Αφηρημένο

Στόχος

Αυτή η μελέτη ανέλυσε τη κλινικοπαθολογοανατομικές συσχέτιση μεταξύ του καρκίνου των ωοθηκών (OC) και RECQL1 DNA ελικάση να εκτιμηθεί το θεραπευτικό δυναμικό της.

Μέθοδοι

χειρουργικά OC από 118 αναδρομική περιπτώσεις, για τις οποίες μπλοκ παραφίνης και όλα τα κλινικά δεδομένα ήταν πλήρη, χρησιμοποιήθηκαν σε αυτή τη μελέτη. RECQL1 και Ki-67 ανοσοχρώση πραγματοποιήθηκαν σε τμήματα για να συσχετίζονται χρώση RECQL1 με υπότυπο και την επιβίωση των ασθενών. Δέκα OC και δύο κανονικές κυτταρικές γραμμές εξετάστηκαν στη συνέχεια για έκφραση RECQL1 και υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με siRNA κατά RECQL1 να εκτιμήσει την επίδρασή της επί του πολλαπλασιασμού των κυττάρων.

Αποτελέσματα

Από τις 118 περιπτώσεις αδενοκαρκινώματος (50, ορώδης? 26, ενδομητριοειδές? 21, διαυγοκυτταρικό? 15, βλεννώδες? 6, άλλα ιστολογία), 104 (90%) έδειξαν διαφορετικά επίπεδα έκφρασης RECQL1 στους πυρήνες των κυττάρων OC. Το μοντέλο κινδύνου του Cox, επιβεβαίωσε ότι η διάχυτη και έντονη χρώση των RECQL1 συσχετίστηκε με ιστολογικό τύπο. Ωστόσο, η έκφραση RECQL1 δεν συσχετίζονται με τη συνολική επιβίωση των ασθενών ή το στάδιο της νόσου.

In vitro

, η έκφραση RECQL1 ήταν εξαιρετικά υψηλός σε ταχέως αναπτυσσόμενες κυτταρικές σειρές OC, σε σύγκριση με τα φυσιολογικά κύτταρα. Χρησιμοποιώντας μια ανάλυση χρονική πορεία της RECQL1-siRNA επιμόλυνση, παρατηρήσαμε μια σημαντική αναστολή του πολλαπλασιασμού των κυττάρων.

Συμπεράσματα

RECQL1 DNA ελικάση είναι ένας δείκτης της υψηλής πολλαπλασιασμού των κυττάρων. RECQL1-siRNA μπορεί να προσφέρει μια νέα θεραπευτική στρατηγική έναντι διαφόρων υποτύπων του οργανωμένου εγκλήματος, συμπεριλαμβανομένης της πλατίνας ανθεκτικό καρκίνους, ή σε επαναλαμβανόμενες καρκίνους που αποκτούν αντίσταση από λευκόχρυσο

Παράθεση:. Sanada S, Futami Κ, Terada Α, Yonemoto Κ, Ogasawara S, Akiba J, et al. (2013) RECQL1 ελικάσης Επισκευή DNA: Ένα πιθανό θεραπευτικό στόχο και μία πολλαπλασιαστική Marker κατά του καρκίνου των ωοθηκών. PLoS ONE 8 (8): e72820. doi: 10.1371 /journal.pone.0072820

Επιμέλεια: Rolf Müller, Πανεπιστήμιο Philipps, Γερμανία

Ελήφθη: 28 Οκτώβρη του 2012? Αποδεκτές: 9 του Ιούλη 2013? Δημοσιεύθηκε: 9 Αυγ, 2013

Copyright: © 2013 Sanada et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Έχουμε τα εξής ενδιαφέροντα. Kazunobu Futami και Γιασουχίρο Furuichi απασχολούνται από Gene Care Institute Co., Ltd. Δεν υπάρχουν διπλώματα ευρεσιτεχνίας, τα προϊόντα για την ανάπτυξη ή την εμπορία προϊόντων που να δηλώνουν. Αυτό δεν αλλάζει προσήλωση μας σε όλα τα PLoS ONE πολιτικές για την ανταλλαγή δεδομένων και υλικών, όπως περιγράφεται λεπτομερώς σε απευθείας σύνδεση στον οδηγό για τους συγγραφείς.

Εισαγωγή

Ο καρκίνος των ωοθηκών (OC) αντιπροσωπεύει περίπου το 30% των όλοι οι καρκίνοι του γυναικείου αναπαραγωγικού συστήματος. Το μέσο ποσοστό επιβίωσης 5 ετών σε προχωρημένο στάδιο είναι τόσο χαμηλά όσο 31% (στάδιο IIIC FIGO) έως 51% (FIGO στάδιο ΙΙΙΑ) (Διεθνής Ομοσπονδία Γυναικολογίας και Μαιευτικής (FIGO)). Περίπου το 75% των ασθενών με προχωρημένο (III στάδιο) OC αντιπροσωπεύουν με υποτροπή μετά από χειρουργική επέμβαση, η οποία είναι θανατηφόρα [1]. Αυτό είναι σε μεγάλο βαθμό αποδίδεται στην έλλειψη συμπτωμάτων έγκαιρης προειδοποίησης και έλλειψη διαγνωστικών τεστ που επιτρέπουν την έγκαιρη ανίχνευση του οργανωμένου εγκλήματος και της επανάληψης της [2]. Η αρχική θεραπεία για OC είναι χύμα εκτομή ακολουθούμενη από μετεγχειρητική χημειοθεραπεία συνδυασμού για ασθενείς με σταδίου IC ή μεγαλύτερο βαθμό όγκου. Έτσι, η θεραπεία πρώτης γραμμής στοχεύεται σε θεραπευτική αγωγή. Συγκριτικά, μόνο παρηγορητική φροντίδα παρέχεται για υποτροπή του καρκίνου ή σε ασθενείς που αναπτύσσουν αντίσταση χημειοθεραπεία. Σε προχωρημένο OC με περιτοναϊκή διάχυση, ενώ επιτυγχάνεται πλήρης παλινδρόμηση, μερικοί υπόλοιποι OC κύτταρα μπορούν να προωθήσουν την εμφάνιση των κυττάρων ανθεκτικών στα φάρμακα υπό παρατεταμένη χημειοθεραπεία. Δύο υπο-ομάδες των διαβόητη αντισυλληπτικά χάπια, ιστολογικά υποδιαιρούνται ως σαφής κύτταρο αδενοκαρκινώματος και βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα, είναι γνωστό ότι είναι ανθεκτικά σε διάφορα αντικαρκινικά φάρμακα, συμπεριλαμβανομένων των παραγώγων λευκοχρύσου με DNA που αλληλεπιδρούν. Αυτά τα προφίλ των συνθηκών λειτουργίας αποτελούν σοβαρά προβλήματα μεταξύ των γυναικολογικών ογκολόγους.

RECQL1 ανήκει σε μια οικογένεια ελικάσες DNA, που είναι πανταχού παρόντα ένζυμα που χαλαρώσετε διπλής έλικας του DNA για να αποκαλύψει μονόκλωνο DNA κατά τη διάρκεια απαραίτητες διαδικασίες, όπως είναι η αντιγραφή, μεταγραφής ή επισκευή. Βιοχημικές και κυττάρων βιολογικά δεδομένα δείχνουν RECQL1 ελικάσης συμμετέχει στη διατήρηση της γενωμικού ακεραιότητα και είναι ιδιαίτερα πάνω ρυθμισμένα σε ταχέως πολλαπλασιαζόμενα κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων εκείνων σε διάφορους καρκίνους, όπως του πνεύμονα, του ήπατος, του παγκρέατος, του παχέος εντέρου, του εγκεφάλου και καρκίνο κεφαλής και του λαιμού [3-9]. Προηγουμένως, στο μοντέλο ποντικού ξενομοσχεύματος καρκίνου του ήπατος, δείξαμε ένα RNAi θεραπεία που σίγαση ειδικά την έκφραση του DNA RECQL1 ελικάσης ήταν μία αποτελεσματική αντικαρκινική θεραπεία και έχει τη δυνατότητα να αναπτυχθεί ως νέα θεραπευτική μέθοδο [10]. Παρά το γεγονός ότι η αποτελεσματικότητα των RECQL1-siRNA έχει αποδειχθεί σωστά με τις καλλιεργημένες κυτταρικές σειρές που προέρχονται από διάφορες προελεύσεις του καρκίνου και επίσης στα μοντέλα ξενομοσχεύματος ποντικού, τα κύτταρα OC δεν έχουν μέχρι σήμερα μελετηθεί ρητά [11]. Σε αυτή την εργασία, έτσι ανέλυσε την κλινικοπαθολογοανατομικές συσχέτιση μεταξύ καρκίνου των ωοθηκών και της έκφρασης RECQL1

in vivo

και

in vitro

και να κάνει περαιτέρω αναφορά στο θεραπευτικό δυναμικό της RECQL1.

μέθοδοι

πληθυσμός μελέτης και δείγματα

Μια αναδρομική αναζήτηση για ασθενείς που διαγνώστηκαν με καρκίνο των ωοθηκών μεταξύ του 1998 και του 2005 διεξήχθη χρησιμοποιώντας αρχεία από το Τμήμα Παθολογίας του Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου Kurume, Ιαπωνία. Γραπτή συγκατάθεση δόθηκε από τους ασθενείς για τις πληροφορίες τους να αποθηκεύονται στη βάση δεδομένων του νοσοκομείου και να χρησιμοποιηθούν για την έρευνα. Η μελέτη εγκρίθηκε από την επιτροπή δεοντολογίας του Kurume University School of Medicine. Εντοπίστηκαν εκατόν δεκαοκτώ ωοθηκών καρκίνους με το ταίριασμα των μπλοκ παραφίνης. Κλινικά και παθολογικά πληροφορίες εξετάστηκαν, και τα κλινικά δεδομένα που περιλαμβάνονται ηλικία, τη θεραπεία, το στάδιο της νόσου και την παρακολούθηση. Αιματοξυλίνη-ηωσίνη (Η & amp? Ε) βάφονται διαφάνειες εξετάστηκαν και η διάγνωση επιβεβαιώθηκε ανεξάρτητα από δύο παθολόγους (SS, ΗΥ)

Ανοσοϊστοχημική ανάλυση

Τέσσερις-μm πάχους σειριακές τομές ελήφθησαν από επιλεγμένες. ενσωματωμένες σε παραφίνη μπλοκ και τοποθετημένο πάνω σε πλάκες με επικάλυψη από γυαλί χρησιμοποιώντας το σημείο αναφοράς XT (Ventana Automated Systems, Inc., Tucson, AZ, USA) και τις μεθόδους ChemMate ENVISION (DakoCytomation, Glostrup, Δανία). Η ανοσοϊστοχημεία εκτελέστηκε χρησιμοποιώντας μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού RECQL1 (Cell Signaling Inc. USA) σε συγκέντρωση 6,8 μg /ml, και Ki-67 αντισώματα που ελήφθησαν προ-αραιωμένο. Κάθε διαφάνεια υπέστη θερμική κατεργασία χρησιμοποιώντας διάλυμα ανάκτησης CC1 Ventana για 30 λεπτά, και επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα γιά 30 λεπτά. Αυτό το αυτοματοποιημένο σύστημα που χρησιμοποιείται το στρεπταβιδίνης βιοτίνης σύνθετη μέθοδος με 3,3’diaminobenzidine ως το χρωμογόνο (κιτ ανίχνευσης Ventana iVIEW DAB). Χρησιμοποιήσαμε RECQL1-αρνητικά την κανονική και ατροφική ωοθηκών στρώμα της μετεμμηνοπαυσιακής γυναίκας (αρνητικός έλεγχος). Μερικά από τα δείγματος OC περιείχαν άθικτο στρώμα των ωοθηκών, έτσι ώστε να μπορούμε επίσης θα μπορούσε να τους δούμε ως εσωτερική αρνητικοί μάρτυρες. Η βαθμολόγηση βασίστηκε στο ποσό και η ένταση της χρώσης πυρηνικών RECQL1. Το ποσό βαθμολογήθηκε ως αρνητικό (& lt? 1% των θετικών κυττάρων), σποραδικές (απομονωθεί θετικά κύτταρα, αλλά & lt? 5%), εστιακή (συστάδες μικρών κυττάρων, αλλά & lt? 25% των θετικών κυττάρων), διάχυτη (& gt ? 25% των χρωματισμένων κυττάρων). Ένταση βαθμολογήθηκε ως ελαφρά, μέτρια ή ισχυρή ένταση. Διάχυτη και έντονη χρώση θεωρήθηκε ως ++, σποραδικές και εστιακή χρώση, με οποιαδήποτε ένταση θεωρήθηκε ως +, αρνητική, καθώς -. Στατιστική ανάλυση διεξήχθησαν για κάθε κλινικοπαθολογοανατομικές χαρακτηριστικό μεταξύ των (-), (+) και (++) ομάδες. Πολλαπλασιαστικές δείκτης αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας Ki-67 θετικών μετρήσεις κυττάρων ανά 10 πεδία υψηλής ισχύος (Ki-67 δείκτης σήμανσης (LI)). Βιτρώ τομές ιστών βαθμολογήθηκαν και εξετάζεται χωρίς τη γνώση των κλινικοπαθολογοανατομικών δεδομένων ή την έκβαση των ασθενών.

Η στατιστική ανάλυση

Τα κατηγορικών δεδομένων και η έκφραση RECQL1 εξετάστηκε από το Χ

2 τεστ. Ki-67 LI και RECQL1 εκφράσεις εξετάστηκαν από Wilcoxon τεστ rank-sum. Η ιστολογική ποιότητας και της έκφρασης RECQL1 αξιολογήθηκαν με την ακριβή δοκιμή τάση Cochran-Armitage. Cox αναλογικό μοντέλο σε όρους λογιστικής παλινδρόμησης πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας στάδιο ΦΥΓΩ και έκφραση RECQL1. δοκιμασία log-rank με το μοντέλο Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για τη σύγκριση των πληθυσμών επιβίωση μεταξύ εκφράσεων RECQL1. Όλες οι δοκιμές ήταν 2 όψεων, και

P

αξία των & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική. Οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν με τη χρήση του στατιστικού λογισμικού ανάλυσης (SAS) έκδοση 9.2 (SAS Institute, Cary, NC).

Κύτταρα και συνθήκες καλλιέργειας

Σε αυτή τη μελέτη, χρησιμοποιήσαμε 10 ανθρώπινη OC κυτταρικές σειρές ( Πίνακας 1) OVCAR-3, OVCAR-5, SK-OV-3, TOV-21G, TOV-112D και ARPE-19 ελήφθησαν από την ATCC (Manassas, VA, USA). TIG-3 και ΝΕΠ ελήφθησαν από Health Science Τράπεζα Δυναμικού (Osaka, Japan). KOC-2S, KOC-3S, KOC-5C και -7C ιδρύθηκαν το Kurume University School of Medicine [12]. Τα κύτταρα αναπτύχθηκαν σε μέσο Eagle τροποποιημένο ή RPMI-1640 Dulbecco (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) και επωάστηκαν στους 37 ° C σε υγροποιημένο θάλαμο συμπληρωμένο με 5% CO

2.

Γραμμή κυττάρων

κυτταρικό τύπο Ιστοσελίδα εγκατάστασης

OVCAR-3Serous adenocarcinomaATCC * OVCAR-5Serous adenocarcinomaATCCKOC-2SSerous adenocarcinomaKurume universityKOC-3SSerous adenocarcinomaKurume universityKOC-5CClear κυττάρων adenocarcinomaKurume universityKOC-7CClear κυττάρων adenocarcinomaKurume universitySK-OV-3Clear κυττάρων adenocarcinomaATCCTOV-21GClear κυττάρων adenocarcinomaATCCTOV-112DEndometrioid adenocarcinomaATCCMCASMucinous adenocarcinomaHealth Επιστήμη Τράπεζα πόρων ** APRE-19Normal κυττάρων για † έλεγχο ATCCTIG-3Normal κυττάρων για τον έλεγχο ‡ Υγεία Επιστήμη πόρων BankTable 1. Τύποι Γραμμές κυττάρων και τοποθεσίες της Εγκαθίδρυσης.

CSV Λήψη CSV

ανοσοαποτύπωσης

Τα επίπεδα πρωτεΐνης RECQL1 και άλλων πρωτεϊνών που συμμετέχουν στο σύστημα επιδιόρθωσης βλάβης κυτταρικό DNA παρακολουθήθηκαν με τη χρήση ανοσοκηλιδώσεως. Τα κύτταρα πλύθηκαν με παγωμένο φωσφορικό ρυθμιστικό αλατούχο διάλυμα (PBS), ιζηματοποιήθηκαν με φυγοκέντρηση και στη συνέχεια λύθηκαν σε ένα ρυθμιστικό δωδεκυλοθειικού νατρίου (SDS) που περιείχε 1% SDS, 2% β-μερκαπτοαιθανόλη, 20% γλυκερίνη, 30 mM Tris-HCI (ρΗ 6.8) και 0.2 Μ διθειοθρεϊτόλη. Το κυτταρόλυμα βρασμένο για 10 λεπτά και στη συνέχεια υποβλήθηκε σε ηλεκτροφόρηση σε 5-20% κλίση SDS-πολυακρυλαμιδίου πηκτές. Πρωτεΐνες κλασματοποιήθηκαν στα πηκτώματα μεταφέρθηκαν ηλεκτροφορητικώς σε μεμβράνες διφθοριούχου πολυβινυλιδενίου (Immobilon, Millipore, ΜΑ, USA) και αποκλείστηκαν για μία νύχτα με 5% αποβουτυρωμένο γάλα σε PBS. Οι μεμβράνες στη συνέχεια επωάστηκαν είτε με αντι-RECQL1 μονοκλωνικό αντίσωμα Q1N3 (Cell Signaling Technology, Tokyo, Japan) ή αντι-β-ακτίνης μονοκλωνικό αντίσωμα (ICN Biomedicals, Aurora, ΟΗ, USA) για 60 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Οι μεμβράνες πλύθηκαν με 0,05% Tween-20 σε PBS, επωάστηκαν με IgG αντι-ποντικού συζευγμένο με υπεροξειδάση (DakoCytomation, Carpinteria, CA, USA) και πλύθηκαν. Οι μεμβράνες στη συνέχεια αναπτύχθηκε με χρήση αντιδραστηρίου ενισχυμένης χημειοφωταύγειας (ECL Plus, Amersham Biosciences, UK).

siRNA και RNA παρεμβολής

siRNAs (21 bp) που στοχεύουν RECQL1 mRNA (RECQL1-siRNA) και αρνητικά ελέγχου siRNA (NS-siRNA) συντέθηκαν χημικά (GeneDesign, Inc, Osaka, Japan). Όλες οι αλληλουχίες siRNA είχε ένα προεξέχον 3′-dTdT στο 3 ‘άκρο [11]. Αλληλουχίας-ειδική γονιδιακή σίγηση επιβεβαιώθηκε χρησιμοποιώντας ανάλυση μικροσυστοιχιών cDNA με το σύστημα Affymetrix GeneChip (Human Genome U133 Plus 2.0 Array). Για την επιμόλυνση στις 24 ώρες μετά την επίστρωση, τα κύτταρα επωάστηκαν με 30 ηΜ siRNA duplex για 4 ώρες υπό την παρουσία RNAiMAX (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), αραιωμένα 2-φορές με τον ορό που περιέχει φρέσκο ​​μέσο, ​​και καλλιεργήθηκαν στους 37 ° C για υποδεικνύεται όρους. Ολικό RNA εξήχθη από καλλιεργημένα κύτταρα σε διάφορα χρονικά σημεία χρησιμοποιώντας ένα RNeasy Mini Kit (Qiagen GmbH, Hilden, Germany) σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή μετά τη θεραπεία χημικών ενώσεων. αναλύσεις αντίστροφης μεταγραφάσης-PCR διεξήχθησαν χρησιμοποιώντας το ΑΒΙ PRISM 7000 Sequence Detection System με ανιχνευτές και εκκινητές TaqMan (ΑΒΙ, Foster, CA, USA). Το γονίδιο β-ακτίνης χρησιμοποιήθηκε ως εσωτερικό πρότυπο (ID ανιχνευτή TaqMan? 431088E? ΑΒΙ). Ο πολλαπλασιασμός των κυττάρων μετρήθηκε στις 24, 48, 72, 96 και 120 ώρες με δοκιμασία φθορισμού χρησιμοποιώντας κυττάρων Titer-Glo Luminescent (Promega, WI, USA) σύμφωνα με ένα πρωτόκολλο. Όσον αφορά την ανάλυση του κυτταρικού κύκλου, τα κύτταρα επιμολύνθηκαν με RECQL1-siRNA ή με siRNA NS-κάτω από τις ίδιες συνθήκες που περιγράφονται παραπάνω, και επωάστηκαν για 72 ώρες στους 37 ° C. Κύτταρα και συντρίμματα κυττάρων συλλέχθηκαν, πλύθηκαν με PBS και σταθεροποιήθηκαν σε παγωμένη μεθανόλη για 2 ώρες. Στη συνέχεια, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με παγκρεατική ΚΝάση Α (Nippon Gene, Toyama, Japan), χρωματίστηκαν με ιωδιούχο προπίδιο (Sigma, St Louis, ΜΟ, USA) για 30 minites, και αναλύθηκαν με κυτταρομετρία ροής. Ο φθορισμός μετρήθηκε χρησιμοποιώντας EPICS XL (Beckman Colter, Tokyo, Japan). Για κάθε δείγμα, 7.000 συμβάντα αναλύθηκαν. Αυτές οι αναλύσεις επαναλήφθηκαν 3 φορές για κάθε κυτταρικές γραμμές. Το στάδιο του κυτταρικού κύκλου και του πληθυσμού των κυττάρων εμφανίζονται με τη μέση τιμή ± SD τιμές σε κάθε

Αποτελέσματα

Κλινική και μικροσκοπικά ευρήματα

Το ηλικιακό εύρος κυτταρομετρίας ροής προφίλ. για ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών ήταν από το 20 να 82 (μέση, 57.1) έτη. Όλα τα 118 ασθενείς υποβλήθηκαν σε ολική υστερεκτομή, διμερείς σαλπιγγοωοθηκεκτομή omentectomy και λεμφαδένων ή δειγματοληψία. Χειρουργικά δείγματα αποκάλυψε ότι 50 ασθενείς ήταν ορώδες αδενοκαρκίνωμα, 26 ήταν ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα, 21 ήταν σαφείς κυττάρων αδενοκαρκινώματος, 15 ήταν βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα (επεκτατική εισβολή και επεμβατική βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα), και 6 ήταν άλλα ιστολογία, συμπεριλαμβανομένων 3 πλακώδες καρκίνωμα, 2 μικτά καρκίνωμα (καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων και ορώδες αδενοκαρκίνωμα, ή πλακώδες καρκίνωμα και σαφή κυττάρου αδενοκαρκίνωμα) και 1 μεταβατικό καρκίνωμα.

Ανοσοϊστοχημική αποτελέσματα

Ανοσοϊστοχημική αποτελέσματα ήταν διαθέσιμα για 118 χειρουργικά ΣΛ. έκφραση RECQL1 παρατηρήθηκε στους πυρήνες των κυττάρων OC σε διάφορους βαθμούς σε 104 (90%) από τα 118 δείγματα OC (ορώδης τύπος, 94%? ενδομητριοειδές τύπος, 89%? σαφής τύπο κυττάρων, 81%? βλεννώδες τύπος, 87%? και άλλοι, 100%). Με βάση την ποσότητα και την ένταση, 55 περιπτώσεις θεωρήθηκαν ως (++), για τις οποίες 30 περιπτώσεις (54,5%) ήταν ορώδες τύπου, 9 (16,3%) του τύπου ενδομητριοειδές, 9 (16,3%) του καθαρού τύπου κυττάρου, 3 ( 5,4%) από βλεννώδες και 4 (7,2%) από τους άλλους (Σχήμα 1). Εξήντα περιπτώσεις θεωρήθηκαν ως (+) και (-), για τις οποίες το 20 (31,7%) ήταν ορώδους τύπου, 17 (27,0%) του τύπου ενδομητριοειδές, 12 (19,0%) διαυγούς κυτταρικό τύπο, 12 (17,5%) βλεννωδών και 2 (1,6%) από τους άλλους. RECQL1 – (++) έκφραση σε χειρουργικά ιστούς έχει μια τάση για να παρατηρείται σε ορώδες τύπου, και λιγότερο συχνά σε ενδομητριοειδές, σαφή και βλεννώδες τύπων (ρ & lt? 0,03) (Πίνακας 2). Ki-67 δείκτης σήμανσης (LI) αποκάλυψε την υψηλότερη πολλαπλασιαστικού δυναμικού σε ορώδες αδενοκαρκίνωμα, με μέσο όρο 20,8% (ενδομητριοειδές, 15,8%? Σαφής κύτταρο, 7,3%? Και βλεννώδες, 9,4%). RECQL1 – (++) περιπτώσεις ήταν σημαντικά σχετίζονται με την υψηλή Ki-67LI (p = 0.02) (Εικόνα 2Α)

(++) έκφραση σε καρκίνους των ωοθηκών..

(Α) υδαρής αδενοκαρκίνωμα, (Β) αδενοκαρκινώματος Clear κυττάρου (C) ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα, (D) βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα και (Ε) άθικτο στρώμα των ωοθηκών ως αρνητικός έλεγχος. (ένθετο: αιματοξυλίνη και χρώση ηωσίνης)

Σκόραρε RECQL1Expression

(-) και (+)

(++)

Η ParametersHistological τύπου

aserous type20 (31,7%) 30 (54,5%) ενδομητριοειδές type17 (27,0% ) 9 (16,3%) σαφή type12 κυττάρων (19,0%) 9 (16,3%) βλεννώδες type12 (17,5%) 3 (5,4%) others2 (1,6%) 4 (7,2%) το στάδιο ΦΥΓΩ

σταδίου φυσητήρα (φάση Ι και II) 60 (50,8%) 45 (38,1%) σε προχωρημένο στάδιο (στάδιο ΙΙΙ και ΙV) 3 (2,5%) 10 (8,5%) Πίνακας 2. Γκολ Ανοσοϊστοχημική RECQL1 Έκφραση και Σχέση με ιστολογικός τύπος και FIGO στάδιο.

CSV Λήψη CSV

(Α) Συσχέτιση μεταξύ Ki-67 index επισήμανση και RECQL1 (++) περιπτώσεις. Μικροφωτογραφία που δείχνει υψηλή χρώση Ki-67 στο ορώδες αδενοκαρκίνωμα. RECQL1 (++) περιπτώσεις ήταν σημαντικά σχετίζονται με την υψηλή Ki-67LI (p = 0.02). (Β) εκτίμηση επιβίωσης Kaplan-Meier μεταξύ RECQL1 (++) και (+), (-) περιπτώσεις. Με ανάλυση log-rank, δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ της έκφρασης RECQL1 και τη συνολική επιβίωση (p = 0.72).

Η

Ένταξη των κλινικών παραγόντων

Ένα μοντέλο Cox κινδύνους επιβεβαίωσε ότι η διάχυτη και ισχυρή χρώση των RECQL1 (HR 2.3) συσχετίστηκε με ιστολογικό τύπο, υψηλής Ki-67 LI και προχωρημένο στάδιο ΦΥΓΩ, αν και το στάδιο ΦΥΓΩ χάσει προγνωστική αξία της, όταν ρυθμιστεί από ιστολογικό τύπο (Πίνακας 2). Με ανάλυση log-rank, δεν υπήρχε σημαντική συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης RECQL1 και τη συνολική επιβίωση (p = 0,72) (Εικόνα 2Β).

επίπεδα έκφρασης RECQL1 σε κυτταρικές σειρές OC

Ως μεγαλύτερο ποσό της RECQL1 ανοσοαντιδραστικότητα παρατηρήθηκε σε χειρουργικά δείγματα OC, μελετήσαμε την έκφραση RECQL1 χρησιμοποιώντας διάφορες OC κυτταρικές σειρές. Ως έλεγχοι, τα φυσιολογικά κύτταρα ARPE-19 και TIG-3 παρομοίως χαρακτηριστεί. Οι περισσότεροι, αν όχι όλα, τα καρκινικά κύτταρα που εξετάστηκαν μέχρι σήμερα έδειξαν υψηλότερο επίπεδο έκφρασης της πρωτείνης ελικάσης RECQL1 σε σύγκριση με τα φυσιολογικά κύτταρα (Σχήμα 3Α). έκφραση RECQL1 βρέθηκε να είναι εξαιρετικά υψηλή στα ταχέως αναπτυσσόμενη κυτταρικές σειρές, όπως KOC-2S, KOC-3S, OVCAR-3, OVCAR-5, KOC-7C, SK-OV-3 και κυτταρικές σειρές TOV-112D. Είναι ενδιαφέρον, TOV-21G και ΝΕΠ έδειξαν παρόμοια χαμηλή έκφραση με την κανονική TIG-3 κυτταρική γραμμή.

επίπεδα (Α) RECQL1 έκφραση σε κυτταρικές σειρές δέκα OC. έκφραση RECQL1 βρέθηκε να είναι εξαιρετικά υψηλή σε KOC-2S, KOC-3S, κυτταρικές σειρές καρκίνου ωοθήκης Τοβ-112D OVCAR-3, OVCAR-5, KOC-7C, SK-OV-3 και σε σύγκριση με τις δύο κανονικές κυτταρικές γραμμές (ARPE-19 και TIG-3). (Β) Η επίδραση της RECQL1 σίγασης στην ανάπτυξη του οργανωμένου εγκλήματος κυτταρικής σειράς με ανάλυση χρόνου-πορείας. Ένα σύνολο από δέκα OC κυτταρικές σειρές επιμολύνθηκαν με είτε RECQL1-siRNA (στερεά κύκλος) ή NS-siRNA (τρίγωνο) για μια περίοδο 120 ωρών, όπως περιγράφεται στα Υλικά και Μέθοδοι. Η βιωσιμότητα των κυττάρων μειώθηκε με το χρόνο μετά τη θεραπεία siRNA. RECQL1-siRNA ανέστειλε σημαντικά τον πολλαπλασιασμό ενός ευρέος φάσματος OC κυτταρικών σειρών σύμφωνα με την μείωση του RECQL1 mRNA (που δείχνεται ως ιστογράμματα). Κατά τη χρονική πορεία, η έκφραση του mRNA RECQL1 μειώθηκε διαφορικά, ανάλογα με την κυτταρική γραμμή. Τα δεδομένα αντιπροσωπεύουν το μέσο ± SD, η = 3 (Γ) Η επίδραση της αποσιώπησης RECQL1 επί του κυτταρικού κύκλου των OC κυτταρικής σειράς μετρήθηκε με ανάλυση κυτταρομετρίας ροής. Οι κυτταρικές σειρές επιμολύνθηκαν με είτε NS-siRNA (Άνω πάνελ) ή RECQL1-siRNA (κατώτερο πάνελ) για 72 ώρες. Το ποσοστό των κυτταρικών πληθυσμών στη subG1, G1 /S και G2 /M είναι στάδια φαίνονται ως μέση τιμή ± SD σε κάθε ροή κυτταρομετρίας προφίλ.

Η

Αναστολή του πολλαπλασιασμού κυττάρου με OC RECQL1 σίγηση

Με ανοσοαποτύπωση, όλες οι κυτταρικές σειρές δέκα OC βρέθηκαν να εκφράζουν μεγαλύτερη ποσότητα πρωτεΐνης ελικάσης RECQL1 από τα φυσιολογικά κύτταρα. Με βάση αυτά τα αποτελέσματα, διερευνήσαμε την επίδραση της αποσιώπησης RECQL1 στην ανάπτυξη των διαφόρων OC κυτταρικές σειρές με ανάλυση χρονικής πορείας. Τα κύτταρα γραμμές 10 OC και τα 2 φυσιολογικά κύτταρα γραμμές μετήχθησαν είτε με RECQL1-siRNA ή με NS-siRNA (τρίγωνο) για 120 ώρες. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3Β, RECQL1-siRNA (μαύρος κύκλος) ανέστειλε σημαντικά τον πολλαπλασιασμό ενός ευρέος φάσματος OC κυτταρικών σειρών σύμφωνα με την μείωση του RECQL1 mRNA (δείχνεται ως ιστογράμματα), ενώ δεν είχε καμία επίδραση στην ανάπτυξη των δύο φυσιολογικές κυτταρικές σειρές (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται στο παρόν έγγραφο) [10]. Η βιωσιμότητα των κυττάρων, που δείχνεται ως η σχετική αύξηση σε σύγκριση με εκείνη των μη κατεργασμένων κυττάρων, μειώθηκε με το χρόνο μετά την αγωγή siRNA. Κατά τη διάρκεια του 24-120 ωρών χρονική πορεία, εκφράσεις RECQL1 mRNA μειώθηκαν διαφορικά, ανάλογα με την κυτταρική γραμμή. Είναι ενδιαφέρον ότι, το επίπεδο του mRNA RECQL1 αυξήθηκε προς το τέλος της χρονικής πορείας για μερικές από τις κυτταρικές γραμμές, αν και η αύξηση αυτή δεν υπερέβη ποτέ το 40% της αρχικής έκφρασης.

Όσον αφορά το μηχανισμό υποκείμενων ο μειωμένη κυτταρική βιωσιμότητα, διερευνήσαμε την δυνατότητα κύκλος κυττάρου αρκετών κύτταρα επεξεργασμένα OC RECQL1-siRNA. Τα κύτταρα siRNA επεξεργασμένα (μετά την επιμόλυνση 72 ώρες) απομονώθηκαν από καλλιέργεια και υποβλήθηκαν σε ανάλυση κυτταρικού κύκλου. Όπως φαίνεται στο Σχήμα 3C, οι κυτταρικοί πληθυσμοί όλων των RECQL1-siRNA επεξεργασμένα OC κύτταρα περιείχαν μια διακριτή subG1 κύτταρο κλάσμα των νεκρών κυττάρων, και συσσώρευση κυττάρων στο διάχυτο G1 /S και G2 /φάσεις M, που δείχνει ένα χαρακτηριστικό μιτωτική κυτταρικό θάνατο που συμβαίνουν κατά τη διάρκεια του κυτταρικού κύκλου (κάτω πάνελ). Σε ορισμένες RECQL1-siRNA-αγωγή OC κύτταρα, οι αυξημένοι πληθυσμοί G1 και G2 φάσεις Μ, κύτταρα /ενδεικτική μιας διακοπή του κυτταρικού κύκλου λόγω σύστημα οδοφράγματος βλάβη του DNA. Αντιθέτως, οι εν λόγω μη φυσιολογικά χαρακτηριστικά που παρατηρήθηκαν με τα συγγενή κύτταρα OC κατεργασία με το μη-φίμωση siRNA χρησιμοποιήθηκε για τα πειράματα ελέγχου (άνω πλαίσια). Έτσι, η φαινομενική αναστολή της ανάπτυξης των καρκινικών κυττάρων (φαίνεται στο Σχήμα 3Β) δεν οφείλεται στην καθυστέρηση της ανάπτυξης των κυττάρων, αλλά οφείλεται σε θανάτωση των βιώσιμων κυττάρων OC και μείωση του αριθμού των κυττάρων που προκαλείται από μιτωτικό κυτταρικό θάνατο.

συζήτηση

για τόσο ορώδες και ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα, συνδυασμένη θεραπεία με καρβοπλατίνη και πακλιταξέλη είναι μια αποτελεσματική στρατηγική και δίνει αφορμή για ένα εξαιρετικό θεραπευτικό αποτέλεσμα, ακόμη και αν ο καρκίνος βρίσκεται σε προχωρημένο στάδιο. Αντίθετα, δεν υπάρχει καμία θεραπευτική αγωγή κατά της πλατίνας ανθεκτικά αντισυλληπτικά χάπια, όπως σαφής κύτταρο αδενοκαρκινώματος και βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα, ή υποτροπιάζουσα ΣΛ από πυρίμαχο τύπου. κυττάρων αδενοκαρκινώματος σαφή και βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα δείχνουν νωχελικός συμπεριφορά όταν περιορίζεται στην ωοθήκη και συχνά διαγιγνώσκεται σε πρώιμο στάδιο, το οποίο παρέχει μια καλύτερη πρόγνωση για τον ασθενή. Ωστόσο, όταν η νόσος εκτείνεται εντός του εξω-ωοθηκών χώρο, τα ποσοστά ίασης τους είναι πολύ μικρότερη από αυτή του ορώδες αδενοκαρκίνωμα και ενδομητριοειδές αδενοκαρκίνωμα [13,14]. παράγοντες πλατίνας ως πρότυπο θεραπευτικό σχήμα περιλαμβάνει την καρβοπλατίνη, η οποία στοχεύει σύνθεση του DNA σε S-φάση και επάγει την απόπτωση. Η πακλιταξέλη, από τη σύγκριση, παρεμβαίνει στη σύνθεση της τουμπουλίνης να συμβάλλουν στην αναστολή του κυτταρικού κύκλου. Για το λόγο αυτό, αυτοί οι χημειοθεραπευτικοί παράγοντες λειτουργούν πιο αποτελεσματικά σε ενεργό, πολλαπλασιαστικές όγκους, ενώ αργή ανάπτυξη, χαμηλό-Ki-67 LI όγκων, όπως σαφής κύτταρο αδενοκαρκινώματος και βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα, δεν ανταποκρίνονται καλά, και η θεραπεία με αυτές τις θεραπείες μπορεί να οδηγήσει σε hyposensitivity

Μέχρι σήμερα, αρκετές μελέτες για τον εντοπισμό εναλλακτικών χημειοθεραπευτικών ή παράγοντες μοριακής στοχευμένες έχουν γίνει εναντίον πλατίνα ανθεκτικό ΣΛ.? Ωστόσο, μια γενική συναίνεση για τη βέλτιστη θεραπεία πρώτης γραμμής δεν έχει επιτευχθεί [15-20]. Επιπλέον, οι μελέτες δείχνουν ότι ένας σημαντικός αριθμός ασθενών με υποτροπή για καρκινώματα που ήταν αρχικά πλατίνα-ευαίσθητα, όπως ορώδες αδενοκαρκίνωμα και το αδενοκαρκίνωμα ενδομητριοειδές, καταλήγουν με πλατίνα-ανθεκτικά καρκινώματα.

Έχει αναφερθεί ότι η έκφραση RECQL1 παρατηρείται στο ήπαρ, του παχέος εντέρου, ο καρκίνος του πνεύμονα, γλοιοβλαστώματος και καρκίνους της κεφαλής και του λαιμού [7,21]. Σε αυτή τη μελέτη, με τη χρήση χειρουργικά δείγματα OC, παρατηρήσαμε έκφραση πυρηνικών RECQL1 σε 90% των 4 κύριοι υποτύποι OC (ορώδες, ενδομητριοειδές, σαφείς κυττάρων και βλεννώδες τύπου), με υψηλή (++) έκφραση παρατηρήθηκαν σε 54,5% των περιπτώσεων . Μια σύγκριση μεταξύ της έκφρασης RECQL1 και Ki-67 LI έδειξαν ότι RECQL1 (++) ομάδα συνδέεται με την υψηλή Ki-67LI (p = 0.02)? ως εκ τούτου, RECQL1 μπορεί να είναι ένα χρήσιμο πολλαπλασιασμού μοριακό δείκτη. Αναφέραμε προηγουμένως ότι RECQL1 θετικότητα σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα συσχετίσθηκε με ιστολογική βαθμού και Ki-67 LI [10]. Έτσι, η έκφραση RECQL1 μπορεί να προτείνει να συσχετίζεται έντονα με την εξέλιξη και διαφοροποίηση των όγκων. Από την άποψη της εξέλιξης του όγκου, η έκφραση RECQL1 συσχετίστηκε σημαντικά με ΦΥΓΩ διανομής στάδιο (p = 0.01), αν και έχασε την αξία του, όταν ρυθμιστεί για ιστολογικό τύπο. Ως εκ τούτου, ενώ η έκφραση RECQL1 μπορεί να δρα ως πολλαπλασιαστική παράμετρο, δεν καταφέραμε να αποδείξουμε συσχετισμούς μεταξύ RECQL1 και FIGO στάδιο και η συνολική επιβίωση. Είμαστε εικάζουν ότι αυτό μπορεί να είναι γιατί το μέγεθος της υπολειπόμενης νόσου συσχετίζεται πιο ξεκάθαρα με την επιβίωση σε ασθενείς με προχωρημένο στάδιο του όγκου [22].

Σε μας

in vitro

ανάλυση, ερευνήσαμε το δυνητική αντικαρκινική δράση του RECQL1-σίγηση σε κυτταρικές σειρές που είναι αντιπροσωπευτικά της ορώδες, ενδομητριοειδές, σαφείς κυττάρων, και βλεννώδες αδενοκαρκινώματα. Οι περισσότεροι, αν όχι όλα, τα καρκινικά κύτταρα που εξετάστηκαν μέχρι σήμερα έδειξαν υψηλότερα επίπεδα έκφρασης της πρωτεΐνης ελικάσης RECQL1 σε σύγκριση με τα φυσιολογικά κύτταρα. Λαμβάνοντας υπόψη ότι είναι ιδιαίτερα RECQL1 πάνω ρυθμισμένα σε ταχέως αναπτυσσόμενα κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων διαφόρων καρκίνων και μετασχηματισμένα κύτταρα [4-6,8], σαφείς κυττάρων και βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα που είναι γνωστό ότι είναι σχετικά αργό ρυθμό ανάπτυξης OC, έδειξαν λιγότερο έκφραση RECQL1 μπορεί να είναι λογικό. Σε μια τέτοια αργή ανάπτυξη καρκινικών κυττάρων, η ποσότητα των ενζύμων επιδιόρθωσης του DNA, συμπεριλαμβανομένων RECQL1 ελικάση μπορεί να γλιτώσει, ίσως επειδή ο άφθονος χρόνος που παρέχεται από αργή ανάπτυξη, αντί βοηθά να εκπληρώσει τις απαραίτητες εργασίες που απαιτούνται στην επιδιόρθωση του DNA.

Προηγουμένως έδειξε αντι-πολλαπλασιαστική επίδραση από RECQL1-siRNA σε διάφορες καρκινικές κυτταρικές σειρές [10,21]. Αυτό είναι αποτέλεσμα μια αυξημένη συσσώρευση της βλάβης του DNA στα κύτταρα του καρκίνου που προκαλείται από RECQL1 σίγηση οδήγησε σε σύλληψη Μ φάση και κυτταρικό θάνατο λόγω της ατελούς συστημάτων οδοφράγματος, οι οποίες ενδεικτικά της μιτωτικής καταστροφής [10,21]. Από την άλλη πλευρά, η κανονική κυτταρικές σειρές, συμπεριλαμβανομένων TIG-3 και ARPE-19, έδειξε ανοχή σε μιτωτική καταστροφή από RECQL1 φίμωση [10,21]. Κύρια διαφορά μεταξύ φυσιολογικών κυττάρων και καρκινικών κυττάρων θα μπορούσε να εξηγηθεί από την ικανότητα στον έλεγχο του κυτταρικού κύκλου. Τα περισσότερα καρκινικά κύτταρα είναι ανεπαρκή σε G1 και G2 σημείου ελέγχου της λειτουργίας και έτσι αποτυγχάνουν να συλλάβουν τον κυτταρικό κύκλο στη φάση G1 και G2 για να επιτραπεί κύτταρο να συμμετάσχουν στην επιδιόρθωση του DNA. Αντ ‘αυτού, τα κύτταρα να προχωρήσει στον κυτταρικό κύκλο σε φάση Μ όπου δεν επιτρέπεται επιδιόρθωσης του DNA. Έτσι, τα κύτταρα υφίστανται τελικά κυτταρικό θάνατο καθώς εισέρχονται μίτωση [23-25]. Σε αντίθεση, τα συστήματα οδοφράγματος σε φυσιολογικά κύτταρα παραμένει ανέπαφη, η οποία οδηγεί σε παροδική διακοπή του κυτταρικού κύκλου μέχρι το πρόβλημα έχει επιλυθεί DNA με την πρόσληψη ενός κατάλληλου συστήματος επιδιόρθωσης [21]. Με άλλα λόγια, μπορεί να θεωρηθεί ως φυσιολογικά κύτταρα είναι ανθεκτικά στην RECQL1 φίμωση, ενώ οι οδοφράγματος ελαττωματικά καρκινικά κύτταρα δεν είναι.

Στην παρούσα μελέτη, έδειξε επίσης RECQL1-siRNA αποσιώπηση που προκαλείται από τον κυτταρικό θάνατο και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων ανέστειλαν σε OC κυτταρικές σειρές. προηγούμενα δεδομένα μας θα υποστηρίξει ότι η μειωμένη βιωσιμότητα των κυττάρων OC επίσης προέκυψε από μιτωτική καταστροφή από RECQL1-siRNA αποσιώπηση. Περισσότερο ή λιγότερο, η έκφραση RECQL1 παρατηρήθηκε για όλες τις ιστολογικές υποτύπους OC, το οποίο μπορεί να υποδηλώνει μια αποτελεσματικότητα RECQL1-siRNA επί πλατίνα ανθεκτικά καρκίνων, όπως σαφής αδενοκαρκίνωμα κυττάρου, βλεννώδες αδενοκαρκίνωμα και μερικά από επαναλαμβανόμενες καρκίνων με πλατίνα ανθεκτικά τύπου.

ένα συνεργιστικό αντικαρκινικό αποτέλεσμα παρατηρήθηκε όταν RECQL1-siRNA χορηγήθηκε τοπικά σε ποντίκια με όγκους της κεφαλής και του λαιμού μαζί με μία ενδοφλέβια ένεση ενός παραγώγου cis-λευκοχρύσου [14]. Τα αποτελέσματα υπέδειξαν τη δυνητική συμμετοχή της RECQL1 DNA ελικάσης στη μείωση του cis-λευκοχρύσου που προκαλείται από βλάβη του DNA. Όσον αφορά την θεραπευτική εφαρμογή του siRNA κατά κακοήθων όγκων, αρκετοί ερευνητές έχουν αναφέρει την αποτελεσματικότητα ενός συνδυασμού άλλους χημειοθεραπευτικούς παράγοντες όπως η γεμσιταβίνη [26], καμπτοθεκίνη [27] και η αδριαμυκίνη [28]. Τα αποτελέσματα αυτών των μελετών έδειξαν ότι μια τέτοια συνδυαστική θεραπεία θα μπορούσε να μειώσει τις αρνητικές επιδράσεις των χημειοθεραπευτικών παραγόντων ενώ αυξάνεται η ευαισθησία των καρκινικών κυττάρων. Συγκριτικά, πολλοί άλλους χημειοθεραπευτικούς παράγοντες τείνουν να βλάψουν μη-καρκινικό ιστό. Για παράδειγμα, η καταστολή του μυελού των οστών, περιφερική νευρική διαταραχή, καρδιοτοξικότητα και νεφροτοξικότητα συχνά προκαλούνται.

Πρόσφατα, ετερογενή γονιδιακής έκφρασης σε ιστούς του καρκίνου αναφέρθηκε μέσω μελέτες σχετικά με τις συνεχόμενες δείγματα νεφρική όγκου-βιοψία [29]. Ακόμη και στο ίδιο δείγμα όγκου, διαφορετικές υπογραφές γονιδιακής έκφρασης ανιχνεύθηκαν με διαφορετικές περιοχές του δείγματος και του πρωτογενούς έναντι μεταστατικές θέσεις [29]. Μέχρι στιγμής, έχουν πολλές μοριακοί στόχοι έχουν προσδιοριστεί για την ανάπτυξη αντικαρκινικών φαρμάκων. Από την άποψη των μεταλλάξεων ή διαφορική έκφραση των γονιδίων κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης του καρκίνου, είναι επιτακτικό ότι η πλέον απαραίτητη γονίδιο που απαιτείται για την ανάπτυξη του καρκίνου είναι στοχευμένη. Σε σύγκριση με άλλα μοριακά στοχευμένες θεραπείες, RECQL1-siRNA στοχεύει μόνο την επιδιόρθωση του DNA, και ενεργεί ανεξάρτητα από οποιαδήποτε μετάλλαξη του γονιδίου ή έκφραση αλλαγή υπογραφής ειδικών στον καρκίνο. Πιστεύουμε ότι RECQL1 είναι ένα από τα λίγα στόχους υποψήφιο γονίδιο που δεν επηρεάζουν τις κανονικές κυτταρικών πληθυσμών.

Εν κατακλείδι, RECQL1 θα πρέπει να θεωρείται ως νέα πολλαπλασιαστική δείκτη. Επιπλέον, RECQL1-siRNA μπορεί να έχει την δυνατότητα να εφαρμοστούν ως μια νέα θεραπευτική μέθοδο κατά OC διαφόρων ιστολογικών και κλινικών χαρακτηριστικών, συμπεριλαμβανομένων και εκείνων ενός πλατίνα-ανθεκτική υπότυπο.