, Ventana Inc., Tuscon, AZ). μονοκλωνικό αντίσωμα αντι-CD163 (Novacastra) χρησιμοποιήθηκε σε αραίωση 1:100, και πολυκλωνικό αντίσωμα κατά NOS2 (Abcam) χρησιμοποιήθηκε σε μια αραίωση 1:50. Τα πλακίδια με αιματοξυλίνη.

Για την αξιολόγηση, διαφάνειες εξετάστηκαν κάτω από οπτικό μικροσκόπιο. Η ανοσοϊστοχημική χρώση αξιολογήθηκε ως πιο αντιπροσωπευτική περιοχή στην επεμβατική εμπρός και αξιολογούνται ως μη /αδύναμος (βαθμός 1), μέτρια (βαθμός 2), ισχυρή /ισχυρή (βαθμολογία 3) και μαζική διείσδυση (βαθμολογία 4) σύμφωνα με Forssell et al. [18]. Τα δείγματα αξιολογήθηκαν δύο φορές από τον ίδιο παρατηρητή, και ασύμφωνα περιπτώσεις επανεξετάστηκαν για τρίτη φορά, ακολουθούμενη από μία οριστική απόφαση. Για immunoflourescense, αντι CD163-μονοκλωνικό αντίσωμα, αντι-NOS2 πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού και αντι-CD68 κουνελιού πολυκλωνικό αντίσωμα (GeneTex Inc) χρησιμοποιήθηκε σε μια αραίωση 1:50, και αντι-CD68 μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού (Dako) χρησιμοποιήθηκε σε μια αραίωση του 1:400. Για μπλοκ, τα τμήματα ιστού κατεργάστηκαν με PBS που περιέχει 10% φυσιολογικό ορό κατσίκας και 0.4% Triton Χ-100 για 20 λεπτά, ακολουθούμενη από πλύση σε ρυθμιστικό πλύσης (PBS? 0,2% Triton Χ-100? 0,2% λευκωματίνη βόειου ορού). Στη συνέχεια, τα πλακίδια επωάστηκαν με πρωτογενές αντίσωμα (σε PBS? 0,1% Triton Χ-100) για 1 ώρα σε θερμοκρασία δωματίου, μετά την οποία πλύθηκαν σε ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης. Οι πλάκες επωάστηκαν περαιτέρω με ϋΑΡΙ σε αραίωση 1:1000 και δευτερογενούς αντι-κουνελιού IgG και IgG Alexa®488 Alexa®555 αντισώματα αντι-κουνελιού (Invitrogen) αραιωμένο 1:400 (σε PBS? 0,1% Triton Χ-100) για 1 ώρα. Μετά από επιπλέον πλύσεις, τα πλακίδια τοποθετούνται σε Vectashield μέσο (Vector Laboratories) στερέωσης και εμφανισμένα χρησιμοποιώντας ένα Nikon D-Eclipse C1 ομοεστιακό μικροσκόπιο με εμβάπτιση λάδι και ένα 40 × στόχο.

MSI κατάσταση διαλογή και την κατάσταση CIMP

κατάσταση διαλογής MSI προσδιορίστηκε με ανοσοϊστοχημεία όπως περιγράφηκε προηγουμένως [39]. Μια θετική MSI κατάσταση διαλογής (MSI) αποδόθηκε σε δείγματα ιστού με καρκινικά κύτταρα που στερούνται πυρηνική χρώση για μία ή περισσότερες από τις πρωτεΐνες MLH1, MSH2, MSH6, ή PMS2, αυτό σε αντίθεση με μια κατάσταση αρνητικού ελέγχου (MSS), όπου θετική όγκος πυρήνες ήταν παρόντες εκφράζοντας τις τέσσερις δείκτες. κατάσταση CIMP προσδιορίστηκε σύμφωνα με υπερμεθυλίωση ενός πάνελ οκτώ γονίδιο (

CDKN2A

,

MLH1

,

CACNA1G

,

NEUROG1

,

RUNX3

,

SOCS1

,

IGF2

,

και CRABP1

) με την μέθοδο MethyLight (ποσοτική πραγματικού χρόνου PCR) που περιγράφηκε προηγουμένως με αλληλουχίες εκκινητή και ανιχνευτή [39] , [40]. Ο παρακάτω αριθμός των υπερμεθυλιωμένων γονιδίων ορίζεται CIMP-αρνητικούς όγκους, 0 γονίδια? CIMP-χαμηλή όγκους, 1-5 γονίδια? και CIMP υψηλής όγκων, 6-8 γονίδια.

Στατιστικές αναλύσεις

Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση PASW Στατιστικής 18 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA). Cross-πινακοποιήσεις αναλύθηκαν με την ακριβή δοκιμασία και γραμμικές σχέσεις Fischer με τη δοκιμή σύνδεσης ακριβή γραμμική-από-γραμμική. ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση ειδική για τον καρκίνο επιβίωσης, και οι συγκρίσεις μεταξύ των ομάδων έγιναν με τη δοκιμασία log-rank. Ειδική για τον καρκίνο επιβίωση ορίστηκε ως ο θάνατος με γνωστή διαδίδονται ή υποτροπιάζουσα νόσο. αναλύσεις πολυμεταβλητή επιβίωση πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση Cox μοντέλα αναλογικών κινδύνων.

P

& lt?. 0.05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική

Αποτελέσματα

Η έκφραση των δεικτών των μακροφάγων Μ1 και Μ2

επιλέχθηκε NOS2 ως δείκτης για μακροφάγα με ένα φαινότυπο M1 και CD163 ως δείκτης για μακροφάγα με φαινότυπο Μ2. Για την επικύρωση εάν NOS2 και CD163 ήταν δείκτες, είναι σε θέση να διαχωρίσει μεταξύ διακριτών πληθυσμών των μακροφάγων, τα δείγματα 10 ασθενών CRC επιλέχθηκαν τυχαία και η κατανομή των NOS2 και CD163 αναλύθηκε με διπλή χρώση immunoflourescent ακολουθούμενη από ομοεστιακό μικροσκόπιο. NOS2 και CD163 βρέθηκε να εκφράζεται κυρίως από διάφορους πληθυσμούς μακροφάγων (Σχήμα 1Α). Ένα μικρό υπερ-γύρο θα μπορούσε ωστόσο να προσδιοριστεί, η οποία είναι σύμφωνη με την πλαστική φύση των μακροφάγων. Τα μακροφάγα που εκφράζεται έντονα ένας από τους δείκτες, εντούτοις, με συνέπεια δεν εκφράζουν το δεύτερο δείκτη. Αυτό επαληθεύει NOS2 και CD163 ως δείκτες που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διάκριση μεταξύ των διαφόρων υποπληθυσμών των μακροφάγων που εμφανίζουν κυρίως Μ1 ή Μ2 φαινοτύπους, αντίστοιχα. Επιπλέον, η έκφραση NOS2 και CD163 βρέθηκε σε κύτταρα που εξέφραζαν επίσης την μακροφάγων CD68 δείκτη (Εικόνα 1Β και Γ).

συνεστιακή εικόνες των χρώσεις immunoflourescent σε CRC του (Α) NOS2 (κόκκινο) και CD163 (πράσινο) , (Β) CD68 (κόκκινο) και CD163 (πράσινο) και (Γ) NOS2 (κόκκινο) και CD68 (πράσινο). Οι πυρήνες αποκαλύφθηκε με χρώση DAPI (μπλε), και επικάλυψης flourescense συλλέγονται από όλα τα κανάλια.

Η

Η έκφραση της NOS2 και CD163 ήταν ημι-ποσοτικά αξιολογηθεί σε δείγματα από 485 ασθενείς CRC χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημεία σύμφωνα με μια προηγουμένως τεκμηριωμένη τεσσάρων διαβαθμισμένη κλίμακα [18]. Αντιπροσωπευτικά χρώσεις της διεισδύοντας NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα εμφανίζονται μπορώ να καταλάβω 2. Περίπου το 70% όλων των όγκων εμφανίζεται μια μέτρια σε μαζική διείσδυση των NOS2

+ και CD163

+ κύτταρα (σημειώσει 2 -4), ενώ το υπόλοιπο έδειξαν ασθενή ή καθόλου διείσδυση (βαθμός 1). Η πλειοψηφία της έκφρασης NOS2 και CD163 βρέθηκε σε κύτταρα που βρίσκονται στο στρώμα του όγκου, με την υψηλότερη πυκνότητα κατά μήκος της διεισδυτικής μέτωπο του όγκου.

Αντιπροσωπευτικά φως μικροσκοπικές εικόνες των ανοσοϊστοχημικών χρώσεων του NOS2 και CD163 σε διαδοχικά σημεία της ίδιας δείγμα όγκου CRC.

Η

Η σχέση μεταξύ NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα

Οι συχνότητες των διεισδύοντας NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα στο μπροστινό μέρος του όγκου παρουσιάζονται στον πίνακα 1. τα διηθητικά μακροφάγα εκφράζουν NOS2 ή CD163 ήταν ιδιαίτερα θετικά (

P

& lt? 0,0001). Τα ποσά των CD163

+ κύτταρα στο μπροστινό μέρος του όγκου, ωστόσο, ήταν συχνά υψηλότερη από εκείνη των

+ κύτταρα NOS2.

Η

Σύνδεσης μεταξύ διεισδύοντας NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα και κλινικοπαθολογική και μοριακών παραμέτρων

Οι βαθμολογίες των διεισδύοντας NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα σε δείγματα CRC συσχετίστηκαν με διάφορες κλινικοπαθολογική μεταβλητές (Πίνακας 2). Όταν συμπεριλαμβανομένων όλων των όγκων, χωρίς σχέση NOS2

+ ή CD163

+ διήθηση μακροφάγων βρέθηκε με το φύλο, την ηλικία, το βαθμό, πρότυπο ανάπτυξης, επικουρική χημειοθεραπεία ή προεγχειρητική ακτινοθεραπεία. Ένας ασθενής γραμμική τάση βρέθηκε για αυξημένη διείσδυση των NOS2

+ μακροφάγα από την ceacum έως το ορθό (

P

= 0,043). Ενώ καμία σημαντική συσχέτιση της έκφρασης NOS2 βρέθηκε με τον τύπο του όγκου, μία σημαντική συσχέτιση με τον τύπο του όγκου αποτελέσματα για έκφραση CD163 (

P

= 0,005), με CD163 διεισδύσει όγκους πιο συχνά έχουν μια μη βλεννώδες ιστολογία. Μια ισχυρή αντίστροφη συσχέτιση με το στάδιο του όγκου βρέθηκε τόσο για NOS2

+ (

P

& lt? 0.0001) και CD163

+ (

P

& lt? 0.0001). Διήθηση μακροφάγων

Όταν όσον αφορά τη διείσδυση NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα με το μοριακό παραμέτρων (πίνακας 3), καμία συσχέτιση της NOS2

+ ή CD163

+ διήθηση μακροφάγων βρέθηκε να είτε το καθεστώς ελέγχου MSI ή την κατάσταση CIMP. Όταν συνδυάζοντας το καθεστώς ελέγχου MSI με την κατάσταση CIMP ωστόσο, CD163

+ διήθηση μακροφάγων βρέθηκε να είναι σημαντικά χαμηλότερη σε CIMP-υψηλής όγκους σε σύγκριση με CIMP-αρνητικό ή CIMP-χαμηλή όγκους μεταξύ της ομάδας των MSS όγκους (

P

= 0,042).

η

προγνωστική σημασία της διεισδύοντας NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα

Για να εκτιμηθεί η προγνωστική επίδραση των μακροφάγων διείσδυση, συγκρίναμε τη συνολική του καρκίνου -εξειδικευμένης επιβίωση σε ασθενείς με διάφορα αποτελέσματα της διεισδύοντας NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα. Το σχήμα 3 δείχνει Kaplan-Meier για καρκίνο ειδικών επιβίωση σε ασθενείς CRUMS με διαφορετικά επίπεδα διείσδυση NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα. Η αυξημένη διείσδυση των NOS2

+ μακροφάγων στο μπροστινό μέρος του όγκου ήταν ιδιαίτερα σημαντικά σχετίζεται με μια βελτιωμένη πρόγνωση (Log-rank

P

= 0,0003) (Εικόνα 3Α). Μια παρόμοια συσχέτιση παρατηρήθηκε επίσης για CD163

+ μακροφάγα (Log-rank

P

& lt? 0.0001) (Σχήμα 3D). Σε δυνητικά θεραπευτικά εκτομή CRCs (δηλαδή εκτός από ασθενείς με απομακρυσμένες μεταστάσεις ή μη ριζική χειρουργική επέμβαση) τη σημασία της σχέσης μεταξύ NOS2

+ διήθηση μακροφάγων και την πρόγνωση χάθηκε (Log-rank

P

= 0.132). Ωστόσο, σε αυτή την ομάδα η σημασία της NOS2

+ διήθηση μακροφάγων και την πρόγνωση αποκαταστάθηκε όταν χωρίζει περιπτώσεις καρκίνου του παχέος εντέρου από του ορθού, Log-rank

P

= 0,008 στο παχύ έντερο σε σύγκριση με το Log-rank

P

= 0,881 σε ορθού (Σχήμα 3Β και C). Για την αντίστοιχη ανάλυση των CD163

+ διήθηση των μακροφάγων σε θεραπευτικά εκτομή ΚΕΣ βρεθεί μια παρόμοια τάση (Log-rank

P

= 0,034 σε όλες τις CRCs? Log-rank

P

= 0.059 στο παχύ έντερο?. Log-rank

P

= 0.236 στο ορθό) (Σχήμα 3Ε και F)

CRC περιπτώσεις βαθμολογήθηκαν για NOS2 (Α-Γ) και CD163 (D-F) έκφρασης , το σκορ 1-4. Εμφανίζονται είναι κατά Kaplan-Meier για καρκίνο ειδικών επιβίωση (Α και Δ) όλα τα ΚΕΣ (Β και Ε) ενδεχομένως θεραπευτικά εκτομή του παχέος εντέρου, και (C και F) δυνητικά θεραπευτικά εκτομή των καρκίνων του ορθού. τεστ log-rank χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό

P

τιμές.

Η

Λόγω της ισχυρής συσχέτισης μεταξύ το στάδιο του όγκου και της έκφρασης των NOS2 και CD163 πραγματοποιήσαμε πολυπαραγοντικά μοντέλα αναλογικών κινδύνων κατά Cox, συμπεριλαμβανομένης της μεταβλητές φύλο, ηλικία, localization, το στάδιο του όγκου, και ένα δείκτη μακροφάγων, αντίστοιχα. αναλογίες κινδύνου (HR) για τις δύο NOS2 (HR 0.67, 95% CI 0,40 έως 1,12,

P

= 0,12) και CD163 (HR 0.66, 95% CI 0,42 έως 1,06,

P

= 0.087) έδειξε μια προστατευτική δράση, αλλά δεν ήταν στατιστικά σημαντική, τονίζοντας την εξάρτηση από το στάδιο.

Η πιθανή επίδραση των μεταβολών του λόγου NOS2 /CD163 στην επιβίωση των ασθενών αναλύθηκε επίσης. Δεν φάνηκε σημαντική διαφορά στην ειδική για τον καρκίνο επιβίωση σε CRC σε σχέση με την αναλογία NOS2 /CD163, ούτε σε όλες τις περιπτώσεις CRC (Σχήμα 4Α), ούτε στην επιλεγμένη ομάδα των δυνητικά θεραπευτικά εκτομή των καρκίνων του παχέος εντέρου (Σχήμα 4Β). Επιπλέον, η αναλογία NOS2 /CD163 δεν συσχετίστηκε σημαντικά με την επιβίωση σε πολυπαραγοντική ανάλυση (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Καρκίνος-ειδική επιβίωση των περιπτώσεων CRC άνοιξε για την αναλογία NOS2 /CD163. Εμφανίζονται είναι κατά Kaplan-Meier για του λόγου NOS2 /CD163 στο (Α) όλα τα ΚΕΣ ή (Β) δυνητικά θεραπευτικά εκτομή των καρκίνων του παχέος εντέρου. τεστ log-rank χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό

αξίες

Ρ.

Η

Προγνωστική σημασία της διεισδύοντας NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα ανάλογα με την κατάσταση ελέγχου MSI και το καθεστώς CIMP

για να αναλυθεί περαιτέρω η προγνωστική αξία των μακροφάγων διείσδυση, συγκρίναμε τη συνολική ειδική για τον καρκίνο επιβίωση μέσα σε διαφορετικές υποομάδες του CRC καθορίζονται με βάση την κατάσταση ελέγχου MSI και την κατάσταση CIMP.

MSI περιπτώσεις CRC βρίσκονται σε έχουν μια ελαφρώς καλύτερη πρόγνωση σε σύγκριση με τις περιπτώσεις MSS [33]. Διήθηση μακροφάγων βρέθηκε να είναι ένας προγνωστικός παράγοντας σε υποομάδες των δύο MSI (Σχήμα 5Α και D) και των περιπτώσεων MSS (Σχήμα 5Β και Ε). Η προγνωστική αξία της NOS2

+ διήθηση μακροφάγων δεν έφθασε σημασία σε περιπτώσεις MSI (Log-rank

P

= 0,256), αλλά το έπραξε στις περιπτώσεις MSS (Log-rank

P

= 0,002). CD163

+ διήθηση μακροφάγων ήταν σημαντική για την πρόγνωση τόσο MSI (Log-rank

P

= 0,009) και MSS (Log-rank

P

= 0,003) περιπτώσεις. Όταν συνδυάζοντας το καθεστώς ελέγχου MSI με χαμηλή (1-2) ή υψηλή (σκορ 3-4) διείσδυση της NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα, σημαντικές επιπτώσεις στην πρόγνωση βρέθηκε τόσο για NOS2

+ ( log-rank

P

= 0,005) και CD163

+ (log-rank

P

= 0,0004) διήθηση των μακροφάγων (Σχήμα 5C και F). Η πιο ευνοϊκή πρόγνωση βρέθηκε σε περιπτώσεις MSI εξαιρετικά μολυσμένο από μακροφάγα, ιδίως με NOS2

+ μακροφάγα. περιπτώσεις MSS με χαμηλή διείσδυση μακροφάγων εμφανίζεται τη χειρότερη πρόγνωση (Σχήμα 5C και F). Δεν υπάρχουν σημαντικές διαφορές στην πρόγνωση βρέθηκαν μεταξύ MSI και MSS περιπτώσεις μέσα σε υποομάδες με χαμηλή ή υψηλή διείσδυση NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα.

υποομάδες της CRC ήταν τοποθετημένα σύμφωνα με το καθεστώς ελέγχου MSI και σκόραρε για NOS2 (Α-Γ) και CD163 (D-F) έκφρασης, το σκορ 1-4. Εμφανίζονται είναι κατά Kaplan-Meier για καρκίνο ειδικών επιβίωση (Α και D) περιπτώσεις MSI, (Β και Ε) περιπτώσεις MSS, και (C και F) κατάσταση σε συνδυασμό διαλογής MSI και NOS2 ή CD163, 1-2 ή 3 4, αντίστοιχα. τεστ log-rank χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό

P

τιμές.

Η

διήθηση μακροφάγων φάνηκε να είναι προγνωστική σημασία σε όλες τις υποομάδες CIMP (Εικόνα 6Α-C και Ε-G). NOS2

+ διήθηση μακροφάγων έδειξαν σημαντική επίδραση στην ειδική για τον καρκίνο επιβίωση σε CIMP-χαμηλή περιπτώσεις (

P

= 0,011). Τα μακροφάγα εκφράζουν CD163 έδειξε σημαντικές επιπτώσεις στην πρόγνωση σε CIMP αρνητικά αποτελέσματα (Log-rank

P

= 0.006) και CIMP-υψηλή (Log-rank

P

= 0.022) περιπτώσεις. Όταν συνδυάζοντας το καθεστώς ελέγχου CIMP με χαμηλή (1-2) ή υψηλή (σκορ 3-4) διείσδυση των μακροφάγων εκφράζει NOS2 ή CD163, σημαντικές επιπτώσεις στην πρόγνωση βρέθηκε τόσο για NOS2 (Log-rank

P

= 0.015) και CD163 (Log-rank

P

= 0.001) διήθησης (Σχήμα 6D και H). Η πιο ευνοϊκή πρόγνωση βρέθηκε σε εξαιρετικά μολυσμένο υποομάδες CIMP (Σχήμα 6D και H). CIMP υποομάδες με χαμηλή διείσδυση της NOS2

+ ή CD163

+ κυττάρων σε σύγκριση έδειξε χειρότερη πρόγνωση. Δεν υπάρχουν σημαντικές διαφορές στην πρόγνωση βρέθηκαν μεταξύ CIMP-αρνητικό, CIMP χαμηλές ή CIMP-υψηλής περιπτώσεις κατά τις υποομάδες με χαμηλή ή υψηλή διείσδυση NOS2

+ ή CD163

+ μακροφάγα.

Υποομάδες της CRC ήταν τοποθετημένα ανάλογα με την κατάσταση CIMP και σκόραρε για NOS2 (Α-Δ) και CD163 (Ε-Η) έκφρασης, το σκορ 1-4. Εμφανίζονται είναι κατά Kaplan-Meier για δειγμάτων (Α και Ε) CIMP αρνητικά περιπτώσεις, (Β και F) CIMP-χαμηλή περιπτώσεις, (C και G) CIMP-υψηλής περιπτώσεις, και (D και H), σε συνδυασμό κατάσταση CIMP και NOS2 ή CD163, 1-2 ή 3-4, αντίστοιχα. τεστ log-rank χρησιμοποιήθηκαν για τον υπολογισμό

P

τιμές.

Η

Συζήτηση

Το μικροπεριβάλλον υποδοχής υφίσταται δραματικές αλλαγές κατά τη διάρκεια της εξέλιξης του καρκίνου, επηρεάζοντας στρωματικά κύτταρα, μήτρα σύνθεση, η αγγειογένεση καθώς και η ανοσολογική απόκριση, η οποία με τη σειρά της μπορεί να έχει σημαντικές επιπτώσεις στην ανάπτυξη του όγκου και την εξάπλωση [41]. Μία φλεγμονώδης μικροπεριβάλλον του όγκου έχει προταθεί ως η έβδομη σήμα κατατεθέν της εξέλιξης του καρκίνου [42]. Ανάλυση του ανοσοποιητικού contexture – δηλαδή τη θέση, την πυκνότητα και λειτουργικό προσανατολισμό των κυττάρων του ανοσοποιητικού – και πώς είναι ενσωματωμένη με καρκινικά μοριακά χαρακτηριστικά μπορεί να παρέχει σημαντικές πληροφορίες για την πρόγνωση των ασθενών, καθώς και την πρόβλεψη της απόκρισης σε διάφορες θεραπείες θεραπεία [43], [ ,,,0],44]. Τα μακροφάγα παίζουν σημαντικό ρόλο στο μπροστινό μέρος του όγκου, εκκρίνουν παράγοντες που με πολλούς τρόπους θα μπορούσαν να επηρεάσουν τόσο τον όγκο και τις γύρω στρωματικά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων άλλων κυττάρων του ανοσοποιητικού συστήματος.

Έχουμε δείξει προηγουμένως σε μια σχετικά μεγάλη κλινική κοόρτης ότι ένα υψηλό διείσδυση των κυττάρων που εκφράζουν τον μακροφάγων CD68 δείκτη στο μέτωπο του όγκου στα αποτελέσματα CRC σε μια βελτιωμένη πρόγνωση [18]. Εδώ, η κατανομή των μακροφάγων με ένα φαινότυπο Μ1 ή Μ2 αξιολογήθηκε

in situ

σε αυτή την ομάδα για να αναλύσει τη σημασία των διαφορετικών υποτύπων των μακροφάγων σε CRC πρόγνωση των ασθενών. Για τη μελέτη αυτή, επιλέχθηκαν NOS2 και CD163 ως δείκτες για τον διαχωρισμό μεταξύ των μακροφάγων που εμφανίζουν κυρίως M1 ή M2 φαινοτύπους, αντίστοιχα. Τόσο NOS2 και CD163 έχουν χρησιμοποιηθεί από άλλους ως δείκτες για να καθορίσει M1 ή M2 φαινοτύπους των μακροφάγων σε ανθρώπινους καρκίνους [10], [45] – [57]. Εμείς εδώ επιβεβαιώθηκε με διπλή χρώση immunoflourescent και συνεστιακή ανάλυση ότι αυτοί οι δείκτες σε μεγάλο βαθμό οι χωριστές μεταξύ δύο διαφορετικών κυτταρικών υποπληθυσμών που είναι της μακροφάγων (Σχήμα 1). Ωστόσο, φαίνεται να υπάρχει ένας μικρός αριθμός κυττάρων που κάνουν εκφράζουν τόσο NOS2 και CD163, αλλά πιο συχνά σε μειωμένες ποσότητες, γεγονός που υποδηλώνει ότι συμβαίνουν μερικές φορές μια μικτή φαινότυπο. υποτύπων των μακροφάγων που πολύ εκφράζουν είτε NOS2 ή CD163, όμως πολύ σπάνια εκφράζουν το δείκτη για το αντίθετο υπότυπο. Η διακριτή ορισμός των μακροφάγων στο πληθυσμούς Μ1 και Μ2 υποτύπους είναι πιθανό να είναι μια μικρή υπεραπλούστευση, αφού τα μακροφάγα είναι ιδιαίτερα πλαστικά κύτταρα και μπορεί να εμφανίσει ένα φάσμα φαινοτύπων [58]. Ωστόσο, οι δείκτες των Μ1 και Μ2 μακροφάγα μπορεί ακόμα να χρησιμοποιηθεί για να αναγνωρίσει το κύριο φαινότυπο ή τη λειτουργία των διαφορετικών πληθυσμών μακροφάγων. Ακόμη και αν διαπιστώνουμε ότι NOS2 και CD163 εκφράζονται από διαφορετικούς πληθυσμούς μακροφάγων, εξακολουθεί να υπάρχει ο κίνδυνος ότι δεν είναι όλα τα μακροφάγα M1 ή M2 εκφράζουν αυτούς τους δείκτες και ότι ως εκ τούτου θα μπορούσε να χάσει μέρη των μακροφάγων πληθυσμών στη μελέτη μας. Περαιτέρω μελέτες απαιτούνται για την επαλήθευση των φαινοτύπων Μ1 και Μ2 και να βρείτε πιο συγκεκριμένους δείκτες που διακρίνουν μεταξύ των πληθυσμών των μακροφάγων Μ1 και Μ2.

Όταν συσχετίζεται με κλινικοπαθολογική χαρακτηριστικά (Πίνακας 2), ένας ασθενής γραμμική τάση βρέθηκε για αυξημένο διήθηση του Μ1 μακροφάγων από την ceacum προς το ορθό, η οποία είναι σύμφωνη με την ορθοκολικό θεωρία συνεχές προτείνει Yamauchi et al [59], [60]. Στη μελέτη τους, CIMP-υψηλή, MSI-υψηλής και

BRAF

μεταλλάξεις βρέθηκαν να αυξάνουν σταδιακά από το ορθό με το ανιόν κόλον. Ceacal καρκίνοι βρέθηκαν να αντιπροσωπεύουν ένα μοναδικό υπότυπο που δεν ακολουθούν την τάση γραμμικότητα. Ωστόσο, για διήθηση μακροφάγων ceacal καρκίνοι δεν αποκλείστηκαν από τη γραμμικότητα. Η έκφραση του NOS2 και CD163 αντιστρόφως συσχετίζεται με το στάδιο του όγκου, υποδεικνύοντας ότι οι υψηλότερες όγκοι στάδιο σε μεγαλύτερο βαθμό έχουν διαφύγει το ανοσοποιητικό σύστημα. Επιπλέον, NOS2 και έκφραση CD163 συσχετίζονται καλά με την έκφραση των μακροφάγων CD68 δείκτη (

P

& lt? 0,0001)., Η οποία υποστηρίζει ότι NOS2 και CD163 εκφράζονται από κύτταρα του μακροφάγων

πολλές κλινικές μελέτες έχει παρατηρηθεί ότι ένα υψηλό διείσδυση του ΤΑΜ συσχετίζεται με κακή πρόγνωση και ΤΑΜ έτσι προτείνεται να είναι από Μ2 φαινοτύπου που προάγουν την εξέλιξη του όγκου. Ωστόσο, εμείς και άλλοι έχουμε δει πρόσφατα ότι υψηλές ποσότητες ΤΑΜ σε CRC προσδίδουν ένα καλύτερο ποσοστό πρόγνωση και την επιβίωση [17] – [20], [52]. Αυτή είναι η πρώτη μελέτη, με τις γνώσεις μας, όπου είναι δείκτες για υποτύπους Μ1 και Μ2 μακροφάγα χρησιμοποιούνται μαζί στο σκοπό να συγκρίνει την κατανομή των διαφορετικών φαινοτύπων μακροφάγων και τη σχέση τους με την πρόγνωση σε CRC. Θα μπορούσαμε να παρατηρήσουμε μια σημαντική στατιστική συσχέτιση μεταξύ του ύψους των NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα (

P

& lt? 0,0001), γεγονός που αποδεικνύει την παράλληλη παρουσία των μακροφάγων τόσο με Μ1 και Μ2 φαινοτύπων κατά τη όγκου επεμβατική εμπρός (Πίνακας 1). Επιπλέον, μια αυξημένη διείσδυση τόσο NOS2

+ και CD163

+ μακροφάγα στο μπροστινό όγκου συσχετίζεται με μια σημαντικά βελτιωμένη πρόγνωση (Σχήμα 3). Η συσχέτιση αυτή βρέθηκε επίσης σε μια υποομάδα θεραπευτικά εκτομή καρκίνων του παχέος εντέρου, αλλά όχι σε μια υποομάδα θεραπευτικά εκτομή του ορθού. Μια πιθανή εξήγηση για αυτή τη διαφορά μπορεί να είναι ότι σε αντίθεση με τους περισσότερους ασθενείς με καρκίνο του παχέος εντέρου, πολλοί (60%) των ασθενών με καρκίνο του ορθού έλαβαν προεγχειρητική ακτινοθεραπεία, η οποία είναι γνωστό ότι προκαλεί μία μειωμένη φλεγμονώδη αντίδραση [61]. Ωστόσο, βρήκαμε καμία διαφορά στην διήθηση των μακροφάγων μεταξύ όγκων σε ασθενείς που είχαν λάβει προεγχειρητική ακτινοθεραπεία και εκείνων που δεν είχαν (Πίνακας 2).

Η σχέση μεταξύ διηθούν μακροφάγα του Μ2 φαινότυπο και πρόγνωση σε CRC έχει προηγουμένως αναλυθεί σε μερικές μελέτες. Σύμφωνα με Nagorsen et al., Όπως και στη μελέτη μας, στρωματικά διείσδυση του CD163

+ M2 μακροφάγα σε CRC συσχετίστηκε με σημαντικά βελτιωμένη επιβίωση [52]. Οι συγγραφείς αυτοί δεν εντούτοις να αξιολογήσει την παράλληλη παρουσία του Μ1 μακροφάγων. Algars et al. βρήκε μια θετική συσχέτιση της περινεοπλασματικής CLEVER-1 /Stabilin-1

+ M2 μακροφάγα και επιβίωσης σε CRCs [17]. Βρήκαν επίσης ότι μια χαμηλή αναλογία M1 /​​M2 οδήγησε σε πιο υποτροπιάζουσα νόσο. Ωστόσο, στη μελέτη τους M1 μακροφάγα θεωρήθηκαν ως τα μακροφάγα που δεν εκφράζουν Clever-1 /Stabilin-1. Οι Μ1 μακροφάγων έχουν προταθεί για να έχουν ογκοκτόνο δραστικότητα, και όπως αναμενόταν, οι ασθενείς που φέρουν όγκους με υψηλή διείσδυση του NOS2

+ μακροφάγα βρέθηκαν να έχουν σημαντικά καλύτερη πρόγνωση από εκείνους με μικρή ή καθόλου διείσδυση NOS2 (Σχήμα 3Α). Παρόμοια με τη μελέτη μας, Ohri et al.