Αφηρημένο

Στην παρούσα μελέτη, εξετάσαμε την έκφραση της οστεοποντίνης (OPN), ανβ3 και Pim-1 σε μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) και διερευνήθηκαν οι πιθανές κλινικές επιπτώσεις των προτύπων έκφρασης τους σε NSCLC. Ανοσοϊστοχημική δοκιμασίες χρησιμοποιήθηκαν για να εξεταστεί η έκφραση πρωτεΐνης του ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 σε 208 δείγματα NSCLC και παρακείμενα δείγματα φυσιολογικό πνευμονικό ιστό τους. Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν για την αξιολόγηση των σχέσεων μεταξύ ΟΡΝ, ανβ3 και πρότυπα έκφρασης Pim-1, και την ένωσή τους με τις κλινικές-παθολογικές παράμετροι των ασθενών με NSCLC. Στο NSCLC ιστούς, τα θετικά ποσοστά OPN, ανβ3 και Pim-1 έκφρασης ήταν 67,8% (141/208), 76,0% (158/208) και 58,7% (122/208), αντίστοιχα. Ωστόσο, στις παρακείμενες φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων, τα θετικά ποσοστά ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 ήταν 20,2% (42/208), 24,0% (50/208) και 14,9% (31/208), αντίστοιχα. Οι διαφορές στα θετικούς ρυθμούς έκφρασης ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 μεταξύ NSCLCs και των παρακείμενων φυσιολογικών ιστών του πνεύμονα ήταν όλα σημαντικά (

P

& lt? 0,01). Επιπλέον, η θετική έκφραση του ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLCs σχετίστηκε με μια αύξηση στην παθολογική βαθμό, μετάσταση λεμφαδένα και προηγμένες κλινικές στάδιο (όλα

P

& lt? 0,01). Επιπλέον, οι ενώσεις μεταξύ της έκφρασης του OPN και ανβ3, OPN και Pim-1, και ανβ3 και Pim-1 παρατηρήθηκαν επίσης σε NSCLC ομάδα μας (όλα

P

& lt? 0,01). Οι πρωτεΐνες ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 συχνά υπερεκφράζονται σε NSCLC και σχετίζονται με κάποια κλινικοπαθολογική μεταβλητές που είναι γνωστής προγνωστική σημασία σε NSCLC, γεγονός που υποδηλώνει ότι μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη ή /και την πρόοδο του NSCLC.

Παράθεση: Jin Υ, Tong Dy, Τσεν Ιν, Φενγκ Zy, Yang Jy, Shao Ck, et al. (2012) Η υπερέκφραση του οστεοποντίνη, ανβ3 και Pim-1 συνδεδεμένες με προγνωστικώς Σημαντικές κλινικοπαθολογική μεταβλητές σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 7 (10): e48575. doi: 10.1371 /journal.pone.0048575

Επιμέλεια: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesù, Ιταλία

Ελήφθη: 29 Μαρτίου 2012? Αποδεκτές: 27 του Σεπτεμβρίου, 2012? Δημοσιεύθηκε: 31 Οκτώβρη, 2012

Copyright: © 2012 Jin et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

πρωτοπαθές νεόπλασμα καρκινώματα του πνεύμονα έχουν την υψηλότερη θνησιμότητα ποσοστό οποιουδήποτε κακοήθους όγκου στον κόσμο, και μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) αντιπροσωπεύει το 85% των πρωτογενών καρκίνων του πνεύμονα. Οι περισσότεροι ασθενείς με NSCLC έχουν διαγνωστεί κλινικά σε πιο προχωρημένα στάδια και έχουν ποσοστό επιβίωσης πολύ χαμηλό 5 ετών [1]. Έτσι, η έγκαιρη διάγνωση και έγκαιρη θεραπεία είναι ιδιαίτερα σημαντικές για τη βελτίωση του ποσοστού επιβίωσης. Είναι κοινώς αποδεκτό ότι οι διάφοροι παθογόνοι παράγοντες που εμπλέκονται στην εξέλιξη του NSCLC.

Η οστεοποντίνη (OPN) είναι ένα πολυλειτουργικό εκκρίνεται φωσφορυλιωμένη γλυκοπρωτεΐνη που προάγει την κυτταρική χημειοταξία, την προσκόλληση και τη μετανάστευση. Αυτές οι διαδικασίες μεσολαβούν την εισβολή και τη μετάσταση των καρκινικών κυττάρων και συνδέονται με την εμφάνιση, ανάπτυξη, μετάσταση και την πρόγνωση μιας ποικιλίας τύπων καρκίνου [2], [3], [4]. Πρόσφατες μελέτες έχουν δείξει ότι η ΟΡΝ εμπλέκεται σε NSCLC εξέλιξη και τη μετάσταση μέσω της αλληλεπίδρασης της με τον υποδοχέα ιντεγκρίνης ανβ3 (alphavbeta3) και ΟΡΝ υπερέκφραση σε NSCLC σχετίζεται με την παθολογική στάδιο του όγκου, η οποία είναι μία από τις προγνωστικός δείκτης κακής πρόγνωσης [ ,,,0],5]. Η ηπαρίνη-δεσμευτικών ανβ3 ιντεγκρίνης μεσολαβεί κυττάρου-κυττάρου και προσκόλληση κυττάρου-μήτρας, ρυθμίζει ενδοκυτταρικά μονοπάτια σηματοδότησης και επάγει την ενεργοποίηση των ενζύμων πρωτεΐνης-διάλυση, συμβάλλοντας έτσι στην εξωκυττάρια μήτρα και υπόγειο κυτταρικής μεμβράνης αποδόμηση και την προώθηση της εισβολής και της μετανάστευσης των κυττάρων του όγκου [ ,,,0],6]. Προηγούμενες μελέτες διαπιστώθηκε ότι ανβ3 ανιχνεύεται σε μια ποικιλία τύπων όγκου και σχετίζεται στενά τόσο με την ανάπτυξη των όγκων και του βαθμού κακοήθειας του όγκου [7]. Άλλοι παράγοντες που συνδέονται στενά με τα γονίδια της ρύθμισης του κυτταρικού κύκλου και πολλαπλασιασμού, όπως Pim-1 (PIM-1 ογκογονίδιο), συμμετέχουν επίσης στην ογκογένεση [8]. Σύμφωνα με πληροφορίες, OPN ενεργεί μέσω ιντεγκρίνης ανβ3, η οποία με τη σειρά της ενεργοποιεί την FAK, PI3K, Akt, ΕΚΚ, NF-κΒ και Pim-1 μονοπάτια, συμβάλλοντας έτσι στην μετανάστευση των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα [8]. Ταυτόχρονα, αυτά τα αποτελέσματα προτείνουν ότι ΟΡΝ μεσολαβεί μετανάστευση σε ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα μέσω της ιντεγκρίνης ανβ3, ΡΑΚ, ΡΙ3Κ, Akt, ΕΚΚ, NF-κΒ και μονοπάτια σηματοδότησης Pim-1. Ως εκ τούτου, επιλέξαμε να διερευνήσει περαιτέρω ΟΡΝ, ανβ3 ιντεγκρίνη και Pim-1, τρία εξαρτήματα αυτών των οδών σηματοδότησης, σε αυτή τη μελέτη. Μέχρι σήμερα, όμως, η δυναμική έκφραση του ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLCs και πιθανούς βιολογικούς ρόλους τους στην ογκογένεση του NSCLC δεν έχουν πλήρως καθορισθεί.

Σε αυτή τη μελέτη, ανοσοϊστοχημικές δοκιμασίες χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστεί τα ποσοστά έκφρασης των OPN, ανβ3 και Pim-1 σε 208 δείγματα NSCLC και τα γειτονικά δείγματα φυσιολογικό πνευμονικό ιστό τους. Επιπλέον, οι πιθανές συσχετίσεις μεταξύ των προτύπων έκφρασης των τριών δεικτών και των ενώσεών τους με τα κλινικο-παθολογικών χαρακτηριστικών των ασθενών με NSCLC αξιολογήθηκαν.

Υλικά και Μέθοδοι

Δήλωση Ηθικής

η μελέτη εγκρίθηκε από την Κλινική Επιτροπή Ερευνητικής Δεοντολογίας του τρίτου Ενταγμένο Νοσοκομείο, η Sun Yat-sen University. Γραπτή συγκατάθεση λήφθηκε από κάθε ασθενή, και ακολούθησαν οι ηθικές κατευθυντήριες γραμμές, όπως περιγράφεται στη Διακήρυξη του Ελσίνκι.

Θέματα

Σε αυτή τη μελέτη, τα δείγματα ελήφθησαν από το αρχειοθετημένο παραφίνη-ενσωματωμένες ιστού τμήματα των 208 συνεχόμενων NSCLC περιπτώσεων που διαγιγνώσκονται στην Τρίτη Συνδεδεμένες Νοσοκομείο, η Sun Yat-sen University, Guangzhou, Κίνα, από την 1η Ιανουαρίου 2008 έως 31 Δεκεμβρίου 2010. Δίπλα φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων από την κάθε περίπτωση χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Σε αυτή την ομάδα NSCLC, 147 ασθενείς ήταν άνδρες και 61 ασθενείς ήταν γυναίκες, με μέση ηλικία 60 έτη (εύρος 30 έως 82 ετών). Σύμφωνα με τα κριτήρια του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας του καρκίνου του πνεύμονα που δημοσιεύθηκε το 2004 [9], η ιστολογία του NSCLC ομάδα μας ταξινομούνται ως εξής: αδενοκαρκίνωμα: 110 περιπτώσεις, καρκίνωμα πλακώδους κυττάρου: 61 περιπτώσεις, και άλλων τύπων: 37 περιπτώσεις? καλά διαφοροποιημένο καρκίνωμα: 65 περιπτώσεις, μέτρια διαφοροποιημένο καρκίνωμα: 70 περιπτώσεις, και κακώς διαφοροποιημένο καρκίνωμα: 73 περιπτώσεις. Σύμφωνα με το σύστημα ΤΝΜ από τη Διεθνή Ένωση για τη Μελέτη του καρκίνου του πνεύμονα [10], 87 περιπτώσεις ήταν σταδίου Ι, 59 περιπτώσεις ήταν σταδίου ΙΙ, 42 περιπτώσεις ήταν σταδίου ΙΙΙ και 20 περιπτώσεις ήταν σταδίου IV.

Η ανοσοϊστοχημεία

Ανοσοϊστοχημική τεχνικές που χρησιμοποιούν στρεπταβιδίνης-υπεροξειδάσης (SP) χρησιμοποιήθηκαν για OPN, ανβ3 και ανίχνευση Pim-1. αντι-ανθρώπινα μονοκλωνικά αντισώματα Έτοιμο προς χρήση ποντικού έναντι ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1, και κιτ S-P αγοράστηκαν από Maxim βιολογικές και τεχνική εταιρεία, Fuzhou, Κίνα. Όλες οι τομές συνήθως αποπαραφινοποιήθηκαν και επανυδατώθηκαν, ξεπλύθηκαν σε φωσφορικό ρυθμιστικό αλατούχο διάλυμα (PBS, ρΗ 7.4) και υποβλήθηκε σε επεξεργασία για ανάκτηση αντιγόνου. Τα τμήματα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία σε ρυθμιστικό EDTA (ρΗ 8.0) σε αυτόκλειστο αποστειρωτή. Μετά από ψύξη σε θερμοκρασία δωματίου για 20 λεπτά, οι τομές ξεπλύθηκαν σε PBS στη συνέχεια βυθίζεται σε 3% Η

2O

2 για 15 λεπτά για να εμποδίσει την ενδογενή δραστηριότητα του ενζύμου. Μετά την έκπλυση με PBS, οι τομές επωάστηκαν με φυσιολογικό ορό κατσίκας σε 37 ° C για 15 λεπτά για να εμποδίζουν δέσμευση μη ειδικών αντισωμάτων. Μετά την επώαση με τα πρωτογενή αντισώματα (ΟΡΝ, ανβ3 και μονοκλωνικά αντισώματα Pim-1), οι τομές ξεπλύθηκαν σε PBS, επωάστηκαν με βιοτινυλιωμένα δευτερογενή αντισώματα και ξεπλύθηκε με PBS και πάλι. Μετά οι τομές επωάστηκαν με στρεπταβιδίνη-ΗΚΡ και ξεπλένονται με PBS, οι τομές οπτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας 3,3′-διαμινοβενζιδίνη και αντίθετα με αιματοξυλίνη. Τέλος, οι τομές αφυδατώθηκαν, transparented, που καλύπτεται με καλυπτρίδες και σφραγισμένο με ουδέτερο κόμμι. PBS χωρίς πρωτογενές αντίσωμα χρησιμοποιήθηκε ως αρνητικός έλεγχος.

Τα αποτελέσματα των ανοσοϊστοχημικών δοκιμασιών αξιολογήθηκαν από τρεις από τους συγγραφείς (Jin Υ, Chen JN και Shao CK). Θετική OPN και Pim-1 έκφραση παρατηρήθηκε στο κυτταρόπλασμα ως ένα καφέ-κίτρινο χρώμα, ενώ ανβ3 βρισκόταν τόσο στο κυτταρόπλασμα και της κυτταρικής μεμβράνης ως ένα καφέ-κίτρινο χρώμα. Μόνο τα κύτταρα με ένα σαφές κυτταροπλασματική και /ή μεμβρανώδη χρώση θεωρήθηκαν ως θετικές. Για κάθε περίπτωση, ένα σύνολο 10 τυχαία επιλεγμένα πεδία υψηλής ισχύος (400 Χ) αξιολογήθηκαν και το ποσοστό των κυττάρων που έδειξαν θετική χρώση ποσοτικοποιήθηκε. Για να ελαχιστοποιηθεί-ατομικές διαφορές ερμηνείας, η μέση βαθμολογία των τριών παρατηρητών χρησιμοποιήθηκε για ανάλυση. Ένας όγκος ή φυσιολογικό ιστό στον οποίο περισσότερο από 10% των κυττάρων ήταν θετικά χρωματισμένων ταξινομήθηκε ως θετικός [11], [12], [13]. Ένας όγκος ή φυσιολογικού ιστού, με λιγότερο από το 10% θετικά χρωματισμένα κύτταρα ταξινομήθηκε ως αρνητική.

Η στατιστική ανάλυση

Οι εκφράσεις των τριών δεικτών (OPN, ανβ3 και Pim-1) παρουσιάστηκαν σε η παρούσα μελέτη, όπως διχοτόμηση (θετικό /αρνητικό), και αναλύθηκαν ως διχοτομική μεταβλητές. Chi-τετράγωνο τεστ χρησιμοποιήθηκαν για τη σύγκριση των ποσοστών εκφράσεως του ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLCs και των παρακείμενων φυσιολογικών ιστών των πνευμόνων τους, καθώς και τις ενώσεις μεταξύ της έκφρασης του OPN, ανβ3 και Pim-1 και τα κλινικο-παθολογική παραμέτρους των ασθενών με NSCLC. Οι ενώσεις ανάμεσα σε δύο μεταβλητές αξιολογήθηκαν επίσης από τις δοκιμές chi-τετράγωνο. Οι διαφορές θεωρήθηκαν στατιστικά σημαντικές σε

σ

-τιμή μικρότερη από 0.05. Όλα τα

σ

-τιμές που παρουσιάζονται σε αυτή τη μελέτη είναι διπλής όψης. Τα δεδομένα αναλύθηκαν με τη βοήθεια υπολογιστή SPSS13.0 στατιστικό λογισμικό.

Αποτελέσματα

Η έκφραση της OPN και σύνδεσης της με τις κλινικο-παθολογικές παραμέτρους του NSCLC ασθενείς

Η έκφραση του OPN σε ιστούς NSCLC ήταν κυρίως κυτταροπλασματική (Σχήμα 1Α-C). Στη μελέτη μας, 141 208 (67,8%) περιπτώσεις NSCLC έδειξε θετική έκφραση της OPN, ενώ το θετικό ρυθμό έκφρασης OPN σε παρακείμενες φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων ήταν 20,2% (42/208). Η διαφορά μεταξύ της έκφρασης του OPN σε ιστούς NSCLC και των παρακείμενων φυσιολογικών ιστών του πνεύμονα ήταν σημαντική (

P

& lt? 0,01, Πίνακας 1). Περαιτέρω αναλύσεις έδειξαν ότι η έκφραση του OPN συσχετίστηκε σημαντικά με τη διαφοροποίηση βαθμός όγκου, μετάσταση λεμφαδένα και κλινική σταδιοποίηση σε ασθενείς με NSCLC (

P

& lt? 0,01). Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του OPN και μακρινή μετάσταση σε ασθενείς με ΜΜΚΠ ήταν οριακά στατιστικά σημαντική (

P

= 0,05). Ωστόσο, η έκφραση OPN δεν συσχετίστηκε με άλλα μελετημένα κλινικο- παθολογικών παραμέτρων (

P

& gt? 0,05, Πίνακας 2).

OPN εκφράζεται στο κυτταρόπλασμα και εμφανίζεται είτε ως κίτρινο ή Μπράουν κίτρινος. Θετική έκφραση του OPN ανιχνεύθηκε σε πλακώδες καρκίνωμα (Α) και ένα αδενοκαρκίνωμα (Β) του πνεύμονα, αλλά όχι στο γειτονικό φυσιολογικό ιστό πνεύμονα (C). ανβ3 εκφράζεται σε κυτταρική μεμβράνη και κυτόπλασμα και εμφανίζεται είτε ως κίτρινο ή καφέ-κίτρινο. ανβ3 είναι θετική σε διαφορετικό πλακώδες καρκίνωμα (D) και ένα αδενοκαρκίνωμα (Ε) του πνεύμονα, αλλά όχι στο γειτονικό φυσιολογικό ιστό πνεύμονα (F). Η έκφραση του Pim-1 είναι κυρίως κυτταροπλασματική. Pim-1 είναι θετική σε πλακώδες καρκίνωμα (G) και ενός αδενοκαρκινώματος (H) του πνεύμονα, αλλά όχι στο γειτονικό φυσιολογικό ιστό πνεύμονα (Ι) (SP 20 × 10).

Η

Έκφραση ανβ3 και η σύνδεσή της με τις κλινικο- παθολογικών παραμέτρων των NSCLC ασθενών

NSCLCs, παρατηρήσαμε ότι η πρωτεΐνη ανβ3 εκφράζεται κυρίως στην κυτταρική μεμβράνη ή κυτόπλασμα (Σχήμα 1 D-F). Ο θετικός ρυθμός της ανβ3 έκφραση σε NSCLCs ήταν 76,0% (158/208), η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από ό, τι σε γειτονικές φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων (24,0%, 50/208) (

P

& lt? 0,01, Πίνακας 1) . Επιπλέον, η έκφραση της ανβ3 επίσης θετικά με ιστοπαθολογικές διαφοροποίηση, λεμφαδένας μεταστατική κατάσταση και το κλινικό στάδιο (

P

& lt? 0,01, Πίνακας 2).

Η έκφραση του Pim-1 και σύνδεσή της με τα κλινικο-παθολογικών παραμέτρων των ασθενών με NSCLC

Pim-1 έκφραση παρατηρήθηκε κυρίως στο κυτταρόπλασμα (Σχήμα 1G-I). Στο NSCLC ομάδα μας, 122 από τους 208 (58,7%) περιπτώσεις έδειξε θετική έκφραση του Pim-1, ενώ το θετικό ρυθμό Pim-1 έκφραση σε φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων ήταν 14,9% (31/208). Η διαφορά μεταξύ Pim-1 έκφραση σε ιστούς NSCLC και φυσιολογικούς ιστούς των πνευμόνων ήταν σημαντική (

P

& lt? 0,01, Πίνακας 1). Επιπλέον, η έκφραση του Pim-1 συσχετίστηκε σημαντικά με το βαθμό διαφοροποίησης, μετάσταση λεμφαδένα, απομακρυσμένη μετάσταση και την κλινική σταδιοποίηση σε ιστούς NSCLC (

P

& lt? 0,01), αλλά δεν παρατηρήθηκαν συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης Pim-1 και άλλων μελέτησαν κλινικο-παθολογική παραμέτρους (

P

& gt? 0,05, Πίνακας 2).

Ενώσεις μεταξύ των προτύπων έκφρασης πρωτεΐνης του ΟΡΝ, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLCs

στη μελέτη μας, οι πιθανές συσχετίσεις μεταξύ των προτύπων έκφρασης πρωτεΐνης OPN, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLCs περαιτέρω αξιολόγηση. 89,4% (126/141) των όγκων θετικά σε OPN ήταν επίσης ανβ3-θετικά και 52,2% (35/67) OPN αρνητικούς όγκους ήταν ανβ3 αρνητική. Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του OPN και ανβ3 ήταν στατιστικώς σημαντική (

P

& lt? 0,01, Πίνακας 3). Εκτός αυτού, 72,3% (102/141) των όγκων θετικών για OPN ήταν θετικά για Pim-1, και 70,1% (47/67) των όγκων αρνητικό σε OPN ήταν επίσης Pim-1 αρνητική. Η συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης του OPN και Pim-1 ήταν επίσης στατιστικά σημαντική (

P

& lt? 0.01, Πίνακας 4). Επιπλέον, το 66,5% (105/158) των όγκων θετικών για ανβ3 ήταν θετικά για Pim-1, και 66% (33/50) των όγκων αρνητικά για ανβ3 ήταν επίσης Pim-1 αρνητική. Μια ένωση μεταξύ της έκφρασης της ανβ3 και παρατηρήθηκε επίσης Pim-1 (

P

& lt? 0.01, Πίνακας 5).

Η

Η

Συζήτηση

είναι καθιερωμένη ότι ο κακοήθης μετασχηματισμός των κυττάρων απαιτεί αλλαγές του γονιδίου φαινότυπο και την αγγειογένεση. OPN θεωρείται ότι είναι ο πιο σημαντικός παράγοντας για τον κακοήθη μετασχηματισμό. ΟΡΝ, επίσης γνωστή ως μετασχηματισμός σχετίζεται πρωτεϊνική φωσφατάση, είναι μια εξωκυτταρική μήτρα που εκκρίνεται φωσφορυλιωμένη γλυκοπρωτεΐνη που αρχικά βρέθηκε από Senger και συνεργάτες [14] σε επιθηλιακά κύτταρα που είχαν υποβληθεί σε κακοήθη μετασχηματισμό. Τα τελευταία χρόνια, πρόσθετες μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι η υπερέκφραση του ΟΡΝ μπορεί να προωθήσει την ανάπτυξη του όγκου, εισβολή και /ή μετάσταση [3].

Προηγουμένως, είχε αναφερθεί ότι η έκφραση του OPN παρατηρήθηκε στο 68,8% των περιπτώσεων NSCLC [15]. Άλλες ομάδες ανέφεραν ότι η έκφραση ΟΡΝ συσχετίστηκε με την ανάπτυξη όγκου, σταδιοποίηση όγκου και λεμφαδένων εισβολή των ασθενών με NSCLC [16]. Στη παρούσα μελέτη μας, ο ρυθμός έκφρασης πρωτεΐνης σε OPN NSCLCs προσδιορίστηκε να είναι 67,8%, ενώ μόνο το 20,2% των φυσιολογικών ιστών του πνεύμονα εκφράζεται ΟΡΝ πρωτεΐνη, υποδηλώνοντας ότι η έκφραση ΟΡΝ μπορεί να παρέχει ένα επιλεκτικό πλεονέκτημα για την ανάπτυξη του NSCLC. Περαιτέρω στατιστική ανάλυση έδειξε ότι η έκφραση OPN συσχετίζεται στενά με το βαθμό διαφοροποίησης των NSCLC, λεμφαδένα μετάσταση και η κλινική σταδιοποίηση, αλλά ότι ήταν ανεξάρτητη από άλλες κλινικο-παθολογικών παραμέτρων των NSCLCs. Επιπλέον, η έκφραση OPN παρατηρήθηκε συχνότερα σε ανεπαρκώς διαφοροποιημένο καρκίνους, όγκους με μετάσταση λεμφαδένα ή /και των όγκων των προηγμένων κλινικό στάδιο (III /IV). Μια τρέχουσα μελέτη δείχνει ότι ΟΡΝ μπορεί να παράγει μία έντονη επίδραση μέσω δέσμευσης σε υποδοχείς επί ενδοθηλιακών κυττάρων των κυτταρικών μεμβρανών. Μετά OPN πρόσδεση σε υποδοχείς, όπως οι ιντεγκρίνες ανβ3, μπορεί να διεγείρουν άμεσα τη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα, και μπορεί να ρυθμίζει την γένεση και τη μετανάστευση των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα, αυξάνουν την αγγειακή διαπερατότητα, να αλλάξει την εξωκυτταρική μήτρα, επάγουν αγγειογένεση, ενεργοποιούν ενδοκυτταρικά μονοπάτια σηματοδότησης και την προώθηση της ανάπτυξης των NSCLC [17]. Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι η αυξημένη έκφραση του OPN μπορεί να διευκολύνουν την ανάπτυξη ή /και την πρόοδο των NSCLC, και είναι πιθανό ότι ΟΡΝ θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί είτε ως θεραπευτικό στόχο ή ένα βιοδείκτη για NSCLC στο μέλλον.

Υψηλή έκφραση ΟΡΝ σε NSCLC μπορεί να προκύψει από ρύθμιση της από παράγοντες μεταγραφής όπως ανβ3 και Pim-1. Προηγούμενες μελέτες έχουν αποδείξει ότι το ανβ3 ρυθμίζει την έκφραση του Pim-1 και του VEGF, και μεσολαβεί αγγειογένεση όγκου μέσω των οδών ΡΙ3 /ΑΚΤ σηματοδότησης. Κατά συνέπεια, θα προωθήσει επίσης την έκφραση του OPN [18], [19]. Πρόσφατα, έχει αναφερθεί ότι η υπερέκφραση της ανβ3 ιντεγκρίνης συνδέεται με έναν επιθετικό φαινότυπο σε διάφορους τύπους συμπαγούς όγκου [20], [21]. Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι το ποσοστό έκφρασης της ανβ3 ήταν 76,0% το NSCLC ιστούς, η οποία ήταν σημαντικά υψηλότερη από ό, τι σε φυσιολογικούς ιστούς πνεύμονα (24,0%), γεγονός που υποδηλώνει ότι ανβ3 μπορεί να εμπλέκονται στην ανάπτυξη του NSCLC. Επιπλέον, στατιστικές αναλύσεις έδειξαν ότι η πρωτεΐνη έκφραση της ανβ3 συσχετιζόταν θετικά με το βαθμό διαφοροποίησης του NSCLC, μετάσταση λεμφαδένα και την κλινική σταδιοποίηση. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν περαιτέρω ότι η έκφραση της ανβ3 μπορεί να εμπλέκονται στην ανάπτυξη του NSCLC, καθώς και ο βαθμός κακοήθειας, εισβολή και μετάσταση του NSCLC. Ένας πιθανός μοριακός μηχανισμός που μπορεί να εξηγήσει πώς ανβ3 προάγει την ανάπτυξη του NSCLC είναι ο ρόλος που παίζει ανβ3 ιντεγκρίνης σε προαγωγή αγγειογένεσης και της προσκόλλησης κυττάρου-μήτρας [22]. Έτσι, είναι πιθανό ότι ανβ3 χρησιμοποιείται ως σημαντικός δείκτης για την αξιολόγηση του βαθμού των κακοήθων εισβολή σε NSCLC. Είναι επίσης πιθανό ότι ανβ3 χρησιμοποιείται ως υποκατάστατο δείκτη για τη διάγνωση της NSCLC και προγνωστικός της θεραπευτικής ανταπόκρισης μετά από θεραπεία με το αντι-ανβ3 αντίσωμα σε ασθενείς με NSCLC. Ωστόσο, απαιτείται περαιτέρω έρευνα για να καθορίσει την ακρίβειά τους.

Pim-1, ένας πιθανός ογκογονίδιο, βρίσκεται στο χρωμόσωμα 6p21.2 και κωδικοποιεί μια κινάση σερίνης /θρεονίνης [23]. Πρόσφατες μελέτες έχουν επιβεβαιώσει ότι εκφράζεται έντονα σε μια υποομάδα των κακοήθων όγκων [24], [25]. Pim-1 ρυθμίζει τον πολλαπλασιασμό, τη διαφοροποίηση και την απόπτωση των κυττάρων καρκίνου του πνεύμονα [26]. Στη παρούσα μελέτη μας, Pim-1 έκφραση ανιχνεύθηκε στην πλειονότητα των NSCLCs, ενώ Pim-1 έκφραση παρατηρήθηκε σε ένα σημαντικά χαμηλότερο ποσοστό των φυσιολογικών ιστών του πνεύμονα. Το αποτέλεσμα αυτό είναι συνεπές με τα ευρήματα που αναφέρονται από Zhang et al. [27] και He et al. [28]. Έχει τεκμηριωθεί ότι Pim-1 μπορεί να προάγει G2 /M, και ενεργοποιούν την κυτταρική ανάπτυξη, τη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό [8]. Βρήκαμε επίσης ότι η έκφραση της πρωτεΐνης Pim-1 συσχετίζεται με ελάχιστα διαφοροποιημένους ιστούς NSCLC, προχωρημένο κλινικό στάδιο (III /IV) και λεμφαδένα και μακρινή μετάσταση σε σημαντικά υψηλότερα ποσοστά από ό, τι στις αρχές κλινικό στάδιο (Ι /ΙΙ) περιπτώσεις NSCLC και όχι λεμφαδένων και ή /και μακρινή μετάσταση. Με βάση αυτά τα συλλογικά αποτελέσματα, προτείνουμε ότι Pim-1 μπορεί επίσης να εμπλέκεται στην ογκογένεση ή /και την εξέλιξη των NSCLC.

Σε αυτή τη μελέτη, η στατιστική ανάλυση έδειξε ότι υπήρχε μια ισχυρή θετική-θετική συσχέτιση μεταξύ της έκφραση της OPN και ανβ3. Προτάθηκε ότι OPN δρα μέσω της ιντεγκρίνης ανβ3, η οποία με τη σειρά της ενεργοποιεί την FAK μονοπάτια και συμβάλλει περαιτέρω σηματοδότησης στην υπερέκφραση της ανβ3 [29]. Άλλες ομάδες διαπίστωσε επίσης ότι ΟΡΝ εμπλέκεται τόσο στην ανάπτυξη των όγκων και την αγγειογένεση του καρκίνου του πνεύμονα με up-ρύθμιση του αγγειακού ενδοθηλίου μετανάστευση των κυττάρων και τον πολλαπλασιασμό μέσω της αλληλεπίδρασής της με ανβ3 ιντεγκρίνης [30]. Προς τα πάνω ρύθμιση OPN ενεργοποιεί ειδικά την δραστικότητα του υποδοχέα ανβ3 ιντεγκρίνης, η οποία μπορεί να επιταχύνει την αγγειογένεση των όγκων και επάγει την ενεργοποίηση μιας ποικιλίας κινασών όπως Pim-1, ΡΙ3Κ και ΑΚΤ [18], [19]. Ως εκ τούτου, τα υψηλότερα επίπεδα έκφρασης OPN μπορεί να ανυψώσει την έκφραση της ανβ3 και Pim-1 από την ενεργοποίηση της πρόσθετης μονοπάτια σηματοδότησης. Στη παρούσα μελέτη μας, η έκφραση του OPN, ανβ3 και Pim-1 σε NSCLC συνδέθηκαν με το άλλο. Ως εκ τούτου, τα αποτελέσματα μας, μαζί με τα ευρήματα από άλλες ομάδες, δείχνουν ότι ΟΡΝ παίζει έναν κρίσιμο ρόλο για την ανάπτυξη ή /και την πρόοδο του καρκίνου του όγκου ανθρώπινου πνεύμονα με την αλληλεπίδραση με ανβ3 ιντεγκρίνη και την ενεργοποίηση Pim-1 μέσω πρόσθετων οδών σηματοδότησης [18], [19 ], [23], [29], με αποτέλεσμα την υπερέκφραση της OPN, ανβ3 και Pim-1.

Εν κατακλείδι, η παρούσα μελέτη είναι η πρώτη έρευνα αξιολόγησης της σχέσης μεταξύ οστεοποντίνη, ανβ3 και Pim- 1, και την ένωσή τους με τις κλινικές-παθολογικές παραμέτρους του NSCLC. Αν και όλες οι αναλύσεις ήταν μονοπαραγοντική, η παρούσα μελέτη έδειξε ότι τα ΟΡΝ, πρωτεΐνες ανβ3 και Pim-1 συχνά υπερεκφράζονται σε NSCLC και συνδέονται με μερικές κλινικοπαθολογική μεταβλητές οι οποίες είναι γνωστές προγνωστική σημασία σε NSCLC, γεγονός που υποδηλώνει ότι μπορεί να παίζει ένα σημαντικό ρόλο στην η ανάπτυξη ή /και την πρόοδο της NSCLC. Στόχευση την αλληλεπίδραση μεταξύ ΟΡΝ, ανβ3 και /ή Pim-1 μπορεί να είναι αποτελεσματική για τη μελλοντική ανάπτυξη της αντι-αγγειογόνου θεραπευτικοί παράγοντες για τους ασθενείς με NSCLC.