Αφηρημένο

Αναιμία του καρκίνου (AC) μπορούν να συμβάλλουν στην κόπωση σχετιζόμενη με τον καρκίνο και να βλάπτουν την ποιότητα της ζωής. Βελτιωμένη κατανόηση της παθογένειας των AC θα μπορούσε να διευκολύνει την καλύτερη θεραπεία, αλλά ζωικά μοντέλα για τη μελέτη AC λείπουν. Εμείς χαρακτηριζόμενη τέσσερις συγγενικούς καρκίνους C57BL /6 ποντίκι που προκαλούν AC. Ποντίκια με δύο διαφορετικές ταχέως αναπτυσσόμενη μεταστατικούς καρκίνους του πνεύμονα αναπτύξει τα χαρακτηριστικά ευρήματα της αναιμίας της φλεγμονής (AI), με δραματικά διαφορετικούς βαθμούς της αναιμίας. Ποντίκια με ταχέως αναπτυσσόμενη μεταστατικό μελάνωμα επίσης αναπτύξει μια σοβαρή αναιμία από 14 ημέρες, με αιματολογικές και φλεγμονώδεις παραμέτρους παρόμοια με AI. Ποντίκια με μια αργή ανάπτυξη του καρκίνου των ωοθηκών περιτοναϊκή ανέπτυξε μια σιδηροπενική αναιμία, πιθανόν δευτερογενώς προς χρονίως μειωμένη διατροφή και αιμορραγία μέσα στην περιτοναϊκή κοιλότητα. Από τα τέσσερα μοντέλα, εψιδίνης επίπεδα mRNA αυξήθηκαν μόνο στην ηπιότερη μοντέλο καρκίνου του πνεύμονα. Σε αντίθεση με το μοντέλο μας της συστηματικής φλεγμονής που προκαλείται από θερμότητα σκότωσε

Brucella abortus

, εκτομή του εψιδίνης στον καρκίνο των ωοθηκών και των ηπιότερες μοντέλα ποντικών με καρκίνο του πνεύμονα δεν επηρέασε την βαρύτητα της αναιμίας. Εψιδίνης-ανεξάρτητοι μηχανισμοί διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο σε αυτά τα μοντέλα ποντικών AC

Παράθεση:. Kim A, Rivera S, D Shprung, Limbrick D, Gabayan V, Νέμεθ E, et al. (2014) Μοντέλα Mouse της αναιμίας του Καρκίνου. PLoS ONE 9 (3): e93283. doi: 10.1371 /journal.pone.0093283

Επιμέλεια: Κώστας Παντόπουλος, Lady Davis Ινστιτούτο Ιατρικών Ερευνών /Πανεπιστήμιο McGill, Καναδάς

Ελήφθη: 20 του Δεκέμβρη 2013? Αποδεκτές: 28 Φεβ 2014? Δημοσιεύθηκε: 28, Μαρτίου του 2014

Copyright: © 2014 Kim et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από ΝΙΗ Πνευμονική & amp? Critical Care Θεσμική Κατάρτισης Grant Τ32 (HL072752) με AK, 09/2008 – 06/2011? και η Roche Ίδρυμα Αναιμία Έρευνα για TG. Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Τ.Ο. και Ε.Ν. είναι συνιδρυτές, μέτοχοι και στελέχη της Εγγενής LifeSciences, μια εταιρεία ανάπτυξης διαγνωστικών εψιδίνης. Ε.Ν. και T.G. κατέχουν τα διπλώματα ευρεσιτεχνίας που σχετίζονται με τη θεραπευτική χρήση των εψιδίνης και τις ρυθμιστικές αρχές της. Παρακαλώ δείτε παρακάτω για λεπτομέρειες των διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας », συμπεριλαμβανομένων των ονομάτων και αριθμών: 1) Ανταγωνιστική κανονισμού της εψιδίνης mRNA από Διαλυτό και κυττάρων-Associated Hemojuvelin (Ganz, Lin, Goldberg) US Patent όχι. 7534764, ημερομηνία έκδοσης 19η Μαΐου 2009 2) Μίνι-εψιδίνης πεπτίδια και μεθόδους χρήσης αυτών (Ganz, Nemeth, Preza, Ruchala) US Patent όχι. 8435941, ημερομηνία έκδοσης 7η Μάη 2013 3) Μέχρι: Erythroferrone και ERFE πολυπεπτίδια και Μέθοδοι Ρύθμισης Iron μεταβολισμού (Ganz, Nemeth) PCT Patent Application Νο PCT /US2013 /67771. Αυτό δεν αλλάζει την τήρηση των συγγραφέων να PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και Υλικά |

Εισαγωγή

Η αναιμία είναι μια εξαιρετικά συχνή επιπλοκή του καρκίνου, που εμφανίζεται σε & gt?. 30% των μη επεξεργασμένων ασθενών [ ,,,0],1]. Η συχνότητα της αναιμίας αυξάνεται περαιτέρω από τη θεραπεία του καρκίνου, συμπεριλαμβανομένης της χημειοθεραπείας και της ακτινοβολίας. Αναιμία του καρκίνου (AC) συσχετίζεται με κακή κατάσταση απόδοσης ΠΟΥ και την ποιότητα ζωής [2], [3]. Η αποτελεσματική θεραπεία του AC μειώνει υποκειμενικής κόπωσης σε ασθενείς με καρκίνο [4]. Εκτός από τις επιπτώσεις στην ποιότητα της ζωής, η παρουσία της ομάδας AC μπορεί να είναι ένας ανεξάρτητος αρνητικός προγνωστικός παράγοντας [5].

Η αιτιολογία της AC είναι πολυπαραγοντική και πιθανόν ποικίλλει ανάλογα με την προέλευση του πρωτογενούς όγκου, καθώς επίσης ως χρονιότητα της εξέλιξης της νόσου. Σημαντικούς παράγοντες που συμβάλλουν περιλαμβάνουν έλλειψη σιδήρου δευτερεύουσα σε αιμορραγία ή διατροφικές ελλείψεις [6], αιμόλυση λόγω ανοσοποιητικό φαινόμενα, την ενεργοποίηση της πήξης καταρρακτών ή ανώμαλη σχετίζονται με τον όγκο αγγείωση [7], εξασθενημένη ερυθροποίηση δευτερογενής σε ανεπαρκή παραγωγή ερυθροποιητίνης ή κατάθλιψη απόκριση του μυελού ερυθροειδών με την ερυθροποιητίνη [8], και την άμεση εισβολή του μυελού από τα καρκινικά κύτταρα με διάσπαση της ερυθροποιητικής περιβάλλοντος. Μια ιδιαίτερα σημαντική συμβολή στο AC είναι η φλεγμονή, όπως μετοχές AC πολλά από τα χαρακτηριστικά της αναιμίας της φλεγμονής (AI). AI είναι ένα νορμοκυτταρική, normochromic αναιμίας με μια συντομευμένη διάρκεια ζωής των ερυθρών αιμοσφαιρίων και την κατάθλιψη ερυθροποίησης. AI χαρακτηρίζεται επίσης από μια διαταραχή της συστηματικής ομοιόστασης του σιδήρου χαρακτηρίζεται από hypoferremia με ακέραια αποθήκες σιδήρου [9] και μειωμένη διαθεσιμότητα του σιδήρου για την παραγωγή των ερυθρών αιμοσφαιρίων.

εψιδίνης, μια 25-αμινοξέων πεπτίδιο ορμόνη που παράγεται κυρίως από ηπατοκύτταρα [ ,,,0],10], είναι ο πρωταρχικός ρυθμιστής της ομοιόστασης του σιδήρου στην υγεία και κατά τη διάρκεια της φλεγμονής [11]. Εψιδίνης δρα με σύνδεση προς φερροπορτίνη, ο μόνος γνωστός κυτταρική εξαγωγέα σιδήρου, εμφανίζεται στην επιφάνεια των κυττάρων που παρέχουν σίδηρο σε πλάσμα: μακροφάγα, ηπατοκύτταρα και εντεροκύτταρα. Εψιδίνης σύνδεση προς φερροπορτίνη οδηγεί σε φερροπορτίνη ενδοκύτωση και αποικοδόμηση [12], τον περιορισμό της ροής του σιδήρου στο πλάσμα και μειώνοντας έτσι τη διαθεσιμότητα του σιδήρου για την ερυθροποίηση. Κατά τη διάρκεια της φλεγμονής, η έκφραση εψιδίνης έντονα επάγεται, σε μεγάλο βαθμό από την IL-6 [13] μέσω της οδού JAK-STAT [14] – [16] και αυτή η περίσσεια εψιδίνης θεωρείται ότι συμβάλλει στην ανάπτυξη της ΓΠ. Είναι ενδιαφέρον ότι, το IL-6 έχει παρατηρηθεί να αυξηθεί σε πολλαπλούς τύπους καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του πνεύμονα [17] και τον καρκίνο των ωοθηκών [18]. Ο βαθμός στον οποίο η αυξημένη παραγωγή εψιδίνης συμβάλλει στην AC δεν έχει δοκιμαστεί άμεσα με γενετική εκτομή της εψιδίνης, εν μέρει λόγω της έλλειψης της μοντέλα ποντικών της AC.

Παρά τον υψηλό επιπολασμό της AC με αρνητικές επιπτώσεις στην ποιότητα της ζωής και της επιβίωσης, έχουν λίγα μοντέλα ζώων έχουν αναπτυχθεί για τη μελέτη της. Έχουμε χαρακτηριζόμενη τέσσερα συγγενικά μοντέλα C567BL /6 ποντικού καρκίνου: δύο ταχέως αναπτυσσόμενη μοντέλα του καρκίνου του πνεύμονα, μία ταχέως αναπτυσσόμενη μοντέλο του μελανώματος, και μία αργή ανάπτυξη μοντέλο καρκίνου των ωοθηκών. Μετά από μια συνολική εξέταση των αιματολογικών, σίδηρο, και φλεγμονώδεις παράμετροι αυτών των μοντέλων, ερευνήσαμε την έκταση της εψιδίνης συμμετοχή στην ανάπτυξη του AC σε δύο από αυτά τα μοντέλα με σύγκριση C57BL /6 ποντικών σε ποντικούς εψιδίνης knockout στο ίδιο υπόβαθρο στελέχους.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Όλες οι εργασίες των ζώων και εκτελέστηκαν σύμφωνα με τις οδηγίες του Πανεπιστημίου της Καλιφόρνια, στο Λος Άντζελες Επιτροπή ζώων Ερευνών (UCLA) καγκελαρίου (ARC) . Ειδική έγκριση για τα πειράματα ποντικού ελήφθη με το πρωτόκολλο # 2008-129-12 με τίτλο «Ο ρόλος της IL-6 και εψιδίνης σε αναιμία του καρκίνου.» Όλες οι εύλογες προσπάθειες έγιναν για τη βελτίωση ταλαιπωρία, συμπεριλαμβανομένης αναισθησία για επώδυνες διαδικασίες.

τα ζωικά μοντέλα της αναιμίας του καρκίνου

Όλες οι μελέτες σε ζώα εγκρίθηκαν από την επιτροπή των ζώων Έρευνας στο Πανεπιστήμιο της Καλιφόρνια, Λος Άντζελες (UCLA). 6-εβδομάδων C57BL /6J ποντικοί ελήφθησαν από την Charles River Laboratories (Wilmington, ΜΑ) ή την Jackson Laboratories (Bar Harbor, ΜΕ). Για τα τρία ταχέως αναπτυσσόμενη μοντέλα καρκίνου, αρσενικό και θηλυκό άγριου τύπου (WT) ποντίκια τοποθετήθηκαν σε ένα δίαιτα σίδηρο επαρκής (20 ppm σιδήρου, Harlan Teklad, Indianapolis, ΙΝ) για 2 εβδομάδες πριν από την έγχυση των κυττάρων όγκου ή αλατούχο διάλυμα. Η ίδια δίαιτα χρησιμοποιήθηκε για το υπόλοιπο του πειράματος. Αυτή η διατροφική του κλιματισμού εφαρμόστηκε, διότι η υψηλή περιεκτικότητα σε σίδηρο από τυπική τροφή (περίπου 7-8 φορές το ημερήσιο απαίτηση) αυξάνει δραματικά την έκφραση εψιδίνης και καθιστά αδιάφορη για φλεγμονώδη ερεθίσματα [19]. Επιπλέον, διατροφικές απορρόφηση του σιδήρου σε ποντικούς αντιπροσωπεύει όσο το 50% των ημερήσιων ροών σιδήρου σε ποντίκια στα οποία χορηγήθηκε τυπική τροφή, αλλά μόνο ~5-10% σε ανθρώπους [20]. Αυτή η αυξημένη διαιτητική απορρόφηση του σιδήρου σε ποντικούς μπορεί να μειωθεί η σχετική συμβολή της ανακύκλωσης σιδήρου από τα μακροφάγα [21] και οδηγεί σε προοδευτική φόρτωση σιδήρου. Έτσι, η μείωση των διαιτητικών περιεκτικότητα σιδήρου στο τροφή ποντικών είχε ως σκοπό να διαμορφώσει ροές σιδήρου της ανθρώπινης ομοιόστασης. Για την αργή ανάπτυξη μοντέλο του καρκίνου των ωοθηκών, θηλυκά ποντίκια διατηρήθηκαν σε σίδηρο επαρκή δίαιτα είτε 20 ppm σιδήρου ή 50 ppm σιδήρου.

Για να δημιουργήσετε ένα μεταστατικό μοντέλο καρκίνου του πνεύμονα, τα ζώα ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκώς (ΙΡ ) με 0,1 × 10

6 – 0,5 × 10

6 ποντικού καρκίνωμα TC-1 ή Lewis πνεύμονα (LLC) κύτταρα (ATCC, Manassas, VA). Επειδή αυτά είναι μεταστατικά καρκινικά κύτταρα, και ερευνά την συστημική απόκριση σε αυτούς τους καρκίνους, επιλέξαμε να εκτελέσει ενέσεις ενδοπεριτοναϊκή αντί επώαση των κυττάρων όγκου σε πρωτογενή όργανο τους. Τα κύτταρα LLC καλλιεργήθηκαν όπως προσκολλημένα κύτταρα σε τροποποιημένο Eagle μέσο Dulbecco (ϋΜΕΜ) (Life Technologies, Grand Island, ΝΥ) συμπληρωμένο με 10% ορό εμβρύου βοός (FBS) και 1% πενικιλλίνη G-στρεπτομυκίνη, και τα κύτταρα TC-1 ήταν καλλιεργήθηκαν όπως προσκολλημένα κύτταρα σε RPMI 1640 (Life Technologies, Grand Island, ΝΥ) συμπληρωμένο με 10% FBS και 1% πενικιλλίνη G-στρεπτομυκίνη. Την ημέρα της θεραπείας, τα καρκινικά κύτταρα επαναιωρηματοποιήθηκαν σε ορό ρυθμισμένο με φωσφορικά (PBS), μετρήθηκαν με ένα Αιματοκυτταρόμετρο, και εγχύθηκε σε ένα όγκο των 500 μL PBS. Τα ποντίκια ελέγχου ενέθηκαν ΙΡ με 500 μL PBS. Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία σε 13-15 ημέρες, και το αίμα, το ήπαρ, και σπλήνα συνελέγησαν κατά τη νεκροψία.

Για το μοντέλο ποντικού της μεταστατικού μελανώματος, τα ζώα ενέθηκαν ΙΡ με 0.1 × 10

6 έως 0,3 × 10

6 Β16-Ρ10 κύτταρα (ATCC, Manassas, VA). Τα κύτταρα Β16-Ρ10 καλλιεργήθηκαν όπως προσκολλημένα κύτταρα σε ϋΜΕΜ (Life Technologies, Grand Island, ΝΥ) συμπληρωμένο με 10% FBS και 1% πενικιλλίνη G-στρεπτομυκίνη. Την ημέρα της θεραπείας, τα καρκινικά κύτταρα επαναιωρήθηκαν σε PBS, μετρήθηκαν με ένα Αιματοκυτταρόμετρο, και εγχύθηκε σε ένα όγκο των 500 μL PBS. Τα ποντίκια ελέγχου ενέθηκαν ΙΡ με 500 μL PBS. Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία στις 14 ημέρες, και το αίμα και το ήπαρ συλλέχθηκαν κατά τη νεκροψία.

Για περιτοναϊκά διαδίδονται καρκίνο των ωοθηκών, τα ζώα ενέθηκαν ΙΡ με 1 × 10

6 ID8 κυττάρων που γενναιόδωρα από τον Dr. Oliver Dorigo. Η μεταστατική κυτταρική γραμμή ID8 προήλθε από αυθόρμητες κακοήθη μετασχηματισμό των κυττάρων των ωοθηκών επιφάνειας επιθηλίου /6 ποντικό C57BL

in vitro

[22]. Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε DMEM συμπληρωμένο με 10% FBS και 1% πενικιλλίνη G-στρεπτομυκίνη. Την ημέρα της θεραπείας, τα καρκινικά κύτταρα επαναιωρήθηκαν σε PBS, μετρήθηκαν με ένα Αιματοκυτταρόμετρο, και εγχύθηκε σε ένα όγκο των 500 μL PBS. Τα ποντίκια ελέγχου ενέθηκαν ΙΡ με 500 μL PBS. Τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε ευθανασία σε 18,5 εβδομάδες.

Για να μελετηθεί ο ρόλος της εψιδίνης σε αναιμία του καρκίνου, χρησιμοποιήσαμε θηλυκό εψιδίνης-1 knockout (HKO) ποντικούς αρσενικούς και για το μοντέλο TC-1, και θηλυκά ποντίκια HKO για το μοντέλο ID8. HKO ποντικοί αρχικά παρέχονται στο εργαστήριο μας από τον Dr. Sophie Vaulont [23] και διασταυρώθηκαν πάνω στο C57BL /6 υπόβαθρο όπως περιγράφηκε προηγουμένως [24]. Για αυτό το τμήμα της μελέτης, τα ποντίκια υποβλήθηκαν σε HKO διαιτητικές κλιματισμού για την πρόληψη της ανάπτυξης της υπερφόρτωσης σιδήρου και να διατηρήσει τα επίπεδα σιδήρου συγκρίσιμα με εκείνα των ποντικών WT. Κατά τον απογαλακτισμό, τα ποντίκια HKO ξεκίνησαν στις δίαιτες μειωμένων-σιδήρου (4 ppm ή 20 ppm) για περίπου 2 εβδομάδες για να αποφευχθεί η μαζική χαρακτηριστικό φόρτωση του σιδήρου αυτού του νοκ-άουτ του ποντικιού. Από τη στιγμή της ένεσης, οι ποντικοί διατηρήθηκαν σε μία δίαιτα σίδερο 20 ppm για το υπόλοιπο της μελέτης. Για το μοντέλο TC-1, HKO ποντίκια ενέθηκαν και σε ευθανασία όπως περιγράφηκε παραπάνω για τα ποντίκια WT. Για το μοντέλο ID8, οι ποντικοί υποβλήθηκαν σε ευθανασία HKO σε 16,5 εβδομάδες.

Μέτρηση των παραμέτρων του σιδήρου και της ερυθροποιητίνης

Serum σιδήρου και συγκεντρώσεις σιδήρου του ήπατος χωρίς αίμη μετρήθηκαν με μία χρωματογραφική ανάλυση για σίδηρο (Sekisui Διάγνωση? Lexington, ΜΑ) όπως περιγράφηκε προηγουμένως [20]

μελέτες Αιματολογικές

Πλήρεις αιματολογικοί έλεγχοι ελήφθησαν με έναν αναλυτή HemaVet αίματος (Drew επιστημονική?. Waterbury, CT). Για να εκτιμηθεί ερυθροποίηση περιορισμένου σιδήρου, πρωτοπορφυρίνη ψευδαργύρου (ΖΡΡ) μετρήθηκε χρησιμοποιώντας ένα hematofluorometer (Ανίν? Lakewood, NJ). Δικτυοερυθροκύτταρα μετρήθηκαν με κυτταρομετρία ροής. Blood (5 μΐ) προστέθηκε σε 1 ml θειαζολίου πορτοκάλι σε PBS με αζίδιο του νατρίου 0,1% (ΡΒδ-αζίδιο, BD Bioscience? San Jose, CA) και επωάστηκαν σε θερμοκρασία δωματίου για 1-3 ώρες. Ως μη-χρωματισμένα ελέγχου, το αίμα προστέθηκε σε ΡΒδ-αζίδιο χωρίς θειαζόλης πορτοκάλι. Το ποσοστό των κόκκινων φθορισμού δικτυοερυθροκύτταρα (Retic%), μετρήθηκε με κυτταρομετρία ροής στο UCLA Jonsson Περιεκτική Κέντρο Καρκίνου (ΜΕΤΣ) και το Κέντρο Έρευνας για το AIDS κυτταρομετρίας ροής πυρήνα Διευκόλυνσης που υποστηρίζεται από Εθνικά Ινστιτούτα βραβεία Υγείας CA-16042 και AI -28697, και από το ΜΕΤΣ, το Ινστιτούτο UCLA AIDS, και την David Geffen της Ιατρικής Σχολής του UCLA. Μη προετοιμασμένο έλεγχοι χρησιμοποιήθηκαν για τη δημιουργία μια πύλη για τον αποκλεισμό φθορισμό υποβάθρου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως ο δείκτης προϊόν δικτυοερυθροκυττάρων:. RPI = Retic% × Hgb /αρχική τιμή Hgb

απομόνωση RNA και πραγματικού χρόνου ποσοτική PCR

Ολικό RNA απομονώθηκε από το ήπαρ και αναλύθηκε με πραγματικού -Time RT-PCR όπως περιγράφηκε προηγουμένως [25].

ποντικού β-ακτίνη χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος mRNA καθαριότητας. Οι εκκινητές που παρατίθενται στον Πίνακα S1

Histocytopathology

Περιφερειακά επιχρίσματα αίματος διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας 10 μL πλήρους αίματος κατά τη στιγμή της νεκροψίας, και παρασκευάζονται με Wright-Giemsa χρώση. (Fisher? Hampton, ΝΗ) .

Στατιστικά

SigmaStat χρησιμοποιήθηκε για όλες τις στατιστικές αναλύσεις (Λογισμικό Systat? Point Richmond, CA). Για το μελάνωμα, ο καρκίνος του πνεύμονα, και εψιδίνης μοντέλα KO, κανονικά κατανεμημένα δεδομένα συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας Student

t-τεστ

. Οι μετρήσεις που δεν είχαν κανονική κατανομή συγκρίθηκαν με τη μη παραμετρική δοκιμή αθροίσματος κατάταξης Mann-Whitney. P & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. ID8 δεδομένα ποντίκι άγριου τύπου αρχικά αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας Δύο Way ANOVA, με ID8 /ένεση φυσιολογικού ορού και σίδηρο διατροφή, καθώς οι δύο μεταβλητές που επηρεάζουν το αποτέλεσμα. Αυτή η στατιστική ανάλυση δεν έδειξε σημαντική επίδραση αλληλεπίδραση μεταξύ των δύο μεταβλητών. Τα δεδομένα άγριου τύπου ID8 παρουσιάζεται χρησιμοποιώντας Student

t-test

για παραμετρικά στοιχεία, και Mann-Whitney τεστ rank ποσό για μη παραμετρικά δεδομένα. μετρήσεις συσχέτισης ελήφθησαν από Pearson Correlation.

Και οι δύο αρσενικά και θηλυκά ποντίκια WT και HKO χρησιμοποιήθηκαν για τις τρεις ταχύτατα αναπτυσσόμενη μοντέλα ποντικών με καρκίνο. Ανάλυση των βασικών παραμέτρων αιματολογικής, συμπεριλαμβανομένων αιμοσφαιρίνης και του σιδήρου του ορού, έδειξε ότι δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των αρσενικών και θηλυκών ποντικών. Έτσι, παρουσιάζουμε τις συνδυασμένες αρσενικά και θηλυκά στοιχεία.

Αποτελέσματα

Τα ποντίκια με μεταστατικούς καρκίνους του πνεύμονα αναπτύσσουν αναιμία με δικτυοερυθροκυττάρωση και τον περιορισμό του σιδήρου

Εμείς δημιουργούνται δύο μοντέλα του μεταστατικού καρκίνου του πνεύμονα με έγχυση των συγγενικών καρκινικές κυτταρικές σειρές, TC-1 και LLC, στο περιτόναια των ποντικών. Τα ποντίκια ελέγχου έλαβαν PBS. Πριν από την ευθανασία στις 14 ημέρες μετά την ένεση, όλα τα ποντίκια του όγκου εμφανίζονται συμπτώματα συμβατά με συστημική ασθένεια δευτερεύουσα σε φορτίο όγκου, συμπεριλαμβανομένων λήθαργο, την κακή περιποίηση, και ασκίτη. Νεκροψία αποκάλυψε μάζες ενδοπεριτοναϊκή στα περισσότερα από τα ποντίκια. Η αιμοσφαιρίνη ήταν χαμηλότερη στα ποντίκια όγκου σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχήμα 1Α). (LLC 7,8 g /dL vs. PBS 15,6 g /dL, P & lt? 0,001? TC-1 14,2 g /dL vs. PBS 15,6 g /dL, P = 0,029). Οι αναιμικοί ποντικοί όγκος είχε αυξηθεί δικτυοερυθροκυττάρωση σε σύγκριση με τους μάρτυρες (Σχήμα 1Β). (RPI σε LLC 10,7 έναντι PBS 2,4, Ρ & lt? 0,001? TC-1 6.1 vs. 2.4 PBS, Ρ & lt? 0.001). Αξίζει να σημειωθεί, οι ποντικοί LLC είχαν χαμηλότερα επίπεδα αιμοσφαιρίνης από TC-1 ποντίκια (Ρ & lt? 0.001). Και μεγαλύτερη δικτυοερυθροκυττάρωση (Ρ = 0,006)

C57BL /6 ποντίκια ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκώς με 0,1 × 10

6 -0.5 × 10

καρκίνωμα TC-1 ή Lewis πνεύμονα 6 κύτταρα ποντικού και ευθανασία μετά από 14 ημέρες (LLC). Σε σύγκριση με τους μάρτυρες, τα ποντίκια που φέρουν όγκο έχουν: (Α) μειωμένη αιμοσφαιρίνη? (Β) αυξήθηκαν δικτυοερυθροκυττάρωση. N = 8-19 ποντικοί ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0.05, ** P & lt? 0.001? P με Mann-Whitney τεστ rank sum. Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι μέσες τιμές ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο.

Η

Όταν ανεπαρκής σίδηρος είναι διαθέσιμη για την ερυθροποίηση, αυξημένα επίπεδα ψευδαργύρου έχουν ενσωματωθεί στο δαχτυλίδι πρωτοπορφυρίνης. Ως εκ τούτου, πρωτοπορφυρίνη ψευδαργύρου επίπεδα (ΖΡΡ) είναι ένας καλός δείκτης της ερυθροποίησης περιορισμένου σιδήρου [26]. επίπεδα ΖΡΡ σε ποντίκια που φέρουν όγκο αυξήθηκαν σε σύγκριση με τους μάρτυρες, υποδεικνύοντας περιορισμένου σιδήρου ερυθροποίησης (Σχήμα 2Α). (LLC 160 έναντι PBS 84, Ρ & lt? 0,001? TC-1 136 έναντι PBS 84, Ρ & lt? 0.001). LLC ποντίκια είχαν μια τάση προς υψηλότερα επίπεδα ZPP από το λιγότερο αναιμική TC-1 ποντίκια (P = 0,129). Ποντικοί που φέρουν όγκο είχε hypoferremia όπως υποδεικνύεται από μία δοκιμασία του σιδήρου του ορού (Εικόνα 2Β). (LLC 11,5 μmol /L έναντι PBS 39,8 μmol /L, Ρ = 0,004? TC-1 20,8 μmol /L έναντι PBS 39,8 μmol /L , P = 0,031). Προκειμένου να καθοριστεί εάν αυτό οφειλόταν σε δέσμευση του σιδήρου, όπως θα φαίνεται στην αναιμία της φλεγμονής, αντί σιδηροπενική αναιμία δευτεροβάθμια υποσιτισμού ή αιμορραγία, συνολική αποθέματα σιδήρου του σώματος εκτιμήθηκαν χρησιμοποιώντας μετρήσεις σιδήρου των ιστών ήπατος και του σπλήνα. Και τα δύο μοντέλα όγκου πνεύμονα είχαν υψηλότερα ήπατος nonheme περιεκτικότητα σε σίδηρο από τους ελέγχους (Σχήμα 2C.) (LLC 8.9 μmole Fe /g έναντι PBS 1,5 μmole Fe /g, P & lt? 0,001? TC-1 3.9 μmole Fe /g έναντι PBS 1,5 μmole Fe /g, Ρ = 0,002). LLC ποντίκια είχαν επίσης υψηλότερα σπλήνα nonheme περιεκτικότητα σε σίδηρο από τους ελέγχους, και TC-1 ποντίκια είχαν συγκρίσιμη περιεκτικότητα σε σίδηρο σπλήνα (Σχ. 2D) (LLC 15,9 μmole Fe /g έναντι PBS 10,4 μmole Fe /g, P = 0,039).

C57BL /6 ποντίκια ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκά με TC-1 ή LLC κύτταρα και υποβάλλονται σε ευθανασία μετά από 14 ημέρες. Και τα δύο μοντέλα όγκου ποντικού που φέρει δείχνουν: (Α) αυξημένα επίπεδα ΖΡΡ σύγκριση με τους μάρτυρες, υποδεικνύοντας σύνθεση αίμης περιορισμένου σιδήρου? (Β) hypoferremia? (C) αυξήθηκε σιδήρου στο ήπαρ. (Δ) Τα ποντίκια LLC φέρουν έχουν αυξηθεί σιδήρου σπλήνα, και τα TC-1 που φέρουν τα ποντίκια έχουν μια τάση για αύξηση του σιδήρου σπλήνα, TC-1 έναντι PBS, P = 0.381. N = 8-19 ποντικοί ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0.05, ** P & lt? 0.001? P με Mann-Whitney τεστ rank sum. Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι μέσες τιμές ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο.

Η

Ποντίκια με καρκίνους του πνεύμονα μεταστατικό πρόδηλη φλεγμονή, αλλά εψιδίνης αυξάνεται μόνο στα λιγότερο σοβαρή μοντέλο

για να αξιολογηθεί η συνεισφορά της φλεγμονής και της δραστηριότητας εψιδίνης στην ανάπτυξη της αναιμίας σε μοντέλα καρκίνο μας, μετρήσαμε τις συγκεντρώσεις ηπατικού mRNA του SAA-1 και εψιδίνης. SAA-1 είναι ένα ηπατικό αντιδραστήριο οξείας φάσης που είναι γνωστό ότι αυξάνεται σε απόκριση σε φλεγμονή και ορισμένων κυτοκινών, ειδικά της IL-6 [27]. Όπως η IL-6 πιστεύεται ότι είναι μια σημαντική αιτία της αναιμίας της φλεγμονής με διέγερση έκφρασης εψιδίνης [19], χρησιμοποιήσαμε μετρήσεις SAA-1 ως ένας δείκτης της IL-6 δραστηριότητας. Την ημέρα 14, και οι δύο TC-1 και LLC ποντίκια είχαν αυξημένα ηπατικά SAA-1 mRNA επιπέδων σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 3Α). LLC ποντίκια είχαν & gt? 75-πλάσια αύξηση σε σχέση με τα ποντίκια που PBS (Ρ = 0,001), και TC-1 ποντίκια είχαν & gt? 340-πλάσια αύξηση (Ρ = 0,002). Την ημέρα 14, η ήπια αναιμία TC-1 ποντίκια είχαν ελαφρώς αυξημένα ηπατικά εψιδίνης επίπεδα του mRNA σε σύγκριση με τους ελέγχους (& gt? 2 χ, Ρ = 0,012) (Σχήμα 3Β), ενώ οι πιο σοβαρά αναιμικός ποντίκια LLC είχαν χαμηλότερα επίπεδα εψιδίνης (Ρ = 0,022), ίσως λόγω της αντισταθμιστικής επίδραση επί εψιδίνης μέτριας αναιμίας και τα προκύπτοντα ερυθροποιητικής διέγερσης [28]. Για να εκτιμηθεί η επίδραση της φλεγμονής στην έκφραση εψιδίνης mRNA, αξιολογήσαμε τη συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων του SAA-1 mRNA και τα επίπεδα mRNA που αντιστοιχούν εψιδίνης σε μεμονωμένα ποντίκια αλλά ο συσχετισμός ήταν αδύναμη [τα δεδομένα δεν απεικονίζονται]. Παρά πολύ υψηλότερα επίπεδα SAA-1 στα ποντίκια που φέρουν όγκο από ό, τι στους ελέγχους, ενδεικτικό της προκαλούμενης από όγκο φλεγμονή, οι συγκεντρώσεις εψιδίνης mRNA δεν αυξήθηκαν αναλογικά σε TC-1 που φέρουν τα ποντίκια και είχαν ακόμη και μειώθηκαν σε LLC φέρουν ποντικούς. Αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι άλλοι παράγοντες μπορεί να εξουδετερώσει την επίδραση της φλεγμονής στη σύνθεση εψιδίνης, και αυτές θα μπορούσαν να περιλαμβάνουν αναιμία και αυξημένη ερυθροποίηση.

Μέχρι την ημέρα 14, (Α) και τα δύο μοντέλα όγκων έχουν αυξηθεί τα επίπεδα του mRNA του ήπατος SAA-1 ? (Β) ποντίκια TC-1 που φέρουν έχουν αυξημένα ηπατικά εψιδίνης επίπεδα του mRNA σε σύγκριση με τους μάρτυρες, και LLC-ποντικών που φέρουν έχουν μειωθεί εψιδίνης. N = 8-19 ποντικοί ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0,05? P με Mann-Whitney τεστ rank sum. Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι μέσες τιμές ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο.

Η

επίπεδα εψιδίνης mRNA μετρήθηκαν επίσης στους όγκους να καθοριστεί αν η έκφραση εψιδίνης όγκου μπορεί να συμβάλλει στην ανάπτυξη της αναιμίας του καρκίνου. Ούτε TC-1 ούτε όγκους LLC είχαν ανιχνεύσιμη έκφραση εψιδίνης, δείχνουν ότι οι όγκοι αυτοί δεν συμβάλλουν άμεσα σε επίπεδα συστημικής εψιδίνης.

Τα ποντίκια με μελάνωμα αναπτύσσουν αναιμία με ερυθροποίηση περιορισμένου σιδήρου και φλεγμονή

επόμενη δημιουργείται ένα μοντέλο ποντικού μεταστατικού μελανώματος με την έγχυση μιας κυτταρικής γραμμής μελανώματος, Β16-Ρ10, στην περιτόναια των ποντικών. Τα ποντίκια ελέγχου έλαβαν PBS. Πριν την ευθανασία 14 d μετά την ένεση, τα ποντίκια του όγκου εμφανίζονται συμπτώματα συμβατά με συστημική ασθένεια και το φορτίο του όγκου, συμπεριλαμβανομένων λήθαργο και ασκίτη. Πλήρης ανάλυση ανάλυση αίματος αποκάλυψε μία αξιοσημείωτη αναιμία στα ποντίκια με μελάνωμα σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχήμα 4Α). (Β16-Ρ10 Hgb 8,2 g /dL έναντι PBS Hgb 15,6 g /dL, P & lt? 0.001). Τα ποντίκια όγκου αναπτύξει επίσης μια ισχυρή δικτυοερυθροκυττάρωση & gt? 4 × εκείνη των ομολόγων τον έλεγχό τους (Σχήμα 4Β.). ποντίκια μελάνωμα επέδειξε σημαντική περιορισμένου σιδήρου ερυθροποίηση με & gt?. αύξηση κατά 2-φορές σε επίπεδα ΖΡΡ σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 4C)

C57BL /6 ποντίκια ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκώς με 0,1 × 10

6 -0.3 × 10

6 κύτταρα Β16-F10 και ευθανασία μετά από 14 ημέρες. Τα ποντίκια με μελάνωμα που φέρουν την ανάπτυξη: (Α) μια σημαντική αναιμία? (Β) αυξήθηκαν δικτυοερυθροκυττάρωση σύγκριση με ελέγχους? (Γ) αυξημένα πρωτοπορφυρίνης ψευδαργύρου (ΖΡΡ) επίπεδα σε σύγκριση με τους μάρτυρες, υποδεικνύοντας σύνθεση αίμης περιορισμένου σιδήρου? (D) αυξημένα επίπεδα ηπατικών SAA-1 mRNA, ένα δείκτη φλεγμονής και IL-6 δραστηριότητα? (Ε) χαμηλότερα επίπεδα του mRNA εψιδίνης. N = 8-11 ποντικοί ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0.05, ** P & lt? 0.001? P με Mann-Whitney τεστ rank sum. Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι μέσες τιμές ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο

Η

Την ημέρα 14, τα ποντίκια με μελάνωμα είχε μια δραματική αύξηση (& gt? 600 φορές). Σε SAA- 1 mRNA σε σύγκριση με μάρτυρες, υποδεικνύοντας στιβαρή φλεγμονή (Σχ. 4D). επίπεδα εψιδίνης mRNA καταστάλθηκαν στα ποντίκια όγκου σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 4Ε). Επειδή αυτός ο όγκος προκάλεσε μία αναιμίας με πολύ παρόμοια χαρακτηριστικά με εκείνη που προκαλείται από μεταστατικό καρκίνο του πνεύμονα LLC, η επίδρασή της στην ομοιόσταση του σιδήρου δεν χαρακτηρίστηκε περαιτέρω.

Τα ποντίκια με καρκίνο των ωοθηκών αναπτύξουν σιδηροπενική αναιμία

Αναλύσαμε επίσης την ανάπτυξη αναιμίας σε ποντικούς με μία αργή ανάπτυξη του καρκίνου των ωοθηκών με έγχυση του συγγενή ωοθηκών καρκινικής κυτταρικής γραμμής ID8 στην περιτόναια των ποντικών. Οι ID8 ένεση και PBS ένεση ποντικών ελέγχου θυσιάστηκαν 18,5 εβδομάδες μετά την ημερομηνία της ένεσης. Προς το παρόν, όλα τα ποντίκια που φέρουν όγκο εμφανίζονται συμπτώματα συμβατά με συστημική ασθένεια, συμπεριλαμβανομένου λήθαργο, την κακή περιποίηση, και ασκίτη. Νεκροψία αποκάλυψε ορατή ενδοπεριτοναϊκή μάζες στην πλειοψηφία των ποντικών με αιματηρό ασκίτη σε πολλούς. Αιμοσφαιρίνης ήταν χαμηλότερη σε ποντικούς που φέρουν όγκο σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 5Α) (ID8 10,4 g /dL vs. PBS 11,25 g /dL, P = 0,040). PBS ποντίκια ίδιοι είχαν μειωθεί μέτρια επίπεδα αιμοσφαιρίνης, πιθανότατα ως συνέπεια του ότι έχουν τραφεί μια δίαιτα με μειωμένο σίδηρο για 18 εβδομάδες. Τα ποντίκια που έφεραν όγκους είχαν αυξημένα επίπεδα ΖΡΡ σύγκριση με τους ελέγχους, υποδεικνύοντας περιορισμένου σιδήρου ερυθροποίησης (Εικ. 5Β) (ID8 162 έναντι PBS 129, Ρ = 0,008). Συνολικά αποθέματα σιδήρου του σώματος αξιολογήθηκαν χρησιμοποιώντας μετρήσεις σιδήρου των ιστών ήπατος και του σπλήνα. Τα ποντίκια ID8 φέρουν είχαν χαμηλότερα του ήπατος και του σπλήνα σιδήρου περιεχομένου από τους ελέγχους (Σχήμα 5C, D.) (ID8 σιδήρου στο ήπαρ 8,1 μmole Fe /g έναντι PBS σιδήρου στο ήπαρ 14,9 μmole Fe /g, P = 0,041? ID8 σπλήνα σιδήρου 63,1 μmole Fe /g έναντι PBS σπλήνα σιδήρου 138,5 μιτιοΐβ Fe /g, P = 0,011). Έτσι, αυτό το μοντέλο όγκου ωοθηκών αναπτύσσεται αναιμία με τον Frank έλλειψη σιδήρου, πιθανόν εν μέρει δευτερεύουσα σε αιμορραγία μέσα στην περιτοναϊκή κοιλότητα και μειωμένη διατροφή.

C57BL /6 ποντίκια ενέθηκαν ενδοπεριτοναϊκά με 1 × 10

6 κύτταρα ID8 και ευθανασία μετά 18,5 εβδομάδες. Σε σύγκριση με τους μάρτυρες, τα ποντίκια ID8-φέρει: (Α) είναι πιο αναιμικά? (Β) έχουν αυξημένα επίπεδα ZPP? (C, D) έχουν χαμηλότερα επίπεδα των ηπατικών και σιδήρου σπλήνα. N = 10-16 ποντίκια ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0.05, ** P & lt? 0.001? P με Mann-Whitney τεστ rank-sum (Α, Β) ή φοιτητής

t-test

(C, D). Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι ± μέση μέση ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο (Α, Β) ή μέση τιμή ± SD (C, D).

Η

Τα ποντίκια με καρκίνο των ωοθηκών έχουν κατέστειλε τα επίπεδα εψιδίνης αποκρίνεται σε σίδηρο καταστήματα συκώτι

στο 18,5 εβδομάδες ID8 ποντικοί είχαν κατάθλιψη ήπατος εψιδίνης επίπεδα του mRNA σε σύγκριση με τους ελέγχους (Σχ. 6Α) (ID8 0,20 vs. PBS 14.08, Ρ = 0,013), καθώς και ως συγκρίσιμα επίπεδα SAA-1 με τους ελέγχους (Σχ. S1) (P = 0,361), υποδεικνύοντας ότι η φλεγμονή και εψιδίνης δεν παίζουν σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη αυτής της αναιμίας. Επιπλέον, το σχήμα 6Β δείχνει μια σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων εψιδίνης και σιδήρου στο ήπαρ, το οποίο δείχνει κατάλληλη καταστολή εψιδίνης με την ανάπτυξη αναιμίας λόγω έλλειψης σιδήρου σε αυτό το μοντέλο όγκου ωοθηκών (ID8 εψιδίνης εναντίον του σιδήρου στο ήπαρ, R

2 = 0.64 ., P = 0,017)

στο 18,5 εβδομάδες, ID8 που φέρουν τα ποντίκια σε σύγκριση με τους μάρτυρες έχουν (Α) κατέστειλε το mRNA εψιδίνης? (Β) σημαντική θετική συσχέτιση μεταξύ του ήπατος αποθέματα σιδήρου και την έκφραση του mRNA εψιδίνης. N = 11-16 ποντίκια ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. * P & lt? 0,05? P Mann-Whitney τεστ rank ποσό (Α), καθώς και από Pearson Correlation στο (Β). Μπαρ, μπαρ σφάλματος είναι μέσες τιμές ± 75

ης /25

ο εκατοστημόριο.

Η

Η ανάπτυξη της αναιμίας στα μοντέλα όγκων ποντίκι δεν είναι δευτερεύον σε μικροαγγειοπαθητικής αιμόλυση

ο κατάλογος των πιθανών αιτιών της αναιμίας σε μοντέλα καρκίνου περιλαμβάνει μικροαγγειοπαθητική αιμόλυση ή διάτμηση των ερυθροκυττάρων, η οποία μπορεί επίσης να δει σε φλεγμονώδεις αναιμίες [6]. Περιφερικό αίμα επιχρίσματα των ποντικών που φέρουν όγκο δεν έδειξε σχιστοκύτταρα ή θραύσματα ερυθροκυττάρων. Το Σχήμα 7Β δείχνει μία σχεδόν φυσιολογική επίχρισμα αίματος του μοντέλου TC-1, με ελάχιστη ανωμαλίες μεμβράνη. Τα Σχήματα 7C και 7D δείχνουν ότι οι πιο αναιμικά LLC και ID8 μοντέλα έχουν περισσότερους σοβαρές ανωμαλίες των ερυθρών αιμοσφαιρίων, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων δάκρυ και κεντρική ωχρότητα, αλλά και πάλι χωρίς έναν σημαντικό αριθμό σχιστοκύτταρα που θα σημαίνουν συμβολή μικροαγγειοπαθητικής αιμόλυσης σε αναιμία. [29]

(Α) ελέγχου PBS (Β) TC-1 (C) LLC (D) ID8.

Η

Η αναιμία δεν είναι εξασθενημένος σε εψιδίνης-αφαιρεθεί TC-1- ή ID8 φέρει ποντικούς

προκειμένου να ελεγχθεί αν εψιδίνης συμβάλλει στην ανάπτυξη της αναιμίας σε ποντικούς που φέρουν όγκο, ενέθηκε δύο από τις κυτταρικές σειρές όγκων σε ποντίκια knockout εψιδίνης. Την ημέρα 14 μετά TC-1 ένεση, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των αιμοσφαιρίνη μειώσεις του άγριου τύπου και ποντίκια knockout εψιδίνης (Εικ. 8Α) (WT TC-1 -1,08 g /dL έναντι HKO TC-1 -0,99 g /dL, P = 0,908). Αν και TC-1 ποντίκια είχαν ελαφρώς αυξημένα επίπεδα εψιδίνης, εψιδίνης δεν είναι σαφώς απαραίτητο για την ανάπτυξη αυτής της αναιμίας. Σε συνδυασμό με την αύξηση του SAA-1 επίπεδα, αυτά τα δεδομένα υποδηλώνουν μια εψιδίνης-ανεξάρτητο φλεγμονώδη μηχανισμό για την αναιμία.

(Α) Μέχρι την ημέρα 14, δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ των αλλαγών αιμοσφαιρίνης σε TC-1 οποία φέρουν το αγρίου τύπου και ποντίκια knockout εψιδίνης (Ρ = 0,908). (Β) Απόλυτη επίπεδα αιμοσφαιρίνης ποντικών που φαίνεται στο Α (γ) με 18,5 εβδομάδες δεν υπάρχει σημαντική διαφορά μεταξύ των αλλαγών της αιμοσφαιρίνης του ID8 φέρουν άγριου τύπου και ποντίκια knockout εψιδίνης (Ρ = 0,739). (D) Απόλυτη επίπεδα αιμοσφαιρίνης ποντικών απεικονίζεται στο C. Ν = 4-19 ποντικοί ανά ομάδα θεραπείας και ελέγχου. P με t-test. Μπαρ και οι ράβδοι σφάλματος είναι μέσες ± SD.

Η

Για να εξεταστεί αν εψιδίνης έκφραση είναι αναγκαία για την ανάπτυξη της έλλειψης σιδήρου σε ένα πιο μοντέλο χρόνιας, συγκρίναμε την ανάπτυξη αναιμίας σε WT και εψιδίνης knockout ποντικούς που φέρουν ID8 καρκίνο των ωοθηκών. Στο 18,5 εβδομάδες δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ των αιμοσφαιρίνη μειώσεις του άγριου τύπου και ποντίκια knockout εψιδίνης σε επεξεργασία με ID8 (Εικ. 8C) (WT ID8 -5,26 g /dL vs. HKO ID8 -4,50 g /dL, P = 0,739 ). Αυτά τα δεδομένα επιβεβαιώνουν τα ευρήματα μας ότι ID8 φέρουν ποντικοί αναπτύσσουν αναιμία σε απόκριση σε αιμορραγία και διατροφική ανεπάρκεια σιδήρου, αντί για ένα εψιδίνης φλεγμονώδεις μηχανισμό.

Συζήτηση

Αναιμία του καρκίνου (AC) είναι ένα συχνά παραβλέπεται, αλλά σημαντική εκδήλωση της κακοήθειας. Ακόμα και ήπια αναιμία έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζει αρνητικά που αναφέρθηκαν από ασθενείς της ποιότητας ζωής (ΠΖ) παραμέτρους [30]. Αν και μια μειωμένη αιμοσφαιρίνη είναι μόνο ένας παράγοντας στην ανάπτυξη των κατάθλιψη μετρήσεις QOL σε ασθενείς με καρκίνο, η βελτίωση της αναιμίας έχει αποδειχθεί ότι έχουν μια σημαντική και άμεση συσχέτιση με τη συνολική QOL [31]. Η βελτίωση στην QOL με θεραπεία αναιμίας συνεχίστηκε ανεξάρτητα από μερική ή πλήρη απόκριση σε οποιαδήποτε σχήμα χημειοθεραπείας. Επιπλέον, AC έχει δειχθεί ότι είναι ένας ανεξάρτητος αρνητικός προγνωστικός παράγοντας για τον χρόνο επιβίωσης των ασθενών με καρκίνο [32].

Παρά τις δυσμενείς επιπτώσεις της AC, είναι κάτω από αναγνωρισμένες και υπό αγωγή από τους ιατρούς [33] , εν μέρει λόγω της έλλειψης των ασφαλών και αποτελεσματικών θεραπειών. Μεταξύ των πιθανών θεραπειών, οι μεταγγίσεις ερυθρών αιμοσφαιρίων που συνδέονται με την ανοσοκατασταλτική δράση, μετάδοση λοίμωξης, και οι αντιδράσεις μετάγγισης [34]. παραγόντων ερυθροποίησης, όπως η ανασυνδυασμένη ανθρώπινη ερυθροποιητίνη, έχουν συσχετισθεί με υψηλότερα ποσοστά θνησιμότητας σε ασθενείς με καρκίνο κεφαλής και τραχήλου, ο καρκίνος του μαστού, και μη μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα [35]. Τα προκλινικά μοντέλα θα πρέπει να διευκολύνουν την ανάπτυξη ασφαλέστερων και πιο αποτελεσματικές θεραπείες.

Στην αραιή βιβλιογραφία σχετικά με το ρόλο των εψιδίνης σε AC, υπάρχουν κάποιες ενδείξεις ότι οι συγκεντρώσεις φλεγμονή και αυξημένη εψιδίνης θα μπορούσε να συμβάλει στην AC. Butterfield et al. απέδειξαν ότι τα επίπεδα εψιδίνης ορού αξιοσημείωτα αυξημένα σε ασθενείς ανθρώπους με αιματολογική ή μη αιματολογικές καρκίνους, συμπεριλαμβανομένου του μελανώματος και καρκίνους του πνεύμονα [36]. Μια άλλη μελέτη των ασθενών με καρκίνο αναιμικά από Ukarma et al. [37] απέδειξαν μια αντίστροφη σχέση μεταξύ των επιπέδων εψιδίνης και ανταπόκρισης της αιμοσφαιρίνης σε θεραπεία με την epoetin. Αυτή η σχέση ανάμεσα στην epoetin αντίσταση και αυξημένη εψιδίνης υποδεικνύει ένα πιθανό ρόλο της εψιδίνης στο μηχανισμό της ανάπτυξης AC. Sasu et al. περαιτέρω στρωματοποιημένη καρκινοπαθείς αναιμικούς σε εκείνους με φλεγμονώδη, αναμιγνύονται και έλλειψης σιδήρου αναιμίες, χρησιμοποιώντας παραμέτρους αιματολογικές και C-αντιδρώσα πρωτεΐνη επίπεδα [38]. Αυτό διαστρωμάτωση έδειξε ότι οι ασθενείς είχαν φλεγμονή τα υψηλότερα επίπεδα εψιδίνης στον ορό, που ακολουθείται από τους ασθενείς με τη μικτή αναιμία. Υπήρξε επίσης μια άμεση συσχέτιση μεταξύ των δεικτών φλεγμονής (φερριτίνη και CRP) και εψιδίνης στους ασθενείς AC, υποδηλώνοντας ένα ρόλο επαγόμενης από φλεγμονή αύξηση εψιδίνης στην παθογένεση της AC σε μια υποομάδα ασθενών με καρκίνο με εξέχοντα φλεγμονή.

Έχουμε δημοσίευσε πρόσφατα μια λεπτομερή χαρακτηρισμό ενός μοντέλου ποντικού που βοήθησε να καθορίσει τη συμβολή της εψιδίνης στην αναιμία της φλεγμονής (AI) [39].