Αφηρημένο

Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η πιο θανατηφόρα όλων των γυναικολογικών καρκίνων. Πρόσφατα στοιχεία δείχνουν τη σύνδεση μεταξύ ενζυματική δραστηριότητα αλλάζοντας μόνο πολυμορφισμών νουκλεοτιδίου (SNP) με την ευαισθησία του καρκίνου στον άνθρωπο. Επιδιώξαμε να αξιολογήσει τη σύνδεση των SNPs σε βασικούς οξειδωτικό και αντιοξειδωτικά ένζυμα με αυξημένο κίνδυνο και την επιβίωση σε επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών. Τα άτομα (n = 143) που προσλαμβάνονται χωρίστηκαν σε ελέγχους, (n = 94): υγιείς εθελοντές, (n = 18), υψηλού κινδύνου

BRCA1 /2

αρνητικό (n = 53), υψηλού κινδύνου

BRCA1 /2

θετικό (n = 23) και των ωοθηκών περιπτώσεων καρκίνου (n = 49). DNA υποβλήθηκε σε ανάλυση γονότυπου TaqMan SNP για επιλεγμένες οξειδωτικό και αντιοξειδωτικά ένζυμα. Από τα επτά επιλεγμένα SNP που μελετήθηκαν, καμία συσχέτιση με τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών (Pearson Chi-square) βρέθηκε. Ωστόσο, η καταλάση SNP αναγνωρίστηκε ως προγνωστικός δείκτης επιβίωσης του καρκίνου των ωοθηκών από το μοντέλο παλινδρόμησης Cox. Η παρουσία αυτού του SNP σχετίστηκε με υψηλότερη πιθανότητα θανάτου (λόγος κινδύνου (HR) 3,68 (διάστημα εμπιστοσύνης 95% (CI): 1,149 – 11,836)) για ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Kaplan-Meier ανάλυση επιβίωσης έδειξαν σημαντική μέση συνολική επιβίωση διαφορά (108 έναντι 60 μηνών, p & lt? 0,05) για εκείνους που δεν έχουν την καταλάση SNP σε σύγκριση με εκείνα με το SNP. Επιπλέον, ηλικία κατά τη διάγνωση είναι μεγαλύτερη από τη μέση βρέθηκε να είναι ένας σημαντικός προγνωστικός θανάτου (HR 2,78 (95% CI: 1,022 έως 7,578)). Αυτή η μελέτη υποδεικνύει μια ισχυρή συσχέτιση με την καταλάση SNP και την επιβίωση των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών, και ως εκ τούτου μπορεί να χρησιμεύσει ως μάντης

Παράθεση:. Belotte J, Fletcher NM, Saed MG, Abusamaan MS, Dyson G, Diamond MP , et al. (2015) Μια πολυμορφισμού ενός νουκλεοτιδίου στην καταλάση συνδέεται στενά με καρκίνο των ωοθηκών επιβίωσης. PLoS ONE 10 (8): e0135739. doi: 10.1371 /journal.pone.0135739

Επιμέλεια: Alvaro Galli, CNR, Ιταλία

Ελήφθη: May 18, 2015? Αποδεκτές: 25 Ιουλίου του 2015? Δημοσιεύθηκε: 24 Αυγ του 2015

Copyright: © 2015 Belotte et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα: Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του Υποστηρίζοντας αρχεία πληροφοριών του χαρτιού και

χρηματοδότηση:.. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν αντικρουόμενα συμφέροντα

Εισαγωγή

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών (EOC) αντιπροσωπεύει το 85 έως 90% όλων των καρκίνων των ωοθηκών, των σαλπίγγων και των πρωτογενών περιτοναίου? και εμφανίζει διάφορα ιστολογίες όπως ορώδες, βλεννώδες ή ενδομητριοειδές [1]. Ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η πιο θανατηφόρα όλων των γυναικολογικών καρκίνων, με εκτιμώμενη 22.980 νέες περιπτώσεις και 14.270 θάνατοι αναμένεται το 2014 μόνο στις ΗΠΑ [1,2]. Τυπικά, η θεραπεία του καρκίνου των ωοθηκών εκτελείται είτε με κυτταρομειωτική χειρουργική (CRS) ακολουθούμενο από χημειοθεραπεία συνδυασμού πλατίνας /ταξάνιο ή εισαγωγική χημειοθεραπεία με μεσοδιάστημα CRS [3,4]. Γενικά, ένα 50-80% πλήρης κλινική ανταπόκριση μπορεί να επιτευχθεί σε ασθενείς με προχωρημένη νόσο. Δυστυχώς, οι περισσότεροι ασθενείς με θεραπεία θα υποτροπή μέσα σε 18 μήνες με χημειοθεραπεία νόσο [5]. Ενώ οι πιθανότητες μακροχρόνιας επιβίωσης των ασθενών αυξήθηκε σημαντικά όταν ο καρκίνος ανιχνεύεται σε πρώιμο στάδιο, μέχρι σήμερα, δεν υπάρχει καμία αξιόπιστη μέθοδος διαθέσιμη για την έγκαιρη ανίχνευση της ασθένειας αυτής [5].

Οι επιδημιολογικές μελέτες έχουν καθορίζεται σαφώς το ρόλο του οικογενειακού ιστορικού ως σημαντικό παράγοντα κινδύνου τόσο για καρκίνους μαστού και ωοθήκης [6]. Μεταλλάξεις σε

BRCA

χρησιμοποιούνται σήμερα για την αξιολόγηση του κινδύνου για καρκίνο του μαστού και καρκίνο των ωοθηκών, ωστόσο, η μέθοδος αυτή δεν είναι ιδανική επειδή οι μεταλλάξεις είναι τόσο σπάνιες (1 στους 500 άτομα), που οδηγεί σε μια μικρή συνολική επίπτωση στη θνησιμότητα ποσοστό [7]. Γονιδιωματικής διαφοροποιήσεις μεταξύ των ατόμων έχουν χρησιμοποιείται όλο και περισσότερο στην άσκηση της ιατρικής [8-12]. Μια ενιαία νουκλεοτιδίου πολυμορφισμός (SNP) παρουσιάζεται εξαιτίας μεταλλάξεων σημείου που διατηρούνται επιλεκτικά σε πληθυσμούς και διανέμονται σε όλο το ανθρώπινο γονιδίωμα με εκτιμώμενη συνολική συχνότητα τουλάχιστον ένας σε κάθε 1000 ζεύγη βάσης [13]. Μη συνώνυμες υποκατάστατο SNPs κωδικοποιημένα αμινοξέα σε πρωτεΐνες, και είναι πιο πιθανό να μεταβάλλει την δομή, τη λειτουργία, και την αλληλεπίδραση της πρωτεΐνης [14]. Πρόσφατα στοιχεία δείχνουν τη σύνδεση μεταξύ ενζυματική δραστηριότητα αλλάζοντας SNPs σε οξειδωτική γονίδια επιδιόρθωσης του DNA και αντιοξειδωτικές γονίδια με ανθρώπινη ευαισθησία του καρκίνου [15]. Επιπλέον, ένα προ-οξειδωτικό κατάσταση έχει ενοχοποιηθεί στην παθογένεση πολλών κακοηθειών, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου των ωοθηκών [16,17]. Η τρέχουσα μελέτη βασίζεται στο γεγονός ότι ορισμένες SNPs που υπάρχουν στο πλήκτρο οξειδωτικών και αντιοξειδωτικών ενζύμων έχει ως αποτέλεσμα αλλαγμένη ενζυματική δραστηριότητα, καθώς επίσης και προηγουμένως δημοσιευθείσα εργασία μας οριοθετούν το ρόλο του οξειδωτικού στρες στον καρκίνο των ωοθηκών. Ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν να διαπιστωθεί αν συγκεκριμένες SNP σε βασικούς οξειδωτικό και αντιοξειδωτικά ένζυμα συνδέονται με τον αυξημένο κίνδυνο, καθώς και τη συνολική επιβίωση των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών.

Υλικά και Μέθοδοι

Σχεδιασμός της μελέτης

Πραγματοποιήσαμε μια μελέτη ασθενών-μαρτύρων σύγκριση θηλυκά άτομα με και χωρίς EOC και καθοριστεί αν υπάρχει συσχέτιση με διάφορα επιλεγμένα SNPs σε καθιερωμένες γονίδια οξειδοαναγωγής. Επιλέξιμες γυναίκες ήταν 19 έως 80 ετών και είχαν προηγουμένως προσληφθεί μέσω της γενετικής Γραμματεία του Karmanos Καρκίνου Ινστιτούτου (KCIGR), Detroit, MI. Οι ερευνητικές δραστηριότητες και τη μέθοδο της συναίνεσης έγιναν με την έγκριση του Διοικητικού Συμβουλίου του Wayne State University Institutional Review (IRB # 024199MP2F (5R)). Ενημέρωσε γραπτή συγκατάθεση μορφές χρησιμοποιήθηκαν και την άδεια χορηγήθηκε για τη συλλογή των δειγμάτων αίματος και για την πρόσβαση στα ιατρικά αρχεία για όλα τα θέματα.

πληθυσμό ασθενών.

Πρόσληψη ατόμων (n = 143) χωρίστηκαν σε ελέγχους (94), υγιείς εθελοντές (n = 18), υψηλού κινδύνου

BRCA1 /2

αρνητικό (n = 53), υψηλού κινδύνου

BRCA1 /2

θετικό (n = 23 ) και περιπτώσεις καρκίνου των ωοθηκών (n = 49). Οι έλεγχοι επιλέγονται κυρίως από την έρευνα θέματα, θεωρούνται υψηλού κινδύνου για καρκίνο του μαστού και των ωοθηκών, χωρίς καρκίνο των ωοθηκών που υποβλήθηκαν σε γενετικό έλεγχο για

BRCA1 /2

κατάσταση φορέα. Αξίζει να σημειωθεί ότι τα κριτήρια που χρησιμοποιούνται για τον έλεγχο περιλαμβάνονται προσωπική ιστορία του μαστού και των ωοθηκών, οικογενειακό ιστορικό καρκίνου του μαστού και των ωοθηκών, και

BRCA1 /2

μεταλλάξεις. Επιπλέον, υγιείς εθελοντές είχαν επίσης προσληφθεί ως μάρτυρες από την μητροπολιτική περιοχή του Ντιτρόιτ χωρίς τέτοιες ιστορίες. επιλεγμένες περιπτώσεις βασίστηκαν σε ιστοπαθολογική εξέταση, επιβεβαίωσε πρωτογενή διάγνωση του ΕΓΚ. Όλοι οι συμμετέχοντες, εκτός υγιείς εθελοντές, είχαν προηγουμένως υποβληθεί σε

BRCA1 /2

δοκιμών και τα αποτελέσματα ήταν στη διάθεσή μας.

Τα δείγματα που χρησιμοποιούνται για τη μελέτη αυτή συλλέχθηκαν από τους συμμετέχοντες που προσλαμβάνονται μεταξύ των ετών 1999 και 2012. δείγματα DNA χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστεί η παρουσία πολυμορφισμών στα γονίδια που περιγράφονται στον πίνακα 1. τα SNPs επιλέχθηκαν με βάση την προηγουμένως αναφερθεί ενώσεις με διάφορους καρκίνους [18-26]. Από τα 143 άτομα, 49 (34,3%) είχαν πρωτογενή διάγνωση του καρκίνου των ωοθηκών, ενώ 94 (65,7%) χωρίς καρκίνο χρησίμευσαν ως μάρτυρες. Για την ωοθηκών ομάδα του καρκίνου: 13 (26,5%) ήταν

BRCA1 /2

θετική σε σύγκριση με το 34 (69,4%)

BRCA1 /2

αρνητική? 2 (4,1%) περιπτώσεις έλειπαν. Τα δεδομένα κανονικά κατανεμημένη με την ηλικία της εγγραφής κυμαίνονταν από 18 να 90 με μέσο όρο 52 ± 15 και μία διάμεση ηλικία 52. Η ηλικία διάγνωσης κυμαίνονταν από 23 έως 77, η με μέσο όρο 52 ± 11 και μία μέση ηλικία των 52. Το φυλετικό κατανομή ήταν 88,8% (Καυκάσιοι), 8,4% (Αφρο-Αμερικανός) και 2,8% (Άλλες). Προσωπικές και οικογενειακές ιστορίες του καρκίνου του μαστού, τον καρκίνο των ωοθηκών, άλλους καρκίνους, και

BRCA1 /2

ήταν ποσοτικά. Οι συχνότητες της παρουσίας του SNP (ετερόζυγο συν ομόζυγο μεταλλαγμένο) σε σύγκριση με ομόζυγο άγριου τύπου προσδιορίστηκαν για κάθε γονίδιο που μελετήθηκαν.

Η

Καθαρισμός του DNA και η δοκιμασία Γονοτυποποίηση TaqMan SNP για SNPs

DNA, από δείγματα αίματος, απομονώθηκε από την Applied Genomics Technology Center (AGTC, Detroit, ΜΙ). DNA εκχυλίστηκε με QIAamp DNA μίνι κιτ σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή (Qiagen, Valencia, CA) [27]. Η Δοκιμασία TaqMan Γονοτυποποίηση SNP Σετ (Applied Biosystems, Carlsbad, CA) (NCBI dbSNP γονιδίωμα build 37, πηγή MAF 1000 γονιδιώματα) χρησιμοποιήθηκαν για να γονότυπο που επιλέγεται SNPs που περιγράφονται στον Πίνακα 1. Η AGTC εκτελούνται αυτή τη δοκιμασία και η ανάλυση έγινε χρησιμοποιώντας το QuantStudio 12Κ Flex Real-Time PCR System (Applied Biosystems).

Η στατιστική ανάλυση

τα δεδομένα αναλύθηκαν με τη χρήση του SPSS (IBM, Armonk, New York) για Mac V.22. Οι μεταβλητές που επιλέγονται για τις αναλύσεις περιλαμβάνουν γονότυπους, την ηλικία κατά τη διάγνωση και την ηλικία κατά την ένταξη, προσωπική και οικογενειακό ιστορικό καρκίνου του μαστού, των ωοθηκών, και

BRCA1 2

μεταλλάξεις /, εκτός από άλλες κακοήθειες. Χρησιμοποιώντας τη διάμεση ηλικία κατά τη διάγνωση /εγγραφή ως σημείο κοπής, που διχοτομήθηκε την «ηλικία κατά τη διάγνωση» μεταβλητή. Η «φυλή» μεταβλητή κατηγοριοποιήθηκε ως: Καυκάσιος, Αφροαμερικανός ή Άλλο. Έχουμε ενοποιείται την ακόλουθη όγκου και κλινικές μεταβλητές σε δυαδικά συστήματα κατηγορηματική: Διεθνής Ομοσπονδία Γυναικολογίας και Μαιευτικής (FIGO) στάδια σε πρόωρη (ΙΙΑ-ΙΙΙΒ) και προηγμένες (IIIC-IV)? βαθμούς ΦΥΓΩ (G1 /2) και (G3)? ιστολογία (ορώδες και άλλα). Για μελέτησε όλα τα γονίδια, το «γονότυπος» μεταβλητή διαχωρίστηκαν μεταξύ τους χρησιμοποιώντας το ακόλουθο σχήμα: ομόζυγο άγριου τύπου έναντι ομόζυγο μεταλλαγμένο συν ετερόζυγο μεταλλαγμένο. Για να συγκρίνετε τις περιπτώσεις τους ελέγχους στα επιλεγμένα δημογραφικά, κλινικά και γονοτυπική χαρακτηριστικά, πραγματοποιήσαμε Pearson Chi-square ανάλυση. Το ποσοστό υποτροπής καθορίστηκε ως το ποσοστό των ασθενών που έχουν περάσει σε ύφεση, αλλά η ασθένεια έχει επιστρέψει μήνες ή χρόνια αργότερα, με βάση τη φυσική εξέταση, ακτινολογικές μελέτες και CA-125 επίπεδα ορού.

Cox παλινδρόμησης και Kaplan -Meier αναλύσεις των μεταβλητών ως προγνωστικός δείκτης της συνολικής επιβίωσης.

για να μελετηθεί η επίδραση της SNPs στη συνολική επιβίωση, αναλύσεις παλινδρόμησης Cox πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση των παραπάνω εισηγμένων μεταβλητών και των συστημάτων ταξινόμησης, χρησιμοποιώντας την πιθανότητα αναλογία προς τα εμπρός κατά βήματα μέθοδος. Αρκετές προσομοιώσεις μέθοδο διεξήχθησαν όπως: αναγκαστική είσοδο (ENTER), προς τα εμπρός LR (αναλογία πιθανότητας), κ.λπ. Η προς τα εμπρός LR επιλέχθηκε για την τελική ανάλυση. Αυτή η μέθοδος είναι ένας αυστηρός μοντέλο που επιλέγει τα ισχυρότερα δείκτες πρόβλεψης της έκβασης που θα συμπεριληφθούν στο τελικό μοντέλο. Ο Πίνακας 2 περιλαμβάνει τα ισχυρότερα προγνωστικοί παράγοντες που τηρείται από το μοντέλο καθώς και μεταβλητές απορρίφθηκαν από το μοντέλο. Όλοι οι ασθενείς έλαβαν το πρότυπο της φροντίδας μετά διοικητικού συμβουλίου του όγκου συζήτηση. Λεπτομέρειες σχετικά με τα χαρακτηριστικά της θεραπείας δεν ήταν διαθέσιμα. Επιπλέον, οι καμπύλες επιβίωσης Kaplan-Meier δημιουργήθηκαν για τις μεταβλητές που επιλέγονται από το μοντέλο. Διενεργήσαμε όλες τις αναλύσεις στην τιμή p & lt? 0,05 για στατιστική σημαντικότητα.

Η

Αποτελέσματα

Πραγματοποιήσαμε side-by-side σύγκριση μεταξύ των περιπτώσεων καρκίνου των ωοθηκών και των ελέγχων με τη χρήση του Pearson chi-square ανάλυση. Φυλετική κατανομή ήταν στατιστικά παρόμοια μεταξύ των ομάδων (p & gt? 0,05). Όπως ήταν αναμενόμενο, «προσωπικό ή οικογενειακό ιστορικό καρκίνου των ωοθηκών», «προσωπικό ή οικογενειακό ιστορικό άλλων καρκίνων» και «προχωρημένη ηλικία» ήταν σημαντικά διαφορετική μεταξύ των ομάδων και είναι γνωστοί παράγοντες των ωοθηκών κίνδυνος καρκίνου (p & lt? 0,05, Πίνακας 3). Συγκριτικές αναλύσεις για μαγγανίου δισμουτάσης του υπεροξειδίου (

MnSOD

, rs4880), NAD (P) H οξειδάση (

Cyba

, rs4673), γλουταθειόνης υπεροξειδάσης (

GPX1

, rs3448), επαγώγιμης συνθάσης του νιτρικού οξειδίου (

NOS2

, rs2297518), μυελοϋπεροξειδάση (

MPO

, rs2243828), γλουταθειόνη αναγωγάσης (

GSR

, rs1002149), και η καταλάση (

CAT

, rs1001179) δεν βρίσκουν σημαντική διαφορά μεταξύ των περιπτώσεων και των ελέγχων (Πίνακας 3). Από τις 49 περιπτώσεις καρκίνου των ωοθηκών, 38 (77,5%) αναλύθηκαν περαιτέρω με τη μέθοδο της παλινδρόμησης Cox, και 11 (22,5%) είχαν πέσει λόγω έλλειψης στοιχείων. Η πλειοψηφία των περιπτώσεων ήταν ορώδες ιστολογία, προχωρημένο στάδιο, και όγκους υψηλής ποιότητας (Πίνακας 4). Το ποσοστό υποτροπής βρέθηκε να είναι 60,5%.

Η

Η

CAT

SNP είναι ένας προγνωστικός δείκτης της μικρότερης επιβίωσης

Κατά τη διάρκεια αυτών των αναλύσεων, υπήρξαν 26 θάνατοι (18,2%) και 117 (81,8%) άτομα ζωντανός. Μεταξύ των SNPs που εξετάστηκαν, μόνο

CAT

(rs1001179) αναγνωρίστηκε ως προγνωστικός δείκτης μικρότερη επιβίωση από το μοντέλο παλινδρόμησης Cox με αναλογία κινδύνου (HR) από 3,68 (95% CI: 1,149 έως 11,836, p = 0,028 ) (Πίνακας 4Α). Όπως ήταν αναμενόμενο, «ηλικία κατά τη διάγνωση» μεγαλύτερο από το διάμεσο (52) βρέθηκε να είναι ένας σημαντικός προγνωστικός θανάτου με HR 2,78 (95% CI: 1,022 – 7,578, p = 0,045) (Πίνακας 4). Οι μεταβλητές που επιλέγονται για τις αναλύσεις, αλλά απορρίφθηκε από το μοντέλο που παρατίθενται στον Πίνακα 4. ανάλυση Kaplan-Meier (KM) επιβίωση συντελεστή από

CAT

γονότυπο, το οποίο χρησιμοποιείται 84,6% των θανάτων, έδειξε μια στατιστικά σημαντική μέση διαφορά στη συνολική επιβίωση (108 [95% CI: 79-137] έναντι 60 [95% CI: 40-80] μηνών, p & lt? 0,05) και η μέση διαφορά στη συνολική επιβίωση (182 [95% CI: 75,5 – 288] έναντι 47 μήνα [95% CI: 31-60]., ρ & lt? 0,05) για τα άτομα με τον φυσιολογικό γονότυπο σε σύγκριση με το

CAT

SNP γονότυπο (Σχήμα 1)

το στερεό καμπύλη αναπαριστά περιπτώσεις με (CC) ομόζυγο άγριου τύπου γονότυπο σε σύγκριση με την διακεκομμένη καμπύλη που αντιπροσωπεύει τις περιπτώσεις με ομόζυγο μεταλλαγμένο συν ετερόζυγη μεταλλαγμένο (CT + ΤΤ) γονότυπους. Ο άξονας Χ αντιπροσωπεύει επιβίωσης ασθενών σε μήνα? ο Υ-άξονας αντιπροσωπεύει ποσοστό σωρευτική επιβίωση. Chi-τετράγωνο τιμή-p 0 & lt? 0,05 θεωρείται στατιστικά σημαντική

Η

Συζήτηση

Ένα μεγάλο σώμα της στοιχεία δείχνουν ότι ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών έχουν μειωθεί τα επίπεδα των κυκλοφορούντων αντιοξειδωτικά και υψηλότερα επίπεδα. οξειδωτικό στρες [16,17,28-32]. Έχουμε αναφέρει την ύπαρξη ενός επίμονης προ-οξειδωτικό κατάσταση στην EOC που περιελάμβανε αυξημένη έκφραση του κλειδιού προ-οξειδωτικό ένζυμα όπως διεγέρσιμης συνθάσης νιτρικού οξειδίου (iNOS), NAD (P) H οξειδάση, και ΜΡΟ [16,32,33] . Είναι ενδιαφέρον ότι, η έκφραση του MPO στα κύτταρα και τους ιστούς EOC ήρθε ως έκπληξη, δεδομένου ότι είναι ένα ένζυμο οξειδωτικό ροών που συναντάμε συνήθως σε κύτταρα μυελοειδούς προέλευσης [34]. Έχουμε καθορίζεται επίσης ότι η MPO μπορεί να παράγει το κατιόν νιτροσονίου (ΝΟ

+) χρησιμοποιώντας ΝΟ που παράγεται από το iNOS. Αυτό είναι σημαντικό διότι ΝΟ

+ αιτίες s-νιτροσυλίωση της κασπάσης-3, και η αναστολή της δραστηριότητας της, με αποτέλεσμα μία μείωση στην απόπτωση [32]. Ο μηχανισμός αυτός εξηγεί περαιτέρω την παρατήρηση ότι τα κύτταρα του ΕΓΚ πρόδηλη μειώθηκαν σημαντικά την απόπτωση και αυξημένη επιβίωση [32,33,35,36]. Είναι ενδιαφέρον ότι η αξιολόγηση των μεταλλάξεων στα διάφορα οξειδοαναγωγικά ένζυμα, με τη μορφή του SNPs είναι ένα ενεργό τομέα της επιστημονικής έρευνας [37-45]. Γενετικοί πολυμορφισμοί είναι γνωστό ότι σχετίζονται με την ευαισθησία του καρκίνου και μπορεί να καθοριστεί από τη μελέτη λειτουργικών πολυμορφισμών στα γονίδια που ελέγχουν τα επίπεδα της κυτταρικής αντιδραστικά είδη οξυγόνου και οξειδωτική βλάβη, συμπεριλαμβανομένων των SNPs για γονίδια που εμπλέκονται στην καρκινογόνο μεταβολισμού (αποτοξίνωση ή /και ενεργοποίηση), αντιοξειδωτικά , και τα μονοπάτια επιδιόρθωσης του DNA [46]. Για παράδειγμα, οι μεταλλάξεις βλαστικής σειράς σε

BRCA1

ή

BRCA2

σχετίζονται με τον καρκίνο των ωοθηκών σε ποσοστό μόνο 20-40%, γεγονός που υποδηλώνει την παρουσία άλλων αγνώστων μεταλλάξεων σε άλλα γονίδια ως αιτιολογία [ ,,,0],14,47,48]. Πρόσθετες γενετικές παραλλαγές, πολλές από τις οποίες έχουν ταυτοποιηθεί σε πρόσφατες μελέτες συσχέτισης γονιδιώματος σε επίπεδο (GWAS), έχουν υποτεθεί ότι δρουν ως χαμηλή έως μέτρια παράγοντα διείσδυσης αλληλόμορφα, οι οποίες συμβάλλουν στον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών, καθώς επίσης και άλλες ασθένειες [14,49] . Προς υποστήριξη αυτού, οι πρόσφατες μελέτες έχουν επίσης συσχετίσει γενετικών πολυμορφισμών στα γονίδια που εμπλέκονται στην καταστολή της ογκογονικότητας καθώς και εκείνων που εμπλέκονται σε κυτταρικό κύκλο με καρκίνο των ωοθηκών [50,51].

Για τη μελέτη αυτή, επιδιώξαμε να αξιολογήσει η ένωση των συγκεκριμένων SNPs σε βασικούς οξειδωτικό και αντιοξειδωτικά ένζυμα με αυξημένο κίνδυνο και τη συνολική επιβίωση του καρκίνου των ωοθηκών. Η ανάλυση του πληθυσμού των ασθενών έδειξε ότι η μέση ηλικία κατά τη διάγνωση και τη φυλετική κατανομή από αυτούς που διαγνώστηκαν με καρκίνο των ωοθηκών ήταν σύμφωνες με γνωστούς παράγοντες κινδύνου για τον καρκίνο των ωοθηκών, συγκεκριμένα, οι γυναίκες της Βόρειας Αμερικής αξιοπρεπής και άτομα άνω των 50 ετών. Σήμερα έχουμε αποδείξει ότι δεν υπάρχει συσχέτιση μεταξύ των επιλεγμένων SNPs και τον κίνδυνο ανάπτυξης καρκίνου των ωοθηκών (Πίνακας 2). Είναι σημαντικό να τονίσουμε το γεγονός ότι, αν και οι επιλεγμένες SNPs για την παρούσα μελέτη δεν βρέθηκε να σχετίζεται με τον κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών, επιπλέον αλλαγή των SNPs λειτουργίας για αυτά τα ένζυμα υπάρχουν και θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω. Από τα SNPs που μελετήθηκαν κατά την εξέταση της επιβίωσης, βρήκαμε το

CAT

SNP (rs1001179) να είναι ένα σημαντικό προγνωστικό παράγοντα θανάτου όταν είναι παρούσες σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών, όπως φαίνεται από την παλινδρόμησης Cox και αναλύει KM επιβίωσης (Πίνακας 3 και Σχήμα 1). Συγκεκριμένα, οι ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών με το

CAT

SNP πέθαναν σημαντικά πιο γρήγορα από ό, τι τα άτομα χωρίς αυτό (Σχήμα 1). Η

CAT

SNP (rs1001179) βρίσκεται στην περιοχή του υποκινητή του

CAT

γονίδιο, υποκαθιστώντας αλληλόμορφο C με Τ στη θέση -262 στην 5 ‘περιοχή του χρωμοσώματος 11 και συσχετίζεται με μειωμένη ενζυμική επίπεδο δραστηριότητας [52]. Η καταλάση είναι ένα πολύ σημαντικό και πανταχού παρόν ένζυμο που εμπλέκεται στην αποικοδόμηση των δύο μορίων του υπεροξειδίου του υδρογόνου (Η

2O

2) σε νερό και οξυγόνο. Τα τρέχοντα ευρήματα είναι συνεπή με αρκετές άλλες μελέτες, οι οποίες συνδέονται με το συγκεκριμένο SNP με τον κίνδυνο, απάντηση στην επικουρική θεραπεία και την επιβίωση των ασθενών με καρκίνο [18,19,24,53]. Συγκεκριμένα, τα χαμηλά επίπεδα CAT στον ορό συσχετίστηκαν με δυσμενείς πρόγνωση για τον καρκίνο των ωοθηκών [21]. Τα δεδομένα μας παρέχει μια πιθανή εξήγηση για τα επίπεδα CAT χαμηλά στον ορό, η οποία μπορεί να είναι αποτέλεσμα ενός

CAT

SNP που μειώνει ενζυματική δραστικότητα. Επιπλέον, μηχανιστικές μελέτες έχουν εντοπίσει H

2O

2, ένα αποτέλεσμα του οξειδωτικού στρες, να ενισχυθεί η αγγειογένεση και η εισβολή όγκου μέσω διαφόρων οδών, συμπεριλαμβανομένων: υποξία επαγώγιμου παράγοντα 1-άλφα, p38 ΜΑΡΚ και σαλιγκάρι [54,55]. Φαίνεται ότι η τελική κοινή οδός κορυφώνεται να επιδερμικού αυξητικού παράγοντα (EGF) προκληθείσα μειορύθμιση των επιθηλιακών έκφρασης καδερίνης που μπορεί να ανασταλεί από εξωγενές CAT [54]. Επιθηλιακά-καντερίνης είναι μια γλυκοπρωτεΐνη προσκόλλησης κυττάρου-κυττάρου που κωδικοποιείται από το

Cdh1

γονιδίου σε ανθρώπους, η οποία έχει χαρακτηριστεί ως καταστολέας όγκου [56,57]. απώλεια της λειτουργίας συσχετίζεται με διάφορους συμπαγείς όγκους, συμπεριλαμβανομένων των ωοθηκών και θεωρείται ότι συμβάλλουν στην εξέλιξη και μετάσταση όγκου [58].

Είναι σημαντικό να τονιστεί ότι η έλλειψη σύνδεσης μεταξύ των επιλεγμένων SNPs σε αυτήν την μελέτη των ωοθηκών τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου δεν απαντήσει οριστικά αυτό το σημαντικό ζήτημα, διότι η πρόσθετη αλλαγή της λειτουργίας SNPs για αυτά τα ένζυμα υπάρχουν και θα πρέπει να διερευνηθεί περαιτέρω. Πρόσφατες γενετικές μελέτες έχουν συνδέσει ΜΡΟ στον πνεύμονα και των ωοθηκών, αποδεικνύοντας μια εντυπωσιακή συσχέτιση μεταξύ της σχετικής κινδύνου για την ανάπτυξη της ασθένειας και τη συχνότητα των λειτουργικά διακριτές

ΜΡΟ

πολυμορφισμών [59]. Επιπλέον, ένα SNP σε ΝΑΟ (Ρ) Η οξειδάση (rs4673) έχει συσχετιστεί με αυξημένο κίνδυνο καρκίνου των ωοθηκών [60]. Στον καρκίνο του μαστού, η παρουσία του

CAT

SNP (rs1001179), φάνηκε να προσδώσει αυξημένο κίνδυνο [24]. Έχουμε επιλέξει πολλές πρόσθετες SNPs με βάση την επίδρασή τους στις δραστηριότητες ή συσχέτιση με τον καρκίνο του ενζύμου. Αρκετές SNPs σε

NOS2

έχουν συσχετιστεί με γαστρική, του οισοφάγου, του δέρματος και του ουρογεννητικού καρκίνους [20,22]. Επίσης, SNPs στο

MnSOD

,

GPX1

,

GPx4

,

CAT

βρέθηκαν να σχετίζονται με τον καρκίνο του προστάτη [24].

Άλλες μελέτες έχουν βρει ένα SNP στο

MnSOD

(rs4880) και SNP στο

MPO

(rs2333227) να σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο για καρκίνο των ωοθηκών [34]. Η

MPO

SNP έχουμε αναλύσει σε αυτή τη μελέτη είναι στο 100% συμφωνία με rs2333227 SNP [61]. Έτσι, εκτός από την εξέταση άλλων μεταβολών των λειτουργικών SNPs, αυξάνοντας το μέγεθος του κοόρτης μας μπορεί να είναι επαρκής για την επίτευξη στατιστικής σημαντικότητας σε αρκετές από τις SNPs που επιλέγονται για αυτή τη μελέτη. Η ισχύς της παρούσας μελέτης περιλαμβάνει την ολοκληρωμένη φύση των γονιδίων οξειδοαναγωγής μελετηθεί και την μεταγραφική πτυχή της προσέγγισής μας αξιολογώντας ταυτόχρονα κλινικά και γονοτυπική χαρακτηριστικά του πληθυσμού. Πιστεύουμε ότι το γεγονός ότι η ομάδα του ελέγχου μας είναι ετερογενής αντιπροσωπεύει τη δύναμη, διότι περιλαμβάνει ασθενείς που θεωρούνται υψηλού κινδύνου για

BRCA1 /2

μετάλλαξη και εκείνων χωρίς τις τυχόν παράγοντες κινδύνου για τον καρκίνο των ωοθηκών, αντανακλώντας την ομάδα βασικό κίνδυνο (γενικές πληθυσμός). Είναι ενδιαφέρον ότι, οι ασθενείς που βρέθηκαν αρνητικά για

BRCA1 /2

μεταλλάξεις, καθώς και τα άτομα με οικογενειακό ιστορικό

BRCA1 /2

μεταλλάξεις, αλλά και βρέθηκαν αρνητικά για

BRCA1 /2

θα πρέπει να θεωρείται σε υψηλότερο προφίλ κινδύνου από ό, τι στο γενικό πληθυσμό. Το πιο σημαντικό, με τις γνώσεις μας, είμαστε οι πρώτοι που αναφέρουν σύνδεσης μεταξύ της παρουσίας της συγκεκριμένης

CAT

SNP και την επιβίωση του καρκίνου των ωοθηκών. Η μελέτη έχει αρκετούς περιορισμούς όπως το μικρό μέγεθος του δείγματος, την αναδρομική φύση εγγενή σε μελέτες ασθενών-μαρτύρων, και το γεωγραφικό περιορισμό του πληθυσμού. Σε πληθυσμού μας ασθενούς, ο ρυθμός υποτροπής βρέθηκε να είναι 60,5%? Ωστόσο, η ακριβής ημερομηνία της επανάληψης δεν ιδρύθηκε κάνοντας τον υπολογισμό της επιβίωσης χωρίς εξέλιξη της νόσου (PFS) αδύνατη. Αναγνωρίζουμε ότι ο προσδιορισμός της PFS θα ενίσχυε τα ευρήματά μας, όπως PFS έχει συχνά χρησιμοποιηθεί ως πρωτεύον τελικό σημείο ή ένα υποκατάστατο για τη συνολική επιβίωση σε κλινικές δοκιμές [62-67].

Είναι πλέον προφανές ότι το οξειδωτικό στρες παίζει σημαντικό ρόλο στην παθογένεση του καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου των ωοθηκών, ωστόσο οι ακριβείς μηχανισμοί παραμένουν να διευκρινισθούν. Σε αυτήν την προκαταρκτική μελέτη ήμασταν σε θέση να αποδείξει ότι ένα συγκεκριμένο

CAT

SNP συνδέεται με κακή επιβίωση σε ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών. Περαιτέρω μελέτες που εξετάζουν άλλες SNPs σε βασικούς οξειδωτικών και αντιοξειδωτικών ενζύμων με μεγαλύτερο αριθμό ασθενών θα χρειαστούν για να αποκατασταθεί η σύνδεση αυτή. SNPs σε αυτά τα ένζυμα μπορούν να χρησιμεύσουν ως πιθανοί δείκτες για τον καρκίνο των ωοθηκών, τα οποία απαιτούνται επειγόντως. Η μελέτη μας δείχνει μια ισχυρή συσχέτιση με το

CAT

SNP και την επιβίωση των ασθενών με καρκίνο των ωοθηκών, και έτσι μπορεί να χρησιμεύσει ως μάντης.

Υποστήριξη Πληροφορίες

S1 αρχείου. δεδομένων των ασθενών και πληροφορίες

doi:. 10.1371 /journal.pone.0135739.s001

(PDF)

Ευχαριστίες

Θα θέλαμε να ευχαριστήσουμε τον Δρ Michael S. Simon, Karmanos Ινστιτούτο Καρκίνου, Detroit, MI για την πολύτιμη προσπάθειές του και τις γενετικούς συμβούλους στην Κλινική Γενετική. Οι ασθενείς ελέγχονται για την επιλεξιμότητα σε εβδομαδιαία κλινική συνέντευξη και ο Δρ Σάιμον ή το γενετικό Σύμβουλοι εισαγάγουν /εξηγήσουν τη μελέτη για τις επιλέξιμες ασθενείς, συναινείτε τους, και να μεριμνήσει για την κλήρωση του αίματος. Θα ήθελα επίσης να ευχαριστήσω τον Δρ Michael A. Tainsky και Nancy Levin, Karmanos Ινστιτούτο Καρκίνου, Detroit, MI, για την υποστήριξή τους και για την παροχή των δειγμάτων DNA για την παρούσα μελέτη.