Αφηρημένο

Ιστορικό

Η κλινική απόφαση για τη βασική θεραπεία για τον καρκίνο του προστάτη υπαγορεύεται από μεταβλητές με ανεπαρκή εξειδίκευση. Η έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη πιθανό να αναπτύξουν την ταχεία επανεμφάνιση θα μπορούσε να υποστηρίξει νεο-επικουρική θεραπευτική και επικουρική επιλογές πριν από την ειλικρινή βιοχημική υποτροπή. Αυτή η μελέτη συνέκρινε τους δείκτες στον ορό και στα ούρα των ασθενών με ταχέως υποτροπιάζοντα καρκίνο του προστάτη να χωρίς υποτροπή ασθενείς μετά από ριζική προστατεκτομή. Με βάση την προηγούμενη αναγνώριση του ουροποιητικού σαρκοσίνη ως μεταστατικού δείκτη, ελέγξαμε εάν οι μεταβολίτες μεθειονίνη στα ούρα και τον ορό θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως προ-χειρουργικές δείκτες για την επιθετική νόσο.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

ούρων και δείγματα ορού (n = 54 και 58, αντίστοιχα), τα οποία συλλέγονται κατά τη στιγμή της προστατεκτομής χωρίστηκαν σε άτομα που εμφάνισαν βιοχημικής υποτροπής εντός 2 ετών και εκείνοι που παρέμειναν χωρίς υποτροπή μετά από 5 χρόνια. Πολλαπλές μεταβολίτες μεθειονίνη μετρήθηκαν στα ούρα και τον ορό με GC-MS. Ο ρόλος των μεταβολιτών ορού και κλινικές μεταβλητές (βιοψία Gleason βαθμός, κλινικό στάδιο, το ειδικό προστατικό αντιγόνο του ορού [PSA]) στην βιοχημική πρόβλεψη υποτροπής αξιολογήθηκαν. Ακράτεια επίπεδα σαρκοσίνη και κυστεΐνη ήταν σημαντικά υψηλότερα (ρ = 0,03 και ρ = 0,007 αντίστοιχα) στην υποτροπιάζουσα ομάδα. Ωστόσο, σε ορό, οι συγκεντρώσεις της ομοκυστείνης (p = 0,003), κυσταθειονίνης (p = 0,007) και κυστεΐνη (ρ & lt? 0.001) ήταν πιο άφθονα στο επαναλαμβανόμενο πληθυσμό. Η συμπερίληψη της κυστεΐνης ορού σε ένα μοντέλο με PSA και βιοψία Gleason βαθμό βελτιωμένη πρόβλεψη κατά τη διάρκεια των κλινικών μεταβλητών μόνο (p & lt? 0.001).

Συμπεράσματα

Οι συγκεντρώσεις ομοκυστεΐνης, κυσταθειονίνης, και κυστεΐνη Ανώτατης ορού ανεξάρτητα προβλέψει τον κίνδυνο πρόωρης βιοχημικής υποτροπής και την επιθετικότητα της νόσου σε μια μελέτη ελέγχου υπόθεση ένθετα. Οι μεταβολίτες μεθειονίνη συμπληρωθούν περαιτέρω γνωστές κλινικές μεταβλητές για να παρέχουν ανώτερη ευαισθησία και ειδικότητα στην πολυμεταβλητή μοντέλα πρόβλεψης για την ταχεία βιοχημική υποτροπή μετά από προστατεκτομή

Παράθεση:. Stabler S, Koyama Τ, Zhao Ζ, Martinez-Ferrer M, Allen RH, Λούκα Ζ, et al. (2011) του ορού Μεθειονίνη μεταβολίτες αποτελούν παράγοντες κινδύνου για μεταστατικό καρκίνο του προστάτη Εξέλιξη. PLoS ONE 6 (8): e22486. doi: 10.1371 /journal.pone.0022486

Επιμέλεια: Νατάσα Κυπριανού, Πανεπιστήμιο του Κεντάκι, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: May 16, 2011? Αποδεκτές: 22 Ιούν 2011? Δημοσιεύθηκε: 10 Αυγούστου, 2011

Copyright: © 2011 Stabler et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς έλαβε ιδιωτική φιλανθρωπική χρηματοδότηση από τη Susan και ο Λουκάς Simons. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

ο καρκίνος του προστάτη παραμένει η πιο κοινή μη-δερματικό στερεό κακοήθεια στις Ηνωμένες Πολιτείες, και η δεύτερη κύρια αιτία του καρκίνου ειδικών θανάτου στους άνδρες. Παρ ‘όλα αυτά, έχει γίνει όλο και πιο σαφές ότι δεν είναι όλοι οι άνθρωποι που έχουν διαγνωστεί με καρκίνο του προστάτη απαιτεί την παρέμβαση [1]. Ωστόσο, πολλοί άνδρες που λαμβάνουν χειρουργική ή ακτινοβολία που βασίζεται σε πρωτοβάθμια επεξεργασία αναπτύσσουν υποτροπιάζουσα νόσο. Πριν από την χειρουργική επέμβαση, PSA ορού, βιοψία Gleason βαθμού, και το κλινικό στάδιο βοηθήσει να προσδιορίσετε αν οι ασθενείς είναι πιθανό να υποτροπιάσει έναντι εκείνων που μπορούν να παραμένουν εντοπισμένα και ενδεχομένως παραμένουν κλινικά ασήμαντος. Διάφορες προσεγγίσεις για τη βελτίωση του ρόλου των PSA σε έγκαιρη ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη έχουν δοκιμαστεί, αλλά όφελος τους με τη συνολική επιβίωση θα πρέπει ακόμη να αποδειχθεί [2], [3]. Τελικά, υπάρχει μια υποομάδα των ανδρών, χωρίς συμβατικών αρνητικών παραγόντων που φέρουν υψηλό κίνδυνο, επιθετική νόσο και είναι ακόμα σε αυξημένο κίνδυνο πρόωρης επανάληψης μετά από απόπειρα οριστική τοπική θεραπεία [4], [5], [6]. Η συνεχιζόμενη πρόκληση που αντιμετωπίζουν οι κλινικοί γιατροί είναι πώς να προσδιορίσει αυτή ομάδα των ανδρών υψηλού κινδύνου, από τη μεγαλύτερη ομάδα των ανδρών που είναι πιθανό υπόθαλψη πιο νωχελικός ασθένεια [7]. Ως εκ τούτου, οι νέες δείκτες της επιθετικής νόσου που απαιτούνται για μια τεκμηριωμένη κλινική απόφαση.

Μια προηγούμενη μελέτη εντόπισε σαρκοσίνη (Ν-μεθυλογλυκίνη) ως προϊόν της μεθειονίνης καταβολισμού που είναι αυξημένη στα ούρα των ασθενών με μεταστατική νόσο του προστάτη [8 ]. επίπεδα της σαρκοσίνης ήταν υψηλότερα σε ιστούς από εντοπισμένο καρκίνο του προστάτη σε σύγκριση με φυσιολογικό ιστό, και ακόμη υψηλότερη σε μεταστατικό προστατικό ιστό. Ακράτεια σαρκοσίνη Έτσι προτείνεται ως πιθανός δείκτης για μεταστατικό καρκίνο του προστάτη. Το ένζυμο, Γλυκίνη Ν-μεθυλοτρανσφεράσης (GNMT) είναι η κύρια πηγή της σαρκοσίνης στο ήπαρ, όπου αντιπροσωπεύει περίπου το 1% της διαλυτής πρωτεΐνης [9]. Τα άτομα με ελαττωματική αφυδρογονάση σαρκοσίνης έχουν sarcosinemia, αλλά δεν δείχνουν διακριτικό φαινότυπο [10]. Ωστόσο, μια αναφερόμενη αιτιολογικός ρόλος για σαρκοσίνη στη μετάσταση του καρκίνου του προστάτη [8], προτείνει θεραπευτική στόχευση της μεταβολικής οδού της να είναι χρήσιμη.

Στη μελέτη αυτή αξιολόγησε τον ορό και τα ούρα ασθενών ριζική προστατεκτομή για τους μεταβολίτες να διαφοροποιηθούν εκείνοι που αναπτύχθηκαν (αύξηση της PSA≥0.2 ορό ng /ml) εντός δύο ετών από τη χειρουργική επέμβαση και εκείνων που παρέμειναν χωρίς υποτροπή μετά από περισσότερα από πέντε χρόνια νωρίτερα βιοχημική υποτροπή. Βρήκαμε ότι τα ούρα των ασθενών στην ταχέως υποτροπιάζοντα ομάδα είχαν σημαντικά υψηλότερες συγκεντρώσεις της σαρκοσίνης και κυστεΐνη από εκείνες της χωρίς υποτροπή ομάδα. Επιπλέον, σημαντικά μεγαλύτερες συγκεντρώσεις ορού κυσταθειονίνης, ομοκυστεΐνης και κυστεΐνης βρέθηκαν στην ταχέως επανάληψη ομάδα σε σύγκριση με την χωρίς υποτροπή ομάδα. Αυτά τα προϊόντα της αυξημένης καταβολισμού μεθειονίνης σε ασθενείς με ταχέως υποτροπιάζοντα καρκίνο του προστάτη αντιπροσωπεύουν προ-χειρουργική δεικτών που επαυξημένη PSA ορού για την πρόβλεψη της κλινικά σημαντικής καρκίνου του προστάτη.

Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

Αυτή η μελέτη ασθενών-μαρτύρων ένθετη διεξήχθη σύμφωνα με το Διοικητικό συμβούλιο Institutional Review του Πανεπιστημίου Vanderbilt. Γραπτή συγκατάθεση δόθηκε από τους ασθενείς για τις πληροφορίες τους να αποθηκεύονται στη βάση δεδομένων του νοσοκομείου. Το διοικητικό συμβούλιο ενέκρινε συγκεκριμένα την ερευνητική χρήση του δι-προσδιορίζονται πληροφοριών και «στο ράφι» δείγματα που πρέπει να χρησιμοποιούνται για την έρευνα υπό παραίτηση της συγκατάθεσης.

επιλογή των ασθενών

Τα ψηφιακά ιατρικά αρχεία των 400 άτομα ήταν αναδρομικά εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας το Τμήμα του Πανεπιστημίου Vanderbilt Ουρολογικής Χειρουργικής μητρώου των ριζοσπαστικών προστατεκτομών που πραγματοποιούνται μεταξύ του 2003 και του 2007. Αρκετοί ασθενείς αποκλείστηκαν για λόγους κίνδυνο νεφρικής, καρδιακής ή ηπατικής λειτουργίας όπως καθορίζεται από τα ηλεκτρονικά αρχεία των αυξημένων ουρική κρεατινίνης, της υπέρτασης , καρδιακή ιστορία του μυοκαρδίου, και οι δείκτες αίματος για ηπατική λειτουργία. Επιπλέον, η διαθεσιμότητα της παρακολούθησης των δεδομένων και τα αρχεία της προ-χειρουργική θεραπεία ορμονικής-εκτομή ήταν οι λόγοι αποκλεισμού. Γρήγορα επαναλαμβανόμενες ασθενείς ταυτοποιήθηκαν ως εκείνοι που ανέπτυξε βιοχημικής υποτροπής μετά από προστατεκτομή εντός 2 ετών (αμερικανική μεικτής επιτροπής για τον Καρκίνο ορίζονται ως έχουσες PSA≥0.2 ng /ml, επιβεβαιώνονται τουλάχιστον μία φορά, δύο εβδομάδες αργότερα). Η ελεύθερη υποτροπής πληθυσμός ορίστηκε ως έχουν διατηρήσει ένα PSA ορού & lt? 0,01 ng /ml για πέντε ή περισσότερα χρόνια μετά από χειρουργική επέμβαση. Τελικά, για αυτή τη μελέτη ελέγχου υπόθεση ένθετη επικεντρωθήκαμε σε 54 άτομα για την ανάλυση των ούρων και 58 άτομα για την ανάλυση του ορού που αναπτύχθηκε ραγδαία βιοχημικής υποτροπής και μια ομάδα ελέγχου χωρίς υποτροπή της ίδιας ηλικίας οι οποίοι ήταν ελεύθεροι υποτροπής. Η μέση ηλικία των ατόμων ήταν 60 έτη. Όλα τα θέματα που σχολιάστηκαν με βάση την ηλικία, προ-χειρουργικές PSA ορού, βιοψία Gleason σκορ, κλινικό στάδιο, και την ανίχνευση της βιοχημικής υποτροπής.

ούρα και στον ορό Ποσοτική Ανάλυση Μεταβολικών

ορού και ούρων που λαμβάνονται σε ο χρόνος της ριζικής προστατεκτομής ταχέως σε επεξεργασία και αποθηκεύονται στους -80 ° C. Αξιολογήσαμε ορού και ούρων για τους μεταβολίτες, σαρκοσίνη, διμεθυλογλυκίνη, μεθειονίνη, ομοκυστεΐνη, κυσταθειονίνη, κυστεΐνη, μεθυλομηλονικού οξέος και methylcitrate με αέρια-υγρή χρωματογραφία /φασματομετρία μάζας [11], [12], [13]. Φυλλικό οξύ μετρήθηκε μικροβιολογικά όπως περιγράφεται από Horne [14]. Ακράτεια μεταβολίτες εκφράστηκαν ως nmol /mg κρεατινίνης για τη διόρθωση για διαφορές στον όγκο των ούρων. Κρεατινίνης στα ούρα μετρήθηκε με τη μέθοδο Jaffe [15].

Στατιστική Ανάλυση

δημογραφικά και κλινικά μεταβλητές των ασθενών εκτιμήθηκαν χρησιμοποιώντας Wilcoxon τεστ αθροίσματος κατάταξης για τις συνεχείς μεταβλητές και Fisher ακριβές τεστ για τις κατηγορικές (συμπεριλαμβανομένων δυαδικές) μεταβλητές. Όλες οι τιμές δείκτη, καθώς και τα επίπεδα PSA, είχαν λογαριθμικά μετασχηματισμένα για να επιτευχθεί ομαλότητα. Συσχετίσεις μεταξύ των δεικτών αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας βαθμό συσχέτισης Spearman του. Μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης χρησιμοποιήθηκαν για την ανάλυση συχνότητα υποτροπής. Το βασικό μοντέλο περιλαμβάνει PSA ορού, βιοψία Gleason σκορ, και κλινικό στάδιο, κλινικές μεταβλητές που είναι διαθέσιμες πριν από τη χειρουργική επέμβαση. Οι μετεγχειρητικές μεταβλητές (π.χ., λεμφαδένες, χειρουργικά όρια, παθολογική Gleason σκορ) δεν εξετάστηκαν. Για πολλαπλότητα ελέγχου, p≤0.007 (p-τιμή μικρότερη από 5% /7 = 0,7%) θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Για να αποφευχθεί η περαιτέρω υπερπροσαρμογής των δεδομένων, δεν υπάρχει μεταβλητή επιλογής διεξήχθη στις επόμενες αναλύσεις βασίζονται σε μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης. Χρησιμοποιήσαμε μια δοκιμασία δείκτη πιθανότητας να συγκρίνει το απλούστερο μοντέλο (χωρίς τους μεταβολίτες) και το πλήρες μοντέλο (με τις ατομικές μεταβολίτες). Δέκτη λειτουργικά χαρακτηριστικά (ROC) καμπύλες δημιουργήθηκαν για κάθε μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης, όπου η περιοχή κάτω από την καμπύλη ROC (AUC) προσδιορίστηκε. Ολοκληρωμένη βελτίωση των διακρίσεων (IDI) και του δείκτη Καθαρό ανακατάταξης (NRI) [16] χρησιμοποιήθηκαν για να συγκρίνουν την ικανότητα των μοντέλων να διακρίνει υποτροπής και μη υποτροπής. Οι δοκιμές logrank χρησιμοποιήθηκαν για να εκτιμηθεί η διαφορά στην επιβίωση χωρίς υποτροπή μεταξύ των δύο ομάδων που απεικονίζονται από Kaplan-Meier οικόπεδα. Για τους επιλεγμένους δείκτες, Cox μοντέλα παλινδρόμησης αναλογικών κινδύνων ήσαν κατάλληλα, και οι δοκιμές του λόγου πιθανοφάνειας χρησιμοποιήθηκαν για την αξιολόγηση ένωση δείκτες »με τον χρόνο επανεμφάνισης έκβαση. Το αναλογικό υπόθεση κίνδυνος εκτιμήθηκε χρησιμοποιώντας τη μέθοδο των Grambsch και Therneau [17]. Όλες οι αναλύσεις των δεδομένων πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση R 2.10.1 (R Ανάπτυξης πυρήνα της ομάδας, Βιέννη, Αυστρία)? ένα επίπεδο σημαντικότητας 0,05 χρησιμοποιήθηκε για τη στατιστική συμπερασματολογία, εκτός αν αναφέρεται διαφορετικά.

Αποτελέσματα

μεταβολίτες μεθειονίνη υποστηρίξει την πρόβλεψη της βιοχημικής υποτροπής

μεταβολίτες στα ούρα αρχικά μετρήθηκε σε πενήντα τέσσερις ασθενείς ο οποίος ανέπτυξε βιοχημική υποτροπή (Ν = 25) και εκείνων που παρέμειναν χωρίς υποτροπή (Ν = 29). Αυτοί οι ασθενείς της ίδιας ηλικίας και προ-χειρουργική PSA στον ορό. Ο Πίνακας 1 απαριθμεί τα κλινικά χαρακτηριστικά των δύο ομάδων ασθενών από την PSA ορού, κλινικό στάδιο, και βιοψία Gleason βαθμού. Πλειονότητα των ασθενών είχαν κλινικό στάδιο της Τ1. Κρεατινίνης-ομαλοποιηθεί ουροποιητικού διμεθυλογλυκίνη και η ομοκυστεΐνη δεν ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των δύο ομάδων. Ωστόσο, βρήκαμε ουροποιητικού σαρκοσίνης να είναι σημαντικά αυξημένα κατά το χρόνο της χειρουργικής επέμβασης σε ασθενείς που ανέπτυξαν βιοχημικής υποτροπής, όπως είχε αρχικά αναφερθεί για ασθενείς με ειλικρινή προστάτη μεταστατικές αλλοιώσεις [8]. Βρήκαμε επίσης ότι ουροποιητικού κυστεΐνη ήταν σημαντικά αυξημένα σε βιοχημικά επαναλαμβανόμενες ασθενείς σε σύγκριση με εκείνους που παρέμειναν χωρίς υποτροπή πέντε ετών μετά προστατεκτομή. ανάλυση ούρων σε ένα προ-χειρουργική πληθυσμό ασθενών πρότεινε τα προϊόντα της μεθειονίνης καταβολισμό μπορεί να συσχετίζονται με την κατάσταση της εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη.

Η

Στη συνέχεια, πραγματοποιήθηκε μια ένθετη μελέτη ελέγχου υπόθεση με προ-χειρουργική ορό. Πενήντα-οκτώ ασθενείς προστατεκτομή ίδιας ηλικίας στρωματοποιήθηκαν με προ-χειρουργική PSA, κλινικό στάδιο, και βιοψία Gleason βαθμού καθώς και παθολογικές μεταβλητές (Πίνακας 2). Όπως ήταν αναμενόμενο, οι κλινικές μεταβλητές ήταν σημαντικά διαφορετική στις δύο πληθυσμούς, όπως ήταν οι μετεγχειρητικό παθολογικών παραγόντων. Είναι ενδιαφέρον ότι η ομοκυστεΐνη ορού, κυσταθειονίνη, και κυστεΐνη ήταν σημαντικά υψηλότερα στα βιοχημικά επαναλαμβανόμενες ασθενείς (τιμή ρ & lt? 0.001). Ωστόσο, τα επίπεδα κλινικής στάδιο και στον ορό της σαρκοσίνης, διμεθυλογλυκίνης, φυλλικό οξύ, methylcitrate και μεθυλομηλονικού οξέος δεν ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των δύο πληθυσμών. Φυσιολογικά επίπεδα methylcitrate και στους δύο πληθυσμούς υποστηρίζεται νεφρική επάρκεια. Ορός επίπεδα μεθυλομηλονικού οξέος, ένας δείκτης της βιταμίνης Β-12 κατάσταση [18], δεν ήταν διαφορετική μεταξύ των δύο ομάδων. Ορό και συσχέτιση κυστεΐνη ούρα δεν ήταν στατιστικά σημαντική (p = 0.06, Πίνακας 3). Ωστόσο, η ομοκυστεΐνη ορού συσχετίζεται έντονα με κυστεΐνη (rank συσχέτισης Spearman είναι = 0,65, p & lt? 0,01). Ως εκ τούτου, η υψηλότερη ομοκυστεΐνης του ορού δεν ήταν συνάρτηση των διαφορών στη νεφρική λειτουργία, βιταμίνη Β-12 ή φυλλικού οξέος κατάστασης.

Η

Η σημασία αυτών των νέων προσδιορίζονται δείκτες για την κατάσταση της υποτροπής των ασθενών ήταν απεικονίζεται στην Kaplan-Meier οικόπεδα για ομοκυστεΐνης, κυσταθειονίνης, και κυστεΐνη σε σύγκριση με προεγχειρητική επίπεδα του PSA στον ορό, και time-to-υποτροπή (Σχήμα 1). Κάθε ένα από τους δείκτες θα μπορούσε να διαχωρίσει ταχέως υποτροπιάζοντα από την επανάληψη χωρίς εξέλιξη. Ωστόσο, η ανίχνευση κυστεΐνη ορό είχε τη μεγαλύτερη διακριτική εξουσία στους δύο πληθυσμούς πριν από την προστατεκτομή.

Οι ασθενείς χωρίστηκαν σε δύο ομάδες, διαιρούμενο σε μεσαίο επίπεδο ιστού για (Α) PSA, (Β) της ομοκυστεΐνης, (C ) κυσταθειονίνης, και (Δ) κυστεΐνης όπως αυτές σχετίζονται σημαντικά με το χρόνο μέχρι την υποτροπή (Πίνακας 5). Εκείνα τα άτομα πάνω από τη μέση στάθμη έκφρασης ονομάστηκαν ανώτερο ήμισυ, ενώ εκείνοι κάτω από τη μέση ονομάστηκαν κάτω μισό. Οι πιθανότητες επιβίωσης χωρίς υποτροπή εκτιμήθηκαν με τη μέθοδο Kaplan-Meier και οι διαφορές δοκιμάστηκαν χρησιμοποιώντας τη δοκιμασία log-rank. Κάθε ένα από τα διχοτομική δείκτες ορού υποστηρίζεται στατιστικά σημαντικές διαφορές σε βιοχημικές επιβίωσης χωρίς υποτροπή.

Η

Η κλινική αξία αυτών των μεταβολιτών της μεθειονίνης ως βιοδείκτες θα ήταν να αυξήσει σημαντικά την ικανότητα να προβλέψουμε επιθετικό χαρακτηριστικά του καρκίνου του προστάτη και στις αρχές του βιοχημική υποτροπή πέρα ​​και πάνω από ανύπαρκτη κλινικές μεταβλητές συμπεριλαμβανομένων των PSA ορού, βιοψία Gleason σκορ, και κλινικό στάδιο. Έχουμε αναπτύξει ένα λογιστικό μοντέλο πολλαπλής παλινδρόμησης για την πρόβλεψη της βιοχημικής υποτροπής βασίζεται σε μεταβολίτες ορού της μεθειονίνης και τις μεταβλητές προ-χειρουργικών προγνωστικό, PSA ορού και βιοψία Gleason βαθμού. Από την πλειοψηφία των ασθενών και στις δύο ομάδες είχαν νόσο κλινικό στάδιο T1c, αυτή η μεταβλητή έχει μικρή διακριτική δύναμη και έπεσαν από το μοντέλο. Ορός κυστεΐνη, κυσταθειονίνης, και ομοκυστεΐνης ήταν οι τρεις πρώτες προγνωστικούς παράγοντες για υποτροπή στο 70% των ασθενών, έτσι ώστε η περαιτέρω ανάλυση των μεταβολιτών μεθειονίνη επικεντρώθηκε σε αυτές τις τρεις μεταβολίτες. Οι συσχετίσεις μεταξύ κυστεΐνη και ομοκυστεΐνη ήταν το υψηλότερο μεταξύ όλων των συσχετίσεων κατά ζεύγη (R

2 = 0,65, p & lt? 0.01), και κυστεΐνη επίσης υψηλή συσχέτιση με κυσταθειονίνης (R

2 = 0,39, p & lt? 0.01, Πίνακας 4). Η προσθήκη της ομοκυστεΐνης του ορού την προϋπόθεση ότι η μεγαλύτερη βελτίωση των λογιστικής παλινδρόμησης σε σύγκριση με το βασικό μοντέλο με PSA και βιοψία Gleason (p = 0,0007), ακολουθούμενη από κυστεΐνη (p = 0,0017), και κυσταθειονίνης (p = 0,0037). Συσχέτιση μεταξύ κυσταθειονίνης και ομοκυστεΐνης ήταν μέτρια (R

2 = 0.22, p = 0.10). Βασισμένο σε πολλαπλά μοντέλα λογιστικής παλινδρόμησης (Πίνακας 5), οι πιθανότητες υποτροπής αυξήθηκε 5,79 φορές (95% CI: 1,65 – 20,29, p = 0,006), όταν τα επίπεδα κυστεΐνη αυξήθηκε από 343 (χαμηλότερο τεταρτημόριο, στο εξής Q1) έως 436 (ανώτερο τεταρτημόριο, εφεξής Q3). Αυτό το μοντέλο λογιστικής παλινδρόμησης δεν κατάφερε να βρει προ-χειρουργική επίπεδα του PSA στον ορό να σχετίζεται σημαντικά με την κατάσταση επανάληψης. Σε ένα ξεχωριστό μοντέλο, κυσταθειονίνης επίπεδα συσχετίστηκαν σε σημαντικό βαθμό με την επανεμφάνιση κατάσταση. Πιθανότητες υποτροπής ήταν 2,44 (95% CI: 1,07 – 5,56, p = 0,03) φορές μεγαλύτερος όταν κυσταθειονίνης επίπεδα αυξήθηκαν από 139 (Q1) έως 200 (Q3). τα επίπεδα του PSA στον ορό ήταν οριακά σχετίζονται με υποτροπή σε αυτό το μοντέλο? η αναλογία πιθανοτήτων ήταν 2,94 (95% CI: 1,02 – 8,48, p = 0,046), όταν τα επίπεδα του PSA αυξήθηκαν από 4,7 (Q1) έως 8,5 (Q3). επίπεδα ομοκυστεΐνης βρέθηκαν επίσης να σχετίζονται με την κατάσταση επανάληψης. Σε όλα αυτά τα μοντέλα βιοψίας Gleason βαθμού συσχετίστηκε με υποτροπή. Για να αξιολογηθεί η πρόσθετη χρησιμότητα αυτών των τριών δεικτών, τα μοντέλα, συμπεριλαμβανομένων κυστεΐνη, κυσταθειονίνη, ή ομοκυστεϊνης επιπροσθέτως επίπεδα ορού PSA και βιοψία Gleason βαθμού συγκρίθηκαν σε ένα μοντέλο που χρησιμοποιεί μόνο το PSA συν βιοψίας Gleason. Κλινική τιμές στάδιο δεν συμβάλλει στη βελτίωση των μοντέλων. Η περιοχή κάτω από τις καμπύλες ROC ήταν παρόμοια (AUC = 0,86) για την κυστεΐνη, κυσταθειονίνης, και ομοκυστεΐνης όταν συνδυάζεται με τις κλινικές μεταβλητές και σημαντικά ανώτερη από τις κλινικές μεταβλητές μόνο (AUC = 0,81). Το Ολοκληρωμένο Διακρίσεις Βελτίωσης (IDI) και Καθαρή Ανακατατάξεις Βελτίωσης (NRI) υποστήριξε την στατιστική σημασία της βελτίωσης (Πίνακας 6). Το όφελος αυτών των μεταβολιτών, όπως σε συνδυασμό με την τυποποιημένη δοκιμή PSA είναι εμφανές όταν η ευαισθησία και η ειδικότητα της PSA συγκρίθηκε με μια συνδυασμένη πρόβλεψη της βιοχημικής υποτροπής από την ROC στο Σχήμα 2 παρακάτω προστατεκτομή, με τη χρήση μόνο PSA ορού. Η AUC μόνο με δείκτες ορού ήταν παρόμοια με τα πιο ολοκληρωμένη αυτά, συμπεριλαμβανομένων αποτελέσματα βιοψίας. Υπήρξε μια σημαντική συσχέτιση μεταξύ αυτών των δεικτών και της κατάστασης στην επανάληψη, ωστόσο οι δείκτες δεν δείχνουν απαραίτητα χρησιμότητα στην πρόβλεψη της επιβίωσης χωρίς υποτροπή.

Ο ορός PSA συγκρίνεται με την προστιθέμενη αξία της (Α) ομοκυστεΐνης του ορού, (Β ) κυσταθειονίνης, και (Γ) κυστεΐνη. Στην καμπύλη ROC είναι η πιθανότητα με μεγαλύτερη περιοχή υπό την καμπύλη (AUC) υποστήριξη αυξημένη ειδικότητα και ευαισθησία πάνω από τυχαία εικασία, εκπροσωπούμενη από την διακεκομμένη διαγώνια γραμμή.

Η

Η

Για να καθορίζουν την αποτελεσματικότητα των δεικτών στην πρόβλεψη επιβίωσης χωρίς υποτροπή, Cox μοντέλων παλινδρόμησης αναλογικού κινδύνου είχαν ταιριάζει δείχνουν ότι η κυστεΐνη, κυσταθειονίνης και ομοκυστεΐνης ήταν το καθένα ανεξάρτητα προγνωστικοί παράγοντες της επιβίωσης χωρίς υποτροπή κατά τη ρύθμιση για την προεγχειρητική PSA ορού και βιοψία σκορ Gleason ( Πίνακας 7). Συγκεκριμένα, οι τιμές του ορού κυστεΐνη, κυσταθειονίνης και ομοκυστεΐνης αυξήθηκαν (p & lt? 0.001, p = 0.014, p & lt? 0.001, αντίστοιχα) με αυξημένο κίνδυνο υποτροπής σε πολυπαραγοντική ανάλυση με προσαρμογή για βαθμολογία τόσο PSA ορού και βιοψία Gleason

Συζήτηση

Η τρέχουσα διαστρωμάτωση του κινδύνου των ασθενών πριν από τη χειρουργική επέμβαση περιλαμβάνει μεταβλητές συμπεριλαμβανομένου του PSA στον ορό, κλινικό στάδιο, και το βαθμό βιοψία. Ανεξάρτητη δείκτες ορού σε συνδυασμό με το PSA θα μπορούσε να βοηθήσει στη διάκριση των ασθενών με επιθετικό καρκίνο του προστάτη. Στη σημερινή εποχή των δοκιμών PSA, η κλινική σταδιοποίηση έχει μειωθεί ενδιαφέρον όταν ο όγκος του όγκου είναι σχετικά μικρές. Στη μελέτη μας, η υψηλότερη βαθμολογία βιοψίας Gleason σε ≥8 πυρήνα βιοψίες παρέχεται ένα σημαντικό ανεξάρτητο προγνωστικό συγκρίσιμη με ορό κυστεΐνη και ομοκυστεΐνη. Ωστόσο, υπερηχογράφημα ρουτίνας κατευθύνεται πρώτα βιοψίες αναφερθεί να χάσει σχεδόν το ένα τέταρτο των καρκίνων του προστάτη [19] και συχνά υποτιμούν βαθμό του όγκου [20], [21]. Ο συνδυασμός του PSA ορού με κυσταθειονίνης, κυστεΐνη και ομοκυστεΐνη ως δείκτες θα μπορούσαν να βελτιώσουν τη λήψη αποφάσεων για την πρωτοβάθμια επεξεργασία και νωρίτερα μετέπειτα επικουρική θεραπεία.

Μονοπάτια του μεταβολισμού της μεθειονίνης περιλαμβάνουν δύο μηχανισμούς για το σχηματισμό σαρκοσίνη (Σχήμα 3). ΚυσταθειονίνΓΚ και κυστεΐνη είναι προϊόντα της ομοκυστεΐνης καταβολισμού σημαντικό στην παραγωγή της γλουταθειόνης. Αύξηση των ουροφόρων σαρκοσίνης απουσία διαφορών σαρκοσίνης ορού ήταν έκπληξη, και πιθανόν το αποτέλεσμα της διαφορικής νεφρικής σαρκοσίνης απέκκριση. Αλλαγές στη σαρκοσίνη, αλλά δεν διμεθυλογλυκίνης υποδηλώνουν ότι η αυξημένη δραστηριότητα των GNMT μπορεί να ήταν παρόντες στην υποτροπιάζουσα ομάδα. Είναι πιθανό ότι για άγνωστους λόγους η περιοδική ομάδα είχε αυξηθεί S-αδενοσυλμεθειονίνης (SAM), η οποία ενεργοποιείται το μονοπάτι transulfuration [22] Έτσι, η αύξηση κυσταθειονίνη, κυστεΐνη, και το σχηματισμό της σαρκοσίνης. Θα πρέπει να σημειωθεί ότι Sreekumar et al. [8] δεν ανέφεραν σαρκοσίνη στον ορό ή στο πλάσμα σχετίζονται με μεταστατικό καρκίνο του προστάτη ασθενούς. Τα στοιχεία μας σε προ-χειρουργικές θέματα υποστηρίζει την προηγούμενη έκθεση του ουροποιητικού ανύψωση σαρκοσίνης στην επιβεβαίωσε μεταστατικό ασθενείς. Τα δεδομένα θα μπορούσε να σημαίνει ότι ο πληθυσμός των ασθενών μας είχε προηγουμένως απαρατήρητα μετάσταση ή ότι η αυξημένη μεταβολισμός της μεθειονίνης είναι ένας πρόδρομος για μετάσταση. Ο άμεσος ρόλος της σαρκοσίνης για τη μεταστατική εξέλιξη είναι αμφιλεγόμενη. Σε αντίθεση με την έκθεση της σαρκοσίνης υποστηρίζει άμεσα μετάσταση [8], μια πρόσφατη έκθεση προτείνει καμία συσχέτιση μεταξύ του ουροποιητικού επίπεδα σαρκοσίνη και είτε το στάδιο του όγκου ή Gleason score [23]. Είναι δύσκολο να συγκριθούν τα ευρήματα μας με τους άλλους εκθέσεις από την αρχική μελέτη από Sreekumar et al [8] διαφέρουν ως προς τη μεθοδολογία μέτρησης σαρκοσίνης [24], η πηγή του δείγματος [25], [26], και κυρίως τα κριτήρια που καθορίζουν την επανάληψη [23] – [27]. δοκιμασία μας χρησιμοποιεί ένα σταθερό ισότοπο εσωτερικού προτύπου σε κάθε δείγμα, ανακτάται στα ούρα και τον ορό πριν από την εκτομή του προστάτη, και την επανάληψη βασίστηκε μόνο στην ανίχνευση του PSA στον ορό. Μια άλλη μελέτη συνέκρινε καλοήθη ελέγχων κατά των ασθενών με ενεργό καρκίνο του προστάτη και διαπίστωσε ότι σαρκοσίνη ούρα ήταν μόνο μια μέτρια προγνωστικός δείκτης της νόσου, αλλά όταν προστίθεται σε άλλες νέες δείκτες όπως ο καρκίνος του προστάτη αντιγόνο 3 και τοις εκατό ελεύθερο PSA βελτιωμένες διαγνωστικές ισχύος [27]. Υπάρχουν άφθονες ενδείξεις ότι το φυλλικό οξύ και Β12 ανεπάρκεια και νεφρική νόσο μπορεί να συμβάλει στην υπερομοκυστεϊναιμία. Ωστόσο, στην παρούσα έρευνα δεν υπήρχε καμία διαφορά σε φυλλικό οξύ ή τα επίπεδα μεθυλομηλονικού οξέος μεταξύ επαναλαμβανόμενες και μη επαναλαμβανόμενες ομάδες. Οι ασθενείς σε αυτή τη μελέτη ήταν ανάλογα προσληφθεί για να ελαχιστοποιηθεί περιπλέκοντας συννοσηρότητες. Οι διαφορές που βρέθηκαν σε ομοκυστεΐνης, κυσταθειονίνης και κυστεΐνη σε ορό υποδηλώνουν ότι μπορεί να υπάρχουν συστηματικές διαφορές μεταβολική σε εκείνους τους ασθενείς που πάει για να έχουν μια βιοχημική υποτροπή.

Η μεθειονίνη πρώτα μετατρέπεται σε SAM, ο δότης ομάδων μεθυλίου σε όλες εκτός από μία αντίδραση μεθυλοτρανσφεράση. SAM μπορεί να μεταφέρει την ομάδα μεθυλίου σε μία ποικιλία ενώσεων, Χ, από μια ομάδα ειδικών ενζύμων για να δώσουν τις ενώσεις μεθυλιωμένη, CH

3-X (π.χ.. Μεθυλιωμένο λιπίδια, DNA, ή πρωτεΐνες). Εναλλακτικά, η SAM μπορεί να μεταφέρει την ομάδα μεθυλίου σε γλυκίνη για να σχηματίσει σαρκοσίνη μέσω του ενζύμου γλυκίνης Ν-μεθυλτρανσφεράσης (GNMT. Μετά τη μεταφορά της ομάδας μεθυλίου SAM μετατρέπεται σε S-αδενοσυλομοκυστεΐνης (SAH), το οποίο διασπάται περαιτέρω σε ομοκυστεΐνη, κυσταθειονίνης και κυστεΐνη. σαρκοσίνης μπορεί επίσης να σχηματιστεί με διάσπαση της χολίνης προς βεταϊνη, η οποία, μετά την απώλεια μιας ομάδας μεθυλίου, μετατρέπεται σε διμεθυλογλυκίνη. μια αφυδρογονάση μετατρέπει διμεθυλογλυκίνη να σαρκοσίνη.

Η

Η πλειονότητα των σαρκοσίνης παράγεται στο σώμα γίνεται στο ήπαρ ως κατάντη προϊόν SAM και ομοκυστεΐνη. Μελέτες χρησιμοποιώντας ομόζυγα ποντίκια με GNMT νοκ άουτ έχουν επίπεδα SAM πλάσμα κατά 50% μεγαλύτερη από αυτή του άγριου τύπου. τα επίπεδα SAM στο συκώτι του

Gnmt

null ζώα ήταν 33 φορές υψηλότερη από ό, τι στο συκώτι των ζώων άγριου τύπου και όλα τα

Gnmt

null ζώα ανέπτυξαν ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα μετά από 8 μήνες [28]. είναι ενδιαφέρον ότι, οι υψηλότερες τιμές κυστεΐνη που σχετίζεται με την παχυσαρκία [ ,,,0],29] – [32]. Τα περιορισμένα στοιχεία της σύστασης του σώματος για το θέμα των ομάδων μας, ωστόσο, προτείνεται μικρή συσχέτιση του δείκτη μάζας σώματος και ποσοστό υποτροπής. Τα στοιχεία που αναφέρονται εδώ, υποστήριξη αυξημένη ροή μέσω GNMT με αποτέλεσμα το αυξημένο σχηματισμό της ομοκυστεΐνης και σαρκοσίνης μέσω της αυξημένης χρησιμοποίησης των SAM. Είναι ενδιαφέρον, GNMT, αναφέρεται ότι είναι κάτω-ρυθμίζονται σε νεοπλαστικούς ιστούς σε γενικές γραμμές [33], συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του προστάτη στον άνθρωπο [34]. Έτσι, οι αλλαγές που παρατηρούνται κατά την τρέχουσα έρευνα δεν μπορεί να είναι ένα αποτέλεσμα των νεοπλασματικών αλλοιώσεων σε ιστό προστάτη. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν την υπόθεση ότι μπορεί να υπάρχουν διαφορές στην ικανότητα μεθυλίωση διάφορα άτομα ή ξενιστές όγκου, ως αποτέλεσμα των διαφορετικών επιπέδων του SAM. Δυστυχώς, οι τιμές SAM δεν μπορούσε να μετρηθεί στην τρέχουσα μελέτη, λόγω της αστάθειας της SAM στα αποθηκευμένα δείγματα ορού. Περαιτέρω, είναι πιθανό ότι τα άτομα με μεγαλύτερη ικανότητα μεθυλιώσεως είναι πιο πιθανό να αναπτύξουν καρκίνο οδηγεί σε μεταστατική εξέλιξη.

Για τις γνώσεις μας, καμία προηγούμενη μελέτη έχει συσχετιστεί μια ολόκληρη βραχίονα ενός μεταβολικού μονοπατιού στην επιθετικότητα του καρκίνου . Στη μελέτη μας, η σύγκριση έγινε μεταξύ των ασθενών με αποδεδειγμένη καρκίνο, όχι μεταξύ των ατόμων με αποδεδειγμένη καρκίνο και καλοήθης νόσος. Τα αποτελέσματα αυτά επιτεύχθηκαν με μόνο μια σχετικά μικρή ομάδα ασθενών, αλλά τα αποτελέσματα είναι σημαντικά και δείχνουν ότι απαιτούνται περαιτέρω μελέτες. Η υποκείμενη βιολογία υποστηρίζει την ευρωστία αυτών των δεικτών. Υψηλότερη ομοκυστεΐνης του ορού, κυσταθειονίνης, και κυστεΐνη βελτίωσε τη χρησιμότητα που χρησιμοποιούνται σήμερα κλινικών μεταβλητών στην πρόβλεψη πρώιμη υποτροπή και να προτείνει μια μεγαλύτερη ροή των ομάδων μεθυλίου μέσω του ενζύμου GNMT.