Αφηρημένο

Ιστορικό

Η ταυτοποίηση νέων προγνωστικών δεικτών για τον καρκίνο του προστάτη είναι ιδιαίτερα δικαιολογημένη, δεδομένου ότι είναι δύσκολο να εντοπιστούν ασθενείς που απαιτούν θεραπευτική αγωγή. Τα δεδομένα από τα δύο πειραματικά μοντέλα και κλινικά δείγματα έχουν εντοπιστεί σημαντικές λειτουργίες του PDGFRβ για περικύτταρα και ινοβλάστες στο στρώμα του όγκου.

Μεθοδολογία /Κύρια Ευρήματα

Σε αυτή τη μελέτη η προγνωστική σημασία της PDGFRβ στον καρκίνο του προστάτη στρώμα, και συμφωνημένα μη κακοήθη ιστό, αξιολογήθηκε με ανοσοϊστοχημεία. έκφραση PDGFRβ αναλύθηκε σε φυσιολογικά και καρκινικά στρώμα από περισσότερες από 300 ασθενείς με καρκίνο του προστάτη. Υψηλή έκφραση PDGFRβ στο στρώμα του όγκου συνδέθηκε με το μεγάλο μέγεθος του όγκου, σε προχωρημένο στάδιο, υψηλή βαθμολογία Gleason και υψηλής πυκνότητας σκάφος. Περιαγγειακή χρώση PDGFRβ σε όγκους επίσης συσχετίστηκε με υψηλό σκορ Gleason. Οι συσχετίσεις παρατηρήθηκαν επίσης μεταξύ της κατάστασης PDGFRβ σε στρώματος του όγκου και μη κακοήθεις στρώμα. Ομοίως, υψηλή έκφραση PDGFRβ σε παρακείμενες μη κακοήθη στρώμα ιστού σχετίζεται με το μεγάλο μέγεθος του όγκου, σε προχωρημένο στάδιο, υψηλή βαθμολογία Gleason και τον πολλαπλασιασμό σε μη κακοήθεις επιθηλίου. Είναι ενδιαφέρον, υψηλά επίπεδα PDGFRβ στο στρώμα του όγκου και μη κακοήθη ιστό συσχετίστηκαν με μικρότερη καρκίνο συγκεκριμένες επιβίωσης σε ασθενείς με καρκίνο του προστάτη.

Συμπεράσματα /Σημασία

Η μελέτη αποκάλυψε μια σειρά νέων συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης στρωματικών PDGFRβ σε όγκους του προστάτη και πολλά σημαντικά κλινικά χαρακτηριστικά, συμπεριλαμβανομένης της επιβίωσης

Παράθεση:. Hägglöf C, Hammarsten P, Josefsson Α, Stattin P, Paulsson J, Bergh A, et al. (2010) στρωματικά PDGFRβ έκφραση σε προστάτη όγκοι και μη κακοήθεις του προστάτη ιστών Προβλέπει Καρκίνος του προστάτη επιβίωσης. PLoS ONE 5 (5): e10747. doi: 10.1371 /journal.pone.0010747

Επιμέλεια: Ανά Westermark, Πανεπιστήμιο της Ουψάλα, Σουηδία

Ελήφθη: 3 Μαρτίου, 2010? Αποδεκτές: 30, Απριλίου, 2010? Δημοσιεύθηκε: May 20, 2010

Copyright: © 2010 Hägglöf et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτή η μελέτη χρηματοδοτήθηκε από απεριόριστη επιχορηγήσεις από επιχορήγηση Linna στο δίκτυο Starget από το σουηδικό Συμβούλιο Έρευνας και επιχορηγήσεις από σουηδική Αντικαρκινική Εταιρεία και Konung Gustaf Vs Jubileumsfond. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

συμπεριφορά του όγκου, σε γενικές γραμμές, διέπεται σε μεγάλο βαθμό από τα χαρακτηριστικά του στρώματος του όγκου. Στην περίπτωση του καρκίνου του προστάτη αυτό καθίσταται προφανές με μια σειρά πρόσφατων μελετών που έχουν εντοπιστεί στρωματικά χαρακτηριστικά και δείκτες με προγνωστικές και απόκριση-κατηγορηματικός σημασία.

Οι όγκοι με την πιο έντονη μεταβολή στη μορφολογία στρώμα, που χαρακτηρίζεται από α σημαντική απώλεια των λείων μυϊκών κυττάρων και αυξάνει σε ινοβλάστες, μυοϊνοβλάστες και ίνες κολλαγόνου (αντιδραστική στρώμα βαθμός 3), έχουν μια κακή έκβαση σε σύγκριση με εκείνους με στρώμα μορφολογικά περισσότερο παρόμοια με εκείνη σε φυσιολογικό ιστό του προστάτη, δηλαδή δραστικές ποιότητες στρώμα 1 και 2 [1]. Πρόσφατες μελέτες έχουν επίσης δείξει ότι οι καρκίνοι του προστάτη χαρακτηρίζεται από απώλεια υποδοχείς ανδρογόνων (AR) στο στρώμα [2]. Μια χαμηλή συχνότητα των στρωματικών AR ήταν συνδεδεμένη με αυξημένη βαθμολογία Gleason, μετάσταση, η κακή ανταπόκριση στη θεραπεία ευνουχισμού και μια δυσμενή έκβαση. Επιπλέον, τα στρωματικά χαρακτηριστικά, όπως η αγγειογένεση, η συσσώρευση μακροφάγων, λεμφοκυττάρων και μαστοκύτταρα καθώς και αλλαγές στην εξωκυτταρική μήτρα έχουν συνδεθεί με μεταβολές στη συμπεριφορά του όγκου του προστάτη [3], [4], [5], [6], [7]. Αξίζει να σημειωθεί ότι, έχει επίσης παρατηρηθεί ότι οι επιδράσεις πεδίο καρκίνου και /ή προσαρμοστικές αλλαγές μπορεί να αλλάξουν το στρώμα και αδενικό επιθήλιο στον περιβάλλοντα μη κακοήθη ιστό σε προγνωστικά σημαντικό τρόπο [2], [8], [9], [10] .

PDGF α- και β-τυροσίνης υποδοχέων κινάσης ασκούν σημαντικές λειτουργίες ελέγχου στα μεσεγχυματικά κύτταρα, όπως περικύτταρα, ινοβλάστες και αγγειακά κύτταρα λείου μυός κατά την διάρκεια της ανάπτυξης [11], [12]. Πειραματικές μελέτες έχουν προσδιορίσει διάφορες λειτουργικές επιδράσεις της στρωματικών PDGF υποδοχέα σηματοδότησης σε διάφορα μοντέλα όγκων. Έχει αποδειχθεί ότι παρακρινείς ενεργοποίηση των υποδοχέων PDGF σε ινοβλάστες δρα ως ισχυρός σήμα για την πρόσληψη στρώματος του όγκου [13], [14], [15]. Άλλες μελέτες έχουν δείξει θεραπευτικά οφέλη της στοχοθέτησης στρωματικών υποδοχέων PDGF που περιλαμβάνουν είτε απευθείας καταπολέμησης των όγκων αποτελέσματα, καθώς και ευεργετικά αποτελέσματα στην πρόσληψη φαρμάκου όγκου [16], [17], [18], [19], [20]. Κλινική σημασία των ευρημάτων από πειραματικά μοντέλα υποδεικνύεται από πολυάριθμες μελέτες που αποδεικνύουν στρωματικά έκφραση του υποδοχέα PDGF σε διαφορετικούς ανθρώπινους συμπαγείς όγκους [13]. Πιο πρόσφατα οι μελέτες αυτές έχουν συμπληρωθεί με αναλύσεις αποκαλύπτουν ότι η έκφραση του υποδοχέα PDGF υψηλής στρωματικά είναι ένας δείκτης της δυσμενούς έκβασης σε ασθενείς με καρκίνο του μαστού [21].

Οι βιολογικές επιδράσεις των υποδοχέων PDGF σε ινοβλάστες όγκου και περικύτταρα μαζί με η έλευση των φαρμάκων με δραστικότητα υποδοχέα-ανασταλτική PDGF, όπως imatinib, sorafenib και sunitinib, παρακινεί έτσι ένα συστημικό χαρακτηρισμός του προτύπου έκφρασης των υποδοχέων PDGF σε ανθρώπινους συμπαγείς όγκους. Για το σκοπό αυτό, αυτή η μελέτη περιγράφει την έκφραση του PDGFRβ σε περίπου 300 περιπτώσεις καρκίνου του προστάτη και σε συμφωνημένα γύρω μη κακοήθη ιστό προστάτη, και αναφέρεται επίσης σε ενώσεις μεταξύ της έκφρασης PDGFRβ και μοριακών, ιστοπαθολογικές και κλινικά χαρακτηριστικά.

Αποτελέσματα

Μεταβλητό έκφραση PDGFRβ σε φυσιολογικά και όγκο του προστάτη

ιστού

για να αξιολογηθεί η σημασία των PDGFRβ στον καρκίνο του προστάτη, μια ΤΜΑ περιέχουν συμφωνημένα μη κακοήθη και καρκινικού ιστού από 377 ασθενείς με καρκίνο του προστάτη με μέχρι 25 έτος συνέχεια που δόθηκε αναλύθηκε με PDGFRβ ανοσοϊστοχημεία.

σε συμφωνία με προηγούμενες μελέτες, η έκφραση PDGFRβ ήταν κατά κύριο λόγο βρίσκονται στο στρώμα ινομυώδης και περιαγγειακή κύτταρα (Εικόνα 1 και Πίνακας 1). Στο μη κακοήθη προστάτη 27% και 18% βαθμολογήθηκαν ως έχοντα θετική έκφραση PDGFRβ στο στρώμα ινομυώδης και περιαγγειακή κύτταρα, αντίστοιχα. Περιαγγειακή και χρώση στρώμα δεν συσχετίζονται. Στις περιοχές του όγκου κατά 34% ήταν θετικά στην μοιάζουν με ινοβλάστες στρώματος και 17% τα περιαγγειακά κύτταρα. Χρώση σε στρώματος του όγκου και γύρω από τα αιμοφόρα αγγεία του όγκου συσχετίσθηκαν (Rs = 0,59). Σημαντικές ενώσεις παρατηρήθηκαν επίσης μεταξύ του καθεστώτος PDGFRβ στην κακοήθη και μη κακοήθη στρώμα (Πίνακας 1).

Τμήματα χρώση για την PDGFRβ από μη κακοήθη (Α, Β και C) και του όγκου (D, E και F) ιστών από ασθενείς με καρκίνο του προστάτη. Περιπτώσεις Α και αρνητική χρώση Δ show, Β και Ε δείχνουν μέτρια χρώση στρωματικά ενώ C και F παρουσιάζουν έντονη χρώση του στρώματος. Κλίμακα bar = 200 μΜ.

Η

Σε μερικές περιπτώσεις, η έκφραση PDGFRβ ποικίλει επίσης εντός του προστατικού ιστού του ίδιου του ασθενούς (Εικόνα S1).

συμβεί έκφραση στρωματικά PDGFRβ κυρίως στην αSMA-θετικά κύτταρα

Για να χαρακτηριστεί περαιτέρω η έκφραση του στρωματικά PDGFRβ, μια διπλή χρώση πραγματοποιήθηκε με αντισώματα ενάντια αSMA και PDGFRβ.

Αυτές οι αναλύσεις επιβεβαίωσαν ότι το μεγαλύτερο μέρος της έκφρασης PDGFRβ στην μη-κακοήθη fibromusclar και τα παρόμοια με ινοβλάστη στρώματος του όγκου συνέβη σε αSMA-θετικά κύτταρα (Σχήμα 2). Επιπλέον, οι αναλύσεις απέδειξαν επίσης την παρουσία αSMA-θετικών κυττάρων στο στρώμα του όγκου και μη-κακοήθεις ιστούς οι οποίοι δεν παρουσίασαν έκφραση οποιουδήποτε στρωματικών PDGFRβ.

Διπλή χρώσεις του προστατικού ιστού με PDGFRβ (πράσινο) και αSMA (κόκκινο) σε μη κακοήθη ιστό (Α και Β) και ιστό του όγκου (Γ και Δ). Κλίμακα bar = 100 μΜ.

Η

Αυτά τα ευρήματα επιβεβαιώνουν την ύπαρξη των υποσυνόλων των στρωματικών αSMA-θετικών κυττάρων, τα οποία διαφέρουν σε σχέση με την έκφραση PDGFRβ.

στρωματικά και περιαγγειακή PDGFRβ χρώση σε όγκων του προστάτη συσχετίζεται με προγνωστικοί δείκτες

οι αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν για να διερευνήσει πιθανές συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης PDGFRβ σε όγκους και κλινικές παραμέτρους ή ιστολογικά χαρακτηριστικά των όγκων.

Παρουσία χρώσης PDGFRβ στο fibroblast- όπως στρώματος του όγκου ήταν σημαντικά θετική συσχέτιση με το μεγάλο μέγεθος του όγκου, σε προχωρημένο στάδιο, υψηλή βαθμολογία Gleason και υψηλής πυκνότητας σκάφος (Πίνακας 1). Σε ασθενείς με Gleason σκορ 4-6 ή Gleason score 7 όγκων, μόνο περίπου το 20% των όγκων έδειξε στρώμα χρώση PDGFRβ, αλλά ήταν πολύ πιο συχνή σε περιπτώσεις με Gleason σκορ 8-10 όγκους (Σχήμα 3).

χρώση PDGFRβ στο στρώμα του όγκου ήταν πιο συχνή σε περιπτώσεις με Gleason σκορ 8-10 όγκους σε σύγκριση με τους ασθενείς με Gleason σκορ 4-6 ή Gleason score 7 (Α). Παρουσία PDGFRβ ανοσοχρώση ήταν πιο συχνή στην κανονική στρώμα ιστού του προστάτη, όταν ένα Gleason σκορ 8-10 όγκου ήταν παρούσα στον προστάτη σε σύγκριση με το εάν ο όγκος είχε Gleason σκορ 4-6 (Β).

Η

έκφραση περιαγγειακή PDGFRβ στην περιοχή του όγκου ήταν επίσης θετικά με προχωρημένο στάδιο, η πυκνότητα του αγγείου όγκου και υψηλή βαθμολογία Gleason (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

μαζί τα ευρήματα αυτά αποδεικνύουν προηγουμένως un-αναγνωρισμένες ενώσεις μεταξύ του στρώματος και περιαγγειακή έκφραση PDGFRβ στην όγκων του προστάτη και τα χαρακτηριστικά που σχετίζονται με μια πιο επιθετική φαινότυπο του καρκίνου.

χρώση στρωματικά PDGFRβ στο διπλανό μη κακοήθη ιστό συσχετίζονται με προγνωστικούς δείκτες

PDGFRβ έκφραση σε παρακείμενες μη κακοήθη ιστό αναλύθηκε επίσης σε σχέση με τις ενώσεις με τα χαρακτηριστικά του όγκου (Πίνακας 1).

υψηλή PDGFRβ σε μη κακοήθεις, ινομυώδης στρώμα συσχετίστηκε με μεγάλο μέγεθος του όγκου, σε προχωρημένο στάδιο, τον πολλαπλασιασμό των επιθηλιακών κυττάρων και υψηλή βαθμολογία Gleason (Πίνακας 1). Ήταν πολύ πιο κοινό να βρει PDGFRβ έκφραση στον φυσιολογικό στρώμα ιστό προστάτη όταν ένα Gleason στείλει 8-10 όγκου ήταν παρούσες αλλού στο όργανο σε σύγκριση με εάν ο όγκος ήταν Gleason στείλει 4-6 (Σχήμα 3 Β).

έκφραση περιαγγειακή PDGFRβ στον περιβάλλοντα μη κακοήθη ιστό επίσης συσχετίζεται θετικά με τον πολλαπλασιασμό των επιθηλιακών κυττάρων (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Αυτές οι αναλύσεις δείχνουν έτσι νέες σχέσεις μεταξύ των ιδιοτήτων του προστάτη του καρκίνου και τον φαινότυπο του στρώματος του μη κακοήθη ιστό προστάτη παρακείμενα σε όγκους του προστάτη.

έκφραση στρωματικά PDGFRβ σε όγκους και στη μη κακοήθη ιστό προστάτη περιβάλλει όγκους προβλέπει καρκίνος ειδική επιβίωση

τα αποτελέσματα από τις αναλύσεις της έκφρασης PDGFRβ ήταν Τέλος σε συνδυασμό με τα δεδομένα επιβίωσης για να διερευνήσει πιθανή προγνωστική σημασία.

τα cut-offs για στρωματικών όγκων PDGFRβ και μη κακοήθη στρωματικά PDGFRβ στις αναλύσεις ορίστηκε στο τρίτο τεταρτημόριο, που αντιστοιχούν σε 1,0 και 0,5 για τους όγκους και μη -malignant στρωματική χρώση PDGFRβ, δηλαδή υψηλή PDGFRβ ανοσολογική αντίδραση ήταν ≥1.0 για όγκο και ≥0.5 για μη-κακοήθεις στρώμα.

Kaplan-Meier ανάλυση έδειξε ότι οι άγρυπνο ασθενείς που περιμένουν με το υψηλότερο τεταρτημόριο της έκφρασης PDGFRβ στην στρώματος του όγκου είχαν σημαντικά μικρότερη καρκίνος ειδική επιβίωση σε σύγκριση με το υπόλοιπο (15-ετή πιθανότητα εκδήλωσης επιβίωσης χωρίς (Ρ-EFS) ήταν 67 ± 5% και 34 ± 9% και στις δύο ομάδες) (Σχήμα 4 α).

Οι ασθενείς χωρίστηκαν σε δύο ομάδες ανάλογα με στρωματικά έκφραση PDGFRβ στον όγκο (Α) και οι όγκοι μη-κακοήθεις προστάτη ιστό που περιβάλλει (Β). Σταθερή γραμμή, υψηλή PDGFRβ στο στρώμα του όγκου (≥1.0)? διακεκομμένη γραμμή, χαμηλή PDGFRβ στο στρώμα του όγκου (& lt? 1.0? Α). Σταθερή γραμμή, υψηλή PDGFRβ σε μη κακοήθεις στρώμα (≥0.5)? διακεκομμένη γραμμή, χαμηλής PDGFRβ σε μη κακοήθη στρώμα (& lt? 0.5? Β).

Η

Είναι ενδιαφέρον, υψηλή έκφραση του PDGFRβ στο στρώμα του παρακείμενο φυσιολογικό ιστό του προστάτη συσχετίστηκε επίσης με σημαντικά μειωμένη επιβίωση σε ασθενών που αντιμετωπίζονταν με άγρυπνο αναμονής (15 ετών P-EFS ήταν 68 ± 5% και 41 ± 9% και στις δύο ομάδες)

Υψηλή όγκου και μη κακοήθεις στρώμα PDGFRβ ανοσοχρώση συνδέθηκε (Σχήμα 4 Β). με αυξημένο σχετικό κίνδυνο για καρκίνο του προστάτη ειδικό θάνατο σε ένα μονοπαραγοντική ανάλυση παλινδρόμησης Cox (Πίνακας 2). Στην πολυμεταβλητή ανάλυση παλινδρόμησης Cox συμπεριλαμβανομένης της γνωστής προγνωστικός δείκτης GS και τοπικές στάδιο του όγκου, υψηλές στρωματικά PDGFRβ στον όγκο και μη κακοήθη ιστό δεν ήταν ανεξάρτητος προγνωστικός δείκτης (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Η

Συζήτηση

Η παρούσα αναλύσεις αποκάλυψαν μια σειρά νέων ενώσεων μεταξύ του στρώματος του όγκου καθεστώς PDGFRβ και ιστοπαθολογικά χαρακτηριστικά, συμπεριλαμβανομένων θετικές συσχετίσεις με σκορ Gleason, το στάδιο του όγκου και το μέγεθος του όγκου (Πίνακας 1). Αυτά τα ευρήματα είναι θυμίζουν την κατάσταση που περιγράφεται προσφάτως στον καρκίνο του μαστού, όπου η έκφραση στρωματικών PDGFRβ συσχετίστηκε θετικά με υψηλής ποιότητας [21]. Τα ευρήματα εγείρουν το ζήτημα του υποκείμενου μηχανισμού (s). Όσο για σήμερα, δεν είναι δυνατόν να συμπεράνει κατά πόσον οι ενώσεις που προκαλείται από ένα επιθηλιακό που προκαλείται φαινότυπο στρωματικών ή από επιθηλιακό στρώμα φαινότυπο που προκαλείται.

Οι αναλύσεις της παρούσας μελέτης αποκάλυψε επίσης σημαντικές συσχετίσεις μεταξύ των κλινικών χαρακτηριστικών, συμπεριλαμβανομένων επιβίωση, και την έκφραση του στρωματικά PDGFRβ στη μη κακοήθη παρούσα ιστού (Πίνακας 1). Αυτή η παρατήρηση των προγνωστικά σημαντικές ιδιότητες της μη κακοήθη ιστό προσθέτει σε μια σειρά από παρόμοιες παρατηρήσεις που από κοινού οδήγησαν να προτείνει τον όρο «όγκου υποδεικνύοντας μη κακοήθη ιστό» (TINT), πράγμα που σημαίνει ότι οι αναλύσεις των μη κακοήθη ιστό του προστάτη μπορεί να αποδώσει προγνωστικές πληροφορίες [2], [10]. Άλλες πρόσφατες μελέτες έχουν παρουσιάσει παρόμοια ευρήματα μετά από αναλύσεις, π.χ. ρΑΚΤ, pEGFR και AR [2], [10], [22]. Από πρακτική άποψη αυτό είναι σημαντικό, δεδομένου ότι πολλές διαγνωστικές βιοψίες δειγματοληψία μόνο μη κακοήθη ιστό.

Η υποκείμενη βιολογία των μεταβολών στην έκφραση στρωματικά PDGFRβ θα πρέπει να διευκρινιστεί καλύτερα. Από την παρούσα ανάλυση δεν είναι σαφές αν οι μεταβολές στη μη κακοήθη ιστό είναι δευτερεύουσες στην παρουσία σχεδόν από κακοήθη ιστό, όπως προτείνεται σε ζωικά μοντέλα [8], ή εάν μάλλον αντανακλά ένα όγκο-ανεκτικό περιβάλλον που συμβάλλει αιτιολογικά προς σχηματισμό περισσότερο κακοηθών όγκων.

Οι αναλύσεις όπως η διπλή χρώση με αSMA και PDGFRβ αντισώματα αποκάλυψε ότι η έκφραση PDGFRβ εμφανίστηκαν σε αSMA -θετικό κύτταρα (Σχήμα 2). Ωστόσο, παρατηρήθηκε επίσης ότι αυτά τα κύτταρα, σε όγκους που σημειώνονται ως έχει μία PDGFRβ-θετικών στρώμα, εμφανίστηκε μαζί με αSMA -θετικό /PDGFRβ-αρνητικά κύτταρα. έτσι Αυτά τα ευρήματα επεξηγούν σαφώς την μοριακή ετερογένεια μεταξύ των κυττάρων του μη-κακοήθη fibromusclar στρώματος και του ομοιάζουν με ινοβλάστη στρώματος του όγκου. Παρόμοια ευρήματα έχουν γίνει σε πειραματικούς όγκους [23]. Όπως προτείνεται και από άλλους [24], τα ευρήματα θα πρέπει να ενθαρρύνει σε μια βελτιωμένη ταξινόμηση αυτών των υποσυνόλων και συνέχισε αναλύσεις της λειτουργικής σημασίας τους.

Οι συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης υψηλή στρωματικών PDGFRβ και μικρότερη επιβίωση υποδεικνύουν ότι αυτός ο υποδοχέας είναι αιτιολογικά που συνδέονται με την κλινική πορεία της νόσου και ως εκ τούτου προτείνει επίσης τη στόχευση των υποδοχέων PDGF για θεραπευτικούς σκοπούς. Ορισμένες μικρότερες μελέτες έχουν αναφερθεί όπου το imatinib έχουν χρησιμοποιηθεί σε καρκίνο του προστάτη χωρίς προφανή αποτελέσματα [25], [26]. Τα ευρήματα από την παρούσα μελέτη, που αποδεικνύει μεγάλες διακυμάνσεις στην έκφραση στρωματικά PDGFRβ, δείχνουν ότι οι μελλοντικές μελέτες που αξιολογούν αυτήν την προσέγγιση θα απαιτήσει αυστηρότερες διαδικασίες για την επιλογή των ασθενών. Στο πλαίσιο αυτό, μπορεί επίσης να σημειωθεί ότι η έκφραση των επιθηλιακών PDGFRβ ήταν σπανίως ανιχνεύεται σε αυτή τη μελέτη (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Επιπλέον, δεν παρατηρήθηκαν συσχετίσεις μεταξύ αυτής της έκφρασης και κλινικών ή ιστοπαθολογικών χαρακτηριστικών.

Μια σειρά θεμάτων για μελλοντικές μελέτες προτείνονται από τα παρόντα ευρήματα. Πειραματικές μελέτες που περιλαμβάνουν συν-καλλιέργειες επιθηλιακών και στρωματικών κυττάρων θα πρέπει να βοηθήσει να διευκρινιστεί αν οι στρώμα-επιθηλιακά ενώσεις έχουν κυρίαρχο μηχανιστική βάση τους στην στρωματικά ή επιθηλιακά διαμέρισμα. Ένα άλλο ενδιαφέρον θέμα για μελλοντικές μελέτες θα ήταν να διερευνήσει σε ποιο βαθμό η στρωματικών και επιθηλιακών φαινότυποι συνδέονται με γονίδια κίνδυνο καρκίνου του προστάτη μεμονωμένα. Τέλος, συνέχισε αναλύσεις που απαιτείται για να καταλάβουμε αν οι σχετίζονται με όγκους παραλλαγές στο μη κακοήθη ιστό είναι η αιτία ή συνέπεια του σχηματισμού όγκου. Προσεκτική ιστού αναλύσεις σε προοπτικές μελέτες ενδέχεται να απαιτείται να διευκρινιστεί αυτό το θέμα.

Υλικά και Μέθοδοι

Οι ασθενείς και οι μικροσυστοιχίες ιστού

δείγματα ιστών συλλέχθηκαν από ασθενείς που υποβλήθηκαν σε διουρηθρική εκτομή του του προστάτη (TURP) στο νοσοκομείο σε Västerås, Σουηδία, μεταξύ 1975 και 1991. η ιστολογική ανάλυση έδειξε παρουσία καρκίνου του προστάτη. Η διάμεση ηλικία κατά την διουρηθρική προστατεκτομή ήταν 74 έτη (εύρος 51-95 έτη). Πληροφορίες σχετικά με την απουσία ή την παρουσία της καλοήθους υπερπλασίας του προστάτη δεν ήταν διαθέσιμο. Δείγματα ιστού μονιμοποιηθεί με φορμαλίνη και έχει εμπεδωθεί με παραφίνη που ακολουθείται από την υποβάθμιση σύμφωνα με το σύστημα Gleason. Τα δείγματα που χρησιμοποιούνται για την κατασκευή ενός ιστού micro array (ΤΜΑ) χρησιμοποιώντας ένα μέσο Beecher (Sun Prairie, WI, USA). Η TMA: s περιείχε 5-8 δείγματα ιστού του όγκου που αντιπροσωπεύει τόσο την πρωτοβάθμια και δευτεροβάθμια βαθμίδα Gleason και 4 δείγματα μη κακοήθη ιστό από κάθε ασθενή. Οι ασθενείς που δεν είχαν λάβει καμία θεραπεία κατά του καρκίνου πριν από διουρηθρική προστατεκτομή. Ραδιόφωνο σπινθηρογράφημα οστών ραδιονουκλεϊδίων έγινε λίγο μετά τη διάγνωση για την ανίχνευση μεταστάσεων. Υπήρχαν 377 ασθενείς που συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη, από τα οποία 293 ασθενείς παρακολουθήθηκαν με προσεκτικής αναμονής μετά από διουρηθρική προστατεκτομή. Στο συμπτώματα από μεταστάσεις ασθενείς έλαβαν παρηγορητική θεραπεία με ανδρογόνων και σε ακτινοθεραπεία μερικές περιπτώσεις ή θεραπεία με οιστρογόνα, σύμφωνα με τις παραδόσεις της θεραπείας στη Σουηδία κατά τη διάρκεια αυτού του χρόνου. Επίσης, 84 ασθενείς που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με ανακουφιστική θεραπεία αμέσως μετά τη διάγνωση αναλύθηκαν. Η διάμεση συνολική επιβίωση για την ομάδα των ασθενών που ακολουθείται με άγρυπνο αναμονής ήταν 5,6 χρόνια. Ενενήντα δύο από τα δείγματα TURP βαθμολογήθηκαν ως αποτέλεσμα Gleason (GS) 4-5, 107 ασθενείς όπως η GS 6, 63 ασθενείς είχαν GS 7, και 115 ασθενείς GS 8-10. 3 ασθενείς (4,1%) με το GS 6, 4 ασθενείς (8,2%) με το GS 7, και 33 ασθενείς (33,7%) με GS 8-10 είχαν οστικές μεταστάσεις κατά τη διάγνωση. Τον Αύγουστο του 2003, 36 ασθενείς (9,5%) ήταν ακόμη ζωντανοί, 131 ασθενείς (34,7%) είχαν πεθάνει από καρκίνο του προστάτη και 210 ασθενείς (55,7%) είχαν αποβιώσει από άλλα αίτια. Το υλικό συλλέχθηκε σύμφωνα με τη σουηδική κανονισμούς σε μια εποχή που δεν ήταν απαραίτητη συγκατάθεση. Η έρευνα επιτροπή δεοντολογίας σε Umeå πανεπιστημιακό νοσοκομείο (Περιφερειακό Ηθική Διοικητικού κριτική στο Umeå) ενέκρινε τη μελέτη και παραιτήθηκε από την ανάγκη για συναίνεση.

Σε αυτό το υλικό που έχουμε ήδη αναλύσει τους παράγοντες των πιθανών προγνωστική σημασία, όπως σκορ Gleason, όγκος του όγκου, το στάδιο του όγκου, τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων και των αγγειακών πυκνότητας και τα δεδομένα που ελήφθησαν τώρα που σχετίζονται με τις τρέχουσες PDGFRβ διαπιστώσεις [2], [27].

PDGFRβ ανοσοϊστοχημεία

PDGFRβ ανοσοϊστοχημεία εκτελέστηκε όπως περιγράφεται στο Nupponen

et al

2008 [28]. Anti- PDGFRβ (μονοκλωνικό κουνέλι, # 3169, Cell Signaling Technology, Danvers, ΜΑ, USA) χρησιμοποιήθηκε σε συγκέντρωση 2 μg /ml. Η ένταση χρώσης βαθμολογήθηκε ξεχωριστά σε στρώμα και γύρω από τα αιμοφόρα ως αρνητικό (μηδέν), ασθενές (1), μέτρια (2) ή ισχυρά (3). Η βαθμολογία χρώση PDGFRβ είναι οι μέσες τιμές πέντε έως οκτώ σκόραρε δείγματα καρκινικού ιστού ή τέσσερα γκολ δείγματα καλοήθη ιστό. Για την ανάλυση συσχέτισης τα δείγματα βαθμολογήθηκαν ως θετικά για PDGFRβ εάν ανιχνεύθηκε χρώση σε τουλάχιστον ένα από τους πυρήνες ΤΜΑ.

ανοσοφθορισμού

ανοσοφθορισμού χρώσεις της TMAs διεξήχθη όπως παραπάνω (στην ανοσοϊστοχημεία τμήμα) μέχρι την επώαση με το αντίσωμα αντι-PDGFRβ. Οι τομές μετά πλύθηκαν σε PBS με 0.1% Tween-20 (ΡΒΤ) 3 × 5 λεπτά. Αυτό ακολουθήθηκε από μια επώαση 1 ώρας με το δεύτερο πρωτεύον αντίσωμα, ποντικού μονοκλωνικό αSMA (M0851, κλώνος 1Α4, Dako Cytomation, Glostrup, Δανία) αραιωμένο 1:100 σε 20% ορό κατσίκας σε ΡΒΤ. Μετά από έκπλυση σε PBT για 3 × 5 λεπτά, τα πλακίδια επωάστηκαν με αντίσωμα αντι-ποντικού βιοτινυλιωμένο κατσίκα (E0432, Dako Cytomations 1:500) για 45 λεπτά σε RT. Αυτό ακολουθήθηκε από ένα άλλο 3 × 5 λεπτά πλύσεως εντός ΡΒΤ. Οι πλάκες στη συνέχεια επωάστηκαν με Alexa Flour 488-κατσίκας αντι-κουνελιού δευτερογενές αντίσωμα (A11008, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) αραιωμένο 1:100 σε PBT για 45 λεπτά σε RT. Μετά το πλύσιμο? τα πλακίδια επωάστηκαν για 45 λεπτά με προϊόν σύζευξης Στρεπταβιδίνης-Cy3 (Sigma-Aldrich) αραιωμένο 1:500 σε PBT για 45 λεπτά σε RT. Μετά από πλύση τα πλακίδια ξηράνθηκαν και τοποθετείται με Vectashield μέσο με DAPI (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) τοποθέτησης.

Στατιστικά

Διμεταβλητά συσχετίσεις υπολογίστηκαν με τεστ συσχέτισης κατά Pearson του. Οι συσχετίσεις μεταξύ των κατηγορικών μεταβλητών και συνεχείς μεταβλητές αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας το τεστ συσχέτισης τάξης του Spearman του. Τα δεδομένα συλλέχθηκαν κατά τη στιγμή της διάγνωσης του καρκίνου του προστάτη.

Οι ασθενείς που περιλαμβάνονται στην επιβίωση αναλύσεις με τη μέθοδο Kaplan-Meier και Cox παλινδρόμησης ακολούθησε με άγρυπνο αναμονής. Η διάρκεια της εκδήλωσης επιβίωσης χωρίς (EFS) ορίζεται ως ο χρόνος από διουρηθρική προστατεκτομή μέχρι την ημερομηνία θανάτου από καρκίνο του προστάτη, ο θάνατος της άλλης αιτίας, ή μέχρι την ημερομηνία της τελευταίας παρακολούθησης. Εκδήλωση στην ανάλυση επιβίωσης ορίστηκε ως θανάτου από καρκίνο του προστάτη, δείχνοντας έτσι την ειδική για τον καρκίνο επιβίωση. Οι διαφορές στην έκβαση ελέγχθηκαν με τη δοκιμασία log-rank. Η προγνωστική σημασία της PDGFRβ ανοσοαντιδραστικότητα αξιολογήθηκε με ανάλυση παλινδρόμησης Cox μόνο και σε συνδυασμό με την GS και τοπικά το στάδιο του όγκου. Πιθανότητα επιβίωση χωρίς συμβάντα (P-EFS) παρουσιάζεται ± τυπικό σφάλμα (SE). Το επίπεδο στατιστικής σημαντικότητας ορίστηκε ως

P

& lt? 0,05 (δύο όψεων). Η στατιστική ανάλυση έγινε με τη χρήση του λογισμικού SPSS 17.0.0 για το OS X (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1. έκφραση

PDGFRβ ποικίλλει περιστασιακά εντός του ιστού του προστάτη του ίδιου ασθενούς. Ετερογενή πρότυπα χρώσης PDGFRβ παρατηρήθηκε σε πολλούς όγκους. Α και Β απεικονίζουν διάφορα τμήματα του ίδιου του καρκίνου του προστάτη. μπαρ κλίμακα = 200 μΜ

doi:. 10.1371 /journal.pone.0010747.s001

(7,24 MB EPS)

Ευχαριστίες

Μέλη του εργαστηρίου του Α.Ο. αναγνωρίζονται για τις παραγωγικές και υποστηρικτικές σχόλια σε όλο το πρόγραμμα.