ΡΤΕΝ είναι ένα λιπίδιο φωσφατάση που μετατρέπει φωσφατιδυλινοσιτόλη-3, 4, 5-τριςφωσφορικής (PtdInsP3) σε φωσφατιδυλινοσιτόλη-4, 5-διφωσφορικής (PtdInsP2) και ανταγωνίζεται φωσφοϊνοσιτιδίου 3-κινάσης ( PI3K) εξαρτώμενη από τη σηματοδότηση. Nedd4-1 (νευρικά πρόδρομα κύτταρο εκφράζεται, αναπτυξιακώς ρυθμισμένη προς τα κάτω 4-1) ήταν η πρώτη Ε3 λιγάση να εμπλέκεται σε ΡΤΕΝ ουβικουϊτινίωση. Nedd4-1 μπορεί να καταλύει τη μονο- και polyubiquitination του ΡΤΕΝ, οδηγώντας σε πυρηνική εισαγωγή του ΡΤΕΝ και ΡΤΕΝ αποικοδόμηση, D έτσι ρυθμίζουν αξονική ανάπτυξη σε νευρώνες.

Προηγούμενη in vitro και in vivo αποτελέσματα δείχνουν ότι η Nedd4-οικογένεια Ε3 λιγάσες Nedd4-1 και Nedd4-2 διαδραματίζουν εξελικτικά συντηρημένη ρόλο στη ρύθμιση του νευράξονα μορφογένεσης.

Πρώτον, δείχνουμε ότι τα επίπεδα πρωτεΐνης όρια ΡΤΕΝ Nedd4-1 με ρύθμιση της δραστικότητας του mTORC1, ενός συμπλόκου πρωτεΐνης η οποία ελέγχει την πρωτεϊνοσύνθεση και την ανάπτυξη των κυττάρων.

στη συνέχεια, Nedd4-οικογένεια Ε3 λιγάσες Nedd4-1 και Nedd4-2 την προώθηση της ανάπτυξης άξονα σε νευρώνες θηλαστικών κεντρικό νευρικό σύστημα. Η έκφραση, ουβικιτινίωση, εντοπισμός ή δραστικότητα φωσφατάσης της ΡΤΕΝ δεν έχει αλλάξει.

με αντίθετο, ΡΤΕΝ ρυθμίζει αρνητικά Nedd4-1 έκφραση στο μεταφραστικό επίπεδο. Και αυτό Nedd4-1 θηλαστικών και Nedd4-2 ρυθμίζουν την ανάπτυξη νευραξόνων.

Τα στοιχεία μας δείχνουν ότι λιγάσες Nedd4-οικογένεια E3 προώθηση της αξονικής ανάπτυξης και της διακλάδωσης στον αναπτυσσόμενο εγκέφαλο των θηλαστικών, wherePten δεν είναι ένα σχετικό υπόστρωμα. Αντ ‘αυτού, PTEN ελέγχει την ανάπτυξη νευρίτιδα με τη ρύθμιση Nedd4-1 έκφρασης.

Ρετινοειδές ομοιόσταση είναι ζωτικής σημασίας για την φυσιολογική εμβρυϊκή ανάπτυξη. Βασικών ρυθμιστικών παραγόντων που μεσολαβούν στις πλειοτροπικές επιδράσεις της RA περιλαμβάνουν αρκετές κατηγορίες RA-πρόσδεσης παραγόντων μεταγραφής, υποδοχείς ρετινοϊκού οξέος RARA, RaRb, και RARg. SIRT1, μια πυρηνική NAD + εξαρτώμενη πρωτεΐνη αποακετυλάσης, είναι η πιο συντηρημένη μέλος της sirtuin οικογένεια των ενζύμων.

Πρώτον, δείχνουμε ότι η SIRT1 de; κότητα σχετίζεται με αυξημένα ελαττώματα σηματοδότηση RA και ανάπτυξης σε ποντικούς. Έχουμε αναγνωριστικός; ed τόσο CRABPI και CRABPII ως υπερ-ακετυλιωμένες πρωτεΐνες σε εμβρυϊκά SIRT1 null ποντίκι; broblasts (ΠΜΑ) σε μια παγκόσμια σταθερή σήμανση ισοτόπου από τα αμινοξέα σε καλλιέργεια κυττάρων (SILAC) -με βάση την ανάλυση της Lys ακετυλίωση.

Στη συνέχεια, εξετάσαμε κατά πόσο SIRT1 θα μπορούσε φυσικά να αλληλεπιδράσουν με CRABPs. Αναλύσαμε τα υποκυτταρικά εντοπισμοί των ΗΑ-CRABPII στην WT και SIRT1 ΚΟ ΠΜΑ από ανοσο; uorescent χρώση CRABPII είναι ένα κυτταρικό φορέα RA που μεταθέτει από το κυτταρόπλασμα στον πυρήνα κατά την σύνδεση RA να ενεργοποιήσει τους υποδοχείς πυρηνικής RA.

δείχνουμε ότι RA-μεσολάβηση ακετυλίωση ofCrabpii σε K102 είναι απαραίτητη για την πυρηνική συσσώρευση και την επακόλουθη ενεργοποίηση της σηματοδότησης RA. SIRT1 αλληλεπιδρά με και αποακετυλιώνει CRABPII, ρύθμιση υποκυτταρικό εντοπισμό του.

Επιτέλους, η διαγραφή της SIRT1 οδηγεί σε αυξημένη RA-επαγόμενη διαφοροποίηση MESC.

Εν ολίγοις, έχουμε δείξει ότι μέσα από αποακετυλίωση CRABPII, SIRT1 διαδραματίζει ζωτικό ρόλο στη ρύθμιση της κυτταρικής σηματοδότησης RA και MESC pluripotency. Αυτή η SIRT1 /CRABPII /RAR καταρράκτη σηματοδότησης θα παρέχει έναν τρόπο για να μελετήσουν αλληλεπιδράσεις γονιδίων-περιβάλλοντος που επηρεάζουν την ανάπτυξη των ζώων.