Αφηρημένο

Πληκτρολογήστε 1 iodothyronine deiodinase (DIØ1) καταλύει την μετατροπή της προ-ορμόνης θυροξίνης στη δραστική 3,3 θυρεοειδούς ορμόνης ‘, 5-τριιωδοθυρονίνη (Τ3), σημαντικός ρυθμιστής του πολλαπλασιασμού και της κυτταρικής διαφοροποίησης. έκφραση DIØ1 μειώνεται στο πιο κοινός τύπος των νεφρών νεοπλασία, σαφείς κυττάρων νεφροκυτταρικό καρκίνωμα (ccRCC). Τα microRNAs είναι μικρά, μη κωδικοποιητικού RNA που ρυθμίζουν την έκφραση του γονιδίου σε μετα-μεταγραφικό επίπεδο. Ο σκοπός αυτής της μελέτης ήταν να αναλύσει τις δυνατότητες ρύθμισης της έκφρασης DIØ1 από microRNAs στο ccRCC. Βιοπληροφορική ανάλυση αποκάλυψε ότι 3’UTR του ανθρώπινου

DIØ1

μεταγραφής γονιδίων περιέχει miR-224 και miR-383 θέσεις-στόχους, τα οποία διατηρούνται σε όλα τα είδη των θηλαστικών. Ημι-ποσοτική PCR πραγματικού χρόνου χρησιμοποιήθηκε για να αναλυθεί η έκφραση του miR-224 και miR-383 σε 32 δείγματα ccRCC όγκων (Τ) και σε 32 συμφωνημένα ελέγχου (C) δείγματα. Παρατηρήσαμε στατιστικά σημαντική (p = 0,0002) περισσότερο από τέσσερις φορές αύξηση στην miR-224 έκφρασης και σχεδόν δύο φορές αύξηση στην miR-383 έκφραση σε δείγματα Μ σε σύγκριση με τα δείγματα Γ Tumor συγκεκριμένες αλλαγές στην έκφραση του miR-224 συσχετίζεται αρνητικά με τις αλλαγές στην έκφραση DIØ1 και ενδοκυτταρική συγκέντρωση Τ3. Η επιμόλυνση των HeLa κυτταρική γραμμή με miR-224 και miR-383 κατέστειλε την δραστηριότητα ενός λουσιφεράσης που περιέχει την 3’UTR του

DIØ1

. Αυτό καταργήθηκε όταν κατασκευάσματα μεταλλαχθεί σε miR-224 και miR-383 θέσεις στόχου χρησιμοποιήθηκαν αντ ‘αυτού, υποδεικνύοντας ότι το miR-224 και miR-383 δεσμεύει άμεσα με

DIØ1

3’ΙΙΤΡ. Τέλος, επαγόμενη έκφραση του miR-224 σε κύτταρα Caki-2 κατέληξε σε σημαντική (ρ 65 ° C, 1 λεπτό .; συνεχής ανάγνωση του φθορισμού από 65 ° C έως 97 ° C με ρυθμό κλιμάκωσης 0.11 ° C /s και 5 αποκτήσεις ανά κάθε ° C. Τα αποτελέσματα ρυθμίζεται σύμφωνα με την έκφραση του 18sRNA ξενιστή-γονίδιο

RN18S1

.

DIØ1

και

DIØ3

ανάλυση έκφρασης σε δείγματα ιστών εκτελέστηκε όπως περιγράφηκε προηγουμένως (37). Οι αλληλουχίες των εκκινητών φαίνονται στον Πίνακα S1, (Συμπληρωματικό δεδομένα).