Αφηρημένο

Ιστορικό

Το ραδόνιο και το αρσενικό είναι εγκατεστημένοι πνευμονική καρκινογόνες ουσίες. Μελετήσαμε τη συσχέτιση της σωρευτικής έκθεσης σε αυτές τις καρκινογόνες ουσίες με Notch 1, HIF1A και άλλο καρκίνο ειδικές πρωτεΐνες στον πνευμονικό ιστό από ανθρακωρύχους ουρανίου.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

παραφίνη-ενσωματωμένες ιστού των 147 ανθρακωρύχους επιλέχθηκε τυχαία από μία αυτοψία αποθετήριο ανά τύπο του ιστού των πνευμόνων, η οποία περιλαμβάνει αδενοκαρκίνωμα (ADCA), πλακώδες καρκίνωμα (δρΟΟ), μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (SCLC), και χωρίς καρκίνο του ιστού. Μέσα σε κάθε στρώμα, έχουμε επιπλέον στρωματοποιημένη με χαμηλό ή υψηλό επίπεδο έκθεσης σε ραδόνιο ή αρσενικό. ισόβια έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό εκτιμήθηκε χρησιμοποιώντας μια ποσοτική μήτρα δουλειά-έκθεσης που αναπτύσσονται για την εξόρυξη ουρανίου. Για 22 σχετίζονται με τον καρκίνο πρωτεΐνες, ανοσοϊστοχημικές βαθμολογίες υπολογίστηκαν από την ένταση και το ποσοστό των χρωματισμένων κυττάρων. Έχουμε διερευνηθούν οι ενώσεις αυτών σκορ με αθροιστική έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό με το Spearman rank συντελεστές συσχέτισης (r

s). Επαγγελματικής έκθεσης συνδέθηκε με ένα up-ρύθμιση του Notch 1 (ραδόνιο r

s = 0,18, 95% CI 0,02 – 0,33? Αρσενικού: r

s = 0,23, 95% CI 0,07 – 0,38). Επιπλέον, ερευνήσαμε αν αυτά σχετίζονται με τον καρκίνο των πρωτεϊνών μπορεί να χαρακτηρίσει τον καρκίνο του πνεύμονα, χρησιμοποιώντας εποπτευόμενη και μη επιβλεπόμενη ταξινόμηση. MUC1 ταξινομούνται καρκίνο του πνεύμονα από καρκίνο χωρίς ιστού με ένα ποσοστό αποτυχίας του 2,1%. Μια υπογραφή δύο πρωτεϊνών διακρίσεις SCLC (HIF1A χαμηλή), ADCA (NKX2-1 υψηλή), και δρΟΟ (NKX2-1 χαμηλή), με ποσοστό αποτυχίας των 8,4%.

Συμπεράσματα /Σημασία

τα αποτελέσματα αυτά δείχνουν ότι η ακτινοβολία ευαίσθητη πρωτεΐνη Notch 1 μπορεί να ρυθμίζεται προς τα πάνω στον ιστό των πνευμόνων από τους ανθρακωρύχους ουρανίου από το επίπεδο έκθεσης σε πνευμονική καρκινογόνες ουσίες. Αξιολογήσαμε μια υπογραφή τριών πρωτεΐνη αποτελούμενη από ένα φυσιολογικό πρωτεΐνης (MUC1), ένας καρκίνος-ειδική πρωτεΐνη (HIF1A), και ένα γράμμωσης-ειδική πρωτεΐνη (NKX2-1) που θα μπορούσαν διακρίσεις καρκίνο των πνευμόνων και των μεγάλων υποτύπων του με ένα χαμηλό ποσοστό αποτυχίας .

Παράθεση: Pesch Β, Casjens S, Stricker Ι, Westerwick D, Taeger D, Rabstein S, et al. (2012) Notch1, HIF1A και άλλες σχετίζονται με τον καρκίνο Πρωτεΐνες στον πνευμονικό ιστό από Ουράνιο ανθρακωρύχοι-Παραλλαγή από επαγγελματικής έκθεσης και Δευτερεύων του καρκίνου του πνεύμονα. PLoS ONE 7 (9): e45305. doi: 10.1371 /journal.pone.0045305

Επιμέλεια: Ramon Andrade de Mello, Πανεπιστήμιο του Πόρτο, Πορτογαλία

Ελήφθη: 20 Απρίλη του 2012? Αποδεκτές: 21 Αυγούστου 2012? Δημοσιεύθηκε: 17 Σεπ, 2012

Copyright: © Pesch et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη υποστηρίχθηκε από την Ομοσπονδιακή Υπηρεσία για την Προστασία από την ακτινοβολία, Neuherberg, τη Γερμανία, τη χορήγηση StSch 4528. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα κανόνα στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου.

Ανταγωνιστικά συμφέροντα : Οι συγγραφείς δηλώνουν ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

στην Ανατολική Γερμανία, η εκτεταμένη εξόρυξη ουρανίου αναλήφθηκε για τη Σοβιετική πυρηνική βιομηχανία από το 1946 μέχρι το 1990 [1].. Κακές συνθήκες εργασίας στο λεγόμενο εταιρεία εξόρυξης Wismut οδήγησε σε πολύ υψηλά επίπεδα έκθεσης σε ιονίζουσες ακτινοβολίες [2]. Έκθεση στο αρσενικό συνέβη σε ορισμένα ορυχεία, ανάλογα με την περιεκτικότητα σε μέταλλα του μεταλλεύματος.

Ένα ολοκληρωμένο πλέγμα δουλειά έκθεσης (JEM) αναπτύχθηκε για την ποσοτική εκτίμηση της έκθεσης σε ραδόνιο, το αρσενικό, και σκόνη χαλαζία με βάση την εκτεταμένη μετρήσεις [3]. Η μεγαλύτερη ενιαία ομάδα των ανθρακωρύχων ουρανίου ιδρύθηκε δείχνει μία δοσο-εξαρτώμενη αύξηση του κινδύνου για καρκίνο του πνεύμονα από το ραδόνιο έκθεση [4], [5].

Η βιολογική έρευνα για την ακτινοβολία που προκαλείται από την καρκινογένεση έχει επικεντρωθεί σχετικά με τις ζημιές της το γονιδίωμα. Μέχρι στιγμής, τα διαθέσιμα αποτελέσματα δεν υποδηλώνουν σταθερά ένα ραδόνιο-ειδική μετάλλαξη του

TP53

[6]. Ωστόσο, λίγα είναι γνωστά για άλλα γονίδια και κατά πόσο η έκθεση σε ακτινοβολία μπορεί να σχετίζονται με τον καρκίνο-ειδικές πρωτεΐνες: Θυρεοειδής καρκίνους από το αποθετήριο ιστό Τσερνομπίλ έχουν εξεταστεί με σκοπό την ανίχνευση της ακτινοβολίας-ειδική πρωτεΐνη υπογραφές [7], [8], και ακτινοβολία έχει συνδεθεί με

Notch1

μεταλλάξεις στην ανάπτυξη του λεμφώματος [9].

θα μπορούσε να υποτεθεί ότι η ακτινοβολία ενεργεί για γονίδια που είναι επιρρεπή σε αστάθεια και δραστηριοποιείται στον καρκίνο που σχετίζεται με πορείες όπως

Notch1

. Πήραμε πλεονέκτημα της ένα μοναδικό αποθετήριο ιστό της Wismut ανθρακωρύχων που είχαν ανοίξει για την έρευνα μετά τη γερμανική επανένωση [10] για να εξερευνήσετε τα πρότυπα της πρωτεΐνης στο πνευμονικό ιστό. Η στατιστική ανάλυση των δεδομένων αυτών αποκάλυψε μια στροφή προς μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (SCLC) και το καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων (δρΟΟ) σε βάρος του αδενοκαρκινώματος (ADCA) με την αυξανόμενη έκθεση σε ραδόνιο ή αρσενικό [11], [12]. Μια ακόμη πιο ισχυρή μετατόπιση από το επίπεδο της έκθεσης παρατηρήθηκε για το κάπνισμα σε μια μεγάλη συγκεντρωτική ανάλυση των μελετών καρκίνου του πνεύμονα [13]. Εδώ, θα συνεχίσουμε την έρευνά μας για τις παρατηρούμενες μετατοπίσεις έκθεσης που σχετίζονται με την κατανομή των υποτύπων του καρκίνου του πνεύμονα με τη διερεύνηση πρότυπα πρωτεΐνης. SCLC και δρΟΟ φαίνεται να παρουσιάζουν ένα υψηλότερο «βλαστική ικανότητα» παρά AC μετά από μια μεγαλύτερη βλάβη της αρχιτεκτονικής του πνεύμονα. Ως εκ τούτου, υποθέτουν ότι οι υποψήφιες πρωτεΐνες που συνδέονται με την βλαστική ικανότητα είναι πιο συχνά εκφράζονται σε SCLC και δρΟΟ από ό, τι σε ADCA ή χωρίς καρκίνο του πνεύμονα ιστό. Πιο συγκεκριμένα, διερευνούμε 1) κατά πόσον μπορούμε να ανιχνεύσουμε τη σύνδεση της επαγγελματικής έκθεσης σε ραδόνιο ή αρσενικό με την έκφραση των υποψήφιων πρωτεϊνών, 2) αν μπορούμε να διακρίνουν τους υποτύπους του καρκίνου του πνεύμονα με αυτές τις πρωτεΐνες, και 3) αν οι επιρροές της έκθεσης προσθέτουν στη διάκριση των μεγάλων υποτύπων του καρκίνου του πνεύμονα.

Υλικά και Μέθοδοι

Μελέτη

Μια ποσοτική μήτρα δουλειά έκθεσης εφαρμόστηκε στα επαγγελματικά δεδομένα των ανθρακωρύχων ουρανίου με πνευμονικού ιστού στην αυτοψία αποθετήριο Wismut. Αθροιστική ραδόνιο έκθεση δόθηκε στην εργασία μήνες επίπεδο (WLM) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [12]. Εμείς στρωματοποιημένη από & gt? 1000 WLM για την υψηλή και από & lt? 500 WLM για χαμηλή ραδόνιο έκθεσης. Αθροιστική αερομεταφερόμενα αρσενικού έκθεση αξιολογήθηκε όπως περιγράφεται παραπάνω [11] και έχουν χαρακτηρισθεί ως υψηλού από & gt? 100 μg /m

3 χρόνια και τόσο χαμηλά από & lt? 50 μg /m

3 χρόνια. Τα cut-offs βασίστηκαν στην κατανομή των μεταβλητών για την έκθεση σε ανθρακωρύχους με δείγματα αρχειοθετημένα πνευμονικού ιστού και από τη διαθεσιμότητα των δειγμάτων ιστού για σπάνιες συνδυασμούς, όπως η χαμηλή ραδόνιο και υψηλή αρσενικού έκθεσης.

Ψάξαμε την αυτοψία Wismut αποθετήριο για διαθέσιμα δείγματα πνευμονικού ιστού των ανθρακωρύχων του ουρανίου με έντονη αντίθεση με την έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό. Δέκα αρσενικό ανθρακωρύχοι καθένα επιλέχθηκαν τυχαία από τη βάση δεδομένων του χώρου αποθήκευσης μέσα σε 16 στρώματα ενός ορθογωνικού σχεδιασμό της μελέτης. Διαστρωμάτωση έγινε με συνδυασμούς χαμηλής ή υψηλής έκθεσης σε ραδόνιο και το αρσενικό μέσα σε τέσσερις ομάδες των 40 ανθρακωρύχων το καθένα, είτε χωρίς καρκίνο ή με ADCA, δρΟΟ, ή SCLC. Πληροφορίες σχετικά με πυριτίαση, καρκίνο του πνεύμονα, και την επαγγελματική έκθεση εξήχθησαν από τη βάση δεδομένων του αρχείου [14]. το κάπνισμα θα μπορούσε να χαρακτηριστεί ως ποτέ ή ποτέ για 119 ανθρακωρύχοι από τα αρχεία της απασχόλησης και ιατρικά έγγραφα των αρχείων Wismut. Η έρευνα αυτή, συμπεριλαμβανομένων των ηθικών ζητημάτων, με δείγματα ιστορικό ιστού από τους ανθρακωρύχους αποθανόντος ουρανίου εγκρίθηκε από τη γερμανική κυβέρνηση σε απευθείας συμφωνία με ινστιτούτα μας υπογράφηκε στις 29 Ιουλίου 2003. Η μελέτη βασίστηκε σε δείγματα ανώνυμες ιστού και διεξάγονται σύμφωνα με τις αρχές που διατυπώνονται στην η Διακήρυξη του Ελσίνκι.

Τρεις γερμανική παθολόγους αναταξινομήθηκαν καρκίνο του πνεύμονα αρχειοθετημένων ιστών σύμφωνα με την ταξινόμηση του ΠΟΥ [15], [16]. Εμείς ανακτηθεί δείγματα όπου τουλάχιστον δύο από τους παθολόγους ήταν σε συμφωνία και αποκλείονται μικτές μορφές για τη βελτίωση της κατάταξης. Δείγματα ήταν διαθέσιμα για 146 από 160 υποκείμενα διαπιστώνεται τυχαία από τη βάση δεδομένων. Επιλέχθηκε ένα πρόσθετο σύνολο των 15 δειγμάτων για επικύρωση. Μια τυφλή ανάγνωση των δημιουργήθηκε πρόσφατα διαφάνειες (με IS και DW) επιβεβαίωσε τα πρώην ιστολογικές ταξινομήσεις.

Ανοσοϊστοχημική Ανάλυση

Λόγω της επικράτησης της φυματίωσης σε δείγματα ιστών ανθρακωρύχοι υποβλήθηκαν σε μακροπρόθεσμη σταθεροποίηση στην φορμαλίνη. Η αποδόμηση του RNA με φορμόλη απέτρεψε μια αναζήτηση για υπογραφές έκφραση RNA με διαλογή τεχνικές όπως μικροσυστοιχίες DNA. Ωστόσο, αρχικά πειράματα έδειξαν ότι ανοσοϊστοχημεία ίσχυε ακόμα για πολλά δείγματα [17]. Για το λόγο αυτό, επιλέξαμε 30 πρωτεϊνών από την βιβλιογραφία ως πιθανώς σχετίζεται με τον καρκίνο του πνεύμονα (π.χ., EGFR, NKX2-1), την ανάπτυξη των πνευμόνων και ο προσδιορισμός της γενεαλογίας (π.χ., Notch 1), πνεύμονα φυσιολογία (π.χ., SFTPC, MUC1), ιστική αναδιαμόρφωση μετά από έκθεση σε ραδόνιο (π.χ., ΜΜΡ2), ή την προτίμηση του αρσενικού στις κερατίνες (KRT5, KRT14). Ανοσοϊστοχημικές αναλύσεις θα μπορούσαν να καθοριστούν για 22 πρωτεΐνες (συμπληρωματικό πίνακα S1). Για ΑΚΤ1, ATM, CDKN2A, ERCC2, ILK, NFKB1, PTEN και WIF χρώση δεν μπορούσαν να καθοριστούν με το αρχειακό υλικό. μικροσυστοιχίες ιστού (TMAs) δεν θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν λόγω των ασυνήθιστων μηχανικές ιδιότητες του υλικού παραφίνη Wismut, η οποία ήταν πολύ εύθραυστα και δεν είναι κατάλληλο για τους σωλήνες διάτρησης που χρησιμοποιείται με το μηχάνημα ΤΜΑ. Ως εκ τούτου, τα τμήματα 4 μm κόπηκαν από μεμονωμένα δείγματα σταθεροποιημένο με φορμαλίνη εμπεδωθεί με παραφίνη και τοποθετημένα σε αμινοπροπυλοτριαιθοξυσιλάνιο διαφάνειες. Όλες οι πλάκες αποπαραφινοποιήθηκαν και επανυδατώθηκαν σε διαβαθμισμένες αλκοόλες (100%, 96%, και 70%). ανάκτησης αντιγόνου για ανοσοχρώση πραγματοποιήθηκε με θέρμανση των δειγμάτων σε κιτρικό ρυθμιστικό (ρΗ 6.0). Η ενδογενής δραστικότητα υπεροξειδάσης ανεστάλη, μη-ειδική δέσμευση παρεμποδίστηκε. Οι τομές επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα γιά 10 λεπτά έως 12 ώρες τη νύχτα σε θερμοκρασία δωματίου. Ο χρόνος επώασης και η αραίωση ήταν αντίσωμα ειδικό. Οι αραιώσεις που αναφέρονται στον Πίνακα S1. Για παράδειγμα, αραιωμένο 1:50 για τα μονοκλωνικά αντισώματα της HIF1A (Thermo Scientific, Φρανκφούρτη, Γερμανία) και MUC1 (Zytomed, Βερολίνο, Γερμανία), και 1:1000 για Notch1 (Zytomed). Οι τομές στη συνέχεια επωάστηκαν με το βιοτινυλιωμένο δευτερεύον αντίσωμα για 10-60 λεπτά. Μια τελική επώαση με στρεπταβιδίνη-υπεροξειδάση πραγματοποιήθηκε σε θερμοκρασία δωματίου για 5-10 λεπτά. Οπτικοποίηση των αντισωμάτων επιτεύχθηκε με 3,3′-διαμινοβενζιδίνη ή 3-αμινο-9-αιθυλκαρβαζόλη για 5-10 λεπτά. Αντιχρωματισμός έγινε με Mayers αιματοξυλίνη (ϋΑΚΟ, Glostrup, Denmark). Οι αρνητικοί έλεγχοι διεξήχθησαν αφήνοντας έξω το πρωτογενές αντίσωμα. Ένταση χρώσης και το ποσοστό των χρωματισμένων επιθηλιακών κυττάρων σε ίνωση-ελεύθερες περιοχές ήταν τυφλά και ανεξάρτητη αξιολόγηση από δύο παθολόγους (I.S., D.W.). Το ποσοστό των κυττάρων σε ομάδες ένταση (κανένας, αδύναμα, μέτρια ή ισχυρά) ζυγίστηκε με παράγοντες 0, 1, 2, ή 3, αντίστοιχα, και σωρευτικά σε μια βαθμολογία για κάθε διαφάνεια, χωριστά για την μεμβράνη, κυτταρόπλασμα, ή πυρήνας . Συμπληρωματικό Σχήμα S1 δείχνει την χρώση των HIF1A και MUC1 από τον υπότυπο του καρκίνου του πνεύμονα και το σχήμα S2 απεικονίζει τη χρώση των Notch 1 σε καρκινικό ιστό (δρΟΟ) από ενός ανθρακωρύχου με υψηλή έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό.

Στατιστική Ανάλυση

το μέγεθος του δείγματος ήταν περιορισμένη από τη διαθεσιμότητα των τμημάτων ιστού με επαρκή αντίθεση με την έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό. Spearman rank συντελεστές συσχέτισης (r

s) υπολογίστηκαν με διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI) για τη διερεύνηση συσχετίσεων μεταξύ των βαθμολογιών χρώση και με την έκθεση ή την ηλικία. μεθόδων ταξινόμησης εφαρμόστηκαν στο σκορ που να αξιολογεί υπότυπο του καρκίνου του πνεύμονα ή το επίπεδο έκθεσης χρησιμοποιώντας R [URL: www.R-project.org], SAS /STAT και SAS /IML λογισμικό, έκδοση 9.2 (SAS Institute Inc., Cary , NC), και TreeView, έκδοση 1.60 [18]. Λόγω της ασυμμετρίας, παραμετρικές μέθοδοι εφαρμόστηκαν στα δεδομένα log-μετασχηματιστεί ως ln (βαθμολογία + 1). δομή συσχέτισης τους διερευνήθηκε περαιτέρω με τη διαδικασία FACTOR SAS. Ιεραρχική ομαδοποίηση έγινε χρησιμοποιώντας Pearson συσχέτιση και το μέσο σύνδεσης σε TreeView και με τη διαδικασία του CLUSTER SAS χρήση Ευκλείδειας μέτρα απόσταση και το μέσο σύνδεσης. προφίλ πρωτεϊνών διερευνήθηκαν με την Κατηγοριοποίηση και Παλινδρόμηση Δέντρο Αλγόριθμος (CART), όπως εφαρμόζεται στη βιβλιοθήκη rpart του R (σύμφωνα με Therneau και Atkinson) χρησιμοποιώντας μια άδεια-one-out cross-επικύρωσης.

Αποτελέσματα

χαρακτηριστικά των ομάδων μελέτης

Ο Πίνακας 1 παρουσιάζει τα χαρακτηριστικά των ανθρακωρύχων 146 ουρανίου εξακριβωθεί για τις ομάδες 16 μελέτης. Ηλικία θανάτου κυμάνθηκε 48-87 χρόνια. Η πλειοψηφία των ανθρακωρύχων ήταν καπνιστές (95% των περιπτώσεων καρκίνου του πνεύμονα, 88% στον καρκίνο χωρίς ανθρακωρύχοι). Πυριτίαση ήταν διαδεδομένη σε 37% των ανθρακωρύχων με και στο 64% των ανθρακωρύχων χωρίς καρκίνο του πνεύμονα και σχετίζεται με υψηλότερη έκθεση χαλαζία-σκόνη (διάμεση τιμή 20,9

vs

. 13.4 mg /m

3 χρόνια, p & lt? 0,0001). Αθροιστική έκθεση σε σκόνη χαλαζία συσχετίζεται πιο έντονα με την έκθεση σε ραδόνιο (Spearman συντελεστής συσχέτισης r

s = 0,78, 95% CI 0,71 – 0,84) από ό, τι με την έκθεση στο αρσενικό (r

s = 0,31, 95% CI 0.16- 0.45).

Η

Σύλλογοι μεταξύ Marker Παρτιτούρες

Το πρότυπο έκφρασης του καρκίνου που σχετίζονται με τις πρωτεΐνες έδειξε ισχυρή συσχέτιση μεταξύ των 22 δεικτών. Οι ενώσεις αυτές παρέμειναν σχετικά σταθερές κατά την περαιτέρω στρωματοποίηση από την έκθεση (συμπληρωματικός Πίνακας S2). Τρεις παράγοντες εκχυλίζονται από τη μήτρα συσχέτισης που θα μπορούσε να αποδοθεί σε HIF1A, MUC1, και NKX2-1, αντίστοιχα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Ο Πίνακας 2 απεικονίζει τους συντελεστές συσχέτισης Spearman των βαθμολογιών του HIF1A, MUC1, και NKX2-1 με τους άλλους δείκτες σε όλα τα δείγματα ιστών. Επιπλέον, παρουσιάζονται οι συσχετίσεις με Notch 1 ως υποψήφια για τις επιπτώσεις της έκθεσης που σχετίζονται με. Παρόμοιες συσχετίσεις βρέθηκαν εάν περιορίζεται σε καρκινικό ιστό (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). έκφραση HIF1A συσχετίστηκε με Notch 1 (r

s 0,73, 95% CI 0.65-0.80), erbB2 (r

s 0,58, 95% CI 0,46 – 0,68) και άλλες πρωτεΐνες εκτός MUC1 και NKX2-1. MUC1 και NKX2-1 είχαν αρνητική συσχέτιση με δείκτες καρκίνου, όπως TP53, VEGFA, ή KIT. Notch1 και ΕΚΒΒ2 συσχετίζεται αντίστροφα με NKX2-1 (r

s-0.31, 95% CI-0,45 έως -0,15 και -0,30, 95% CI-0,44 έως -0,14). Αλλά δεν έδειξε κάποια συσχέτιση με MUC1

Protein Expression από την έκθεση σε ραδόνιο και αρσενικού

Συμπληρωματικό Πίνακας S3 απεικονίζει την κατανομή των θετικά λεκιασμένα δείγματα από το επίπεδο της έκθεσης σε ραδόνιο και το αρσενικό. Στον πνευμονικό ιστό από ανθρακωρύχους ουρανίου με υψηλή έκθεση σε δύο καρκινογόνες ουσίες, up-ρύθμιση του καρκίνου που σχετίζονται με πρωτεΐνες που ήταν πιο συχνή από ό, τι σε ανθρακωρύχους με χαμηλή έκθεση. Επτά από τα 18 κυτταροπλασματικών πρωτεϊνών αναφέρθηκαν πιο συχνά χρωματίζονται (≥15%) των δειγμάτων υψηλής εκτεθειμένου ιστού, μεταξύ αυτών ErbB2 και Notch 1. Κανένα από τα δείγματα από χαμηλής εκτεθεί ανθρακωρύχοι είχαν μια παρόμοια κλάσμα (≥15%) από χρωματισμένο δείγματα σε περίσσεια στην ομάδα υψηλής έκθεσης.

Πίνακας 3 (επιλεγμένες πρωτεΐνες) και συμπληρωματικό πίνακα S4 (όλες οι πρωτεΐνες) δείχνουν τη συσχέτιση των βαθμολογιών χρώση με αθροιστική έκθεση σε ραδόνιο (αξιολογούνται ως WLM) και το αρσενικό σε όλα τα δείγματα και στρωματοποιημένη κατά του καρκίνου του πνεύμονα. Up-ρύθμιση των σχετιζόμενων με τον καρκίνο πρωτεϊνών που παρατηρούνται συχνά με την αυξανόμενη έκθεση στο ραδόνιο σε πνευμονικό ιστό του καρκίνου, αλλά ανιχνεύσαμε καμία σημαντική ρύθμιση προς τα κάτω. έκθεση στο ραδόνιο συσχετίστηκε περισσότερο με TP53 στον καρκίνο χωρίς ιστού (r

s 0,40, 95% CI 0,09 – 0,63). Οι επιπτώσεις της έκθεσης σε αρσενικό στις βαθμολογίες χρώσης ήταν λιγότερο σαφής. ErbB2 και Notch1 έδειξε μια ρύθμιση προς τα πάνω στον ιστό των πνευμόνων, καρκίνο με αυξημένη έκθεση σε δύο καρκινογόνες ουσίες, αλλά καμία χρώση ή έλλειψη σύνδεσης με την έκθεση σε καρκίνο δωρεάν δείγματα.

Η

Η χρώση Αποτελέσματα από Δευτερεύων του πνεύμονα καρκίνο του

ο Πίνακας 4 δείχνει την κατανομή των θετικά λεκιασμένα δείγματα από μεγάλες υπότυπο του καρκίνου του πνεύμονα και χωρίς καρκίνο του ιστού. Οι περισσότερες διαφάνειες από καρκίνο χωρίς ιστό έλειπε έκφραση CCND1, CD44, Cdh1, EGFR, erbB2, KIT, κεράτινες, Notch1, ΡΑΚ1, PTGS2, SNAI1 και VIM αλλά έδειξε χρώση των MUC1, HIF1A, NKX2-1, SFTPC και STAT3 , η οποία επίσης βρέθηκαν σε ADCA. χρώση της μεμβράνης των MUC1, SFTPC στο κυτταρόπλασμα, και πολλοί άλλοι δείκτες ήταν συχνά λείπει σε SCLC. ADCA και δρΟΟ κοινόχρηστο υπογραφές, συμπεριλαμβανομένων erbB2, KIT, ΜΜΡ2, PTGS2, EGFR, και VEGFA. KRT5 και KRT14 ήταν πιο συχνά εκφράζονται σε δρΟΟ από ό, τι στο ADCA, ενώ NKX2-1 έλειπε.

Η

Η κατάταξη των μοτίβων πρωτεΐνης με Δευτερεύων του Καρκίνου του Πνεύμονα

Το Σχήμα 1 απεικονίζει την ταξινόμηση ΚΑΛΑΘΙ του καρκίνου του πνεύμονα σε όλα τα δείγματα ιστού και το Σχήμα 2 δείχνει την ομαδοποίηση των δειγμάτων καρκίνου του ιστού από μεγάλες ιστολογική υπότυπο. Χρώση των MUC1 (μεμβράνη), HIF1A (κυτταρόπλασμα), και NKX2-1 (πυρήνα) που ταξινομούνται καρκίνου από τον υπότυπο και χωρίς καρκίνο του πνεύμονα ιστού με ένα ποσοστό αποτυχίας του 11,0%. Υψηλότερες έκφραση MUC1 στη μεμβράνη διάκριση φυσιολογικό ιστό από καρκίνο (ποσοστό αποτυχίας 2,1%). HIF1A εκφράστηκε σε NSCLC, αλλά λιγότερο σε SCLC, ενώ NKX2-1 έλειπε δρΟΟ. HIF1A και NKX2-1 κατατάσσονται τα μεγάλα υποτύπους του καρκίνου του πνεύμονα με ένα ποσοστό αποτυχίας των 8,4%. EGFR και VEGFA ταξινομούνται NSCLC

vs

. SCLC με ένα ποσοστό αποτυχίας 10,3% και ADCA

vs

. ΔρΟΟ με 19,1%. Επιβεβαιώσαμε την 2-πρωτεΐνης υπογραφής για τη διάκριση των μεγάλων υποτύπων του καρκίνου του πνεύμονα με 15 επιπλέον δείγματα που ανακτώνται από το αρχείο. Όλες οι πέντε SCLC περιπτώσεις έδειξε μια πολύ αδύναμη ή έλλειψη χρώση HIF1A, και οι πέντε περιπτώσεις ADCA παρουσιάστηκαν με μεγάλη NKX2-1 σκορ που ήταν μηδέν στο δρΟΟ ή χαμηλή σε SCLC.

χρησιμοποιώντας ανοσοϊστοχημικές βαθμολογίες των 22 υποψήφιων πρωτεϊνών σε 146 δείγματα ιστού από τους ανθρακωρύχους ουρανίου. Χρώση βλεννίνης 1 (MUC1) στην μεμβράνη, υποξία παράγοντα 1 α (HIF1A) στο κυτταρόπλασμα, και ΝΚ2 ομοιοακολουθίας 1 (NKX2-1) στον πυρήνα οδήγησε σε τρεις πρωτεΐνη ταξινομητής με ποσοστό αποτυχίας του 11,0% .

Η

Η έκθεση στο ραδόνιο ή αρσενικό δεν μπορούσε να ανιχνευθεί σαφώς στα 22-πρωτεΐνη υπογραφές, με ένα ποσοστό αποτυχίας του 62,6% σε καρκινικό ιστό και 57.5% σε όλα τα δείγματα (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται ). ποσοστά αποτυχίας μεταξύ 37% και 39% αποτελέσματα για το κάπνισμα και την πυριτίαση, αντίστοιχα. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι οι περισσότεροι ανθρακωρύχοι ήταν καπνιστές, και χρώση διερευνήθηκε σε ίνωση χωρίς τμήματα των δειγμάτων ιστού.

Συζήτηση

καρκίνου

πνεύμονα ήταν μια κοινή επαγγελματική ασθένεια στα γερμανικά ανθρακωρύχους ουρανίου με ένας επιπλέον κίνδυνος ραδονίου έκθεσης [4]. Αύξηση της έκθεσης σε ραδόνιο ή αρσενικό συνδέθηκε με μια μετατόπιση προς SCLC ή δρΟΟ σε βάρος της ADCA [11], [12]. Αυτό εγείρει το ερώτημα κατά πόσον οι αλλαγές έκθεσης που σχετίζονται μπορεί να ανιχνευθεί σε πρότυπα έκφρασης στους πνεύμονες των ανθρακωρύχων. Παρατηρήσαμε μια άνω ρύθμιση των σχετιζόμενων με τον καρκίνο πρωτεΐνες, συμπεριλαμβανομένης της Notch 1, με αυξανόμενη αθροιστική έκθεση στο ραδόνιο ή αρσενικό, αλλά δεν θα μπορούσε να ανιχνεύσει μια πρόσθετη επίδραση της έκθεσης για τις πολύ διαφορετικά πρότυπα πρωτεϊνών από τα μείζονα υποτύπων του καρκίνου του πνεύμονα. Μια σφιχτή δομή συσχέτιση μεταξύ των βαθμολογιών χρώση αποκάλυψε τρεις πρωτεΐνες που χρησίμευσε ως καλό διαγνωστικό ταξινομητές. MUC1 διακρίσεις χωρίς καρκίνο ιστού από καρκίνο του πνεύμονα. HIF1A και NKX2-1 διακρίσεις τις μεγάλες υποτύπων με χαμηλό ποσοστό αποτυχίας.

Η συσχέτιση της έκφρασης Notch1 με την έκθεση στο ραδόνιο είναι σύμφωνη με τα πειραματικά αποτελέσματα.

Notch 1

, ένα μεγάλο γονίδιο που περιλαμβάνει 37 εξόνια, είναι επιρρεπής σε προκαλούμενη από ακτινοβολία μεταλλάξεις που μπορεί να συμβάλει στην Τ-κυττάρων lymphomagenesis [9], [19]. Up-ρύθμιση του Notch παρατηρήθηκε επίσης μετά από ακτινοβόληση των εμβρυϊκών κυττάρων νεφρού [20], και ρύθμιση προς τα κάτω καθίστανται γλοιώματος βλαστικά κύτταρα πιο ευαίσθητα στην ακτινοβολία [21]. Λιγότερα είναι γνωστά σχετικά με Notch 1 σε περιπτώσεις καρκίνου του πνεύμονα με την έκθεση σε ακτινοβολία. Στη μελέτη μας, Notch1 ήταν ουσιαστικά δραστική στα περισσότερα δείγματα NSCLC, αλλά λιγότερο σε SCLC και χωρίς καρκίνο χωρίς ιστό.

Notch1 επίσης ρυθμίζεται αυξητικά σε δείγματα καρκίνου του πνεύμονα από τους ανθρακωρύχους ουρανίου με υψηλή έκθεση στο αρσενικό. Αυτό μπορεί να οφείλεται εν μέρει σε μια μέτρια συσχέτιση μεταξύ του αρσενικού και ραδόνιο. Keratins έχουν αναδειχθεί ως ένα σχετικό στόχο του αρσενικού [22]. Ενώ κυτοκερατίνες συνέβαλε στην ειδική χρώση δρΟΟ δεν δείχνουν μια πρόσθετη προτίμηση για το αρσενικό έκθεση.

Notch 1 συσχετίζεται με την έκφραση διαφόρων άλλων σχετιζόμενων με τον καρκίνο πρωτεΐνες όπως HIF1A αλλά όχι με το MUC 1 ως δείκτη του φυσιολογικού πνεύμονα φισιολογία. παραγωγή βλέννης είναι ένας πρωταρχικός μηχανισμός σωματίδιο-άμυνα των αεραγωγών [23]. Προς τα κάτω ρύθμιση του συνδεδεμένου με μεμβράνη MUC1 διακρίσεις χωρίς καρκίνο ιστού από καρκινικό ιστό. Αυτό ενισχύει την άποψη ότι οι αλλαγές στη βιοσύνθεση βλεννίνης μπορεί να χρησιμεύσει ως δείκτης όγκου [24].

απόφαση Θεραπεία του καρκίνου του πνεύμονα συνήθως στηρίζεται στην κατηγοριοποίηση σε NSCLC και SCLC. Στη μελέτη μας, οι συνήθως εφαρμόζεται δείκτες VEGFA και EGFR χωρίζονται τα δύο καταγωγές, αλλά ήταν περιορισμένης αξίας για την περαιτέρω διάκριση μεταξύ ADCA και δρΟΟ. Και οι δύο οντότητες έχουν δείξει διαφορετικές απαντήσεις στη θεραπεία [25]. Τα αποτελέσματά μας αποκάλυψε HIF1A μαζί με NKX2-1 ως πίνακα δύο πρωτεϊνών που υφίστανται όλες τις σημαντικές υποτύπων με χαμηλό ποσοστό αποτυχίας. έκφραση HIF1A ήταν χαμηλότερη σε SCLC, και χρώση NKX2-1 έλειπε δρΟΟ. Θα μπορούσαμε να επιβεβαιώσει ότι τα πρότυπα πρωτεΐνη δρΟΟ και SCLC δείχνουν μεγαλύτερη «βλαστική ικανότητα», ενώ οι μοριακές υπογραφές ADCA αντιπροσωπεύουν περισσότερο διαφοροποιημένα στάδια [26], [27]. ADCA είναι μια περιφερειακή όγκου και συνεχίζει εκφράζουν πρωτεΐνες χαρακτηριστικό της φυσιολογίας του πνεύμονα, όπως βλεννίνες, επιφανειοδραστικό πρωτεΐνες, ή NKX2-1.

Η υποξία είναι ένα βασικό χαρακτηριστικό του καρκίνου, όπου HIF1A έχει αναγνωριστεί ως βασικός ρυθμιστής της ενέργειας μεταβολισμός και άλλες οδοί ογκογόνο [28], [29]. Πολλά γονίδια στόχο έχουν εντοπιστεί, συμπεριλαμβανομένων των

VEGF

,

VIM

, και

KRT14

[30]. Στη μελέτη μας, HIF1A, ομοίως με Notch 1, συσχετίζονται με τις περισσότερες από τις άλλες καρκινικών δεικτών, αλλά λιγότερο με MUC1 ή NKX2-1 ως δείκτες του πνεύμονα φυσιολογίας. Μια υψηλότερη βαθμολογία κυτταροπλασματική χρώση ταξινομούνται NSCLC από δείγματα SCLC.

HIF1A

mRNA έχει παρατηρηθεί να τα πάνω ρυθμισμένα σε NSCLC [31] και πρότειναν ως προγνωστικός ταξινομητής [32], [33]. HIF1A θα μπορούσε επίσης να αποτελέσει ένα θεραπευτικό στόχο [34], [35].

NKX2-1

έχει βρεθεί συχνά ενισχύονται και υπερεκφράζεται σε ADCA [36] και είναι μια καθιερωμένη δείκτης πνεύμονα- καταγωγή του καρκίνου χρησιμοποιούνται για τη διάκριση ADCA από την πιο κεντρική τοποθεσία δρΟΟ. Επιβεβαιώσαμε την έκφραση της στην ADCA ενώ χρώση έλειπε δρΟΟ.

NKX2-1

είναι απαραίτητη για το σχηματισμό του κυψελιδικού τύπου 2 (ΑΤ2) πνευμονοκύτταρα [37]. Και οι δύο ΑΤ2 κύτταρα και ADCA που βρίσκονται σε απομακρυσμένα σημεία του πνεύμονα, όπου βλεννινών κρατήσει το στρώμα επιθηλιακών ενυδατωμένο και να δράσουμε μαζί με τασιενεργά ως εμπόδιο διήθηση [38].

πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά Διάφορα μεθοδολογικές αδυναμίες την μελέτη του καρκίνου του πνεύμονα. Η ταξινόμηση των υποτύπων είναι επιρρεπής σε προκατάληψη του παρατηρητή [39]. Εδώ, πνευμονικό ιστό ήταν διαθέσιμο από αυτοψίες και υπόκεινται σε παθολογία αναφοράς. Ένα άλλο θέμα που αφορά τον εσφαλμένο χαρακτηρισμό της έκθεσης [40]. Οι τεράστιες προσπάθειες για την αξιολόγηση της επαγγελματικής έκθεσης σε ραδόνιο και αρσενικού στην εξόρυξη ουρανίου [2], [3]. Η έκθεση στο ραδόνιο και αρσενικού μπορεί να οδηγήσει σε μία συνεργιστική δράση. Κατά συνέπεια, περισσότερα δείγματα θετικά βάφονται στην ομάδα με υψηλή έκθεση σε δύο καρκινογόνες ουσίες σε σχέση με το χαμηλό εκτεθειμένη ομάδα.

Σε αυτό το συγκεκριμένο πλαίσιο των βαρέων επαγγελματικής έκθεσης, διαψεύδοντας από το κάπνισμα εκτιμάται ότι είναι ήσσονος ενδιαφέροντος [ ,,,0],5]. Δεν υπήρχε έντονη διακύμανση του επιπολασμού του καπνίσματος από το επίπεδο της έκθεσης. Δεν προφανή επίδραση του καπνίσματος βρέθηκε στα πρότυπα miRNA σε ένα μεγάλο σύνολο δειγμάτων ADCA, όπου επίσης θα μπορούσε να επιτευχθεί μια καλή μοριακή ταξινόμηση των ADCA και δρΟΟ [41].

Επίσης, οι δείκτες μας ήταν επίσης καλό ταξινομητές της οι υπότυποι, αλλά δεν θα μπορούσαμε να προσδιορίσει μια πρόσθετη επίδραση της έκθεσης στον υπότυπο-ειδικά σχέδια. Παρά το γεγονός ότι ήμασταν σε θέση να ανιχνεύσει μια μέτρια συσχέτιση μεταξύ της έκθεσης και Notch1 και άλλες πρωτεΐνες, οι μεγάλες διαφορές στην έκφραση του υποτύπου θα μπορούσε να εμποδίσει την ανίχνευση των ασθενέστερων επιρροές. Αυτό εγείρει το ερώτημα κατά πόσον το σχεδιασμό της μελέτης μας ήταν αρκετά ισχυρό για να ανιχνεύσει μια τέτοια τροποποίηση στα επίπεδα έκφρασης. Μία πρώτη έρευνα με μικροσυστοιχίες cDNA σε όγκους του θυρεοειδούς, καθώς και σε δείγματα από το Τσερνομπίλ Tissue Bank, δεν αποκάλυψε ακτινοβολία-ειδική υπογραφή [42]. Μια επακόλουθη ανάλυση επέτρεψε την αναγνώριση ενός λεπτή υπογραφή της γονιδιακής έκφρασης σε μια υποομάδα των περιπτώσεων Τσερνομπίλ, τα οποία ήταν ευπαθή σε καρκίνο που προκαλείται από ακτινοβολία [8]. Είχαμε επιλέξει ένα ορθογώνιο σχεδιασμό της μελέτης με αντίθεση στην έκθεση. Παρά το γεγονός ότι η τράπεζα ιστών είναι μάλλον περιεκτική, τα μπλοκ ιστού ήταν περιορισμένες για τις σπάνιες συνδυασμούς όπως το χαμηλό του ραδονίου και την υψηλή αρσενικού. Επιπλέον, ένα εκτεταμένο διαστρωμάτωση οδηγεί σε μικρότερες υποομάδες που είναι επιρρεπείς σε παραλλαγή από την τύχη. Γι ‘αυτό προσοχή σε σταθερές τάσεις στα αποτελέσματα.

Μια άλλη ανησυχία είναι το ερώτημα εάν η μεθοδολογία που χρησιμοποιήθηκε ήταν κατάλληλο και το σύνολο της πρωτεΐνης ήταν αρκετά πλήρεις και ευαίσθητη. Σύγχρονη μάζας πρωτεομική φασματομετρία-based έχει σημειώσει μεγάλη πρόοδο στην εφαρμογή της σε αρχειακό υλικό [43], [44]. Αντί να χρησιμοποιεί μια μέθοδο για την παγκόσμια ανάλυση πρωτεϊνών, όμως, έχουμε επιλέξει μια προσέγγιση υπόθεση με γνώμονα, που βασίστηκε σε ανοσοϊστοχημεία. ανάκτηση αντιγόνου με αρχειακό υλικό είναι καθιερωμένη και, παρά τη μακρά φορές στερέωσης σε μη ρυθμισμένο φορμόλη, 22 από τα 30 αντισώματα μπορεί να εφαρμοστεί με επιτυχία. Αρχικά, ψάξαμε τη βιβλιογραφία για τις υποψήφιες πρωτεΐνες που απασχολούνται στον καρκίνο του πνεύμονα, την ανάπτυξη ή τη φυσιολογία. Οι παρατηρούμενες ισχυρές συσχετίσεις μεταξύ των βαθμολογιών των 22 πρωτεϊνών που υποστηρίζουν την προσέγγιση της πρωτεΐνης υποψήφιο. Η σφιχτή δομή συσχέτισης θα μπορούσε να εκπροσωπείται από HIF1A, MUC1 και NKX2-1. Αυτή η μείωση της διάστασης θα μπορούσε να οφείλεται στην συμβολή των διαφόρων βασικών πρωτεϊνών στα θεμελιώδη μονοπάτια. Αν και δεν μπορούμε να αποκλείσουμε λείπουν σημαντικές πρωτεΐνες στο σύνολο επιλεγεί για την παρούσα έρευνα, για παράδειγμα από μονοπάτια επιδιόρθωσης του DNA, η δομή συσχέτισης του υποψηφίου πρωτεΐνη υποστηρίζει την άποψη ότι μια τέτοια ανάλυση μπορεί ομοίως να διεξαχθεί με πρωτεΐνες μεσολάβησης. Εάν η έκθεση επηρέασε υποψήφια πρωτεΐνη, ένα τέτοιο αποτέλεσμα θα μπορούσε να μεταφερθεί κατά μήκος των οδών ή κατά μήκος των δικτύων των βασικών πρωτεϊνών.

Εκτός από μεθοδολογικούς περιορισμούς, βιολογικές εξηγήσεις θα πρέπει επίσης να συζητηθεί ως προς το γιατί η έκθεση μπορεί να προκαλέσει μια μετατόπιση μεταξύ της υποτύπους. Πολλοί από τους δείκτες χρησιμοποιούνται σε αναπτυξιακές οδούς των πνευμόνων μορφογένεσης που ανακεφαλαιώνονται στο αναγέννηση του ιστού και του καρκίνου [45] – [47]. Τα προγράμματα αυτά οδηγούν σε πρότυπα έκφρασης της συγκεκριμένης γενεαλογίας που μπορεί να είναι καλά χαρακτηριστεί από αυτές τις πρωτεΐνες. Είναι τρέχουσα γνώμη ότι τουλάχιστον δύο σημαντικές γραμμώσεις προκαλούν SCLC και NSCLC [48], [49]. SCLC είναι μια πιο επιθετική όγκου με χαρακτηριστικά νευροενδοκρινή [50]. ADCA είναι η κοινή υπότυπος σε μη καπνιστές και πιο διαφοροποιημένη από δρΟΟ εντός της γράμμωσης NSCLC [26], [27]. Την αποκατάσταση των ζημιών βαριά ιστών συνήθως χρειάζεται ανακατασκευή ενός πιο σύνθετη αρχιτεκτονική των ιστών και συνεπάγεται την πρόσληψη των κυττάρων με υψηλότερη βλαστική ικανότητα [51]. Αυτό μπορεί να εξηγήσει την παρατηρούμενη μετατόπιση στην κατανομή των υποτύπων του καρκίνου του πνεύμονα με το επίπεδο έκθεσης σε καρκινογόνους παράγοντες. Η έκθεση σε ραδόνιο ή αρσενικό μπορεί να προκαλέσει τον μετασχηματισμό ενός βλαστικού κυττάρου σε ένα καρκίνο βλαστικών κυττάρων. Ωστόσο, ελέγχονται αυστηρά προγράμματα ενεργοποιούνται στη διαδικασία της καρκινογένεσης ενδέχεται επισκιάζει την μεταφορά των ζημιών που σχετίζονται με την έκθεση σε ένα πρόδρομο κύτταρο κατά μήκος του γράμμωσης σε ένα συγκεκριμένο φαινότυπο καρκίνου.

Εν κατακλείδι, Notch 1, μια εξέχουσα υποψήφια για ακτινοβολίας- που σχετίζονται με ανεπιθύμητες, και άλλες πρωτεΐνες που σχετίζονται με τον καρκίνο συσχετίστηκαν ασθενώς έως μετρίως με την έκθεση στο ραδόνιο και το αρσενικό. MUC1, ένα φυσιολογικό δείκτη, HIF1A, ένας ρυθμιστής των μεταβολικών επαναπρογραμματισμό, και NKX2-1, ένας γράμμωσης-ειδικό δείκτη καλές επιδόσεις ως ταξινομητές του καρκίνου του πνεύμονα και των μεγάλων υποτύπων του.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Σχήμα S1.

Χρώση βλεννίνης 1 (MUC1) (δεξιά στήλη) στη μεμβράνη και υποξία παράγοντα 1 α (HIF1A) (αριστερή στήλη) στο κυτταρόπλασμα των αρχειοθετημένων πνευμονικού ιστού από ανθρακωρύχους ουρανίου, δείχνοντας χωρίς καρκίνο του πνεύμονα ιστό, αδενοκαρκίνωμα (ΑϋΟΑ), πλακώδες καρκίνωμα (δρΟΟ), και μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (SCLC) (φθίνουσα).

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s001

(JPG)

Εικόνα S2.

χρώση των Notch 1 σε ένα δείγμα του πλακώδους καρκινώματος από ένα ανθρακωρύχος με υψηλή έκθεση σε ραδόνιο και το αρσενικό.

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s002

(ΔΕΘ)

Πίνακα S1.

υποψήφιες πρωτεΐνες που έχουν επιλεγεί για ανοσοχρώση της αρχειοθετημένα πνευμονικού ιστού.

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s003

(DOC)

Πίνακας S2.

Spearman συντελεστών συσχέτισης μεταξύ των βαθμολογιών δείκτη στον πνευμονικό ιστό από ανθρακωρύχους ουρανίου με επίπεδο έκθεσης σε ραδόνιο και το αρσενικό.

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s004

(DOC)

Πίνακα S3.

Ποσοστό των δειγμάτων με θετική χρώση των υποψήφιων πρωτεϊνών στον καρκίνο του πνεύμονα και του καρκίνου χωρίς ιστό από ανθρακωρύχους ουρανίου με επίπεδο έκθεσης σε ραδόνιο και το αρσενικό.

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s005

(DOC)

Πίνακας S4.

Spearman συντελεστές συσχέτισης των βαθμολογιών δείκτη με αθροιστική έκθεση σε ραδόνιο [WLM] και το αρσενικό [μg /m

3 έτη] στον πνευμονικό ιστό από ανθρακωρύχους ουρανίου.

doi: 10.1371 /journal.pone.0045305.s006

(DOC)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστήσω Johannes Gellissen, Ομοσπονδιακό Ινστιτούτο Επαγγελματικής Ασφάλειας και Υγείας, και την ομάδα του Αρχείου δεδομένων Υγείας της εταιρείας Wismut για την ανάκτηση των δεδομένων του καπνίσματος από ιατρικά και άλλα αρχεία.