Αφηρημένο

A

3 υποδοχείς αδενοσίνης (ΑΕ) να διαδραματίσει κεντρικό ρόλο στην ανάπτυξη του καρκίνου και η ενεργοποίηση τους εμπλέκεται στην αναστολή της ανάπτυξης του όγκου. Τα αποτελέσματα των παλμικών ηλεκτρομαγνητικών πεδίων (PEMFs) για τον καρκίνο έχουν συζητείται αμφιλεγόμενα και οι λεπτομερείς μηχανισμοί δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητή. Στο παρελθόν έχουμε αποδείξει ότι PEMFs αυξημένη Ένα

2Α και Α

πυκνότητα 3AR και λειτουργικότητα σε ανθρώπινα ουδετερόφιλα, τα ανθρώπινα και βόεια αρθρικά κύτταρα, χονδροκύτταρα και βοοειδών. Στα ίδια κύτταρα, η έκθεση PEMF αύξησε την αντι-φλεγμονώδη δράση που προκαλείται από Α

2Α και /ή Α

3aRS. Ο πρωταρχικός σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να αξιολογηθεί εάν η έκθεση PEMF ενίσχυσε τη δράση κατά των όγκων του Α

3aRS στο φαιοχρωμοκύττωμα των επινεφριδίων PC12 αρουραίου και ανθρώπινες κυτταρικές σειρές γλοιοβλαστώματος U87MG σε σύγκριση με αρουραίους φλοιού νευρώνες. Κορεσμός δεσμευτικές δοκιμασίες και mRNA ανάλυση αποκάλυψε ότι η έκθεση PEMF up-ρυθμίζονται A

2Α και Α

3aRS που είναι καλά σε συνδυασμό με τη δραστηριότητα της αδενυλικής κυκλάσης και την παραγωγή cAMP. Η ενεργοποίηση του Α

2Α και Α

3aRS ως αποτέλεσμα τη μείωση του πυρηνικού παράγοντα-κάπα Β (NF-kB) επίπεδα σε καρκινικά κύτταρα, ενώ μόνο ένα

Οι 3aRS εμπλέκονται στην αύξηση της έκφρασης p53. Ένα

3AR διέγερση που προκαλείται μια αναστολή του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων αξιολογήθηκε με ενσωμάτωση θυμιδίνης. Μια αύξηση της κυτταροτοξικότητας με γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH) απελευθέρωσης και απόπτωσης από κασπάσης-3 ενεργοποίησης σε PC12 και U87MG κύτταρα, αλλά όχι σε νευρώνες του φλοιού, παρατηρήθηκε μετά από μια

ενεργοποίηση 3AR. Η επίδραση του Α

3AR αγωνιστή σε καρκινικά κύτταρα ενισχύθηκε με την παρουσία PEMFs και μπλοκαριστεί από τη χρήση ενός πολύ γνωστό επιλεκτικό ανταγωνιστή. Μαζί αυτά τα αποτελέσματα κατέδειξαν ότι η έκθεση PEMF αυξάνει σημαντικά την αντικαρκινική δράση διαμορφώνεται από A

3aRS

Παράθεση:. Vincenzi F, Targa M, Corciulo C, Gessi S, Merighi S, Setti S, et al . (2012) Η αντι-όγκου αποτέλεσμα ενός

3 αδενοσίνης υποδοχείς ενισχύεται από Παλμικά Ηλεκτρομαγνητικά Πεδία σε κύτταρα καλλιεργημένα νευρωνικά Καρκίνου. PLoS ONE 7 (6): e39317. doi: 10.1371 /journal.pone.0039317

Συντάκτης: Μινγκ Tan, Πανεπιστήμιο της Νότιας Αλαμπάμα, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 29 Μαρτίου, 2012? Αποδεκτές: 23η Μαΐου του 2012? Δημοσιεύθηκε: 25 Ιουνίου 2012 |

Copyright: © 2012 Vincenzi et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν διαβάσει την πολιτική του περιοδικού και έχουν τα ακόλουθα συγκρούσεις. SS είναι υπάλληλος και Ruggero Cadossi είναι ο πρόεδρος και επιστημονικός διευθυντής του IGEA (Carpi, Ιταλία) που παρείχε το σύστημα γεννήτρια PEMF. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων σε όλες τις PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών.

Εισαγωγή

Αύξηση στοιχεία δείχνουν ότι η αδενοσίνη επηρεάζει πολλές παθοφυσιολογικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένης της ρύθμισης του κυτταρικού θανάτου και τον πολλαπλασιασμό [1], [2]. Η αδενοσίνη αλληλεπιδρά με τέσσερα G πρωτεΐνη υποδοχείς που συνδέονται με το όνομά του ως Α

1, το Α

2Α, A

2Β και των υποδοχέων Α

3 αδενοσίνη (ΑΕ). Ένα

1 και Α

3aRS αναστέλλουν τη δραστηριότητα της αδενυλικής κυκλάσης και μειώνουν την παραγωγή cAMP ενώ η Α

2Α και Α

2BARs ασκούν μια αύξηση της συσσώρευσης cAMP [3]. Το A

έχουν 3aRS εμπλακεί στη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και οι δύο προ- και αντι-αποπτωτικά αποτελέσματα συνδέονται στενά με το επίπεδο της ενεργοποίησης των υποδοχέων [4]. Ένα

Οι 3aRS εμπλέκονται στη διαμόρφωση του ενεργοποιείται από μιτογόνο κινάσης πρωτεΐνης (ΜΑΡΚ) δραστηριότητα και στη ρύθμιση της εξωκυττάριας κινασών σήματος ρυθμιζόμενη (ERK1 /2) [5]. Έχει γίνει αποδεκτό ότι A

3aRS είναι εντόνως εκφρασμένη σε κύτταρα όγκου παρουσιάζουν ένα σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη του καρκίνου [6] – [10]. Η αναστολή της ανάπτυξης των καρκινικών κυττάρων βρέθηκε σε διάφορα μοντέλα όπως Nb2-11C αρουραίου και ποντικού Yac-1 λέμφωμα, Β16-Ρ10 μελανώματος, MCA σάρκωμα, καρκίνωμα του προστάτη PC3, MIA-PaCa παγκρεατικό καρκίνωμα, ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα Hep-3Β και HCT-116 του παχέος εντέρου κύτταρα καρκινώματος [11] – [14]. Από την κυτταρική άποψη, η Α

3AR αγωνιστή 2-χλωρο

Ν

6- (3-ιωδοβενζυλο) αδενοσίνη-5 ‘-

N-μεθυλ-

ουροναμιδίου (Cl-IB-MECA) ανέστειλε την ανάπτυξη του όγκου μέσω de-ρύθμιση των οδών μεταγωγής σήματος NF-kB, με αποτέλεσμα την απόπτωση των καρκινικών κυττάρων [10]. Φαρμακολογικές μελέτες έδειξαν ότι A

αγωνιστές 3AR ανέστειλε την ανάπτυξη των κυττάρων μελανώματος, προήγαγαν τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του μυελού των οστών, μείωση της βιωσιμότητας των κυττάρων σε ανθρώπινα κύτταρα καρκίνου του μαστού και επαγόμενη διακοπή της προόδου του κυτταρικού κύκλου σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα [15], [ ,,,0],16]. Επιπλέον Cl-ΙΒ-MECA ενισχυμένη απόπτωση μέσω της διαφοροποίησης των μονοπατιού του πυρηνικού παράγοντα κάππα-Β (NF-kB) σηματοδότησης στον καρκίνο του θυρεοειδούς κύτταρα και μειωμένη την ικανότητα των κυττάρων καρκίνου του προστάτη να μεταναστεύσουν

in vitro

και μετάσταση

in vivo

[17], [18]. Επιπλέον, προκλινικές και Φάσης Ι μελέτες έδειξαν ότι A

αγωνιστές 3AR είναι ασφαλής και καλά ανεκτή σε ανθρώπους και ως εκ τούτου μπορεί να θεωρούνται ως πιθανοί θεραπευτικοί παράγοντες για ορισμένες ασθένειες του καρκίνου [5].

Μεγάλες ερευνητική δραστηριότητα έχει εγείρει γύρω τους μηχανισμούς της αλληλεπίδρασης μεταξύ των μαγνητικών πεδίων χαμηλής συχνότητας και βιολογικά συστήματα [19]. Διαφορετικές φυσιολογικών συστημάτων φαίνεται να επηρεάζεται από το ηλεκτρομαγνητικό πεδίο (EMF) έκθεσης, όπως αποκαλύπτεται από το

in vitro

πειράματα σε διάφορα κύτταρα ή ιστούς [20] – [25]. Πρόσφατα, έχει αναφερθεί μια συσχέτιση μεταξύ της έκθεσης σε ΗΜΠ και νευροεκφυλιστικών ασθενειών, όπως Αλτσχάιμερ ή η νόσος Πάρκινσον [26] – [28]. Επιπλέον, παλμικά ηλεκτρομαγνητικά πεδία (PEMFs) θεραπεία μείωσε σημαντικά μετεγχειρητικού πόνου και ναρκωτικό χρήση στην άμεση μετεγχειρητική περίοδο από έναν μηχανισμό που περιλαμβάνουν ενδογενή ιντερλευκίνης-1β (IL-1β) σε υπόστρωμα του τραύματος [29]. Ενώ μερικοί ερευνητές συνεργάτης έκθεσης σε ΗΜΠ με την καρκινογένεση [30], [31], άλλες μελέτες των πειραματικά μοντέλα και ανθρώπινους καρκίνους έχουν δείξει ότι η EMF δεν αυξάνει τον κίνδυνο διαφόρων τύπων καρκίνου, και ότι η θεραπεία με συχνότητες ογκο-ειδικό είναι εφικτή και καλά ανεκτή και μπορεί να έχει βιολογική αποτελεσματικότητα σε ασθενείς με προχωρημένους όγκους [32] – [34]. Επίσης, η έκθεση των θηλυκών C3H /HeJ ποντικούς που φέρουν μαστικό αδενοκαρκίνωμα σε μια συχνότητα των 120 Hz σε εντάσεις 4 και 5 mT ως αποτέλεσμα τη σημαντική μείωση της ανάπτυξης του όγκου, το οποίο είναι ένα φαινόμενο που σχετίζεται με την αναστολή της αγγειογένεσης [35]. Η έκθεση των θηλυκών αθυμικών γυμνών ποντικών με ξενομοσχεύματα ανθρώπινου καρκίνου του μαστού σε μια συχνότητα 120 Hz με ένταση 15 mT, είτε μόνα τους είτε σε συνδυασμό με ακτινοβολία γάμμα, οδήγησε σε μειωμένη ανάπτυξη και μειωμένη αγγείωση των όγκων [36]. Ομοίως, η επίδραση της 50 Hz σε 0,5 μΤ και 0,5 mT σχετικά με την ανάπτυξη των χημικά επαγόμενης εστιών στο ήπαρ αρουραίων έδειξε μια ελαφρά αναστολή του σχηματισμού τους [37]. Σε μια πρόσφατη εργασία, η εφαρμογή του EMF αναστέλλει προνεοπλαστικών βλαβών χημικά που προκαλείται στο ήπαρ αρουραίου μέσω της μείωσης του πολλαπλασιασμού των κυττάρων, χωρίς να μεταβάλλεται η διαδικασία της απόπτωσης [38]. Novel ευρήματα αποδεικνύουν ότι το μαγνητικό πεδίο σε συνδυασμό με Χ-Ray μεσολαβούν μία βελτίωση της επιβίωσης και την αναστολή όγκου σε ποντικούς ηπατώματος-εμφυτευμένα [39]. Σε πολυφαρμακευτική αντίσταση (MDR) οστεοσαρκώματος κυτταρική γραμμή, PEMFs αυξημένη ικανότητα να DNA και ανέστειλε την κυτταρική ανάπτυξη δεσμευτικός δοξορουβικίνη, υποδηλώνοντας ότι PEMFs μπορεί να είναι χρήσιμη ως τοπική θεραπεία για MDR οστεοσαρκώματος [40].

Στην παρούσα μελέτη έχουμε διερευνηθεί αν PEMFs διαμορφώνουν την έκφραση και την επίδραση της Α

3aRS σε διαφορετικά κύτταρα που αντιπροσωπεύεται από κύτταρα επινεφριδίων αρουραίου φαιοχρωμοκυτώματος (PC12) και κυτταρικές γραμμές γλοιοβλαστώματος ανθρώπου (U87MG) σε σύγκριση με νευρώνες του φλοιού του αρουραίου. Χρησιμοποιώντας αυτά τα κυτταρικά μοντέλα που υπογράμμισε την επίδραση του PEMFs στην Α

3AR διέγερση NF-kB και την ενεργοποίηση p53, τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων, κυτταροτοξικότητα και την απόπτωση. Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν την πιθανότητα ότι η αντικαρκινική δράση διαμεσολαβείται από το Α

3aRS θα μπορούσε να ενισχυθεί από μια μη επεμβατική ερέθισμα αντιπροσωπεύεται από PEMFs.

Αποτελέσματα

PEMFs up-ρυθμίζονται Α

2Α και Α

3AR πυκνότητα και Έκφραση

Ο πρώτος στόχος της παρούσας μελέτης ήταν να εξακριβωθεί εάν συγγένεια και την πυκνότητα του Α

1, Α

2Α, A

2Β και Ένα

3aRS επλήγησαν από PEMFs σε αρουραίους φλοιού νευρώνες, PC 12 και τα κύτταρα U87MG. Συγκεκριμένα, ο Πίνακας 1 αναφέρει η συγγένεια (Κ

D) και την πυκνότητα τιμές (Bmax) για ΑΕ στις μεμβράνες ή ανέπαφα κύτταρα που προέρχονται από αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, κύτταρα U87MG και χωρίς θεραπεία ή NGF-επεξεργασμένα κύτταρα PC12 στην απουσία και παρουσία PEMFs σε 1,5 mt. Συγγένεια τιμές των ΑΕ δεν επηρεάστηκαν από τη θεραπεία PEMF στα κύτταρα που εξετάστηκαν, ενώ A

2Α και Α

πυκνότητα 3AR αυξήθηκε σημαντικά.

Η θεραπεία PEMF της πρωτογενούς καλλιέργειας των νευρώνων αρουραίου σε 1,5 mT προκάλεσε μια άνω ρύθμιση του Α

2AAR αφορά πυκνότητα για τον έλεγχο των συνθηκών και στα δύο παρασκεύασμα, όπως μεμβράνες ή ακέραια κύτταρα (Πίνακας 1). Η έκθεση με PEMFs ανεπεξέργαστων ή NGF-επεξεργασμένα κύτταρα PC12 προκάλεσε μια πάνω ρύθμιση της πυκνότητας Α

2AAR με 2,20 ή 2,10 φορές της αύξησης έναντι ελέγχων σε παρασκεύασμα μεμβράνης, αντίστοιχα. Το A

2AAR πάνω ρύθμιση ήταν επίσης εμφανής στις μεμβράνες από κύτταρα U87MG όπου οι τιμές Bmax αυξήθηκε από 91 ± 9 (συνθήκη ελέγχου) σε 207 ± 19 (PEMFs θεραπεία) fmol /mg πρωτεΐνης. Παρόμοια αποτελέσματα σε

2AAR πάνω ρύθμιση ελήφθησαν επίσης εκτελεί τη πειράματα δέσμευσης με ακέραια κύτταρα (Πίνακας 1) κορεσμό.

Η

θεραπεία PEMF προκάλεσε μια άνω ρύθμιση του Α

3aRS από 2,11 ή 2,32 φορές επί αρουραίου νευρώνες του φλοιού και σε κύτταρα U87MG αφορά τον έλεγχο κατάστασης σε παρασκεύασμα μεμβράνης, αντίστοιχα (Πίνακας 1). Παρόμοια αποτελέσματα ελήφθησαν εκθέτοντας ανεπεξέργαστων ή ΝΟΡ-θεραπεία PC12 κύτταρα με PEMFs σε 1,5 mt. Ένα

αξίες 3AR Bmax αυξήθηκε από 94 ± 9 (συνθήκη ελέγχου) σε 215 ± 20 (θεραπεία PEMF) fmol /mg πρωτεΐνης στην μεμβράνη από μη επεξεργασμένα κύτταρα PC12. Κατά την προετοιμασία μεμβράνης από NGF κατεργασμένα κύτταρα PC12 πυκνότητα A

3AR αυξήθηκε από 102 ± 9 (κατάσταση ελέγχου) σε 222 ± 21 (θεραπεία PEMFs) fmol /mg πρωτεΐνης. Ομοίως, η Α

3AR πάνω ρύθμιση παρατηρήθηκαν επίσης εκτελεί τη πειράματα με απρόσβλητα κύτταρα (Πίνακας 1) σύνδεσης κορεσμού.

Το Σχήμα 1 δείχνει το mRNA σχετική έκφραση του Α

1, Α

2Α, A

2Β και Α

3aRS στον αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG εν απουσία και υπό την παρουσία PEMFs. Είναι ενδιαφέρον ότι A

2Α και

επιπέδων Α 3AR mRNA ήταν πάνω ρυθμισμένα μετά τη θεραπεία PEMF επιβεβαιώνοντας την αύξηση της πυκνότητας τους που βρέθηκαν σε πειράματα δέσμευσης κορεσμού (Πίνακας 1).

Σχετική έκφραση του mRNA του Α

1, το Α

2Α, A

2Β και Α

3aRS στον αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

A

2Α και Α

3AR Τόνωση και PEMFs διαμεσολαβείται από μια σημαντική διαφοροποίηση σε cAMP Παραγωγή

Ο Α

οι 2AARs συζευγμένο με διέγερση της αδενυλικής κυκλάσης μέσω Gs πρωτεΐνες οι οποίες διαμεσολαβεί μια αύξηση της παραγωγής cAMP. Σε αρουραίους φλοιώδεις νευρώνες, κύτταρα U87MG και χωρίς θεραπεία ή NGF-επεξεργασμένα κύτταρα PC12, CGS 21680 σε συγκέντρωση 100 ηΜ ήταν σε θέση να μεσολαβήσουν μία σημαντική αύξηση του σχηματισμού cAMP που ενισχύεται στα κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με PEMFs. Σε όλες τις πειραματικές συνθήκες που εξετάστηκαν, SCH 58261 σε συγκέντρωση 1 μΜ ήταν σε θέση να εμποδίσει εντελώς την επίδραση του CGS 21680. Το αποτέλεσμα της Α

3AR αγωνιστή Cl-ΙΒ-MECA (100 ηΜ) αξιολογήθηκε με την παρουσία του 1 μΜ φορσκολίνη και 0,5 mM Ro 20-1724. Αυτή η πειραματική συνθήκη επελέγη για τα χαμηλά βασικά επίπεδα (15-20 pmol cAMP ανά δοκιμασία) που εμποδίζουν την αξιολόγηση μιας άμεση ανασταλτική δράση. Cl-ΙΒ-MECA μεσολάβηση σημαντική μείωση της παραγωγής cAMP και το αποτέλεσμα αυτό ήταν σημαντικά ενισχύθηκε σε κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με PEMFs (Εικ. 2). Επιπλέον, σε όλα τα κύτταρα που εξετάστηκαν, η παρουσία του MRS 1523 (1 μΜ) ανέστειλε την επίδραση της Cl-ΙΒ-MECA επιβεβαιώνοντας την εμπλοκή του Α

3aRS στη ρύθμιση της παραγωγής cAMP.

Επίδραση της ένας γνωστός A

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 ηΜ? SCH 58261, 1 μΜ) ή α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή (Cl-ΙΒ-MECA, 100 ηΜ? MRS 1523, 1 μΜ) στον αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs στην παραγωγή cAMP. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

A

2Α και Α

3AR διέγερση Mediated μια σημαντική αναστολή του NF-kB ενεργοποίηση στην Παρουσία PEMFs

Η επίδραση της Α

2Α ή A

διέγερση 3AR στην ενεργοποίηση p65 υπομονάδα ΝΡ-κΒ διερευνήθηκε σε μη επεξεργασμένα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG σέβονται αρουραίου φλοιώδεις νευρώνες που αποκαλύπτουν την ικανότητα του Α

2Α (CGS 21680) ή Α

3AR (Cl-IB-MECA) αγωνιστές να μειώσει σημαντικά την ενεργοποίηση του ΝΡ-κΒ στα κύτταρα όγκου μετά από 24 ώρες θεραπείας (Εικ. 3). έκθεσης PEMF ήταν σε θέση να ενισχύσει την Α

2Α ή Α

3AR αγωνιστή που προκαλείται από τη μείωση της ενεργοποίησης του NF-kB. Η διέγερση A

3AR μεσολαβεί μια πιο εμφανής αναστολή της NF-kB από Α

ενεργοποίηση 2Α τόσο με την παρουσία ή απουσία PEMFs. Είναι ενδιαφέρον ότι η ταυτόχρονη θεραπεία με Α

αγωνιστή 3AR και PEMFs μεσολαβεί μια σημαντική αναστολή των επιπέδων NF-kB αναφορικά με την Α ενεργοποίησης

3AR μόνο. Η επίδραση αυτών των αγωνιστών έχει αποκλειστεί από τη χρήση γνωστών A

2Α ή Α

ανταγωνιστές 3AR όπως SCH 58261 και MRS 1523, αντίστοιχα (Εικ. 3).

Επίδραση ενός καλά ονομαστές A

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 nM? SCH 58261, 1 μΜ) ή Α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή (Cl-IB-MECA, 100 nM? MRS 1523, 1 μΜ) σε αρουραίους φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs στην ενεργοποίηση του NF-kB η οποία αξιολογήθηκε με ανίχνευση φωσφορυλιωμένων πρωτεϊνών ρ65 σε πυρηνικά εκχυλίσματα. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

Ενεργοποίηση του Α

3AR στην Παρουσία PEMFs Αυξημένα επίπεδα p53 οδηγώντας σε αναστολή του όγκου κυτταρικού πολλαπλασιασμού

Η Ένα

2AAR αγωνιστής CGS 21680 δεν ήταν σε θέση να ρυθμίζει τα επίπεδα πρωτεΐνης ρ53 ούτε με την απουσία ούτε επί τη παρουσία PEMFs στους διαφορετικούς τύπους κυττάρων που εξετάστηκαν. Αντίθετα, η Α

3AR αγωνιστή Cl-ΙΒ-MECA (100 ηΜ) με τη μεσολάβηση σημαντική αύξηση της έκφρασης p53 στον όγκο κυτταρικές γραμμές εξετάστηκαν χωρίς να επηρεάζει τα επίπεδα της ρ53 των ελέγχου αρουραίου νευρώνες του φλοιού (Εικ. 4). Αν και PEMF έκθεση μόνο δεν ήταν σε θέση να τροποποιήσει την έκφραση ρ53, η ταυτόχρονη θεραπεία των καρκινικών κυττάρων με PEMFs και Cl-ΙΒ-MECA οδήγησε σε περαιτέρω σημαντική αύξηση των επιπέδων της πρωτεΐνης ρ53 σε σύγκριση με Cl-ΙΒ-MECA μόνο (ρ & lt? 0,05, Εικόνα 4Β-D)

Επίδραση ενός γνωστού A

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 ηΜ?.. SCH 58261, 1 μΜ) ή Α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή ( Cl-ΙΒ-MECA, 100 ηΜ? MRS 1523, 1 μΜ) σε αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs στα επίπεδα ρ53. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

Για να αξιολογηθεί εάν η διαμόρφωση του NF-kB και ρ53 που σχετίζονται με την ρύθμιση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων του όγκου, μία δοκιμασία ενσωμάτωσης θυμιδίνης διεξήχθη υπό την παρουσία ή σε περίπτωση απουσίας του PEMFs. Σε πειραματικές συνθήκες μας, οι βασικά επίπεδα της [

3Η] -θυμιδίνης σε νευρώνες του φλοιού αρουραίου, ακατέργαστα ή NGF-θεραπεία PC12 και U87MG κύτταρα ήταν 447 ± 42, 8228 ± 782, 856 ± 78, 9535 ± 844 cpm ανά δείγμα , αντίστοιχα. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι ούτε CGS 21680 ούτε PEMFs (μόνος του ή σε συνδυασμό) ήταν σε θέση να ρυθμίζει σημαντικά τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων (Σχ. 5). Η διέγερση του Α

3aRS μέσω Cl-ΙΒ-MECA (100 ηΜ) με τη μεσολάβηση μία σημαντική αναστολή της ενσωμάτωσης θυμιδίνης κατά 39%, 41% και 32% σε μη επεξεργασμένα, NGF κατεργασμένα PC12 κύτταρα και κύτταρα U87MG, αντίστοιχα. Αξίζει να σημειωθεί ότι, η έκθεση PEMF ενισχύεται κατά στατιστικώς σημαντικό τρόπο (ρ & lt? 0,05) την επίδραση του Cl-ΙΒ-MECA σε πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων (Σχήμα 5Β-D.). Επιπλέον, ένα

3AR διέγερση, απουσία ή παρουσία του PEMFs, δεν επηρέασε την ενσωμάτωση θυμιδίνης σε νευρώνες του φλοιού του αρουραίου, γεγονός που υποδηλώνει ότι η παρατηρούμενη επίδραση ήταν εκλεκτική για κύτταρα όγκου (Εικ. 5). Ο άμεσος ρόλος του Α

3aRS στη διαμεσολάβηση της επίδρασης του Cl-ΙΒ-MECA καταδείχθηκε με τη χρήση ενός επιλεκτικού Α

ανταγωνιστής 3aR, MRS 1523, που κατήργησε πλήρως την επαγόμενη από συναγωνιστές ρύθμιση της ρ53 και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων (Σχ .. 4 και 5)

Επίδραση της γνωστής Α

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 nM? SCH 58261, 1 μΜ) ή Α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή (Cl -IB-MECA, 100 ηΜ? MRS 1523, 1 μΜ) σε αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs επί ενσωμάτωσης θυμιδίνης. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

PEMF έκθεσης Ενισχυμένη η Cl-IB-MECA-κυτταρικό θάνατο και απόπτωση σε καρκινικά κύτταρα

Το Σχήμα 6 δείχνει την επίδραση του Α

2Α ή A

3AR διέγερση επί της γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH) απελευθέρωσης (% του ελέγχου σε βασική κατάσταση) από αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NFG-επεξεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή την παρουσία έκθεσης PEMF (1,5 mT). Σε όλες τις εξετάστηκαν κύτταρα, η παρουσία του CGS 21680 (100 ηΜ) δεν ήταν σε θέση να τροποποιήσει την απελευθέρωση LDH ούτε απουσία ούτε επί τη παρουσία PEMFs. Σε αρουραίους νευρώνες του φλοιού και καρκινικά κύτταρα, η έκθεση PEMF στην βασική κατάσταση δεν ήταν σε θέση να ρυθμίζουν την απελευθέρωση LDH. Το A

3AR αγωνιστή Cl-ΙΒ-MECA (100 ηΜ) με τη μεσολάβηση μία κυτταροτοξική επίδραση σε όλα τα κύτταρα του όγκου που εξετάστηκαν όπως αποδεικνύεται από την σημαντική αύξηση απελευθέρωσης LDH. Είναι ενδιαφέρον ότι η ταυτόχρονη παρουσία του PEMFs οδήγησε σε περαιτέρω αύξηση της παραγωγής LDH διαμεσολαβείται από Cl-ΙΒ-MECA φθάνοντας τιμές του 192%, 226% και 243% σε σχέση με το βασικό όρο σε χωρίς θεραπεία, NGF κατεργασμένα PC12 και κυττάρων U87MG, αντίστοιχα (Εικ. 6Β-D). Για να αξιολογηθεί εάν η συνεργική δράση του Cl-ΙΒ-MECA και PEMFs εμπλέκονται αποπτωτικών σημάτων, αξιολογήθηκαν τα επίπεδα ενεργού κασπάσης-3. Μεταξύ των διαφόρων συνθηκών θεραπείας, μόνον η Α

3AR διέγερση ήταν σε θέση να αυξήσει σημαντικά τα επίπεδα της ενεργού κασπάσης-3 σε όλα τα κύτταρα του όγκου, αλλά όχι σε έλεγχο αρουραίου νευρώνες του φλοιού (Εικ. 7). Επιπλέον, η έκθεση PEMF ενίσχυσε την προ-αποπτωτική δράση του Cl-ΙΒ-MECA σε καρκινικά κύτταρα επιτύχει αύξηση του 1,97, 2,64 και 3,24 φορές σε σχέση με τη βασική κατάσταση σε ακατέργαστα ή NGF κατεργασμένα PC12 και U87MG κύτταρα, αντίστοιχα (Σχ. 7β- ΡΕ). Η χρήση του γνωστού A

ανταγωνιστή 3AR, MRS 1523, επανήλθε το αποτέλεσμα του αγωνιστή, γεγονός που υποδηλώνει μια συγκεκριμένη εμπλοκή αυτού του υποτύπου υποδοχέα.

Επίδραση της γνωστής A

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 ηΜ? SCH 58261, 1 μΜ) ή Α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή (Cl-ΙΒ-MECA, 100 ηΜ? MRS 1523, 1 μΜ) σε αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF κατεργασμένα PC12 κύτταρα και κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs στα επίπεδα γαλακτικής αφυδρογονάσης (LDH). Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM

Η

Επίδραση ενός γνωστού A

αγωνιστή 2AAR και ανταγωνιστή (CGS 21680, 100 ηΜ? SCH 58261, 1 μΜ). Ή Α

αγωνιστή 3AR και ανταγωνιστή (Cl-ΙΒ-MECA, 100 ηΜ? MRS 1523, 1 μΜ) σε αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG με την απουσία ή με την παρουσία PEMFs για την ενεργό κασπάση 3 επίπεδα. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος (n = 6) ± SEM.

Η

Συζήτηση

Πολυάριθμες μελέτες έχουν καταδείξει τη συμμετοχή του Α

3aRS στη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου, στην προ- και αντι-αποπτωτικά αποτελέσματα, στη μείωση της βιωσιμότητας των κυττάρων και στην αναστολή της ανάπτυξης του καρκίνου [4], [15] – [18]. Επιπλέον, προκλινικές μελέτες φάσης Ι και έδειξαν ότι ένα

αγωνιστές 3AR είναι ασφαλής και καλά ανεκτή σε ανθρώπους και ως εκ τούτου μπορεί να θεωρούνται ως πιθανοί θεραπευτικοί παράγοντες για ορισμένες ασθένειες του καρκίνου [5]. Όπως αναφέρεται σε διάφορα έργα Μερικοί ερευνητές συνεργάτης έκθεσης σε ΗΜΠ με την καρκινογένεση [30], [31], ενώ άλλες μελέτες έχουν δείξει ότι τα ηλεκτρομαγνητικά πεδία δεν αυξάνουν τον κίνδυνο διαφόρων τύπων καρκίνου, και ότι η θεραπεία με συγκεκριμένες συχνότητες είναι καλά ανεκτή και μπορεί να έχει βιολογική αποτελεσματικότητα σε ασθενείς με προχωρημένους όγκους [32] – [34]. Προς το παρόν, δεν υπάρχουν δεδομένα που αναφέρονται στη βιβλιογραφία για την επίδραση των ΑΕ και έκθεσης PEMF σε

in vitro

ή

in vivo

μοντέλα καρκίνου, ακόμη και αν μερικά αποτελέσματα κατέδειξαν την ενίσχυση της αντι -inflammatory επιπτώσεις της ΑΕ από την παρουσία PEMFs [22] – [25]

στην παρούσα εργασία έχουμε συνδυάσει το ρόλο του

3aRS ως στόχο για τον καρκίνο με την αυξανόμενη παρατήρηση ότι PEMFs μπορεί. έχουν ευεργετικές επιδράσεις στην διαμόρφωση του φυσιολογικές διαδικασίες που σχετίζονται με σηματοδότηση των κυττάρων του όγκου. Πιο συγκεκριμένα οι τρέχουσες πειράματα αποδεικνύουν ότι PEMFs διαμορφώνουν την έκφραση και την επίδραση της Α

3aRS σε διαφορετικά καλλιεργημένα νευρωνικά κύτταρα του όγκου που αντιπροσωπεύεται από PC12 και U87MG κύτταρα σε σύγκριση με αρουραίου νευρώνες του φλοιού. Είναι καλά αναφερθεί ότι οι κυτταρικές γραμμές είναι χρήσιμες σε φαρμακολογικές μελέτες επειδή προσφέρουν την ευκαιρία να μελετήσει μεταγωγή σήματος και ρύθμιση των υποδοχέων υπό περισσότερο ελεγχόμενες συνθήκες από ό, τι σε φυσικά κύτταρα ή ιστούς [41]. Επιπλέον, έχουμε κατεργασία κύτταρα PC 12 με τον NGF να αξιολογήσει τις λειτουργικές αποκρίσεις των κυττάρων όγκου διαφοροποιούνται σε νευρώνες σαν κύτταρα. Χρησιμοποιώντας αυτά τα κυτταρικά μοντέλα που επισημάναμε το συνδυασμένο αποτέλεσμα της έκθεσης PEMF και Α

διέγερση 3AR σε διαφορετικές φυσιολογικές αποκρίσεις όπως NF-kB και την ενεργοποίηση της ρ53, κυτταρικό πολλαπλασιασμό, κυτταροτοξικότητα και απόπτωση.

Πρώτα απ ‘όλα, PEMF έκθεση αύξησε σημαντικά την Α

2Α και Α

3AR mRNA και πυκνότητα σε κύτταρα όγκου όπως επίσης και σε νευρώνες του φλοιού του αρουραίου. Κορεσμός πειράματα Α

2Α και Α

3aRS εκτελείται μετά την έκθεση PEMF σε αρουραίο φλοιώδεις νευρώνες, σε μη επεξεργασμένα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και σε κύτταρα U87MG δέσμευσης (μεμβράνες ή ανέπαφα κύτταρα) αποκάλυψε μια σημαντική αύξηση στις τιμές Bmax σε σύγκριση με μη εκτεθέντα κύτταρα, προτείνοντας την διαμόρφωση της θεραπείας PEMF με την πυκνότητα υποδοχέα. Αυτά τα δεδομένα είναι καλά συσχετίζονται με προηγούμενα αποτελέσματα μας δείχνουν ότι PEMFs είναι σε θέση να ρυθμίζουν A

2Α και Α

πυκνότητα 3AR και λειτουργικότητα σε ανθρώπινα ουδετερόφιλα, τα ανθρώπινα και βόεια αρθρικά κύτταρα και χονδροκύτταρα βοοειδών [22] – [25 ]. Επιπλέον, τα αποτελέσματα αυτά συνδέονται στενά με τα πρόσφατα στοιχεία που δείχνουν την αύξηση του Α

2AARs σε αρουραίους νευρώνες του φλοιού μετά από PEMF έκθεση [42]. Προς το παρόν, οι μηχανισμοί δράσης PEMF δεν είναι ακόμα ικανοποιητική ορίζονται ακόμη και αν σε μοριακό επίπεδο θα μπορούσε να περιλαμβάνει τροποποιήσεις της ανακύκλωσης του υποδοχέα στην κυτταρική μεμβράνη καθώς επίσης και μια ρυθμιστική επίδραση σε ένα μετεγγραφικό επίπεδο, όπως προτείνεται από την αύξηση του Α

2Α και Α

3AR mRNA μετά την έκθεση PEMF.

Για να διερευνηθεί αν η προς τα πάνω ρύθμιση του Α

2Α και Α

3aRS σχετίστηκε με υψηλή λειτουργικότητα αυτών των υποδοχέων, διαφορετικές κυτταρικές αποκρίσεις έχουν μελετηθεί. Πρώτα απ ‘όλα έχουμε αξιολόγησε την επίδραση γνωστών αγωνιστών αδενοσίνης, όπως CGS 21680 και Cl-IB-MECA σε συσσώρευση cAMP. Στην κυτταρικές σειρές διερευνήθηκε η διέγερση του CGS 21680 για Α

2AARs αυξήθηκε μετά την αγωγή με PEMFs. Ομοίως, η ανασταλτική δράση του Cl-ΙΒ-MECA είχε ενισχυθεί από έκθεση PEMF σε φλοιώδεις νευρώνες πρωτογενούς αρουραίου, ακατέργαστα ή NGF-κατεργασμένα κύτταρα PC12 και τα κύτταρα U87MG που υποδηλώνει ότι η αύξηση των υποδοχέων σχετίζεται με αύξηση της λειτουργικότητας του υποδοχέα. Λόγω της στενής σύνδεσης μεταξύ του NF-kB μονοπάτια μεταγωγής σήματος και ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών διαδικασιών, συμπεριλαμβανομένων πολλαπλασιασμού, επιβίωσης και απόπτωσης αναλύσαμε τον ρόλο του Α

2Α και Α

3aRS εν απουσία και υπό την παρουσία PEMFs . Βρήκαμε ότι, σε καρκινικά κύτταρα, η έκθεση PEMF ήταν σε θέση να ενισχύσει τη μείωση της NF-kB προκαλείται από ένα

2Α και Α

3AR διέγερση. Δεδομένου ότι η στιχομυθία μεταξύ του NF-kB και p53 oncosuppressor πρωτεΐνη αναγνωρίζεται να έχει έναν κρίσιμο ρόλο στην ανάπτυξη του καρκίνου [43], έχουμε αξιολογηθεί η επίδραση των Α

2Α και Α

ενεργοποίηση 3AR και PEMFs έκθεση για p53 επίπεδα πρωτεΐνης. Σε κύτταρα όγκου, αλλά όχι σε αρουραίους φλοιώδεις νευρώνες, ο Α

αγωνιστή 3AR Cl-ΙΒ-MECA μεσολάβηση αύξηση των επιπέδων ρ53, ένα αποτέλεσμα που ενισχύεται από την παρουσία του PEMFs. Τα αποτελέσματα αυτά είναι σε συμφωνία με εκείνα που βρέθηκαν σε μια πρόσφατη εργασία, που δείχνουν ότι ένα Α

3AR αγωνιστή αναστέλλεται καρκίνου του προστάτη κύτταρα πολλαπλασιασμού και προκαλείται από τη σύλληψη G1 του κυτταρικού κύκλου μέσω της επαγωγής ρ53 [44]. Να αξιολογήσει εάν η ρύθμιση αυτών των θεμελιωδών παραγόντων που σχετιζόταν με τη διαμόρφωση του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων, μια δοκιμασία ενσωμάτωσης θυμιδίνης διεξήχθη. Μία ανασταλτική δράση του Cl-ΙΒ-MECA στον πολλαπλασιασμό των κυττάρων βρέθηκε σε καρκινικά κύτταρα που επιβεβαιώνουν την εμπλοκή ενός

ενεργοποίηση 3AR στο μπλοκάρισμα της ανάπτυξης του όγκου και ήταν πολύ πιο εμφανής με την παρουσία της έκθεσης PEMF. Αυτή η αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση ενισχύεται από PEMFs στα κύτταρα όγκου που εξετάστηκαν. Η θεραπεία PEMF δεν τροποποίησε τον πολλαπλασιασμό σε νευρώνες του φλοιού σε απουσία ή παρουσία του AR διέγερση, ακόμη και αν η χαμηλή πολλαπλασιαστική δείκτης θα μπορούσε να αντιπροσωπεύει ένα μειονέκτημα. Επιπλέον, τα αποτελέσματα αυτά καταργήθηκαν από την παρουσία του Α

3AR ανταγωνιστή προτείνοντας την άμεση συμμετοχή του συγκεκριμένου υποτύπου AR. Σήμερα, η αντι-πολλαπλασιαστική δράση του Cl-ΙΒ-MECA έχει ερευνηθεί εκτενώς με αντικρουόμενα αποτελέσματα οφείλονται σε ιστούς ή κύτταρα που αναλύθηκαν. Για παράδειγμα, έχει αποδειχθεί ότι τα παράγωγα Cl-ΙΒ-MECA μεσολαβούν μία μείωση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων μέσω διακοπή του κυτταρικού κύκλου σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα που υποδηλώνει τον πρωταρχικό ρόλο της Α

3aRS την αναστολή του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων και στη μετανάστευση των κυττάρων [45]. Βρήκαμε επίσης ότι η Α

3AR αγωνιστή Cl-ΙΒ-MECA μεσολαβεί μιά κυτταροτοξική δράση στα διάφορα κύτταρα όγκου που εξετάστηκαν όπως αποδεικνύεται από την σημαντική αύξηση απελευθέρωσης LDH. Η επίδραση του Α

3AR διέγερση για την απελευθέρωση της LDH είχε ενισχυθεί από την έκθεση PEMF σε θεραπεία ή NGF επεξεργασμένα κύτταρα PC12 και στα κύτταρα U87MG. Αξιοσημείωτα, κανένας κυτταροτοξική δράση του Cl-ΙΒ-MECA βρέθηκε σε αρουραίου φλοιώδεις νευρώνες, υποδεικνύοντας ότι αυτό το αποτέλεσμα θα μπορούσε να συνδεθεί με τα κύτταρα του όγκου. Τα αποτελέσματα αυτά είναι σε συμφωνία με αυτά που έχουν αναφερθεί προηγουμένως αποδεικνύουν ότι A

αγωνιστές 3AR ενισχύουν το κυτταροτοξικό αποτέλεσμα των χημειοθεραπευτικών παραγόντων σε κύτταρα καρκινώματος του κόλου [46]. Προκειμένου να αξιολογηθεί αν η παρατηρούμενη επίδραση του Α

ενεργοποίηση 3AR επί των κυττάρων του όγκου σηματοδότηση και τον θάνατο που εμπλέκονται επίσης αποπτωτικά γεγονότα, επίπεδα ενεργού κασπάσης-3 διερευνήθηκαν μετά την αγωγή με αγωνιστές AR με την παρουσία ή απουσία της έκθεσης PEMF. Ούτε CGS 21680 ούτε Cl-ΙΒ-MECA, μόνο του ή σε συνδυασμό με PEMFs, ήταν σε θέση να επηρεάσει δραστική κασπάση-3 επίπεδα σε αρουραίους νευρώνες του φλοιού. Είναι ενδιαφέρον ότι, σε κύτταρα όγκου, Cl-ΙΒ-MECA, αλλά όχι CGS 21680 ήταν σε θέση να αυξήσει κασπάσης-3 επίπεδα, ένα αποτέλεσμα που ενισχύεται από την έκθεση PEMF, υποδηλώνοντας την συνεργική ρόλο του Α

διέγερση 3AR και PEMFs στην επαγωγή της απόπτωσης. Αυτά τα αποτελέσματα είναι σύμφωνα με αυτά που αναφέρθηκαν πρόσφατα δείχνοντας ότι η Α

3AR αγωνιστή ΙΒ-MECA επαγόμενη απόπτωση σε κυτταρικές γραμμές καρκίνου προστάτη αρουραίου και στο μεταστατικό καρκίνο του προστάτη κυτταρική σειρά ανθρώπινου ανδρογόνου ανεξάρτητη [18]. Όλα αυτά τα στοιχεία επιβεβαιώνουν προηγούμενες εργασίες όπου σε διαφορετικούς όγκους, έχει βρεθεί μια άμεση συμμετοχή του Α

έκφραση 3AR και λειτουργικότητας [14], [47].

Παρά την αυξανόμενη ποσότητα των πειραματικών δεδομένων για PEMFs, οι αμφιλεγόμενες ενέργειες έχουν αναφερθεί κατά πάσα πιθανότητα λόγω των διαφόρων συστημάτων και συσκευών που χρησιμοποιούνται σε

in vivo

ή

in vitro

πειράματα. Ειδικότερα, οι διαφορετικές φυσικές μεταβλητές όπως η συχνότητα, η ένταση και η κυματομορφή θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν σε εμπειρική βάση. Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήσαμε ένα καλά χαρακτηρισμένο σύστημα έκθεσης PEMF, με βάση την ορθολογική οδηγείται μεθοδολογία, η οποία ήταν σε θέση να ρυθμίσουν σε διάφορους τύπους κυττάρων μη-όγκου, η έκφραση και η λειτουργικότητα των ΑΕ όπως αναφέρθηκε προηγουμένως [22] – [25], [42], [48].

In vitro

πειράματα σε διαφορετικές κυτταρικές γραμμές όγκου έχουν δείξει ότι PEMF εφαρμογή σε συνδυασμό με αντικαρκινικά φάρμακα θα είναι πολύ αποτελεσματική ως μη επεμβατική εφαρμογές για θεραπεία όγκου [49]. Σε μια

in vivo

ζωικό μοντέλο η εφαρμογή των χαμηλών συχνοτήτων EMF αναστέλλει προνεοπλαστικών βλαβών χημικά που προκαλείται στο ήπαρ αρουραίου μέσω της μείωσης του πολλαπλασιασμού των κυττάρων [50]. Πρόσφατα, σε κλινικές μελέτες με διάφορους τύπους καρκίνων, χρησιμοποιώντας μια μη επεμβατική μέθοδος ανάδρασης για τον προσδιορισμό των συχνοτήτων όγκου-ειδικά και να ελεγχθεί η σκοπιμότητα της χορήγησης τέτοιων συχνοτήτων σε ασθενείς με προχωρημένο καρκίνο διεξήχθησαν και μπορεί να οδηγήσει στην ανακάλυψη νέων οδών έλεγχο την ανάπτυξη του καρκίνου [34].

Προηγούμενο

in vitro

αναλύσεις έχουν αναφέρει ότι ο Α

αγωνιστές 3AR ασκούν διαφορετική επίδραση σε φυσιολογικά και καρκινικά κύτταρα. Σε φυσιολογικά κύτταρα, οι αγωνιστές επάγουν την παραγωγή των αυξητικών παραγόντων και σε κύτταρα όγκου, οι αγωνιστές επάγουν απόπτωση και την ανάπτυξη του όγκου αναστολή μέσω απορρύθμιση του NF-kB και τα μονοπάτια σηματοδότησης Wnt [5] – [7], [11], [ ,,,0],12]. Τα αποτελέσματα μας είναι σε συμφωνία με αυτά τα δεδομένα και να επιβεβαιώσει το διπλό ρόλο του Α

3aRS αυξάνοντας το ερώτημα σχετικά με το μηχανισμό αυτής της διαφορικό αποτέλεσμα. Μια πιθανή εξήγηση θα μπορούσε να σχετίζεται με την διαφορετική έκφραση του κρίσιμος ρυθμιστικό παράγοντα σε κύτταρα όγκου. Είναι καλά γνωστό ότι η NF-kB εκφράζεται έντονα σε κύτταρα όγκου όπου συστατική ενεργοποίηση της φαίνεται να επηρεάζουν την επιβίωση των κυττάρων του καρκίνου, με την προώθηση αντι-αποπτωτικών γονιδίων έκφραση [51], [52]. Στη μελέτη μας, η χαμηλή συγκέντρωση Cl-ΙΒ-MECA ήταν πιθανότερο επαρκή για την αναστολή του NF-kB σε κύτταρα όγκου χωρίς να επηρεάζουν αυτή την οδό σε κύτταρα ελέγχου. Αναλόγως, η επίδραση του Α

3AR διέγερση επί απορυθμισμένη πρωτεΐνη ρ53 σε κύτταρα όγκου θα μπορούσε να είναι επί τη βάσει των διαφορετικών απαντήσεων που παρατηρούνται σε σχέση με τα κύτταρα ελέγχου. έκθεσης PEMF ενισχύεται αυτά τα αποτελέσματα σε καρκινικά κύτταρα, χωρίς να αυξηθεί η συγκέντρωση του Α

αγωνιστή 3AR. Από φαρμακολογική άποψη, ένα ενδεχόμενο πλεονέκτημα του συνδυασμού του αγωνιστή χαμηλής δόσης και μιας τοπικής εξωτερικής PEMF θεραπεία θα μπορούσε να είναι η μείωση του κινδύνου ανεπιθύμητων ή συστηματικές παρενέργειες που αυξάνουν δραματικά όταν τα φάρμακα χορηγούνται σε υψηλή δόση.

Αυτά τα αποτελέσματα υποδεικνύουν την πιθανότητα ότι η αντικαρκινική δράση που προκαλείται από Α

3aRS μπορούσε να ενισχυθεί από μια μη επεμβατική ερέθισμα που αντιπροσωπεύεται από PEMFs, που επιτρέπουν τη χρήση χαμηλών συγκεντρώσεων του αγωνιστή περιορίζοντας πιθανές παρενέργειες του . [3]dioxol-5-yl-2-[5-(2,6-dioxo-1,3-dipropyl-2,3,6,7-tetrahydro-1H-purin-8-yl)-1-methy-1H-pyrazol-3-yl-oxy]-acetamide,