Αφηρημένο

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών (EOC) είναι συνήθως ανακαλύφθηκε μετά από εκτεταμένη μετάσταση έχουν αναπτυχθεί στην περιτοναϊκή κοιλότητα. Η επιφάνεια των ωοθηκών είναι εκτεθειμένη σε περιτοναϊκό υγρό πιέσεις και δυνάμεις διάτμησης λόγω των συνεχών περισταλτικές κινήσεις του γαστρεντερικού συστήματος, δημιουργώντας ένα μηχανικό μικρο-περιβάλλον για τα κύτταρα. Ένα

in vitro

πειραματικό μοντέλο αναπτύχθηκε για να εκθέσει τα κύτταρα του ΕΓΚ σε σταθερή ροή που προκαλείται από πιέσεις του ρευστού τοιχείου (WSS). Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν ΕΓΚ από OVCAR-3 κυτταρική γραμμή απογυμνωμένη αμνιακό μεμβράνες σε ειδικές υποδοχές. Wall διατμητικές τάσεις των 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2 εφαρμόστηκαν στην επιφάνεια των κυττάρων κάτω από συνθήκες που μιμούνται το φυσιολογικό περιβάλλον, που ακολουθείται από φθορίζουσες κηλίδες ακτίνης και

β-τουμπουλίνης

ίνες. Η απόκριση κυτταροσκελετός να WSS περιλαμβάνονται επιμήκυνση των κυττάρων, σχηματισμό ινών στρες και την παραγωγή των μικροσωληνίσκων. Πιο κυτταροσκελετικές συστατικά που παράγονται από τα κύτταρα και διατεταγμένα σε ένα πυκνότερο και πιο οργανωμένη δομή εντός του κυτταροπλάσματος. Αυτό υποδηλώνει ότι η WSS μπορεί να έχει ένα σημαντικό ρόλο στη μηχανική ρύθμιση του ΕΓΚ περιτοναϊκή διασπορά

Παράθεση:. Avraham-Chakim L, Elad D, Ζαρέτσκι U, Κίοοβ Υ, Jaffa Α, Grisaru D (2013) αδιαπέρατο από υγρό προκαλούνται από τη ροή Wall Shear Stress και επιθηλιακά καρκίνου των ωοθηκών περιτοναϊκή Διάδοση. PLoS ONE 8 (4): e60965. doi: 10.1371 /journal.pone.0060965

Συντάκτης: Gil Ast, Πανεπιστήμιο του Τελ Αβίβ, Ισραήλ

Ελήφθη: 18 του Δεκεμβρίου, 2012? Αποδεκτές: 5 Μαρ 2013? Δημοσιεύθηκε: 10, Απριλίου, 2013

Copyright: © 2013 Avraham-Chakim et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο χρηματοδοτήθηκε εν μέρει από μια επιχορήγηση από το Ισραήλ του Καρκίνου. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου. Καμία πρόσθετη εξωτερική χρηματοδότηση ελήφθη για τη μελέτη αυτή

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών (EOC) είναι η πέμπτη συχνότερη αιτία των θανάτων από καρκίνο μεταξύ των γυναικών, και έχει την υψηλότερη αναλογία θανάτων στη περίπτωση όλων των γυναικολογικών κακοηθειών. Η ανάπτυξη της EOC ξεκινά από το επιφανειακό επιθήλιο και ακολουθείται από επιθετική πολλαπλασιασμό των κυττάρων ΕΓΚ μέσα στην ωοθήκη. Οι μεταστάσεις του ΕΓΚ που σχηματίζονται νωρίς στη διαδικασία της νόσου με τη διάδοση των κυττάρων ΕΓΚ κυρίως στην περιτοναϊκή κοιλότητα. Η επιφάνεια των ωοθηκών είναι συνεχώς εκτεθειμένα στο περιτοναϊκό υγρό πιέσεις και δυνάμεις διάτμησης λόγω των εντέρων περισταλτικές κινήσεις. Αυτή η μηχανική μικρο-περιβάλλον υποτέθηκε να είναι ένας σημαντικός παράγοντας που ελέγχει τα πρότυπα των όγκων εξαπλώνεται [1], [2].

μηχανικά ερεθίσματα, όπως τονίζει τοιχείου (WSS) έχουν αποδειχθεί ότι επηρεάζουν πολλές κυτταρικές διαδικασίες όπως ως κυτταρικό πολλαπλασιασμό, κυτταροσκελετού αναδιαμόρφωση, την προσκόλληση και τη μετανάστευση σε διάφορους τύπους κυττάρων, και σε γενικές γραμμές μελέτησε με ενδοθηλιακά κύτταρα [3]. Πειράματα που διεξήχθησαν με καλλιεργημένα καρκινικά κύτταρα (π.χ., του παχέος εντέρου, των ωοθηκών, της ουροδόχου κύστης, του οισοφάγου, μελάνωμα) αποκάλυψε ότι μηχανικά ερεθίσματα όπως πίεση ή ροή ρευστού επηρεάζουν την πρόσφυση των καρκινικών κυττάρων »[2], [4], [5], [6], [ ,,,0],7], [8], η μετανάστευση [4], [9], καδερίνες και ιντεγκρίνες έκφραση [10], [11], ικανότητα εισβολής [11], [12], η μορφολογία [12], [13] και η βιωσιμότητα [14 ]. Πολλές μελέτες διερεύνησαν την επίδραση της ροής του αίματος στις ιδιότητες προσκόλλησης των κυκλοφορούντων μεταστατικών κυττάρων [4], [5], [7], [10], [11], [12], [13], [14]. Ωστόσο, δεν υπάρχουν ούτε

in vivo

ούτε

in vitro

μελέτες σχετικά με τις επιδράσεις της επαγόμενης ροής WSS υγρών στα κύτταρα του ΕΓΚ.

Οι ακριβείς μηχανισμοί με τους οποίους τα κύτταρα ΕΓΚ διεισδύσουν στο η ωοθήκη και την εξάπλωση στο περιτόναιο δεν έχουν ακόμη πλήρως ανακαλυφθεί. Από την άλλη πλευρά, είναι καλά αποδεκτό ότι ο κυτταροσκελετός είναι το πιο σημαντικό κυτταρική δομή που μπορεί να διανέμουν μηχανικές δυνάμεις σε όλο το κύτταρο για τη διατήρηση της κυτταρικής δομής και ακεραιότητας. Συνεπώς, σε αυτή τη μελέτη διερευνήσαμε τις μεταβολές στο κυτταροσκελετό των ανθρώπινων κυττάρων EOC σε απόκριση προς προκαλούμενη από τη ροή του ρευστού WSS κάτω από συνθήκες που προσομοιώνουν το φυσιολογικό περιβάλλον στην περιτοναϊκή κοιλότητα.

Υλικά και Μέθοδοι

Έχουμε αναπτύξει ένα

in vitro

μοντέλο ανθρώπινων κυττάρων ΕΓΚ με καλλιέργεια OVCAR-3 κυτταρική γραμμή σε ένα απογυμνωμένη αμνιακής μεμβράνης (AM) με τη χρήση ειδικών πηγάδια που μπορεί να αποσυναρμολογηθεί ώστε να επιτραπεί instalation του πυθμένα καλά με το cultued κύτταρα EOC σε ένα θάλαμο ροής για πειράματα υγρό μέσα στο οποίο WSS επάγονται στην κορυφή των κυττάρων.

Cell Culture

τα κύτταρα EOC καλλιεργήθηκαν από την κυτταρική σειρά OVCAR-3 (American Type Culture Collection (ATCC), Virginia, USA). Ήταν καλλιεργήθηκαν σε Roswell Park Memorial Institute (RPMI) -1640 μέσο συμπληρωμένο με ορό εμβρύου μόσχου (FBS), 5% διάλυμα διττανθρακικού νατρίου, ρυθμιστικό 1 Μ Hepes, διάλυμα γλυκόζης 25%, 100 mM διάλυμα πυροσταφυλικό νάτριο, 10.000 U /mL πενικιλλίνη G και 10 mg /ml θειική στρεπτομυκίνη με 1250 U /ml Nystatin, και 4 mg /ml insullin βοοειδών. Τα κύτταρα πρώτα καλλιεργήθηκαν σε πλαστικές φιάλες, και φτάνοντας 70-90% συρροή (συνήθως μετά από 2-3 ημέρες) θρυψινοποιήθηκαν (Θρυψίνη EDTA 0,25%, διάλυμα Α).

Για τα πειράματα ροής καλλιεργήσαμε ο κύτταρα EOC στην απογυμνωμένη ΑΜ, το οποίο συλλέχθηκε από όρος πλακούντες και απογυμνώθηκαν από το στρώμα των επιθηλιακών κυττάρων, όπως περιγράφεται σε μια προηγούμενη μελέτη [15]. Η απογυμνωμένη ΑΜ είναι ένα παχύ εξω-κυτταρική μεμβράνη κατασκευασμένη από ένα μη αγγειακό στρώμα που περιέχει κολλαγόνο και ινονεκτίνη. Έχει μεγάλες δυνατότητες κυτταρικής προσκόλλησης, καλές μηχανικές ιδιότητες, και ως εκ τούτου, είναι ένα κατάλληλο υπόστρωμα για την καλλιέργεια κυττάρων EOC για την έκθεση σε επαγόμενη ροή WSS ρευστού. Η χρήση τροπολογίες από ανθρώπινο πλακούντα εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του Τελ Αβίβ Sourasky Medical Center (# 06/376) και οι δωρητές έδωσε γραπτή συγκατάθεση. Η ΟΑΜ εγκαταστάθηκε σε ειδικά σχεδιασμένα πηγάδια που μπορεί να αποσυναρμολογηθεί σε υπο-μονάδες για την τοποθέτηση των καλλιεργημένων κυττάρων σε ένα θάλαμο ροής δοκιμής, και στη συνέχεια, εκ νέου συναρμολογούνται για περαιτέρω επώαση ή βιολογικές δοκιμές [16]. Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν EOC στην απογυμνωμένη AM αποκάλυψε την ίδια εμφάνιση καλλιέργεια ενός στρώματος σε συρροή και η τακτική καλλιέργεια σε πλαστικές φιάλες, όπως φαίνεται στο Σχ. 1. Μετά το καλλιεργημένο στρώμα των κυττάρων ΕΓΚ επιτεύχθηκε συρροή στην ΑΜ (δηλαδή, μέσα σε 5 ημέρες), το καλά αποσυναρμολογήθηκε σε υπο-μονάδες, ώστε να καταστεί δυνατή εγκατάσταση του πυθμένα καλά με τα καλλιεργημένα κύτταρα στο θάλαμο ροής.

(Α) σε πλαστική φιάλη, 3 ημέρες μετά την σπορά. (Β) Σε αμνιακής μεμβράνης σε ειδικές εκβαθύνσεις, 4 ημέρες μετά την σπορά (50 K κύτταρα ανά φρεάτιο). Φάση αντίθεση οπτικό μικροσκόπιο. Μεγέθυνση:. X10

Η

In vitro Εφαρμογή της Wall Shear Stress σε καλλιεργημένα κύτταρα

Ένα ειδικό θάλαμο ροής αναπτύχθηκε για την άμεση εφαρμογή της επαγόμενης ροής WSS ρευστού σε μια μονοστιβάδα καλλιεργημένα κύτταρα ΕΓΚ . Ο θάλαμος ήταν ένα 17 cm μήκος ορθογώνιο αγωγό με διατομή 28 mm × 1 mm που συνδέεται με μία αντλία σε ένα κλειστό κύκλωμα (Εικ. 2α). Ο θάλαμος ροής σχεδιάστηκε για να κρατήσει 3 πυθμένες καλά με καλλιεργημένα κύτταρα, προκειμένου να μειωθεί το μήκος ενός μόνο πειράματος και για το γεγονός ότι πολλαπλά βιολογικά δείγματα για στατιστική ανάλυση με λίγες επαναλήψεις. Η αντλία θα μπορούσε να δημιουργήσει σταθερούς ρυθμούς ροής μέχρι του 2,52 L /min (ColeParmer, EW-07012-20) με ένα ομοιόμορφο πεδίο των διατμητικών δυνάμεων στην επιφάνεια των κυττάρων. Το μέσο ανάπτυξης των κυττάρων χρησιμοποιήθηκε ως το υγρό στο σύστημα. δυναμικό ιξώδες του υποτέθηκε παρόμοια με αυτή του νερού,

μ

= 0,0007 N⋅s /m

2. Ο χώρος κάτω από τα καλά πυθμένες μέσα στον θάλαμο ροής γέμισε με στατικό μέσο καλλιέργειας που ήταν σε επαφή με το κατώτερο επίπεδο του ΑΜ στο καλά κάτω σε όλα τα πειράματα. Τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν στο πλαίσιο της θερμοκοιτίδας σε περιβαλλοντικές συνθήκες 5% CO2 και 37 ° C (Σχήμα 2β).

Ο θάλαμος ροής μπορεί να κρατήσει 3 πυθμένες καλά. (Β) την κατάρτιση των συστατικών του θαλάμου ροής και τους πυθμένες καλά.

Η

Πρωτόκολλο Πειραματική

Το μέγεθος της WSS στην περιτοναϊκή κοιλότητα θεωρείται πολύ χαμηλό, αλλά άγνωστο. Πρόσφατες προσομοιώσεις υπολογιστικής γαστρεντερικών μοντέλα προβλεπόμενες τιμές WSS στην περιοχή από 0,14 dyne /cm

2 έως 11 dyne /cm

2 [16]. Ως εκ τούτου, εμείς που ισχύουν για τα καλλιεργημένα κύτταρα ΕΓΚ σταθερή ομοιόμορφη WSS 0,5 dyne /cm

2, 1,0 dyne /cm

2 και 1,5 dyne /cm

2 για διάρκεια 30 λεπτών. Υποθέσαμε το πεδίο της WSS να οφείλονται σε στρωτή ροή για ποιο αριθμό Reynolds & lt? 2000, και κατά συνέπεια, υπολογίζεται ο ρυθμός ροής στο κλειστό κύκλωμα χρησιμοποιώντας μια μέθοδο που περιγράφηκε προηγουμένως [17]

Μία παρόμοια ποσότητα. 50.000 κύτταρα ανά φρεάτιο EOC καλλιεργήθηκε για την ΑΜ σε όλες τις καλλιέργειες που χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη. Όλα τα πειράματα πραγματοποιήθηκαν με καλά διαφοροποιημένα EOC κύτταρα που έχουν καλλιεργηθεί για 2-5 ημέρες. Καλλιέργειες ελέγχου για καθένα από τα πειράματα σπάρθηκαν και επωάστηκαν όμοια με τις τόνισε καλλιέργειες, και ορίστηκαν ως καλλιέργειες υπό στατικές συνθήκες, ενώ όλες οι άλλες συνθήκες παραμένουν οι ίδιες. Κάθε πείραμα επαναλήφθηκε 3 φορές με 3 καλά πυθμένες με καλλιεργημένα κύτταρα EOC για τη στατιστική ανάλυση.

Χρώση Κυτταροσκελετού Fibers

Ανοσοϊστοχημική λεκέδες φθορισμού του β-τουμπουλίνης και F-ακτίνης διεξήχθησαν προκειμένου για τον εντοπισμό μορφολογικές και δομικές αλλαγές στην κυτταροσκελετού των κυττάρων. Καθήλωση των κυττάρων πραγματοποιήθηκε με επώαση των καλά πυθμένες με τα κύτταρα σε ένα διάλυμα παραφορμαλδεΰδης 4% επί 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (RT) μετά την απομάκρυνση του μέσου. Στη συνέχεια, διάτρηση κυτταρικής μεμβράνης πραγματοποιήθηκε με επώαση των κυττάρων σε μπλοκ γάιδαρο, μια αραίωση 5% του γαϊδάρου ορού (Jackson Immunoresearch, Suffolk, UK) σε PBST (PBS με 0,05% Tween 20), για 4-5 ώρες σε ένα ταλαντωτή ( 60 RPM) σε RT.

β-τουβουλίνης ίνες βάφτηκαν με επώαση των κυττάρων σε αραίωση 1:500 του πρωτογενούς αντισώματος αντι-β-τουμπουλίνης μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού, την κλωνοποίηση 2.1 (Sigma-Aldrich, Rehovot, Israel) στο μπλοκ γάιδαρος, για 1 ώρα σε ένα ταλαντωτή (60 RPM) σε RT, και στη συνέχεια ολονύκτια επώαση στους 4 ° C. Το επόμενο πρωί, τα κύτταρα πλύθηκαν 3 φορές για 45 λεπτά με το τετράγωνο αραιωτικό (α αραίωση 1:03 του μπλοκ γάιδαρος: PBST) και επωάστηκαν με το δευτερογενές αντίσωμα – γάιδαρος ροδαμίνη δευτερογενές αντίσωμα αντι-ποντικού (Jackson Immunoresearch, Suffolk, UK ) – σε αραίωση 1:400 στο μπλοκ διαλύτη. Τα κύτταρα επωάστηκαν με το δευτερογενές αντίσωμα για 4 ώρες, σε ένα ταλαντωτή σε RT, και στη συνέχεια πλένονται και πάλι 3 φορές για 45 λεπτά με μπλοκ αραιωτικό. ίνες στρες Actin βάφτηκαν μετά από επώαση σε 1:1000 αραίωση ΡΙΤΟ-επισημασμένου Φαλλοϊδίνη (Sigma-Aldrich, Rehovot, Israel) σε PBS, για 20 λεπτά σε ένα ταλαντωτή σε RT και στη συνέχεια πλύθηκαν δύο φορές με PBS.

Μετά την ολοκλήρωση των λεκέδων, οι μεμβράνες αφαιρέθηκαν και τοποθετήθηκαν σε γυάλινες πλάκες μικροσκοπίου. γυαλιά Cover είχαν τοποθετηθεί στους γυάλινες πλάκες χρησιμοποιώντας μία σταγόνα ϋΑΡΙ + γέλης στερέωσης (Santa Cruz Biotechnology, Inc μέσω Enco, Petah Tikva-Ισραήλ), τα οποία χρωματίστηκαν επίσης στον πυρήνα του κυττάρου. Τα κύτταρα εξετάζονται υπό SP5 Leica και Zeiss 410 συνεστιακό μικροσκόπια, χρησιμοποιώντας ένα αντικειμενικό φακό νερό X40.

Ανάλυση Κυτταροσκελετού δομικές αλλαγές

Παρατήρηση

της συνεστιακής εικόνες μετά την έκθεση των πολιτισμών ΕΓΚ με WSS αποκάλυψε κυττάρων επιμήκυνσης από πολυγωνικό και στρογγυλοποιείται στο ελλειψοειδές. Παρόμοια με άλλες μελέτες [13], χαρακτηρίσαμε την ελλειψοειδές σχήμα με αναλογία διαστάσεων το οποίο καθορίζει το σιτηρέσιο μεταξύ των θετικών και αρνητικών διαμέτρους μιας έλλειψης. Χρησιμοποιώντας τις εφαρμογές απεικόνισης των συνεστιακού μικροσκοπίου μετρήσαμε αυτά διαμέτρους που ήταν κάθετες η μία στην άλλη στις εικόνες κύτταρα (Σχ. 3). Ο λόγος διαστάσεων υπολογίστηκε για την εκτίμηση του επιπέδου της επιμήκυνσης των κυττάρων με 1.0 αντιπροσωπεύει έναν κύκλο.

Η

Εκτίμηση μικροσωληνίσκους και σχηματισμού ινών στρες έγινε με παρατήρηση. Τρία επίπεδα ινών στρες ή μικροσωληνίσκους σχηματισμός ορίστηκαν, σύμφωνα με την εμφάνισή τους σε λαμβανόμενων εικόνων (εικ. 4): «Low Level» υποδεικνύει ότι η ακτίνη ή β-τουμπουλίνης βάφτηκαν ευκρινώς στο φλοιώδες δακτύλιο του κυττάρου και σχεδόν τίποτα σε το κύτταρο κέντρο (Εικ. 4AA, 4βα). «Ενδιάμεσο επίπεδο» σημαίνει ότι ως επί το πλείστον προεξοχές, microspikes και θραύσματα actin- ή β-τουμπουλίνης ήταν ορατά (Σχ. 4AB, 4BB). «Υψηλού επιπέδου» υποδηλώνει ότι το μεγαλύτερο μέρος της κεντρικής περιοχής του κυττάρου που περιέχονται ίνες στρες ή μικροσωληνίσκων, με σχεδόν καθόλου θραύσματα ίνες και μικρή χρώση στις περιφερειακές περιοχές του κυττάρου (Εικ. 4ac, 4Bc).

(α) χαμηλό επίπεδο, κυρίως του φλοιού της ακτίνης και σχεδόν καθόλου ίνες στρες, (β) Ενδιάμεσο επίπεδο, ορισμένες ίνες σχηματίζονται, ως επί το πλείστον στο κελί προεξοχές, και (γ) υψηλό επίπεδο, το μεγαλύτερο μέρος της κεντρικής περιοχής του κυττάρου είναι άφθονη με ίνες στρες. (Β) Τρία διαφορετικά επίπεδα σχηματισμού μικροσωληνίσκων: (α) χαμηλό επίπεδο, ως επί το πλείστον β-τουμπουλίνης θραύσματα και σχεδόν καμία κυτταροπλασματική μικροσωληνίσκων, (β) Ενδιάμεσο επίπεδο, κάποιοι μικροσωληνάρια σχηματίστηκαν στο εσωτερικό του κυττάρου, και (γ) υψηλό επίπεδο, ένα πυκνό δίκτυο των μικροσωληνίσκων παρήχθη στο εσωτερικό των κυττάρων.

η

Στατιστική ανάλυση

οι μονόδρομες και αμφίδρομες ανάλυση διακύμανσης (ANOVA, SPSS 11.5.1) ακολουθούμενη από δοκιμή Tukey ήταν χρησιμοποιείται για την εκτέλεση πολλαπλών συγκρίσεων μεταξύ των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται μετά την έκθεση των κυττάρων EOC σε διαφορετικές τάσεις διατμήσεως. Για τα αποτελέσματα του σχηματισμού ινών στρες και μικροσωληνίσκους έγινε ένα τεστ chi-square και η σημασία του σωματείου γραμμικής-από-γραμμική ελέγχθηκε.

Αποτελέσματα

Η παρούσα μελέτη κατέδειξε τις μορφολογικές αλλαγές των κυτταροσκελετική ίνες των κυττάρων ΕΓΚ καλλιεργημένα στην απογυμνωμένη ΑΜ μετά από έκθεση σε WSS ροή ρευστού. Ομοεστιακή εικόνες έδειξαν μετασχηματισμό των κυττάρων σχήμα από πολυγωνικά και στρογγυλεμένες σχήματα για να ελλειψοειδή σχήματα μετά από 30 λεπτά έκθεσης σε WSS (Εικ. 5Α). Οι θετικές και αρνητικές διαμέτρους από 541 κύτταρα (δηλαδή, 136, 64, 223 και 118 κύτταρα για WSS 0,0 (έλεγχος), 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα) μετρήθηκαν και τα αντίστοιχα αναλογίες πτυχή τους ήταν υπολογιστεί. Η μέση αναλογία έχει αυξηθεί κατά 12,4%, 19,2% και 27,8% σε σύγκριση με εκείνη του ελέγχου σε σύγκριση για κύτταρα που εκτίθενται σε WSS 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα. Για τη στατιστική ανάλυση χρησιμοποιήθηκε το λογάριθμο αυτών των αριθμητικών τιμών, επιτρέποντας έτσι να αναλύουν τα αποτελέσματα με μια κανονική κατανομή (Εικ. 5Β). Ο λόγος διαστάσεων αυξήθηκε σημαντικά σε σχέση με την ομάδα ελέγχου, όπως WSS αυξημένη (ρ & lt? 0.001). Μια σημαντική διαφορά υπάρχει, καθώς μεταξύ του 0,5 dyne /cm

2 και τα 1,5 δύνη cm

2 ομάδων, καθώς και μεταξύ του 1,0 δύνη cm

2 και 1,5 δύνη cm

2 ομάδες ///( p & lt? 0,05). Ωστόσο, δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ του 0,5 dyne /cm

2 και το 1 δύνη /cm

2 ίδιων των ομάδων.

Τα βέλη που δείχνουν στο εκπροσωπούν κύτταρα. (Α) καλλιέργεια ελέγχου, (β) 0,5 dyne /cm

2 πολιτισμό, (γ) 1,0 dyne /cm

2 πολιτισμό, και (δ) 1,5 dyne /cm

2 πολιτισμούς. (Β) Μεταβολή της λογαριθμική τιμή του λόγου διαστάσεων που καθορίζουν το επίπεδο της επιμήκυνσης των κυττάρων με το επίπεδο της εφαρμοζόμενης τάσης διάτμησης (± τυπική απόκλιση).

Η

Σχηματισμός ένα παχύ νηματοειδές δίκτυο του στρες ίνες παρατηρήθηκε σε κύτταρα που εκτίθενται σε διάτμηση στρες, σε σύγκριση με καλλιέργειες ελέγχου στις οποίες ακτίνη ήταν παρούσα κυρίως στις περιφερειακές περιοχές του κυττάρου. Παρατηρήσαμε το σχηματισμό ινών στρες σε 640 κύτταρα? 235, 78, 142 και 185 κύτταρα για WSS 0,0 (έλεγχος), 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα. Αντιπροσωπευτικά εικόνες των λεκέδων ακτίνης σε κυτταρικές καλλιέργειες EOC που έχουν εκτεθεί σε διάφορα WSS για 30 λεπτά σε σύγκριση με στατικές καλλιέργειες που παρουσιάζονται στο Σχ. 6Α. Περισσότερες ίνες στρες σχηματίστηκαν μέσα στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων, όπως η WSS αυξήθηκε (Σχ. 6Β). Σε γενικές γραμμές, το ποσοστό των κυττάρων αποδεικνύοντας χαμηλό επίπεδο σχηματισμού ινών στρες μειώθηκε σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, όπως WSS αυξημένη (δηλαδή, από 80% στο στατικό ομάδα σε σύγκριση με 28,1% στο 1,5 dyne cm

2 /ομάδα) . Το ποσοστό των κυττάρων με ένα ενδιάμεσο επίπεδο του σχηματισμού ινών στρες αυξηθεί σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, όπως WSS αυξημένη (δηλαδή, από 18,3% στο στατικό ομάδα να 49,2% το 1,5 dyne cm

2 /ομάδα). Το ποσοστό των κυττάρων με ένα υψηλό επίπεδο σχηματισμού στρες ινών αυξάνει γενικά στα τόνισε ομάδες σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου (δηλαδή, από 1,7% στο στατικό ομάδα σε 22,7% στο 1,5 dyne cm

2 /ομάδα). Chi-square τεστ έδειξαν ότι γραμμικής-by-γραμμική συσχέτιση για αυτά τα αποτελέσματα ήταν στατιστικά σημαντική (ρ & lt? 0.001), που σημαίνει ότι υπήρχε μία γραμμική σχέση μεταξύ του μεγέθους του WSS και το επίπεδο του σχηματισμού ινών στρες και ότι το επίπεδο των ινών στρες σχηματισμός εξαρτάται από το μέγεθος της διατμητικής τάσης.

(α) καλλιέργεια ελέγχου (όχι WSS), (β) κύτταρα που εκτίθενται σε WSS 0,5 dyne /cm

2, (γ) κύτταρα που εκτίθενται σε WSS του 1,0 dyne /cm

2, και τα κύτταρα (δ) εκτίθενται σε WSS 1,5 dyne /cm

2. (Β) Το ποσοστό των κυττάρων σε κάθε ένα από τα τρία επίπεδα του σχηματισμού ινών στρες, για διαφορετικά επίπεδα διατμητικής τάσης. (Γ) Η λογαριθμική μέση αναλογία διαστάσεων της επιμήκυνσης των κυττάρων για κάθε επίπεδο του σχηματισμού ινών στρες (± 2 · τυπικό σφάλμα).

Η

Εμείς διερευνηθεί επίσης τη σχέση μεταξύ του σχηματισμού ινών στρες και την επιμήκυνση των κυττάρων. Για αυτή τη στατιστική ανάλυση, τα μακράς και βραχείας διαμέτρους από 221 κύτταρα (δηλαδή, 110, 13, 62 και 36 κύτταρα για την WSS 0,0 (έλεγχος), 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα, μετρήθηκαν και αντίστοιχες αναλογίες πτυχή τους υπολογίστηκαν για κάθε επίπεδο σχηματισμού ινών στρες, αγνοώντας την τάση διατμήσεως (Εικ. 6C). μια σημαντική διαφορά βρέθηκε μεταξύ της αναλογίας διαστάσεων της ομάδας χαμηλού επιπέδου σχηματισμού ινών στρες (συμβολίζεται «α») και η μέσης και υψηλής ομάδες επιπέδου σχηματισμού ινών στρες (συμβολίζεται «β»), μια & lt? b (p & lt? 0,05). κατά την εξέταση της διατμητικής τάσης καθώς και η αλληλεπίδραση μεταξύ διατμητικής σχηματισμό του στρες και το άγχος ινών (σε σχέση με τις επιπτώσεις τους στο αναλογία) δεν βρέθηκε στατιστικώς σημαντική (ρ & gt?.. 0.05) το αποτέλεσμα αυτό υποδεικνύει ότι η επίδραση του σχηματισμού ινών στρες στις αναλογίες διαστάσεων των επιμήκων κυττάρων ήταν ανεξάρτητη από το επίπεδο των διατμητικής τάσης

Ένα πυκνό και οργανωμένο δίκτυο κυτταροσκελετικών μικροσωληνίσκων παρήχθη μετά την έκθεση των κυττάρων σε διάτμηση στρες, σε σύγκριση με θραύσματα τουμπουλίνης και πλευρική χρώση σε καλλιέργειες ελέγχου. Παρατηρήσαμε το σχηματισμό μικροσωληνίσκων σε 494 κύτταρα? 156, 33, 111 και 194 κύτταρα για WSS 0,0 (έλεγχος), 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα. Αντιπροσωπευτικά εικόνες μικροσωληνίσκων λεκέ σε κυτταρικές καλλιέργειες EOC που έχουν εκτεθεί σε διάφορα WSS για 30 λεπτά σε σύγκριση με στατικές καλλιέργειες που απεικονίζεται στο Σχ. 7Α. Είναι προφανές ότι περισσότερο μικροσωληνάρια σχηματίστηκαν στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων, όπως η αύξηση της WSS (Εικ. 7Β). Σε γενικές γραμμές, το ποσοστό των κυττάρων αποδεικνύοντας χαμηλό επίπεδο σχηματισμού μικροσωληνίσκων μειώθηκε σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου, όπως WSS αυξημένη (δηλαδή, από 84% σε στατικές καλλιέργειες σε 20,6% στο 1,5 dyne cm

2 /ομάδα). Δεν υπήρχε συνεπής συμπεριφορά για το ενδιάμεσο επίπεδο, καθώς το ποσοστό των κυττάρων που αποδεικνύει ένα ενδιάμεσο επίπεδο του σχηματισμού μικροσωληνίσκων αρχικά αυξήθηκε μεταξύ της στατικής και 0,5 dyne /cm

2 ομάδες (δηλαδή, 16% και 63,6%, αντίστοιχα), και στη συνέχεια ήπια μειώθηκε στο 1,0 και 1,5 dyne /cm

2 ομάδες (δηλαδή, 55% και 54,6%, αντίστοιχα). Το ποσοστό των κυττάρων που αποδεικνύει ένα υψηλό επίπεδο σχηματισμού μικροσωληνίσκων αυξήθηκε από 0% σε στατικές και 0,5 dyne cm

2 ομάδες σε σχεδόν 10% στο 1,0 dyne cm

2 /ομάδα /και πάνω από το 24% στο 1,5 /cm

2 ομάδα δύνη. Chi-square test διαπιστώθηκε ότι γραμμικής-by-γραμμική ένωση για αυτά τα αποτελέσματα είναι στατιστικά σημαντική (ρ & lt? 0.001), που σημαίνει ότι υπάρχει μία γραμμική σχέση μεταξύ του μεγέθους των διατμητικής τάσης και του επιπέδου του σχηματισμού μικροσωληνίσκων και ότι το επίπεδο του σχηματισμού μικροσωληνίσκων εξαρτάται σχετικά με το μέγεθος της διατμητικής στρες.

(α) καλλιέργεια ελέγχου (όχι WSS), (β) κύτταρα που εκτίθενται σε WSS 0,5 dyne /cm

2, (γ) κύτταρα που εκτίθενται σε WSS 1,0 dyne /cm

2, και (δ) τα κύτταρα εκτίθενται στο WSS 1,5 dyne /cm

2. (Β) το ποσοστό των κυττάρων σε κάθε ένα από τα τρία επίπεδα του σχηματισμού μικροσωληνίσκων, για διαφορετικά επίπεδα διατμητικής τάσης. (Γ) Η λογαριθμική μέση αναλογία διαστάσεων της επιμήκυνσης των κυττάρων για κάθε επίπεδο του σχηματισμού μικροσωληνίσκων (± 2 · τυπικό σφάλμα).

Η

Η σύνδεση μεταξύ του σχηματισμού μικροσωληνίσκων και επιμήκυνση των κυττάρων αξιολογήθηκε επίσης. Για την ανάλυση αυτή, οι θετικές και αρνητικές διαμέτρους από 191 κύτταρα (δηλαδή, 82, 8, 58 και 43 κύτταρα για την WSS 0,0 (έλεγχος), 0,5, 1,0 και 1,5 dyne /cm

2, αντίστοιχα, μετρήθηκαν και τους που αντιστοιχεί αναλογίες πτυχή υπολογίστηκαν για κάθε επίπεδο του σχηματισμού μικροσωληνίσκων, αγνοώντας την τάση διατμήσεως (Εικ. 7C). μια σημαντική διαφορά βρέθηκε μεταξύ των αναλογιών άποψη της ομάδας χαμηλού επιπέδου σχηματισμού μικροσωληνίσκων (υποδηλούμενο «α») και το ενδιάμεσο και υψηλό ομάδες επιπέδου του σχηματισμού μικροσωληνίσκων (συμβολίζεται «β»), μια & lt? b (p & lt? 0,05). κατά την εξέταση της διατμητικής τάσης καθώς και η αλληλεπίδραση μεταξύ διατμητικής τάσης και του σχηματισμού μικροσωληνίσκων (σε σχέση με την επίδρασή τους στην αναλογία διαστάσεων) βρέθηκε στατιστικά σημαντική (p & lt? 0,05). το συμπέρασμα ήταν ότι η επίδραση του σχηματισμού μικροσωληνίσκων στις αναλογίες διαστάσεων των επιμήκων κυττάρων εξαρτάται από το επίπεδο της διατμητικής τάσης

Συζήτηση

ο καρκίνος των ωοθηκών είναι η. πιο κοινή αιτία θανάτου μεταξύ των γυναικολογικών κακοηθειών και συνήθως διαγιγνώσκεται σε προχωρημένο στάδιο [18]. Τα κύτταρα επιφάνεια EOC εκτίθεται σε περιτοναϊκό υγρό πιέσεις και δυνάμεις διάτμησης λόγω των περισταλτικές κινήσεις του γαστρεντερικού συστήματος, δημιουργώντας ένα μηχανικό μικρο-περιβάλλον για τα κύτταρα [2], [19]. Οι μηχανικά ερεθίσματα όπως WSS αποδειχθεί ότι επηρεάζει πολλές κυτταρικές διεργασίες σε διάφορους τύπους κυττάρων [3]. Η παρούσα εργασία διερευνήθηκαν οι επιδράσεις της WSS για κυτταροσκελετού αναδιαμόρφωση των καλλιεργημένα κύτταρα του ΕΓΚ. Για το σκοπό αυτό έχουμε αναπτύξει ένα νέο μοντέλο ΕΓΚ καλλιεργημένα στην απογυμνωμένη ΑΜ, το οποίο είναι ένα εύκολα προσβάσιμο κολλαγονούχο μεμβράνη και πιο στενά προσομοιώνει την

in vivo

συνθήκες όπου τα κύτταρα αναπτύσσονται σε μη άκαμπτα υποστρώματα. Τα κύτταρα που καλλιεργήθηκαν στην τρέχουσα μελέτη αυξήθηκε ως μονοστιβάδα με το τυπικό πλακόστρωτο-όπως εμφάνιση παρόμοια με τις καλλιέργειες σε πλαστικές φιάλες σε άλλες μελέτες [20].

Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης έδειξαν ότι η ροή του υγρού που προκαλείται WSS διεγερμένα επιμήκυνση των κυττάρων, σχηματισμό ινών στρες και παραγωγή των μικροσωληνίσκων στα κύτταρα EOC. Οι αναλογίες διαστάσεων των κυττάρων που εκτέθηκαν σε 1,5 dyne /cm

2 σημαντικά αυξημένη σε σύγκριση με εκείνη του 0,5 dyne /cm

2 και 1,0 dyne /cm

2 ομάδες. Επιμήκυνση και ευθυγράμμιση των καλλιεργημένων κυττάρων στην κατεύθυνση της ροής είναι συχνές ανεπιθύμητες της διατμητικής τάσης και έχουν μελετηθεί ευρέως σε ενδοθηλιακά κύτταρα [21], [22], [23]. Επί του παρόντος, ωστόσο, δεν παρατηρήθηκε ευθυγράμμιση κυττάρων στην κατεύθυνση της ροής. Αυτό μπορεί να είναι το αποτέλεσμα της σχετικά σύντομο χρονικό διάστημα της έκθεσης των κυττάρων σε WSS. Ενώ τα κύτταρα στην παρούσα μελέτη είχαν εκτεθεί σε WSS για 30 λεπτά, κύτταρο ευθυγράμμιση σε σχέση με μια συγκεκριμένη κατεύθυνση αποδείχθηκε σε άλλους τύπους κυττάρων μόνο μετά από 24 ώρες έκθεσης σε WSS [21], [22], [23], [ ,,,0],24]. Θα πρέπει να σημειωθεί ότι η επιμήκυνση των κυττάρων αναφέρθηκε να συμβεί μετά από πολύ μικρότερο χρόνο έκθεσης σε διάτμηση στρες [13], [23]. Η προαναφερθείσα αντίδραση των ενδοθηλιακών κυττάρων σε WSS (δηλαδή, επιμήκυνση και προσανατολισμός στην κατεύθυνση της ροής) αλλαγή σχήματος υποτέθηκε κυττάρου-ειδική, δεδομένου ότι δεν παρατηρήθηκε σε κύτταρα λείων μυών και ρινικών επιθηλιακών κυττάρων [25], [26], [27 ]. Η παρούσα αποτέλεσμα μπορεί επίσης να σχετίζεται με την ελαστικότητα του αμνιακού mambrene κατά την οποία τα κύτταρα του ΕΓΚ καλλιεργήθηκαν. Έχει αναφερθεί στο παρελθόν ότι η ανταπόκριση των κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των κυτταροσκελετικών αναδιαμόρφωση, εξαρτώνται από την ακαμψία και ελαστικότητα των υποστρωμάτων τους [28].

Μια ενδιαφέρουσα διανομή του λεκέ ακτίνης παρατηρήθηκε υπό έκθεση σε WSS. Στατικές καλλιέργειες αποδεικνύεται πυκνή περιφερειακές ζώνες της ακτίνης, ενώ οι κεντρικές ίνες στρες ήταν λιγοστές. Ωστόσο, στα κύτταρα που εκτίθενται σε WSS ένας νηματοειδής δίκτυο ακτίνης σχηματίστηκε στο εσωτερικό του κυττάρου που σχετίζεται γραμμικά με το μέγεθος της διατμητικής τάσης. Τα αποτελέσματα αυτά υποδηλώνουν ότι η διατμητική τάση επηρεάζει την ακτίνη του κυτταροσκελετού των κυττάρων του ΕΓΚ. σχηματισμός ινών στρες επηρεάζει επίσης την αναλογία διαστάσεων, ωστόσο, αυτό το αποτέλεσμα δεν εξαρτάται από το επίπεδο της διατμητικής τάσης. Παρόμοιες αλλαγές στο σχήμα των κυττάρων και δομική οργάνωση παρατηρήθηκαν επίσης σε

καλλιεργημένα

ενδοθηλιακών κυττάρων, η οποία εμφανίστηκε πολυγωνικά με λίγες ίνες στρες υπό στατικές συνθήκες, ενώ τα κύτταρα που εκτίθενται σε WSS αναπτύξει πολλές ίνες στρες και σε μεταγενέστερο στάδιο επίσης επιμήκη [24], [29], [30], [31], [32], [33], [34]. Ένα παρόμοιο αποτέλεσμα του WSS επάγεται ακτίνη τουμπουλίνης αναδιαμόρφωση παρατηρήθηκε επίσης σε μεταστατικό καρκίνο του οισοφάγου κύτταρα [11]. Από την άλλη πλευρά, τα κύτταρα καρκινώματος κόλου που εκτίθενται σε διατμητική τάση του 2,4 dyne /cm

2 για 45 λεπτά κατέδειξε μειωμένο σχηματισμό στρες ακτίνης χωρίς επιμήκυνση κατά μήκος της κατεύθυνσης της ροής [35].

Η παρούσα μελέτη απέδειξε ο σχηματισμός των κυτταροπλασματικών μικροσωληνίσκων σε κύτταρα τόνισε, με την παραγωγή ενός κεντρικού, νηματοειδείς δίκτυο των μικροσωληνίσκων σε σύγκριση με στατικά κύτταρα στα οποία τα θραύσματα των μικροσωληνίσκων εντοπίζεται κυρίως περιφερειακά. σχηματισμός μικροσωληνίσκοι επηρεάζει τις αναλογίες διαστάσεων των τόνισε κυττάρων και αυτή η επίδραση εξαρτάται από το επίπεδο του WSS. Ένα παρόμοιο αποτέλεσμα των πυκνότερα και περισσότερο σταθεροποιημένη μικροσωληνίσκων στο κυτταρόπλασμα και γύρω από τον πυρήνα του κυττάρου παρατηρήθηκε επίσης σε ενδοθηλιακά κύτταρα που εκτίθενται σε σταθερή WSS 15-20 dyne /cm

2 για 24 ώρες επέδειξε [22], [36] , [37]. Είναι αξιοσημείωτο ότι η σταθερή WSS εφαρμόζεται ρινικά επιθηλιακά κύτταρα που επάγεται μικροσωληνίσκους κατακερματισμό, ενώ ταλαντωτική WSS οδήγησε σε ένα δίκτυο πιο οργανωμένη και νηματοειδείς μικροσωληνίσκων στο κυτταρόπλασμα, συμπεριλαμβανομένης της παραγωγής νέων μικροσωληνίσκων [17], [25]. Σε μια άλλη μελέτη, μεταστατικό καρκίνο του οισοφάγου κύτταρα που εκτέθηκαν σε φλεβική ρυθμό διάτμησης 200 για 30 λεπτά έδειξε ταχύ πολυμερισμό και trans-θέση της τουμπουλίνης προς το μπροστινό άκρο του κυττάρου σε αντίθεση με φλοιώδη εντοπισμός δακτυλίου υπό στατικές συνθήκες [12].

η ενσωμάτωση των αποτελεσμάτων από την παρούσα μελέτη σχετικά με τις κυτταροσκελετού τροποποιήσεις συνεπάγεται ότι η έκθεση των κυττάρων του ΕΓΚ στο WSS μπορεί να προκαλέσει την κίνηση των κυττάρων. Το πρώτο βήμα στην κυτταρική κινητικότητα παρουσιάζεται όταν το κύτταρο εκτείνεται προεξοχές όπως filopodia και ελασματοπόδια στην κατεύθυνση της κίνησής του με ακτίνη πολυμερισμού στην αιχμή. Πολλά από τα κύτταρα στην παρούσα μελέτη έδειξε το σχηματισμό προεξοχών ακτίνης, ειδικά σε κύτταρα για τα οποία παρατηρήθηκε ένα ενδιάμεσο επίπεδο σχηματισμού ινών στρες (για παράδειγμα, στο Σχ. 6Α και 6C). Από ίνες στρες είναι σημαντικές για τις συσταλτικές δραστηριότητες μιας κινητικών κυττάρων, η παραγωγή των περισσοτέρων ινών στρες από τα κύτταρα μπορεί να υποδεικνύει ότι το κύτταρο σύρεται προς τα εμπρός ως μέρος της διαδικασίας κινητικότητας. ίνες στρες μπορεί επίσης να έχει ένα σημαντικό ρόλο στην κυτταρική προσκόλληση στο εξωκυττάριο μήτρα μέσω ιντεγκρίνες που σχηματίζουν τα εστιακές συμφύσεις κατά την κίνηση των κυττάρων. Μικροσωληνίσκους και αλληλεπιδράσεις ακτίνης των μικροσωληνίσκων μπορεί επίσης να έχει σημαντικό ρόλο στην κυτταρική κινητικότητα [38]. Τα κύτταρα που έλαβαν θεραπεία με μικροσωληνίσκους παράγοντες αποπολυμερισμού χάσουν πολωμένο την εμφάνισή τους και να κάνουν προεξοχές ταυτόχρονα σε όλη την περίμετρο τους. Μια άθικτη κυτταροσκελετού μικροσωληνίσκων ήταν απαραίτητη προκειμένου να διατηρηθεί η πολωμένη κατανομή των προεξοχών ακτίνης εξαρτάται βρίσκονται στην αιχμή ενός ινοβλαστών μεταναστευτική [39].

Τα καρκινικά κύτταρα καλλιεργούνται σε τρισδιάστατες μήτρες έχουν αποδείξει επιμήκη και στρογγυλεμένες μορφολογίες ως αποτέλεσμα των μεσεγχυματικών και αμοιβαδοειδή μεταναστεύσεις, αντίστοιχα. Στην παρούσα μελέτη, η μέση αναλογία διαστάσεων του επιμήκους κυττάρων αποδεικνύοντας χαμηλό επίπεδο σχηματισμού στρες ινών ήταν σημαντικά μικρότερη από εκείνη των κυττάρων αποδεικνύοντας ενδιάμεσα και τα υψηλά επίπεδα του σχηματισμού ινών στρες. Τα αποτελέσματα αυτά μπορεί να υποδηλώνουν ότι τα κύτταρα ΕΓΚ χρησιμοποιούν λειτουργία μεσεγχυματικά της κυτταρικής μετανάστευσης, ως αποτέλεσμα της έκθεσης σε WSS, και ως εκ τούτου επιμήκη. Επιμήκη κύτταρα έχουν προεξέχοντα μεμβράνη στην αιχμή και η μορφή της ιντεγκρίνης που εξαρτώνται από συμφύσεις με το υπόστρωμα [40]. Επιπλέον, η αναστολή πολυμερισμού της ακτίνης και της τουμπουλίνης καταστέλλει μετανάστευση των καρκινικών κυττάρων, η οποία υποστηρίζει το γεγονός ότι ο πολυμερισμός της ακτίνης και της τουμπουλίνης είναι απαραίτητη για την κυτταρική κινητικότητα [41]. Ωστόσο, μια πρόσφατη μελέτη έδειξε ότι η παρεμβολή με δυναμική ακτίνη είναι πιο αποτελεσματική στην αναστολή ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων των ωοθηκών κινητικότητα από διαταραχή της λειτουργίας των μικροσωληνίσκων [42]. Τα στοιχεία αυτά μας υπόθεση που WSS επάγει κυτταρική κινητικότητα σε κύτταρα του ΕΓΚ. Αυτή η επίδραση της WSS μπορεί να έχει μια σημαντική σύνδεση με τις διαδικασίες του sheading και μεταστατική εξάπλωση επιθηλιακού καρκίνου των ωοθηκών. θεραπεία του καρκίνου που κατευθύνονται προς μικροσωληνίσκους και δυναμική πολυμερισμού ακτίνης θα μπορούσε να είναι μια χρήσιμη προσέγγιση για την αναστολή της κινητικής των κυττάρων και η προκύπτουσα περιτοναϊκή μεταστατική εξάπλωση.

Εν κατακλείδι, η παρούσα μελέτη παρέχει για πρώτη φορά δεδομένα σχετικά με τροποποιήσεις κυτταροσκελετού στα κύτταρα του ΕΓΚ εκτίθενται σε ροή ρευστού που προκαλείται WSS, οι οποίες αναμένεται στην περιτοναϊκή κοιλότητα. Η απόκριση κυτταροσκελετός να WSS ήταν σαφής και σημαντική, ειδικά σε υψηλότερες μεγέθη των WSS, και περιελάμβανε επιμήκυνση των κυττάρων, σχηματισμό ινών στρες και την παραγωγή των μικροσωληνίσκων τα οποία είναι απαραίτητα κυτταρικά συστατικά για τη μετακίνηση των κυττάρων. Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η μηχανική περιβάλλον ΕΓΚ έχουν σημαντικό ρόλο στον πολλαπλασιασμό και την εξάπλωση και θα πρέπει επίσης να εξεταστούν για την ανάπτυξη θεραπευτικών εργαλείων για την πρόληψη του καρκίνου των ωοθηκών περιτοναϊκή μετάσταση.