Αφηρημένο

Αναφέρουμε εδώ την ανάπτυξη, λειτουργική και μοριακός χαρακτηρισμός ενός ισογονιδιακές, σε συνδυασμό πρότυπο σύστημα καλλιέργειας κυττάρων καρκίνου της ουροδόχου κύστης για τη μελέτη της αντοχής στα φάρμακα λευκόχρυσου. Η καρκινική κυτταρική σειρά 5637 ανθρώπινης κύστεως καλλιεργήθηκε πάνω από δέκα μήνες, με αυξήσεις κατά στάδια σε συγκέντρωση οξαλιπλατίνη για να δημιουργήσει μια ανθεκτική φάρμακο 5637R υπο κυτταρική γραμμή. Η δοκιμασία ΜΤΤ χρησιμοποιήθηκε για να μετρηθεί η κυτταροτοξικότητα πολλών φαρμάκων κατά του καρκίνου της ουροδόχου κύστης. Υγρό σπινθηρισμού επέτρεψε τον ποσοτικό προσδιορισμό των κυτταρική πρόσληψη φαρμάκου και την εκροή του ραδιοεπισημασμένου οξαλιπλατίνη και καρβοπλατίνη. Η επίδραση της ενδοκυτταρικής αδρανοποίηση φαρμάκου αξιολογήθηκε με χημική τροποποίηση των επιπέδων γλουταθειόνης. σχηματισμό προϊόντος προσθήκης οξαλιπλατίνη και καρβοπλατίνη και επιδιόρθωση του DNA μετρήθηκε χρησιμοποιώντας φασματομετρία μάζας επιταχυντή. παράγοντες αντοχής συμπεριλαμβανομένης απόπτωσης, σηματοδότηση παράγοντα ανάπτυξης και άλλοι αξιολογήθηκαν με RNAseq αμφοτέρων των κυτταρικών γραμμών και συμπεριλαμβάνεται επιβεβαίωση των επιλεγμένων προϊόντων μετεγγραφής με RT-PCR. Η οξαλιπλατίνη, η καρβοπλατίνη, η σισπλατίνη και γεμσιταβίνη ήταν σημαντικά λιγότερο κυτταροτοξική σε κύτταρα 5637R σε σύγκριση με τα κύτταρα 5637. Σε αντίθεση, δοξορουβικίνη, μεθοτρεξάτη και βινβλαστίνη είχε καμία κυτταρική γραμμή εξαρτώμενη διαφορά στην κυτταροτοξικότητα. Κατά την έκθεση σε θεραπευτικά σχετικές δόσεις οξαλιπλατίνη, τα κύτταρα 5637R είχαν επίπεδα προσαγωγού χαμηλότερα ναρκωτικά DNA από 5637 κύτταρα. Αυτή η διαφορά εν μέρει εξηγείται από μηχανισμούς βλάβη προ-DNA όπως η πρόσληψη του φαρμάκου και ενδοκυτταρική αδρανοποίηση από γλουταθειόνη, καθώς επίσης και ταχύτερη οξαλιπλατίνη επιδιόρθωση του DNA προϊόντος προσθήκης. Σε αντίθεση, και οι δύο κυτταρικές σειρές δεν είχαν σημαντικές διαφορές στην πρόσληψη καρβοπλατίνη κυττάρων, σχηματισμό προϊόντος προσθήκης εκροής και τα ναρκωτικά και επιδιόρθωση του DNA, γεγονός που υποδηλώνει διακριτούς μηχανισμούς ανθεκτικότητας για τα δύο αυτά συνδέονται στενά με τα ναρκωτικά. Οι λειτουργικές μελέτες αυξηθεί με ανάλυση RNAseq, η οποία κατέδειξε μια σημαντική αλλαγή στην έκφραση του 83 μεταγραφές, συμπεριλαμβανομένων 50 γνωστά γονίδια και 22 νέα μεταγραφές. Οι περισσότερες από τις μεταγραφές δεν είχαν προηγουμένως συνδέονται με χημειοαντίσταση καρκίνο της ουροδόχου κύστης. Αυτό το πρότυπο σύστημα και η σχετική φαινοτυπική και γονοτυπική δεδομένων έχει τη δυνατότητα να εντοπίσει κάποιες νέες λεπτομέρειες των μηχανισμών αντίστασης των κλινικών σημασίας για τον καρκίνο της ουροδόχου κύστης

Παράθεση:. Wang S, Zhang Η, Scharadin TM, Zimmermann Μ, Χου Β , Παν AW, et al. (2016) Μοριακή ανατομή της Induced Platinum Αντίσταση μέσα από Λειτουργικές και Gene Analysis έκφραση σε ένα κύτταρο πολιτισμού μοντέλο καρκίνου της ουροδόχου κύστης. PLoS ONE 11 (1): e0146256. doi: 10.1371 /journal.pone.0146256

Επιμέλεια: Aamir Ahmad, Wayne State University School of Medicine, Ηνωμένες Πολιτείες