πολυ θεραπείας οδήγησε σε Z μειωμένο ποσό των rac1 DNA σε ηπατικό ιστό. Western blot ανάλυση με βάση αποκάλυψε απώλεια της έκφρασης πρωτεΐνης Rac1 κατά περίπου 757-200, η ​​οποία επιβεβαιώθηκε με ανοσοϊστοχημική ανάλυση. Εκτός του ήπατος, πολυ μεσολάβηση Cre ανασυνδυάση επηρεάζεται rac1 knock-out Παρατηρήθηκε επίσης στο μυελό των οστών, σπλήνα, πνεύμονα, περιφερικό αίμα, την καρδιά και τους νεφρούς, αν και κανένας προφανής απομάκρυνση rac1 ήταν αισθητή στο εσωτερικό του εντέρου και του εγκεφάλου. βλάβη του DNA που προκύπτουν από την αναστολή της τοποϊσομεράσης II θεωρείται ως η πιο σχετική αντικαρκινική μετενέργεια της ανθρακυκλίνης παραπροϊόν doxorubicinand μπορεί επίσης να είναι σημαντική για τη φυσιολογική βλάβη ιστού που οφείλεται σε ανθρακυκλίνες.

Προηγουμένως αποκτήθηκαν in vitro και in vivo δεδομένα έδειξαν ότι Rac1 σηματοδότηση είναι πολύ σημαντικό για doxorubicininduced αποκρίσεις στρες και κυτταρικό θάνατο των ενδοθηλιακών κυττάρων, καθώς και της καρδιάς και ηπατικού ιστού. Εδώ, έχουμε ως στόχο να ελέγχει αυτή τη θεωρία χρησιμοποιώντας την προαναφερόμενη μοντέλο γενετικού ποντικού, η οποία χαρακτηρίζεται από μια πολυ επαγώγιμο ηπατική knockout του rac1. φωσφορυλίωση S139 ιστόνης H2AX, η οποία είναι γενικά αποδεκτό δείκτη του DNA διπλό σκέλος διαλείμματα, ήταν υπό την επίβλεψη, για να αναλύσει τον αντίκτυπο της Rac1 σε οξεία ηπατική βλάβη μετά από θεραπεία δοξορουβικίνη.

Όπως αποδεικνύεται τόσο από τη δυτική blotbased ανάλυση των gH2AX ποσότητες πρωτεΐνης και ανοσοφθορισμού που βασίζεται ανίχνευση gH2AX εστίες, ανακαλύψαμε ότι η ανεπάρκεια Rac1 προστατεύει σημαντικά έναντι doxorubicin όπως αναλύεται 48 και 96 ώρες μετά από εφάπαξ έκθεση σε διάφορες δόσεις του σχηματισμού που προκαλείται δοξορουβικίνη των DSBs. Στο σύνολό τους, Rac1 σηματοδότηση είναι απαραίτητη για την δοξορουβικίνη να προκαλέσει γονοτοξικότητας σε μία οξεία ρύθμιση. Συγκριτικά, IR επαγόμενη ηπατική φωσφορυλίωση gH2AX, το οποίο αναλύθηκε 72 ώρες μετά την ακτινοβολία ολόκληρου του σώματος των ποντικών με 6 Gy, δεν τροποποιήθηκε όταν rac1 διαγράφηκε. Το επίπεδο της gH2AX εστίες ήταν 0. 8-1. 2 εστίες /κύτταρο πέρα ​​από την κατάσταση των ηπατοκυττάρων. Επίσης στις μη-ακτινοβολημένα ζώα, η ποσότητα του ηπατικού gH2AX εστιών ήταν πολύ παρόμοια σε άγριου τύπου και rac1 κατώτερα ζώα.

τιμή ivacaftor

Η φήμη επίσης δεν επηρεάζει H2AX φωσφορυλίωση σε παλαιότερες εποχές μετά την ακτινοβόληση. Πάνω από όλα, τα δεδομένα δείχνουν ότι η έλλειψη rac1 δεν οδηγεί σε μια γενική hepatoprotection κατά τις οξείες DNA βλαβερές συνέπειες του γενοτοξίνες. Αρκετά, genoprotection είναι μοναδικό για δοξορουβικίνη και δεν περιλαμβάνει IR. αφορούσαν μεσίτη ορισμένες διαφορές έχουν ήδη παρατηρηθεί μετά από ανθρακυκλίνες και θεραπεία IR της λοβαστατίνη προ-επεξεργασία πλάσματα cellsand. Επίδραση της ηπατικής rac1 νοκ-άουτ στην έκφραση του mRNA της βασικής και γονοτοξικές που προκαλείται από το στρες.

Για να εξετάσει τις συνέπειες της rac1 knock-out για τα βασικά και genotoxininduced mRNA έκφραση των γονιδίων που δραστηριοποιούνται στη ρύθμιση των αποκρίσεων άγχους, μερική προσαρμοσμένη σειρά PCR χρησιμοποιήθηκε. Η κλίμακα αυτή επιτρέπει την ποσοτική ανάλυση της έκφρασης του mRNA του 94 επιλεγμένων γονιδίων που εμπλέκονται στην επιδιόρθωση του DNA, απόκριση βλάβη του DNA, την εξέλιξη του κυτταρικού κύκλου και του θανάτου. Υπό κανονικές συνθήκες, ένα σύνολο επτά γονιδίων βρέθηκε να διαχειρίζεται διαφορετικά σε ιστό ήπατος όταν τα ποντίκια knockout rac1 ζυγίστηκαν κατά τον έλεγχο. Στη συνέχεια, εξετάσαμε την επίδραση της Rac1 στην σοβαρή ηπατική αντίδραση στο στρες που προκλήθηκε από παράγοντες, που είναι, το παράγωγο δοξορουβικίνη ανθρακυκλίνη και η ιονίζουσα ακτινοβολία.

Όπως αποφασίστηκε 48 ώρες μετά θ. Π. Θεραπεία της doxorubicin, Rac1 έλλειψη προκάλεσε αναστολή της δοξορουβικίνης προκάλεσε έκφραση του mRNA του cdkn1a, hspa1b, ICAM1 και topoIIb ενώ αύξησε την έκφραση mRNA του γονιδίου RAD51 επιδιόρθωσης DNA και του αντίστοιχου του κυτταρικού κύκλου wee1 κινάσης. Όσον αφορά επαγόμενη IR αλλαγές στη γονιδιακή έκφραση μετά από 24 ώρες μετά από ΤΒΙ, Rac1 έλλειψη οδήγησε συγκεκριμένα στην ανασταλτικά αποτελέσματα, κυρίως IR έκφραση επάγεται mRNA του DNA των γονιδίων επιδιόρθωσης fen1, topoIIb, WRN και Xpc, το cdkn1a κυτταρικού κύκλου ρυθμιστικών γονιδίων και ccne1 και το γονίδιο σοκ ζεστασιά hspa1b.