Αφηρημένο

Ιστορικό

IQ-πρωτεϊνική περιοχή ΟΤΡάσης ενεργοποίησης 1 (IQGAP1) δεσμεύεται με Dishevelled (ϋνΙ) και λειτουργεί ως ρυθμιστής της ϋνΙ πυρηνικού εντοπισμού σε έμβρυα Xenopus. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ IQGAP1 και ϋνΙ σε καρκινικούς ιστούς δεν είναι σαφής.

Υλικά και Μέθοδοι

Χρησιμοποιήσαμε ανοσοϊστοχημεία για την αξιολόγηση των εκφράσεων του IQGAP1 και ϋνΙ σε μία ομάδα από 111 μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα καρκίνου (NSCLC) ασθενείς. Σύλλογος εντοπισμού εκφράσεις τους με κλινικοπαθολογοανατομικές παράγοντες αναλύθηκε επίσης.

Αποτελέσματα

Το θετικό ρυθμό IQGAP1 σε πρωτογενείς όγκους ήταν 48,6% (54/111) για cytoplamic έκφρασή του, το 9,0% (10 /111) για την πυρηνική έκφραση και 31,5% (35/111) για μεμβρανώδη έκφραση? το θετικό ποσοστό ϋνΙ ήταν 65,8% (73/111) για cytoplamic έκφραση, 9,9% (11/111) για την πυρηνική έκφραση και 10,8% (12/111) για μεμβρανώδη έκφρασης. ρυθμός Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ ήταν 77,8% (42/54) στο κυτταρόπλασμα, 80,0% (8/10) στον πυρήνα και 8,6% (3/35) στην μεμβράνη. Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα συσχετίζονταν σημαντικά (Ρ & lt? 0,05), αλλά όχι στη μεμβράνη (Ρ & gt? 0,05). Οι θετικές τιμές έκφραση της κυκλίνης D1 και c-myc ήταν σημαντικά υψηλότερη στην ομάδα του IQGAP1 και ϋνΙ συνέκφραση στον πυρήνα από ότι στο κυτταρόπλασμα. ρυθμός Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα ήταν σημαντικά υψηλότερη σε λεμφαδένες κομβικών μεταστάσεις (63,3%, 19/30) από ό, τι σε πρωτογενείς όγκους (38,3%, 31/81), που συσχετίζεται με κακή πρόγνωση. Πενταετής χρόνος επιβίωσης μετά την εκτομή του στην ομάδα με συν-έκφραση τους στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από αυτή χωρίς συνέκφραση (44.705 ± 3.355 έναντι 58.403 ± 2,543 μήνες, σ & lt? 0,05).

Συμπεράσματα

συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα συσχετίστηκε με τη λέμφο κομβικών μεταστάσεων και φτωχή πρόγνωση του NSCLC, και συνέκφραση σε πυρήνα μπορεί να παίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην ενεργοποίηση του κανονικού μονοπατιού Wnt.

Παράθεση: Zhao Η, Xie C, Λιν Χ, Zhao Υ, Han Υ, Fan C, et al. (2014) Συνέκφραση του IQ-Τομέα ΘΤΡάσης-Ενεργοποίηση Protein 1 (IQGAP1) και Dishevelled (ϋνΙ) συσχετίζεται με κακή πρόγνωση σε μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα. PLoS ONE 9 (12): e113713. doi: 10.1371 /journal.pone.0113713

Συντάκτης: John D. Minna, Πολυτεχνείου της Texas Southwestern Medical Center στο Ντάλας, Ηνωμένες Πολιτείες της Αμερικής

Ελήφθη: 3 Ιουλίου, 2014? Αποδεκτές: 27 Οκτωβρίου, 2014? Δημοσιεύθηκε: 1 Δεκέμβρη, 2014

Copyright: © 2014 Zhao et al. Αυτό είναι ένα άρθρο ανοικτής πρόσβασης διανέμεται υπό τους όρους της άδειας χρήσης Creative Commons Attribution, το οποίο επιτρέπει απεριόριστη χρήση, τη διανομή και την αναπαραγωγή σε οποιοδήποτε μέσο, ​​με την προϋπόθεση το αρχικό συγγραφέα και την πηγή πιστώνονται

Δεδομένα Διαθεσιμότητα:. Η συγγραφείς επιβεβαιώνουν ότι όλα τα δεδομένα που διέπουν τα ευρήματα είναι πλήρως διαθέσιμα χωρίς περιορισμούς. Όλα τα σχετικά δεδομένα είναι εντός του χαρτιού

Χρηματοδότηση:.. Οι συγγραφείς δεν έχουν καμία υποστήριξη ή χρηματοδότηση για να αναφέρετε

Αντικρουόμενα συμφέροντα:. Οι συγγραφείς έχουν δηλώσει ότι δεν υπάρχουν ανταγωνιστικά συμφέροντα

οι οικογενειακές Εισαγωγή

IQGAP πρωτεΐνες που υπάρχουν σε πολλές οργανισμούς, συμπεριλαμβανομένης της μαγιάς, τα ψάρια και τα θηλαστικά. Υπάρχουν τρεις ισομορφές της IQGAP στον άνθρωπο: IQGAP1, IQGAP2 και IQGAP3. IQGAP1 είναι το καλύτερο που χαρακτηρίζεται και το πιο ευρέως μελετηθεί μέλος της οικογένειας IQGAP. Είναι μια πρωτεΐνη σκαλωσιά που δεσμεύεται με νηματοειδή ακτίνη και τις λειτουργίες για τη διασύνδεση και τη σταθεροποίηση νημάτια ακτίνης μέσω τομέα του calponin ομολογία (CH) στο Ν-άκρο [1]. Προηγούμενες εκθέσεις έδειξαν ότι IQGAP1 επηρέασε την κυτταρική κινητικότητα στην αιχμή των μεταναστευτικών κυττάρων, αυξάνοντας τα επίπεδα των ενεργών Rac1 και Cdc42 [2]. IQGAP1 δείχνει αυξημένα επίπεδα σε μια ποικιλία τύπων καρκίνου, συμπεριλαμβανομένου του καρκίνου του παγκρέατος [3]. Η έκφραση και υποκυτταρική τοποθεσία του IQGAP1 σε αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα σχετίζεται με ιστολογική διαφοροποίηση και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να προβλέψει την επιβίωση σε ασθενείς [4]. Πρόσφατες έρευνες δείχνουν ότι IQGAP1 είναι ένας παράγοντας κινδύνου για λεμφαδένα μετάσταση του πνεύμονα ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα [5].

ϋνΙ έχει αναγνωριστεί ως βασικός ρυθμιστής της Wnt σηματοδότησης (συμπεριλαμβανομένων των κανονικών και noncanonical μονοπάτια), το οποίο είναι ένα βασικό συστατικό της φυσιολογικής διαδικασίας που εμπλέκονται στην εμβρυϊκή ανάπτυξη και την εξέλιξη του όγκου [6], [7]. Πολλές αναφορές έχουν καταδείξει το ρόλο της ϋνΙ σε όγκους. ΫνΙ υπερέκφραση συσχετίστηκε σημαντικά με κακή διαφοροποίηση και μετάσταση λεμφαδένα σε NSCLC [8]. ΫνΙ-1 και ϋνΙ-3 επηρεάσει NSCLC εισβολή των κυττάρων, κυρίως μέσω των κανονικών και noncanonical Wnt μονοπάτια, αντίστοιχα [9]. Wnt5a προωθεί τη μετανάστευση των κυττάρων του καρκίνου του μαστού μέσω ϋνΙ-2 [10].

IQGAP1 λειτουργεί ως ρυθμιστής της ϋνΙ πυρηνικού εντοπισμού στη σηματοδότηση Wnt [11]. Ωστόσο, ο συσχετισμός μεταξύ IQGAP1 και ϋνΙ σε όγκους είναι ασαφής. Στην παρούσα μελέτη, πραγματοποιήσαμε μια ανοσοϊστοχημική ανάλυση για τον προσδιορισμό των εκφράσεων και τις θέσεις των IQGAP1 και ϋνΙ σε NSCLC. Επίσης, αναλύσαμε τη σχέση τους με κλινικοπαθολογικών παραμέτρων.

Υλικά και Μέθοδοι

Ηθική Δήλωση

Όλοι οι ανθρώπινοι ιστοί ελήφθησαν σύμφωνα με το ανθρώπινο υποκείμενο ερευνητικά πρωτόκολλα εγκεκριμένα από την Κίνα Ιατρική συμβούλιο Εξέτασης University. ιστούς όγκων ελήφθησαν με τη γραπτή συγκατάθεση από ενήλικες ασθενείς με ΜΜΚΠ.

δείγματα ιστών και

δεδομένων του ασθενούς

Συλλέξαμε 111 δείγματα από ασθενείς με ΜΜΚΠ οι οποίοι υποβλήθηκαν σε πλήρη εκτομή στην Πρώτη συνδεδεμένες νοσοκομείο της Κίνας Ιατρικής Πανεπιστήμιο από τον Ιανουάριο έως το Δεκέμβριο του 2008. Κανένας από τους ασθενείς είχαν λάβει ακτινοθεραπεία ή χημειοθεραπεία πριν από τη χειρουργική εκτομή. Συνέχεια πληροφορίες που λαμβάνονται από την εξέταση του ιατρικού φακέλου του ασθενούς. Το σύστημα pTNM στάσης της Διεθνούς Ένωσης κατά του Καρκίνου (7η έκδοση) χρησιμοποιήθηκε στη μελέτη μας. Η μελέτη αυτή διεξήχθη με την έγκριση του τοπικού συμβουλίου θεσμικής αναθεώρησης σε Κίνα Ιατρικό Πανεπιστήμιο. Οι κύριες κλινικές και παθολογικές μεταβλητές όλων των ασθενών έχουν ως εξής: 46 περιπτώσεις ακανθοκυτταρικού καρκινώματος, 65 περιπτώσεις αδενοκαρκινώματος? 38 περιπτώσεις και διαφοροποίησης, 73 περιπτώσεις μέτριας-φτωχών διαφοροποίηση? 67 περιπτώσεις στο στάδιο Ι, 20 περιπτώσεις στο στάδιο ΙΙ, 24 περιπτώσεις ήταν σταδίου ΙΙΙ? 70 περιπτώσεις άνδρες ασθενείς, 41 περιπτώσεις γυναικών ασθενών? η μέση ηλικία είναι 57 ετών.

Ανοσοϊστοχημεία

χειρουργικά δείγματα όγκου μονιμοποιήθηκαν με 10% ουδέτερη φορμαλίνη, ενσωματωμένο σε παραφίνη και 4 μm πάχους τομές παρασκευάζονται. Ανοσοϊστοχημική χρώση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το αβιδίνης-βιοτίνης-υπεροξειδάσης μέθοδο (UltrasensitiveTM, MaiXin, Fuzhou, Κίνα). Οι τομές αποπαραφινοποιήθηκαν σε ξυλόλιο, επανυδατώθηκαν με κλιμακούμενες αλκοόλη, και μετά βράζεται σε 0,01 Μ κιτρικού ρυθμιστικού (ρΗ 6,0) για 2 λεπτά με αυτόκλειστο. υπεροξείδιο του υδρογόνου (0.3%) εφαρμόστηκε για να εμποδίσει την ενδογενή δραστηριότητα του υπεροξειδίου και οι τομές επωάστηκαν με φυσιολογικό ορό κατσίκας για να μειωθεί η μη ειδική πρόσδεση. Τομές ιστού στη συνέχεια επωάστηκαν με πρωτεύοντα αντισώματα όλη τη νύχτα στους 4 ° C. Πρωτογενή αντισώματα (ποντικού αντι-ανθρώπου) έχουν ως εξής: IQGAP1 μονοκλωνικό αντίσωμα (1:40 SC-376021, Santa Cruz Biotechnology, USA), ϋνΙ μονοκλωνικό αντίσωμα (1:25 SC-166303, Santa Cruz), η κυκλίνη D1 μονοκλωνικό αντίσωμα (1:100, SC-20044, Σάντα Κρουζ), c-myc μονοκλωνικό αντίσωμα (1:500, cat.ab32, Abcam). Βιοτινυλιωμένο κατσίκας IgG ποντικού ορός χρησιμοποιήθηκε ως δευτερεύον αντίσωμα. Ως έλεγχος ισοτύπου, ποντικού IgG (Maixin Biotechnology, Fuzhou, Fujian, Κίνα, στην ίδια συγκέντρωση του πρωτογενούς αντισώματος) χρησιμοποιήθηκε αντί του πρωτογενούς αντισώματος (Σχήμα S1). Μετά την πλύση, οι τομές επωάστηκαν με στρεπταβιδίνη-βιοτίνη συζευγμένο με υπεροξειδάση αρμορακίας, και η αντίδραση υπεροξειδάσης εμφανίσθηκε με 3,3′-διαμινοβενζιδίνη τετραϋδροχλωρική. Αντιχρωματισμός έγινε με αιματοξυλίνη, και οι τομές στη συνέχεια αφυδατώθηκαν με αιθανόλη προτού τοποθετηθεί.

Αξιολόγηση της χρώσης

Η ένταση χρώσης και το ποσοστό των κυττάρων που βάφονται σε αντιπροσωπευτικές περιοχές κάθε πλακίδιο ξεχωριστά αξιολογήθηκαν και σκόραρε από δύο ερευνητές, οι οποίοι δεν γνώριζαν τα κλινικά δεδομένα σχετικά με τους ασθενείς. Πέντε απόψεις εξετάστηκαν ανά διαφάνεια, και 100 κύτταρα παρατηρήθηκαν ανά προβολή στα 400 × μεγέθυνση. Για IQGAP1 ή ϋνΙ, τα ανοσοϊστοχημικές αποτελέσματα έδειξαν ότι η θετική χρώση εντοπισμένη στην μεμβράνη πυρήνα, κυτόπλασμα, και (ή). Οι όγκοι που ορίζονται ως κυτταροπλασματική έκφραση όταν περισσότερα κύτταρα όγκου κατά 20% ή έδειξαν κυτταροπλασματική χρώση? όγκοι που ορίζεται ως πυρηνική έκφραση όταν περισσότερα κύτταρα όγκου κατά 20% ή έδειξαν πυρηνική χρώση, είτε κυτταροπλασματική χρώση ή όχι? όγκοι που ορίζονται ως μεμβρανώδη έκφραση όταν περισσότερα κύτταρα όγκου κατά 20% ή έδειξε μεμβρανώδη χρώση, είτε κυτταροπλασματική χρώση ή όχι. Οι περιοχές με θετική έκφραση ήταν κίτρινο ή καφέ-κίτρινο, και οι περιοχές με αρνητική έκφραση δεν ήταν χρώση. Για κυκλίνη D1 ή c-myc, τα ανοσοϊστοχημικές αποτελέσματα έδειξαν ότι η θετική χρώση εντοπισμένη στον πυρήνα ή πυρήνα /κυτταροπλάσματος.

Στατιστική ανάλυση

SPSS έκδοση 16.0 για Windows χρησιμοποιήθηκε για όλες τις αναλύσεις. Η Chi-τετράγωνο τεστ χρησιμοποιήθηκε για να εξετάσει διάφορες πιθανές συσχετίσεις. ανάλυση επιβίωσης Kaplan-Meier χρησιμοποιήθηκε για να υπολογιστεί η πιθανότητα επιβίωσης των ασθενών, και οι διαφορές της επιβίωσης μεταξύ των υποομάδων των ασθενών. Το μοντέλο παλινδρόμησης αναλογικών κινδύνων Cox χρησιμοποιήθηκε για να εκτιμηθεί η πιθανή προγνωστική σημασία του κλινικοπαθολογοανατομικές μεταβλητών. Όλες οι τιμές P βασίστηκαν στα δύο όψεων στατιστική ανάλυση, και η P & lt? 0,05 θεωρήθηκε στατιστικά σημαντική σε διαφορά

Αποτελέσματα

1.. Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ κυρίως στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα

Ο θετικός ρυθμός έκφραση IQGAP1 ήταν 89,2% (99/111) και 48,6% (54/111) για cytoplamic έκφραση της, 9,0% (10 /111) για την πυρηνική έκφραση και 31,5% (35/111) για μεμβρανώδη έκφρασης. Ο θετικός ρυθμός έκφραση της ϋνΙ ήταν 86,5% (96/111) και 65,8% (73/111) για cytoplamic έκφραση, 9,9% (11/111) για την πυρηνική έκφραση και 10,8% (12/111) για μεμβρανώδη έκφραση (Πίνακας S1).

ρυθμό συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ ήταν 77,8% (42/54) στο κυτταρόπλασμα (Πίνακας 1, Σχήμα 1), 80,0% (8/10) στον πυρήνα (Πίνακας 1, Σχήμα 2Α -ΡΕ). Συνέκφραση στο κυτταρόπλασμα συσχετίστηκε σημαντικά (Πίνακας 1, Ρ = 0,009, r = 0,246), επίσης στον πυρήνα (Πίνακας 1, Ρ = 0,000, r = 0,738)? ρυθμός συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στη μεμβράνη ήταν μόνο 8,6% (3/35), και η συνέκφραση στη μεμβράνη δεν συσχετιζόταν (Πίνακας 1, Ρ & gt? 0,05, Εικόνα S2)

Α-Β:. αδενοκαρκίνωμα ? C-D: καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων. Αρχική μεγέθυνση, 400 ×? κλίμακα bar, 20 μm.

Η

Συνέκφραση IQGAP1 (Α) και ϋνΙ (C) στον πυρήνα του αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα. Συνέκφραση IQGAP1 (Β) και ϋνΙ (D) στον πυρήνα του πλακώδους καρκινώματος πνεύμονα. Θετική έκφραση της κυκλίνης D1 (Ε) και c-myc (G) σε αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα. Θετική έκφραση της κυκλίνης D1 (F) και c-myc (H) σε πνεύμονα καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων. Αρχική μεγέθυνση, 400 ×? κλίμακα bar, 20 μm.

Η

Η έκφραση της κυκλίνης D1 και c-myc ήταν σημαντικά θετικά στην ομάδα της IQGAP1 και ϋνΙ συν-έκφραση στον πυρήνα (Σχήμα 2Ε-Η), και τους θετικούς ρυθμούς έκφρασης ήταν 100% (8/8) και 87,5% (7/8), αντίστοιχα. Στην ομάδα των IQGAP1 και ϋνΙ συνέκφραση στο κυτταρόπλασμα, τα θετικά ποσοστά έκφραση της κυκλίνης D1 και c-myc ήταν 52,4% (22/42) και 35,7% (15/42), αντίστοιχα. Οι θετικές τιμές έκφραση της κυκλίνης D1 και c-myc στην ομάδα των πυρηνικών συνέκφραση ήταν σημαντικά υψηλότερη από εκείνη της κυτταροπλασματικής συνέκφραση (Ρ & lt? 0,05)

2.. Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα ή στον πυρήνα συσχετίστηκε με λεμφικό μετάσταση του NSCLC

Όπως φαίνεται στον Πίνακα 2, ρυθμός συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα ήταν 63,3% (19/30) στην ομάδα με λεμφαδένες κομβικών μεταστάσεις (Ν1-3) και 38,3% (31/81) στην ομάδα με πρωτοπαθή αναπτύξεις (N0). Κομβικές μεταστάσεις έδειξε υψηλότερο ποσοστό συν-έκφραση της IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα από πρωτογενείς όγκους (P & lt? 0,05). Δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορετικό ρυθμό δείχθηκε μεταξύ της ομάδας των Τ1 και T2-4 (κατάσταση όγκου) (P & gt? 0.05, Πίνακας S2), και μεταξύ της ομάδας των αδενοκαρκίνωμα και το καρκίνωμα των πλακωδών κυττάρων (ιστολογικών τύπων) (P & gt? 0.05, Πίνακας S3 ).

Η

3. Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα ή στον πυρήνα συσχετίστηκε με κακή πρόγνωση του NSCLC

κατά Kaplan-Meier ανάλυση επιβίωσης έδειξε ένα σημαντικά χαμηλότερο χρόνο επιβίωσης σε ασθενείς με συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα από εκείνους με δεν συν-έκφραση. Πέντε χρόνια χρόνος επιβίωσης μετά την εκτομή στην ομάδα με συν-έκφραση τους στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη χωρίς συνέκφραση (44,705 ± 3,355 έναντι 58,403 ± 2,543 μηνών, p & lt? 0,05, Σχήμα 3Α), και την ομάδα των πυρηνικών συνέκφραση ήταν σημαντικά χαμηλότερη από εκείνη των κυτταροπλασματικών συνέκφραση (36.000 ± 6.329 έναντι 46.528 ± 3,758 μήνες, P & lt? 0.05, Σχήμα 3Β).

(Α) α.Η ομάδα με IQGAP1 και ϋνΙ noncoexpression στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα ( 61 περιπτώσεις)? β.Η ομάδα με IQGAP1 και ϋνΙ συνέκφραση στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα (50 περιπτώσεις) (Β) Α.Η ομάδα με IQGAP1 και ϋνΙ noncoexpression στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα (61 περιπτώσεις)? β.Η ομάδα με IQGAP1 και ϋνΙ συν-έκφραση στο κυτταρόπλασμα (42 περιπτώσεις)? ομάδα γ.Η με IQGAP1 και ϋνΙ συν-έκφραση στον πυρήνα (8 περιπτώσεις).

Η

Για να διευκρινιστεί αν συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα συσχετίστηκε ανεξάρτητα με την πρόγνωση των ασθενών με NSCLC, χρησιμοποιήσαμε το μοντέλο παλινδρόμησης αναλογικού κινδύνου Cox. Το αποτέλεσμα έδειξε ότι η κυτταροπλασματική και πυρηνική coexpressions ήταν ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου για την πρόγνωση των ασθενών με NSCLC (P & lt? 0,05? Πίνακας 3).

Η

Συζήτηση

Ως ένα σημαντικό τελεστή Rho GTPases, IQGAP1 είναι μια πρωτεΐνη ικρίωμα και παίζει θεμελιώδεις λειτουργία στην κίνηση των κυττάρων με ρύθμιση της ακτίνης του κυτταροσκελετού μέσω Rac1 και Cdc42 [12] – [14]. ΫνΙ αποτελεί ουσιαστικό μεσολαβητής της κανονικής οδού σηματοδότησης Wnt, και πυρηνικό εντοπισμό του απαιτείται για τα κανονικά σηματοδότηση Wnt [15], [16]. Σε έμβρυα Xenopus, IQGAP1 αλληλεπίδρασε με ϋνΙ και ρυθμίζεται πυρηνική εντόπιση του να μετριάσει την έκφραση των γονιδίων στόχων Wnt κατά την πρώιμη εμβρυογένεση [11]. Ωστόσο, η σχέση μεταξύ IQGAP1 και ϋνΙ σε όγκους δεν έχει αναφερθεί.

Η παρούσα μελέτη διερευνήθηκε η IQGAP1 και ϋνΙ έκφραση του NSCLC (αδενοκαρκίνωμα και το καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων). Βρήκαμε ότι IQGAP1 και ϋνΙ είχαν βρίσκονται κυρίως στο κυτταρόπλασμα. ρυθμός Συνέκφραση IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα ή στον πυρήνα ήταν σημαντικά υψηλότερη από ότι στη μεμβράνη? συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα συσχετίζονταν σημαντικά (Ρ & lt? 0,05), αλλά όχι στη μεμβράνη (Ρ & gt? 0,05). Η συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα συνδέθηκε με λεμφαδένα μετάσταση και φτωχή πρόγνωση σε NSCLC. Η επιβίωση στην ομάδα των πυρηνικών συνέκφραση ήταν σημαντικά χειρότερη από εκείνη της κυτταροπλασματικής συνέκφραση. Η μεμβρανώδη συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ δεν συσχετίστηκαν (Ρ & gt? 0,05). Αυτά τα αποτελέσματα πρότειναν ότι IQGAP1 αλληλεπίδρασε με ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και τον πυρήνα των NSCLC, και ο ρόλος στο κυτταρόπλασμα θα μπορούσε να είναι ένα από τα κρίσιμα στάδια στην διαμόρφωση ϋνΙ πυρηνικού εντοπισμού, αλλά όχι στη μεμβράνη. Αυτά τα ευρήματα είναι συνεπή με προηγούμενη μελέτη [11].

Η πυρηνική εντόπιση της ϋνΙ απαιτείται για την κανονική σηματοδότηση Wnt [15]. ΫνΙ συνεργάζεται με c-Jun να ρυθμίσει τη μεταγραφή του γονιδίου που διεγείρεται από το κανονικό μονοπάτι σηματοδότησης Wnt στον πυρήνα [16]. Σε αυτή τη μελέτη, βρήκαμε ότι τα γονίδια-στόχους κανονικών σηματοδότηση Wnt, η κυκλίνη D1 και c-myc, τα θετικά ποσοστά τους στην ομάδα με IQGAP1 και ϋνΙ συνέκφραση στον πυρήνα ήταν πολύ υψηλότερο από εκείνο στο κυτταρόπλασμα. Η ανάλυση επιβίωσης έδειξε επίσης ότι οι ασθενείς με συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στον πυρήνα έχει έναν σημαντικά χαμηλότερο χρόνο επιβίωσης από τους ασθενείς με ότι στο κυτταρόπλασμα (Ρ & lt? 0,05). Αυτά τα αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η πυρηνική συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ συνδέεται με την ενεργοποίηση των κανονικών Wnt μονοπατιού.

Με βάση τα παραπάνω αποτελέσματα συμπεραίνουμε ότι η συνέκφραση του IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και στον πυρήνα συσχετίζεται με μετάσταση στους λεμφαδένες και κακή πρόγνωση σε NSCLC. IQGAP1 διαμορφώνει ϋνΙ πυρηνικό εντοπισμό στο κυτταρόπλασμα, αλλά όχι στη μεμβράνη. Η συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ στον πυρήνα συνδέεται με την έκφραση της κυκλίνης D1 και c-myc, οι οποίες υποδηλώνουν ότι η πυρηνική συνέκφραση των IQGAP1 και ϋνΙ συνδέεται με την ενεργοποίηση των κανονικών μονοπατιού Wnt. Ως εκ τούτου, η αναστολή της πρόσδεσης του IQGAP1 και ϋνΙ στο κυτταρόπλασμα και την πρόληψη ϋνΙ πυρηνική μετατόπιση, μπορεί να είναι μία από τις στρατηγικές για την πρόληψη και θεραπεία του καρκίνου του πνεύμονα.

Υποστήριξη Πληροφορίες

Σχήμα S1.

την επικύρωση των αντισωμάτων (IQGAP1, Α και D? ϋνΙ, Β και Ε) για ανοσοϊστοχημεία. A-C: αδενοκαρκίνωμα? D-F: καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων? C και F: IgG ποντικού χρησιμοποιήθηκε αντί του πρωτογενούς αντισώματος. Αρχική μεγέθυνση, 400 ×? . Κλίμακα bar, 20 μm

doi: 10.1371 /journal.pone.0113713.s001

(ΔΕΘ)

Εικόνα S2.

Συνέκφραση IQGAP1 (A, C) και ϋνΙ (Β, D) στη μεμβράνη του NSCLC. Α-Β: αδενοκαρκίνωμα? C-D: καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων. Αρχική μεγέθυνση, 400 ×? . Κλίμακα bar, 20 μm

doi: 10.1371 /journal.pone.0113713.s002

(ΔΕΘ)

Πίνακα S1.

IQGAP1 και ϋνΙ έκφραση σε NSCLC

doi:. 10.1371 /journal.pone.0113713.s003

(DOC)

Πίνακας S2.

IQGAP1 και ϋνΙ συνέκφραση σε διαφορετικό καθεστώς όγκου

doi:. 10.1371 /journal.pone.0113713.s004

(DOC)

Πίνακα S3.

IQGAP1 και ϋνΙ συν-έκφραση σε διαφορετικούς τύπους ιστολογική

doi:. 10.1371 /journal.pone.0113713.s005

(DOC)

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς επιθυμούν να ευχαριστήσω Ο Δρ Weinan Λι, για την εξαιρετική τεχνική βοήθεια.