Αφηρημένο

Νέα θεραπείες για προχωρημένο στάδιο και τον ευνουχισμό καρκίνο του προστάτη ανθεκτικού (CRPC) εξαρτώνται από τον ορισμό μοναδικές ιδιότητες και τα μονοπάτια κυτταρικών υποπληθυσμών μπορεί να διατηρεί τη καθαρή αύξηση του καρκίνου. Ένα από τα καλύτερα προγράμματα εμπλουτισμού για την απομόνωση του υποθετικού βλαστικών /προγονικών κυττάρων από τον αδένα του προστάτη ποντικού είναι Λιν

-? Sca1

+? CD49f

hi (LSC

hi), η οποία οδηγεί σε μια πιο από εμπλουτισμό 10 φορές για

in vitro

δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας. Έχουμε δείξει στο παρελθόν ότι η LSC

hi-πληθυσμό είναι τόσο αναγκαία και επαρκής για την έναρξη του καρκίνου στο

PTEN

-null μοντέλο καρκίνου του προστάτη. Για την περαιτέρω βελτίωση του καθεστώτος αυτού εμπλουτισμό, ψάξαμε για τα μόρια της κυτταρικής επιφάνειας ρυθμίζεται προς τα πάνω κατά τον ευνουχισμό του προστάτη ποντικού και αναγνωρίζονται CD166 ως υποψήφιο γονίδιο. CD166 κωδικοποιεί ένα μόριο κυτταρικής επιφάνειας που μπορεί να εμπλουτίσει περαιτέρω δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας των WT LSC

hi και

PTEN

null LSC

hi. Σημαντικά, CD166 θα μπορούσε να εμπλουτίσει σχηματισμού σφαίρας ικανότητα της καλοήθους πρωτογενών ανθρώπινων κυττάρων προστάτη

in vitro

και επάγουν τον σχηματισμό σωληναρίου-όπως δομές

in vivo

. έκφραση CD166 ρυθμίζεται αυξητικά σε ανθρώπινους καρκίνους του προστάτη, ειδικά CRPC δείγματα. Αν και η γενετική διαγραφή του ποντικού CD166 στο

ΡΤΕΝ

null μοντέλο καρκίνου του προστάτη δεν παρεμβαίνει με τον σχηματισμό σφαίρα ή διακόπτουν την πορεία του καρκίνου του προστάτη και CRPC ανάπτυξη, την παρουσία του CD166 επί του προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα και ανθεκτικοί ευνουχισμός υποπληθυσμούς υποδηλώνουν ότι είναι ένα μόριο κυτταρικής επιφάνειας με τη δυνατότητα για στοχευμένη παράδοση του ανθρώπινου θεραπευτικών καρκίνου του προστάτη

Παράθεση:. Jiao J, Hindoyan α, Wang S, Tran LM, Goldstein AS, Lawson D, et al. (2012) Προσδιορισμός του CD166 ως δείκτης επιφάνειας για τον εμπλουτισμό του προστάτη Βλαστικά /προγονικά και Καρκίνος Έναρξη κύτταρα. PLoS ONE 7 (8): e42564. doi: 10.1371 /journal.pone.0042564

Συντάκτης: Dean G. Τανγκ, το Πανεπιστήμιο του Τέξας M.D. Anderson Κέντρο Καρκίνου, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 8 του Μάρτη του 2012? Αποδεκτές: 9, Ιουλίου, 2012? Δημοσιεύθηκε: 3, Αυγούστου, 2012

Copyright: © Jiao et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο έχει υποστηριχθεί εν μέρει από ένα βραβείο από το Ίδρυμα Καρκίνου του προστάτη (σε OW, IPG και HW), Jean Ίδρυμα Perkins και το Υπουργείο άμυνας (για να IPG) και επιχορήγηση από το Εθνικό Ινστιτούτο Υγείας (R01 CA107166 και RO1 CA121110 να HW ). Onw είναι ένας ερευνητής του Ιατρικού Ινστιτούτου Howard Hughes. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Παρά τις προόδους στην πρώιμη ανίχνευση και τη διαχείριση του καρκίνου του προστάτη, ανθεκτικό ευνουχισμό καρκίνο του προστάτη (CRPC) παραμένει η δεύτερη πιο κοινή αιτία της ανδρικής θνησιμότητας στις Ηνωμένες Πολιτείες [1]. Τοποθέτηση στοιχεία δείχνουν ότι ένας υποπληθυσμός κυττάρων του προστάτη μπορεί να κινήσει τον καρκίνο του προστάτη και μπορεί να είναι υπεύθυνη για την αντίσταση ευνουχισμό [2], [3], [4], [5]. Ως εκ τούτου, οι εν λόγω καρκίνου έναρξη κύτταρα [6] μπορεί να χρησιμεύσει ως πολλά υποσχόμενη κυτταρικών στόχων για τον καρκίνο του προστάτη και τον εντοπισμό των υποπληθυσμών έχει γίνει το απαραίτητο βήμα για την μελλοντική αποτελεσματική θεραπεία.

Η προέλευση του καρκίνου του προστάτη έναρξη κύτταρα είναι αμφιλεγόμενη [7 ], [8]. Κανονική προστάτη από άνθρωπο ή ποντικό περιέχει τρεις διαφορετικούς τύπους κυττάρων, δηλαδή του αυλού εκκριτική, βασική και νευροενδοκρινή κύτταρα. Από ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη χαρακτηρίζεται από απώλεια των βασικών κυττάρων και επέκταση των αυλού κυττάρων, αρκετά ζωικά μοντέλα θέτουμε ότι αυλού ειδικά πρόγονοι είναι οι πηγές για την έναρξη του καρκίνου του προστάτη [9], [10], [11]. Ωστόσο, χρησιμοποιώντας την προσέγγιση αναγέννηση των ιστών, τα βασικά κύτταρα έχουν αποδειχθεί να είναι πιο αποτελεσματική ογκογόνους στόχους τόσο για την έναρξη του ανθρώπου και του προστάτη ποντικού του καρκίνου [12], [13]. Είναι ενδιαφέρον ότι, η ομάδα Xin έδειξε ότι η βασική ενηλίκων προστάτη ποντικού και του αυλού κύτταρα είναι αυτοσυντηρούμενη καταγωγές που μπορούν και οι δύο να χρησιμεύσουν ως στόχοι για ογκογόνο έναρξη του καρκίνου του προστάτη [14].

ΡΤΕΝ παίζει σημαντικό ρόλο στον ανθρώπινο καρκίνο του προστάτη και CRPC ανάπτυξη [15] και αδρανοποιείται σε 20% της πρωτογενούς και το 60% των μεταστατικών βλαβών [16]. Το μυϊκό

PTEN

μοντέλο καρκίνου του προστάτη (

Pb-Cre

+? PTEN

L /L

) ανακεφαλαιώνει την εξέλιξη της νόσου εμφανίζονται στον άνθρωπο, συμπεριλαμβανομένων των CRPC [17], [ ,,,0],18], [19], [20], και οι μετοχές πολλών υπογραφή γενετικές αλλαγές με την ανθρώπινη ασθένεια [17]. Είναι σημαντικό, η

Pb-Cre

+?

Μοντέλο PTEN

L /L παρέχει ένα μοναδικό εργαλείο για τη μελέτη των καρκινικών κυττάρων κίνηση καθώς η πλειοψηφία των αυλού κυττάρων και υποπληθυσμών των βασικών κυττάρων έχουν

PTEN

διαγραφή [17], [18]. Χρησιμοποιώντας αυτό το μοντέλο, αποδείξαμε ότι

PTEN

διαγραφή προκαλεί την επέκταση της βασικής και παροδικές υποπληθυσμών ενίσχυση και την επακόλουθη έναρξη του όγκου

in vivo

[18]. Δείξαμε περαιτέρω Lin

-Sca-1

+ CD49f

hi (LSC

hi) στέλεχος του προστάτη /προγονικών κυττάρων από το

PTEN

null προστάτη είναι ικανή να ξεκινά μια καρκινικό φαινότυπο ότι μιμείται την πρωτοπαθή καρκίνο στο

PTEN

μοντέλο null προστάτη [19].

Εδώ, αναφέρουμε την ταυτοποίηση ενός δείκτη κυτταρικής επιφάνειας, CD166 ή ενεργοποιημένα λευκοκύτταρα μόριο κυτταρικής προσκόλλησης (CD166 /ALCAM ) που είναι ιδιαίτερα ρυθμίζεται αυξητικά σε ανθρώπινα και ποντικού CRPC δείγματα. CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εμπλουτισμό βλαστικών /προγονικών κυττάρων σχηματισμού σφαίρας τόσο από WT και

ΡΤΕΝ

null μεταλλαγμένο προστάτες ποντικού. Επιπλέον, CD166 μπορεί να διαχωρίσει LSC

hi βλαστικά ποντίκι /προγονικά κύτταρα στο CD166

hi και CD166

υποπληθυσμών lo, με την LSC

hi? CD166

hi-πληθυσμό που έχει πολύ μεγαλύτερη σχηματισμού σφαίρας δραστηριότητα. Έχουμε αποδείξει περαιτέρω ότι CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δημιουργός εμπλουτισμού για την απομόνωση ανθρώπινου προστάτη κύτταρα σχηματισμού σφαίρας και των κυττάρων σωληναρίου μορφοποίησης.

Αποτελέσματα

Η έκφραση CD166 υπερεκφράζεται σε Μυοειδούς ευνουχισμένα Προστάτη επιθηλίου και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εμπλουτισμό βλαστικά /προγονικά κύτταρα

τρωκτικό προστάτη περιέχει βλαστικά κύτταρα που μοιάζουν με τα οποία είναι εμπλουτισμένα σε ευνουχισμένα προστάτη αδένα και μπορεί να υποβληθεί σε περισσότερες από 15 κύκλους υποστροφή-αναγέννησης σε απάντηση ανδρογόνων απόσυρσης και αντικατάστασης [21] . Εμείς αιτιολογημένη ότι ο ευνουχισμός μπορεί επίσης να οδηγήσει σε προς τα πάνω ρύθμιση ή τον εμπλουτισμό αυτών των βλαστικών μορίων κυτταρικής επιφάνειας που μπορεί δυνητικά να χρησιμεύσει ως δείκτης για την απομόνωση βλαστικών /προγονικών κυττάρων και για στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων. Ως εκ τούτου, εξορύσσεται δημοσίως διαθέσιμες βάσεις δεδομένων που περιγράφουν τα προφίλ γονιδιακής έκφρασης του ποντικού προστάτη κατά την ημέρα 0 και την ημέρα 3 μετά τον ευνουχισμό [22], [23]. Εστιάσαμε σε αυτά τα γονίδια που έπεσε στην κατηγορία οντολογία γονίδιο της «πλασματικής μεμβράνης» και προσδιορίζονται CD166 /ALCAM ως ένα από τα μόλις δύο κοινά μόρια της κυτταρικής επιφάνειας ευνουχισμό εμπλουτισμένο (Πίνακας S1). CD166 ήταν σημαντικά αυξημένη (1-ουρά t-test & lt? 0.015) 3 ημέρες μετά τον ευνουχισμό, σε σύγκριση με άθικτα ποντικούς. Ενώ CXCL12 επίσης ρυθμίζεται προς τα πάνω, επιλέξαμε να μην επικεντρωθεί σε αυτό το γονίδιο, δεδομένου ότι είναι μια χημειοκίνη και δεν επιδέχονται για FACS με τη μεσολάβηση του εμπλουτισμού βλαστικών /προγονικών κυττάρων.

CD166 είναι μια διαμεμβρανική πρωτεΐνη τύπου Ι της υπερ-οικογένειας Ig ότι προκαλεί αλληλεπιδράσεις κυττάρου-κυττάρου μέσω ετερόφιλα (CD166-CD6) και /ή ομοφιλική (CD166-CD166) μηχανισμοί [24], [25]. Βρήκαμε ότι στα ανέπαφα ποντικούς, CD166 εκφράζεται κατά προτίμηση στο στέλεχος /εγγύς περιοχή προγονικά εμπλουτισμένο [21], αλλά χαμηλή στο στέλεχος /προγονικά-φτωχή περιφερική περιοχή του προστάτη WT (Σχήμα 1Α άνω πλαίσια). τα επίπεδα της πρωτεΐνης CD166 είναι, επίσης, up-ρυθμίζεται αμέσως μετά τον ευνουχισμό (Εικόνα 1Α κάτω πάνελ? σύγκριση ημέρα 0 και την ημέρα 3 μετά τον ευνουχισμό)

(Α) Top:. Σύγκριση της p63 (κόκκινο) και CD166 (πράσινο) συν-IF χρώση μεταξύ του προστάτη εγγύς περιοχή και απομακρυσμένη περιοχή. Κάτω: IHC για έκφραση CD166 από ανέπαφα εναντίον του προστάτη ευνουχισμένο ποντίκι. bar Κλίμακα: 50 μm. (Β) Lin

-? CD166

hi, Lin

-? CD166

lo, LSC

hi? CD166

hi, και LSC

hi? CD166

κύτταρα lo απομονώθηκαν με FACS από 8- έως 12-εβδομάδων ποντικούς. Η γραφική παράσταση δείχνει το ποσοστό των κυττάρων σχηματισμού σφαίρας, με βάση τις σφαίρες από κάθε πληθυσμό ανά 2.500 κύτταρα τοποθετούνται μετά από 8 ημέρες ανάπτυξης. Τα στοιχεία που παρουσιάζονται ως μέση τιμή +/- STD (**, ρ & lt? 0.001, η = 3). (C) Διπλώστε την αλλαγή του LSC

hi? CD166

hi περιεχομένου με βάση ανέπαφη WT από την ανάλυση FACS. (*, P & lt? 0.05, n = 3)

Η

προστάτη βλαστικά /προγονικά τα κύτταρα χαρακτηρίζονται από την ικανότητά τους να σχηματίζουν σφαίρες

in vitro

[26]. Πραγματοποιήσαμε την δοκιμασία σχηματισμού σφαίρας χρησιμοποιώντας ταξινομημένο CD166

hi και CD166

κύτταρα lo και διαπίστωσε ότι CD166

hi κύτταρα έχουν σημαντικά υψηλότερη δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας σε σύγκριση με το CD166

κύτταρα lo (Εικόνα 1Β, αριστερά ). Από τη στιγμή που είχε προηγουμένως αναπτύξει το LSC

hi σύστημα εμπλουτισμού [26], το οποίο αποδίδει 10-φορές εμπλουτισμό του WT κύτταρα σχηματισμού σφαίρας, ελέγξαμε εάν CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για δραστικότητα σχηματισμού σφαίρας περαιτέρω εμπλουτισμού. Εμείς περιφραγμένο LSC

hi κύτταρα σύμφωνα με την έκφραση CD166 τους και διαπίστωσε ότι LSC

hi? CD166

hi κύτταρα έχουν 5 φορές υψηλότερη δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας σε σύγκριση με LSC τους

hi? CD166

lo ομόλογό (Εικόνα 1Β, δεξιά). Ως εκ τούτου, CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δείκτης για τον περαιτέρω εμπλουτισμό κυττάρων που σχηματίζουν σφαίρα εντός του προστάτη WT. Σειριακό πέρασμα των σφαιρών που προκύπτουν από την LSC

hi? CD166

hi κύτταρα έδειξαν ότι αυτή η αυξημένη δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας θα μπορούσε να διατηρηθεί

in vitro

μέσω τουλάχιστον τρία περάσματα (Σχήμα S1 Α). Αντίθετα, λιγότερο σφαίρες παρήχθησαν από LSC

hi? CD166

lo κύτταρα (P0-Ρ2) και δεν μπορούν να υποβάλλονται σε συνεχή διέλευση οφείλεται στον αριθμό περιορισμένων κυττάρων. Δεν παρατηρήσαμε καμία σημαντική διαφορά στην κατανομή μεγέθους σφαίρα μεταξύ LSC

hi? CD166

hi δημιουργείται σφαίρες και LSC

hi? CD166

lo δημιουργείται σφαίρες (Σχήμα S1B και S1c). Παρόμοια με το hi υποπληθυσμό LSC

[26], ο ευνουχισμός επίσης οδηγεί σε σημαντική ενίσχυση της LSC

hi?. CD166

hi υπο-πληθυσμού (σχήμα 1Γ)

CD166

γεια ανθρώπινα κύτταρα προστάτη έχουν υψηλότερα Σφαίρα Forming και Αναγέννηση Πιθανές

Ορισμένα δείκτες κυτταρικής επιφάνειας, όπως Sca-1, εκφράζονται μόνο σε ποντίκια και επομένως δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την απομόνωση των ανθρώπινων βλαστικών /προγονικών κυττάρων. CD166, από την άλλη πλευρά, εκφράζεται σε διάφορα ανθρώπινα όργανα και ρυθμίζεται αυξητικά σε ανθρώπινους καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του προστάτη [27]. Για να καθοριστεί εάν CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εμπλουτισμό ανθρώπινου προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα, εξετάσαμε πρώτη έκφραση της και διαπίστωσε ότι CD166 εκφράζεται έντονα στην ανάπτυξη του ανθρώπινου επιθηλίου του εμβρύου προστάτη (Σχήμα 2Α, αριστερό πάνελ) και εστιακά εκφράζονται στην καλοήθη ενηλίκων προστάτη, η οποία επικαλύπτεται με ένα υποσύνολο TROP2 και CD49f -. θετικά κύτταρα (Σχήμα 2, μεσαία και δεξιά πάνελ)

(Α) IHC χρώση CD166 επί ανθρώπινου ιστού εμβρύου προστάτη και ασθενής ιστούς καρκίνου του προστάτη. bar Κλίμακα: 50 μm. (Β) Συνολική διαχωρισμένα κύτταρα του προστάτη, CD166

hi και CD166

πληθυσμούς lo απομονώθηκαν με FACS από δείγματα 6 ασθενή. Η γραφική παράσταση δείχνει το ποσοστό των κυττάρων σχηματισμού σφαίρας, με βάση τις σφαίρες από κάθε πληθυσμό ανά 5.000 κύτταρα τοποθετούνται μετά από 7 ημέρες καλλιέργειας. Τα στοιχεία που παρουσιάζονται ως μέση τιμή +/- STD (**, ρ & lt? 0.001). (C) CD166

hi, και CD166

πληθυσμούς lo απομονώθηκαν με FACS από δείγματα 3 ασθενή. CD166

hi και CD166

κύτταρα lo (2 × 10

5) εμφυτεύθηκαν υποδορίως σε NOD SCID-/IL2rγ ποντίκια null, σε συνδυασμό με 2 × 10

5 rUGSM επαγωγική μεσεγχυματικά κύτταρα. Μοσχεύματα συλλέχθηκαν, σταθεροποιήθηκαν και αναλύθηκαν μετά από 8-16 εβδομάδες. Αριστερά, γράφημα δείχνει ότι CD166

hi ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη μπορούν να σχηματίσουν πιο σωληνάρια σε δοκιμασία την αναγέννηση του μοσχεύματος σε σύγκριση με το CD166

lo ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη. Δεξιά, η H & amp? Ε χρώση αντπροσωπευτικές μοσχεύματος. bar κλίμακας: 100 μm. οικόπεδα (D) Αριστερά, FACS δείχνουν πύλες που για τη διαλογή της LTC (TROP2

hi? CD49f

hi) CD166

hi και LTC? CD166

lo υποπληθυσμών από έναν ασθενή. Δεξιά, εκπρόσωπος γράφημα δείχνει ότι LTC? CD166

hi ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη μπορούν να σχηματίσουν πιο σωληνάρια σε δοκιμασία την αναγέννηση του μοσχεύματος σε σύγκριση με την ομάδα LTC?. CD166

lo ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη

Η

Στη συνέχεια αξιολογείται κατά πόσον CD166 θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως δείκτης για τον εμπλουτισμό ανθρώπινα βλαστικά /προγονικά κύτταρα. Καλοήθης περιοχές του ιστού του προστάτη συλλέχθηκαν από πολλαπλούς ασθενείς που υποβλήθηκαν σε ριζική προστατεκτομή και διαχωρίζεται σε μεμονωμένα κύτταρα. Σε συμφωνία με προηγούμενες μελέτες μας [13], [28], τα ποσοστά του CD166

+ κύτταρα διαφέρουν από ασθενή σε ασθενή (δεν παρουσιάζονται τα δεδομένα). Ωστόσο, το μεγαλύτερο μέρος των δραστηριοτήτων που σχηματίζουν σφαίρα εντοπίστηκε στο hi πληθυσμού CD166

(Εικόνα 2Β), παρόμοια με τα ευρήματά μας με τα κύτταρα του προστάτη ποντικού. Τα δεδομένα που παρουσιάζονται από 6 εκπρόσωπο των ασθενών.

Για να αξιολογηθεί κατά πόσον CD166 μπορεί να εμπλουτίσει την ικανότητα του ανθρώπου αναγέννηση των ιστών του προστάτη

στο

vivo

, καλοήθη ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη διαχωρίστηκαν και ταξινομούνται σύμφωνα με το τα επίπεδα έκφρασης CD166 κυτταρικής επιφάνειας. Ίδιος αριθμός των βιώσιμων CD166

hi και CD166

κύτταρα lo (2 × 10

5) εμφυτεύθηκε υποδορίως σε NOD-SCID /IL2rγ null ποντίκια, σε συνδυασμό με 2 × 10

5 rUGSM επαγωγική μεσεγχυματικών κύτταρα. Μετά από 8-16 εβδομάδες, μοσχεύματα συλλέχθηκαν, σταθεροποιήθηκαν και ενσωματωμένα σε παραφίνη για τον ποσοτικό προσδιορισμό και αναλύσεις. CD166

hi κύτταρα έχουν μεγαλύτερη ικανότητα αναγέννησης ιστού, όπως αποδεικνύεται από αύξηση του αριθμού των επιθηλιακών δομών σωληναρίου-όπως βρέθηκαν στα μοσχεύματα, τα οποία είναι σπάνια στα CD166

μοσχεύματα lo (Σχήμα 2C). Περαιτέρω αναλύσεις έδειξαν ότι οι σωληναρίων-όπως δομές που ξεκίνησε από CD166

hi κύτταρα περιέχουν CK5 και ρ63 που εκφράζουν τα βασικά κύτταρα, κύτταρα του αυλού Ck8 και θετικά κύτταρα AR (Εικόνα S2).

Συνδυασμός των δεικτών TROP2 και CD49f μπορεί ξεχωριστή καταγωγή αρνητικών ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων του προστάτη σε διάφορες υποπληθυσμούς, με TROP2

hi? CD49f

hi (Lin

-Τ

Hic

hi ή LTC) κύτταρα που έχουν την υψηλότερη σφαίρα που σχηματίζει ικανότητα

in vitro

[29]. Επιπλέον, τα κύτταρα μπορούν να LTC αναπτύξουν καρκίνο φαινότυπο

in vivo

εξής ογκογόνο μετασχηματισμό [13]. Ελέγξαμε εάν CD166 μπορεί να διαχωρίσει περαιτέρω τον πληθυσμό αυτό LTC. FACS ανάλυση της καλοήθους ανθρώπινων κυττάρων προστάτη έδειξε ότι περισσότερο από το 50% των LTC βλαστικών /προγονικών κυττάρων εκφράζουν επίσης τον επιφανειακό δείκτη CD166 (Σχήμα 2D, αριστερά και μεσαίο πλαίσιο). Επιπλέον, εξετάσαμε αν υπάρχουν διαφορές όσον αφορά τις δυνατότητες αναγέννησης μεταξύ αυτών των δύο υποπληθυσμών. Ταξινομημένο LTC? CD166

hi και LTC? CD166

κύτταρα lo εγχύθηκαν υποδορίως σε NOD-SCID /IL2rγ

– null ποντίκια με 2 × 10

5 rUGSM κύτταρα και αναλύθηκαν 8-16 εβδομάδες αργότερα. Μας

in vivo

δεδομένα υποδηλώνουν ότι η LTC? CD166

hi κύτταρα μπορεί να προκαλέσει περισσότερο σωληναρίων-όπως δομές, ενώ LTC?. CD166

κύτταρα lo έχουν μικρότερη ικανότητα αναγέννησης (Σχήμα 2D, δεξιά πάνελ)

CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εμπλουτισμό του όγκου Σφαίρα που σχηματίζουν τα κύτταρα του

PTEN

Null προστάτη Μοντέλο Καρκίνου

για να εξεταστεί αν CD166 μπορεί να εμπλουτίσει τα καρκινικά κύτταρα έναρξη μετά τον ευνουχισμό, συγκρίναμε το ποσοστό του CD166

hi υποπληθυσμό μεταξύ άθικτο και ευνουχισμένα

PTEN

μεταλλαγμένα ποντίκια και παρατήρησαν την επέκταση του CD166

hi-πληθυσμό μετά τον ευνουχισμό (Εικόνα 3Α). Στη συνέχεια, σε σύγκριση με τη σφαίρα των δυνατοτήτων σχηματισμό LSC

hi? CD166

hi, LSC

hi? CD166

lo, LSC

lo? CD166

hi, και LSC

lo? CD166

υποπληθυσμών lo στο ΡΙΝ προ-καρκίνου (6 εβδομάδες) και τα στάδια του καρκίνου (11 εβδομάδες). Βρήκαμε ότι η LSC

hi? CD166

hi-πληθυσμό έχει πολύ υψηλότερη σφαίρα-ικανότητα σχηματισμού, και σχεδόν όλη η δραστηριότητα σχηματισμού σφαίρας στο στάδιο καρκίνου κατοικεί στο LSC

hi? CD166

hi υποπληθυσμό (Σχήμα 3Β). Συνεπής με την προηγούμενη παρατήρηση μας ότι

PTEN

μεταλλαγμένο σφαίρες είναι μεγαλύτερα από σφαίρες έλεγχο WT [19], τόσο LSC

hi? CD166

hi και LSC

hi? CD166

lo υποπληθυσμών σχηματίζουν μεγάλες σφαίρες του προστάτη (Σχήμα S3). προηγούμενη μελέτη μας προτείνει ότι

PTEN

διαγραφή προωθεί την επέκταση της LSC

hi προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα [18], [19]. Εντός του LSC

πληθυσμού γεια, παρατηρήσαμε επιλεκτική επέκταση των LSC

hi? CD166

hi κύτταρα.

PTEN

μεταλλαγμένα ποντίκια έχουν περισσότερα από ένα 3-πλάσια αύξηση στο ποσοστό των LSC

hi?. CD166

hi υποπληθυσμό, σε σύγκριση με το συγγενή WT (Σχήμα 3C)

( Α) κηλίδες FACS δείχνουν αυξημένη Lin

-CD166

hi πληθυσμό μετά τον ευνουχισμό του

PTEN

μεταλλαγμένα ποντίκια σε σύγκριση με άθικτα

PTEN

μεταλλαγμένα ποντίκια. (Β) Τέσσερις υποπληθυσμών (LSC

hiCD166

hi, LSC

hiCD166

lo, LSC

loCD166

hi, LSC

loCD166

lo) απομονώθηκαν από

PTEN

μεταλλαγμένο προστάτη είτε από 6 εβδομάδες ή 11 εβδομάδων ποντίκια. Η γραφική παράσταση δείχνει το ποσοστό των κυττάρων σχηματισμού σφαίρας. Τα δεδομένα από διάφορα πειράματα συνενώθηκαν. Τα στοιχεία που παρουσιάζονται ως μέση τιμή +/- STD (*, ρ & lt? 0,05, η = 3). (C) Αριστερά: ραβδόγραμμα εμφανίζει φορές αλλαγή της

PTEN

μεταλλαγμένο LSC

hiCD166

hi περιεχόμενο σε σύγκριση με WT? δεξιά, κηλίδες FACS δείχνουν την επέκταση του LSC

hi CD166

hi κύτταρα εντός του πληθυσμού LSC στο

PTEN

μεταλλαγμένο σε σύγκριση με το WT. (Δ) RNA απομονώθηκε από μη-LSC, LSC

hiCD166

hi, και LSC

hiCD166

κλάσματα lo εις διπλούν πειράματα. RNA συντέθηκε σε cDNA και υπεβλήθη σε qRT-PCR. Γράφημα δείχνει φορές εμπλουτισμού κατά τη διάρκεια των μη-LSC κύτταρα για κάθε γονίδιο. GADPH χρησιμοποιήθηκε ως γονίδιο αναφοράς (*, p & lt? 0,05? **, P & lt? 0,01? Ns, όχι σημαντική).

Η

Για να μελετήσει περαιτέρω το LSC

hi? CD166

γεια υποπληθυσμό, απομονώσαμε RNA από LSC

hi? CD166

hi, LSC

hi? CD166

υποπληθυσμών lo και το κλάσμα των κυττάρων εξαντλούνται των κυττάρων LSC (μη-LSC

hi) και συγκρίνονται γονίδιο εκφράσεις τους με ανάλυση RT-PCR. LSC

hi? CD166

hi υποπληθυσμό εκφράζει παρόμοια επίπεδα των δεικτών βασικών κυττάρων

CK5

και

p63

ως LSC

hi? CD166

lo υποπληθυσμό (Σχήμα 3D, αριστερό πάνελ). Ωστόσο, LSC

hi? CD166

hi υποπληθυσμό εκφράζει πολύ υψηλότερο επίπεδο του αυλού δείκτη

Ck8

και

Trop2

, ένας νέος δείκτης επιθηλιακά επιφάνεια εντοπίσαμε πρόσφατα για τον εμπλουτισμό των δραστηριοτήτων των βλαστικών κυττάρων τόσο ποντικού και ανθρώπου προστάτες [13], [29] (Σχήμα 3D, δεξιό πλαίσιο). Περαιτέρω εξέταση πολλών άλλων επιθηλιακών δείκτες κυττάρων βλαστικών κυττάρων [10], [30], [31], [32], [33] έδειξε ότι LSC

hi? CD166

hi κύτταρα έχουν σημαντικά υψηλότερα

CD44

και

Nkx3.1

έκφρασης σε σύγκριση με LSC

hi? CD166

κύτταρα lo. Παρά το γεγονός ότι σε σύγκριση με μη-LSC πληθυσμού, LSC

hi? CD166

hi κύτταρα εκφράζουν λιγότερο

Nkx3.1

. Δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές στο

CD117

, και

CD133

εκφράσεις μεταξύ αυτών των δύο πληθυσμών (Σχήμα 3D, δεξί πάνελ).

Η έκφραση CD166 υπερεκφράζεται στα Ανθρώπινα Ευνουχισμός Ανθεκτικό προστάτη καρκίνος

Αφού διαπίστωσε ότι CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον εμπλουτισμό για τα ανθρώπινα κύτταρα LTC και όγκου ποντικού σε itiating κύτταρα, μπορούμε στη συνέχεια εξετάστηκε η σχέση μεταξύ της έκφρασης CD166 και εξέλιξη ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη. Σε κλινικώς σχολιασμένα δεδομένα του 218 όγκους του προστάτη [34], η γονιδιακή έκφραση CD166 συσχετίζεται σημαντικά με την αυξημένη επιθετικότητα του καρκίνου του προστάτη, όπως υποδεικνύεται από βαθμολογία Gleason, με την υψηλότερη έκφραση σε δείγματα μετάσταση (Σχήμα 4Α). Εμείς που ρωτήθηκαν περαιτέρω έκφραση CD166 σε μικροσυστοιχίες ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη ιστών, τα οποία αποτελούνται από 14 ευνουχισμού ανθεκτικών (CRPC) δείγματα μετάσταση και 98 ορμόνη αφελή δείγματα πρωτογενούς καρκίνου από ασθενείς που έλαβαν είτε θεραπεία εισαγωγική ορμόνη (NHT) για διάφορες χρονικές περιόδους ή που δεν έλαβαν θεραπεία. CD166 ενισχύεται σημαντικά στα δείγματα CRPC (Σχήμα 4Β για αντιπροσωπευτικές εικόνες). Σε σύγκριση με το κυρίαρχο εντοπισμό μεμβράνη CD166 στην ορμόνη αφελείς δείγματα πρωτογενούς καρκίνου, παρατηρήσαμε έντονη κυτταροπλασματική εντόπιση του CD166 σε δείγματα CRPC μετάσταση στα οστά (Σχήμα 4Β, υψηλή μεγέθυνση). επίπεδα έκφρασης CD166 βαθμολογήθηκαν και οι τιμές ρ υπολογίζονται με δοκιμή Mann-Whitney. επίπεδο έκφρασης πρωτεΐνης CD166 είναι σημαντικά υψηλότερη σε CRPC δείγματα σε σύγκριση με πρωτογενείς καρκίνους με (ρ & lt? 0,0001) ή χωρίς (ρ & lt? 0,02) NHT (Σχήμα 4C). Αυτά τα στοιχεία υποδηλώνουν ότι CD166 είναι ένας δείκτης ευνουχισμό εμπλουτισμένο τόσο για ποντικού και του ανθρώπινου καρκίνου του προστάτη.

(Α) CD166 γονιδιακής έκφρασης από 147 ανθρώπινους όγκους του προστάτη αναλύθηκε με τη σύγκριση διαφορετικών ομάδων σκορ Gleason σε κανονική /καλοήθη (NL /BN) του προστάτη. (Β) Εκπρόσωπος IHC χρώση της έκφρασης CD166 από ανθρώπινο προστάτη TMA. Top: ορμόνη αφελείς πρωτοπαθή καρκίνο του προστάτη? Χαμηλή: ευνουχισμό καρκίνο του προστάτη ανθεκτικό δείχνει πολύ εντατική ανοσοχρώση. bar κλίμακας: 100 μm (αριστερά)? 10 μm (δεξιά). (Γ) δεδομένα από 112 δείγματα υπολογίστηκαν και στατιστική ανάλυση των CD166 έκφραση της ανθρώπινης ΤΜΑ διεξάγεται. NHT: εισαγωγική θεραπεία ορμονικής? CRPC: ευνουχίσει ανθεκτικό καρκίνο του προστάτη. Στήλη, σημαίνει χρώση CD166 στο NHT και CR ιστούς. Τα δείγματα βαθμολογήθηκαν από 0 έως +3 αντιπροσωπεύει την περιοχή από καμία χρώση για τα βαρέα χρώση με οπτική βαθμολόγηση. bar Σφάλμα: τυπικό σφάλμα. Ανοσοαντιδραστικότητα του CD166 είναι σημαντικά υψηλότερη σε CRPC ομάδα σε σύγκριση με την ομάδα άνευ αγωγής (p & lt? 0.021) ή NHT με διαφορετικούς χρόνους θεραπείας (p & lt? 0.0001).

Η

Απώλεια του CD166 δεν αλληλεπιδρά με WT προστάτη Ανάπτυξης και προστάτη Σφαίρα Σχηματισμός

Ενώ εκφράζεται σε μια ευρεία ποικιλία ιστών, CD166 είναι συνήθως περιορίζεται σε υποσύνολα των κυττάρων που εμπλέκονται στην δυναμική ανάπτυξη ή /και τη μετανάστευση, συμπεριλαμβανομένης νευρικής ανάπτυξης, διακλάδωση ανάπτυξης οργάνων, την αιμοποίηση και ανοσολογική απόκριση [27] . Για να ελέγξετε αν CD166 παίζει εγγενή ρόλο στη ρύθμιση του προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα, αναλύσαμε

CD166

knockout ποντίκια (

CD166

– /-

). Γενετική εξάλειψη του

CD166

γονίδιο επιτεύχθηκε με την αντικατάσταση πρώτο εξόνιο του με ένα cDNA που κωδικοποιεί EGFP [35].

CD166

null ποντίκια είναι φαινοτυπικά φυσιολογικά και γόνιμα [35]. Εξετάσαμε τον προστάτη σε 8 και 20 εβδομάδων και δεν βρήκε καμία διαφορά στην ανατομία και ιστολογία μεταξύ WT (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται),

CD166

+/-

και

CD166

– /- προστάτες

ποντίκι (Εικόνα 5Α)

(Α) Αρχή: Η ανατομία του προστάτη του

WT

και

CD166 – /-

ποντίκια σε. ηλικίας 8 εβδομάδων, η κλίμακα bar: 2 mm. Κάτω: HE χρώση του τμήματος DLP από την WT και

CD166

– /- ποντίκια σε ηλικία 8 εβδομάδων, γραμμή κλίμακας: 200 μm. (Β) Σύγκριση του σχηματισμού σφαίρας από το σύνολο των μη ταξινομημένα κύτταρα του προστάτη (5000 ανά 12-καλά) μεταξύ των

CD166

+/-

και

CD166

– /-

προστάτες. Τα δεδομένα παρουσιάζονται ως μέση τιμή +/- STD (ρ & gt? 0,05, η = 3). (C) Σύγκριση των LSC

hi περιεχομένου μεταξύ των

CD166

+/-

και

CD166

– /-

προστάτη σε 8-12 εβδομάδες ηλικία (p & gt? 0,05 , n = 5).

Η

για να εξεταστεί περαιτέρω αν η απώλεια της CD166 έχει καμία επίδραση στον προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα, συγκρίναμε σφαίρα δραστηριοτήτων σχηματισμό

CD166

+/-

και

CD166

– /-

προστάτη επιθήλιο και διαπίστωσε, δεν υπάρχει σημαντική διαφορά (Σχήμα 5Β). Επιπλέον, σφαίρες που δημιουργούνται από το

CD166

– /-

προστάτη έχουν παρόμοια κατανομή μεγέθους σε σύγκριση με εκείνους από το

CD166

+/-

προστάτη επιθήλιο (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Ομοίως, FACS ανάλυση έδειξε ότι η απώλεια του CD166 δεν επηρεάζει LSC

hi περιεχόμενο του προστάτη που απομονώνονται από το

CD166

– /-

ποντίκια (Σχήμα 5C), γεγονός που υποδηλώνει ότι CD166 δεν παίζει ουσιαστικό ρόλο στην ανάπτυξη φυσιολογικό αδένα του προστάτη ή του στελέχους του προστάτη /αριθμός προγονικών και λειτουργία.

Γενετική διαγραφή του

CD166

δεν εμποδίζει τον καρκίνο του προστάτη εξέλιξη

έχει διατυπωθεί η άποψη ότι λειτουργεί CD166 ως αισθητήρας κυτταρικής επιφάνειας για την κυτταρική πυκνότητα και ελέγχει τη μετάβαση μεταξύ των τοπικών κυτταρικού πολλαπλασιασμού και εισβολής ιστού κατά τη διάρκεια της εξέλιξης του μελανώματος [36]. Να εξετάσει κατά πόσον CD166 διαδραματίζει ουσιαστικό ρόλο στην ανάπτυξη του καρκίνου του προστάτη, ειδικά στον όγκο έναρξη κύτταρα, περάσαμε

CD166

– /- ποντίκια

με τις

PTEN

όρους knockout ποντικών [17 ]. Η ιστοπαθολογική ανάλυση έδειξε ότι η απώλεια του CD166 δεν μεταβλήθηκε σημαντικά την κινητική της ανάπτυξης του καρκίνου του προστάτη σε

PTEN

null το μοντέλο και όλα τα

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

– /- ποντίκια ανέπτυξαν

αδενοκαρκίνωμα περίπου 9 εβδομάδων (Σχήμα 6Α και τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Παρατηρήσαμε παρόμοια επίπεδα Κί67

+ κυττάρων μεταξύ

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

+ /+ και Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

– /-

προστάτη (Σχήμα 6Α). χρώση SMA έδειξαν επίσης ότι η απώλεια του CD166 δεν εμποδίζει τον καρκίνο του προστάτη κύτταρα από τις τοπικές εισβολή (Σχήμα 6Α, δεξί πάνελ).

(Α) Αξιολόγηση της

CD166

διαγραφή στην εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη (HE χρώση, γραμμή κλίμακας: 200 μm), τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων (χρώση Ki67, γραμμή κλίμακας: 100 μm), και του προστάτη εισβολή όγκου (χρώση SMA, γραμμή κλίμακας: 100 μm) με τη σύγκριση αντίστοιχης ηλικίας

Pb-Cre

+ , PTEN

L /L, CD166

+ /+

και

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

– /- του προστάτη ιστού σε 20 εβδομάδες της ηλικίας. (Β) Σύγκριση του σχηματισμού σφαίρας από το σύνολο των μη ταξινομημένα κύτταρα του προστάτη (5000 ανά 12-καλά) μεταξύ των

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

+/-

και

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

– /-

προστάτη (ηλικίας 9 εβδομάδων). (Γ) ένας εκπρόσωπος κηλίδα FACS δείχνει LSC περιεχομένου μεταξύ των

Pb-Cre +, PTEN

L /L, CD166

+/-

και

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

– /-

. (D) Η εξέταση των επιπέδων πρωτεΐνης του CD166, Ρ-ΑΚΤ και GFP μεταξύ διαφορετικών ιστό προστάτη με ενδεικνυόμενη γονότυπο με κηλίδωση Western. GADPH περιλαμβάνεται ως ισότιμος έλεγχος φόρτωσης

Η

Στη συνέχεια, σε σύγκριση με το σχηματισμό σφαίρας μεταξύ

Pb-Cre

+?. PTEN

L /L? CD166

+/-

και

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

– /-

προστάτες και διαπίστωσε ότι η απώλεια του CD166 δεν παρεμβαίνει με δραστικότητα σχηματισμού σφαίρας του

ΡΤΕΝ

null επιθήλιο (Εικόνα 6Β). Επιπλέον,

CD166

– /-

προστάτες έχουν παρόμοια LSC

hi περιεχόμενο σε σύγκριση με το

CD166

+/- PTEN

null προστάτη (Σχήμα 6C). Δεδομένου ότι η ενεργοποίηση της PI3K /AKT οδό είναι μια κινητήρια δύναμη για τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων και την εξέλιξη του καρκίνου του προστάτη σε

Pb-Cre

+? PTEN

L /L καρκίνο του προστάτη

[17], [20], που Στη συνέχεια εξετάστηκε κατά πόσο υπάρχει οποιαδήποτε μεταβολή της ενεργοποίησης ΑΚΤ μετά από γενετική διαγραφή του

CD166

. ανάλυση κηλίδας Western έδειξε ότι

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

– /-

του προστάτη δεν έχει καμία έκφραση CD166, αλλά έχει παρόμοια Ρ-ΑΚΤ επίπεδα σε σύγκριση με το

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

+ /+

και

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

+/-

προστάτη (Σχήμα 6D). Επιβεβαιώσαμε επίσης ότι δεν υπάρχει καμία αρνητική επιλογή έναντι

PTEN

– /-? CD166

– /-

κύτταρα αφού την ίδια ένταση της knockin-GFP πρωτεΐνη μπορεί να ανιχνευθεί σε όλες τις ομάδες εκτός από

CD166

+ /+

ποντίκια.

από βλέπουμε σημαντική υπερέκφραση του CD166 σε ανθρώπινα δείγματα CRPC, είμαστε δίπλα διερευνηθεί κατά πόσον CD166 θα επηρεάσει την ανάπτυξη της CRPC στο

PTEN

null μοντέλο καρκίνου του προστάτη.

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

+/-

και

Pb-Cre

+? PTEN

L /L? CD166

– /-

αρσενικά ευνουχισμένα στις 12 εβδομάδες και προστάτες απομονώθηκαν 8 εβδομάδες αργότερα. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 7, διαγραφή του CD166 δεν επηρεάζει σημαντικά το σχηματισμό CRPC, όπως αποδεικνύεται από παρόμοιες pathohistology (Σχήμα 7Α), CK5 /διανομής δείκτη Ck8, την επισήμανση παλμού BrdU και χρώση SMA και στις δύο ομάδες (Σχήμα 7Β). Στο σύνολό τους, οι γενετικές μελέτες μας δείχνουν ότι CD166 έχει περιορισμένη εγγενή λειτουργία του προστάτη, ακόμη και σε ο όγκος έναρξη κύτταρα.

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

+/-

και

Pb-Cre

+, PTEN

L /L, CD166

– /- ποντίκια ευνουχιστεί σε ηλικία 12 εβδομάδων χρησιμοποιώντας τυπικές τεχνικές. Σε 8 εβδομάδες μετά τον ευνουχισμό, ποντικοί ενδοπεριτοναϊκή ένεση με μία μόνο δόση των 100 μΙ (1 mg) του διαλύματος BrdU και θυσιάστηκαν 4 ώρα αργότερα για ανάλυση. Αξιολόγηση των αποτελεσμάτων του

CD166

διαγραφή στο (Α) ευνουχισμό ανθεκτικός εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη (ΗΕ), και (Β) σύνθεση κυτταρική γραμμή (CK5 /Ck8), τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων (BrdU) και του προστάτη εισβολή όγκου (SMA ) διεξήχθησαν. μπαρ κλίμακα:. 50 μm

Η

Συζήτηση

Λίγα δείκτες επιφάνειας είναι σήμερα διαθέσιμα για τον εμπλουτισμό τόσο ποντικού και ανθρώπινο ιστό του προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα και για τον εντοπισμό του καρκίνου του προστάτη έναρξη κύτταρα. Με αναζήτηση για τα εν λόγω μόρια κυτταρικής επιφάνειας που υπερεκφράζονται σε ευνουχισμένα προστάτη ποντικού και ανθεκτικά ευνουχισμό καρκίνους προστάτη (CRPC) ποντικού και ανθρώπινης προέλευσης, εντοπίσαμε CD166 ως δείκτης επιφάνειας για τον εμπλουτισμό τόσο ποντικού και ανθρώπου ιστό προστάτη βλαστικά /προγονικά κύτταρα με βάση

in vitro

σφαίρα που σχηματίζει και

αναλύει in vivo

αναγέννηση των ιστών. Είναι σημαντικό ότι, υπερέκφραση CD166 και επέκταση του CD166

hi κύτταρα συσχετίζονται με το

PTEN

null CRPC εξέλιξη καθώς και τα ανθρώπινα CRPC ανάπτυξη, αν και η γενετική διαγραφή του

CD166

δεν παρεμβαίνει με την κανονική ποντικού την ανάπτυξη του προστάτη ή

PTEN

null εξέλιξης του καρκίνου του προστάτη. Μαζί, η μελέτη μας προτείνει CD166 μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως ένα δυνητικό δείκτη επιφανείας για την ταυτοποίηση ευνουχισμό κύτταρα ανθεκτικά όγκου για στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων.

έκφραση CD166 έχει προταθεί ως προγνωστικός δείκτης για διάφορους καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του μαστού [37], προστάτη [38], των ωοθηκών [39], παγκρεατικό [40], του παχέος εντέρου [41], στοματικών καρκίνων [42], το μελάνωμα [36] και γαστρικών καρκίνων [43]. Σημαντικά, μικροσυστοιχιών μας και μελέτες TMA αποδεικνύουν την συσχέτιση της αυξημένης έκφρασης CD166 με ανθρώπινο μετάσταση καρκίνου του προστάτη και CRPC ανάπτυξη. Επιπλέον, εντός τόσο ποντικού και ανθρώπου προστάτες, δείχνουμε ότι η CD166-υψηλής έκφρασης υποπληθυσμός περιλαμβάνει προστάτη βλαστικά /προγονικά και τον καρκίνο κύτταρα έναρξης.

Για να διερευνηθεί ιδιότητες βλαστικών /προγονικών κυττάρων ανθρώπινου ιστού του προστάτη, αξιολογήσαμε ανθρώπινου προστάτη ενηλίκου επιθήλιο αποσυνδεθεί από καλοήθη προστάτη, αντί κυτταρικές γραμμές και ξενομοσχεύματα. Το πλεονέκτημα αυτής της προσέγγισης είναι να διατηρήσει το αρχικό ετερογένεια σε δείγματα ανθρώπινου προστάτη με την αποφυγή της επίδρασης των μακροπρόθεσμων

in vitro

επιλογής. Ωστόσο, φαίνεται να είναι μεγαλύτερη μεταβλητότητα μεταξύ των δειγμάτων ασθενών στις δοκιμασίες αναγέννηση των ιστών εκεί. Αυτό μπορεί να οφείλεται στη διαφορά σε μεταβλητότητα δείγμα (δηλαδή, χρόνος ισχαιμίας πριν από την επεξεργασία των ιστών και την ανάκτηση των κυττάρων), ατομική μεταβλητότητα σε έκφραση CD166, και τεχνικές προκλήσεις που σχετίζονται με τις δοκιμασίες αναγέννηση ιστού χρησιμοποιώντας ανθρώπινα κύτταρα του προστάτη. Ως εκ τούτου, η ανάλυση των επαρκών δειγμάτων των ασθενών είναι απαραίτητη προκειμένου να συντάξει ένα έγκυρο συμπέρασμα. Στην παρούσα μελέτη, 6 ανθρώπινα δείγματα χρησιμοποιήθηκαν για την

in vitro

σχηματισμού σφαίρας και άλλα 6 δείγματα χρησιμοποιήθηκαν για

in vivo δοκιμασίες

αναγέννηση.