ενζυμική ανοσοπροσροφητική Δοκιμασία, ELISA, είναι ένα εξαιρετικά ευαίσθητο immunoeassay που χρησιμοποιείται στη θέση του ραδιοανοσοπροσδιορισμό, δεδομένου ότι δεν περιλαμβάνει ειδικές διαδικασίες χειρισμού και απόρριψης που απαιτούν εργασία με ραδιενεργές ουσίες. Η ELISA βασίζεται στα αντισώματα για την ανίχνευση της παρουσίας αντιγόνων σε υγρά δείγματα, αλλάζοντας έτσι από ένα διαυγές υγρό σε ένα έγχρωμο ένα. Επειδή είναι βασίζονται σε αντισώματα, τα ELISAs ονομάζονται ανοσοπροσδιορισμούς. ELISAs μπορεί να ανιχνεύσει ποσότητες λεπτών νοσογόνων παραγόντων σε δείγματα σε όπως σωματικά υγρά, πριν από το σώμα είχε την ευκαιρία να εξαπολύσουν μία ανοσοαπόκριση. Κατά τον πειραματισμό χρησιμοποιώντας μία ELISA, τα αντισώματα που υπάρχουν στα δείγματα δεσμεύονται στην πλάκα αντιγόνο και μετά την απομάκρυνση της περίσσειας αντισώματος, συνδεδεμένο αντίσωμα μπορεί να ανιχνευθεί με την προσθήκη δεύτερου αντισώματος με ένζυμο συζευγμένο.

Ο στόχος αυτής της μελέτης είναι να εξετάσει δύο πράγματα: πρώτον, είναι δεσμευτικές για ένα πιάτο που περιέχει δύο διαφορετικά αντισώματα ειδικά για δύο διαφορετικά αντιγόνα αντιγόνου-αντισώματος εκεί: λυσοζύμης αυγού κότας (HEL) και αλβουμίνη βόειου ορού ( BSA), και δεύτερο, πόσο της σύνδεσης είναι παρόν στην πλάκα; Για την εξέταση αυτών των ερωτημάτων, χρησιμοποιώντας ένα Enzyme-Linked Immunosorbent Assay να βοηθήσει οθόνη για υβριδώματα που εκκρίνουν αντίσωμα, το οποίο είναι τόσο εξαιρετικά ευαίσθητο και λογικό να εκτελέσει. Η διαδικασία της χρησιμοποιώντας μια ELISA έχει αυξηθεί αντιλήψεις των συνδέσεων του αντιγόνου με το αντίσωμα της εν λόγω δοκιμές, όπως HIV, τα ναρκωτικά (μαριχουάνα), εγκυμοσύνες, κλπ

Ο σκοπός της ELISA είναι να καθοριστεί εάν το συγκεκριμένο αντιγόνο-αντίσωμα δέστρες είναι παρούσες σε ένα δείγμα? αν υπάρχουν αντισώματα που δεσμεύονται με αντιγόνα που υπάρχουν, μία ELISA βοηθά να προσδιοριστεί πόσο. Υπάρχουν δύο κύριες παραλλαγές με αυτή τη μέθοδο? το ένα είναι έτσι ώστε να καθορίσει το ποσό της δέσμευσης αντιγόνου-αντισώματος και το άλλο, αναφέρθηκε προηγουμένως, είναι έτσι μπορούμε να δούμε πόσο αντίσωμα είναι παρόν στο δείγμα μας. Σε αυτό το εργαστηριακό πείραμα, έχουμε επικάλυψη μια μικρο-πλάκα με φρεάτια με αντιγόνα. Το αντιγόνο απορροφάται ισχυρά από το πλαστικό και παραμένει συνδεδεμένο με την επιφάνεια καλά καθ ‘όλη τη διαδικασία. Μετά επικάλυψη και πρόσθεση των αντισωμάτων, ήμασταν σε θέση να καθορίσει την δέσμευση αντιγόνου-αντισώματος.

Στα περισσότερα πειράματα, οι ερευνητές χρησιμοποιούν BSA και HEL ως άσχετα αντιγόνα για τον έλεγχο για μη-ειδική αντιδραστικότητα αντιγόνου. Για παράδειγμα, τα φρεάτια επικαλυμμένα με αντιγόνο HEL δεν πρέπει να εμφανίζουν θετικά σημάδια όταν αντισώματα αντι-ΒδΑ είναι παρόντες, και αντιστρόφως. Αυτό σημαίνει ότι η ποσότητα του ενζύμου-συζευγμένο αντίσωμα δεσμεύεται σε κάθε φρεάτιο είναι σε θέση να υδρολύει ένα άχρωμο υπόστρωμα για να δώσει ένα έγχρωμο προϊόν.

Εν κατακλείδι, τα αποτελέσματα από τη χρήση ενός ELISA θα πρέπει να συμπεράνει ότι τα αντιγόνα δεσμεύονται με αντισώματα, με οι παρεχόμενες αντιγόνα παρόν. Το δευτερεύον αντίσωμα είναι συνδεδεμένο με ένα ένζυμο που μεταβάλλει χημικώς το ένζυμο υποστρώματος, μετατρέποντάς το από ένα άχρωμο διάλυμα σε ένα κίτρινο διάλυμα. Μια πλευρά σημείωση όμως, κενό φρεάτια χωρίς αντιγόνα πρέπει να αφαιρούνται από την πλάκα ελέγχου, αλλά όχι μορφή είτε πλακών επικαλυμμένα με αντιγόνο. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα το δευτερεύον αντίσωμα που δεσμεύεται ομοιοπολικά, συζευγμένο, σε ένα ένζυμο που καταλύει μια χημική αντίδραση όταν προστίθεται το υπόστρωμα του ενζύμου. Αυτό θα παράγει μια αλλαγή χρώματος εάν το δείγμα ορού περιέχεται αντίσωμα στα βακτήρια, επειδή το ένζυμο δεσμευμένο δεύτερο αντίσωμα θα συνδέεται προς το πρωτογενές αντίσωμα ήδη δεσμευμένο στο αντιγόνο στα φρεάτια.

Η