Αφηρημένο

Ιστορικό και Σκοπός

Κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης του προστάτη, μεσεγχυματικά-επιθηλιακά αλληλεπιδράσεις ρυθμίζουν την αύξηση και τη διαφοροποίηση των οργάνων. Σε ενήλικες προστάτη, στρωματικά-επιθηλιακά αλληλεπιδράσεις είναι σημαντικά για την ομοιόσταση του ιστού και επίσης να παίξει σημαντικό ρόλο στον καρκίνο του προστάτη. Σε αυτή τη μελέτη έχουμε εντοπίσει τα μόρια που παρουσιάζουν ένα πρότυπο έκφρασης μεσεγχυματικά στον αναπτυσσόμενο προστάτη, και ένα από αυτά έδειξε μειωμένη έκφραση σε στρώμα του καρκίνου του προστάτη.

Μεθοδολογία και Principal Ευρήματα

Πέντε υποψήφια μόρια προσδιορίζονται από πρακτικά προφίλ των αναπτυξιακών μεσέγχυμα του προστάτη επελέγησαν χρησιμοποιώντας ένα wholemount στην οθόνη situ υβριδισμού και σπούδασε Decorin (DCN), Semaphorin6D (Sema6D), SPARC /Οστεονεκτίνη (SPARC), Sprouty1 (Spry-1) και Tsukushi (Tsku). Η έκφραση σε ιστούς αρουραίου αξιολογήθηκε χρησιμοποιώντας wholemount in situ υβριδισμού (μεταγεννητική ημέρα (P) 0.5) και ανοσοϊστοχημεία (εμβρυϊκή ημέρα (Ε) Ε17.5, E19.5? P0.5? Ρ6? 28 & amp? Ενηλίκων). Τέσσερις υποψήφιοι (Decorin, SPARC, Spry-1, Tsukushi) έχουν immunolocalised σε ανθρώπινα εμβρυϊκά προστάτη (εβδομάδες 14, 16, 19) και η έκφραση του Decorin αξιολογήθηκε πάνω σε ένα ανθρώπινο προστάτη μικροσυστοιχία καρκινικού ιστού. Σε εμβρυϊκά και περιγεννητική αρουραίους Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Spry-1 και Tsukushi εκφράστηκαν με διαφορετικά πρότυπα διανομής σε όλη την μεσέγχυμα σε Ε17.5, E19.5, P0.5 και P6.5. Σε Ρ28 και ενηλίκων προστάτες υπήρχε ούτε μια μείωση στην έκφραση (Semaphorin6D) ή ένα διακόπτη σε επιθηλιακό έκφραση SPARC, και Spry-1, ενώ Decorin και Tsukushi ήταν ειδικά για μεσέγχυμα /στρώμα σε όλες τις ηλικίες. Έκφραση του Decorin, SPARC, Spry-1 και Tsukushi σε ανθρώπινα εμβρυϊκά προστάτες παράλληλα ότι σε αρουραίους. Decorin έδειξε μεσεγχυματικά και έκφρασης στρωματικών ειδικά σε όλες τις ηλικίες και εξετάστηκε περαιτέρω στον καρκίνο του προστάτη, όπου η έκφραση στρωματικά ήταν σημαντικά μειωμένη σε σύγκριση με μη-κακοήθεις του προστάτη.

Συμπέρασμα και τη σημασία

Έχουμε περιγράψει το χωροχρονικά έκφραση του Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Spry-1 και Tsukushi στην ανάπτυξη του προστάτη και παρατηρήθηκαν παρόμοια πρότυπα έκφρασης μεσεγχυματικά στον αρουραίο και άνθρωπο. Επιπλέον, Decorin έδειξε μειωμένη έκφραση στο στρώμα του καρκίνου του προστάτη σε σύγκριση με μη-κακοήθεις στρώμα του προστάτη

Παράθεση:. Henke Α, Γκρέις OC, Ashley GR, Stewart GD, Riddick ΑΚΕ, Yeun H, et al. (2012) στρωματικά Έκφραση Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Sprouty1 και Tsukushi στην ανάπτυξη του προστάτη και μείωση των επιπέδων Decorin στον καρκίνο του προστάτη. PLoS ONE 7 (8): e42516. doi: 10.1371 /journal.pone.0042516

Επιμέλεια: David L. McCormick, IIT Research Institute, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 17 Αυγούστου του 2011? Αποδεκτές: 9, Ιουλίου, 2012? Δημοσιεύθηκε: 3, Αυγούστου, 2012

Copyright: © Henke et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Χρηματοδότηση:. Το έργο χρηματοδοτήθηκε από το Συμβούλιο Ιατρικών Ερευνών (WBSe 1276.00.003.00004.01) και του καρκίνου του προστάτη Charity (https://www.prostate-cancer.org.uk/). Οι χρηματοδότες δεν είχε κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, τη συλλογή και ανάλυση των δεδομένων, η απόφαση για τη δημοσίευση, ή την προετοιμασία του χειρογράφου

Αντικρουόμενα συμφέροντα:.. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

Εισαγωγή

Τα μεσεγχυματικά-επιθηλιακά αλληλεπιδράσεις, με τη μεσολάβηση μέσω σηματοδότηση κυττάρου-κυττάρου, παίζουν ένα κρίσιμο ρόλο στην προδιαγραφή των οργάνων των θηλαστικών όπως ο προστάτης, το νεφρό, πνεύμονα, και του μαστικού αδένα και επίσης στην ομοιοστασία ιστών ενήλικων ιστών. Μεσέγχυμα είναι η εμβρυϊκή πρόδρομος των ενηλίκων στρώμα. Στους άνδρες οι διαφοροποιείται προστάτη και αναπτύσσεται από το ουρογεννητικό κόλπο και ρυθμίζεται από όρχεων ανδρογόνα. Στις γυναίκες, η ουρογεννητική κόλπων εξελίσσεται σε μήτρας και του κόλπου, αν και θα σχηματίσει ένα προστάτη αν οι εξωγενείς ανδρογόνα χορηγείται. Οι ανδρογόνων αποτελέσματα που μεσολαβούνται μέσω του υποδοχέα ανδρογόνων (AR) και μελέτες σε μοντέλα τρωκτικών απέδειξαν ότι AR εκφράζεται αρχικά στο μεσέγχυμα και στη συνέχεια στο επιθήλιο του αναπτυσσόμενου προστάτη. πειράματα ανασυνδυασμού ιστού χρησιμοποιώντας μεσέγχυμα και επιθήλιο είτε από άγριου τύπου ή AR-ανεπαρκή ποντίκια αποκάλυψε ότι ένας προστάτη μπορεί να αναπτυχθεί μόνο όταν το μεσέγχυμα έχει μια λειτουργική AR, ενώ επιθηλιακά AR δεν απαιτείται [1] – [3]. Η έννοια των εμβρυονικών μεσεγχυματικών και ενήλικες στρωματικά κύτταρα ως μεσολαβητές του οργάνου-ειδικότητας τονίστηκε από μια μελέτη που κατέδειξε την πολυμορφία και θέσης μνήμης σε ενήλικες ανθρώπινους ινοβλάστες [4]. Στο φυσιολογικό ανθρώπινο ενήλικο προστάτη η πλειοψηφία του διαμερίσματος στρωματικών αποτελείται από κύτταρα λείων μυών και ινοβλάστες, ενώ το υπόλοιπο αποτελείται από ενδοθηλιακά κύτταρα, περικύτταρα, λεμφοκύτταρα και μακροφάγα [5].

Πρόσφατες μελέτες κατέδειξαν μια ρόλος για το διαμέρισμα στρωματικά στη ρύθμιση της εξέλιξης των καρκινικών κυττάρων, η οποία είναι πλέον γενικά αποδεκτό [6]. Εντός του μικροπεριβάλλον του όγκου έχουν καρκίνο που σχετίζεται ινοβλάστες (CAF) έχουν προταθεί ως βασική πηγή προ-ογκογόνο παρακρινή μεσολαβητών [7] – [9]. TGFβ1 είναι ένας από τους παράγοντες που εκκρίνονται από καρκίνο που σχετίζεται ινοβλάστες (CAF) και μπορεί να δράσει με αυτοκρινή ή παρακρινή βρόχο με δέσμευση στο σύμπλοκο υποδοχέα TGFβRI /ΙΙ επί στρωματικών ή /και των επιθηλιακών κυττάρων σε μαστού και του προστάτη καρκινικών κυττάρων [10]. Η προ-ογκογόνο δυναμικό του TGFβ1 δείχθηκε όταν η γενετική εκτομή της ΤΟΡβΚΙΙ σε ινοβλάστες οδήγησε σε μειωμένη ανάπτυξη του όγκου σε ένα μοντέλο ποντικού [10], [11]. Μια άλλη σημαντική πτυχή της στρωματικών προ-ογκογόνο δραστηριότητα είναι η ετερογένεια των υποπληθυσμών ινοβλαστών και η έλλειψη κατάλληλων δεικτών για αυτούς. Αρκετές CAF δείκτες έχουν προταθεί, αλλά την αναγνώριση διακριτών υποπληθυσμών συν-έκφραση μερικά από αυτά και τη συμβολή αυτών των υποπληθυσμών για την ανάπτυξη του όγκου είναι τα πρόσφατα [12] – [14]

Υπάρχει μια σαφής σχέση μεταξύ της ανάπτυξης. σηματοδότηση και την ασθένεια. Στο μοντέλο αρουραίου Dunning του καρκίνου του προστάτη, η συμπερίληψη των εμβρυϊκών μεσέγχυμα μειωμένη ανάπτυξη του όγκου, υπογραμμίζοντας την διδακτική δύναμη των μεσεγχυματικών κυττάρων σε κακοήθη κύτταρα [15]. Επιπλέον, η υπόθεση McNeal υποδηλώνει ότι αναπτυξιακές πορείες επανα-δραστηριοποιείται στον προστάτη της νόσου [16].

Έτσι, ο προσδιορισμός των μεσεγχυματικών /στρωματικών μεσολαβητές των μεσεγχυματικών-επιθηλιακών επικοινωνίας είναι υψίστης σημασίας για την κατανόηση της ανάπτυξης και της νόσου του ένα όργανο. Εκκρίνεται ή δεσμευμένες σε μεμβράνη πρωτεΐνες φαίνεται να είναι οι πιο πιθανοί διαμεσολαβητές της στρωματικών /επιθηλιακών παρακρινής σηματοδότηση.

Σε μια προηγούμενη μελέτη από την ομάδα μας, σειριακή ανάλυση έκφρασης γονιδίου (SAGE) του μεσέγχυμα από την νεογέννητου αρουραίου ουρογεννητική οδό εντοπίστηκαν 219 υποθετικό μεταγραφές «μεσεγχυματικά ‘που εκφράζονται σε υψηλότερα επίπεδα σε μεσέγχυμα από γειτονικό επιθηλιακό ιστό. Αυτή η λίστα μπορεί να περιέχει υποψήφιοι για παρακρινικές μεσολαβητές των μεσεγχυματικών-επιθηλιακών διάλογο [17]. Εντός των 219 υποψήφιες μεταγραφές ταυτοποιήσαμε ένα υποσύνολο αυτό που κωδικοποιείται εκκρίνεται ή μόρια δεσμευμένη σε μεμβράνη, οι οποίες είναι οι πλέον πιθανοί υποψήφιοι για την αλληλεπίδραση μεσεγχυματικά-επιθηλιακά. Μέχρι σήμερα, έχουμε αναλύσει και να επικυρωθεί η έκφραση ορισμένων από αυτούς τους υποψηφίους για την ανάπτυξη του προστάτη. Έχουμε αποδείξει ότι Dlk1 και Notch2 σηματοδότηση ήταν σημαντικό για διακλάδωση, καθώς και τα επιθηλιακά και λεία διαφοροποίηση μυός σε συστήματα καλλιέργειας οργάνου του προστάτη [18]. Η EphB3 υποδοχέα και συνδέτη του EphrinB1 ανιχνεύθηκαν επίσης στο μεσέγχυμα του προστάτη, και του πολιτισμού οργάνων με EphrinB1-Ρο συνδέτη οδήγησε σε αυξημένη περιοχή του οργάνου, αλλά μειώθηκε εκκολαπτόμενος με διευρυμένη συμβουλές οφθαλμός, ενώ επώαση με EphB3-Fc υποδοχέα μειωθεί το μέγεθος του οργάνου και μειωμένη εκκολαπτόμενους [19 ]. Πλειοτροπίνη (PTN) βρέθηκε να εκφράζεται στην ανάπτυξη μεσέγχυμα του προστάτη και ρυθμίζεται η ανάπτυξη των αναπτυσσόμενων μεσέγχυμα, επιθήλιο και CAFS. Επιπλέον, σηματοδότηση των ανδρογόνων αυξημένη έκφραση ΡΤΝ [20].

Στο σύνολό τους, αυτές οι μελέτες δείχνουν ότι ένα μεγάλο ποσοστό των υποψηφίων που προσδιορίζονται από SAGE προφίλ μας παίζουν ένα ρόλο στην ανάπτυξη του προστάτη και τις ασθένειες. Στην παρούσα μελέτη, έχουμε αναλύσει περαιτέρω υποψήφια μόρια από προηγούμενες μελέτες SAGE μας για τον εντοπισμό εκείνων που εκφράζονται σε αρουραίους και ανάπτυξη του ανθρώπινου προστάτη και του καρκίνου του προστάτη. Η λογική μας ήταν ότι ταυτοποίηση μεσεγχυματικώς εκφρασμένων μορίων θα δώσει μια καλύτερη κατανόηση των στρωματικών βιολογίας. Έχουμε επιλέξει εκκρινόμενη και δεσμεύεται μεμβράνη μόρια προσδιορίζονται σε μελέτες SAGE μας και πραγματοποίησε wholemount στην οθόνη situ υβριδισμού (WISH) να καθορίσει κατά πόσον έδειξε μεσεγχυματικά έκφρασης.

Εδώ μπορούμε να δείξουμε πέντε υποψηφίους που προσδιορίζονται από την οθόνη WISH που επιβεβαιώθηκαν ως δείχνει μεσεγχυματικά έκφραση:

Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Spry-1

και

Tsukushi

(Πίνακας 1). Αυτά εξετάστηκαν κατά τη διάρκεια του αρουραίου και την ανάπτυξη του ανθρώπινου προστάτη μέσω ανοσοϊστοχημείας.

Η

Decorin και Tsukushi ήταν οι μόνοι υποψήφιοι με την έκφραση στρωματικά μόνο και στη συνέχεια ερευνήθηκε σε καρκίνο του προστάτη (PCA) ιστούς. Decorin έδειξαν μια σημαντική ρύθμιση προς τα κάτω σε σύγκριση με μη-κακοήθεις ιστούς, ενώ η έκφραση Tsukushi δεν έδειξε καμία διαφορική έκφραση.

Αποτελέσματα

Ταυτοποίηση και επιβεβαίωση της μεσεγχυματικώς Εκφράζεται μεταγραφές

μια προηγούμενη μελέτη του εργαστηρίου μας, SAGE ανάλυση των μεσέγχυμα προστάτη του αρουραίου εντοπίστηκαν 219 μεταγραφές που εκφράστηκαν σε επαγωγική μεσέγχυμα? αυτά που υπόσχεται δυναμικό ρυθμιστές της οργανογένεσης. SAGE προφίλ μελέτες μας χρησιμοποιήθηκε το θηλυκό Anlagen προστάτη, που ονομάζεται ΚΦ, δεδομένου ότι δεν έλαβε επιθήλια και ο στόχος μας ήταν να εντοπιστούν μη-επιθηλιακών μεταγραφές. Σύκο. 1Α δείχνει την ομολογία μεταξύ μεσέγχυμα των θηλυκών και αρσενικών ουρογεννητικού συστήματος (UGT) σε P0.5, και οι σημαντικές υποπεριοχές της μεσέγχυμα σκιασμένες με πράσινο χρώμα. Αυτές οι μελέτες SAGE εντοπίστηκαν μετάγραφα πιθανό να εκφράζονται κατά την μεσέγχυμα [17]. Εδώ, εστιάσαμε στην εκκρινόμενη ή δεσμευμένο σε μεμβράνη μορίων εντός του καταλόγου 219 μεταγραφή ως το πιο λογικό υποψήφιοι για μεσεγχυματικά-to-επιθηλιακά σηματοδότηση. Για να ορίσετε ποια από υποψήφια μόρια μας έδειξε συγκεκριμένα μοτίβα έκφρασης μεσεγχυματικά /στρωματικά, έγινε μια μικρή οθόνη WISH. Πέντε υποψήφιοι

Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Spry-1

και

Tsukushi

επιβεβαιώθηκαν ως μεσέγχυμα-εκφράζεται σε αυτή την οθόνη και έχει επιλεγεί για περαιτέρω έρευνα (Σχήμα 1Β, Πίνακας 1). Σύκο. 1 Β απεικονίζει τους αριθμούς των αντιγράφων (που αναγνωρίζονται μέσω «ετικέτες» από το 3 ‘άκρο του mRNA), κανονικοποιημένα ανά εκατομμύριο ετικέτες για να αντιπροσωπεύουν διαφορετικές μετρήσεις ετικέτα μεταξύ βιβλιοθηκών), η οποία έδωσε μία προσέγγιση επιπέδου έκφρασης μεταγράφου. Από τη λίστα των πέντε υποψηφίων,

Decorin

και

SPARC

ήταν οι πιο υψηλή έκφραση μεταγραφές, και στη συνέχεια

Sema6D, Spry-1

και

Tsku

. επίπεδα μεταγραφής μετρήθηκαν σε δυο διαφορετικές βιβλιοθήκες (VMP και VSU) και ο λόγος μεταξύ αυτών έδωσε μια ένδειξη της πιθανότητας εντοπισμού στο μεσέγχυμα VMP, καθώς η VMP είναι ένα υποσύνολο του VSU [17]. Μόρια εκφράζεται παντού έδωσε αναλογίες πιο κοντά στο 1, ενώ εκείνα που δείχνει εμπλουτισμό VMP είχαν αναλογίες 1,4 ή μεγαλύτερη.

Α) Σχηματική επισκόπηση των UGT αρουραίου ανατομίας στο περιγεννητική στάδιο (P0.5) για το αρσενικό (επάνω) και θηλυκό (κάτω). Η πράσινη σκιασμένη περιοχή αντιστοιχεί σε επαγωγική μεσέγχυμα, η οποία βρίσκεται και στα δύο, αρσενικό και θηλυκό UGTs. Το θηλυκό ΑΔΕΠ μεσέγχυμα χρησιμοποιήθηκε για μελέτες προφίλ γονιδιακής SAGE, και την οθόνη WISH μας με στόχο να εντοπιστούν οι μεταγραφές εκφράζονται σε αρσενικό μεσέγχυμα του προστάτη. Το σχήμα βασίζεται σε Thomson, 2001 [46]. Β) Τα επίπεδα έκφρασης Αντίγραφο της

Decorin, Sema6D, SPARC, Spry-1

και

Tsku

λαμβάνονται μέσω SAGE προφίλ των P0.5 θηλυκό αρουραίο ΑΔΕΠ [17]. Μεταγραφές εντοπίστηκαν μέσω μικρών, μεταγραφή-ειδικές αλληλουχίες ονομάζονται ετικέτες και καταμέτρηση τους αντανακλά το επίπεδο έκφρασης μεταγραφής. Η αναλογία μεταξύ μετράει ετικέτα ΑΔΕΠ και VSU αντιπροσωπεύει την πιθανότητα περιορισμού της επαγωγικής μεσέγχυμα? αξιών στο ή πάνω από 1,4 πρότεινε έκφραση μεσέγχυμα ειδικών. Γ) Ανίχνευση

Decorin, Sema6D, SPARC, Spry-1

και

Tsku

κατανομή του mRNA μέσω in situ υβριδισμού σε αρσενικούς UGTs P0.5 αρουραίου. Τα μικρά ένθετα δείχνουν UGTs αντιμετωπίζονται με τις αρνητικές RNA ανιχνευτές αίσθηση του ελέγχου, η κλίμακα μπαρ είναι Συντομογραφίες το 1 mm: AP πρόσθιο προστάτη, DP ραχιαίο προστάτη, DLP dorsolateral προστάτη, VP κοιλιακό προστάτη, ΑΔΕΠ κοιλιακό μεσεγχυματικά pad, VSU? ΑΔΕΠ + λείων μυών + ουροδόχου κύστης, SV σπερματοδόχο κύστη.

Η

Στη συνέχεια, θα πραγματοποιηθεί WISH σε αρουραίους νεογνών ουρογεννητικό φυλλάδια (UGT) για να προσδιοριστεί η έκφραση του mRNA που κωδικοποιούν πέντε υποψήφιες μόρια μας (Εικ. 1Γ).

Decorin

και

SPARC

μεταγραφές έδειξε ένα πολύ περιορισμένο πρότυπο έκφρασης στο μεσέγχυμα του προστάτη (όλα τα λοβούς), ενώ

Sema6D

,

Sprouty1

και

Tsukushi

εκφράστηκαν σε μεσέγχυμα του προστάτη, καθώς και της ουρήθρας μεσέγχυμα. Σε γενικές γραμμές, η οποία διακρίνεται έκφραση ήταν ορατή στο μεσέγχυμα γειτονικά επιθηλιακά αγωγούς ή /και στην ευρύτερη επιθήλιο που περιβάλλει μεσέγχυμα στον κοιλιακό προστάτη (VP), ο προστάτης ραχιαίο (DP) και το dorsolateral προστάτη (DLP).

Decorin

έδειξε την πιο περιορισμένο πρότυπο έκφρασης σε μεσέγχυμα προστάτη (Σχ. 1C) και ήταν σαφώς ορατή σε μεσέγχυμα γειτονικά επιθηλιακά μπουμπούκια, και ήταν απούσα από μη-προστατική μεσέγχυμα, όπως το μεσέγχυμα ουρήθρας.

ανοσολογικός του Decorin στις αναπτυσσόμενες προστάτη αρουραίου μεσέγχυμα

στη συνέχεια εξετάσαμε την κατανομή των Decorin πρωτεΐνης για να εξακριβωθεί εάν παρουσίασαν παρόμοια κατανομή με το mRNA, και αν ήταν, επίσης, περιορίζεται στο μεσέγχυμα. Στο Ε17.5 Decorin εκφράστηκε σε ένα υποσύνολο της UGT μεσέγχυμα (Σχήμα 2Α).? η κύστη και δίπλα στον υποψήφιο VP (Εικ. 2Β), η έκφραση περιορίστηκε σε μονά κύτταρα με ασθενή έκφραση στο κυτταρόπλασμα και ένα ισχυρό σήμα στην επιφάνεια του κυττάρου. Στο E19.5 Decorin έδειξε ισχυρή έκφραση στο μεσέγχυμα του προστάτη και ασθενέστερη χρώση γύρω κύστη με «θερμά σημεία» (Εικ. 2D). Ωστόσο, ο μελλοντικός VP και DP έδειξε επίσης Decorin έκφραση αλλά όχι τόσο ισχυρή όσο ότι στην περι-ουρηθρική μεσέγχυμα (Σχ. 2D, E). Νεογνών P0.5 και P6.5 UGTs έδειξε παρόμοια χρώση με μεσέγχυμα μόνο για την έκφραση και την πλήρη απουσία τόσο της ουρήθρας και του προστάτη επιθήλιο (Σχ. 2F-Ι). Είναι ενδιαφέρον, αυτό το μοτίβο έκφρασης διέφερε από το πρότυπο WISH, όπου Decorin βρέθηκε αποκλειστικά στο μεσέγχυμα εντός του προστάτη λοβούς, αλλά δεν το περι-ουρηθρική περιοχή, και μπορεί να αντανακλά την έκκριση και τη διάδοση των Decorin πρωτεΐνης. Την ημέρα 28, η έκφραση του Decorin βρέθηκε στο στρώμα που περιβάλλει προστάτη αγωγούς, και ήταν απούσα από επιθήλια (Σχ. 2J, K). Κατά την ενηλικίωση η VP ήταν μορφολογικά πλήρως διαφοροποιημένα, που περιέχει Decorin αρνητικά επιθήλια, και Decorin-θετικών στρώμα (Σχ. 2L, Μ). Εν ολίγοις, Decorin έδειξε μεσέγχυμα και έκφρασης στρωματικών ειδικά σε όλα τα αναπτυξιακά στάδια διερευνηθεί και μια πλήρη απουσία στο επιθήλιο. Επιπλέον, εντοπίστηκε κυρίως στο μη κυτταρικό διάμεσο.

αναπτυξιακά στάδια της Ε17.5 (AC), E19.5 (D, E), P0.5 (F, G), P6.5 (H , Ι), Ρ28 (J, K) και των νεαρών ενηλίκων (L, M) ερευνήθηκαν. Σε αναπτυξιακά στάδια Ε17.5, E19.5 οι μεγεθύνσεις δείχνουν τις περιοχές των μελλοντικών VP, ενώ στο P0.5 και P6.5 το VP ή ΑΣ εμφανίζονται. Decorin απουσίαζε στο επιθήλιο και στο διαμέρισμα των λείων μυών, αλλά υπάρχει στο μεσέγχυμα /στρώμα. Η έκφραση ήταν ιδιαίτερα έντονη σε μεσέγχυμα παρακείμενα της ουρήθρας και του προστάτου επιθήλιο, όπως υποδεικνύεται από τα μαύρα βέλη και βέλη. Αξίζει να σημειωθεί ότι, Decorin φαίνεται να συν-εντοπισμό με δομικές ίνες στην εξωκυτταρική μήτρα, που υποδεικνύεται με λευκά βέλη στο I και Μ Υπόμνημα: Β της ουροδόχου κύστης, των αιμοφόρων αγγείων BV, C τριχοειδές, DP ραχιαίο προστάτη, Ε επιθήλιο, Μ μεσέγχυμα, L αυλό προστάτη αγωγούς, S στρώμα, SM λείων μυών, U ουρήθρα, VP κοιλιακό προστάτη. Ράβδοι κλίμακας: 200 μm σε Α, D, F, Η και L, 400 μm στο J, και 50 μm σε όλες τις άλλες. Παρακαλείστε να σημειώσετε ότι η επιτροπή H έχει προσαρμοστεί μεγέθους – συμπεριλαμβανομένων των μπαρ κλίμακα – και δεν είναι στην ίδια μεγέθυνση όπως πίνακες Α, Δ και ΣΤ

Η

ανοσολογικός της Tsku στις αναπτυσσόμενες προστάτη αρουραίου μεσέγχυμα

έκφραση Tsku σε Ε17.5 και E19.5 περιοριζόταν σε μεσέγχυμα και λείων μυών, και έδειξε μια κυτταροπλασματική εντόπιση στην VP και DP (Εικ. 3Α, Β). Στο P0.5 και P6.5, Tsku απουσίαζε στα επιθήλια, αλλά υπάρχει στο λείο μυ και μεσέγχυμα που περιβάλλει τα επιθηλιακά αγωγούς στην VP και ΟΡ (Σχ. 3 C, D). Η

Tsku

mRNA και της πρωτεΐνης έδειξε παρόμοια πρότυπα διανομής.

Αναπτυξιακά στάδια της Ε17.5 (Α), E19.5 (Β), P0.5 (C), P6.5 ( D), Ρ28 (Ε) και νεαρών ενηλίκων VP (F) διερευνήθηκαν. Σε αναπτυξιακά στάδια Ε17.5, E19.5 οι μεγεθύνσεις δείχνουν τις περιοχές των μελλοντικών VP, ενώ στο P0.5 και P6.5 είναι είτε η VP ή το DP. έκφραση πρωτεΐνης Tsku ήταν μεσεγχυματικά /στρωματικά μόνο μέχρι Ρ28 (βέλη). Ωστόσο, σε ενήλικες VP, υπήρχε επιπλέον χαμηλή έκφραση στο επιθήλιο (κεφαλή βέλους στο F). Είναι ενδιαφέρον ότι, λεία μυϊκά κύτταρα ήταν επίσης θετικά για Tsku (P0.5 ως Ρ28). Ράβδοι κλίμακας ισούται 200 ​​μm.

Η

Την ημέρα 28, το επιθήλιο έλειπε Tsku και έκφραση στρωματικά ήταν λιγότερο έντονη (Σχ. 3 Ε). Το πλήρως διαφοροποιημένα ενήλικα VP παρουσίασαν περαιτέρω μείωση στην χρώση σε σύγκριση με Ρ28. Επιπλέον, Tsku παρατηρήθηκε σε επιθηλιακά κύτταρα (Εικ. 3 F).

ανοσολογικός του Semaphorin6D, SPARC και Spry-1 σε ανάπτυξη προστάτη αρουραίου μεσέγχυμα

Semaphorin6D εκφράστηκε στο μεσέγχυμα, συμπεριλαμβανομένου του VP Anlagen, στο Ε17.5 να E19.5 (συμπληρωματική Σχ. S1A, Β), περιγεννητική VP και λοβούς DP, και στο P6.5 UGTs αλλά απουσίαζε στα επιθήλια (Εικ. S1 C, D). Παραδόξως, ανοσοχρώση περιορίζονται στους πυρήνες παρόλο σημαφορίνες συνήθως αναφέρονται να είναι εντοπισμένη στην μεμβράνη του πλάσματος. Παρ ‘όλα αυτά, πρότυπο WISH και ανίχνευση της πρωτεΐνης ήταν συνεπής στην P0.5 UGTs. Ωστόσο, σε πλήρως διαφοροποιημένα ενήλικα VP, μόνο λευκοκύτταρα βρέθηκαν να εκφράζουν Semaphorin6D (Εικ. S1F). Εν ολίγοις, η Semaphorin6D έκφραση ήταν ισχυρότερες και πιο συνεπείς στο μεσέγχυμα της Ε17.5 να P0.5 UGTs με τον πυρηνικό εντοπισμό.

Ανοσοβαφή SPARC δεν ήταν ανιχνεύσιμη σε Ε17.5 ή E19.5 παλιά UGTs ( τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Ασθενής έκφραση μεσεγχυματικών στην VP και DP παρατηρήθηκε σε P0.5 και ήταν απούσα από το επιθήλιο (Εικ. S2A). SPARC εκφράστηκε στο μεσέγχυμα γύρω επιθηλιακά μπουμπούκια τόσο σε P0.5 και P6.5, αλλά χρώση ήταν πιο διαδεδομένη και έντονη στο τελευταίο στάδιο. Αντίθετα, δεν υπήρχε καμία επιθηλιακά έκφραση SPARC ανιχνεύσιμη (Εικ. S2B). Τα σχέδια για το

SPARC

ανίχνευση μέσω WISH και ανοσοϊστοχημεία (IHC) ήταν συνεπής στην P0.5 UGTs.

Στο Ρ28 και ενηλίκων, η έκφραση SPARC ήταν πολύ χαμηλά στο στρώμα σε Ρ28 (Εικ. S2C) και απουσιάζει σε ενήλικες VP (Εικ. S2D). Ωστόσο, υπήρχε μια ισχυρή έκφραση σε ένα υποσύνολο των επιθηλιακών κυττάρων του αυλού, εντοπισμένη στους πυρήνες. Συνοπτικά, ενώ απουσιάζει σε εμβρυϊκά και εμβρυϊκά στάδια, SPARC εκφράστηκε στο μεσέγχυμα κατά τη διάρκεια της περιόδου διακλάδωσης, αλλά υπάρχει μια στρωματική-επιθηλιακών αντιστροφή της έκφρασης κατά τον σχηματισμό και τη συντήρηση των ενηλίκων προστάτη με ισχυρή έκφραση σε μερικά επιθηλιακά κύτταρα, αλλά όχι το στρώμα .

Rat Spry-1 πρωτεΐνη ανιχνεύθηκε στο μεσέγχυμα αναπτυσσόμενων VP σε Ε17.5 και E19.5 UGTs (Σχ. S3A, Β). Στο στάδιο περιγεννητική P0.5 (Εικ. S3C), η ανίχνευση Spry-1 ήταν ισχυρότερο στο μεσέγχυμα γειτονικά επιθηλιακά αγωγών και λιγότερο έντονη στα μεσεγχυματικά κύτταρα μεταξύ αγωγών, και ήταν εντοπισμένο γειτονικά προς τον πυρήνα αντί να διανεμηθεί στο κυτταρόπλασμα (Εικ. S3F). Τα πρότυπα για την ανίχνευση Spry-1 μέσω WISH και IHC ήταν συγκρίσιμες σε P0.5 UGTs (Εικ. S3C).

Υπήρχε αδύναμη ανίχνευση Spry-1 εντός του προστάτη επιθηλιακά αγωγούς σε P0.5 και ήταν εντονότερη σε P6.5, ενώ μεσεγχυματικά έκφραση Spry-1 παρέμεινε αμετάβλητη (Εικ. S3D). Σε αντίθεση, προστάτη λοβούς την ημέρα 28 και ενηλίκων VP έδειξε μια αντιστροφή του Spry-1 έκφραση σε σύγκριση με P0.5 UGTs. Στην διαφοροποιημένη κατάσταση, η έκφραση ήταν ελάχιστη σε στρωματικά κύτταρα, αλλά ισχυρή στο επιθήλιο, στην οποία Spry-1 κατανέμεται σε όλο το κυτταρόπλασμα των βασικών και αυλού κύτταρα (Σχ. S3E, F).

Η κατανομή του Decorin, SPARC, Spry-1 και Tsukushi ανθρώπων εμβρυικό προστάτη

στη συνέχεια, εξετάσαμε την πρωτεΐνη εντοπισμό του Decorin, SPARC, Spry-1 και Tsukushi σε εμβρυϊκό προστάτη του ανθρώπου. Μια εβδομάδα 14 ανθρώπινου προστάτη δείχνει νωρίς επιθηλιακά εκκολαπτόμενους, παρόμοια με αρουραίου περιγεννητική φάση P0.5 [21]? βλέπε επίσης Σχ. 4, δύο κορυφαίες σειρές). Ωστόσο, η ακριβής συσχέτιση των αναπτυξιακών σταδίων είναι δύσκολο λόγω ανατομικών διαφορών, όπως τρωκτικά δείχνουν ζεύγη και διακριτά λοβούς, ενώ το ανθρώπινο προστάτη είναι συμπαγής χωρίς οργάνωση lobular [21].

Ανθρώπινα εμβρυϊκά προστάτη σε κύησης εβδομάδες 14, 16 και 19 δείχνονται στα δύο κορυφή, μέση και κάτω δύο δύο σειρές, αντίστοιχα (κάθε στάδιο ηλικία n = 1 ιστού). Οι A-S, C-U και E-W σειρές αντιπροσωπεύουν επισκοπήσεις (γραμμή κλίμακας = 200 um), ενώ το Β-Τ, D-V και F-X σειρές δείχνουν μεγεθύνσεις (γραμμή κλίμακας = 50 μm). Κάθε στήλη δείχνει την χρώση για μία πρωτεΐνη σε όλη τη δηλωμένη αναπτυξιακή χρονικό διάστημα, και ένθετα δείχνουν IgG αρνητικούς μάρτυρες. Μόνο Decorin έκφραση περιορίστηκε στο μεσέγχυμα, ενώ SPARC και TSKU ήταν επίσης μεσεγχυματικών με λίγο επιθηλιακών έκφραση σε εβδ 19. SPRY-1 έδειξε έκφραση σε μεσέγχυμα και κάποια επιθηλιακά έκφρασης με την αύξηση της ηλικίας. Βέλη υποδεικνύονται παραδείγματα των μεσεγχυματικών έκφρασης, ενώ αιχμές βελών δείχνουν επιθηλιακά έκφρασης. Υπόμνημα: δ. Ραχιαίο, ε επιθήλιο, αγωγός ed απαγωγές, s στρώμα, u ουρήθρα, κατά κοιλιακό

Η

έκφραση του Decorin σε ανθρώπινα εμβρυϊκά προστάτες περιορίστηκε στο διαμέρισμα μεσεγχυματικά και ήταν εντελώς απούσα στο ουροθήλιο και προστατικού επιθηλίου σε όλα τα αναπτυξιακά στάδια (Σχ. 4Α-F). Αξίζει να σημειωθεί ότι, η έκφραση του Decorin στους κοιλιακή λείου μυός περιοχές ήταν εξαιρετικά χαμηλή ή απούσα (π.χ. Εικ. 4C, κάτω πάνελ).

Δεν ήταν δυνατή η εντόπιση Semaphorin6D σε εμβρυϊκό προστάτη του ανθρώπου λόγω της κακής αντιδραστικότητα αντισώματος προς ανθρώπινο Sema6D (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

έκφραση SPARC έδειξε ισχυρότερη χρώση με την αύξηση του εμβρύου ηλικία και εκφράζεται κυρίως στο μεσέγχυμα (Σχ. 4G-L). Στο wk14, η έκφραση ήταν γειτονικό σε ενδοθηλιακά κύτταρα και ήταν επίσης παρούσα σε λείο μυ σε wk16 (Σχ. 4K-L). Σε δύο στάδια, το επιθήλιο στερείται της έκφρασης SPARC. Στο wk19, χρώση στρωματικά ήταν έντονη και βρίσκονται στα περισσότερα μεσεγχυματικά κύτταρα (Σχ. 4K-L), συμπεριλαμβανομένων ενδοθηλιακών τριχοειδών κυττάρων, και με ασθενή χρώση στα επιθήλια. Η χρώση στην κορυφαία περιοχή των επιθηλιακών υποδηλώνει ότι το επιθηλιακό σήμα SPARC μπορεί να είναι μη-ειδική (κεφαλή βέλους στο Σχ. 4L), όπως πρωτεΐνες εκκριτική του προστάτη μπορεί να δεσμεύσει μη-ειδικά μερικά αντισώματα.

Spry-1 βρέθηκε να να εκφράζονται σε δύο, το επιθηλιακό και μεσεγχυματικά διαμερίσματα και στις τρεις ηλικίες (Σχ. 4Μ-R). Στο wk14, το επιθηλιακό εντοπισμός ήταν στο βασική μεμβράνη και πάνω από το κορυφαία πλευρά των επιθηλιακών κυττάρων του αυλού. Μεσεγχυματικά έκφραση περιορίζεται σε μικρές αλλά έντονες κηλίδες που ήταν διάσπαρτα σε όλο το μεσέγχυμα (Εικ. 4K-L). Στο wk16, επιθηλιακά έκφραση ήταν απούσα από τη βασική μεμβράνη, αλλά εξακολουθούν να υπάρχουν στην κορυφαία επιφάνεια ενώ μεσεγχυματικά έκφραση εντοπίστηκε στο κυτταρόπλασμα ενός υποσυνόλου των κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των ενδοθηλιακών κυττάρων. Στο wk19, επιθηλιακά έκφραση κατανέμεται ομοιόμορφα σε όλη την βασική και κυττάρων του αυλού στιβάδες, εντοπισμένη στην επιφάνεια κυτταρόπλασμα και των κυττάρων. έκφραση Μεσεγχυματικά και πάλι περιορίζεται σε μικρές κηλίδες εντός ενός υποσυνόλου των ινοβλαστικών και ενδοθηλιακών κυττάρων.

Tsukushi βρέθηκε σε μικρό μεσεγχυματικών υποπεριοχές σύγκριση με τις άλλες τρεις πρωτεΐνες, και ο επιπολασμός του ήταν ελάχιστη και στα τρία στάδια (Σχ. 4S-Χ). Δεν υπήρχε σαφής σχήμα έκφρασης σε σχέση με τον κυτταρικό τύπο ή περιοχή, αντ ‘αυτού βρέθηκε σε ινοβλάστες και ενδοθηλιακά κύτταρα, και ανιχνεύθηκε στην ακραία πλευρά μερικών αυλού των επιθηλιακών κυττάρων στις εβδομάδες 14, 16 και 19.

Decorin, SPARC, Spry-1 και Tsukushi έδειξε εντυπωσιακές ομοιότητες σε σχέση με μεσεγχυματικά εντοπισμού, καθώς και αύξηση της χρώσης έντασης τόσο σε ανθρώπινο όσο και τρωκτικών, μεταξύ P0.5 να P6.5 και wk14 να wk19, αντίστοιχα. Οι ομοιότητες στην κατανομή πρωτεΐνης μεταξύ αρουραίου και ανθρώπου υποδηλώνουν ότι αυτά τα μόρια εκφράζονται μεσεγχυματικώς και μπορεί να παίξει σημαντικό ρόλο σε αναπτυξιακές ανάπτυξη και σχηματοποίηση του προστάτη.

Η έκφραση του Decorin μειώνεται σε καρκίνο προστάτη

Decorin και Tsukushi αποδείξει τα πιο μοτίβα έκφρασης μεσέγχυμα ειδικά στην ανάπτυξη του αρουραίου και του ανθρώπινου προστάτη, ενώ Semaphorin6D, SPARC και Spry-1 έδειξε τόσο μεσεγχυματικών και επιθηλιακών έκφρασης. Αποφασίσαμε να επικεντρωθεί σε μόρια που δείχνει μεσέγχυμα μόνο έκφρασης και ως εκ τούτου Decorin και Tsukushi ελήφθησαν προς τα εμπρός για την αξιολόγηση της έκφρασης σε καρκίνο του προστάτη και των ελέγχων ασθενή ταιριάζουν.

Ιστός μικρο συστοιχίες (TMAs) και τα δείγματα της δικής μας συλλογής του προστάτη χρωματίστηκαν για Tsukushi αλλά δεν παρατηρήθηκε διαφορά μεταξύ PCa και μη κακοήθη ιστό (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται). Στη συνέχεια, εξετάσαμε την έκφραση του Decorin.

Οι αντιπροσωπευτικές περιοχές της χρώσης Decorin φαίνεται στο Σχ. 5Α, χρώση Β Decorin βαθμολογήθηκε με ένα μόνο τύφλωσε ερευνητής για την έκταση των στρωματικών χρώσης Decorin (0 = καμία χρώση, 1 = ~1-20%, 2 = ~20-50%, 3 = & gt? 50% των στρωματικών περιοχή). Επίσης, η πιο διαδεδομένη ένταση της χρώσης σε κάθε σημείο του ιστού εκτιμήθηκε (ανεξάρτητο από το χρωματισμένο μέγεθος περιοχής) με ένα μη γραμμικό 0,1,2,3 σύστημα βαθμολόγησης με το 0 να απουσία χρώσης, και 1, 2, και 3 που αντιπροσωπεύει αύξηση της έντασης λεκέ. Υποθέσαμε ότι η ένταση χρώσης ήταν κατ ‘αναλογία προς το πραγματικό ύψος του Decorin πρωτεΐνης. Μεταξύ κακοήθη και μη κακοήθη ιστό, δεν υπήρχε διαφορά στην έκταση της περιοχής του στρωματικά έκφρασης ντεκορίνης (Mann-Whitney test? P = 0.45). Ωστόσο, βρήκαμε μια μείωση της έντασης της χρώσης Decorin σε κακοήθεις περιοχές σε σύγκριση με μη-κακοήθεις περιοχές ελέγχου. Συνολικά αναλύσαμε 186 σημεία ιστού από εμπορικά τμήματα TMAs και ιστού των τσιπ TURP από 10 ασθενείς.

προστάτη ιστού βάφονται με IHC για Decorin. Α) Ένας εκπρόσωπος spot προστάτη ιστών έδειξε λιγότερο έντονη χρώση από Β) έναν εκπρόσωπο μη κακοήθη σημείο ιστού. Ταυτόχρονα επεξεργασία προστατικό ιστό από την δική μας τράπεζα ιστών χρησιμοποιήθηκε με μη ειδική IgG ως αρνητικός έλεγχος C) και αντι-Decorin αντίσωμα ως θετικός έλεγχος (D), καταδεικνύοντας εξειδίκευση της χρώσης. Η αξιολόγηση του DAB ένταση χρώσης για κάθε κηλίδα ιστού παρουσιάζεται στην Ε), επιδεικνύοντας μία σημαντικά χαμηλότερη βαθμολογία σε PCa (n = 91) σε σύγκριση με μη-κακοήθεις μάρτυρες (n = 20) (δοκιμή Mann Whitney, δύο ουρών, ρ & lt? 0.0001). Τα κουτιά δείχνουν τις 25-75 εκατοστημόρια, ενώ μουστάκια δείχνουν τις 10-90 εκατοστημόρια.

Η

Η στατιστική ανάλυση με μια μη-παραμετρική δοκιμασία Mann-Whitney επιβεβαίωσε μια σημαντική μείωση της έντασης των στρωματικών χρώσης Decorin σε κακοήθεις περιοχές σε σύγκριση με μη-κακοήθεις περιοχές ελέγχου (p = 0,0001, σχ. 5Ε). Τα αποτελέσματα δείχνουν μια αρνητική ρύθμιση του Decorin σε προστάτη. Στη συνέχεια εξετάσαμε την πιθανή συσχέτιση μεταξύ Decorin ένταση χρώσης και το σκορ Gleason, όμως δεν υπήρχε καμία απόδειξη συσχέτισης (τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται).

Η

Συζήτηση

Μόρια που εκφράζονται σε μεσέγχυμα του προστάτη και του στρώματος παίζουν ρόλους κλειδιά στην ανάπτυξη, ομοιόσταση του ιστού και των ασθενειών όπως ο καρκίνος. Ξεκινήσαμε να ταυτοποιηθούν μόρια που έδειξαν έκφραση μεσέγχυμα ειδικά στον προστάτη, και στη συνέχεια αυτά που έδειξε επίσης απορυθμισμένη έκφραση σε καρκίνο του προστάτη. Αφετηρία μας ήταν μια αναπτυξιακή έκφραση του γονιδίου προφίλ μελέτη από την ομάδα μας, η οποία παρέχεται μια λίστα με 219 μόρια που πιθανώς περιορίζεται στην επαγωγική μεσέγχυμα του προστάτη. Η κατανομή μεταγραφή αρκετών από αυτούς τους υποψηφίους εξετάστηκε με wholemount υβριδοποίηση in situ, οδηγώντας στην ταυτοποίηση πέντε μεσεγχυματικώς εκφρασμένων μορίων κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης του προστάτη. Ένα από αυτά τα μόρια, η θεωρούμενη ογκοκατασταλτικό Decorin, έδειξε επίσης ρύθμιση προς τα κάτω σε στρώμα του καρκίνου του προστάτη.

Η

Έκφραση των μεσεγχυματικών Μόρια σε αναπτυσσόμενες προστάτες

Έχουμε εντοπίσει μεσεγχυματικά έκφραση του

Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Sprouty1 και Tsukushi

στην περιγεννητική UGTs αρουραίο P0.5 αρσενικό μέσω WISH και των αντίστοιχων πρωτεϊνών τους μέσω IHC. Σε όλες τις περιπτώσεις, υπήρχε μια πολύ καλή συσχέτιση μεταξύ χρώση WISH και ανίχνευση IHC των μορίων. Η κατανομή των Decorin πρωτεΐνης έδειξε περι-επιθηλιακά εντοπισμού που δεν ανιχνεύθηκε μέσω WISH. Το αντίσωμα Decorin ελέγχθηκε σε ανθρώπινη πρωτεΐνη Atlas έργου (https://www.proteinatlas.org/) ως ειδικό για ανθρώπινη Decorin και δεδομένου ότι είναι μια εκκρινόμενη πρωτεΐνη, εμείς εικάζουν ότι η ισχυρή χρώση δίπλα στο ουροθήλιο είναι το αποτέλεσμα της έκκριση και διάχυσης.

Decorin, Semaphorin6D, SPARC, Sprouty1

και

Tsukushi

εκφράστηκαν στο μεσέγχυμα αρουραίο κατά τη διάρκεια Ε17.5 να P0.5. Στο P6.5 τέσσερα μόρια έδειξαν μεσεγχυματικά μόνο έκφραση με μόνο Spry-1, που δείχνει την έκφραση τόσο μεσέγχυμα και επιθήλιο. Όταν η διαφοροποίηση του προστάτη ήταν σχεδόν ή πλήρως ολοκληρωθεί σε Ρ28 και ενηλίκων, αντίστοιχα, υπήρχαν σαφείς διαφορές μεταξύ των ομάδων: οι πρωτεογλυκάνες Decorin και Tsukushi είχε στρωματικά εντοπισμού, Semaphorin6D κερδίσει μια αδύναμη έκφραση στο επιθήλιο, αλλά ήταν σχεδόν εντελώς απούσα στο στρώμα, ενώ Spry -1 και SPARC έδειξε μια αντιστροφή των προτύπων με ισχυρή έκφραση προς το επιθηλιακό διαμέρισμα και σχεδόν απουσία στο στρώμα. Από τα στοιχεία αυτά καταλήγουμε στο συμπέρασμα ότι μεταξύ των μορίων του παρόντος διερευνώνται δύο διατηρούν έκφρασης στρωματικών στη διαφοροποιημένη προστάτη και το υπόλοιπο είτε παύουν έκφρασης στρωματικών ή να στραφούν σε επιθηλιακό έκφρασης.

Έκφραση μεσεγχυματικά σε αρουραίους και Ανθρώπινου Προστάτη Ανάπτυξης

υπάρχουν πρόσφατες αξιολογήσεις της συγκριτικής ανατομίας μεταξύ των ανθρώπων και των τρωκτικών [21], καθώς και συγκρίσεις των προγραμμάτων έκφρασης παγκόσμιας γονιδίων στην ανάπτυξη του προστάτη σε σχέση με τον καρκίνο [22]. Ωστόσο, λίγες μελέτες μέχρι σήμερα σε σύγκριση μεσεγχυματικώς εκφρασμένων γονιδίων και των πρωτεϊνών των προϊόντων τους μεταξύ των αναπτυσσομένων τρωκτικών και ανθρώπου προστάτη [23]. Στην παρούσα μελέτη βρήκαμε ότι η έκφραση του Decorin, SPARC, Spry-1 και Tsukushi σε ανθρώπινο προστάτη συσχετίζεται καλά με τις αντίστοιχες αναπτυξιακά στάδια στον προστάτη του αρουραίου, γεγονός που υποδηλώνει ότι ο αρουραίος είναι ένα κατάλληλο μοντέλο για τη μελέτη της ανάπτυξης του ανθρώπινου προστάτη.

Ένας ρόλος για Decorin σε προστάτη ανάπτυξης και Καρκίνος

Πολλές λειτουργίες έχουν περιγραφεί προηγουμένως για Decorin στην ανάπτυξη.