Αφηρημένο

Rnd3 /Ρόη είναι μια μικρή Rho ΟΤΡάσης εμπλέκεται στη ρύθμιση των διαφορετικών συμπεριφορών των κυττάρων. Δυσλειτουργία του Rnd3 έχει συνδεθεί με την ογκογένεση και τη μετάσταση. καρκίνων του πνεύμονα είναι η κύρια αιτία θανάτου από καρκίνο που σχετίζονται με τη Δύση και σε όλο τον κόσμο. Η έκφραση του Rnd3 και έκτοπη ρόλο της στην μη-μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα (NSCLC) παραμένουν για να εξερευνηθούν. Εδώ, αναφέραμε ότι Rnd3 ήταν ρυθμισμένα προς τα κάτω σε τρεις κυτταρικές γραμμές NSCLC: Η358, Η520 και Α549. Η προς τα κάτω ρύθμιση των Rnd3 οδήγησε σε υπερ-ενεργοποίηση των Rho κινάσης και σηματοδότηση Notch. Η επαναφορά της Rnd3 ή επιλεκτική αναστολή της σηματοδότησης Notch, αλλά δεν Rho κινάσης σηματοδότησης, μπλοκάρει τον πολλαπλασιασμό των H358 και H520 κύτταρα. Μηχανιστικά, Notch ενδοκυττάρια περιοχή (NICD) πρωτεΐνη αφθονία στα κύτταρα Η358 ρυθμιζόταν από Rnd3 μεσολάβηση NICD υποβάθμιση του πρωτεασώματος. Rnd3 ρύθμιση του πολλαπλασιασμού των κυττάρων Η358 και Η520 μέσω Notch 1 /NICD /Hes1 σηματοδότησης άξονα ανεξάρτητα από Rho κινάσης

Παράθεση:. Tang Υ, Hu C, Yang H, Cao L, Li Υ, Deng P, et al. (2014) Rnd3 Ρυθμίζει τον Καρκίνο του Πνεύμονα κυτταρικού πολλαπλασιασμού μέσω Notch σηματοδότηση. PLoS ONE 9 (11): e111897. doi: 10.1371 /journal.pone.0111897

Συντάκτης: Jeremy J.W. Chen, Ινστιτούτο Βιοϊατρικών Επιστημών, Ταϊβάν

Ελήφθη: 13 Ιουνίου, 2014? Αποδεκτές: 29 του Σεπτεμβρίου του 2014? Δημοσιεύθηκε: 5 Νοέμβρη 2014

Copyright: © 2014 Tang et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:. Η εργασία αυτή υποστηρίχθηκε από το Κλειδί αναφέρουν Εθνικής Clincial Κέντρο Ερευνών για αναπνευστικών νοσημάτων, Εθνικό Key Επιστημονικό (Δ) Η δημιουργία μιας κυτταρικής γραμμής Η358 σταθερώς εκφράζουν GFP-tagged Rnd3. Η έκφραση Rnd3 επαληθεύτηκε και από τις δύο αντισώματα Rnd3 και GFP. (E) (D) μειώθηκε δραστηριότητα Rho κινάσης σε κύτταρα H520-Rnd3 σύγκριση με H520 κύτταρα ανιχνεύεται με αντισώματα ειδικά για pMYPT1 και pMLC2. (E) Τα στοιχεία μας έδειξαν ότι η αναστολή της δραστικότητας κινάσης Rho από φασουδίλη δεν μετέβαλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων H520 και H358 (Εικ. S4). Ωστόσο, η ένωση Ε [17], ένας ειδικός αναστολέας της σηματοδότησης Notch, μπορεί να εξασθενίσει πολλαπλασιασμό σε αμφότερες τις κυτταρικές σειρές (Εικ. 4). Η θεραπεία με την ένωση Ε μείωσε την εξάπλωση των Η358 κατά 40% σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου DSMO αγωγή όπως υποδεικνύεται από μία δοκιμασία ενσωμάτωσης BrdU (Σχ. 4Α και 4Β). Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού μειώθηκε σε μόνο 32% του ελέγχου στην ομάδα H520 (Σχ. 4C και 4D). Για να ελεγχθεί η πιθανή κυτταροτοξικότητα της Ένωσης Ε, αξιολογήσαμε την κυτταρικό θάνατο με βαφή κυανούν τρυπανίου. Κατά τη συγκέντρωση 5 ηΜ ένωσης Ε, δεν είχαμε ανιχνεύσει μια σημαντική κυτταρικό θάνατο σε σύγκριση με την ομάδα άνευ θεραπείας τόσο H358 και H520 κύτταρα (Εικ. S6, εικόνα 2 και 6 σε σύγκριση με το 1 και 5, αντίστοιχα), γεγονός που υποδηλώνει την κυτταροτοξικότητα της Ενωσης Ε σε όλες τις τρεις κυτταρικές γραμμές σε αυτή τη συγκέντρωση ήταν ελάχιστη. Έχουμε αυξηθεί περαιτέρω η συγκέντρωση της ένωσης Ε σε 50 ηΜ και 500 ηΜ, και διαπίστωσαν ότι μόνο λιγότερο από 5% κυτταρικός θάνατος παρατηρήθηκε σε 50 ομάδα ηΜ (Σχ S6, εικόνα 3, 7 και 11)., Ενώ μαζικό θάνατο των κυττάρων ( (Β) Η εφαρμογή των μπλοκ ένωσης Ε ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων Η358 όπως ανιχνεύεται με μία δοκιμασία ενσωμάτωσης BrdU. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με την ένωση Ε στην τελική συγκέντρωση 5 ηΜ και συγχρονίζεται από εξάντληση του ορού που ακολουθείται από ανάπτυξη σε μέσα για 12 ώρες. Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με BrdU για 30 λεπτά πριν τη συγκομιδή για ανάλυση. (Κατασκήνωση; (Δ) Η εφαρμογή των μπλοκ ένωσης Ε ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων H520 όπως ανιχνεύεται με μία δοκιμασία ενσωμάτωσης BrdU. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με την ένωση Ε στην τελική συγκέντρωση 5 ηΜ και συγχρονίζεται από εξάντληση του ορού που ακολουθείται από ανάπτυξη σε μέσα για 12 ώρες. Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με BrdU για 30 λεπτά πριν τη συγκομιδή για ανάλυση. BrdU-θετικών κυττάρων προσδιορίστηκαν ποσοτικά από 8 εικόνες που λαμβάνονται από τέσσερις διαφάνειες. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± Τ.Α.

Η

Rnd3 ρυθμίζει τον πολλαπλασιασμό με τη διαμόρφωση του άξονα σηματοδότησης NICD /Hes1 στο H520 και H358 κύτταρα

σηματοδότηση Notch είναι ένας σημαντικός ρυθμιστής του κυτταρικού κύκλου. Ο αποκλεισμός της σηματοδότησης Notch αναστέλλει την ανάπτυξη διαφορετικών κυττάρων [18] – [20]. Αισθητά, μια πρόσφατη μελέτη από τον Chang et al. ομάδα έδειξε ότι NICD ρυθμίζει τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό επιδερμικού μέσω up-ρύθμιση του Hes1 σε Rnd3 knockout ποντίκια [21]. Ως εκ τούτου, ερευνήσαμε την έκφραση Hes1 στα κύτταρά μας. Hes1 ήταν ρυθμισμένα προς τα πάνω 5-φορές σε H520 και H358 σε σύγκριση με τα κύτταρα HBEC (Σχ. 5Α και 5Β). Συνεπής με ένα εξασθενημένο ρυθμό πολλαπλασιασμού που παρατηρείται σε H520-Rnd3 και τα κύτταρα Η358-Rnd3 (Σχ. 3Ε-3Η), έκφραση Hes1 επίσης ρυθμίζεται προς τα κάτω κατά 2-φορές και 2,5-φορές σε αυτές τις δύο κυτταρικές σειρές σε σύγκριση με H520 και H358, . αντίστοιχα (Εικ. 5C-5F), υποδηλώνοντας ότι η αναστολή NICD μεσολάβηση μειώσεις στα ποσοστά πολλαπλασιασμού H520-Rnd3 και τα κύτταρα Η358-Rnd3 μπορεί να είναι μέσω ρυθμίζεται προς τα κάτω έκφραση Hes1

(Α) & amp? (Β) Hes1 ήταν επάνω ρυθμισμένη σε H520 και τα κύτταρα Η358 σύγκριση με τα κύτταρα HBEC. έκφραση (C-F) Hes1 μειώθηκε όταν Rnd3 ήταν σταθερώς υπερεκφράζεται σε Η358 και τα κύτταρα H520. (G) & amp? (H) Παροδική υπερέκφραση Rnd3 σε κύτταρα Η358 ρυθμίζεται προς τα κάτω NICD και Hes1 σε μία δόση εξαρτώμενο τρόπο. (Ι) & amp? (J) Αναστολή της δραστηριότητας του πρωτεασώματος από MG132 (τελική συγκέντρωση 15 μΜ) κατάργησε τη δοσολογία Rnd3 εξαρτάται NICD ρύθμιση προς τα κάτω σε Η358 κύτταρα. Western στυπώματα ποσοτικοποιήθηκαν από τρία ανεξάρτητα πειραματικά επαναλήψεις. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± S.D. *

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με τον έλεγχο (ομάδα 0)? #

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα 1? $

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα 3. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± SD

Η

Για να ορίσετε τη σχέση μεταξύ Rnd3 και NICD, πραγματοποιήσαμε μια δόση εξαρτάται από την έκφραση του Rnd3 σε Η358 κύτταρα . myc-Rnd3 διαμολύνθηκε παροδικά σε κύτταρα Η358 σε διαφορετικές δοσολογίες (0, 1 μg, 3 μg, 5 μg). Στη συνέχεια, εξετάσαμε την έκφραση NICD και Hes1 με κηλίδα western. Με αυξημένη έκφραση Rnd3, ο NICD και τα επίπεδα έκφρασης Hes1 μειώθηκε (Σχ. 5G και 5Η). Δεν αποτελεί έκπληξη, Hes1 mRNA, ένα γονίδιο στόχος NICD, αλλάζει ανάλογα (Εικ. S5 συμπληρώθηκε μαύρη γραμμή). Ωστόσο, δεν παρατηρήσαμε καμία αλλαγή στο Notch 1 mRNA (Εικ. S5 άδειο μπαρ), παρά τη σημαντική μείωση του επιπέδου της πρωτεΐνης λόγω Rnd3 υπερέκφραση, γεγονός που υποδηλώνει ότι Rnd3 ρυθμιζόμενη NICD στο μετα-μεταφραστικό επίπεδο, επειδή το επίπεδο NICD ρυθμίζεται από υποβάθμιση του πρωτεασώματος [22]. Είμαστε αναστέλλεται δραστηριότητα πρωτεασώματος χρησιμοποιώντας MG132 και διαπίστωσε ότι η Rnd3 δοσολογία εξαρτάται από την υποβάθμιση NICD ήταν εντελώς αποκλεισμένη (Σχ. 5Θ και 5J), γεγονός που υποδηλώνει μια μετα-μεταφραστική ρυθμιστικό ρόλο της Rnd3 στην υποβάθμιση NICD.

Rnd3 ρυθμίζει τον πολλαπλασιασμό μέσω Notch1 σηματοδότηση σε κύτταρα αδενοκαρκινώματος πνεύμονα

κυτταρική γραμμή

Η358 προήλθε από καρκίνωμα πνεύμονα βρογχοκυψελιδικού και κυτταρική γραμμή H520 προήλθε από πνευμονικό καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων. Ωστόσο, το μεγαλύτερο υπότυπος του NSCLC ήταν αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα. Έτσι επιβεβαιώθηκε η μελέτη μας σε κύτταρα αδενοκαρκινώματος ένα πνεύμονα, Α549, όπως φαίνεται στο Σχ. 6. Rnd3 ήταν κάτω-ρυθμίζονται μαζί με τα επάνω ρυθμισμένη Rho κινάση και Notch 1 σηματοδότηση σε κύτταρα Α549 σε σύγκριση με κύτταρα HBEC (Εικ. 6Α και 6Β). Εμείς ποσοτικά η ρύθμιση προς τα πάνω φορές σε αλλαγή σε δύο σηματοδότηση. Τα αποτελέσματα έδειξαν στο Σχ. 6C. Rho κινάσης σηματοδότησης ήταν up-ρυθμίζεται από σχεδόν 4 φορές αποδεικνύεται από το επίπεδο pMYPT1? η σηματοδότηση Notch 1 ήταν up-ρυθμίζεται από 5 φορές αποδεικνύεται από το επίπεδο NICD. Αναστολή της Notch 1 σηματοδότηση από ένωση Ε μπλοκάρει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων Α549 (Εικ. 6D και 6Ε). Η κυτταροτοξικότητα της Ενωσης Ε σε κυτταρικές Α549 αξιολογήθηκε επίσης με κυανή χρώση Trypan. Όπως έδειξε στο Σχ. S6 (εικόνα 9 έως 12), το 5 nM Ένωση Ε δεν προκάλεσε σημαντική θάνατο σε σύγκριση με την αρχική κατάσταση σε κύτταρα Α549. Μηχανιστικά, Rnd3 ρυθμίζεται τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων μέσω NICD /Hes1 σηματοδότησης. Η υπερέκφραση Rnd3 κατέστειλε την NICD και έκφραση Hes1 σε δοσολογία με τρόπο που εξαρτάται σε Α549 κύτταρα (Σχ. 6F και 6G). Τα ευρήματά μας σε κύτταρα Α549 ήταν σύμφωνα με τα αποτελέσματα από Η358 και Η520 κύτταρα, υποδηλώνοντας η σηματοδότηση Rnd3-NICD-Hes1 ήταν γενικά μοριακός μηχανισμός για τη ρύθμιση των NSCLC ανάπτυξη κυττάρων. Μαζί, υψηλότερη NICD και έκφραση Hes1 και χαμηλότερη έκφραση Rnd3 παρατηρήθηκαν σε H520, H358 και τα κύτταρα Α549 σε σύγκριση με τα κύτταρα HBEC. Επαναφορά του Rnd3 ανέστειλε NICD και Hes1 έκφρασης, η οποία οδήγησε σε μειωμένα ποσοστά πολλαπλασιασμού H520 και H358 κύτταρα. Απόφραξη του Notch1 σηματοδότησης ανέστειλε τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων σε H358, H520 και τα κύτταρα Α549. Rnd3 ρυθμίζεται η αφθονία NICD μέσω προτρέποντας υποβάθμιση του πρωτεασώματος της στην NSCLCs.

(Α) Rnd3 mRNA ανιχνεύεται από qRT-PCR ρυθμίζεται προς τα κάτω σε σχέση με το Α459 HBEC. (Β) & amp? (Γ) μία κηλίδα Western για την ανίχνευση φωσφορυλιωμένης MYPT1, NICD στα κύτταρα. (D) & amp? (Ε) Η εφαρμογή των μπλοκ ένωσης Ε ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων Α459 όπως ανιχνεύεται με μία δοκιμασία ενσωμάτωσης BrdU. Τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με την ένωση Ε στην τελική συγκέντρωση 5 ηΜ και συγχρονίζεται από εξάντληση του ορού που ακολουθείται από ανάπτυξη σε μέσα για 12 ώρες. Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με BrdU για 30 λεπτά πριν τη συγκομιδή για ανάλυση. (F) & amp? (G) Παροδική υπερέκφραση Rnd3 σε κύτταρα Α549 κάτω ρυθμισμένα NICD και Hes1 σε μία δόση εξαρτώμενο τρόπο. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± S.D. *

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με τον έλεγχο (ομάδα 0)? #

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα 1? $

σ

& lt? 0,05 σε σύγκριση με την ομάδα 3. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν μέσο ± SD

Η

Συζήτηση

Rnd3 ανήκει στο Ras υπεροικογένεια και είναι ένα μικρό Rho ΟΤΡάσης ότι ρυθμίζει μία ποικιλία λειτουργιών των κυττάρων και των ασθενειών. Αρχικά ταυτοποιήθηκε ως ένας αναστολέας ROCK1 ενδογενής. Rnd3 δεσμεύεται με ROCK1 να αναστέλλουν κατάντη σηματοδότησης [5]. Πρόσφατα, μελέτες έχουν τονίσει τον κρίσιμο ρόλο της Rnd3 σε διαφορετικούς τύπους καρκίνου. Rnd3 ρυθμίζεται προς τα κάτω σε πολλούς καρκίνους, όπως το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα [10], [23], μεσεγχυματικά κύτταρα όγκου [12], και του καρκίνου του προστάτη [12]. Ωστόσο, σε ορισμένες μορφές καρκίνου, Rnd3 είναι επάνω ρυθμισμένη, όπως σε όγκους του παγκρέατος [24], [25], οι κυτταρικές σειρές καρκίνου του κόλου [25] και ορισμένα μελανώματα [26]. Οι διαφορές αυτές δείχνουν ότι Rnd3 έχει συγκεκριμένους ρόλους σε διαφορετικές κυτταρικές γραμμές. Είναι ενδιαφέρον, όπως ένα γονίδιο ιδιαίτερα που σχετίζονται με όγκους, η έρευνα για το ρόλο της Rnd3 σε NSCLC είναι εξαιρετικά ανεπαρκείς. Δύο μελέτες έδειξαν ότι Rnd3 υπερ-έκφραση μπορεί να σχετίζεται με μια δυσμενή πρόγνωση σε ασθενείς με NSCLC [27], [28], ενώ ο ακριβής ρόλος του Rnd3 σε NSCLC δεν έχει ακόμη ερευνηθεί. Εδώ, αναφέραμε ότι Rnd3 ρυθμίζεται προς τα κάτω σε Η358, Η520 και Α549 κύτταρα, και αυτή η ρύθμιση προς τα κάτω προάγει την ανάπτυξη αυτών των δύο κυτταρικών σειρών και εξαρτάται από τα επάνω ρυθμισμένο σηματοδότηση Notch.

Ένα από τα πιο σημαντικές στρατηγικές για τη θεραπεία του καρκίνου είναι η αναστολή του πολλαπλασιασμού των καρκινικών κυττάρων ανεξέλεγκτη. Ωστόσο, η έλλειψη ειδικής αναστολής είναι το μείζον πρόβλημα που αντιμετωπίζουν στην κλινική. Η κατανόηση του μοναδικού ρυθμιστικού μηχανισμού του κυτταρικού κύκλου στα καρκινικά κύτταρα θα ευνοούσε την ανακάλυψη νέων φαρμάκων και νέες θεραπείες για τον καρκίνο. Rnd3 υπερέκφραση σε ινοβλάστες αναστέλλει την είσοδο S φάση από το κλείδωμα έκφραση κυκλίνης D1 στο μετα-μεταγραφικό επίπεδο [13]. Στην ίδια μελέτη, η υπερέκφραση της κυκλίνης D1 δεν διασώθηκε Rnd3 μεσολάβηση διακοπή του κυτταρικού κύκλου, υποδεικνύοντας ότι άλλοι παίκτες εμπλέκονται ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου. Σε καρκινικά κύτταρα του προστάτη, η έκφραση Rnd3 επάγει τα κύτταρα συνελήφθησαν στη G2 /M και όχι στο G1, όπως φαίνεται σε ινοβλάστες, υποδηλώνοντας ότι Rnd3 έχει την ικανότητα να ρυθμίζει την πρόοδο του κυτταρικού κύκλου σε διαφορετικές φάσεις [29]. Τα στοιχεία μας έδειξαν ότι Notch /Hes1 σηματοδότηση είναι κρίσιμη στην Rnd3 ανεπάρκεια μεσολάβηση αύξησης του Η358, Η520 και Α549 κύτταρα. Αυτό το εύρημα διευρύνει την κατανόηση της λειτουργίας Rnd3 στην ρύθμιση του κύκλου των καρκινικών κυττάρων και επίσης παρέχει ένα πιθανό στόχο για θεραπεία NSCLC.

έκφραση Rnd3 συσχετίζεται με την κυτταρική μετανάστευση στην ανάπτυξη και ασθένειες. Δύο πρόσφατες μελέτες διαπιστώθηκε ότι Rnd3 ρυθμίζεται η μετανάστευση των νευρώνων μέσω εξαρτώνται Rho κινάσης σηματοδότησης [30], [31]. Εν τω μεταξύ σε καρκίνους, ρύθμιση προς τα κάτω του Rnd3 συνδέεται στενά με εισβολή και τη μετάσταση [10], [23], [32]. Ο πιθανός μηχανισμός μπορεί επίσης να είναι μέσω RhoA /ROCK1 σηματοδότησης. Σε αυτή τη μελέτη, δείξαμε ότι οι δύο NICD και Rho κινάση ενεργοποιούνται σε Η358, Η520 και Α549 κύτταρα σε σύγκριση με HBEC. Επαναφορά της Rnd3 ανέστειλε τις δύο οδούς σηματοδότησης. Ωστόσο, η αναστολή μόνο Εγκοπή σηματοδότησης εμποδίζει την υπερ-ανάπτυξη H358 και H520 κύτταρα? αναστολή Rho κινάσης δεν το κάνει. Περαιτέρω μελέτες για τη διερεύνηση της ρύθμισης της ογκογένεσης, της μετανάστευσης και της απόπτωσης των κυττάρων του όγκου σε απόκριση προς την αναστολή κινάσης Rho θα ήταν απαραίτητη και ενδιαφέρουσα.

Notch είναι μια εξελικτικά συντηρημένη διαμεμβρανικό υποδοχέα που εμπλέκονται στην ανάπτυξη και ασθένειες. Κατά τη διέγερση συνδετήρα, Notch μπορεί να διασπαστεί με γ-σεκρετάσης. Η ενδοκυτταρική τμήμα (NICD) μπορεί να μετατοπίσει εντός του πυρήνα για την έναρξη της μεταγραφής. Εξαναγκασμένη έκφραση του Notch 1 ανέστειλε την ανάπτυξη των κυττάρων Α549 σε καλλιέργεια [2]. Ωστόσο, μια ανεξάρτητη μελέτη αμφισβήτησε αυτή την έννοια [33]. Πιο πρόσφατα, ένα μεταλλαγμένο ενεργοποίηση Notch 1 έχει βρεθεί σε περίπου 10% του NSCLC, και οι μεταλλάξεις που ανατίθενται χειρότερη πρόγνωση σε ασθενείς [4]. Αυτή η διαμάχη προτείνει, τουλάχιστον, ότι 1) η λειτουργία του Notch 1 σε NSCLC είναι διαφοροποιημένη σε διαφορετικά κύτταρα και διαφορετικά στάδια του καρκίνου? 2) έκφραση του Notch1 θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά τη θεραπεία ασθενών? 3) πρέπει επειγόντως να κατανοήσουν το ρόλο του Notch 1 σε NSCLC. Σε αυτή τη μελέτη, τα δεδομένα μας έδειξαν ότι σηματοδότηση Notch ενεργοποιείται σε κύτταρα Η358 και Η520, και αυτή η ενεργοποίηση οδήγησε τον πολλαπλασιασμό αυτών των δύο κυττάρων μέσω Hes1. Rnd3 θα μπορούσε να καταστείλει H358, H520 και τα κύτταρα Α549 πολλαπλασιασμό με ανταγωνισμό σηματοδότηση Notch σε μια μετα-μεταφραστική τρόπο.

Μία πρόσφατα δημοσιευμένη μελέτη κατέδειξε ότι Rnd3 ήταν μεταγενέστερος μεσολαβητής της σηματοδότησης Notch σε ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα (SCC) στο δέρμα επιθήλια [34]. Αυτοί οι συγγραφείς πρότειναν ότι Rnd3 είναι ένας μεταγραφικός στόχος των ενεργοποιημένων Notch1, και η εξάντληση Rnd3 καταστέλλει Notch σηματοδότηση μεσολαβώντας πυρηνική μετατόπιση της NICD μέσω αλληλεπίδρασης με importins. Στη μελέτη μας, διαπιστώσαμε ότι Rnd3 υπερέκφραση καταστέλλεται σηματοδότησης Notch μπλοκάροντας την υποβάθμιση NICD. Αυτές οι διαφορές μπορεί να είναι επειδή 1) ένα διαφορετικό κυτταρική γραμμή χρησιμοποιήθηκε για την μελέτη? 2) πιο πιθανό, οι δύο αυτοί τύποι ρύθμισης συνυπάρχουν στα κύτταρα, που εργάζονται ως μηχανισμός ανάδρασης για να ελέγχουν με ακρίβεια τη σηματοδότηση Notch.

Η έκφραση της Rnd3 Express ήταν ακριβώς ρυθμίζεται σε ανθρώπινους ιστούς όγκων. Rnd3 ήταν ρυθμισμένα προς τα πάνω σε καρκίνο του παχέος εντέρου σε σύγκριση με φυσιολογικό ανθρώπινο ορθοκολικό ιστό [35]. Ενώ τα κάτω ρύθμιση Rnd3 ήταν παρατήρηση σε ανθρώπινο ιστό ήπατος όγκου και οισοφαγικό καρκίνωμα ιστούς ανθρώπινης πλακωδών σε σύγκριση με τις παρακείμενες φυσιολογικούς ιστούς αντίστοιχα [11], [36]. Παρά το γεγονός ότι η διαφορετική μορφή έκφρασης του Rnd3 βρέθηκε σε διαφορετικούς όγκους στον άνθρωπο, η έκφραση Rnd3 συνδέθηκε στενά με τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων, κυττάρων μετανάστευση /μετάσταση και τη διάγνωση /πρόγνωση. Λαμβάνοντας υπόψη το γεγονός ότι Rnd3 ήταν κάτω-ρυθμίζονται σε κύτταρα NSCLC και κάτω ρύθμιση των Rnd3 προώθησε την ανάπτυξη καρκινικών κυττάρων NSCLC, θα ήταν ενδιαφέρον και αναγκαίο για την αξιολόγηση της έκφρασης Rnd3 σε δείγματα καρκινικού ιστού των πνευμόνων του ανθρώπου.

Στο σύνολό τους , είμαστε η πρώτη ομάδα να αναφέρει ότι Rnd3 ρυθμίζεται προς τα κάτω σε Η358, Η520 και Α549 κύτταρα, με αποτέλεσμα ένα υπερ-ενεργοποίηση των Notch και σηματοδότηση Rho κινάσης. Μηχανιστικά, Rnd3 ρυθμίζει τον πολλαπλασιασμό των H358, H520 και τα κύτταρα Α549 μέσω του άξονα σηματοδότησης NICD /Hes1.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Εικόνα S1.

Έκφραση της ΡϋΚ1, ενός ενεργοποιητή Rho κινάσης, παραμένει αμετάβλητο στο H358 και H520 κύτταρα σε σύγκριση με τα κύτταρα HBEC.